专利名称：含1，2，4-噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及有机化合物及医药应用领域，尤其涉及含1，2，4_噁二唑杂环a， 3-不饱和酮类化合物及其抗肿瘤活性。
背景技术：
恶性肿瘤是当今世界上威胁人类健康的主要疾病之一，随着肿瘤生物学的发展， 为抗肿瘤药物的研究开发提供了新的分子生物学基础。大多数肿瘤细胞高表达谷胱甘肽 转移酶(glutathione S-transferases，GSTs)，GSTs是广泛存在于真核生物中的多功能 蛋白超家族，通常被分为细胞溶质家族、线粒体家族和膜结合微粒体家族，参见HayeS， J. D. ；Flanagan, J. U. ；Jowsey, I. R. Glutathione transferases. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2005，45，51-88。哺乳动物细胞溶质GSTs可分为七个亚型:Alpha( a )、Mu( y )、 Pi ()、Sigma ( o )、Omega ( )、Theta ( 9 )和Zeta (I)。在许多耐药的肿瘤细胞中发现三 种高表达的GSTs( a、i^n)，其中，谷胱甘肽转移酶Pi (GST Pl_l)是与肿瘤最密切相关的 同工酶，在人结肠癌、胃癌、胰腺癌、子宫颈癌、乳腺癌以及淋巴瘤和黑素瘤中都发现了高表 达的 GST P1-1。作为II相代谢酶，GST P1-1的基本功能是保护细胞大分子免受活性亲电底物的 进攻，尤其是催化还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)与多种内源性和外源性亲电化合 物(包括多种化疗药物)结合形成复合物，这些复合物活性小、水溶性大、易于被III相 代谢酶代谢失活，参见Shen, H. ；Kauvar, L. ；Tew, K. D. Importance of glutathione and associated enzymes in drugresponse. Oncol. Res. 1997,9, 295-302。当 GSTP1-1 表达增 加或活性增强时，抗肿瘤药物的排泄也随之增加，从而诱发耐药性的发生，cAMP-依赖的蛋 白激酶(PKA)和蛋白激酶C(PKC)分别以GSH-依赖和不依赖的方式磷酸化GST P1-1，增强 其代谢活性，加剧GST P1-1诱导的耐药性。活性氧在细胞增值、凋亡中发挥着重要的调节作用。GST P1-1通过消耗细胞内活 性氧，使细胞免于活性氧诱导的细胞凋亡，参见a) Zhou, L. Jing, Y. ；Styblo, M. ；Chen, Z. ；ffaxman, S.Glutathione-S-transferase pi inhibits As203_induced apoptosis in lymphoma cells :involvement of hydrogen peroxide catabolism. Blood2005,105, 1198-1203。b)Yin, Z. ； Ivanov, V.N. ；Habelhah, H. ；Tew, K. ；Ronai, Z. Glutathione S-transferase p elicits protection against H202-induced cell death via coordinated regulation of stress kinases. Cancer Res. 2000,60,4053-4057。近期石if 究表明，GST Pl-1是内源性的c-Jun氮末端激酶(JNK，c-junN-terminal kinase)抑制剂， 通过蛋白-蛋白相互作用与JNK结合，使细胞免于应激性凋亡。JNK是有丝分裂原活化蛋 白激酶(MAPK，mitogen-activated protein kinase)家族的一员，其在细胞的存活和凋亡 通路中起着关键作用，参见a)Wang，T. ；Arifoglu, P. ；Ronai, Z. ；Tew, K. D. Glutathione S-transferase Pl-1(GSTP 1-1)inhibits c-Jun N-terminal kinase(JNK 1)signaling through interaction with the C terminus. J. Biol. Chem. 2001,276, 20999-21003。b)Zhao, G. ；Wang, X. Advance in antitumor agents targeting glutathione S-transferase. Curr. Med. Chem. 2006，13，1461-1471。GST Pl-I 一方面作为II相代谢酶，另一方面作为细胞信号传导通路的内源性调 节因子，与凋亡通路中重要的激酶及相关因子相互作用抑制其激活，从而阻断细胞凋亡通 路。依他尼酸(Ethacrynic acid，简写EA，式I)是被发现的第一个GSTs抑制剂，用EA 处理细胞能够引起细胞溶质及线粒体内的GSH完全耗竭、诱导活性氧自由基 产生和线粒体的融合、促进与MAPK通路激活相关的肿瘤细胞凋亡(参见BoWes，T.J.； Gupta, R. S. Induction of mitochondrial fusion by cysteine-alkylators ethacrynic acid and N-ethylmaleimide. J. Cell Physiol. 2005，202，796-804。但 EA 的利尿、耳 毒性等毒副作用，限制了其临床应用。以依他尼酸为先导化合物，保留化合物中α， β-不饱和酮基团，对其结构进行修饰，以生物电子等排体1，2，4_噁二唑环替代化合物 结构中的羧酸基，所得化合物对GST Pl-I抑制活性以及对人急性早幼粒白血病细胞株 (HL-60)生长抑制作用均有不同程度的提高，参见:a)Yang, X. ；Liu, G. ；Li, H. ；Zhang, Y. ；Song, D. ；Li, C. ；Wang, R. ；Liu, B. ；Liang, W. ；Jing, Y. ；Zhao, G. ；Novel oxadiazole analogues derived from ethacrynic acid :design,synthesis,and structure-activity relationships in inhibiting the activity of glutathione S-transferase Pl-Iand cancer cell proliferation. J. Med. Chem. 2010，53，1015-1022 ；b) CN101108832 中国专利 200710015199.5 “五元杂环化合物、制备方法及应用”。通过进一步的结构改造，可获得新 的抗肿瘤候选药物。
