专利名称：冰片脂肪酸酯衍生物及含有该衍生物的制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说是公开一类含冰片和脂肪酸的衍生物(冰片脂肪酸酯衍生物)及含有该衍生物的制剂。
背景技术：
冰片可分天然冰片和合成冰片两大类。天然冰片为脑香科植物龙脑香树脂的加工品，因资源紧缺，现多使用以樟脑、松节油等为原料的人工合成品(江苏新医学院编.《中药大辞典》上海人民出版社，1977年951.)冰片的结构如下 冰片性辛、苦，微寒。归心、脾、肺经。具有开窍醒神，清热止痛。用于热病神昏、痉厥，中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷，目赤，口疮，咽喉肿痛，耳道流脓。冰片有多种药理作用1、对中枢神经系统的作用龙脑或其异构体(异龙脑)、合成冰片250mg/kg腹腔注射，小鼠热板法，能显著延长舔足时间；200mg/kg腹腔注射显著延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间。2、抗炎作用5％龙脑或异龙脑乳剂涂耳对2％巴豆涂耳合剂所致小鼠炎症反应有抑制作用，其中异龙脑作用显著。3、抗菌作用龙脑、异龙脑和人工合成冰片对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌，草绿色链球菌、肺炎链球菌和大肠杆菌等，在试管内均有明显抗菌作用，三者的抗菌作用相似，低浓度抑菌，高浓度灭菌。4、抗生育作用5、与其他药物的相互作用.最近，将冰片用于脑靶向、吸收促进剂(陈艳明，王宁生 冰片对P-糖蛋白的影响《中药新药与临床药理》2003，14(2).-96-99；赵保胜 刘启德 冰片促血脑屏障开放与病理性开放的比较《中药新药与临床药理》2002，13(5).-287-288；王宁生，谢独，梁美容，等.CT动态扫描观察冰片对兔血脑屏障作用的影响《中药新药与临床药理》，1992，3(4)28；陈铁峰，林曙光，陈露西，等.冰片促进四甲基吡嗪的吸收《中国药理学报》，1993，4(4)42.)。
由于冰片具有较强的挥发性，给制剂工艺带来困难，同时也会在长期贮存后，药物损失严重，造成药效不能保证，可以考虑在冰片分子上连上一脂质基团，制备冰片衍生物。已见报道的冰片衍生物有冰片葡(萄)糖苷酸(HUEBNER CF，LINK KP.Note on the bornyl ester of bornyl d-glucuronide.J Biol Chem.1950Sep；186(1)393-4.)等，但未见本发明中所指出的衍生物。
发明内容
本发明的目的是提供一种冰片脂肪酸酯衍生物，它可以降低冰片的挥发性，并将其用于制剂中，实现提高药物的透皮吸收和提高药物穿透血脑屏障、黏膜的目的。
一种含冰片与脂肪酸的衍生物---冰片脂肪酸酯衍生物，其结构通式如下 在此所示的冰片包括异冰片，有天然的与合成的两大类。所说的脂肪酸为C5～C30的直链或支链脂肪酸(或R＝C4～C29)，包括饱和或不饱和脂肪酸，如己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、特戊酸、(亚)油酸、亚麻油酸、二十二碳六烯酸(DHA)等。为了制备冰片脂肪酸酯衍生物，可以通过制备脂肪酰氯后与冰片进行反应。为了提高反应速度和程度，可以在反应液中加入常规的催化剂，如吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸钾。所用的溶剂为除去水的有机溶剂，如氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、二甲苯、醚类、酯类、丙酮、烷烃类、环己烷、二氧六环。另外，冰片脂肪酸酯衍生物还可以通过将脂肪酸与冰片混合溶解于有机溶剂后，加入脱水剂和常规的催化剂，如EDCI、DCC、NHS，还可加入吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸钾。也可以通过制备酸酐，如戊酸酐，在固体酸催化剂、固体超强酸催化剂S2O82-/ZRO2作用下来与冰片进行酯化反应，制备冰片脂肪酸衍生物。所制备的冰片脂肪酸衍生物，可被用于注射剂、口服剂和外用剂中，如脂质体、乳剂、纳米粒、乳膏、滴眼剂等，以提高药物的脑靶向、透皮吸收或黏膜吸收，提高药物的生物利用度。也可利用衍生物的低挥发性作为冰片替代品而用于含有冰片的制剂中，如速效救心丸、醒脑静注射液。
图1为不同衍生物在50℃条件下样品的残留率表。
图2为阿霉素在脑组织中的浓度(ug/g)表。
图3为脑组织伊文氏蓝浓度(ug/g)表。
具体实施例方式下面结合实例对本发明做进一步详细的描述实施例1冰片月桂酸酯(BL)取冰片5g加入50mL二氯甲烷溶解，按等摩尔量加入月桂酰氯，混均后，加入0.5ml吡啶，于30℃条件下反应5小时，蒸除二氯甲烷，所得物中加入水10ml，30℃反应0.5小时，消除未反应的月桂酰氯，补加水100ml，混均后，用二氯甲烷萃取，共三次，每次30ml，合并二氯甲烷，用无水硫酸钠出去残余的水分，减压蒸除二氯甲烷，得产物。
