专利名称：二－β－D－吡喃葡萄胺化合物控制发炎反应的用途及其合成方法
背景技术：
1、发明的领域本发明涉及二-β-D-吡喃葡萄糖胺(glucopyranosylamine)化合物控制发炎控制系统以及相关疾病的用途并且也涉及制备该化合物的方法。
2、已有公开技术的描述K.Linek等人在Carbohydrate Research，164(1987)，195-205页中讨论了“某些二糖基胺的结构和重排反应”。这些糖基胺对于碳水化合物的酶学来说是有趣的化合物，因为它们被认为是糖苷酶可逆抑制剂的直接活化部位。化合物二-β-D-吡喃葡萄糖胺通过β-D-吡喃葡萄糖胺的转糖基作用来制备。
在我的转移因子研究中已经发现了该化合物。对于转移因子的讨论可参见G.B.Olson和C.G.Drube在Journal of Reticuloendothelial Society，24卷，第3期，1978年11月中的“Modulation of inflenza in Mice byTransfer Factor Therapy”。在这些转移因子研究的纯化期间获得了该化合物。
本发明涉及制备该化合物的较为简单的方法并涉及该材料控制发炎控制系统独特用途的发现。
3、本发明目的本发明的一个目的是提供一种由葡萄糖制备二葡糖胺的方法。
本发明的一个目的是提供一种由葡萄糖特别是由D-(+)-葡萄糖制备二-β-D-吡喃葡萄糖胺的方法。
本发明的另一目的是用二-β-D-吡喃葡萄糖胺控制发炎控制系统。
本发明的另一目的是用二-β-D-吡喃葡萄糖胺治疗不利的免疫反应。
本发明的另一目的是用二-β-D-吡喃葡萄糖胺治疗不利的神经反应。
本发明的另一目的是用二-β-D-吡喃葡萄糖胺治疗不利的内分泌反应。
本发明的另一目的是用二-β-D-吡喃葡萄糖胺治疗不利的直接的物理或化学伤害。
本发明的另一目的是用二-β-D-吡喃葡萄糖胺在其细胞防御网失衡的生物中重建细胞防御网的平衡。
本发明的另一目的是配制含有二-β-D-吡喃葡萄糖胺的抗炎药物组合物。
本发明的另一目的是在NH3+离子存在下并在pH约为7.0或更大时给予生物葡萄糖来治疗不利的发炎反应。
本发明的另一目的是在NH3+离子存在下并在pH约为7.0或更大时以肠溶包衣的形式口服给予生物葡萄糖来治疗不利的发炎反应。
通过本发明说明书的描述，本发明的这些和进一步的目的将变得显而易见。
本发明概述导致生物细胞机械动力网破坏的不利发炎反应可通过给予该生物以二葡糖胺作为活性组分的组合物来治疗。优选的化合物是二-β-D-吡喃葡萄糖胺。给予所述的组合物在其细胞防御网失衡的生物中也重建细胞防御网的平衡。在这种情况下，该组合物治疗炎性疾病并且活化体内的发炎控制系统。
已经开发了制备较高纯度的二葡糖胺的简单方法。该方法包括使葡萄糖、含碱的氮和甲醇或乙醇反应形成二葡糖胺，然后优选地用活性炭回收该二葡糖胺。
可将抗炎化合物二-β-D-吡喃葡萄糖胺和可药用载体一起配制成治疗炎性有效的药物组合物。
这些不利的发炎反应也可通过在NH3+离子存在下并在pH约为7.0或更高时给予生物葡萄糖来治疗。优选地，该葡萄糖可单独地或与其它药物组合口服给予肠溶包衣形式的葡萄糖来使用。
优选实施方案的描述已经从糖蜜中分离出二葡糖胺并且已由D-(+)-葡萄糖通过两种途径合成称为BD2K1和BD2K2的产物。在本文中，这些二葡糖胺通常被称作BD2K，它们具有几乎不可相信的抗炎能力。
在抗炎剂领域中，有一些抗炎剂指定控制基于发炎反应的特异介质的特定类型的炎症。而BD2K以不同的方式起作用，因为它改善体内系统，直接治疗所有过度型的炎症，如接触性过敏。所以，BD2K化合物是广谱的且不是特指的抗炎剂。由于BD2K广谱使用，它有希望成为治疗发炎过程并恢复正常炎性反应的好产品。而且，该产品的动力作用适于与其它增加其治疗指数的药物一起进行组合治疗；也就是说，需要较少的药物并因此而最大限度地减少它们可能有的毒性作用。