发明内容
本发明的任务在于提供一种含1，2，4_噁二唑杂环的α，β -不饱和酮类化合物； 本发明的另一任务在于提供该化合物的制备及应用。发明综述依他尼酸(EA)为α，β -不饱和酮类化合物，是有效的GST Pl_l抑制剂，在高浓度 具有抑制肿瘤细胞生长活性，参见Aizawa，S. ；0okawa,K. ；Kudo, Τ. ；Asano, J. ；Hayakari, Μ. ；Tsuchida, S.Characterization of cell death induced by ethacrynic acid in a human colon cancer cell line DLD-Iand suppression by N-acetyl-L-cysteine. Cancer Sci. 2003，94，886-893.。以EA为先导物，对其结构进行修饰，保留结构中α，β -不饱和酮 基团，设计合成的五元杂环类化合物，对HL-60细胞的生长抑制作用有所提高(参见本申请 人在先中国专利CN101108832“五元杂环化合物、制备方法及应用”)。为进一步提高化合物 的抗肿瘤活性，本发明设计合成了结构不同于现有技术的含1，2，4_噁二唑杂环α，β-不 饱和酮类化合物(式5)，其创新点是在噁二唑杂环上引入不同取代基，活性实验结果表明， 本发明的大部分化合物对HL-60细胞的生长抑制作用又提高了 10倍以上。
发明详述一、含1，2，4_噁二唑α，β -不饱和酮类化合物本发明的含1，2，4_噁二唑α，β -不饱和酮类化合物，具有通式5的结构 其中，R1为氢、甲基或氯；R2为甲基、氯或溴；R3为甲基或乙基；R4为对-三氟甲基、 对-硝基或邻-甲基；R5为氢或甲基。其中，优选的化合物是下列之一5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_(4_三氟甲基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑(5a)、5-[3_氯-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3-(4_三氟甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5b)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]_3-(2_甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5d)、 5- [2，3- 二甲基-4- (2-亚甲基氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_ (2_甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5e)、5-[2，3_ 二氯-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_(2-甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5f)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5g)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5i)或5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5j)。上述优选的8个化合物名称后的括号中为其对应的代号，为了叙述方便，所述括 号中的代号在本说明书以下内容中将被直接使用。上述优选化合物中，5f、5j是R1及R2均为氯，R3为乙基，R4为2_甲基或4_硝基， R5为氢的化合物。上述优选化合物中，5a、5d、5e、5g、5i是R1及R2均为甲基，R3为甲基或乙基，R4为 4-三氟甲基，2-甲基或4-硝基，R5为氢的化合物。上述优选化合物中，5b是R1为氢，R2为氯，R3为乙基，R4为4_三氟甲基，R5为氢的 化合物。二、合成路线上述通式5的含1，2，4-噁二唑α，β -不饱和酮类化合物，合成路线如下 上式中，试剂与反应条件i.盐酸羟胺，无水碳酸钾，甲醇；ii. SOCl2,甲苯， 50-60°C, 5. 5h ；iii.吡啶，-2 0°C ；rt, Ih ；90°C，2. 5h。三、制备方法本发明通式5的含1，2，4-噁二唑α，β -不饱和酮类化合物的制备方法，步骤如 下1)取代胺肟(2)的制备将盐酸羟胺加入到无水甲醇中，每一毫摩尔的盐酸羟胺加0. SmL的无水甲醇，再 加入无水碳酸钾，室温反应至无气泡生成时，加入取代苯甲腈(1)。盐酸羟胺、无水碳酸钾、 取代苯甲腈的摩尔比为5 5 1。回流反应4-7h，趁热过滤，滤饼用无水甲醇洗涤，合并 洗液和滤液，减压蒸除溶剂，柱层析分离得取代胺肟(2)，洗脱体系为石油醚/丙酮3 1体 积比。