专利名称：核苷磷酸化酶和核苷酶抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一些核苷类似物，它们是PNP、PPRT、MTAP、MTAN和/或NH的抑制剂，这些化合物作为药物以及含有这些化合物的药物组合物的用法。本发明还涉及治疗疾病的方法。
背景技术：
US 5,985,848，US 6,066,722和US 6,228,741涉及作为嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)和嘌呤磷酸核糖转移酶(PPRT)抑制剂的核苷类似物。这种类似物可用于治疗寄生虫感染、T-细胞恶性肿瘤、自身免疫疾病和炎性疾病。这些类似物还可在器官移植中用于免疫抑制。
PCT/NZ00/00048提供了一种制备某些PNP抑制剂的方法。该申请识别作为PNP抑制剂的化合物并表达了对制备这些物质的更简便方法的需求。PCT/NZ01/00174也提供了作为PNP和PPRT抑制剂的其它核苷类似物。
一些核苷类似物也被鉴定为5′-甲硫基腺苷磷酸化酶(MTAP)和5′-甲硫基腺苷核苷酶(MTAN)的强有力的抑制剂。这是PCT/NZ03/00050的主题。
本申请的申请人也研发了一种制备连接有亚甲基的环胺脱氮嘌呤的方法，该方法包括使甲醛或甲醛等价物与环胺和杂芳族化合物反应。该方法是新西兰专利申请no.523970的主题。
PNP催化例如鸟嘌呤和次黄嘌呤等核糖核苷和脱氧核糖核苷的磷酸裂解，以得到相应的糖-1-磷酸和鸟嘌呤、次黄嘌呤或其它嘌呤碱基。
缺失嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)的人会罹患特定的T-细胞免疫缺陷，这是由于dGTP的聚集会妨碍受激的T淋巴细胞的增殖。因此PNP抑制剂可抑制免疫，并可抵抗T-细胞恶性肿瘤和T-细胞增殖性疾病。
核苷水解酶(NH)催化核苷的水解。这些酶在哺乳动物中未发现但一些原生动物类寄生虫的核苷补救需要这种酶。一些原生动物寄生虫用核苷磷酸化酶来代替用于此目的的核苷水解酶，或除核苷水解酶外还利用核苷磷酸化酶。预计核苷水解酶和磷酸化酶的抑制剂可干扰寄生虫的代谢，因此可用于抗原生动物类寄生虫。
MTAP和MTAN作用于多胺生物合成途径，哺乳动物的嘌呤补救和细菌的细胞密度感受途径。MTAP催化5′-甲硫基腺苷(MTA)可逆磷酸解成腺嘌呤和5-甲硫基-α-D-核糖-1-磷酸(MTR-1P)。MTAN催化MTA可逆水解成腺嘌呤和5-甲硫基-α-D-核糖和S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAH)可逆水解成腺嘌呤和S-核糖-高半胱氨酸(SRH)。形成的腺嘌呤随后参与循环并被转化成核苷酸。实际上，人类细胞中游离腺嘌呤的唯一来源就是这些酶作用的结果。MTR-1P随后通过一系列酶作用被转化成甲硫氨酸。
MTA是亚精胺形成过程中将氨丙基从脱羧基化的S-腺苷甲硫氨酸转移到腐胺的反应的副产物。该反应是由亚精胺合成酶催化的。亚精胺合成酶对MTA聚集造成的产物抑制非常敏感。因此，对MTAP和MTAN的抑制将严重限制多胺的生物合成和细胞中腺嘌呤的补救途径。同样，MTA是细菌由S-腺苷甲硫氨酸(SAM)和酰基-酰基载体蛋白合成酰化的高丝氨酸内酯的副产物，其中，随后的内酯化释放出MTA和酰化的高丝氨酸内酯。酰化的高丝氨酸内酯是一种细菌的细胞密度敏感分子，它与细菌对人类组织的毒性有关。最近的工作已经鉴定了第二种通讯系统(自诱导物2，AI-2)，这对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都是共同的，因此被认为是“遍在信号”，它作用于种间细胞-细胞通讯。再者，MTAN产生S-核糖-高半胱氨酸(SRH)，这是AI-2的前体。在微生物中对MTAN或MTAP的抑制将组织MTA被移除并使该途径受到产物抑制，由此可减少细胞密度敏感途径的产生并降低微生物感染的毒力。在微生物中抑制MTAN还将阻止SRH的形成，从而减少第二细胞密度敏感途径的产生。
据报道，许多恶性肿瘤都有遗传缺失造成的MTAP缺损。已知这些细胞中MTAP酶功能的缺失是由于第9号染色体上紧密连锁的MTAP和p16/MTS1肿瘤抑制基因的纯合缺失。由于p16/MTS1的缺失可能会造成肿瘤，遗传缺失的结果便是MTAP活性缺乏，但这不是造成癌症的原因。但是，MTAP的缺失改变了这些细胞的嘌呤代谢，使得这些细胞主要依赖于从头合成(de novo)途径以提供嘌呤。这就使得这些细胞对氨甲喋呤、丙氨菌素和偶氮丝氨酸等阻断从头合成途径的抑制剂异常敏感。因此，将氨甲喋呤、丙氨菌素或偶氮丝氨与MTAP抑制剂联合治疗将具有非常有效地抗肿瘤特性。
MTAP抑制剂也可非常有效地抵抗疟疾等感染红血细胞(RBC)的寄生虫感染，这是由于它们缺乏嘌呤生物合成的从头合成途径。原生动物类寄生虫的生长和繁殖完全依赖于补救途径产生的嘌呤。因此，MTAP抑制剂将杀死这些寄生虫而对宿主RBC没有任何副作用，这是由于RBC是最终分化的细胞，且它们不合成嘌呤、不制造多胺或繁殖。
以上专利说明书中大多数地方所描述的化合物的亚氨基糖部分的氮原子位于C-1和C-4之间，从而形成1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-D-核糖醇化合物。氮原子在核糖醇环中的位置对于与酶结合是重要的。此外，糖部分和核苷碱基类似物之间的键合位置对于酶抑制活性也是重要的。已知的化合物在糖环的C-1处连接。
在寻找新的和改进的核苷磷酸化酶和核苷酶抑制剂的过程中，本申请人研究了一些化合物的合成和生物活性，其中，氮原子在糖环中的位置各不相同，且此外，两个氮原子形成了糖环的一部分。还研究了连接糖部分和碱基类似物的其它方式。
本申请人惊喜地发现，一些新的化合物对PNP、PPRT、MTAP和核苷水解酶MTAN中的一种或多种具有强有力的抑制活性。
因此，本发明的目的是提供一种化合物，它是PNP、PPRT、MTAP、MTAN和/或NH的抑制剂，或至少提供了一种有用的选择。
发明综述本发明的第一个方面提供了式(I)的化合物 其中V选自CH2和NH，W选自NR1和NR2；或V选自NR1和NR2，W选自CH2和NH；X选自CH2和CHOH，为R或S-构型；Y选自氢、卤素和羟基，但当V选自NH、NR1或NR2时Y是氢；Z选自氢、卤素、羟基、SQ、OQ或Q，其中Q是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；R1是式(II)的残基
R2是式(III)的残基 A选自N、CH或CR，其中，R选自卤素、任选取代的烷基、芳烷基或芳基、OH、NH2、NHR3、NR3R4和SR5，其中，R3、R4和R5分别是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；B选自OH、NH2、NHR6、SH、氢或卤素，其中，R6是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；D选自OH、NH2、NHR7、氢、卤素或SCH3，其中，R7是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；E选自N和CH；G选自CH2和NH，或G不存在，条件是，其中W是NR1或NR2，G是NH时，则V是CH2，条件是，其中V是NR1或NR2，G是NH时，则W是CH2；或其互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其酯，或其前药。
优选Z选自氢、卤素、羟基、SQ或OQ。更优选Z是OH。或者，优选Z是SQ。在另一个优选的实施方案中，Z是Q。
还优选V是CH2。更优选的是X是CH2。此外，优选的是G是CH2。
优选W是NR1。或者，优选的是W是NR2。同样优选的是，当W选自NH、NR1或NR2时，则X是CH2。
优选的本发明的化合物包括那些其中V、X和G都是CH2，Z是OH和W是NR1的化合物。
其它优选的本发明的化合物包括那些其中V、X和G都是CH2，Z是SQ同时W是NR1的化合物。
优选Y是氢。还优选的是Y是羟基。
优选B是羟基。还优选的是B是NH2。
优选A是CH。还优选的是A是N。
优选D是H。还优选的是D是NH2。
同样优选的是E是N。
优选的本发明的化合物包括(3R，4R)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(8-氮杂-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷；(3S，4R)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3，4-二羟基-4-甲硫基甲基吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷；N-(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-D-核糖醇；N-(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-D-核糖醇；(3R，4R)-3-羟基-4-羟基甲基-1-(次黄嘌呤-9-基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(9-脱氮鸟嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(4-氯苯硫基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(6-氯-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(6-叠氮-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；或(3R，4R)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-乙酰氧基-4-(乙酰氧基甲基)吡咯烷。
另一方面，本发明提供了一种药物组合物，它含有药物有效量的上述式(I)的化合物。
再在另一方面，本发明提供了一种治疗需要抑制嘌呤磷酸核糖转移酶、嘌呤核苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷核苷酶和/或核苷水解酶的疾病或症状的方法，该方法包括给予需要治疗的患者药物有效量的上述式(I)的化合物。
所述疾病或症状包括癌症、细菌感染、原生动物感染或T-细胞介导的疾病。所述T-细胞介导的疾病是银屑病、关节炎或移植排斥。
再在另一方面，本发明提供了上述式(I)的化合物在制造用于治疗需要抑制嘌呤磷酸核糖转移酶、嘌呤核苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷核苷酶和/或核苷水解酶的疾病或病症的药物中的应用。
详细描述应该知道，式(I)的化合物的表示方法，其中，B和/或D是羟基，具有相应的酰胺的烯醇型互变异构形式，且这将主要以酰胺形式存在。使用烯醇型互变异构表示方法仅是为了用更少的结构式来表示本发明的化合物。
类似的，应该知道，式(I)的化合物的表示方法，其中，B和/或D是硫醇基，具有相应的硫代酰胺的硫代烯醇型互变异构形式，且这将主要以硫代酰胺形式存在。使用硫代烯醇型互变异构表示方法仅是为了用更少的结构式来表示本发明的化合物。
本发明的化合物可用适当的方法制备。一种合适的方法包括独立合成糖部分和碱基部分，然后将碱基部分与糖环部分中的氮原子结合。
例如，下面的流程1显示了本发明化合物的1-N-亚氨基糖部分的制备，其中糖类似物的氮原子位于与糖分子中的C-1异头碳原子相同的位置。一种有用的用于合成1-N-亚氨基糖的起始化合物是N-叔-丁氧羰基-(3R，4S)-3-羟基-4-((1S)-1，2-二羟基乙基)吡咯烷。这种起始物质可用Filichev等(Carbohydrate Res.，2001，333，115-122)的方法制备，唯一的变化是将叔-丁氧羰基部分而不是N-(9-芴基甲氧基羰基)用作氮原子保护基。氧化切断二醇部分后进行原位还原得到N-保护的3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷(1)。除去N保护基得到(3R，4R)-3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷(4)。外消旋的3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷首先由Jaeger等(J.Org.Chem.，1965，30，740-744)制备，并被用于制备1′-氮杂碳环胸腺嘧啶类似物(Lee，Y.H.，Kim，H.K.，Youn，I.K.，Chae，Y.B.，Bioorg.Med.Chem.Lett.1991,1,287-290.)和氮杂-C-嘧啶(Sorenson，M.D.，Khalifa，N.M.，Pedersen，E.B.，Synthesis，1999，1937-1943)。