非常显著的抗炎活性暗示该化合物作为以炎症为部分病因的自身免疫疾病的部分治疗是特别有用的。BD2K化合物可与其它自身免疫疾病治疗剂一起使用来治疗该疾病。BD2K化合物对其它化合物具有很好的耐受性，因此它们可一起使用，而且BD2K不抑制其它活性化合物的活性。
BD2K似乎在许多水平上起作用。相信BD2K修理或补充调节发炎控制系统的基因分子。发炎控制系统在体内具有非常特异的生物活性。该系统控制生物中包括许多不同系统的炎症，如神经系统、消化系统、代谢系统、免疫系统和内分泌系统。所以，BD2K对炎症的特殊作用使得该化合物成为一种有实验、治疗和预防价值的广谱产物。
BD2K对于大多数相同症状来说象阿斯匹林一样具有多种用途并且可能更多。然而，相反地，BD2K作为治疗剂局部使用时非常有效并且没有任何刺激性，当非肠道使用时表明没有毒性。BD2K可与其它药物组合使用。该化合物是炎症动力阳性控制的特异治疗剂。它不仅缓解症状，也积极治疗该疾病，没有提高病人血清的IgE水平。
不受任何特定理论和机制的限制，假定生物的衰老和寿命取决于对寿命有利的防御机制和对抗疾病过程的防御机制之间的平衡。对寿命有利的机制是使来自外源的和内源的大分子和其它身体成分破坏。
生物必须承担由离子辐射作用、UV辐射作用和异种生物体(xenobiotics)包括原始致癌物所产生的最常规的基因毒性物质，每天将其妥善处理。身体发热、氧游离基、葡萄糖和其它氧化的糖是有代表性的各种代谢途径的副产物并且代表了不可避免的潜在的基因毒性剂。
内源性激素包含在生物的细胞衰老和疾病产生过程中。实际上，它们起调节发育过程和再生的作用，这两种现象是整个生命过程中所必须的。
为了保持生物平衡的动态的细胞防御机制，整个动物界的细胞都具有各种细胞防御机制。这些体系中最重要的是(1)DNA修复机制；(2)抗氧化剂体系，或者是酶促的或者是非酶促的；(3)热休克和其它紧张蛋白的产生；(4)核酶如聚(ADP-核糖)聚合酶(PAD-PRP)的激活；和(5)apoptosis，程序化的细胞死亡细胞防御机制。
上文(1)-(5)的分享机制是相互联系的并且构成整个细胞防御体系网，认为这些体系是整体的而不是一个一个的。apoptosis被认为是消除严重突变细胞并因此而避免细胞转化的非常重要的机制。
一个生物的细胞防御机制的功能对于修正负责体内平衡的三个主要系统的功能是必需的，这三个系统是免疫系统、神经系统和内分泌系统。由于其与常规的进化源具有严格的解剖和功能上的关系，从整体上来说，将它们看作是免疫神经内分泌综合系统。
潜在的外原性或内源性物质可使生物的发炎系统过高或过低地反应，从而破坏细胞防御机制动力网，引起创伤或其它疾病。BD2K重建细胞防御网的平衡是有效的，它是通过体内发炎控制系统治疗炎症疾病来产生的，所以该物质对于预防和治疗发炎系统失衡的起因具有许多治疗和预防作用。应用的实例列于表1-4中，其目录相应于解剖来源；包括免疫系统、神经系统、内分泌系统和由直接的物理或化学损伤引起的。
表1 不利的免疫反应I型和II型疱疹带状疱疹(shingles)疱疹性结膜炎和角膜炎生殖器疱疹HIV病毒性肝炎瘤形成，严重突变的细胞系统性红斑狼疮类风湿性关节炎硬皮病胰岛素依赖性糖尿病非胰岛素依赖性糖尿病低血糖恶性贫血节段性回肠炎肝自身免疫疾病肾自身免疫疾病多发性硬化和免疫介导的神经病风湿热心肌炎(恰加斯病和柯萨奇心肌炎)寻常天疱疮自身免疫溶血性贫血特发性血小板减少紫癜自身免疫性中性白细胞减少症精子和睾丸的自身免疫疾病真皮内感染(对感染有过敏反应的)对感染有过敏反应的急性和慢性细菌感染皮肤接触过敏光接触性过敏麻风和其它分支杆菌感染与抗微生物剂组合哮喘湿疹痤疮牛皮癣小鸡痘的局部治疗高血压肾上腺自身免疫重症肌无力和肌炎，等。
