一种蔬菜发酵产品制备方法_2

文档序号:9771542阅读:来源:国知局
艺包括如下步骤,具体如下:辣椒去把,清洗,切块, 加入辣椒重量1~3 %的盐,2-4%的薦糖、随后添加辣椒原料重量0.1-0.5%鼠李糖乳杆菌 菌粉,0.5-1 %植物乳杆菌CGMCCl 1763菌粉放入发酵辣椒生产容器中,加水使辣椒被淹没, 密封容器;控制溫度在22~28°C进行15~25小时的发酵,控制溫度在15~20°C保持5-8小 时,继续调整溫度到在8~15°C保持3-6小时;整个发酵期间容器密封;发酵完毕将辣椒渐干 水份,加入大蒜、薦糖、味素等调味料进行调配,然后经真空包装冷藏销售或包装灭菌均可。
[0019] 本发明中鼠李糖乳杆菌为市售商业化菌种。
[0020] 本发明首先对植物乳杆菌,鼠李糖乳杆菌进行单独培养,培养到预定时间后经离 屯、后收集菌体,利用常规微生物制剂的生产方法制备各菌的粉状微生物菌粉;将制备的菌 种粉剂根据配比进行混和调配。
[0021] 菌粉的具体生产方法已有较多报道,报道文章有黄良昌的硕±学位论文"真空冷 冻干燥法生产干酸奶发酵剂工艺的研究"(2002年),刘宇峰等在中国乳品工业杂志发表的 "直接使用型酸奶发酵剂的研制"发表于1995年第5期。酵母菌菌粉的生产方法参见肖冬光 著"酿酒活性干酵母的生产与应用技术",内蒙古人民出版社1994年出版。
[0022] 本发明中辣椒原料为市场上常见各种品种的辣椒。
[0023] 最终发酵辣椒取出渐干后添加调味料调配,也可将调配后产品粉碎制成发酵辣椒 酱。调味料的添加量为大蒜3-10%、薦糖2-5%、味精1-3%。
[0024] 本发明借助菌种的协同生长发酵,使蔬菜发酵产品具有良好的风味,产品中富含 益生菌和多种营养成分。本发明的产品辣味柔和,口感良好;经过后期低溫发酵处理使得本 发明产品口味协调和谐,入口酸辣适宜。
[0025] 本发明中生产容器可W采用泡菜坛或类似可W密封的容器。
[0026] 采用本发明方法可W快速制备发酵产品,生产周期较天然发酵和纯菌种发酵周期 明显缩短,产品质量好,风味佳,安全性高,产品标准一致,既可适合工业化大规模生产,又 可用于手工作坊式生产,有较大的应用市场。
【具体实施方式】:
[0027] 发明所述植物乳杆菌CGMCC NO. 1 1763,是植物乳杆菌化actobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、 (简称CGMCC),保藏号为CGMCC NO. 11763,保藏地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3 号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101。
[0028] 植物乳杆菌益生特性如下:
[0029] 本发明所提供的植物乳杆菌CGMCC NO. 11763经实验发现能够在抑为1.50的条件 下存活,在1 %胆盐培养4小时后仍处于存活状态;植物乳杆菌CGMCC NO. 11763降解亚硝酸 盐速度快,分解能力达到10.9mg/h/kg,该菌种在生产泡菜时,整个发酵过程中亚硝酸盐浓 度在4.8mg/kgW下;CGMCC NO. 11763在发酵60h小时后,对胆固醇降解率可达到64.76%。 CGMCC NO. 11763黏附能力测定的自凝集率为95.71 %。
[0030] CGMCC NO. 11763对胆固醇降解能力研究和测定:
[0031] 取Iml CGMCC NO. 11763母液接种于IOmL的MRS胆固醇液体培养基(胆固醇含量 O.lmg/ml,抑6.2)中,37°C的恒溫静置分别培养20h、40h、60h备用,W接入1血无菌水的MRS 胆固醇培养基为对照,取W上培养不同时间的菌液样品及对照液各lml,9000r/min,4°C下 离屯、lOmin,得到发酵上清液,邻苯二甲醒法测定上清液中胆固醇含量(具体为:取各上清液 0 . Iml于相应的试管中,加冰醋酸0.3ml,Img/ml的邻苯二甲醒0.15ml,缓缓加入浓硫酸 1.Oml,混合均匀。室溫静置IOmin,于550nm下测吸光值)。每一处理3个重复,W同样方法制 作胆固醇标准曲线,计算上清液中胆固醇含量及降解率,结果见表1。可知,CGMCC NO. 11763 对胆固醇有很好的降解作用,在发酵60h小时后,降解率可达到64.76%。
[0032] 表1对胆固醇的降解情况。
[0034] 菌CGMCC NO. 11763菌株的耐胆盐试验:
[0035] 取CGMCC NO. 11763菌液ImL接种菌种于含有不同胆盐(含量梯度为0.0%、0.2%、 0.4%、0.6%、0.8%、l%)的10mLMRS液体培养基(PH=6.4),置于37°C下分别培养0、2、4h, 每个处理3个重复。各取Iml样品菌液于9ml生理盐水中混匀,制备稀释度溶液,取0.1ml稀释 液于MRS中涂布,于37°C生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平 板上的菌数个数。结果见表2。可知该菌在胆盐浓度为1 %处理4h后菌的生长量依然达到 0.59±0.92 X 107(cfu/ml),有很好的耐胆盐能力。
[0036] 表2耐胆盐能力检测[(±s) X 107cfu/ml]
[0038] 菌CGMCC NO. 11763菌株的耐酸试验
[0039] 取HLX37母液按Iml接种菌种于不同pH值(pH梯度为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的 IOmL MRS液体培养基,置于37°C下分别培养0、2、地,每一处理3个重复。各取Iml样品菌液于 9ml生理盐水中混匀,制备稀释溶液,取0.1ml稀释液于MRS中涂布,于37°C生化培养箱中倒 置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录平板上的菌落个数。结果见表3。说明该菌具有 很强的耐酸能力。
[0040] 表3耐酸能力检测[(±s) X l07cfu/ml]
[0042] 菌CGMCC NO. 11763的黏附能力测定
[0043] 培养CGMCC NO. 11763(MRS液体培养基)、大肠杆菌D册a(LB液体培养基)24h得发酵 液,分别置于3000r/min、4°C下离屯、IOmin,收集菌泥,分别用抑=7.0的无菌憐酸盐缓冲液 (PBS)洗涂菌泥2次(即在菌落中加入PBS,震荡混合均匀后,置于3000r/min、4°C下离屯、 IOmin,收集菌体)。自凝集率(% ):用无菌的PBS将菌泥CGMCC NO. 11763制成在波长600皿处 的吸光值为〇.4±0. UA 0)的悬浮菌液及菌悬液,静置24h后测定吸光值A 24,自凝集率 (%)公式为(4 0-4 24)心0。;他凝集率(%):将〔610:^).11763和大肠杆菌0册〇的悬菌 液调节成在波长600皿处的吸光值为0.6±0.1 (A 0)的混合悬浮菌液。静置24H后测定吸光 值A 24,他凝集率(% )公式为(A 0 -A 24)/A 0。测定结果见表5,可知CGMCC NO. 11763的自 凝集率为95.71 %,有很强的黏附能力。
[0044] 表4黏附能力表
[0046] 菌株生理特性
[0047] 所述植物乳杆菌(Xactobaci Ilus plantarunOXH于2015年11月30日保藏于中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、(简称CGMCC),保藏号为CGMCC NO. 11763,保藏地 址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101。
[004引该菌株特点如下:在显微镜下观察,该菌株为短杆状,革兰氏染色呈阳性,无鞭毛, 不产芽抱;在固体培养基上,该菌菌落为白色,表面光滑,致密,形态为圆形,边缘较整齐。
[0049] 理化特征为:过氧化氨酶(-),明胶液化(-),吗I噪实验( + ),运动性(-),发酵产气 (-),亚硝酸盐还原(-),发酵产气(-),产硫化氨气体(-),pH4.0MRS培养基中生长(+ )。经过 生理生化鉴定为为植物乳杆菌化actobaci Ilus PIantarum),命名为植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum)XH。
[0050] 菌株能够在57°C下生长良好,葡萄糖耐受能力为275g/L。
[0051] 本发明植物乳杆菌由采集人李建树,从新疆维吾尔族老乡家中酸奶中分离得到, 采集时间2015年6月2日。
[0052] 实施例1化发酵罐试验
[0化3] (1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCC NO. 11763-环,接入装有50mL培养基MRS(无琼 脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mLS角瓶中,200巧m,37°C培养12h左右,使菌体处 于对数生长中期。
[0054] (2)将对数期的菌种接入装有化MRS液体培养基(初始葡萄糖为15
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