IR(KBr压片)ν/cm-1特征峰1735.4(酯，C＝O)，1160.3(C-O)，1112.8(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z337.6[M]+。元素分析(％)实测值C 62.17，N 8.82，H 3.22；计算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。证明为目标化合物。
实施例2冰片肉豆蔻酸酯(BM)
取冰片5g加入50mL甲苯溶解，按等摩尔量加入肉豆蔻酰氯，混均后，加入0.3克二甲基吡啶(DMAP)，于60℃条件下回流反应3小时，蒸除甲苯，所得物中加入水5ml，60℃反应0.5小时，消除未反应的肉豆蔻酰氯，补加水100ml，混均后，用乙酸乙酯萃取，共三次，每次30ml，合并乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠出去残余的水分，减压蒸除乙酸乙酯，得产物。
IR(KBr压片)ν/cm-1特征峰1 735.8(酯，C＝O)，1161.1(C-O)，1113.1(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z365.6[M]+。元素分析(％)实测值C 62.17，N 8.82，H 3.22；计算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。证明为目标化合物。
实施例3冰片油酸酯(BO)取冰片5g加入50mL异丙醚溶解，按1∶1.1摩尔量加入油酸酰氯，混均后，加入1ml三乙胺，于40℃条件下回流反应7小时，蒸除异丙醚，所得物中加入水5ml，60℃反应0.5小时，消除未反应的油酸酰氯，补加水100ml，混均后，用二氯甲烷萃取，共三次，每次30ml，合并二氯甲烷萃取液，用无水硫酸钠出去残余的水分，减压蒸除二氯甲烷，得产物。
IR(KBr压片)ν/cm-1特征峰1735.6(酯，C＝O)，1160.6(C-O)，1113.4(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z419.7[M]+。证明为目标化合物。
实施例4冰片棕榈酸酯(BP)取冰片5g加入50mL二氧六环溶解，按1∶1.5摩尔量加入棕榈酸，混均后，加入1克碳酸钾和0.3克DCC，于40℃条件下回流反应10小时，蒸除二氧六环，所得物中加入水5ml，60℃反应0.5小时，消除未反应的油酸酰氯，补加水100ml，混均后，用氯仿萃取，共三次，每次30ml，合并氯仿萃取液，用无水硫酸钠出去残余的水分，减压蒸除氯仿，得产物。
IR(KBr压片)ν/cm-1特征峰1735.5(酯，C＝O)，1160.1(C-O)，1113.2(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z393.7[M]+。元素分析(％)实测值C 62.17，N 8.82，H 3.22；计算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。，证明为目标化合物。
实施例5冰片二十二碳六烯酸酯(BDHA)取冰片5g，NHS，DCC加入四氢呋喃50mL溶解，按1∶1.5摩尔量加入二十二碳六烯酸，通氮气，混均后，室温下搅拌反应8h。取出反应混合物，过滤除去沉淀，滤液减压除去溶剂，所得物中加入水25ml，混均振摇，用乙酸乙酯萃取，共三次，每次30ml，合并乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠出去残余的水分，减压蒸除乙酸乙酯，得产物。
IR(KBr压片)ν/cm-1特征峰1735.0(酯，C＝O)，1160.6(C-O)，1112.5(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z465.7[M]+。证明为目标化合物。
实施例6不同衍生物的挥发性将0.5克样品置于50℃恒温箱中，60分钟后取出样品，称重，计算残留率，结果见附图1。
注冰片己酸衍生物(BC)、冰片月桂酸衍生物(BL)、冰片肉豆蔻酸(BM)、冰片油酸(BO)、冰片二十二碳六烯酸(BDHA)由此可知，对冰片进行结构修饰后，其挥发性大大下降，脂肪酸的碳数大于10时，药物的挥发性可忽略不计。
实施例7阿霉素脑靶向脂质体的制备及脑靶向效果脂质体的制备处方组成氢化大豆卵磷脂(HSPC)0.5g，胆固醇(CH)0.1g，靶向辅料--冰片月桂酸酯(BL)0.02g，柠檬酸缓冲液(pH4.0)，阿霉素10mg，共成10mL。
将处方量的HSPC、CH、BL加入配置容器中，60℃条件下用适量乙醇溶解，并挥尽乙醇成膜，同温度下加入柠檬酸缓冲液水化，制备空白脂质体。空白脂质体经超声仪处理，通过0.22μm微孔滤膜整粒。整粒后的脂质体采用pH梯度，60℃孵化20min，制备阿霉素脂质体。其平均粒度为186nm粒度。
体内分布取昆明种小鼠，体重18～22g，分3组阿霉素水溶液、普通脂质体组、靶向脂质体组，按10mg/kg的剂量尾静脉给药，于不同时间点断头处死动物，放尽血液后，取出脑组织，用生理盐水冲洗干净，滤纸吸干，称重。经组织匀浆，沉淀蛋白后，采用荧光分光光度法测定阿霉素的浓度。结果见附图2。表明靶向脂质体组阿霉素在脑中的浓度显著提高。采用其它试验也可得到相同的结果。