表2 不利的神经反应多发性硬化和免疫介导的神经病神经组织修复偏头痛带状疱疹(shingles)麻风表3 不利的内分泌反应胰岛素依赖性糖尿病非胰岛素依赖性糖尿病低血糖恶性贫血肝的自身免疫疾病老化组织的控制性糖化(control glycation)表4 不利的物理和化学损伤整容外科，伤口愈合外科治疗，器官和组织移植(伤口愈合)虫叮咬烧伤与已知指定治疗具体病种的治疗剂一起使用BD2K会更有效并且具有更好的治疗指数。用已知的抗真菌化合物治疗真菌感染时，真菌被杀死在组织中，死亡的真菌颗粒保留在生物中。因对原位真菌片断的免疫过敏性而使疾病状态继续。另一例子是在用已知的抗病毒剂治疗人角膜炎时，由于对残留病毒颗粒的原位免疫反应而使得用抗病毒化合物治疗失败。这些对真菌和病毒颗粒的免疫反应加速对抗疾病而破坏动态细胞防御网的发炎疾病，而且这也能促使化合物在其它系统中引起其它疾病。
该组合物可用于各种各样的生物体。除了对人、哺乳动物和鱼具有有利的作用之外，具有抗炎特性的组合物也有助于减轻植物的疾病并且控制枯萎机制。
以水溶液直接用于炎症部位时，该化合物在局部是非常有效的。与增容剂配制，使得能够保护化合物可通过酸性环境的胃而进入碱性环境的小肠时，口服是有效的。已经发现，在碱性环境，特别是pH大于6.8时，该化合物是非常有效的。该化合物似乎在体内立即与靶向化合物结合。新的复合物是稳定的并且在生物体中是非常活泼的。该葡萄糖胺与受体分子的结合或者触发分子活化或者使体内休眠有害(deleted)的化合物恢复活力。生物体中的这种新的化合物似乎是非常稳定的。用很少量的材料简单处理之后，这种新的复合化合物的生物活性持续很长一段时间。已经显示处理后的活性至少持续5年的时间。其活性不同于用其它抗炎剂所观察的，所述的其它抗炎剂的活性所持续的时间很短。
在治疗不利的急性、亚急性和慢性炎症中，这些化合物具有好的治疗和预防价值。它们也可有助于通常健康的发炎系统的维持，即，对生物体存在每秒所产生的反应，其中可以存在或不存在无临床症状的反应。
该药物组合物的独特特性之一是尽管它是自身免疫反应调节剂，但它对IgE应答没有作用。该组合物是非甾体的、广谱的治疗炎症的药物。
如上所述，化合物二-β-D-吡喃葡萄糖胺可以按K.Linek等人在Carbohydrate Research，164(1987)，195-205页中讨论的“某些二糖基胺的结构和重排反应”来由β-D-吡喃葡萄糖胺通过转糖基作用进行制备。
已经发现了一种少见的复合反应，它是通过将葡萄糖与含氮的碱在甲醇或乙醇中，优选以无水形式反应，以形成二葡萄糖胺，然后回收二葡萄糖胺进行的。在早期的研究中，糖蜜被用作原料，因为葡萄糖是糖蜜中发现的单糖之一。然而，在糖蜜中发现有许多未确定的碳水化合物。这些碳水化合物是糖工业的副产物，而且糖蜜中的这些副产物使BD2K的制备和分离产生困难。
为了避免这些困难，用D-+-葡萄糖的α-端基异构体来代替以前使用的糖蜜。这允许用纯的化学物质代替糖蜜，并且通过使用纯的化学物质，可以控制BD2K的合成并完成质量控制。使用两种不同的碱。其中一种方法是使用氢氧化铵并且产物被鉴定为BD2K1。另一种方法是将氢氧化钠加到磷酸二氢铵的水溶液中来产生另一种BD2K产物，被鉴定为BD2K2。两种产物是相同的。在第二种方法中，磷酸单碱铵的NH3+离子被氢氧化钠中的Na+离子取代形成NaH2PO4。在该方法中，当加入甲醇时，磷酸单碱钠从甲醇水溶液中沉淀出来。为了葡萄糖的优选的二聚合作用或转糖基作用以合成所述化合物，用足够的氢氧化物离子将混合物的pH调节到大约11.2，使产生具有过量浓度的游离的氨离子。
在优选的D-(+)-葡萄糖、含氮碱的水溶液和甲醇或者乙醇反应形成葡萄糖胺之后，蒸去甲醇或乙醇以形成水相。搅拌下，将活性炭水淤浆加到混合物中来将二葡萄糖胺吸附在活性炭上。然后，从水中分离活性炭并从活性炭中回收二葡萄糖胺。
优选的从活性炭中分离二葡萄糖胺的回收方法是用水洗涤活性炭并用无水甲醇从活性炭中洗脱二葡萄糖胺。浓缩甲醇流出液并将干燥的甲醇残渣溶于热的无水甲醇中。将甲醇溶液在丙酮中搅拌以形成沉淀(participate)，将沉淀过滤并用丙酮洗涤。回收二葡萄糖胺并干燥成粉末。洗涤活性炭水的另一优选的方法是连续洗涤直到流出液具有-274UV读数。在500MHz能量的NMR上，显示很强274nm单紫外光吸收峰的微量杂质被鉴定为吡嗪。存在有1％份，并且优选洗涤直到流出液具有-274UV读数以消除该杂质。
