~0· 027mg/L CoCl2 · 6Η02、1· 8 ~2. 2mg/L 甘氨酸、〇· 08~0· 12mg/L盐酸硫胺素、0· 48~0· 52mg/L盐酸吡哆醇、0· 48~0· 52mg/L烟 酸、99 ~101mg/L 肌醇、0.8 ~1.2g/L PVP、0.2 ~0.3mg/L 6-ΒΑ、0·048 ~0.052mg/L IBA、 27 ~32g/L 蔗糖、7 ~8g/L 卡拉胶，ρΗ5· 75 ~5· 85。
[0104] 5)生根诱导培养：将增殖培养中高度达2cm以上的单芽切下接入生根培养基中， 培养10~15天；培养条件为：温度245°C、光照9h · d \光照强度2700LX。
[0105] 上述生根诱导培养基的配方为：412~413mg/LNH4N03、473~477mg/L ΚΝ03、 42 ~43mg/L KH2P04、92 ~93mg/L MgS04*7H02、108 ~112mg/L CaCl2*2H02、ll ~ 11. 5mg/L MnSO4 · 4H02、4 ~4. 5mg/L ZnSO4 · 7Η02、2· 8 ~3. 4mg/L Η3Β03、0· 12 ~0· 13mg/L Na2MoO4 · 2H02、13. 5 ~14. 5mg/L FeSO4 · 7H02、18. 3 ~18. 9mg/L Na2 · EDTA · 2Η02、0· 41 ~ 0.42mg/LKI、0.012~0.013mg/LCuS04.5H02、0.012~0.013mg/LCoCl 2.6H02、1.8~ 2. 2mg/L甘氨酸、0· 08~0· 12mg/L盐酸硫胺素、0· 45~0· 55mg/L盐酸[!比咳醇、0· 45~ 0· 55mg/L 烟酸、99 ~101mg/L 肌醇、0· 65 ~0· 75mg/L NAA、18 ~22g/L 鹿糖、7 ~8g/L 卡 拉胶，ρΗ5· 75 ~5. 85。
[0106] 6)炼苗：当至少60%的增殖苗开始生根后进入炼苗阶段，将获得的地被银桦生根 组培苗在光强3000~6000Lx、温度30°C条件下炼苗15天；
[0107] 7)移植及管理：将炼苗后的苗木移植到含有45~55%黄泥和45~55%泥炭土 基质的移植介质中，进行田间栽培管理。移植的时间为3~4月。在移植前，移植介质用 1/1000的高锰酸钾溶液消毒，移植后每个星期用1/800的百菌清和多菌灵轮流喷施，防止 杂菌滋生，移植后15天开始施肥，采用1/1000的复合肥溶液每周喷施一次。
[0108] 田间栽培管理的具体方法为：移植后先在遮阳率为90~95%，相对湿度为85 %~ 90%，温度为25~33°C的条件下培养7~8天；然后将苗木置于遮阳率为75%~80%，湿 度为75 %~80%，温度为25~33°C的条件下培养8~20天；以后按常规育苗进行遮阳及 淋水管理。
[0109] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种地被银桦组织培养的方法，其特征在于：包括以下步骤： 1) 外植体的采集； 2) 外植体的消毒； 3) 丛芽诱导培养：将上步消毒后的外植体接种至丛芽诱导培养基中，诱导培养3~5个 月，期间需转接至新丛芽诱导培养基3~5次，外植体即可被诱导出多个丛芽； 4) 继代增殖培养：将上步诱导出丛芽的地被银桦组培苗接种到继代增殖培养基中，每 培养28~32天将地被银桦增殖苗转接至新的继代增殖培养基中继续培养； 5) 生根诱导培养：将增殖培养中高度达2cm以上的单芽切下接入生根培养基中，培养 10~15天； 6) 炼苗：当至少60%的增殖苗开始生根后进入炼苗阶段，将获得的地被银桦生根组培 苗在光强3000~6000 Lx、温度26~30°C条件下炼苗15~20天； 7) 移植及管理：将炼苗后的苗木移植到移植介质中，进行田间栽培管理。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中外植体采集的时间为6~9月， 采集新萌条顶梢的25~30cm部分，并剪去叶片。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中外植体消毒处理的具体方法 为：将采集的枝条清洗干净，剪切成3~4cm长、带1~2个叶腋的茎段，在无菌环境中用 0. 08~0. 12%v/v的取(：12浸泡消毒3~7min，期间不断摇动确保消毒液与枝条充分接触， 然后用无菌水清洗干净，最后将茎段两端各切去0. 4~0. 6cm，留下中间含叶腋茎段作为无 菌外植体。4.根据根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)中丛芽诱导培养基的配方 S:412~413mg/LNH4N03、1898~ 1902 mg/LKN03、84.5~85.5mg/LKH2P04、369~371mg/ L MgS04.7H02、131~133 mg/L CaCl2.2H02、22~22.5 mg/L MnS04.4H02、8.4 ~8.8 mg/ L ZnSO4 ? 7H02、6 ~6. 4 mg/L H3B03、0. 22 ~0? 27 mg/L Na2MoO4 ? 2H02、27. 5 ~28 mg/L FeSO4 ? 7H02、37 ~37. 5 mg/L Na2 ? EDTA ? 2H02、0. 8 ~0? 85mg/L KI、0. 023 ~0? 027 mg/L CuSO4?5H02、0. 