还描述了两种合成(3R，4R)-3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷的其它方法。一种方法是Bols等的方法[Bols，M.，Hansen，S.U.，Acta Chem.Scand.，1998，52，1214-1222]，它包括对映异构体的酶促纯化。另一种方法是Ichikawa等的方法[Ichikawa，Y.，Makino，K.，Tetrahedron Lett.，1998，39，8245-8248]，该方法通过延胡索酸单乙基酯的多克(multi-gram)不对称合成(3R，4R)-3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷。Ichikawa等评价了(3R，4R)-3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷对人PNP的抑制活性并得到160μM的IC50。
在去除N-保护基之前可能需要将化合物(1)的羟基苄基化以得到盐酸(3R，4R)-3-苄氧基-4苄氧基甲基吡咯烷(3)，这是准备与合适的碱基类似物结合的有用化合物。
可通过合适的醛的还原性胺化与糖部分连接。用相应的溴前体制得的合适的醛的例子显示在流程2中。
流程2醛式碱基类似物与受保护的糖类似物(3)的偶合显示在流程3中。去除保护基可得到本发明的抑制剂化合物(3S，4S)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3，4-二羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(8)。
应该知道的是，在其环的任何位置含有氮原子的糖类似物可用这种方法与任何碱基类似物偶合。还应该知道，也可采用除通过醛的还原性胺化偶合以外的其它方法。
从下面的流程4可见，可对中间体(7)进行操作以得到(10)。
流程4将碱基类似物与糖类似物(4)偶合的其它实施例显示在流程5中。该方法可用来制备化合物(3R，4S)-1-[(8-氮杂-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(12)和(3R，4S)-1-[(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(13)。
在其环中含有两个氮原子的糖类似物中间体已被制备。(3R，4S)-4-羟基-3-羟基甲基吡唑烷(21)可按照流程6中列出的途径来制备。酮(14)是用已知的化学方法(Lin，T-S.，Zhu，J-L.，Dutschman，G.E.，Cheng，Y-C.，Prusoff，W.H.，J.Med.Chem.1993，36，353-362)从D-木糖制备的。胺化后将亚胺还原并将所得仲胺乙酰化得到化合物(17)。经过关键的酸水解步骤同时伴随有再环化作用得到了亚氨基环(18)。经过氢化然后切断二醇部分并去除乙酸酯得到了所需的吡唑烷(21)。
吡唑烷(21)或其前体N-乙酸酯(20)可与各种碱基类似物偶合得到本发明的式(I)的潜在的抑制剂。
另一种将碱基类似物与糖类似物偶合的方法显示在流出7中。将醛N-叔-丁氧羰基-(3R，4S)-3-羟基-4-甲酰吡咯烷(22)用于Wittig反应以得到5′C-C连接的中间体N-叔-丁氧羰基-(3R，4R)-3-羟基-4-(2-苯乙烯基)吡咯烷(23)。随后进行氢化并切除Boc得到盐酸盐(25)，它可用于Mannich反应以得到(3R，4R)-1-[(6-氯-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷(26)。于130℃在封管中用7N的甲醇氨处理，然后用3N的HCl水溶液将其转化成盐酸盐以得到(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷盐酸盐(27)。
应该知道，流程7中所例举的方法可用于将各种C-4取代基不同的25的类似物与各种9-脱氮嘌呤类似物偶合。
流程7流程8显示了再一种制备经过选择的本发明的化合物的方法。该方法采用D-阿拉伯糖醇而不是N-叔-丁氧羰基-(3R，4S)-3-羟基-4-[(1S)-1，2-二羟基乙基]吡咯烷作为起始化合物。
本发明的化合物是PNP、MTAP和/或MTAN的强有力的抑制剂。表1显示了经过选择的本发明的化合物对人PNP的抑制常数。表2显示了所选化合物对大肠杆菌(E coli)MTAN的抑制常数。表3显示了所选化合物对人MTAP的抑制常数。表4显示了所选化合物对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)PNP的抑制常数。表5显示了所选化合物对恶性疟原生动物(/Plasmodium falciparum)PNP的抑制常数。
表1抗人PNP的抑制常数
表2抗大肠杆菌MTAN的抑制常数
表3抗人MTAP的抑制常数
表4抗结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)PNP的抑制常数
表5抗恶性疟原生动物(Plasmodium falciparum)PNP的抑制常数 如表1、2、3、4和5所示，Ki是由酶-抑制剂复合物形成的初始抑制常数，Ki*是在慢发作(slow-onset)阶段后观察到的抑制(即紧密结合抑制)的平衡解离常数。Ki*是生物有效常数。
其它方面本发明的化合物可作为游离碱的形式和盐的形式使用。术语″药学上可接受的盐″是指衍生自无机或有机酸的无毒盐，例如下面的酸盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、乳酸、延胡索酸、琥珀酸、酒石酸、葡糖酸、柠檬酸、甲烷磺酸和对甲苯磺酸。
所述活性化合物可通过各种途径施用于患者，包括口服施用、注射或局部施用。根据患者的状况和待治疗疾病的性质和程度，要施用的化合物的量是可变的。通常给成人的剂量小于1-1000毫克，优选0.1-100毫克。
供口服施用时，所述化合物可被制成固体或液体制剂，例如片剂、胶囊剂、粉末剂、溶液剂、悬液剂和分散剂。这种制剂是此领域熟知的，其它口服剂型方案未在这里列出。当为片剂形式时，所述化合物可与常规的片剂基料如乳糖、蔗糖和玉米淀粉，以及粘合剂、崩解剂和润滑剂一起制片。所述粘合剂可以是，例如，玉米淀粉或明胶，所述崩解剂可以是土豆淀粉或藻酸，所述润滑剂可以是硬脂酸镁。也可加入其它组分如着色剂或调味剂。
液体形式包含水和乙醇等载体，可含或不含其它试剂如药学上可接受的表面活性剂或悬浮剂。
所述化合物可与生理上可接受的稀释剂如水或盐水混合通过注射给药。所述稀释剂可含有一种或多种其它成分，如乙醇、丙二醇、油或药学上可接受的表面活性剂。
所述化合物可作为局部用于皮肤或粘膜的乳膏的一种成分。所述乳膏优选包含药学上可接受的溶剂以帮助其通过皮肤或粘膜。合适的乳膏是精通此领域的技术人员熟知的。
所述化合物还可通过持续释放系统给予。例如，可将它们掺入缓释片剂或胶囊。
附图简述
图1显示了化合物(8)抑制人PNP的动力学曲线。
图2显示了对小鼠MTAP的体内抑制。
实施例以下实施例进一步阐述了本发明。但应该明确，本发明并不限于这些实施例。
实施例1N-叔-丁氧羰基-(3R，4R)-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(1)将乙醇(50mL)中的N-叔-丁氧羰基-(3R，4S)-3-羟基-4-[(S)-1，2-二羟基乙基]吡咯烷(3.4g，13.7mmol)溶液逐滴加入正在搅拌的高碘酸钠(3.4g，16mmol)的水溶液(25mL)，同时保持反应温度在0℃。使反应再进行20分钟然后分批加入硼氢化钠(2.0g，过量)并再次确保反应温度保持在0℃。完全加入后滤出固体，用乙醇(50mL)洗涤并在真空下浓缩以得到一种浆状物。通过层析显示得到浆状的1(2.74g，92％)。
实施例2N-叔-丁氧羰基-(3R，4R)-3-苄氧基-4-(苄氧基甲基)吡咯烷(2)0℃下，将氢化钠(140mg，60％油分散，3.7mmol)分批加入正在搅拌的苄基溴(300μL，2.8mmol)和1(200mg，0.92mmol)的DMF溶液(10mL)。完全加入后使所得悬液回复室温，用甲苯(100mL)稀释，用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空下浓缩以得到浆状物。通过层析显示得到油状的2(350mg，96％)，无需纯化即可将其用于下一步骤。
实施例3(3R，4R)-3-苄氧基-4-(苄氧基甲基)吡咯烷盐酸盐(3)。
40℃下将盐酸(2mL，1 M)加入2(500mg，1.3mmol)的甲醇溶液(2mL)并将所得混合物搅拌1小时。反应完全后将反应物在真空下浓缩以得到3的盐酸盐(330mg，90％)。1H NMRδ7.35-7.21(m，10H)，4.48(m，4H)，4.08(d，J＝2.9Hz，1H)，3.53(m，1H)，3.44(m，3H)，3.24(m，1H)，2.65(m，1H)。13C NMRδ138.0，137.6，128.9，128.8，128.3，128.2，79.3，73.7，71.9，68.7，49.6，46.4，44.8。
实施例4(3R，4R)-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(4)室温下，将盐酸(5mL，12M)加入正在搅拌的1(2.3g，10.6mmol)的甲醇溶液(5mL)。1小时后将反应物在真空下浓缩以得到油状的4(1.63g，100％)。13C NMRδ71.9，60.9，52.1，47.9，46.6。
流程2实施例57-N-苄氧基甲基-6-叔-丁氧基-9-脱氮嘌呤-9-甲醛(5)将5-苄氧基甲基-7-溴-4-叔-丁氧基吡咯并[3，2-d]嘧啶(400mg，1.02mmol)溶于乙醚(10mL)和苯甲醚(5mL)并冷却至-78℃。然后逐滴加入正-丁基锂(600μL，2.5M)，加入速度应保持反应温度低于-70℃，并将所得溶液在-78℃放置30分钟。然后加入二甲基甲酰胺(100μL)并再将反应物搅拌30分钟，然后用水淬灭并使其回复室温。反应物然后用乙酸乙酯(100mL)稀释，用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩以得到一种浆状物。通过层析纯化得到5(270mg，78％)。1H NMRδ10.29(s，1H)，8.62(s，1H)，7.98(s，1H)，7.34-7.22(m，5H)，5.79(s，2H)，4.53(s，2H)，1.71(s，9H)。13C NMRδ184.8，156.63，152.6，150.0，136.7，136.6，128.9，128.5，127.8，118.4，84.4，78.3，71.0，29.0。
实施例68-氮杂-9-脱氮-6-甲氧基-7-N-(四氢吡喃-2-基)-嘌呤-9-甲醛(6)于-78℃在惰性气体下将n-BiLi(0.7mL，2.4M)逐滴加入正在搅拌的8-氮杂-9-溴-9-脱氮-6-甲氧基-7-N-(四氢吡喃-2-基)-嘌呤(530mg，1.7mmol)的THF溶液(20mL)。将反应物再在-78℃下搅拌30分钟，然后加入DMF(1.0mL)并使反应物回复室温。用水(50mL)淬灭反应，用甲苯(2×100mL)萃取，将有机层合并并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空下浓缩以得到固体残余物。通过层析显示得到油状的6。1HNMRδ10.43(s，1H)，8.71(s，1H)，6.55(dd，J＝10.0，2.7Hz，1H)，4.25(s，3H)，4.13(m，1H)，3.83(dt，J＝10.8，2.8Hz)，2.53-1.65(m，7H)。13C NMRδ177.0，161.5，154.5，143.9，130.2，128.9，87.0，67.4，53.5，28.7，23.7，21.2。
实施例77-[(3R，4R)-(3-苄氧基-4-苄氧基甲基吡咯烷-1-基)甲基]-5-苄氧基甲基-3H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-4-酮(3S，4S)-1-[(9-脱氮-7-苄氧基甲基-次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-苄氧基-4-(苄氧基甲基)吡咯烷(7)将氰基硼氢化钠(100mg，1.59mmol)加入正在搅拌的5(220mg，0.64mmol)和3.HCl(190mg，0.57mmol)的甲醇溶液(5mL)，并在室温下搅拌过夜。反应物然后在真空下浓缩并重新溶于甲醇(2mL)和浓HCl(2mL)，搅拌1小时然后在真空下浓缩以得到固体残余物。对所得残余物进行层析得到固体状的7(202mg，63％)。1HNMRδ7.87(1H，s)，7.32(1H，s)，7.31-7.23(m，5H)，5.89(s，2H)，4.56(s，2H)，4.50(s，2H)，4.48(s，2H)，4.47(s，2H)，3.87(m，2H)，3.81(q，J＝13.4Hz，2H)，3.43(d，J＝7.1Hz，2H)，3.01(t，J＝8.1Hz，1H)，2.79(d，J＝4.7Hz，1H)，2.55(m，1H)，2.36(m，1H)。13C NMRδ156.2，145.8，141.8，138.9，138.8，137.6，131.4，128.8，128.7，128.7，128.3，128.2，128.1，128.0，128.8，117.9，115.7，81.3，77.1，73.5，72.1，71.4，70.8，60.0，56.4，48.6，45.9。
