专利名称：小麦黄素的制备方法、制剂与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及小麦黄素的制备方法、制剂与用途。
背景技术：
肿瘤是当今世界最大的疑难病症之一，死亡人数仍有上升趋势，其正在超过心血管疾病而成为人口死亡的第一原因。目前，临床上使用的抗肿瘤药物大多对肿瘤细胞抑制的选择性不高，毒性较大。因此，研究开发高效、低毒、新颖的抗肿瘤药物仍是一项艰巨的任务，也是全球性的科研课题。近年来研究表明，中医药在肿瘤的防治和康复方面具有重要的作用。而黄酮类化合物是自然界药用植物中的主要活性成分之一，具有调节血脂、清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等广谱的生理活性，因此，开发黄酮类化合物已引起国内外学者的广泛关注。 小麦黄素(tricin)是一种从蒲葵等植物药材中提取分离纯化而获得，是一种已知的黄酮类化合物。小麦黄素的结构式为 目前国内尚无小麦黄素的抗肿瘤活性的文献及专利报道，存在分离纯化工艺粗糙，质量不可控等弊端。而且，市面上也未见关于小麦黄素的药物或药物组合物的出现。
发明内容
本发明的目的是提供植物源小麦黄素的制备方法。 本发明的另一 目的是提供含有以上植物源小麦黄素的药物或药物组合物。
本发明还提供了含有植物源小麦黄素的制剂及该成分的用途。
本发明提供了如下技术方案 本发明的植物源小麦黄素。小麦黄素是以蒲葵等药材作为起始原料提取的，纯度可达98%以上。 本发明所述植物源小麦黄素的制备方法，包括以下步骤(l)提取将自然晾干的植物药材粉碎后，用8 15倍量含水或不含水的有机试剂浸泡后提取1 3次，过滤，减压蒸馏回收溶剂，得总浸膏；(2)分离纯化将总浸膏过层析柱，以石油醚乙酸乙酯
(i : i i : io)洗脱，合并相同组分，得到小麦黄素粗组分。多步重结晶，经冷冻干燥得
到小麦黄素精品。 本发明所述植物源小麦黄素可以作为活性成分，加入药剂学上可以接受的辅料，
按照药剂学上记载的制剂的制备方法制成制剂。
本发明所述植物源小麦黄素还可以作为活性成分之一，加入药剂学上接受的辅 料，按照药剂学上记载的制剂的制备方法制成制剂。 所述的制剂包括注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、散剂、口服剂、糖衣片剂、 薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹剂、 喷雾剂、滴丸剂、崩解剂、口崩剂、微丸等。 本发明的植物源小麦黄素及其制剂可在制备抗肿瘤药物中应用。 本发明具有的有益效果是提取精制方法是一种工艺简单易行、提取率高、能规模
化生产。
具体实施例方式
下面将结合实施例进一步说明本发明的实质内容和有益效果，该实施例仅用于说
明本发明而非对本发明的限制。 实施例一植物源小麦黄素的制备 本发明所述植物源小麦黄素的制备方法，包括以下步骤(l)提取将自然晾干的 植物药材粉碎后，用8倍量70%乙醇浸泡后，回流提取3次，过滤，减压蒸馏回收溶剂，得总
浸膏；(2)分离纯化将总浸膏过ioo 200目硅胶柱层析，以石油醚乙酸乙酯(i : i i : 10)洗脱，合并相同组分，得到小麦黄素粗组分。多步重结晶，经冷冻干燥得到小麦黄素
精品。测定小麦黄素的纯度为98.3%。
实施例二植物源小麦黄素的制备 本发明所述植物源小麦黄素的制备方法，包括以下步骤(l)提取将自然晾干的 植物药材粉碎后，用10倍量70%乙醇浸泡后，索氏提取3次，过滤，减压蒸馏回收溶剂，得总
浸膏；(2)分离纯化将总浸膏过聚酰胺柱层析，以石油醚乙酸乙酯(i : i i : io)洗 脱，合并相同组分，得到小麦黄素粗组分。多步重结晶，经冷冻干燥得到小麦黄素精品。测
定小麦黄素的纯度为98.5%。 实施例三植物源小麦黄素的制备 本发明所述植物源小麦黄素的制备方法，包括以下步骤(l)提取将自然晾干的 植物药材粉碎后，用15倍量70%乙醇浸泡后，超声提取2次，过滤，减压蒸馏回收溶剂，得总
浸膏；(2)分离纯化将总浸膏过大孔树脂柱层析，以石油醚乙酸乙酯(i : i i : io) 洗脱，合并相同组分，得到小麦黄素粗组分。多步重结晶，经冷冻干燥得到小麦黄素精品。测
定小麦黄素的纯度为98.0%。 实施例四 抗肿瘤生物活性筛选试验 将对数生长的肿瘤细胞(人肝癌细胞H印G-2、人白血病HL60、宫颈癌细胞Hela、人 鼻咽癌细胞CNE-2、人乳腺癌细胞MCF-7)用0. 25%的胰蛋白酶消化，然后用含10% (体积 百分含量)小牛血清的RPMI1640培养基悬浮细胞，制成细胞悬液，并分别将各肿瘤稀释至 1. 0 X 105个/ml ，再将其接种至96孔培养板中，每孔200ul ，于37°C ， 5 % C02的培养箱内培 养24h，然后倾去各孔培养液。