至少可将药物制剂制成两种形式。为了局部使用，如眼和皮肤使用，优选的组合物为无热源的磷酸盐缓冲液(pH为6.8-7.2)EDTA 0.01％
氯苄烷胺 0.01％二-β-D-吡喃葡萄糖胺100mg/ml葡萄糖20mg/ml每日局部治疗的剂量范围为20-200mg/ml。pH可为6.8以上，优选的范围为6.8-7.2。
为了人或动物的口服治疗，优选组合物的重量比为30％甲基纤维素(1500pfs)170％二-β-D-吡喃葡萄糖胺1、可用羟丙基纤维素(1500pfs)代替甲基纤维素。该组合物可被彻底混合并制成75-250mg的片剂或明胶胶囊，而且，每日口服治疗的剂量范围优选为2.5-100mg/kg体重，与非胃肠道治疗在相同水平。甲基纤维素用作载体，并且起保护二葡萄糖胺的作用，使其能够通过胃的酸性环境。
以上描述了本发明的基本内容，给出下列实施例来说明其具体的实施方案。
实施例1本实施例说明如何由D-(+)-葡萄糖制备BD2K1。
将1升浓的氢氧化铵、3升的甲醇和250克α端基异构体形式的D-(+)-葡萄糖合并，在室温下搅拌2小时，所述葡萄糖从Sigma ChemicalCompany获得。然后在65℃和11.2的pH下回流混合物。将混合物置于旋转蒸发仪中并加热到65℃来蒸去甲醇而产生水相。
由200克Darco 60活性炭和1升去离子水制得活性炭淤浆，将此淤浆搅拌加入所述的水浓缩液中并继续在室温下搅拌1小时。用Whatman#1滤纸过滤混合物以分出活性炭。该活性炭吸附了下文鉴定为BD2K1的反应产物。用软化水洗涤吸附BD2K1的活性炭直到流出物具有负274UV读数。弃去洗涤液。然后将活性炭与5升的无水甲醇混合来洗脱BD2K1。在274nmUV光吸收图形中检测流出物。在65℃下，用旋转蒸发仪浓缩甲醇流出物。通过将甲醇残渣溶于无水甲醇并在65℃下浓缩来将所述过程重复三次以蒸发残留的水。
将干燥的甲醇残留物溶于50℃的温热的无水甲醇中。使用“M”多孔玻璃滤器来将剩余的颗粒滤出并弃去滞留物。将甲醇溶液的相对密度调节到0.82。在室温下，将该甲醇溶液缓慢加入搅拌的6体积的丙酮中。形成白色沉淀，将其收集在“M”多孔玻璃滤器上。用丙酮洗涤滞留物并用丙酮保持覆盖。避免与空气接触，因为沉淀物是特别容易受潮的。弃去丙酮流出物。真空干燥最终滞留物并在密封的干燥容器中贮存。通过NMR分析最终产物并发现为二-β-D-吡喃葡萄糖胺，且产量为135克。
实施例2该实施例说明如何通过用NH4H2PO4和NaOH代替实施例1所使用的NH4OH来满足对NH3+和OH-离子浓度的要求而由D-(+)-葡萄糖制备BD2K2。
将1升的水搅拌加入3升的甲醇中。然后将10克的氢氧化钠和18.75克的磷酸氢铵分别搅拌加入到所述混合物中并使所获得的pH大于11.2。接着，合并250克实施例1所用的α端基异构体形式的D-(+)-葡萄糖，在室温下搅拌2小时。然后在65℃和11.2的pH下回流混合物。用Whatman#1滤纸过滤混合物。贮存滤液并弃去残渣。将滤液置于旋转蒸发仪中并加热到65℃来蒸去甲醇而产生水相。
由200克Darco 60活性炭和1升去离子水制得活性炭淤浆，将此淤浆搅拌加入所述的水浓缩液中并继续在室温下搅拌1小时。用Whatman#1滤纸过滤混合物以分出活性炭。该活性炭吸附了下文鉴定为BD2K2的反应产物。用软化水洗涤吸附BD2K2的活性炭直到流出物具有负274UV读数。弃去洗涤液。然后将活性炭与5升的无水甲醇混合来洗脱BD2K1。在274nmUV光吸收图形中检测流出物。在65℃下，用旋转蒸发仪浓缩甲醇流出物。通过将甲醇残渣溶于无水甲醇并在65℃下浓缩来将所述过程重复三次以蒸发残留的水。
将干燥的甲醇残留物溶于50℃的温热的无水甲醇中。使用“M”多孔玻璃滤器来将剩余的颗粒滤出并弃去滞留物。将甲醇溶液的相对密度调节到0.82。在室温下，将该甲醇溶液缓慢加入搅拌的6体积的丙酮中。形成白色沉淀，将其收集在“M”多孔玻璃滤器上。用丙酮洗涤滞留物并用丙酮保持覆盖。避免与空气接触，因为沉淀物是特别容易受潮的。弃去丙酮流出物。真空干燥最终滞留物并在密封的干燥容器中贮存。通过NMR分析最终产物并发现为二-β-D-吡喃葡萄糖胺，且产量为135克。