2)2-[2，3_ 二取代-4-(2_亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的制备将2-[2，3_ 二取代-4-(2_亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)加入到无水 甲苯中，每一毫摩尔的2-[2，3_二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)用 5mL无水甲苯溶解，向反应器中加入二氯亚砜，2-[2，3- 二取代-4- (2-亚甲基-1-氧代-烷 基)苯氧基]羧酸(3)与氯化亚砜的摩尔比为1 5，室温搅拌Ih后升温至50-60°C，反应 5. 5h，除去过量的二氯亚砜，冷却，得中间体化合物2-[2，3_ 二取代-4-(2-亚甲基-1-氧 代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液，直接用于下一步反应。3)通式5的化合物5-[2，3_ 二取代-4-(2_亚甲基-1-氧-烷基)苯氧亚烷 基]-3-取代-1，2，4-噁二唑的制备将步骤1)制得的取代胺肟溶于吡啶中，将反应器置于冰浴中，在此条件下，将步 骤2)制得的2-[2，3_ 二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯⑷的甲苯溶 液缓慢滴于胺肟的吡啶溶液中，2-[2，3- 二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基] 酰氯(4)与取代胺肟的摩尔比为1 2，滴毕室温搅拌Ih后，缓慢升温至90°C，反应2. 5h， 冷却，减压蒸除溶剂，柱层析纯化，洗脱体系为石油醚/丙酮10 1体积比。优选的，步骤1)中所述的取代苯甲腈为4-三氟甲基苯甲腈、2-甲基苯甲腈或 4-硝基苯甲腈。优选的，步骤2)中2-[2，3_ 二取代-4-(2_亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧 酸(3)为2-[2，3_ 二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]丙酸，结构式如下 优选的，步骤3)中所述的向反应器中滴加2-[2，3_ 二取代-4-(2_亚甲基-1-氧 代-烷基)苯氧基]酰氯⑷的甲苯溶液时的温度为_2 0°C。四、应用本发明的含1，2，4_噁二唑α，β -不饱和酮类化合物对人急性早幼粒白血病细胞 株(HL-60)生长抑制活性显著提高，用于制备抗白血病药物。与现有技术相比本发明的优良效果本发明设计合成了结构不同的含1，2，4_噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合 物，其创新点是在噁二唑杂环上引入不同取代基，活性实验结果表明，本发明的含1，2，
4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物对HL-60细胞的生长抑制活性显著增强，本发明 的大部分化合物对HL-60细胞的生长抑制作用又提高了 10倍以上，对HL-60细胞的半 数生长抑制浓度IC5tl彡2.0μΜ(化合物5c，5h，5k除外)。其中，化合物5_[2，3_ 二甲 基-4- (2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3- (4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5a)、
5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3- (4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二 唑(5b)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1， 2，4_噁二唑(5d)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3-(2_甲 基苯基)-1，2，4_噁二唑(5e)、5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲 基]-3-(2-甲基苯基)-l，2，4-噁二唑(5f)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙 基)苯氧亚甲基]-3_(4-硝基苯基)-1，2，4_噁二唑(5g)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚 甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4_噁二唑(5i)、5-[2，3-二 氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5j)对 HL-60细胞的半数生长抑制浓度(IC5tl)分别为1. 5μΜ、2. 0μΜ、2. 0μΜ、2. 0μΜ、1. 6μΜ、 1.5 μ Μ、1.7 μ M和1. 3 μ Μ，半数抑制浓度≤2.0 μ Μ，对HL-60细胞生长抑制活性提高了 10 倍以上。
具体实施例方式下面结合实施例进一步描述本发明，以利更深入理解本发明及其优点和效果，但 所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。实施例1.1)取代苯甲酰胺肟化合物(2)的制备将盐酸羟胺3. 48g (50mmol)，无水碳酸钾6. 90g (50mmol)置于IOOmL圆底烧瓶中， 加入无水甲醇40mL，室温反应至无气泡生成时，加入对取代苯甲腈(5c) 1.71g (IOmmol)。缓 慢升温至65°C，反应4-7h，趁热过滤，滤饼用无水甲醇洗涤，合并洗液和滤液，旋蒸除去溶 剂，干燥，柱层析分离即得中间体取代苯甲酰胺肟，洗脱系统为石油醚/丙酮3 1体积比。取代苯甲腈分别选用4-三氟甲基苯甲腈、2-甲基苯甲腈或4-硝基苯甲腈，分别得 到以下取代苯甲酰胺肟化合物(2)
2a :4_三氟甲基苯甲酰胺肟，白色固体，收率86. 0 %，mp 94. 7 95. 3 °C。 1H-WR(DMSO-Cl6) δ :9. 92(s，lH，= NOH)，7. 89 (d，2H，J = 7. 80Hz, Ar_H)，7. 74 (d，2H，J =