实施例8(3R，4R)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(8)将化合物7(120mg，0.21mmol)和Pearlman催化剂(120mg)悬浮于乙醇(3mL)和乙酸(1mL)并于室温在氢气下剧烈搅拌24小时。反应物然后通过硅藻土(celite)过滤并在真空下浓缩以得到一种固体物质。对该固体进行层析和离子交换得到白色固体状的8(38mg，68％)。熔点为248-250℃。1H NMRδ7.81(1H，s)，7.34(1H，s)，3.97(1H，brs)，3.65(2H，s)，3.53(1H，m)，3.44(1H，m)，2.93(1H，t，J＝9.0Hz)，2.77(1H，m)，2.60(1H，m)，2.33(1H，t，J＝7.1Hz)，2.12(1H，brs)。13C NMRδ155.8，144.1，142.8，130.0，117.3，111.1，72.9，62.7，60.2，54.8，48.9，473。HRMS(MH+)C12H16N4O3计算值265.1301。实测值265.1302。C12H16N4O3-1/2H2O分析计算值C，52.7；H，6.2；N，20.5。实测值C，53.0；H5.9；N，20.4。
流程4实施例9.1(3R，4R)-1-[(9-脱氮-7-苄氧基甲基-腺嘌呤-9-基)甲基]-3-苄氧基-4-(苄氧基甲基)吡咯烷(9)将化合物7(1.2g，2.12mmol)加入磷酰氯(20mL)并将所得悬液加热至回流。1小时后将反应物在真空下浓缩，用氯仿稀释，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空下浓缩。将所得残余物溶于7N在甲醇中的NH3并将所得溶液在封管中加热至120℃过夜。反应物在真空下浓缩并通过层析纯化以得到9(0.83g，69％)。1H NMRδ8.38(s，1H)，7.76(brs，1H)，7.32-7.25(m，15H)，6.01(brs，2H)，5.51(d，J＝2.3Hz，2H)，4.55(s，2H)，4.51(s，2H)，4.48(s，2H)，4.25(d，J＝2.9 Hz，2H)，4.05(m，1H)，3.50(d，J＝6.5Hz，2H)，3.42(m，1H)，3.31(m，1H)，3.20(m，1H)，3.01(m，1H)，2.71(m，1H)。13C NMRδ152.3，151.5，150.1，138.3，138.0，135.7，134.6，129.2，129.0，128.8，128.2，128.1，115.18，107.94，79.7，77.6，73.6，71.9，70.7，69.8，58.6，58.1，55.22，54.9，48.8，45.3。
实施例9.2(3R，4R)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(10)将化合物9(100mg，0.18mmol)和Pd/C(50mg，10％bw)悬浮于乙醇(4mL)，并于室温在氢气下剧烈搅拌24小时。然后通过硅藻土过滤反应物并在真空下浓缩以得到一种浆状物。在硅胶上进行层析得到固体状的10。1H NMR(D2O)δ7.83(s，1H)，7.13(s，1H)，3.88(q，J＝4.4Hz，1H)，3.56-3.32(4H，m)，2.78(t，J＝9.0Hz，1H)，2.62(dd，J＝10.7，6.4Hz，1H)，2.47(dd，J＝10.7，4.2Hz，1H)，2.16(dd，J＝9.8，7.0Hz，1H)，2.03(1H，m)。13C NMR(D2O)δ150.1，149.6，145.1，129.6，113.3，109.8，72.9，62.8，60.3，54.8，49.0，47.3.HRMS(MH+)C12H18N5O2计算值264.1461。实测值264.1457。
实施例10(3R，4R)-1-[(8-氮杂-9-脱氮-6-甲氧基-8-(四氢吡喃-2-基)-嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(11)
将氰基硼氢化钠(100mg，1.59mmol)加入正在搅拌的6(340mg，1.3mmol)和4.HCl(190mg，0.57mmol)的甲醇溶液(5mL)并在室温下搅拌过夜。对所得残余物进行层析得到固体状的11(150mg，35％)。1H NMRδ8.39(s，1H)，5.90(d，J＝9.1Hz，1H)，4.17-3.94(m，4H)，4.12(s，3H)，3.67-3.52(m，2H)，2.94-2.79(m，2H)，2.66-2.52(m，2H)，2.35-2.09(m，2H)，1.70-1.56(m，2H)。13C NMRδ162.6，152.2，(140.1，140.0)，133.5，131.6，(87.0，86.9)，74.3，(68.3，68.2)，(64.3，64.2)，62.6，(56.2，56.1)，54.5，(50.6，50.7)，(47.7，47.6)，29.7，25.2，21.8。
实施例11(3R，4R)-1-[(8-氮杂-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(12)将浓盐酸(1mL，12M)加入11(50mg，0.14mmol)的甲醇溶液并搅拌过夜，然后在真空下浓缩以得到固体残余物，将残余物与甲醇一起研磨并过滤以得到固体状的12(38mg，92％)。1H NMRδ8.13(s，1H)，4.35(d，J＝2.7Hz，1H)，3.86(m，1H)，3.66-3.43(m，2H)，3.55(d，J＝5.7Hz，2H)，3.10(m，1H)，2.44(brs，1H)。13C NMRδ154.7，145.4，137.1，134.7，128.6，71.4，60.6，60.6，55.0，48.0，47，9。
实施例12(3R，4R)-1-1(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(13)将密闭试管中的在7N NH3中的11(100mg)的甲醇溶液(4mL)在120℃加热过夜。反应物然后在真空下浓缩，将粗的残余物溶于甲醇(1mL)和浓HCl(1mL)并使其过夜。反应物再次在真空下浓缩，所得残余物通过层析纯化以得到13(61mg，84％)。13C NMRδ152.4，151.5，139.1，134.8，122.7，71.7，61.1，60.3，55.0，48.4，48.2。
实施例135-O-叔-丁基二甲基甲硅烷基-1，2-O-异亚丙基-α-D-赤式-呋喃戊-3-酮糖(叔-丁氧羰基)腙(5-O-tert-butyldimethylsilyl-1，2-O-usioriotkudebe-α-D-erythro-pentofuranos-3-ulose(tert-butoxycarbonyl)hybrazone)(15)将14(11.5g，38mmol)、肼基甲酸叔丁酯(17g，128mmol)和对-甲苯磺酸吡啶(1.15g，4.6mmol)的甲苯(150mL)溶液在70℃搅拌过夜。反应完全后用饱和的NaHCO3和水洗涤反应物，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩以得到一种浆状物。通过层析纯化得到油状的15(12.5g，79％)。1H NMRδ8.43(brs，1H)，5.98(d，J＝4.8Hz，1H)，4.90(dd，J＝4.8，1.5Hz，1H)，4.76(q，J＝1.5Hz，1H)，3.77(m，2H)，1.48(s，9H)，1.45(s，3H)，1.41(s，3H)，0.82(s，9H)，-0.03(d，J＝5.8 Hz，6H)。13C NMRδ153.5，152.8，114.3，105.7，82.0，81.7，76.2，66.2，28.6，28.0，27.5，26.2，18.5.HRMS(MH+)C19H37N2O6Si计算值417.2421。实测值417.2398。
实施例143-(2-叔-丁氧羰基肼基)-5-O-叔-丁基二甲基甲硅烷基-3-脱氧-1，2-O-异亚丙基-α-D-呋喃核糖(16)于-78℃在惰性气体下将硼烷.DMS复合物(15mL，约10M，150mmol)逐滴加入正在搅拌的15(12.5g，30mmol)的溶液。使反应物回复室温，用甲醇小心淬灭，然后所得溶液在真空下浓缩。所得粗制浆状物与分次加入的甲醇(3×100mL)共整蒸馏以得到油状的16(12.5g，100％)，该物质无需进一步纯化即可用于下面的步骤。1HNMRδ6.29(brs，1H)，5.67(d，J＝3.7Hz，1H)，4.62(t，J＝4.3Hz，1H)，4.24(brs，1H)，3.75(m，2H)，3.72(m，1H)，1.46(s，3H)，1.38(s，9H)，1.27(s，3H)，0.82(s，9H)，-0.03(s，6H)。13C NMRδ156.9，112.8，104.6，80.7，80.4，80.2，65.0，63.1，28.7，27.1，26.9，26.3，18.7.HRMS(MH+)C19H38N2O6Si计算值418.2499。实测值418.2509。
实施例153-(1-乙酰-2-叔-丁氧羰基肼基-5-O-叔-丁基二甲基甲硅烷基-3-脱氧-1，2-O-异亚丙基-α-D-呋喃核糖(17)将乙酸酐(10mL，过量)加入正在搅拌的16(12.5g，30mmol)的吡啶溶液(30mL)并将所得反应物在室温下搅拌过夜。反应完全后反应物用氯仿稀释(500mL)并用10％HCl、水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后将有机层干燥(MgSO4)，过滤，滤液在真空下浓缩以得到粗制的黄色油状物。通过层析纯化显示得到无色油状的17(6.5g，47％)。1H NMRδ7.20(brs，1H)，5.75(d，J＝3.8Hz，1H)，5.02(dd，J＝9.8，5；0Hz，1H)，4.72(t，J＝4.2Hz，1H)，4.04(dd，J＝9.8，2.2Hz，1H)，3.87(d，J＝11.6Hz，1H)，3.70(dd，J＝11.6，3.8Hz，1H)，2.09(s，3H)，1.55(s，3H)，1.42(s，9H)，1.28(s，3H)，0.84(s，9H)，-0.03(s，6H)。13C NMRδ174.5，155.2，112.7，104.7，82.0，81.0，77.2，62.9，62.0，55.0，28.5，27.0，26.7，26.3，21.1，18.7.HRMS(MH+)C21H41N2O7Si计算值461.2683。实测值461.2704。
实施例16(3S，4S)-2-乙酰-3，4-二氢-3-[(1S)-1，2-二羟基乙基]-4-羟基吡唑(18)将搅拌中的17(2.0g，4.3mmol)的70％的乙酸溶液(20mL)在100℃加热过夜。将所得溶液冷却，用水(100mL)稀释，水溶液用氯仿(2×100mL)萃取，然后将含水层在真空下浓缩以得到一种浆状物。产物通过层析醇化物以得到油状的18(380mg，47％)。13C NMRδ173.1，150.5，112.7，74.7，69.6，65.4，62.4，21.4.HRMS(MH+)C7H13N2O4计算值189.0875。实测值189.0876。
实施例17(3S，4S)-2-乙酰-3-[(1S)-1，2-二羟基乙基]-4-羟基吡唑烷(19)。
将Pearlmans催化剂(200mg)悬浮于(3S，4S)-2-乙酰-1，5-二氢-3-[(1S)-1，2-二羟基乙基]-4-羟基-吡唑(18)(200mg，1.11mmol)的甲醇溶液并在氢气下搅拌过夜。反应物通过硅藻土过滤，滤液在真空下浓缩以得到粗制的油状物。所得粗制产物通过层析纯化以得到无色油状的19(85mg，43％)。1H NMRδ4.64(dd，J＝5.7，3.4Hz，1H)，3.90(m，2H)，3.61(m，2H)，3.36(dd，J＝11.7，6.5Hz，1H)，2.71(dd，J＝11.7，6.0Hz，1H)，2.18(s，3H)。13C NMRδ174.5，75.4，72.7，68.2，65.2，56.4，21.5.HRMS(MH+)C7H14N2O4计算值190.0953。实测值190.0951。
实施例18(3R，4S)-2-乙酰-4-羟基-3-羟基甲基-吡唑烷(20)将19(80mg，0.42mmol)的乙醇溶液(5mL)逐滴加入正在搅拌的高碘酸钠(150mg，0.7mmol)的水溶液(5mL)，加入速度可保持反应物的温度在5℃。反应完全后在所得悬液中分批加入硼氢化钠(135mg，xs)，加入速度可保持反应物的温度在0℃，完全加入后使反应物回复室温。在反应物中加入快速色谱级二氧化硅并将所得悬液在真空下浓缩以得到白色固体。所得固体通过层析纯化以得到无色油状的20(51mg，76％)。1H NMRδ4.43(dd，J＝5.7，3.3Hz，1H)，3.91(q，J＝4.7Hz，1H)，3.75(d，J＝4.7Hz，1H)，3.31(m，1H)，3.28(dd，J＝11.8，5.7Hz，1H)，2.75(dd，J＝11.8，5.5Hz，1H)，2.17(s，3H)。13C NMRδ173.9，76.5，68.2，62.5，55.8，21.7.HRMS(MH+)C6H13N2O3计算值161.0926。实测值161.0920。