贮存BD2K1时，如果将BD2K1贮存在室温下的干燥容器中，它不分解为合成的起始材料。水性制剂的稳定性作如下研究。
实施例3本实施例测量BD2K1在水中的稳定性。
按实施例1来制备BD2K1样品。将5mcg的样品溶于1毫升重水中并将该溶液贮存在紧密加盖的螺旋有盖试管中，维持在大约27℃的室温下。氘被用作水源，因为它有利于NMR测定化学构型。用500MHzNMR在开始和一周后扫描样品溶液。结果显示在表1中。
表1
通过将水加到BD2K1中，BD2K1有33％转变为起始材料葡萄糖。
在重水中5年后分析该样品，没有进一步的改变。已经建立了一种平衡并且维持这种平衡。
打算将BD2K1用在水性制剂中。进行了研究来确定在水中的早期平衡时使溶液贮存稳定的最佳条件，并且最大限度地减少平衡期间的分解。
实施例4该实验测量葡萄糖加入到室温下的BD2K1-重水混合物时的稳定作用。
将各种量的α-D-葡萄糖加到实施例3的类似的起始混合物中并用NMR确定以时间为函数的全部组合物的变化百分数。
结果显示在
图1中。当葡萄糖从0条存在时，显示BD2K1达到平衡并且处于较高的浓度。例如，没有葡萄糖存在时，在水中的95％BD2K1样品在一周内分解到仅剩62％的生物活性组分二-β-葡萄糖胺平衡状态。其它38％被转化为28％的葡萄糖、大约9％的单胺和低于1％的吡嗪。
然而，混合物中有20％或更多的葡萄糖时，二-β-葡萄糖胺将在第一周平衡在大约80％并且在密封的容器中在此水平下至少保持5年。
在较高的葡萄糖浓度下进行了实验，45％和63％的葡萄糖浓度仅记录了10周的数据而没有测量5年的时间。
葡萄糖确实对减少本文BD2K1和水的混合物中所述的二-β-葡萄糖胺(二-β-D-吡喃葡萄糖胺)分解具有有利的作用。上文和
图1结合可注意到，通过加入葡萄糖(20％)可将BD2K1的95％纯样品稳定到维持在水中80％的纯度。没有加入葡萄糖时，95％纯的BD2K1部分分解为葡萄糖并且仅维持大约在水中62％的纯度。
因此，推荐制备用于治疗的制剂包括至少20％重量的葡萄糖来维持BD2K1最高浓度时的平衡。
将BD2K1化合物释放到体内的另一令人激动的方法是将其制备成原位释放在体内的制剂。该技术的理论是葡萄糖在NH3+离子存在下并在合适的微化学环境中可合成BD2K1。该化学过程的关键的物理因素似乎是具有高浓度NH3+离子的碱性pH。
体内具有合适微化学环境的区域之一是在低部肠(十二指肠)，这里的pH为8或更高，并且有游离的NH3+离子存在。通过在该区域提供葡萄糖可原位合成BD2K1。BD2K1(一种葡糖胺)通过铵离子中间体在溶液中倾向于重排，它导致使分子减少的变旋和可能的水解。合成后，体内游离状态的BD2K1存在很短的时间。如果其正常的产生未被进行有序的补充，体内的供应将被耗竭。
十二指肠是与胃一起工作的。胃内的成分在消化期间通过幽门口周期性地进入十二指肠中。胰和胆管在非常靠近幽门的地方向十二指肠开口。胰和胆中分泌的高度碱性的成分中和食糜的酸并将该材料的pH改变为碱性。这种转变对于胰液和肠液中所含的酶的活性是必需的。
胰受食物消化期间通过幽门口周期性地引入十二指肠的胃内的酸性食糜的刺激。胰和胆中分泌的高度碱性的成分中和食糜的酸并将该材料的pH改变为碱性。这种转变对于胰液和肠液中所含的酶的活性是必需的。
胰液是一种水性液体，它含有一些蛋白质、NH3+离子和小量存在的其它无机化合物，主要有Na+，K+，HCO3-和Cl-，Ca++，Zn++，HPO4＝和SO4＝。胰液的pH明显是碱性的，其pH为7.5-8.0或更高。BD2K1在高度碱性的pH下是极其稳定的并在酸性环境中受保护时是具有生物活性的。因此，使用甲基纤维素将BD2K1配制成口服药物时，避免了在胃液中重排的倾向，使得在下部的肠是具有活性的。