8.40Hz, Ar-H)，5. 98 (s, 2H, NH2).2b :2-甲基苯甲酰胺肟，白色固体，收率 86%，mp :127 130°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ 9. 30 (s, 1Η, = NOH) ,7. 27 (m, 2Η, Ar-H)，7· 19 (m，2Η，Ar-H)，5· 71 (s，2Η，NH2)，2· 35 (s，3Η， CH3)。2c 4-硝基苯甲酰胺肟，黄色固体，收率52. 3 %, mp 116 118 °C。 1H-WR(DMSO-Cl6) δ :10· 13(s, 1H, = NOH), 8. 23(d，2H，J = 9. OOHz, Ar-H), 7. 94(d，2H，J =
9.OOHz，Ar-H)，6· 07 (s，2H，NH2)。2)2-[2，3_ 二取代-4_(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的制备将2_[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)2mmol置 于IOOmL的圆底烧瓶中，加入无水甲苯10mL，氯化亚砜0. 74mL (IOmmol)，室温搅拌Ih后升 温至50-60°C，反应5. 5h，用吸收装置除去过量的二氯亚砜，冷却，得中间体2-[2，3-二取 代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液，直接用于下一步反应。2-[2，3_ 二取代-4-(2_亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)分别选用 [2，3_ 二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酸；[2，3_ 二甲基-4-(2-亚甲 基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸；2-[2，3_ 二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基] 丙酸；[3-氯-4- (2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酸；[3-氯-4- (2-亚甲基-1-氧-丁 基)苯氧基]乙酸；[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸，分别得到以 下化合物4 4a [2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酰氯；4b [2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酰氯；4c :2-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]丙酰氯；4d [3-氯-4- (2-亚甲基氧-丙基)苯氧基]乙酰氯；4e [3-氯_4_ (2-亚甲基氧-丁基)苯氧基]乙酰氯；4f [2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酰氯。3)目标化合物5-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧-烷基)苯氧亚烷基]-3-取 代-1，2，4-噁二唑(5)的制备将步骤1)的产物取代苯甲酰胺肟⑵(4mmol)置于50mL圆底烧瓶中，加入吡啶 4mL溶解，将反应器置于冰浴中，此温度下将步骤2)的产物2-[2，3_ 二取代-4-(2-亚甲 基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(2mmol)的甲苯溶液缓慢滴入反应器中，滴毕，室温搅拌 Ih后，缓慢升温至90°C，反应2. 5h，冷却，减压蒸除溶剂，用柱层析纯化(石油醚丙酮= 10 1体积比)，得目标产物(5)。取代苯甲酰胺肟2a、2b、2c与2-[2，3_ 二取代-4-(2_亚甲基-1-氧代-烷基)苯 氧基]酰氯4a、4b、4C、4d、4e、4f的不同组合，分别得到以下化合物5 5a :5_[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_ (4_三氟甲基 苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率 67. 4%，mp:88 91°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 8. 25 (d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 97 (d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 08 (d, J = 9. OOHz，1H, Ar-H)，7. 03 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H)，5. 95 (s, 1H, = CH)，5. 48 (s, 1H, = CH)，5. 68 (s,2H, OCH2)，3. 38 (q, 2H, J = 7. 20Hz, CH3CH2) ,2. 21 (s,3H, Ar-CH3)，2. 13 (s,3H, Ar-CH3)，