将实施例1制得的植物源小麦黄素配成终浓度为1. 6，8，40ug/ml，同时设实验组 和空白对照组进行实验。将以上各组的培养板同时置于371:，5%0)2的培养箱内培养2天。 2天后向每孔加入50ul新鲜配制的lmg/ml四甲基偶氮唑蓝(MTT)溶液，并在37°〇，5% C02 的条件下继续培养4h ;小心弃上清，加入溶剂，充分溶解MTT还原产物；在酶标仪上测定各 孔在波长492nm处的光密度值(OD值)，按公式计算肿瘤细胞生长抑制率。抑制率(％ )= l-(OD实验-OD空白)/(OD对照-OD空白)X100%。植物源小麦黄素对人不同肿瘤细胞 H印G-2、HL60、Hela、CNE-2、MCF-7的抑制作用的结果如表1所示。
表1植物源小麦黄素对不同癌细胞株细胞生长的影响(文士s， n = 10)
组别剂量抑制率(％)
(ug/ml) HepG-2HL-60SW1116CNE-2MCF-7
空白对照组一0.9±0.20.8±0.11.4±0.51.2±0.11.3±0.3
小麦黄素1.69.8±1.3**10.8±1.2** 15.9±1.4**23.1±2.5*13.5士1.9**
850.8士2.0":56.5±2.5*:* 65.6±1.8**48.5±2.1**60.5±3.2**
4082.2±0.6":78.2±2.3*:* 85.3±2.1**80.5士2.4"78.4±1.8* 与空白对照组比较，林P〈0. 01 植物源小麦黄素对多种肿瘤细胞的抑制作用实验结果表明(表1)，植物源小麦黄 素对人肝癌细胞H印G-2、人白血病HL60、结肠癌细胞SW1116、人鼻咽癌细胞CNE-2、人乳腺 癌细胞MCF-7均有一定程度的抑制作用，且存在一定的量效关系。因此，植物源小麦黄素可 以用于制备肝癌、白血病、结肠癌、鼻咽癌、乳腺癌的药物。
实施例五滴丸剂的制备 取植物源小麦黄素0. 5g与10. 5g聚乙二醇-6000混合均匀，加热熔融，化料后移 至滴丸滴灌中，药液滴至6-8t:液体石蜡中，除油，制得滴丸400粒。
实施例六冻干粉针剂的制备 取降香油1. 5g，加入到13ml饱和的羟丙基P _环糊精中，搅拌溶解，滤过，滤液低 温干燥得降香油和羟丙基e-环糊精的包合物粉末。除上述降香油合羟丙基P-环糊精的 包合物粉末外，再取植物源小麦黄素0. 5g、甘露醇5. 5g、依地酸钙钠0. 9g和蒸馏水2ml，上 述组分混匀后，冷冻干燥，分装300支，即得。
实施例七冻干粉针剂的制备 取植物源小麦黄素O. 5g、葡萄糖4. 5g、硫代硫酸钠0. 9g和蒸馏水lml，上述组分混 合均匀后，冷冻干燥，分装500支，即得。
权利要求
植物源小麦黄素(Tricin)，其特征在于所述小麦黄素是以蒲葵等药材作为起始原料提取的，纯度可达98％以上。
2. —种小麦黄素的制备方法，其特征在于包括以下步骤(l)提取将自然晾干的植物 药材粉碎后，用8 15倍量含水或不含水的有机试剂浸泡后提取1 3次，过滤，减压蒸 馏回收溶剂，得总浸膏；(2)分离纯化将总浸膏过层析柱，以石油醚乙酸乙酯(1 : l i : 10)洗脱，合并相同组分，得到小麦黄素粗组分。多步重结晶，经冷冻干燥得到小麦黄素<formula>formula see original document page 2</formula>
3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中的含水或不含水的有 机试剂为石油醚，乙酸乙酯，乙醇或高浓度乙醇水溶液；提取方法为回流提取，索氏提取，超 声提取，微波提取或者微波协同萃取。
4. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中，层析为硅胶柱层析， 聚酰胺柱层析，大孔树脂柱层析。
5. —种含有小麦黄素的药物，其特征在于该药物包括一定量的小麦黄素与药学上可接 受的载体。
6. —种含有小麦黄素的药物组合物，其特征在于该药物组合物包括一定量的小麦黄素 与其他药物及药学上可接受的载体。
7. 根据权利要求5-6所述的药物或药物组合物，其特征在于该药物或药物组合物可制 成任一种药学上可接受的制剂。
8. 根据权利要求1所述小麦黄素和权利要求5-6所述的药物或药物组合物，其特征在 于该小麦黄素或药物或药物组合物可在制备抗肿瘤物中应用。
全文摘要
本发明涉及植物源小麦黄素(Tricin)的制备方法、制剂与用途。本发明小麦黄素的制备方法为用含水或不含水的有机试剂作为溶剂，对植物材料超声提取，将提取液过滤后，减压蒸馏回收溶剂，得到总浸膏，再经过层析分离，合并相同组分，纯化处理得小麦黄素精品。本发明得到的小麦黄素的纯度高，含量可达98％以上。方法简单可行，提取时间短，成本较低，得率较高，能耗低，适合工业化生产。制备得到的小麦黄素通过药剂学上的方法，可制成各种剂型。本发明提供的小麦黄素经抗肿瘤生物活性的筛选实验，证明其对抗肿瘤具有明显的疗效，可以在制备抗肿瘤药物或药物组合物中应用。
文档编号A61K31/352GK101735189SQ20091011294
公开日2010年6月16日 申请日期2009年12月11日 优先权日2009年12月11日
发明者姚宏, 李光文, 李少光, 林新华, 罗红斌, 陈艳 申请人:林新华;姚宏;陈艳