一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法
【专利摘要】本发明涉及一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法。所述的方法包括以下步骤：先将牛樟芝粉末及硅藻土混合，加入提取溶剂，超声提取，过滤；再加入溶剂定容并挥干溶剂，得三萜类化合物粗提物浸膏；然后在三萜类化合物粗提物浸膏中加入溶剂加热溶解，加入加压溶剂进行加压萃取，将萃取液过滤，最后进行减压旋转蒸发，得到三萜类化合物精提物。本发明中在提取前先对牛樟芝进行预处理，包括干燥粉碎，减压蒸发，然后再进行加压萃取，对牛樟芝中的三萜类化合物可充分提取，且整个操作条件温和，可充分保留三萜类化合物的生理活性，此外，操作中经过两次过滤，通过硅藻土的助滤作用，可有效滤除有效杂质，从而避免牛樟芝中其他成分干扰萃取效果。
【专利说明】一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物领域，具体涉及一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法。
【背景技术】
[0002]牛樟芝(Taiwanofungus camphorates),又名牛樟燕或樟芝，是一种原产于我国台湾省的珍稀药用菌。牛樟芝主要存在于我国台湾省的名贵树木牛樟树cinnamomumkanehirae hayata的树干空洞内。牛樟芝具有抗肿瘤、增加免疫能力、抗细菌、抗病毒、抗过敏、抗高血压、降血糖、降胆固醇、抑制血小板凝集及保护肝脏等生理活性，而且不良反应很少。因此牛樟芝在台湾素有药中之王台湾森林中之红宝石的美誉。现代研究表明樟芝生理活性物质包括许多，如维生素、固醇类、麦角留醇、多糖、三萜类、超氧化物歧化酶S0D、腺苷、小分子蛋白质等。其中三萜类化合物是其主要的生理活性物物，它能够直接抑制癌细胞的增长和具有抗氧化的活性，存在于菇菌类植物中，只是不同菌类植物中三铁化合物的含量不同，三萜类化合物为牛樟芝主要化学成分之一，也是牛樟芝萃取苦味成分的来源，实验证明，灵芝内大约含有20——50多种三萜类指纹，各种灵芝总计发现两百多种三萜类指纹，而牛樟芝单一种就有二百多种三萜类指纹，含量之多是灵芝的数多倍。目前研究发现，每种灵芝三萜类含量大约为1%—3%，而牛樟芝一种三萜类含量就达15%—45%。因此，牛樟芝被称为“灵芝之王”。三萜类化合物不仅能抑制癌细胞的生长，抑制组织胺的释放，还具有防止过敏，保护肝脏，促进血小板凝集、降低血脂等功能。三萜类含量越高则医用价值越高。实验证实，高血压患者因为血压高，导致脑血管破裂而中风，三萜类物质中的ACE活性成分可以有效降低血压，从而达到预防中风的目的。
[0003]目前，三萜类化合物的提取方法主要包括有大孔吸附树脂法及色谱柱制备法两种，但此方法三萜类化合物的提取易受到牛樟芝中其他成分的影响，导致提取效果差，且操作繁琐。加压溶剂萃取术是新发展的一种技术，其具有回收率高、快速等优点。
【发明内容】
[0004]针对上述现有技术的不足，本发明提供一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法。
[0005]本发明的技术方案如下:
一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，包括以下步骤:
(1)称取牛樟芝粉末10-20g及硅藻土10-20g，混合，加入提取溶剂，超声提取，过滤，取滤液；
(2)取步骤(I)中制得的滤液，加入50ml量瓶中，加入溶剂定容至刻度，减压旋转蒸发，挥干溶剂，制得三萜类化合物粗提物浸膏；
(3)取步骤(2)中的制得的三萜类化合物粗提物浸膏，加入溶剂加热溶解，加入加压溶齐U，加入到萃取仪的萃取池中，进行萃取，将萃取液过滤，取滤液；
(4)将步骤(4)中制得的滤液再次进行减压旋转蒸发，得到三萜类化合物精提物。
[0006]步骤(I)中所述的牛樟芝粉末制备的具体方法为:将牛樟芝子实体切成薄片，干燥粉碎，干燥温度为55-60°C，粉碎粒度为60-80目，制得牛樟芝粗粉。
[0007]步骤(I)中所述的提取溶液为浓度为5%_10%的碳酸氢钠溶液。
[0008]步骤(I)与步骤(3)中的过滤为采用0.45um的微孔滤膜过滤。
[0009]步骤(I)中所述的超声提取的次数为3-5次，超声提取的时间为每次5-10min。
[0010]步骤(2)中定容所采取的溶剂选自氯仿或甲醇中的一种。
[0011]步骤(2)中所述的减压旋转蒸发时的压力为(4.2-8.5)Kpa，温度为30_50°C。
[0012]步骤(3)中所述的溶剂选自氯仿或甲醇中的一种，所述的加压溶剂为80%_85%的乙醇溶液。
[0013]步骤(3)中所述的萃取温度为55_60°C，所述的萃取压力为5_8Mpa。
[0014]本发明与现有技术相比，有益效果体现在以下几点:
1.本发明中在提取前先对牛樟芝进行预处理，包括干燥粉碎，减压蒸发制得三萜类粗提物浸膏，再进行加压萃取，对牛樟芝中的三萜类化合物可充分提取，与现在技术相比，操作更为简单，提取更为有效，且整个操作条件温和，可充分保留三萜类化合物的生理活性。
[0015]2.本发明中，对牛樟芝粉末采用氯仿定容溶解，5%_10%的碳酸氢钠溶液超声提取
3-5次，80%_85%的乙醇溶液加压萃取，可提高提取及萃取效果，而且本发明将牛樟芝粉末与硅藻土混匀，经过两次过滤，通过硅藻土的助滤作用，可有效滤除有效杂质，从而避免牛樟芝中其他成分干扰萃取效果。
【具体实施方式】
[0016]下面结合实施例对本发明做进一步说明。
[0017]实施例1
一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，包括以下步骤:
(1)称取牛樟芝粉末1g及娃藻土1g,混合,加入5%的碳酸氢钠溶液,超声提取3次，每次5min,提取后经0.45um的微孔滤膜过滤,取滤液；
(2)取步骤(I)中制得的滤液，加入50ml量瓶中，加入氯仿定容至刻度，减压旋转蒸发，挥干氯仿，制得三萜类化合物粗提物浸膏；
(3)取步骤(2)中的制得的三萜类化合物粗提物浸膏，加入溶剂加热溶解，加入80%的乙醇溶液，加入到萃取仪的萃取池中，进行萃取，萃取温度为55°C，所述的萃取压力为5Mpa，将萃取液过滤，取滤液；
(4)将步骤(4)中制得的滤液再次进行减压旋转蒸发，压力为4.2Kpa，温度为30°C，得到三萜类化合物精提物。
[0018]步骤(I)中所述的牛樟芝粉末制备的具体方法为:将牛樟芝子实体切成薄片，干燥粉碎，干燥温度为55°C，粉碎粒度为60目，制得牛樟芝粗粉。
[0019]实施例1
一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，包括以下步骤:
(1)称取牛樟芝粉末20g及娃藻土20g,混合,加入10%的碳酸氢钠溶液，超声提取5次，每次1min,提取后经0.45um的微孔滤膜过滤,取滤液；
(2)取步骤(I)中制得的滤液，加入50ml量瓶中，加入甲醇定容至刻度，减压旋转蒸发，挥干甲醇，制得三萜类化合物粗提物浸膏；
(3)取步骤(2)中的制得的三萜类化合物粗提物浸膏，加入溶剂加热溶解，加入85%的乙醇溶液，加入到萃取仪的萃取池中，进行萃取，萃取温度为60°C，所述的萃取压力为8Mpa,将萃取液过滤,取滤液；
(4)将步骤(4)中制得的滤液再次进行减压旋转蒸发，压力为8.5Kpa，温度为50°C，得到三萜类化合物精提物。
[0020]步骤(I)中所述的牛樟芝粉末制备的具体方法为:将牛樟芝子实体切成薄片，干燥粉碎，干燥温度为60°C，粉碎粒度为-80目，制得牛樟芝粗粉。
[0021]实施例1
一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，包括以下步骤:
(1)称取牛樟芝粉末15g及娃藻土15g,混合,加入8%的碳酸氢钠溶液,超声提取4次，每次8min,提取后经0.45um的微孔滤膜过滤,取滤液；
(2)取步骤(I)中制得的滤液，加入50ml量瓶中，加入氯仿定容至刻度，减压旋转蒸发，挥干氯仿，制得三萜类化合物粗提物浸膏；
(3)取步骤(2)中的制得的三萜类化合物粗提物浸膏，加入溶剂加热溶解，加入82%的乙醇溶液，加入到萃取仪的萃取池中，进行萃取，萃取温度为58°C，所述的萃取压力为6Mpa,将萃取液过滤,取滤液；
(4)将步骤(4)中制得的滤液再次进行减压旋转蒸发，压力为6Kpa，温度为40°C，得到三萜类化合物精提物。
[0022]步骤(I)中所述的牛樟芝粉末制备的具体方法为:将牛樟芝子实体切成薄片，干燥粉碎，干燥温度为58°C，粉碎粒度为80目，制得牛樟芝粗粉。
[0023]上述实施例仅为本发明的优选实施方式，并不应理解为对本发明的限定，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)称取牛樟芝粉末10-20g及硅藻土10-20g，混合，加入提取溶剂，超声提取，过滤，取滤液； (2)取步骤(I)中制得的滤液，加入50ml量瓶中，加入溶剂定容至刻度，减压旋转蒸发，挥干溶剂，制得三萜类化合物粗提物浸膏； (3)取步骤(2)中的制得的三萜类化合物粗提物浸膏，加入溶剂加热溶解，加入加压溶齐U，加入到萃取仪的萃取池中，进行萃取，将萃取液过滤，取滤液； (4)将步骤(4)中制得的滤液再次进行减压旋转蒸发，得到三萜类化合物精提物。
2.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(I)中所述的牛樟芝粉末制备的具体方法为:将牛樟芝子实体切成薄片，干燥粉碎，干燥温度为55-60°C，粉碎粒度为60-80目，制得牛樟芝粗粉。
3.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(I)中所述的提取溶液为浓度为5%-10%的碳酸氢钠溶液。
4.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(I)与步骤(3)中的过滤为采用0.45um的微孔滤膜过滤。
5.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(I)中所述的超声提取的次数为3-5次，超声提取的时间为每次5-10min。
6.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(2)中定容所采取的溶剂选自氯仿或甲醇中的一种。
7.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的减压旋转蒸发时的压力为(4.2-8.5)Kpa，温度为30_50°C。
8.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的溶剂选自氯仿或甲醇中的一种，所述的加压溶剂为80%-85%的乙醇溶液。
9.根据权利要求1所述的一种从牛樟芝中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的萃取温度为55-60°C，所述的萃取压力为5-8Mpa。
【文档编号】A61K36/07GK104127447SQ201410400614
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年8月15日 优先权日:2014年8月15日
【发明者】刘巴宁, 郑安乔 申请人:中山安荞生物科技有限公司