1.06 (t, J = 7. 20Hz，3H，CH3). IR(KBr, cnT1) υ CH :2974· 20,2925. 48 ； uc = 0 1643. 46 ； υ c =c :1623. 87，1591. 52，1579. 01 ； δ CH :1329. 78，u c_。 1268. 26，y = CH2 :1115. 14，1068. 24， 852. 26,759. 60. HRMS (ESI)m/z fOrC23H22F3N2O3[M+H]+ :calculated 431. 1577found 431. 1592.5b :5-[3_氯-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_(4_三氟甲基苯基)_1， 2，4_ 噁二唑，白色固体，收率 36. 6%，mp :56 58°C。1H-WR(CDCl3-Cl3) δ (ppm) 8. 24(d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 77 (d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 28 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H)， 7. 10 (d, J = 2. 40Hz, lH，Ar_H)，6· 97(dd, J1 = 8. 40Hz, J2 = 2. 40Hz, lH，Ar_H)，5· 93 (s, 1Η, =CH), 5. 60 (s，1Η, = CH), 5. 40 (s，2Η，OCH2)，2· 47(q，2H，J = 7. 20Hz, CH3CH2)，1. 14 (t，J = 7. 20Ηζ，3Η，CH3). IR(KBr, cnT1) υ = CH :3090· 22 ； υ CH :2975· 40,2940. 18,2878. 45 ; u c = 0 : 1650. 76 ； uc = c :1599. 99 ； δ CH :1323. 28，υ c_0 :1228. 39，γ =CH2 :1136. 84，1064. 43,850. 85， 716. 77. HRMS (ESI)m/z forC21H17ClF3N203[M+H]+:calculated 437.0874 found 437. 0892.5c:5-[2，3-二甲基-4_(2_亚甲基氧-丙基)苯氧亚乙基]_3_(4_三 氟甲基苯基)-1，2，4_噁二唑，收率15.3%，低温下为白色固体，室温下无色油状液体。 1H-WR(CDCl3-Cl3) δ (ppm) 8. 21 (d, J = 7. 80Hz,2H, Ar-H)，7. 75 (d, J = 7. 80Hz,2H, Ar-H)， 7. 01 (d，J = 8. 40Hz, lH，Ar_H)，6· 75 (d, J = 8. 40Hz, lH，Ar_H)，5· 91 (s, 1Η, = CH), 5. 66 (q, J = 6. 60Hz, 1H，CH)，5· 54 (s，1Η, = CH), 2. 25 (s, 3Η, Ar-CH3), 2. 18 (d, J = 7. 20Hz，3H，CH3)，
2.02(s,3H, Ar-CH3), 1. 9 l(s,3H, CH3). HRMS (ESI) m/z for C23H22F3N2O3 [M+H]+: calculated 431. 1593 found431. 1577.5d :5-[2，3_ 二甲基-4_(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]_3_(2-甲基苯 基)-l，2，4-噁二唑，白色固体，收率 48. 7%，mp :75 76°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 7. 93 (d, J = 7. 80Hz, 1H, Ar-H)，7. 49 (t, J1 = 7. 20Hz, J2 = 7. 80Hz, 1H, Ar-H)，7. 40 (m, 2H, Ar-H), 7. 11 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H), 7. 04 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H), 6. 03 (s, 1H, = CH)， 5. 47 (s，1H, = CH)，5. 66 (s, 2H, OCH2)，2. 55 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 20 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 12 (s, 3H, Ar-CH3), 1. 95(s,3H, CH3). IR (KBr, cnT1) υ CH 2976. 18, 2958. 90, 2924. 36, 2866. 66 ； uc = O ； 1645. 79 ； Uc = c :1627. 10，1603. 54，1590. 13，1577. 87 ； δ CH :1484· 66，1451. 87，1353. 40 ； υ c_。:1274. 73，1263. 90 ； γ = CH2 :1119. 65，1097. 87,937. 07,794. 75,784. 05,743. 95. HRMS (ESI)m/z for C22H23N2O3[M+H] + calculated 363.1703 found 363. 1719.5e :5-[2，3_ 二甲基-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3_(2_甲基苯 基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率 74. 2%，mp :54 57°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 7. 93 (d, J = 7. 20Hz, 1H, Ar-H)，7. 49 (t, J1 = 7. 20Hz, J2 = 7. 80Hz, 1H, Ar-H)，7. 41 (m, 2H, Ar-H), 7. 09 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H), 7. 04 (d, J = 7. 80Hz, 1H, Ar-H), 5. 95 (s, 1H, = CH)， 5. 