使葡萄糖直接进入下部肠(十二指肠)区域的问题是必须使其首先通过包含具有高浓度盐酸并具有1-2的酸性pH的胃成分或食糜的胃。酸性pH下的葡萄糖主要合成环状化合物，而不是二或单葡萄糖胺。该胃内环境不允许合成BD2K1。任何口服摄入的葡萄糖将被重排并在进入小肠前被吸收。
解决葡萄糖溶于胃中的问题是将肠溶包衣的葡萄糖口服给予生物体使得葡萄糖不在胃中溶解，而直接进入葡萄糖溶解并合成BD2K1的十二指肠。用抗酸剂NH4HCO3或其它任何具有相同作用的化合物来稳定十二指肠中的NH3+浓度和pH的正常变化。额外的BD2K1的作用导致缓解生物体任何严重的炎性疾病。
十二指肠中肠溶包衣的葡萄糖的存在使天然产生的BD2K1增加到正常水平，产生预防作用，不允许不利免疫反应的疾病发展。用肠溶包衣的葡萄糖原位治疗会间接增加其它化合物治疗未被认作是炎症型疾病的效果。
肠溶包衣作为阻止胃液作用并崩解和溶解在肠液中是已知的。它们是药学领域中经常使用的。对于好的肠溶包衣材料的要求是必须无毒；它及其降解产物(如果有的话)必须是无生理活性的；必须在可预计的肠溶包衣剂型保持在胃内的时间内不崩解；必须在肠中崩解或溶解因此而释放所包含的药物。
公知商品为Ecotrin，它是一种肠溶包衣的阿斯匹林，在中性-碱性环境的十二指肠中溶解但不在胃中溶解。Ecotrin中量较大的无活性的组分包括纤维素、乙酸邻苯二甲酸纤维素、邻苯二甲酸二乙基酯、二氧化硅、甘醇酸淀粉钠、硬脂酸和二氧化钛。其它小量组分包括巴西棕榈蜡、羟丙基甲基纤维素、甲基丙烯酸共聚物、微晶纤维素、聚乙二醇、多乙氧基醚80、丙二醇、二氧化硅、淀粉、硬脂酸、滑石粉、二氧化钛、柠檬酸三乙基酯和树胶。
为了进行临床试验，通过下列方法配制肠溶包衣的葡萄糖并且将它们称作ENBDK。
实施例5该实施例说明制备每片含有250毫克葡萄糖的500毫克的ENBDK。
通过在500克热(90℃)的双蒸馏水中依次搅拌下列组分来制备水溶液。首先为250克的葡萄糖(50％)、其次160克可溶性淀粉(34％)、再其次10克树胶(0.2％)、然后10克乙酸邻苯二甲酸纤维素(2％)、最后为70克羟丙基甲基纤维素(14％)。羟丙基甲基纤维素不会溶解在热水中，因此加入到热水中时似乎为颗粒。继续搅拌该热溶液，直到冷却到室温(25-27℃)。然后，羟丙基甲基纤维素溶解在水溶液中。在75℃下空气干燥该溶液成颗粒状，加入10可NH4HCO3(0.2％)，压成500毫克的片(每片含有240毫克的葡萄糖)。将颗粒材料压片后，用另外的羟丙基甲基纤维素包衣片剂以改善其外观。
每片葡萄糖的总重量为250毫克并且每公斤体重的剂量范围为10-100毫克。
使用肠溶包衣的葡萄糖在人体上进行临床试验，以便与BD2K1比较其治疗作用。肠溶包衣是葡萄糖的一种特殊的制剂，它会通过胃进入肠中。因此，如果在十二指肠中由葡萄糖可合成BD2K1，那么应当观察到与单独的BD2K1的作用类似的临床改善。
用ENBDK治疗人的下列疾病类风湿性关节炎、胃肠性肠炎流行性感冒、甲状腺炎、牛皮癣、静脉炎、慢性真菌皮肤感染、鼻炎(普通感冒)、窦炎、初疮、咽喉神经节炎症、I型疱疹(感冒疮)、II型疱疹(生殖器疱疹)和外科损伤(手术后)。由严重的炎性疾病显示临床缓解遭受这些不利炎性反应的个体。。由此相信口服肠溶包衣的葡萄糖在生物体的十二指肠中原位合成BD2K1。
由葡萄糖原位合成BD2K1的其它令人激动的方面是不特异于某一个区域。BD2K1在体内可小量合成并立即与另一个分子如蛋白质结合。BD2K1本身在体液中是不十分稳定的。相信体内反应持续发生，如用BD2K1局部治疗在疱疹皮肤损伤处的作用。
在除肠之外另一个合成BD2K1区域的例子见小鼠发炎控制系统(ICS)的研究。在对特异的水溶性化学物质免疫学敏感的小鼠中进行ICS测定。用亚致死剂量(低于非敏感小鼠的毒性水平)的化学物质静脉激发这些小鼠时，它们立即产生不利的免疫反应。导致急性胰腺炎、休克和死亡。激发时，BD2K1保护这些敏感小鼠而免于死亡。该测定包括三次腹膜内给药的葡萄糖对照组。第一次是抗原激发前(即3小时)。第二次是激发前一小时且第三次是在零小时(即进行激发时)。在葡萄糖提前三小时使用的情况下，在随后的三小时中具有制备BD2K1的机会，并且与使用BD2K1相比，对测定具有阳性作用的结果。然而，在零小时和激发前一小时注射葡萄糖的情况下，没有作用。由该数据获得以下结论激发前以足够的间隔时间注射给予葡萄糖，该葡萄糖可原位形成BD2K1并具有阳性结果。
