检测免疫球蛋白e含量的试剂盒、方法及用图_3

文档序号:9928901阅读:来源:国知局
位点充分暴露。
[0055] 步骤S20:按试剂R2与试剂R1体积比为1:1~7,向第一混合液中加入试剂R2,得到 第二混合液,并得到第二混合液的吸光度0D2。
[0056] 优选的,试剂R2与试剂R1体积比为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6或1:7。
[0057] 步骤S30:使用免疫球蛋白E校准品得到标准曲线,根据吸光度0D1和吸光度0D2在 所述标准曲线上得到待测样品中免疫球蛋白E的含量。
[0058]标准曲线可在全自动生化分析仪上通过内置曲线拟合模式得到。其中,标准曲线 的拟合模式包括:Spline、二次方程、logit-log3p、logit-1 og4p、logit-log5p或 Polygonal〇
[0059] 下面以具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明。
[0060] 实施例1
[0061 ]该检测免疫球蛋白E的试剂盒包括:试剂R1、试剂R2和免疫球蛋白E校准品。
[0062]其中,试剂R1包括如下的成分: 磷酸盐(第一缓冲液) 100mmol/L 氯化钠(第一电解质) 8,5g/L Tnton X 100 (表面活性剂) 5g/L
[0063] 牛血清蛋白(第一稳定剂) 5g/L 乙二醇聚氧乙烯醚(高分子促进剂)50g/L 叠氮钠(第一防腐剂) 4g/L
[0064] pH 值 7_0
[0065] 试剂R2包括如下的成分: 磷酸盐(第二缓冲液) 80mmol/L 抗人免疫球蛋白E抗体包被胶乳颗粒 15% ( w八') 氯化钠(第二电解质) 8.5g/L
[0066] 牛血清蛋白(第二稳定剂) 5g/L 叠氮钠(第二防腐剂) 5g L pH 值 7.5
[0067]免疫球蛋白E校准品包括如下的成分: 磷酸盐(第三緩冲液) 30mmo丨/L 乙二胺四乙酸二钠(第三稳定剂) 5g/L 牛血清蛋白(第三稳定剂) 5g/L
[0068] 叠氮钠(第三防腐剂) 6g/L 二丁基羟基甲苯(抗氧化剂) L5g/L 免疫球蛋白B抗原 相应量
[0069]按照需要的校准品浓度将相应量的免疫球蛋白E抗原添加到上述其他试剂混合液 中,混合得到免疫球蛋白E校准品。本实施例配制6个不同浓度的免疫球蛋白E校准品,其免 疫球蛋白E抗原的浓度分别为:25IU/mL、100IU/mL、300IU/mL、500IU/mL、700IU/mI^P 1000IU/mL。将免疫球蛋白E校准品用0.22mi的滤膜过滤除菌,在2~8°C下保存。
[0070] 采用上述试剂盒,通过日立7080全自动生化分析仪对待测样品进行检测分析。如 图2所示,为本发明的实施例1的免疫球蛋白E含量的检测方法的流程示意图。首先,使用免 疫球蛋白E校准品在全自动生化分析仪上通过内置logit-log(4p)曲线拟合模式拟合标准 曲线。如图3所示,为本发明的实施例1的检测免疫球蛋白E含量的标准曲线。然后,向待测样 品中加入试剂R1,待测样品的体积为1〇此,试剂R1的体积为200yL,混合得到第一混合液,并 在37°C保温5分钟,然后读取该第一混合液的吸光度0D1。再向第一混合液中进一步加入试 剂R2,试剂R2体积为100yL,得到第二混合液,并在37°C保温5分钟,读取第二混合液的吸光 度0D2。根据第一混合液的吸光度0D1和第二混合液的吸光度0D2,在标准曲线上得到待测样 品的免疫球蛋白E的含量。检测的波长为570nm。
[0071] 实施例2
[0072] 该检测免疫球蛋白E的试剂盒包括:试剂R1、试剂R2和免疫球蛋白E校准品。
[0073]其中,试剂R1包括如下的成分: 磷酸盐(第一缓冲液) 100mmol/L
[0074]氯化钠(第一电解质) 8,5g/L Triton X 100 (表面活性剂) lOg/L 牛血清蛋白(第一稳定剂) 6g/L 乙二醇聚氧乙烯醚(高分子促进剂)50g/L
[0075] 叠氮钠(第一防腐剂) 5'g/L pH 值 7.5