48 (s，1H, = CH)，5. 66 (s, 2H, OCH2)，2. 55 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 38 (q, J = 7. 20Hz,2H, CH2)， 2. 20 (s，3H, Ar-CH3)，2. 13 (s, 3H, Ar-CH3)，1. 06 (t, J = 7. 20Hz,3H, CH3) · IR(KBr, cnT1) υ =CH :3100. 96 ； uCH ；2960. 08，2932. 81，2876. 82 ； uc = 0 :1647. 89 ； uc = c :1623. 28，1603. 13， 1578. 07 ； δ CH :1484. 62，1452. 39，1353. 38 ； υ c_0 :1274. 65，1264. 32 ； y = CH2 :1118. 71， 1095. 89,937. 77,892. 62,795. 46,783. 54,743. 83. HRMS (ESI)m/z for C23H25N2O3 [M+H] + calculated 377.1860 found 377.1876.
5f 5- [2，3- 二氯-4- (2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3- (2_甲基苯基)_1， 2，4_ 噁二唑，白色固体，收率 62. 5%，mp :68 70°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 7. 92 (d, J = 6. 60Hz，1H，Ar-H)，7. 50 (m，1H，Ar-H)，7. 42 (m，4H，Ar-H)，6. 09 (s，1H，= CH)，5. 59 (s， 1H, = CH)，5. 85(s，2H，OCH2)，2. 54(s，3H，Ar-CH3), 2. 38 (q, J = 7. 80Hz，2H，CH2)，1. 08 (t, J = 7. 80Hz，3H，CH3). IR(KBr, cnT1) υ =CH :3079· 69 ； υ CH :2971· 50,2935. 01,2876. 77 ； υ c =ο :1667. 21 ； uc = c;1618. 99,1583. 24，1559. 11 ； δ CH : 1467. 06，1383. 55,1346. 61 ； υ c_0 1286. 88，1263. 39 ； y = CH2 1045. 23，1028. 22,909. 59,809. 55,796. 41,743. 99. HRMS(ESI) m/z for C21H19Cl2N2O3 [M+H]+calculated 417. 0767found 417. 0789.5g :5-[2，3_ 二甲基_4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3_(4_硝基苯 基)-l，2，4-噁二唑，白色固体，收率 14.8%，mp 162 164°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 8. 30 (d, 4H, Ar-H)，7. 06 (d, 2H, Ar-H)，6. 03 (s, 1H, = CH)，5. 47 (s, 1H, = CH)，5. 69 (s, 2H, OCH2)，2. 25(s，3H，Ar-CH3), 2. 21 (s，3H，Ar-CH3), 2. 14(s，3H，CH3). IR (KBr, cnT1) υ = CH 3100.68 ； υ CH 2924. 33，2853. 38 ； uc = o:1640. 56 ； υ c = c 1612. 80,1592. 40,1580. 81, 1531. 39，1522. 66 ； δ CH :1477· 38，1451. 41,1419. 13 ； υ Ν02 :1350· 86 ； υ c_0 :1265· 01 ； γ =CH2 :1125. 03，1097. 64，1013. 51,863. 32,853. 49,798. 93,721. 88. HRMS (ESI) m/z for C21H2tlN3O5[Μ+Η]+calculated 394.1397 found 394. 1412.5h :5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]_3_ (4_硝基苯基)_1，2， 4-噁二唑，黄色固体，收率 31.7%，mp 101 1020C0 1H-WR(CDCl3-Cl3) δ (ppm) 8. 37 (d, J = 9. OOHz，2H，Ar-H), 8. 31 (d, J = 9. OOHz，2H，Ar-H), 7. 29 (d, J = 8. 40Hz，lH，Ar-H),
7.10 (d, J = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 6. 98 (dd, J1 = 8. 40Hz, J2 = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 5. 99 (s, 1H, = CH) ,5. 59 (s, 1H, = CH)，5. 41 (s，2H，OCH2)，2. 04 (s，3H，CH3). IR (KBr, cnT1) υ = CH 3102. 53 ； υ CH :2981. 86,2917. 80,2863. 77 ; u c = 0 :1664. 95 ； υ c = c :1597. 69，1532. 74， 1562. 58, 1520. 77, 1522. 66 ； δ CH :1489. 25, 1447. 60, 1419. 81 ； υ N02 :1336. 60 ； υ c_0 1290. 49 ； y = CH2 :1106. 91，1071. 79，1056. 98,866. 31,854. 08,801. 45,724. 17. HRMS(ESI) m/z for C19H15ClN3O5[M+H] + :calculated400. 0695 found 400. 0713.5i :5-[2，3_ 二甲基_4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3_(4_硝基苯 基)-l，2，4-噁二唑，白色固体，收率 39. 6%，mp :117 118°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm)