实施例19(3R，4S)-4-羟基-3-羟基甲基吡唑烷(21)将浓HCl(1.5mL)逐滴加入正在搅拌的20(15mg，0.09mmol)的甲醇溶液(1.5mL)并使所得反应物在60℃保持3小时。将反应物在真空下浓缩以得到21(18mg，100％)，为其二盐酸盐形式。1H NMRδ4.60(q，J＝2.4Hz，1H)，3.73-3.31(m，5H)。13C NMRδ72.6，68.3，60.2，54.1。
流程7实施例20N-叔-丁氧羰基-(3R，4S)-3-羟基-4-(2-苯乙烯基)吡咯烷(23)0℃在氩气下在苄基三苯基磷鎓溴(1.75g，4.97mmol)的无水THF溶液(10mL)中加入1.6M在THF中的BuLi(2.33mL，3.73mmol)，无需冷却将所得深红色溶液搅拌10分钟。再冷却至0℃后，加入醛22(335mg，1.56mmol)(Gary B.Evans，RichardH.Furneaux，Andrzej Lewandowicz，Vern L.Schramm和Peter C.Tyler(2003)，Synthesisof Second-Generation Transition State Analogues of Human Purine NucleosidePhosphorylase，J.Med.Chem.，已出版)的THF溶液(5mL)并将所得混合物在室温下搅拌12小时。反应物然后用水(1mL)淬灭，加入二氯甲烷(100mL)，有机相用饱和碳酸氢钠溶液(15mL)洗涤，然后用水(15mL)洗涤。用硫酸镁干燥并在真空下浓缩，然后通过层析显示得到浆状的约1∶3的23的顺/反混合物(290mg，64％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm反式7.28(m，5H)，6.49(d，J＝15.9Hz，1H)，6.03(dd，J＝15.9和8.1Hz，1H)，4.11(m，1H)，3.67(m，2H)，3.32(m，2H)，2.83(m，1H)，1.46(s，9H).顺式7.27(m，5H)，6.58(d，J＝11.6Hz，1H)，5.43(dd，J＝11.6Hz和10.0Hz，1H)，4.11(m，1H)，3.65(m，2H)，3.21(m，2H)，2.88(m，1H)，1.44(s，9H)。
实施例21N-叔-丁氧羰基-(3R，4S)-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷(24)在N-叔-丁氧羰基-(3R，4R)-3-羟基-4-(2-苯乙烯基)吡咯烷23(290mg，1.00mmol)的乙醇溶液(20mL)中加入10％Pd/C(250mg)，将悬液在氢气下搅拌12小时。过滤后在真空下除去溶剂以得到254mg(87％)浆状的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm7.10(m，5H)，4.00(m，1H)，3.47(m，2H)，3.07(m，2H)，2.67(m，2H)，2.04(m，1H)，1.83(m，1H)，1.54(m，1H)，1.45(s，9H)。13C NMR(300MHz，Cd13)δppm(注意，由于旋转异构体的缓慢转化，一些峰是双峰)155.17，142.03，128.83，128.71，126.37，79.88，(74.94，71.26)，(53.17，52.90)，(49.90，49.34)，(46.11，45.52)，34.41，33.69，28.91。
实施例22(3R，4S)-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷盐酸盐(25)在N-叔-丁氧羰基-(3R，4R)-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷24(254mg，0.87mmol)的甲醇溶液(10mL)中加入浓HCl(约12N，4mL)，并将溶液在40℃搅拌30分钟。在真空下除去溶剂并与甲苯共沸后得到了浅灰色固体状的粗制的标题化合物(202mg，0.89mmol，102％)。1H NMR(300MHz，MeOH-d4)δppm7.14(m，5H)，4.22(m，1H)，3.52(dd，J＝11.8和7.4Hz，1H)，3.39(dd，J＝12.3和4.9Hz，1H)，3.14(dd，J＝12.3和2.8Hz，1H)，3.02(dd，J＝11.8Hz，1H)，2.71(m，2H)，2.20(m，1H)，1.84(m，1H)，1.62(m，1H)。13C NMR(300MHz，MeOH-d4)δppm142.94，129.93，129.89，127.56，75.56，52.90，48.55，47.28，35.18，34.44。
实施例23(3R，4S)-1-[(9-脱氮-6-氯-嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷(26)在粗制的(3R，4R)-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷盐酸盐25(194mg，0.85mmol)和6-氯-9-脱氮嘌呤(118mg，0.76mmol)的水悬液(2.2mL)中加入37％的甲醛水溶液(70μL，0.94mmol)和乙酸钠(70mg，0.85mmol)。所得混合物在封管中边搅拌边在95℃加热12小时。冷却后，深棕色浆状物用1，4-二噁烷(3mL)稀释并将深棕色溶液预吸收到二氧化硅上。通过层析显示得到淡黄色/褐色薄膜状的标题化合物(104mg，38％)。1HNMR(300MHz，MeOH-d4)δppm8.71(s，1H)，8.12(s，1H)，7.17(s，5H)，4.55(s，1H)，4.18(m，1H)，3.56(m，2H)，3.31(m，1.H)，3.04(dd，J＝11.6和7.7Hz，1H)，2.64(m，2H)，2.21(m，1H)，1.87(m，1H)，1.61(m，1H)。13C NMR(300MHz，MeOH-d4)δppm151.62，151.35，145.02，142.99，138.11，129.84，129.82，127.46，126.81，107.73，75.68，61.00，58.48，49.51，47.56，35.26，34.88。
实施例24(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷(27)将7N甲醇氨(4mL)中的7-[(3R，4R)-(3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷-1-基)甲基]-4-氯-吡咯并[3，2-d]嘧啶26(70mg，0.196mmol)的溶液在封管中于130℃边搅拌边加热3小时。冷却后在真空下除去溶剂。将残余物置于甲醇中并将粗物质预吸收到二氧化硅。柱层析后得到的物质用3N HCl水溶液(4mL)在40℃处理1小时。冻干处理后得到31mg(39％)淡黄色固体状的标题化合物。1H NMR(300MHz，D2O)δppm8.40(s，1H)，7.83(s，1H)，7.26(m，5H)，4.33(m，4H)，4.07(m，1H)，3.80(m，2H)，2.75(m，2H)，2.37(m，1H)，1.90(m，1H)，1.66(m，1H).43CNMR(300MHz，D2O)δppm(注意，由于旋转异构体的缓慢转化，一些峰是双峰)149.54，144.47，142.40，133.05，129.05，128.85，126.51，113.64，103.48，(74.87，72.96)，(55.34，54.87)，(52.59，52.09)，(45.96，43.65)，33.30，32.94，32.33.ES-MSm/z for C19H23N5O(M+H)+338.1979；计算值338.4326。
流程9实施例25(3S，4S)-1-[(7-N-苄氧基甲基-6-O-叔-丁基-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3，4-二羟基-4-羟基甲基-3，4-O-异亚丙基吡咯烷(29)将胺28(Bols，M.Tetrahedron Lett.1996，37，2097-2100)(0.50g，2.89mmol)和醛(5，流程3)(1.0g，2.95 mmol)的1，2-二氯乙烷溶液(50mL)和三乙酰氧基硼氢化钠(1.1g，5.2mmol)一起搅拌1小时，然后用NaHCO3水溶液洗涤，干燥并浓缩至干。通过层析得到标题化合物29(1.16g，2.34mmol，80％)。13C NMR(CDCl3)δ156.2，150.3(C)，150.0(CH)，137.5(C)，131.8，128.8，128.2，127.8(CH)，117.1，114.6，113.0，91.7，83.2(C)，82.4(CH)，77.3，70.2，65.7，62.1，60.5，48.4(CH2)，29.1，28.3(CH3)。
实施例26(3S，4S)-1-[(6-0-叔-丁基-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3，4-二羟基-4-羟基甲基-3，4-O-异亚丙基吡咯烷(30)在10％Pd/C(0.25g)存在下将29(1.1g，2.21mmol)的乙醇溶液(30mL)在氢气下搅拌。16小时后再加入催化剂，并在24小时后将固体和溶剂除去。残余物通过层析得到浆状的标题化合物30(0.35g，0.93mmol，42％)。13C NMR(CD3OD)δ157.7(C)，150.2(CH)，149.8(C)，131.0(CH)，118.2，113.7，112.9，93.1，83.9(C)，83.5(CH)，66.4，62.7，61.0，48.9(CH2)，29.4，28.2(CH3)。
实施例27(3S，4S)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3，4-二羟基-4-羟基甲基吡咯烷(31)将甲醇(2.5mL)和浓HCl(2.5mL)中的30(0.15g，0.399mmol)的溶液放置1小时，然后浓缩至干。残余物通过层析[(CH2Cl2/MeOH/aq NH310∶6∶1)得到白色固体状的标题化合物31(0.095g，0.34mmol，85％)。13C NMR(D2O/DCl)(85℃)8 153.8(C)，144.7(CH)，138.0(C)，132.8(CH)，118.5，103.8，78.8(C)，70.1(CH)，63.5，59.5，57.3，49.3(CH2)。
实施例28(3S，4R)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3，4-二羟基-4-甲硫基甲基吡咯烷(33)将乙基二异丙胺(0.2mL)加入30(0.14g)的二氯甲烷悬液(5mL)，然后加入甲烷磺酰氯(0.045mL)并将化合物搅拌1小时。所得溶液用常规方法处理并用硫代甲醇钠(0.13g)处理DMF(3mL)中的粗产物，所得混合物在90℃加热4小时，然后在甲苯和水之间分配。有机相用水洗涤，干燥并浓缩。将残余物层析得到32(0.075g)。将甲醇(4mL)和浓HCl(4mL)中该物质的溶液放置1小时，然后浓缩至干以得到白色固体状的33.HCl(0.04g，62％)。13C NMR(D2O)δ153.4(C)，145.0(CH)，135.5(C)，133.1(CH)，118.6，102.9，79.2(C)，71.9(CH)，60.6，56.7，48.3，39.2(CH2)，17.1(CH3)。
流程10实施例29(3R，4S)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(37)将2，4，6-三异丙基苯基磺酰氯(3.0g)加入1(1.0g)的吡啶溶液(20mL)并将所得溶液搅拌16小时，然后在60℃加热1小时。加入氯仿并用水、2M HCl水溶液和NaHCO3水溶液洗涤溶液。进行常规处理和层析以得到1.125g无色玻璃状物质34。用硫代甲醇钠处理0.45g该物质的DMF溶液(5mL)，并将混合物搅拌0.5小时。加入甲苯并对反应物进行正常处理以得到0.115g粗物质。该物质的二氯甲烷溶液(5mL)用在二噁烷(3mL)中的4M的HCl处理。1小时后将溶液浓缩至干。将固体残余物35溶于含有7-N-苄氧基甲基-9-脱氮-6-O-甲基次黄嘌呤-9-甲醛(0.18g)的甲醇(3mL)，并加入氰基硼氢化钠(0.088g)。将混合物搅拌3天。加入氯仿并用正常方法处理混合物。然后层析得到36(0.178g)。将该物质在浓HCl(10mL)中加热回流1小时，然后将溶液浓缩至干。残余物用甲醇/25％aqNH3(1∶1)处理1小时，然后浓缩至干。通过层析显示得到一种固体物质。将其溶于HCl水溶液并浓缩。将残余物与乙醇一起研磨得到一种吸湿性的白色固体状的37.HCl(0.048g)。13C NMR(D2O，85℃)δ154.6(C)，144.5(CH)，140.6(C)，132.6(CH)，118.6，104.6(C)，73.3(CH)，59.3，56.3，48.0(CH2)，45.7(CH)，34.7(CH2)，15.2(CH3)。