[0076]试剂R2包括如下的成分: 磷酸盐(第二缓冲液) 1 OOmmol/L 抗人免疫球蛋白E抗体包被胶乳颗粒 30% ( w/v ) 氯化钠(第二电解质) 8 5g/L
[0077] 牛血清蛋白(第二稳定剂) 6g L 叠氮钠(第二防腐剂) 5g L pH 值 8,0
[0078] 免疫球蛋白E校准品包括如下的成分: 磷酸盐(第三缓冲液) 50mmo1/L 乙二胺四乙酸二钠(第三稳定剂) 7g/L 牛血清蛋白(第三稳定剂) 5g/L
[0079] 叠氮钠(第三防腐剂) Sg/L 二丁基羟基甲苯(抗氧化剂) 2g/L 免疫球蛋白E抗原 lOO0IU/mL
[0080] 本实施例选用高浓度单点校准品,因此免疫球蛋白E抗原浓度为1000IU/mL。然后 将免疫球蛋白E校准品用0.22mi的滤膜过滤除菌,在2~8°C下保存。在使用时用生理盐水稀 释成6个不同浓度的免疫球蛋白E校准品,其免疫球蛋白E抗原的浓度分别为:25IU/mL、 100IU/mL、300IU/mL、500IU/mL、700IU/mUP1000IU/mL。
[0081]采用上述试剂盒,通过日立7080全自动生化分析仪进行检测分析。检测方法同实 施例1。
[0082] 实施例3
[0083] 该检测免疫球蛋白E的试剂盒包括:试剂R1、试剂R2和免疫球蛋白E校准品。 [0084]其中,试剂R1包括如下的成分: 甘氨酸(第一缓冲液) 1 Ominol/L 硫酸镁(第一电解质) 5:g/L 聚氧乙烯壬基苯基醚(表面活性剂)0.5g/L
[0085] 牛血清蛋白(第一稳定剂) 0.5g/L 羟甲基纤维素钠(高分子促进剂) lg/L 对羟基苯甲酸(第一防腐剂) lg/L pH值 6.0
[0086]试剂R2包括如下的成分:
[0087] 甘氨酸(第二缓冲液) 10mmol/L 抗人免疫球蛋白E抗体包被胶乳颗粒 5% ( w/v ) 氯化钠(第二电解质) 5g/L
[0088] 牛血清蛋白(第二稳定剂) 0.5g/L 叠氮钠(第二防腐剂) lg/L pH 值 6.0
[0089] 免疫球蛋白E校准品包括如下的成分: 碟酸盐(第三缓冲液) 1 Ommol/L 乙二胺四乙酸二钠(第三稳定剂) 2g L 牛血清蛋白(第三稳定剂) 3gZL
[0090] 叠氮钠(第三防腐剂) IgZL 二丁基羟基甲苯(抗氧化剂) 0.01g/L 免疫球蛋白E抗原 相应量
[0091]按照需要的校准品浓度将相应量的免疫球蛋白E抗原添加到上述其他试剂混合液 中,混合得到免疫球蛋白E校准品。本实施例配制6个不同浓度的免疫球蛋白E校准品,其免 疫球蛋白E抗原的浓度分别为:25IU/mL、100IU/mL、300IU/mL、500IU/mL、700IU/mI^P 1000IU/mL。将免疫球蛋白E用0.22mi的滤膜过滤除菌,在2~8°C下保存。
[0092]采用上述试剂盒,通过日立7080全自动生化分析仪进行检测分析。检测方法同实 施例1。
[0093] 实施例4
[0094]该检测免疫球蛋白E的试剂盒包括:试剂R1、试剂R2和免疫球蛋白E校准品。
[0095]其中,试剂R1包括如下的成分: 醋酸盐(第一缓冲液) 500mmol/L 氯化钾和氯化镁(第一电解质) 50g/L 聚氧乙烯烷基苯基醚(表面活性剂)50g/L
[0096] 牛血清蛋白(第一稳定剂) 10g/L 脂肪醇聚氧乙燒醚(高分子促进剂)80g/L 对羟基苯甲酸(第一防腐剂) 10g L pH 值 6 5
[0097]试剂R2包括如下的成分: 醋酸盐(第二缓冲液) 500mmo丨/L 抗人免疫球蛋白E抗体包被胶乳颗粒 50% ( w/v ) 氯化钠(第二电解质) 50g/L
[0098] 牛血清蛋白(第二稳定剂) 1 Og/L 叠氮钠(第二防腐剂) 10g/L pH 值 6.5
[0099] 免疫球蛋白E校准品包括如下的成分: 碟酸盐(第三绫冲液:) 500mmol/L 乙二胺四乙酸二钠(第三稳定剂) 50g L
[0100] 叠氮钠(第三防腐剂) lOg/L 二丁基義基甲苯(抗氧化剂) lOg/L 免疫球蛋白D抗原 1 OOOI
当前第3页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1