8.43(d, J = 8. 40Hz，2H, Ar-H)，8. 30 (d，J = 8. 40Hz，2H, Ar-H)，7. 10 (d，J = 8. 40Hz，1H, Ar-H)，7. 03 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H)，5. 95 (s, 1H, = CH)，5. 48 (s, 1H, = CH)，5. 70 (s, 2H, OCH2)，2. 38 (q, J = 7. 80Hz,2H, CH2)，2. 22 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 13 (s, 3H, Ar-CH3)，1. 06 (t, J =7. 80Hz，3H，CH3). IR (KBr, cnT1) υ =CH :3103· 43 ； υ CH :2967· 47,2926. 60,2875. 14 ； uc = ο :1657. 67 ； Uc = c :1611. 34，1584. 88，1534. 11，1520. 87 ； δ CH :1483. 43，1446. 98，1415. 69 ； υΝ02 :1348. 84,1336. 62 ； υ c_0 1261. 58 ； γ = CH2 1126. 20, 1110. 62, 1090. 73,869. 06, 853. 46,798. 54,721. 88. HRMS (ESI)m/z fOrC22H22N3O5[M+H]+ :calculated 408.0554 found 408. 1571.5j :5-[2，3_二氯-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑，白色固体，收率 16. 9%，mp 151 152°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 8. 43 (d, J =8. 40Hz，2H，Ar-H)，8. 29(d, J = 8. 40Hz, 2H, Ar-H), 7. 42 (m, 2H, Ar-H), 6. 09 (s, 1H, = CH)， 5. 59 (s，1H, = CH)，5. 88 (s, 2H, OCH2)，2. 38 (q, J = 7. 20Hz,2H, CH2)，1. 08 (t, J = 7. 20Hz,3H, CH3). IR(KBr, cnT1) υ = CH 3100. 52 ； υ CH :2967· 86,2937. 94 ； υ c = 0 :1660· 22 ； υ c = c :1610. 70，1587. 06，1534. 70，1520. 01 ； δ CH 1471. 45，1445. 27，1415. 36 ； υ N02 :1343. 94 ； uc_0 :1302. 62，1290. 06 ； y = CH2 :1077. 44，1008. 46,853. 41,722. 86. HRMS (ESI)m/z for C20H16Cl2N3O5[M+H]+ :calculated448. 0462found 448. 0483.5k:5-[3-甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2,4-噁二唑，淡黄色固体，收率 21. 1%，mp :110 112°C。1H-WR(CDCl3-Cl3) δ 8. 36 (d, J = 9. OOHz，2H, Ar-H)，8. 30 (d，J = 9. OOHz，2H, Ar-H)，7. 29 (d，J = 9. OOHz，1H, Ar-H)， 6. 90 (d, J = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 6. 83 (m, J1 = 9. OOHz，J2 = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 5. 93 (s, 1H, = CH)，5. 55 (s，1H, = CH)，5. 41 (s, 2H, OCH2)，2. 34 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 04 (s, 3H, CH3C). IR (KBr, cnT1) υ = CH 3104. 79 ； υ CH :2929· 38,2856. 64 ； uc = 0 1631. 97 ； uc = c 1608. 22， 1596. 00，1568. 80，1529. 34，1521. 64，1516. 31 ； δ CH :1445. 92，1414. 32 ； υ N02 :1336. 16 ； uc_0 :1245. 79 ； y = CH2 :1130. 89，1070. 15,864. 78,853. 13,724. 55. HRMS (ESI) m/ζ for C20H18N3O5[M+H]+calculated 380.1241 found 380. 1258.实施例2.化合物GST Pl-I抑制活性测试及对HL-60细胞的生长抑制测定GST Pl-I抑制活性测定方法参见CN1706789 “ α，β -不饱和酮类化合物及其制 备方法及其抑制GST π活性” 200510043573. 3，说明书第11页实施例5。HL-60细胞生长抑制活性测定方法参见CN101108832 “五元杂环化合物、制备方 法及应用”，200710015199. 5，说明书第3页。