流程11实施例305-O-叔-丁基二甲基甲硅烷基-N-氰基甲基-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-2，3-O-异亚丙基-D-核糖醇(39)将溴乙腈(1.46mL，20.9mmol)和乙基二异丙胺(5.46mL，56.9mmol)加入38(Horenstein，B.A.；Zabinski，R.F.；Schramm，V.L.Tetrahedron Lett.1993，34，7213-7216)(3.0g，10.45mmol)的乙腈溶液(20mL)。1小时后，将溶液浓缩至干并将残余物层析以得到浆状的标题化合物39(3.4g，10.4mmol，99％)。1H NMRδ4.58(dt，J＝6.4，4.3Hz，1H)，4.20(dd，J＝6.8，4.2Hz，1H)，3.88(d，J＝17Hz，1H)，3.79(dd，J＝10.9，3.0Hz，1H)，3.58(m，1H)，3.56(d，J＝17Hz，1H)，3.19(dd，J＝9.8，6.1Hz，1H)，2.85(m，1H)，2.75(dd，J＝9.8，4.3Hz，1H)，1.44(s，3H)，1.23(s，3H)，0.82(s，9H)，0.09(s，3H)，0.08(s，3H)；13C NMRδ115.6，113.6(C)，82.2，78.3，68.6(CH)，64.7，59.3，41.0(CH2)，27.6，26.2，25.6(CH3)，18.5(C).HRMS(MH+)C16H31N2O3Si计算值327.2104。实测值327.2097。
实施例31N-(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-D-核糖醇盐酸盐(40.HCl)用与先前所述制备Immucillin-H(Evans，G.B.；Furneaux，R.H.；Gainsford，G.J.；Schramm，V.L.；Tyler，P.C.Tetrahedron 2000，56，3053-3062)相同的反应顺序将N-氰基甲基衍生物39(0.5g，1.53mmol)转化成标题化合物，以得到无定形粉末状的40.HCl(0.07g，0.23mmol，15％)。1H NMR(D2O)δ8.24(s，1H)，7.71(s，1H)，4.43(m，1H)，4.29-4.17(m，2H)，3.96(m，1H)，3.82-3.71(m，3H)；13C NMRδ154.2(C)，144.3(CH)，133.0(C)，124.0(CH)，117.8，115.9(C)，73.4，70.4，68.9(CH)，62.9，56.1(CH2).HRMS(MH+)C11H15N4O4计算值267.1093。实测值267.1101。
实施例32.17-N-苄氧基甲基-9-脱氮-9-甲酰-6-O-甲基次黄嘌呤(5a)将苯甲醚(10mL)和乙醚(25mL)中的7-N-苄氧基甲基-9-溴-9-脱氮-6-O-甲基次黄嘌呤(G.B.Evans等J.Org.Chem.2001，66，5723-5730)(1.0g，2.87mmol)的溶液冷却至-70℃，并在所得悬液中加入正-丁基锂(2.4mL，1.2M)。10分钟后在澄清的溶液中加入无水N，N-二甲基甲酰胺(1.1mL，14.2mmol)并将其在-70℃搅拌30分钟，然后用水淬灭。进行常规处理得到一种固体物质，然后将其与乙醇一起研磨得到白色固体状的标题化合物(0.67g，2.26 mmol，78％)。熔点为100-101℃。1H NMRδ10.30(s，1H)，8.67(s，1H)，8.00(s，1H)，7.35-7.21(m，5H)，5.77(s，2H)，4.55(s，2H)，4.14(s，3H)；13C NMRδ184.7(CH)，157.0(C)，153.0(CH)，150.0(C)，136.9(CH)，136.5(C)，129.0，128.7，128.1(CH)，118.6，116.7(C)，78.3，71.4(CH2)，54.3(CH3).HRMS(MH+)C19H21N3O3计算值340.1661实测值340.1652。
实施例32.2N-(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-D-核糖醇盐酸盐(41.HCl)将醛(5a)(114mg，0.38mmol)加入在甲醇(1.5mL)、THF(0.5mL)和乙酸(100μL)中的38(Horenstein，B.A.；Zabinski，R.F.；Schramm，V.L.Tetrahedron Lett.1993，34，7213-7216)(100mg，0.35mmol)的溶液并将化合物搅拌10分钟。加入氰基硼氢化钠(88mg，1.4mmol)并将溶液搅拌4小时，然后在氯仿和NaHCO3水溶液之间分配。将有机层干燥并浓缩至干。对残余物进行层析得到推测的浆状的N-(7-N-苄氧基甲基-9-脱氮-6-0-甲基次黄嘌呤-9-基)甲基-5-O-叔-丁基二甲基甲硅烷基-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-2，3-O-异亚丙基-D-核糖醇(175mg，0.31mmol，88％)。将该物质的乙醇溶液(5mL)与10％Pd/C(100mg)一起在氢气下搅拌16小时。将固体物质和溶剂除去并对残余物进行层析得到一种浆状物(129mg)，将其溶于甲醇(5mL)和浓HCl(5mL)，将溶液加热回流2小时。将溶液浓缩至干，将残余物溶于水并冻干处理以得到粉末状的标题化合物41.HCl(80mg，0.25mmol，80％)。1H NMR(D2O)δ8.57(m，1H)，7.78(s，1H)，4.66(s，1H)，4.56(s，1H)，4.29(m，1H)，4.13(m，1H)，3.76(m，2H)，3.61(m，2H)，3.34(dd，J＝13.0，3.4Hz，1H)；13C NMRδ153.6(C)，144.8(CH)，136.7(C)，133.2(CH)，118.5，103.3(C)，71.3，70.3，68.9(CH)，57.4，57.1，50.1(CH2).HRMS(MH+)C12H17N4O4计算值281.1250。实测值281.1260。
实施例33(3R，4R)-3-羟基-4-羟基甲基-1-(次黄嘌呤-9-基)吡咯烷(47)将叔-丁基亚硝酸酯(3.5mL，30mmol，4eq.)加入游离碱3(2.25g，7.5mmol)的无水THF溶液(30mL)，并将反应混合物在室温下搅拌3天。将溶液浓缩至干。层析得到无色浆状的N-亚硝基化合物42(2.05g，83％)。将42(1.0g，3.1mmol)的无水THF溶液(20mL)在氩气下冷却至0℃并缓慢加入氢化铝锂(1g，26.3mmol)。将化合物在室温下搅拌6小时，然后用15％的NaOH溶液(25mL)和水(10mL)小心淬灭。混合物用氯仿提取两次，用NaHCO3水溶液洗涤，干燥并浓缩至干。层析(氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇，5∶2∶1)得到浆状的肼43(0.41g，43％)。将亚胺甲酸酯(Formimidate)44(Watson，A.A.J.Org.Chem.1974，39，2911-2916)(0.224g，1.44mmol，1.2eq.)加入43(0.375g，1.2mmol)的乙醇溶液(1.5mL)并将反应混合物加热回流10分钟，然后使其冷却。将溶液浓缩至干。层析(氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇，5∶2∶1)得到淡棕色胶状的45(0.155g，31％)。用5M HCl水溶液(36.5μL，0.183mmol)处理45(77mg，0.183mmol)的无水MeOH溶液(1mL)。除去溶剂得到棕色胶状的盐酸盐。加入DMF(1.5mL)，然后加入原甲酸三乙酯(0.304mL，1.83mmol，10eq.)并将反应混合物在120℃加热30分钟。冷却后在真空下除去溶剂。残余物通过硅胶柱层析(氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇，5∶2∶0.5)纯化以得到胶状的次黄嘌呤46(49mg，62％)。在乙醇(3mL)和25％的氨水(1mL)中的46(41mg，0.095mmol)的溶液中加入Pd(OH)2/C(20mg，20％Pd)。反应混合物在室温室压下在氢气下搅拌3小时。然后滤去催化剂并用乙醇(1.5mL)洗涤。将溶液浓缩至干并对残余物进行层析(二氯甲烷∶甲醇∶氨水，7∶2∶0.5)得到白色固体状的标题化合物47(21mg，88％)。1H NMR(CD3OD)δ8.17(s，1H)，8.07(s，1H)，4.26(m，1H)，3.85-3.64(m，4H)，3.48-3.43(m，2H)，2.49-2.41(m，1H)；13C NMRδ159.3(C)，149.7(C)，146.7(CH)，142.3(CH)，124.7(C)，72.7(CH)，63.7，63.6，58.4(CH2)，50.2(CH).M/Z C10H13N5O3(MH+)计算值252.109，实测值252.108。
流程13实施例34(3R，4S)-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷盐酸盐(48)。
0℃下，将甲烷磺酰氯(180μL，23mmol)逐滴加入三乙胺(400μL，29mmol)和(3R，4R)-1-叔-丁氧羰基-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(1)(2g，9.2mmol)的CH2Cl2溶液，并使所得溶液回复室温。反应物用CH2Cl2稀释，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩。所得残余物通过硅胶快速层析纯化以得到油状的(3R，4R)-1-叔-丁氧羰基-3-羟基-4-(甲磺酰氧基甲基)吡咯烷(900mg)。无需进一步纯化将产物溶于DMF(10mL)并在室温下与硫代甲醇钠(400mg，5.7mmol)一起搅拌过夜。反应物用甲苯稀释，用水洗涤，盐水，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩。所得残余物通过硅胶快速层析纯化以得到浆状的(3R，4S)-1-叔-丁氧羰基-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(600mg，2.4mmol)，未进一步对其表征。将(3R，4S)-1-叔-丁氧羰基-3-羟基-4-(甲硫基)吡咯烷溶于MeOH(5.0mL)和浓HCl(1.0mL)并在真空下浓缩以得到浆状的(3R，4S)-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷盐酸盐(48)(442mg，三个步骤的总产率为26％)。13C NMR(D2O)δ73.5，51.5，48.6，45.2，34.3，14.9。
实施例35(3R，4S)-1-[(6-叔-丁氧基-7-苄氧基甲基-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(49)将氰基硼氢化钠(200mg，3.2mmol)加入正在搅拌的5(800mg，2.32mmol)和48(550mg，3.00mmol)的甲醇溶液(10mL)，并将化合物在室温下搅拌过夜。将粗反应物吸收到二氧化硅上，干填装到硅胶快速层析柱上并洗脱以得到固体状的49(1.10g，78％)。1H NMR(CDCl3)δ8.48(s，1H)，7.54(s，1H)，7.33-7.23(m，5H)，5.75(s，2H)，4.50(s，2H)，4.12(m，1H)，4.02(s，2H)，3.30(dd，J＝9.9，7.5Hz，1H)，2.95(m，2H)，2.64(dd，J＝12.7，7.1Hz，1H)，2.52-2.38(m，3H)，2.07(s，3H)，1.70(s，9H)。13C NMR(CDCl3)δ156.4，150.3，150.3，137.5，133.3，128.8，128.2，127.8，117.1，111.7，83.5，77.5，76.1，70.4，61.4，58.2，48.8，47.4，37.3，29.0，16.0。