023 ~0? 027 mg/L CoCl2?6H02、I.8 ~2. 2 mg/L甘氨酸、0? 08 ~0? 12 mg/ L盐酸硫胺素、0? 48~0? 52 mg/L盐酸吡哆醇、0? 48~0? 52 mg/L烟酸、99~101 mg/L肌 醇、0? 8~I.2 g/L PVP、0. 48~0? 52 mg/L 6-BA、0. 048~0? 052mg/L IBA、27~32g/L蔗 糖、7~8 g/L 卡拉胶，pH5. 75 ~5. 85。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4)中继代增殖培养基的配方为：412 ~413 mg/L NH4N03、1898 ~1902 mg/L KN03、84. 5~85. 5mg/L KH2P04、369~371mg/ L MgS04.7H02、131~133 mg/L CaCl2.2H02、22~22.5 mg/L MnS04.4H02、8.4~8.8 mg/ L ZnSO4 ? 7H02、6~6. 4 mg/L H3B03、0. 22~0? 27 mg/L Na2MoO4 ? 2H02、27. 5 ~28 mg/L FeSO4 ? 7H02、37~37. 5 mg/L Na2 ? EDTA ? 2H02、0. 8~0? 85mg/L KI、0. 023~0? 027 mg/L CuSO4 ? 5H02、0. 023~0? 027 mg/L CoCl2 ? 6H02、I. 8~2. 2 mg/L甘氨酸、0? 08~0? 12 mg/ L盐酸硫胺素、0.48~0.52 mg/L盐酸吡哆醇、0.48~0.52 mg/L烟酸、99~101 mg/L 肌醇、0.8 ~1.2 g/L PVP、0.2 ~0.3 mg/L 6-BA、0.048 ~0.052mg/L IBA、27 ~32g/L 蔗 糖、7~8 g/L卡拉胶，pH5. 75~5. 85。6. 根据根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤5)中生根诱导培养基的配方 为：412 ~413 mg/L NH4N03、473 ~477 mg/L KN03、42 ~43 mg/L KH2P04、92 ~93 mg/ L MgSO4 ? 7H02、108 ~112 mg/L CaCl2 ? 2H02、11 ~11. 5 mg/L MnSO4 ? 4H02、4 ~4. 5 mg/ L ZnSO4 ? 7H02、2. 8 ~3. 4mg/L H3B03、0. 12 ~0? 13 mg/L Na2MoO4 ? 2H02、13. 5 ~14. 5 mg/ L FeSO4 ? 7H02、18. 3 ~18. 9mg/L Na2 ? EDTA ? 2H02、0. 41 ~0? 42 mg/L KI、0. 012 ~0? 013 mg/L CuSO4.5H02、0. 012 ~0? 013 mg/L CoCl2.6H02、I. 8 ~2. 2 mg/L 甘氨酸、0? 08 ~0? 12 mg/L盐酸硫胺素、0? 45~0? 55 mg/L盐酸[!比咳醇、0? 45~0? 55 mg/L烟酸、99~lOlmg/L 肌醇、0? 65 ~0? 75 mg/L NAA、18~22g/L 蔗糖、7~8g/L 卡拉胶，pH5. 75 ~5. 85。7. 根据根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)和步骤4)中丛芽诱导和继代 增殖培养的培养条件均为：温度23~27°C、光照9~Ilh ?(! \光照强度2200~2700Lx ;步 骤5)中生根诱导培养的培养条件为：温度24~26°C、光照8~IOh \光照强度2200~ 2700Lx〇8. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤7)中所述移植介质含有45~55%黄 泥和45~55%泥炭土基质。9. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤7)中所述田间栽培管理的具体方法 为：移植后先在遮阳率为90~95%，相对湿度为85%~90%，温度为25~33°C的条件下培 养7~8天；然后将苗木置于遮阳率为75%~80%，湿度为75%~80%，温度为25~33°C的 条件下培养8~20天；以后按常规育苗进行遮阳及淋水管理。10. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤7)中移植的时间为3~6月或9~ 11月。
【专利摘要】本发明公开了一种地被银桦组织培养的方法。该方法为将消毒后的外植体接种至丛芽诱导培养基中诱导出丛芽；再将丛芽接种到继代增殖培养基继续培养；然后接种至生根培养基中进行生根，生根后进行炼苗和田间栽培管理。本发明方法获得地被银桦无性系苗木的产率高，时间快，且所获得的苗木健壮，这些苗木解决了种植业地被银桦缺乏的问题。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105123519
【申请号】CN201510550899
【发明人】李湘阳, 曾炳山, 裘珍飞, 刘 英, 范春节
【申请人】中国林业科学研究院热带林业研究所
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年8月31日