人急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)表1.化合物抑制GST Pl-I活性及抑制HL-60细胞生长活性测定数据 实验结果显示，本发明的1，2，4_噁二唑α，β -不饱和酮类化合物大部分对HL_60 细胞的半数生长抑制浓度< 2. 0 μ M，活性进一步提高。其中，EA 5k依次代表化合物如 下EA [2, 3- 二氯_4_ (2-亚甲基氧-丁基)苯氧基]乙酸；5a :5_[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_ (4_三氟甲基 苯基)-1，2，4_噁二唑；5b :5-[3-氯-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_(4_三氟甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑；5c :5-[2，3-二甲基-4_(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚乙基]_3_(4_三氟甲基 苯基)-1，2，4_噁二唑；5d :5-[2，3-二甲基-4_(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3_(2_甲基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5e :5-[2，3-二甲基-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2_甲基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5f :5-[2，3-二氯-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2_甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑；5g :5-[2，3_ 二甲基_4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3_(4_硝基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5h :5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]_3_ (4_硝基苯基)_1，2， 4-噁二唑；5i :5-[2，3-二甲基_4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4_硝基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5j :5-[2，3-二氯-4_(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑；5k 5-[3-甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑。
权利要求
具有通式5结构的化合物，其中，R1为氢、甲基或氯；R2为甲基、氯或溴；R3为甲基或乙基；R4为4 三氟甲基、4 硝基或2 甲基；R5为氢或甲基。FSA00000191714200011.tif
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，是下列之一5-[2，3_二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1， 2，4-噁二唑(5a)、5-[3-氯-4- (2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3- (4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁 二唑(5b)、5-[2，3- 二甲基-4- (2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3- (2-甲基苯基)_1，2， 4-噁二唑(5d)、5-[2，3_ 二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2， 4-噁二唑(5e)、5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁 二唑(5f)、5-[2，3- 二甲基-4- (2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3- (4-硝基苯基)-1，2， 4-噁二唑(5g)、5-[2，3- 二甲基-4- (2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3- (4-硝基苯基)-1，2， 4-噁二唑(5i)或5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁 二唑(5j)。
3.权利要求1或2所述的化合物在制备抗白血病药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及含1，2，4-噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合物，结构如通式5，其中，R1为氢、甲基或氯；R2为甲基、氯或溴；R3为甲基或乙基；R4为对-三氟甲基，邻-甲基或对-硝基；R5为氢或甲基。本发明还提供该化合物的制备方法及应用。本发明化合物对HL-60细胞的半数生长抑制浓度≤2.0μM，活性显著提高，可用于制备抗白血病药物。
文档编号A61K31/4245GK101891697SQ20101021538
公开日2010年11月24日 申请日期2010年7月2日 优先权日2010年7月2日
发明者刘古月, 张林娜, 李婷, 李红彩, 杨新美, 赵桂森 申请人:山东大学