在小鼠中进行进一步的研究来试验在ICS测定实验中以各种途径给予小鼠葡萄糖的作用。通过四种不同的途径给予葡萄糖腹膜内、静脉、皮下和口腔。仅仅在将葡萄糖注射到腹腔中的情况下才显示在6-7.5毫克/公斤体重的水平时具有对抗小鼠急性胰腺炎的治疗价值。另一方面，所有BD2K1对照组都显示对抗胰腺炎的好的保护作用。
这些动物实验肯定和明确地证明在ICS测定中小鼠腹腔中的原料葡萄糖保护小鼠免于急性胰腺炎。葡萄糖的治疗活性类似于BD2K1的作用。然而，通过其它途径(口腔、静脉和皮下)，葡萄糖不保护小鼠。在动物的腹腔中，游离的NH3+离子存在，并且pH略偏碱性。相信小鼠腹腔中的化学环境适合于由葡萄糖合成BD2K1。
所给出的碱性和NH3+浓度在不同的个体中会有变化，优选配制成本文所述的与铵离子源结合的肠溶包衣药物，并且最优选与有助于形成从肠溶包衣中释放药物的碱性环境的离子结合。
使用NH4HCO3来提高原位肠溶包衣的葡萄糖治疗作用的原因是1、供给恒定水平的生物体肠中存在的体内NH3+；2、十二指肠中另外离解碳酸氢根(HCO3-)离子将有助于维持该区域肠的碱性；和3、NH4HCO3易于与肠溶包衣的ENBDK中的其它组分压制成片。加到每片中的量为每片中葡萄糖总量的2％。
对原位肠溶包衣的葡萄糖的研究已经给出了另外的有效作用，它产生BD2K1单独的治疗作用或与其它相容的治疗剂(如镇痛剂)组合来控制生物体不利的炎症反应。这些研究也显示在生物体中没有合成BD2K1的具体的细胞群和区域。关键因素是葡萄糖的微化学环境和利用度，并且与共同给予的药物没有使其在体内改变的有害的相互作用。
可以理解上文的详细描述仅仅是说明性的而且不脱离本发明的构思可作出许多变化。
权利要求
1.一种治疗由生物体细胞机械动力网破坏而导致的不利炎症反应的方法，该方法包括给予一种组合物，该组合物含有(a)给予所述生物体来治疗不利的炎性反应有效量的作为活性组分的二葡萄糖胺，或(b)在NH3+存在下并在约7.0或更高的pH下以有效量给予生物体来治疗不利的炎性反应的葡萄糖。
2.权利要求1的方法，其中以肠溶包衣的葡萄糖来口服给予葡萄糖。
3.权利要求2的方法，其中肠溶包衣包括至少一种选自下列物质可溶性淀粉、乙酸邻苯二甲酸纤维素、羟丙基甲基纤维素、树胶及其混合物。
4.权利要求1的治疗不利的炎性反应的方法，其中二葡萄糖胺为二-β-D-吡喃葡萄糖胺。
5.权利要求1的方法，其中被治疗的炎性反应为一种列于表1的不利的免疫反应。
6.权利要求1的方法，其中被治疗的炎性反应是一种列于表2的不利的神经反应。
7.权利要求1的方法，其中被治疗的炎性反应是一种列于表3的不利的内分泌反应。
8.权利要求1的方法，其中被治疗的炎性反应是一种列于表4的不利的直接的物理或化学损伤。
9.权利要求1的方法，其中为局部给药。
10.权利要求1的方法，其中为口服给药。
11.权利要求10的方法，其中使用可药用增容剂来配制二葡萄糖胺以保护该二葡萄糖胺可通过胃的酸性环境。
12.权利要求1的方法，其中为非胃肠道给药。
13.权利要求1的方法，其中与其它自身免疫疾病治疗剂一起给予二葡萄糖胺来共同治疗疾病。
14.一种通过治疗炎性疾病和通过体内激活炎症控制系统在细胞防御网失衡的生物体中重新建立细胞防御网平衡的方法，该方法包括将含有二葡萄糖胺作为活性组分的组合物以有效量给予所述动物来重新建立细胞防御网平衡。
15.权利要求14的重新建立细胞防御网平衡的方法，其中二葡萄糖胺为二-β-D-吡喃葡萄糖胺。
16.权利要求14的方法，其中被治疗的炎性疾病为一种列于表1的不利的免疫反应。
17.权利要求14的方法，其中被治疗的炎性反应是一种列于表2的不利的神经反应。
18.权利要求14的方法，其中被治疗的炎性反应是一种列于表3的不利的内分泌反应。