实施例36(3R，4S)-3-乙酰氧基-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(50)室温下，将乙酸酐(1mL，xs)逐滴加入在CH2Cl2(20mL)中的化合物49(1.1g，2.3mmol)、DMAP(30mg，cat.)和Et3N(2mL，xs)的溶液。15分钟后用CH2Cl2稀释反应物，用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩。所得残余物通过硅胶快速层析纯化以得到浆状的产物(1.35g)。室温下在CH2Cl2(20mL)中的浆状物溶液中逐滴加入TFA(5mL)并在真空下浓缩。将所得残余物溶于CH2Cl2并用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩以得到泡沫状的(3R，4S)-3-乙酰氧基-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(50)(800mg，76％)。1H NMR(CDCl3)δ7.80(s，1H)，7.65(s，1H)，7.25-7.20(m，5H)，5.82(s，2H)，5.11(brs，1H)，4.56(s，2H)，4.47(s，2H)，3.80-3.59(m，3H)，3.32(brs，1H)，2.80-2.69(m，2H)，2.57(dd，J＝13.0，8.3Hz，1H)，2.07(s，3H)，2.05(s，3H)。13CNMR(CDCl3)δ170.7，155.4，145.8，143.3，137.2，134.2，128.8，128.3，128.1，118.1，106.9，77.4，75.7，71.2，57.0，55.8，48.1，43.5，35.0，21.0，16.1。HRMS(MH+)C23H29N4O4S计算值457.1910。实测值457.2412。
实施例37(3R，4S)-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(51)将胺50(800mg，1.75mmol)溶于POCl3并加热回流1小时。所得溶液在真空下浓缩并与甲苯(×2)共馏以得到固体残余物。上述反应得到的产物无需进一步纯化，将其溶于MeOH(15mL)中的7N NH3并在封管中于110℃加热过夜。反应物在真空下浓缩并通过硅胶快速层析纯化所得残余物以得到浆状的(3R，4S)-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(51)(500mg，69％)。1H NMR(d4-MeOH)δ8.24(s，1H)，7.85(s，1H)，7.29-7.26(m，5H)，5.74(s，2H)，4.63(s，2H)，4.43(s，2H)，4.26-4.22(m，1H)，3.70(dd，J＝11.4，6.9Hz，1H)，3.49(dd，J＝12.1，5.6Hz，1H)，3.29(dd，J＝12.3，3.3Hz，1H)，3.16(dd，J＝11.4，6.1Hz，1H)，2.76-2.67(m，1H)，2.50-2.44(m，2H)，2.07(s，3H)。13C NMR(CDCl3)δ153.4，153.0，149.9，138.1，137.0，130.0，129.7，129.3，116.5，106.5，79.5，75.0，72.3，60.9，57.8，50.1，47.6，36.6，16.0。
实施例38(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(52)将胺(51)(150mg，0.37mmol)溶于浓HCl(5mL)并将所得溶液加热回流90分钟。反应物冷却至室温，用水(50mL)稀释并用CHCl3(×2)洗涤，含水层在真空下浓缩，然后与水(×2)共蒸馏。所得残余物溶于NH4OH，在真空下浓缩，并将残余物通过硅胶快速层析以得到固体状的(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷(52)(69mg，65％)。熔点为108-110℃。1H NMR(D2O)δ7.96(s，1H)，7.31(s，1H)，4.00-3.95(m，1H)，3.74(s，2H)，3.05(dd，J＝10.5，7.9Hz，1H)，2.88(dd，J＝11.1，6.2Hz，1H)，2.71(dd，J＝11.1，4.0Hz，1H)，2.49(dd，J＝13.0，6.7Hz，1H)，2.40-2.24(m，2H)，2.16-2.13(m，1H)，1.93(s，3H)。13C NMR(D2O)δ150.5，150.1，145.4，130.4，113.6，108.33，75.0，59.8，56.6，47.4，45.9，35.9，14.8.HRMS(MH+)C13H20N5OS计算值294.1389。实测值294.1394。C13H19N5OS.4/3H2O的分析计算值C，49.19；H，6.88；N，22.06；S，10.10。实测值C，49.86；H6.58；N，21.63；S，9.74。
流程14实施例39(3R，4S)-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷盐酸盐(53)。
将(3R，4R)-1-叔-丁氧羰基-3-羟基-4-(甲磺酰氧基甲基)吡咯烷(见实施例34，1.10g，3.7mmol)溶于DMF(2mL)并逐滴加入DMF(10mL)中的苄硫醇(870L，7.4mmol)和NaH(270mg，60％油分散，6.8mmol)的溶液，同时在室温下搅拌1小时。反应物用甲苯稀释，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩。所得残余物通过硅胶快速层析纯化以得到浆状的(3R，4S)-1-叔-丁氧羰基-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷。无需进一步纯化，将产物溶于MeOH(5.0mL)和浓HCl(1.0mL)并在真空下浓缩以得到浆状的(3R，4S)-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷盐酸盐(53)(730mg，两个步骤的总产率为76％)。1H NMR(D2O)δ7.40-7.27(m，5H)，4.26-4.22(m，1H)，3.74(s，2H)，3.56(dd，J＝12.4，7.2Hz，1H)，3.37(dd，J＝12.8，5.2Hz，1H)，3.21(dd，J＝12.8，3.0Hz，1H)，3.07(dd，J＝12.4，5.5Hz，1H)，2.61-2.52(m，1H)，2.47-2.34(m，2H)。13C NMR(D2O)δ138.7，129.5，129.3，127.9，73.5，51.5，48.5，45.4，35.9，31.8.(MH+)C12H18NOS计算值224.1109。实测值224.1102。
实施例40(3R，4S)-1-[(6-叔-丁氧基-7-苄氧基甲基-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(54)将氰基硼氢化钠(200mg，3.2mmol)加入正在搅拌的5(800mg，2.32mmol)和53(570mg，2.2mmol)的甲醇溶液(10mL)，并将化合物在室温下搅拌。将粗制反应物吸收到二氧化硅上，干填装到硅胶快速层析柱上并洗脱以得到固体状的54(1.10g，78％)。1H NMR(CDCl3)δ8.45(s，1H)，7.62(s，1H)，7.27-7.22(m，10H)，5.75(s，2H)，4.51(s，2H)，4.15(s，2H)，3.67(s，2H)，3.38(dd，J＝10.7，7.0Hz，1H)，3.12-3.02(m，2H)，2.69-2.63(m，1H)，2.54-2.49(m，1H)，2.44-2.39(m，2H)，1.70(s，9H)。13C NMR(CDCl3)δ156.6，150.6，150.0，138.3，137W5，134.4，129.3，129.0，128.8，128.2，127.8，117.1，109.0，83.9，77.9，75.2，70.7，60.5，57.7，49.1，47.0，36.8，33.7，29.0.(MH+)C31H49N4O3S计算值547.2743。实测值547.2723。
实施例41(3R，4S)-3-乙酰氧基-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(55)室温下，将乙酸酐(1mL，过量)逐滴加入CH2Cl2(20mL)中的54(1.16g，2.12mmol)、DMAP(30mg，cat.)和Et3N(2mL，过量)的溶液。15分钟后用CH2Cl2稀释反应物，用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空下浓缩。所得残余物通过硅胶快速层析纯化以得到浆状的产物(1.35g)。室温下在CH2Cl2(20mL)中的浆状物溶液中逐滴加入TFA(5mL)并在真空下浓缩。将所得残余物溶于CH2Cl2并用饱和NaHCO3和水洗涤，干燥(MgSO4)并在真空下浓缩以得到泡沫状的(3R，4S)-3-乙酰氧基-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(55)(900mg，两个步骤的总产率为80％)。1H NMR(CDCl3)δ7.90(s，1H)，7.33(s，1H)，7.28-7.17(m，10H)，5.91(s，2H)，4.85(brs，1H)，4.58(s，2H)，3.86-3.74(m，2H)，3.68(s，2H)，3.16-3.11(m，1H)，2.84-2.80(m，2H)，2.71(dd，J＝11.4，4.6Hz，1H)，2.50-2.36(m，2H)，2.27-2.21(m，1H)，2.00(s，3H)。13CNMR(CDCl3)δ171.3，156.2，145.8，141.9，138.6，137.5，131.4，129.2，128.8，128.3，128.2，127.4，117.9，115.2，78.9，77.0，70.9，59.8，58.7，48.3，45.1，36.9，34.4，21.5.HRMS(MH+)C29H33N4O4S计算值533.2223。实测值533.2236。
实施例42(3R，4S)-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(56)将胺55(900mg，1.7mmol)溶于POCl3(15mL)并加热回流1小时。所得溶液在真空下浓缩并与甲苯(×2)共馏以得到固体残余物。无需进一步纯化将此残余物溶于MeOH(15mL)中的7N NH3并在封管中于130℃加热过夜。反应物在真空下浓缩并通过硅胶快速层析纯化所得残余物以得到浆状的(3R，4S)-1-[(7-苄氧基甲基-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(56)(720mg，两个步骤的总产率为87％)。1H NMR(CDCl3)δ8.32(s，1H)，7.67(s，1H)，7.35-7.25(m，10H)，5.52(s，2H)，4.56(s，2H)，4.23(s，2H)，3.68(s，2H)，3.54-3.48(m，1H)，3.22(d，J＝3.4Hz，2H)，2.83(brs，1H)，2.63-2.45(m，4H)。13C NMR(CDCl3)δ152.2，151.6，149.5，138.2，135.7，134.5，129.2，129.1，128.9，128.8，128.2，127.5，115.2，107.4，77.6，74.9，70.7，60.2，57.3，48.5，46.9，46.3，36.7，33.5，23.1。
实施例43(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(57)将胺56(330mg，0.7mmol)溶于MeOH(4mL)和浓HCl(4mL)的溶液并加热回流90分钟。反应物冷却至室温，用水(50mL)稀释，用CHCl3(×2)洗涤，含水层在真空下浓缩，然后与水(×2)共沸。将所得残余物重溶于NH4OH，在真空下浓缩并通过硅胶快速层析纯化残余物以得到固体状的(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(57)(30mg，12％)。1H NMR(d4-MeOH)δ8.17(s，1H)，7.46(s，1H)，7.26-7.16(m，5H)，3.93-3.90(m，1H)，3.83-3.74(m，2H)，3.68(s，2H)，3.03-2.97(m，1H)，2.80(dd，J＝10.2，6.4Hz，1H)，2.66-2.58(m，2H)，2.38(dd，J＝12.5，8.9Hz，1H)，2.30(dd，J＝9.5，7.2Hz，1H)，2.20-2.14(m，1H)。13C NMR(d4-MeOH)δ152.5，151.4，147.4，140.4，130.4，130.4，129.8，128.3，115.5，112.9，77.3，62.7，59.2，49.3，48.6，37.5，35.6.HRMS(MH+)计算值C19H24N5OS370.1702。实测值370.1694。