实施例8脑靶向乳剂的制备及其对伊文氏蓝脑中分布的影响乳剂的制备处方组成冰片肉豆蔻酸酯(BM)0.5g、注射用大豆油0.5g、大豆卵磷脂(SPC)1.0g、甘油2.2g，共成100ml。
制备工艺1、在配制设备中，将处方量的冰片肉豆蔻酸酯(BM)溶解于0.5g注射用大豆油中混合均匀；2、将处方量的SPC及甘油(无水)与适量的注射用水混合均匀；3、将2)在搅拌的条件下加入1)中，在40℃时搅拌后得初乳，过G3漏斗抽滤，所得液体经微射流仪处理，过0.22um微孔滤膜除菌，脑靶向注射用乳剂。平均粒度212nm。
脑组织中伊文氏蓝的测定小鼠经尾静脉注入脑靶向乳剂后2小时，按2ml/kg注射2％伊文氏蓝，分别于15、30、60分钟处死动物，取出脑组织，经组织匀浆，沉淀蛋白后，采用分光光度法测定伊文氏蓝的浓度。结果见附图3。表明脑靶向乳剂能增加伊文氏蓝脑中的浓度。
实施例9促进双氯芬酸钠的透皮吸收皮肤的制备取体重180～220g的大鼠饲养1天，处死，剪去大鼠背部或腹部毛，取下脱毛处皮肤，将之冲洗干净后，剥离皮肤下脂肪组织组织，选完整皮肤用生理盐水洗干净，4℃冰箱短期保存，备用。
方法取备用皮肤，用棉花吸干表面水分，在整个大鼠皮肤表面涂上冰片油酸酯(BO)，随后将鼠皮固定在扩散池和接受池之间，角质层朝向给药室，取双氯芬酸钠溶液(1％)5ml置于给药室中，接受池中充满30％的乙醇，于32℃水浴中进行透皮吸收试验。计算透皮速率，结果表明BO能极大提高双氯芬酸钠的透皮吸收量，其透皮速率由未用BO对照组(1％AZONE)的93.2μg/cm2·h提高到183.1μg/cm2·h。
实施例10 将速效救心丸中含有的冰片用冰片脂肪酸酯衍生物代替，上述药物具有同样的效果。
实施例11 将醒脑静注射液中含有的冰片用冰片脂肪酸酯衍生物代替，醒脑静注射液具有同样的效果。可见冰片脂肪酸酯衍生物可替代冰片用于含有冰片的制剂中。
权利要求
1.冰片脂肪酸酯衍生物，其结构通式如下
2.根据权利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述冰片包括异冰片，有天然的与合成的两大类。
3.根据权利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述的脂肪酸为C5～C30的直链或支链脂肪酸或R＝C4～C29。
4.根据权利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述的脂肪酸包括饱和或不饱和脂肪酸，己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、特戊酸、(亚)油酸、亚麻油酸、二十二碳六烯酸(DHA)等。
5.一种如权利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制备方法，其特征在于可以通过制备脂肪酰氯后与冰片进行反应制得，为了提高反应速度和程度，可以在反应液中加入常规的催化剂，所用的溶剂为除去水的有机溶剂。
6.根据权利要求5所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制备方法，其特征在于所述的常规催化剂包括吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸钾。
7.根据权利要求5所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制备方法，其特征在于所述的除去水的有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、二甲苯、醚类、酯类、丙酮、烷烃类、环己烷、二氧六环。
8.一种如权利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制备方法，其特征在于可通过将脂肪酸与冰片混合溶解于有机溶剂后，加入脱水剂和常规的催化剂制得，脱水剂和常规的催化剂为EDCI、DCC、NHS，还可加入吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸钾；也可以通过制备酸酐，用戊酸酐来与冰片进行酯化反应，制备冰片脂肪酸衍生物，此时可以用固体酸催化剂、固体超强酸S2O82-/ZrO2作催化剂。
9.根据权利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于该衍生物可用于脂质体、乳剂、纳米粒、乳膏、外用口服注射，提高药物的脑靶向、透皮吸收促进剂，提高药物的生物利用度，特别是提高药物的透皮吸收和提高药物穿透血脑屏障、黏膜。
10.根据权利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于该衍生物可作为冰片替代品而用于含有冰片的制剂中。
全文摘要
本发明公开了一种含冰片和脂肪酸的衍生物及其含有该衍生物的制剂，该类衍生物是由冰片与脂肪酸经酯化反应而得到的。其结构通式如图所示。所述冰片包括异冰片，有天然的与合成的两大类，所述的脂肪酸为C
文档编号A61P29/00GK1651395SQ20041008768
公开日2005年8月10日 申请日期2004年11月29日 优先权日2004年11月29日
发明者邓意辉, 吴红兵, 王绍宁 申请人:沈阳药科大学