19.权利要求14的方法，其中被治疗的炎性反应是一种列于表4的不利的直接的物理或化学损伤。
20.权利要求14的方法，其中为局部给药。
21.权利要求14的方法，其中为口服给药。
22.权利要求21的方法，其中使用可药用增容剂来配制二葡萄糖胺以保护该二葡萄糖胺可通过胃的酸性环境。
23.权利要求14的方法，其中为非胃肠道给药。
24.权利要求14的方法，其中与其它自身免疫疾病治疗剂一起给予二葡萄糖胺来共同治疗疾病。
25.一种制备影响炎症控制系统的二葡萄糖胺的方法，它包括以下步骤(a)葡萄糖、含氮的碱和甲醇或乙醇反应形成二葡萄糖胺；和(b)回收二葡萄糖胺。
26.一种制备影响炎症控制系统的二葡萄糖胺的方法，它包括以下步骤(a)D-(+)-葡萄糖、含氮的水性碱和甲醇或乙醇反应形成二葡萄糖胺；(b)蒸发甲醇或乙醇来形成水相；(c)搅拌下将活性炭的水淤浆加到混合物中以便将二葡萄糖胺吸附在活性炭上；(d)从水中分离活性炭；和(e)回收二葡萄糖胺。
27.权利要求26的方法，其中二葡萄糖胺为二-β-D-吡喃葡萄糖胺。
28.权利要求26的方法，其中碱为氢氧化铵。
29.权利要求26的方法，其中碱为磷酸氢铵和氢氧化钠的混合物。
30.权利要求26的方法，其中活性炭为Darco活性炭。
31.权利要求26的方法，其中D-(+)-葡萄糖为α端基异构体形式。
32.权利要求26的方法，其中甲醇和乙醇为无水形式。
33.权利要求26的方法，其中回收步骤包括(a)用水洗涤活性炭；(b)用无水甲醇从活性炭上洗脱二葡萄糖胺；(c)浓缩甲醇流出物；(d)用温热的无水甲醇溶解干燥的甲醇残渣；(e)将甲醇溶液搅拌加入到丙酮中来形成沉淀，过滤并用丙酮洗涤；和(f)回收并干燥二葡萄糖胺粉末。
34.权利要求26的方法，其中用水洗涤活性炭直到流出物具有负274UV读数。
35.一种抗炎组合物，它含有与可药用载体混合的抗炎有效量的二-β-D-吡喃葡萄糖胺。
36.权利要求35的抗炎组合物，其中pH约为6.8或更高。
37.权利要求35的抗炎组合物，其中pH约为6.8-7.2。
38.权利要求35的抗炎组合物，其中可药用载体为眼用溶液。
39.权利要求35的抗炎组合物，其中可药用载体为甲基纤维素。
40.一种抗炎组合物，它含有抗炎有效量的肠溶包衣的葡萄糖。
41.权利要求40的抗炎组合物，其中肠溶包衣含有至少一种下列物质可溶性淀粉、乙酸邻苯二甲酸纤维素、羟丙基甲基纤维素、树胶及其混合物。
42.权利要求40或41的抗炎组合物，其中将碳酸氢铵与葡萄糖混合。
43.权利要求40或41或42的抗炎组合物，还含有相容的治疗剂。
44.权利要求43的抗炎组合物，其中治疗剂为一种镇痛剂如阿斯匹林。
45.一种抗炎组合物，它含有下列水性混合物(a)抗炎有效量的二-β-D-吡喃葡萄糖胺，(b)基于二-β-D-吡喃葡萄糖胺的重量计算，至少大约20％重量的葡萄糖，(c)和可药用载体。
46.权利要求45的抗炎组合物，包括铵离子可药用源。
47.权利要求45的抗炎组合物，包括可药用的抗酸化合物。
全文摘要
通过给予生物体具有二葡萄糖胺作为活性组分的组合物可治疗不利的炎性疾病。优选的化合物为二－β－D－吡喃葡萄糖胺。以高纯度制备二葡萄糖胺的简单方法是通过葡萄糖、含氮的碱和甲醇或乙醇反应而形成二葡萄糖胺,然后优选使用活性炭回收二葡萄糖胺来获得的。优选的二葡萄糖胺(二－β－D－吡喃葡萄糖胺)具有非常的抗炎活性。可用可药用载体来配制而制成治疗炎症有效的药物组合物。该药物组合物也可用于治疗导致生物体细胞机械动力网破坏的不利的炎性疾病。另外,使用该组合物也可重建细胞防御网失衡的生物体的细胞防御网的平衡。在失衡情况下,该组合物有助于治疗炎症疾病并激活体内发炎控制系统。这些不利的炎性反应也可通过在NH
文档编号A01N43/04GK1190891SQ96195548
公开日1998年8月19日 申请日期1996年6月6日 优先权日1995年6月6日
发明者C·G·德鲁伯 申请人:生物力学制药公司