流程15实施例44(3R，4S)-1-[(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷盐酸盐(58)将氰基硼氢化钠(20mg，0.32mmol)加入正在搅拌的甲醇(5mL)中的6(180mg，0.52mmol)和(3R，4S)-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷盐酸盐(53)(95mg，0.37mmol)的溶液并在室温下搅拌过夜。将粗制反应物吸收到二氧化硅上，干填装到硅胶快速层析柱上并洗脱以得到泡沫状的(3R，4S)-1-{[8-氮杂-9-脱氮-8-(四氢吡喃-2-基)-6-甲氧基次黄嘌呤-9-基]甲基}-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(80mg，46％)。将其溶于MeOH(15mL)中的7N NH3并在封管中于110℃加热过夜。反应物在真空下浓缩并通过硅胶快速层析纯化所得残余物以得到(3R，4S)-1-{[8-氮杂-9-脱氮-8-(四氢吡喃-2-基)-腺嘌呤-9-基]甲基}-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷。产物未进行表征，但将其溶于甲醇(2.0mL)和浓HCl(2mL)，在真空下浓缩，将所得残余物与异丙醇一起研磨以得到白色固体状的(3R，4S)-1-[(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷盐酸盐(58)(52mg，82％)。13C NMR(d4-MeOH)δ153.7，152.0，139.9，138.8，135.1，130.4，130.0，128.5，124.6，74.6，61.4，58.4，50.4，47.7，37.4，33.4.(MH+)C18H23N6OS计算值371.1654。实测值371.1670。
流程16实施例457-苄氧基甲基-6-O-苄基-9-脱氮-9-甲酰-N2，N2-二(4-甲氧基苄基)-鸟嘌呤(59)-80℃在惰性气体下将正-丁基锂(0.5mL，1.5M)逐滴加入乙醚(6mL)和苯甲醚(3mL)中的正在搅拌的7-苄氧基甲基-6-O-苄基-9-溴-9-脱氮-N2，N2-二(4-甲氧基苄基)-鸟嘌呤(Evans，G.B.；Furneaux，R.H.；Hausler，H.；Larsen，J.S.；TVler，P.C.制备手册)溶液。将反应物在-80℃再搅拌30分钟，然后加入DMF(1.0mL)并使反应物回复室温。用水(50mL)淬灭反应物并用氯仿(2×100mL)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空下浓缩以得到固体残余物。将该固体物质与乙醇一起研磨以得到白色固体状的59(280mg，72％)。熔点172-174℃。1H NMRδ10.25(s，1H)，7.79(s，1H)，7.30-7.21(m，13H)，6.85-6.82(m，5H)，5.62(s，2H)，5.44(s，2H)，4.84(s，4H)，4.45(s，2H)，3.79(s，6H)。13C NMRδ185.5，159.4，159.1，156.5，153.9，136.9，136.7，134.9，131.5，129.5，128.9，128.5，128.3，128.0，117.3，114.2，111.0，78.4，71.0，67.9，55.7，49.5.HRMS(MH+)C38H37N4O5计算值629.2764。实测值629.2749。
实施例46(3R，4R)-1-{[6-O-苄基-7-苄氧基甲基-9-脱氮-N2，N2-二(4-甲氧基苄基)鸟嘌呤-9-基]甲基}-3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷(60)将氰基硼氢化钠(200mg，3.0mmol)加入正在搅拌的59(530mg，0.84mmol)和4.HCl(163mg，1.06mmol)的甲醇溶液(10mL)并将化合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物吸收到二氧化硅上并在真空下浓缩。将所得残余物层析得到白色固体状的60(430mg，70％)。熔点98-100℃。1H NMRδ7.49(s，1H)，7.35-7.12(s，14H)，6.81(d，J＝8.5Hz，4H)，5.59(s，2H)，5.47(s，2H)，4.85-4.73(m，4H)，4.44(s，2H)，4.23-4.12(m，3H)，3.75(s，6H)，3.50-3.35(m，3H)，3.20(dd，J＝12.0，5.0Hz，1H)，3.08(d，J＝12.0Hz，1H)，2.95(dd，J＝11.4，5.4Hz，1H)，2.24(brs，1H)。13C NMRδ159.0，158.4，156.7，153.1，137.6，137.0，135.0，131.5，129.4，128.9，128.7，128.4，128.3，128.1，128.0，125.7，114.3，110.6，105.1，78.1，73.1，70.8，68.0，62.2，60.7，55.7，54.8，49.2，48.9.HRMS(MH+)C43H48N5O6计算值730.3605。实测值730.3629。
实施例47(3R，4R)-1-[(9-脱氮鸟嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(61)将浓HCl(2mL)逐滴加入60(370mg，0.5mmol)的甲醇溶液(4mL)并将所得溶液加热回流4小时。使反应物冷却至室温，然后在真空下浓缩。将所得残余物在水和氯仿之间分配，分离并在真空下浓缩水层。对所得残余物进行硅胶和离子交换层析得到白色固体状的61(39mg，28％)。熔点223-225℃。1H NMRδ7.18(s，1H)，4.03-3.98(m，1H)，3.58(s，2H)，3.55(dd，J＝11.1，6.3Hz，1H)，3.45(dd，J＝11.1，7.4Hz，1H)，2.97(dd，J＝10.0，8.5Hz，1H)，2.79(dd，J＝10.9，6.3Hz，1H)，2.64(dd，J＝10.9，4.0Hz，1H)，2.35(dd，J＝10.3，7.0Hz，1H)，2.20-2.09(m，1H)。13C NMRδ158.6，152.8，143.5，129.6，112.7，107.9，72.8，62.6，60.2，54.8，48.9，47.8.HRMS(MH+)C12H18N5O3计算值280.1410。实测值280.1413.分析(C12H17N5O3.1/2 H2O)C，H，N。
实施例48Mannich反应—一般过程 流程17实施例48.1—一般过程(3R，4R)-1-[(9-脱氮鸟嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷(61)将(3R，4R)-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷盐酸盐(4)(154mg，1.0mmol)和乙酸钠(82mg，1.0mmol)溶于水(2mL)，并将溶液加入甲醛(82μL，1.0mmol)和脱氮鸟嘌呤(120mg，0.8mmol)的水溶液中。将反应物在95℃搅拌12小时。加入硅胶(1.0g)并将混合物蒸发至干。通过硅胶层析纯化，采用CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH(5∶4∶1)作为洗脱液，得到乙酸盐。将其转变为盐酸盐并分析1H和13C NMR谱，发现该化合物在所有方面都与先前的报告相同(Evans，G.B.；Furneaux，R.H.；Lewandowicz，A.；Schramm，V.L.；Tyler，.P.C.J.Med.Chem.，印刷中)5表用Mannich反应一般方法制备的其它化合物
实施例48.2(3R，4R)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-羟基甲基吡咯烷(8)采用Mannich反应一般过程(上述)以得到乙酸盐形式的化合物8。将其转化成盐酸盐并分析1H和13C NMR谱，发现该化合物在所有方面都与先前的报告相同(Evans，G.B.；Furneaux，R.H.；Lewandowicz，A.；Schramm，V.L.；Tyler，P.C.J.Med.Chem.，印刷中)。
实施例48.3(3R，4R)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(10)采用Mannich反应一般过程(上述)以得到乙酸盐形式的化合物10。1H NMR(d4-MeOH)δ8.20(s，1H)，7.65(s，1H)，4.27(s，1H)，4.22(五峰，J＝3.0Hz，1H)，3.59(m，2H)，3.46(dd，J＝111，8.3Hz，1H)，3.26(dd，J＝11.4，5.7Hz，1H)，3.11(dd，J＝11.4，3.0Hz，1H)，2.95(dd，J＝11.2，6.8Hz，1H)，2.37(brs，1H)，1.82(s，3H)。13CNMR(d4-MeOH)152.9，151.9，147.1，132.0，115.8，108.2，73.6，63.1，61.9，56.0，50.8，49.5，23.7.HRMS(MH+)C12H18N5O2计算值264.1461。实测值264.1457。
实施例48.4(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷(57)采用Mannich反应一般过程(上述)以得到乙酸盐形式的化合物57。通过离子交换层析将乙酸盐转化成游离碱基。1H NMR(d4-MeOH).17(s，1H)，7.46(s，1H)，7.26-7.16(m，5H)，3.93-3.90(m，1H)，3.83-3.74(m，2H)，3.68(s，2H)，3.03-2.97(m，1H)，2.80(dd，J＝10.2，6.4Hz，1H)，2.66-2.58(m，2H)，2.38(dd，J＝12.5，8.9Hz，1H)，2.30(dd，J＝9.5，7.2Hz，1H)，2.20-2.14(m，1H).H).″C NMR(d4-MeOH)152.5，151.4，147.4，140.4，130.4，130.4，129.8，115.5，112.9，77.3，62.7，59.2，49.3，48.6，37.5，35.6。HRMS(MH+)C19H24N5OS计算值370.1702。实测值370.1694。
实施例48.5(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(4-氯苯硫基甲基)吡咯烷(62)采用Mannich反应一般过程(上述)以得到乙酸盐形式的化合物62。1H NMR(d4-MeOH)8.25(s，1H)，7.84(s，1H)，7.35-7.23(m，5H)，4.54(s，2H)，4.30(m，1H)，3.74(dd，J＝11.9，7.9Hz，1H)，3.59(dd，J＝12.2，5.6Hz，1H)，3.40-3.15(m，4H)，2.89(dd，J＝13.5，9.1Hz，1H)，2.47(brs，1H)，1.98(s，3H)。13C NMR(d4-MeOH)153.0，151.8，146.1，135.7，134.0，133.2，132.2，130.7，115.7，105.5，74.6，60.4，57.3，49.2，47.7，36.1，23.0.HRMS(MH+)C18H21CIN5OS计算值390.1155。实测值390.1264。
实施例48.6(3R，4R)-1-[(6-氯-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(63)采用Mannich反应一般过程(上述)以得到乙酸盐形式的化合物63。1H NMR(D2O)δ.34(s，1H)，7.98(s，1H)，4.48(s，2H)，4.31(m，1H)，3.68(dd，J＝12.1，8.3Hz，1H)，3.53(d，J＝5.9Hz，2H)，3.45(dd，J＝12.6，5.5Hz，1H)，3.32(dd，J＝12.6，2.5Hz，1H)，3.13(dd，J＝12.0，7.4Hz，1H)，2.40(brs，1H)，1.82(s，3H)。13CNMR(d4-MeOH)149.7，148.6，143.4，137.6，124.8，104.5，71.3，60.7，59.8，54.4，48.0，47.8，23.5.HRMS(MH+)C12H16CIN4O2计算值283.0962。实测值283.0973。
实施例48.7(3R，4R)-1-1(6-叠氮-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷(64)采用Mannich反应一般过程(上述)以得到乙酸盐形式的化合物64。1HNMR(D2O)9.52(s，1H)，7.89(s，1H)，4.62(s，2H)，4.38(m，1H)，3.78(dd，J＝12.0，8.5Hz，1H)，3.60(d，J＝5.9Hz，2H)，3.55(t，J＝5.5Hz，1H)，3.42(brd，J＝11.4Hz，1H)，3.23(dd，J＝11.9，7.3Hz，1H)，2.48(brs，1H)，1.86(s，3H)。13C NMR(D2O)141.7，138.6，133.6，132.2，111.7，107.2，71.4，60.8，59.9，54.6，48.0，48.0，23.7。
