专利名称：一种Aβ短肽聚合抑制剂及其制备与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，具体涉及ー种A β短肽聚合抑制剂及其制备与应用。
背景技术：
阿尔茨海默症(Alzheimer’ s Disease, AD)又称老年性痴呆,是一种患病率逐年升高的神经退行性疾病。目前全球AD患者约为1700-2500万，在我国有约645万病人。由于AD病人显著的自理能力的降低，给患者家庭、社会造成了很大的负担及压力。对于人口老龄化日益加剧的当今世界，探索预防和治疗AD的新方法具有重大意义。近年来，分子生物学研究掲示了数个与AD相关的基因和蛋白，包括β淀粉样蛋白前体蛋白(APP蛋白)，Tau蛋白，载脂蛋白Ε4(ΑροΕ4)，早老蛋白(Presenilins，PSl和PS2)等[I]。对于天然突变体的研究以及基因敲除研究已经确认了这些基因与AD的相关性，但 是这些基因产物之间的相互作用关系尚不十分明确。不可否认的是，β淀粉样蛋白的聚合是诱发AD的中心步骤[2]。在体内，APP蛋白在被β-，Y-分泌酶剪切后，主要产物为含有40或42个氨基酸残基的Aβ短肽[3]，这些ム0短肽大部分被分泌到细胞外，聚合形成β淀粉样沉淀，其中Ah_42形成沉淀的速度最快。在Αβ短肽聚合的过程中，形成一系列的聚合产物，包括ニ聚体、三聚体、四聚体、可溶性低聚体、纤维前体、成熟淀粉样纤维等等[4]。这些聚合产物都被证明有不同程度的神经毒性，而近年来越来越多的实验提示可溶性低聚体由于其可扩散性和“种子”特性，可能具有最強的神经毒性[5，6]NMR和X射线晶体结构研究发现β淀粉样蛋白沉淀的纤维状结构是基于氨基酸侧链残基堆积(stacking)形成的交叉β片层结构[7，8]。基于这ー发现，科学家们一直在寻找可以扰乱交叉β片层结构的方法。在体外实验中，小分子抑制剂RS-0406被证明能够有效的抑制Αβ的聚合，但是它在水溶液中的低溶解度有可能限制其在体内的应用[9]。对于五肽和六肽库的筛选也发现了ー些具有破坏β片层特性的小肽，如iAi35[10]，但是这些合成小肽的非内源性导致它们容易引起免疫反应并且易被系统清除，限制了它们在体内的应用。因此，从内源性蛋白入手寻找Αβ聚合的抑制剂可能会是ー个更有效的研究方向。α -晶体蛋白是小热休克蛋白家族的ー员，具有分子伴侶活性，能够结合多种底物蛋白，抑制蛋白质在多种变性条件下的凝聚和失活[11]。α-晶体蛋白由于首次从人眼球晶状体中分离出来而命名。后来发现α-晶体蛋白有两个亚型，αΑ和αΒ。其中a A是晶状体特异性蛋白质，而α B在脑、心脏、骨骼肌等多种组织中都有表达。αΒ晶体蛋白是多亚基的寡聚体，每ー个亚基由175个氨基酸的α B多肽链构成。研究发现，在一些神经退行性疾病如阿尔茨海默病，帕金森病和克罗茨费尔特-雅各布病中，α B晶体蛋白表达升高，这被认为是机体为了保护神经细胞免受进ー步损害的一种应激反映[12]。体外实验表明，人ct B晶体蛋白可以与Αβ n, a -synuclein, β 2-microglobulin,胰岛素等多肽或蛋白结合，并抑制其纤维沉淀的形成[13]。[I]Selkoe, D. J. (2005). Defining molecular targets to prevent Alzheimerdisease. Arch Neurol62，192—5.
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发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的缺陷，提供一种新的Αβ短肽聚合抑制剂及其应用。本发明首先公开了ー种Αβ短肽聚合抑制剂，为氨基酸序列为A Leu B Pro Phe CLeu的多肽或者所述多肽经延长多肽半衰期的化合物修饰后的产物，其中，A为Ser或ThnB 为 Ser 或 Thr，C 为 Tyr、Ser 或 Thr。进ー步优选的，所述Αβ短肽聚合抑制剂的氨基酸序列为Ser Leu Ser Pro PheTyrLeu (SEQ ID NO :1)。
进ー步的，所述延长多肽半衰期的化合物修饰于所述氨基酸序列的羧基端。所述延长多肽所述延长多肽半衰期的化合物可为PEG。所述PEG 的结构式为H0(CH2CH20)nH，η 为 4_40。优选的，所述A β短肽聚合抑制剂符合结构式(I)
权利要求
1.ー种Αβ短肽聚合抑制剂，为氨基酸序列为A Leu B Pro Phe C Leu的多肽或者所述多肽经延长多肽半衰期的化合物修饰后的产物，其中，A为Ser或Thr，B为Ser或Thr，C为 Tyr> Ser 或 Thr0
2.如权利要求I所述Αβ短肽聚合抑制剂，其特征在于，所述Αβ短肽聚合抑制剂的氨基酸序列为 Ser Leu Ser Pro Phe Tyr Leu。
3.如权利要求I所述Aβ短肽聚合抑制剂，其特征在于，所述延长多肽半衰期的化合物修饰于所述氨基酸序列的羧基端。
4.如权利要求I所述Aβ短肽聚合抑制剂，其特征在于，所述延长多肽半衰期的化合物为 PEG。
5.如权利要求4所述Αβ短肽聚合抑制剂，其特征在于，所述PEG的结构式为HO (CH2CH2O)nH, η 为 4-40。
6.如权利要求I所述Αβ短肽聚合抑制剂，其特征在于，所述Αβ短肽聚合抑制剂符合结构式⑴
7.如权利要求1-6任ー权利要求所述Αβ短肽聚合抑制剂的制备方法，包括下列步骤 1)多肽肽段的合成； 2)PEG修饰多肽羧基端； 3)纯化及后处理。
8.如权利要求1-6任ー权利要求所述Aβ短肽聚合抑制剂用于制备预防或治疗神经退行性疾病的药物的用途。
9.一种预防或治疗神经退行性疾病的药物组合物，含有有效治疗量的权利要求1-6任ー权利要求所述Aβ短肽聚合抑制剂。
全文摘要
本发明涉及一种Aβ短肽聚合抑制剂及其制备与应用。本发明的Aβ短肽聚合抑制剂为氨基酸序列为ALeuBProPheCLeu的多肽或者所述多肽经延长多肽半衰期的化合物修饰后的产物，其中，A为Ser或Thr，B为Ser或Thr，C为Tyr、Ser或Thr。本发明的Aβ短肽聚合抑制剂可用于制备预防或治疗神经退行性疾病的药物，与已知的Aβ沉淀的小分子抑制剂RS-0406相比溶解度大幅度提高，其体外实验的有效给药浓度大幅度降低，同时，由于该化合物来源于人源蛋白αB，其引发免疫反应的可能性大为降低。
文档编号A61P25/28GK102675419SQ20111006318
公开日2012年9月19日 申请日期2011年3月16日 优先权日2011年3月16日
发明者王英明 申请人:上海博智生物科技有限公司