实施例48.8(3R，4R)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-乙酰氧基-4-(乙酰氧基甲基)吡咯烷(65)采用Mannich反应一般过程(上述)以得到乙酸盐形式的化合物65。1H NMR(D2O)δ.25(s，1H)，7.69(s，1H)，5.05(五峰，J＝2.8Hz，1H)，4.23-4.06(m，4H)，3.40(dd，J＝10.5，8.1Hz，1H)，3.27-3.12(m，2H)，2.77(dd，J＝10.5，7.8Hz，1H)，2.63(m，1H)，2.03(s，3H)，2.00(s，3H)，1.98(s，3H)。13C NMR(D2O)172.9，172.6，153.0，151.1，145.4，132.1，115.6，108.8，76.6，65.1，59.6，55.8，48.6，45.7，23.4，21.3，21.1。HRMS(MH+)C16H22N5O4计算值348.1 672。实测值348.1669。
实施例49PNP的抑制该反应涉及将肌苷(1mM)和无机磷酸盐(50mM，pH7.4)转化成次黄嘌呤和α-D-核糖1-磷酸。用这种方法分析需要抑制剂的浓度至少为10x酶浓度。酶浓度为1.6pM。反应的进程通过由黄嘌呤氧化酶(128μg；每毫升反应混合物59毫单位)催化的次黄嘌呤氧化形成的尿酸进行偶合测定来鉴定。用浓度为0-1nM的抑制剂来确定初始解离常数。Ki在0-4分钟的时间段测定，平衡解离常数Ki*在35-45分钟的时间段测定。根据以下等式确定抑制常数(Ki或Ki*)对Ki，v＝(kcat)(A)/(Km.(1+I/Ki)+A)；对Ki*，v＝(kcat)(A)/(Km.(1+I/Ki*)+A)。
化合物(8)抑制人PNP的动力学曲线显示在图1中；抑制剂的浓度在右手边标出。
实施例50MTAP和MTAN的抑制用连续分光光度测定和非连续测定来表征本发明抑制剂以及MTAP和/或MTAN的体内抑制。在连续分光光度测定中，MTA转化成腺嘌呤是通过274nm处吸光度的减少测定的。在274nm，光谱特性的差别最大，MTA转化成腺嘌呤的毫摩尔消光系数(cm-1)是1.6。在非连续测定中，将10-20μL含有在50mM磷酸解缓冲液(pH7.5)中的50μM[2，8-3H]MTA(285cpm/pmol)、10mM KCl和酶的混合物在室温下孵育。加入1μL浓HCl或60％的高氯酸终止反应。加入腺嘌呤作为载体(1-2μL，6mM)，将5μL样品点样到薄层纤维素片上并在比例为9∶1的1M乙酸铵(pH7.55)和异丙醇中展开。展开后，腺嘌呤点通过紫外线吸收定位，将其切下并计数氚含量。为分析血液样品中MTAP的活性，将6μL含有1∶1血液0.6％Triton X-100的混合物加到上述测定混合物中并通过薄层层析分析在适当时间取得的样品。用类似的方法测定来自小鼠肝脏的MTAP的活性。在合适的时候将含有约100μg蛋白质的肝脏提取物(3μL)加到测定混合物中，然后通过薄层层析分析。
慢发作抑制和抑制常数慢发作抑制的动力学和Ki和Ki*值的测定是通过以下方法进行的将已知浓度的酶(1-5nM)加到具有高底物浓度和各种抑制剂浓度的反应混合物中。对MTA核苷酶通常采用150μM的底物浓度，对MTA磷酸化酶通常采用200μM的底物浓度。这些浓度相当于274nm的OD在0.7-1.1之间。以274nm吸光度的降低监测产物的形成。测定Ki*时采用高底物浓度。该实验中包含两个对照，一个对照无抑制剂，另一个对照没有酶。这些酶对抑制剂的Ki值是将抑制剂存在时初速度与无抑制剂时的初速度的比值与抑制剂浓度拟合计算出来的，可将已知的Km和底物浓度带入下式计算Vo′Vo=Km+[S]Km+[S]+Km[l]Kl]]>其中，Vo’是抑制剂存在时的速度Vo是不存在抑制剂时的速度[I]是抑制剂浓度同时，[S]是底物浓度而Ki*是通过与下式拟合计算出的
Vs′Vs=Km+[S]Km+[S]+Km[l]Kl*]]>其中，Vs′是抑制剂存在时达到平衡时的稳态速度，Vs是无抑制剂时对照的稳态速度。这些等式描述了竞争性抑制，其中，底物和类似于过渡态的抑制剂以相互排斥的方式与酶结合。
实施例51小鼠MTAP的体内抑制给小鼠喂食200毫克化合物57，并按时间的函数取出血液样品。将细胞溶解并在含有MTA的测定混合物中测定MTAP的残余活性。该测定方法测量腺嘌呤从[2，8-3H]MTA的释放。结果显示在图2中。
尽管已通过实施例描述了本发明，但应该知道，在不背离本发明范围的情况下可对其做出变化或修饰。此外，当存在特定特征的等价形式时，如果在说明书中特别指出，这些等价形式也包含在内。
工业应用本发明涉及PNP、PPRT、MTAP、MTAN和/或NH的抑制剂化合物。因此，预计所述化合物可用于治疗需要抑制PNP、PPRT、MTAP、MTAN和/或NH的疾病。所述疾病包括癌症、细菌感染、原生动物感染或T-细胞介导的疾病。
权利要求
1.式(I)的化合物 其中V选自CH2和NH，W选自NR1和NR2；或V选自NR1和NR2，W选自CH2和NH；X选自CH2和CHOH，为R或S-构型；Y选自氢、卤素和羟基，但当V选自NH、NR1或NR2时Y是氢；Z选自氢、卤素、羟基、SQ、OQ或Q，其中Q是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；R1是式(II)的残基 R2是式(III)的残基 A选自N、CH或CR，其中，R选自卤素、任选取代的烷基、芳烷基或芳基、OH、NH2、NHR3、NR3R4和SR5，其中，R3、R4和R5分别是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；B选自OH、NH2、NHR6、SH、氢或卤素，其中，R6是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；D选自OH、NH2、NHR7、氢、卤素或SCH3，其中，R7是任选取代的烷基、芳烷基或芳基；E选自N和CH；G选自CH2和NH，或G不存在，条件是，其中W是NR1或NR2，G是NH时，则V是CH2，条件是，其中V是NR1或NR2，G是NH时，则W是CH2；或其互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其酯，或其前药。
2.如权利要求1所述的化合物，其中，Z选自氢、卤素、羟基、SQ或OQ。
3.如权利要求1或权利要求2所述的化合物，其中，V是CH2。
4.如权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中，X是CH2。
5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中，G是CH2。
6.如权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中，Z是OH。
7.如权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中，Z是SQ。
8.如权利要求1、3、4或5中任一项所述的化合物，其中，Z是Q。
9.如权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中，W是NR1。
10.如权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中，W是NR。
11.如权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中，W选自NH、NR1或NR2，X是CH2。
12.如权利要求1、2、3、4、5、6或9中任一项所述的化合物，其中，V、X和G都是CH2，Z是OH，W是NR1。
13.如权利要求1、2、3、4、5、7或9中任一项所述的化合物，其中，V、X和G都是CH2，Z是SQ，W是NR1。
14.如权利要求1-13中任一项所述的化合物，其中，Y是氢。
15.如权利要求1-13中任一项所述的化合物，其中，Y是羟基。
16.如权利要求1-15中任一项所述的化合物，其中，B是羟基。
17.如权利要求1-15中任一项所述的化合物，其中，B是NH2。
18.如权利要求1-17中任一项所述的化合物，其中，A是CH。
19.如权利要求1-17中任一项所述的化合物，其中，A是N。
20.如权利要求1-19中任一项所述的化合物，其中，D是H。
21.如权利要求1-19中任一项所述的化合物，其中，D是NH2。
22.如权利要求1-21中任一项所述的化合物，其中，E是N。
23.如权利要求1所述的化合物，所述化合物是(3R，4R)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(8-氮杂-9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(2-苯基乙基)吡咯烷；(3S，4R)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3，4-二羟基-4-甲硫基甲基吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷；N-(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-D-核糖醇；N-(9-脱氮次黄嘌呤-9-基)甲基-1，4-双脱氧-1，4-亚氨基-D-核糖醇；(3R，4R)-3-羟基-4-羟基甲基-1-(次黄嘌呤-9-基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(甲硫基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(8-氮杂-9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(苄硫基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(9-脱氮鸟嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4S)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(4-氯苯硫基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(6-氯-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；(3R，4R)-1-[(6-叠氮-9-脱氮嘌呤-9-基)甲基]-3-羟基-4-(羟基甲基)吡咯烷；或(3R，4R)-1-[(9-脱氮腺嘌呤-9-基)甲基]-3-乙酰氧基-4-(乙酰氧基甲基)吡咯烷；或其药学上可接受的盐，或其酯，或其前药。
24一种含有药物有效量的如权利要求1-23中任一项所述化合物的药物组合物。
25.一种治疗需要抑制嘌呤磷酸核糖转移酶、嘌呤核苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷核苷酶和/或核苷水解酶的疾病或症状的方法，其特征在于，所述方法包括给予需要治疗的患者药物有效量的如权利要求1-23中任一项所述化合物。
26.如权利要求25所述的方法，其中，所述疾病或症状是癌症、细菌感染、原生动物感染或T-细胞介导的疾病。
27.如权利要求26所述的方法，其中，所述T-细胞介导的疾病是银屑病、关节炎或移植排斥。
28.如权利要求1-23中任一项所述的化合物在制造用于治疗需要抑制嘌呤磷酸核糖转移酶、嘌呤核苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷磷酸化酶、5’-甲硫基腺苷核苷酶和/或核苷水解酶的疾病或病症的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的化合物，它们是嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)、嘌呤磷酸核糖转移酶(PPRT)、5’－甲硫基腺苷磷酸化酶(MTAP)、5’－甲硫基腺苷核苷酶(MTAN)和/或核苷水解酶(NH)的抑制剂。本发明还涉及这些化合物在治疗包括癌症、细菌感染、原生动物感染、T－细胞介导的疾病在内的疾病和感染中的应用，并涉及含有这些化合物的药物组合物。
文档编号A61P37/02GK1692120SQ03824354
公开日2005年11月2日 申请日期2003年8月21日 优先权日2002年8月21日
发明者G·B·埃文斯, R·H·弗尔诺, D·H·伦兹, V·L·施拉姆, P·C·泰勒, O·V·朱布科瓦 申请人:阿尔伯爱因斯坦医科叶希瓦大学, 工业研究有限公司