in进行抽滤，洗涂2次。
[0050] (6)将步骤妨中制得的交联凝胶注入冷冻盒中，待其自动流平溢出，然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平，之后将冷冻盒进行冷冻定型化，冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中，冷冻干燥32h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 阳0川 实施例2 阳0巧（1)称取20g透明质酸钢，加入到盛有900mL纯化水的容器中，在揽拌条件下使之 完全溶解，配制得到22. 22g/L的透明质酸钢溶液，用0.Imol/L的盐酸溶液将配制好的透明 质酸钢溶液抑值调节为4. 5。 阳化引 似称取7. 5姐DC·肥L加入到步骤（1)中配制得到的透明质酸钢溶液中，揽拌使 之充分溶解，制得交联前体溶液。
[0054] (3)称取12g簇甲基壳聚糖，加入到盛有750mL纯化水的容器中，在揽拌条件下使 之完全溶解，配制得到16g/L的簇甲基壳聚糖溶液。
[005引 （4)将步骤（3)中配置好的簇甲基壳聚糖溶液加入步骤似中制得的交联前体溶 液中，在32°C溫度下揽拌20min，使之均匀，然后静置lOh，使之充分交联，得到交联凝胶。
[0056] 妨量取150血2. 3mol/L氯化钢溶液加入到步骤（4)中得到的交联凝胶中进行洗 涂，浸泡15min进行抽滤，洗涂3次。
[0057] (6)将步骤巧）中制得的交联凝胶注入冷冻盒中，待其自动流平溢出，然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平，之后将冷冻盒进行冷冻定型化，冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中，冷冻干燥30h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 阳0郎]实施例3
[0059] (1)称取13g透明质酸钢，加入到盛有720mL纯化水的容器中，在揽拌条件下使之 完全溶解，配制得到18g/L的透明质酸钢溶液，用0.Imol/L的盐酸溶液将配制好的透明质 酸钢溶液抑值调节为5. 0。 W60] 0)称取10姐DC·肥L与畑S的混合物加入到步骤（1)中配制得到的透明质酸钢 溶液中，揽拌使之充分溶解，制得交联前体溶液。
[0061] (3)称取12g簇甲基壳聚糖，加入到盛有750mL纯化水的容器中，在揽拌条件下使 之完全溶解，配制得到16g/L的簇甲基壳聚糖溶液。 阳06引（4)将步骤（3)中配置好的簇甲基壳聚糖溶液加入步骤似中制得的交联前体溶 液中，在15°C溫度下揽拌40min，使之均匀，然后静置16h，使之充分交联，得到交联凝胶。 [006引 妨量取100血纯化水加入到步骤（4)中得到的交联凝胶中进行洗涂，浸泡15min 进行抽滤，洗涂3次。 W64] (6)将步骤妨中制得的交联凝胶注入冷冻盒中，待其自动流平溢出，然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平，之后将冷冻盒进行冷冻定型化，冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中，冷冻干燥24h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 W65] 实施例4
[0066] (1)称取8.Ig透明质酸钢，加入到盛有450mL纯化水的容器中，在揽拌条件下使之 完全溶解，配制得到18g/L的透明质酸钢溶液，用0.Imol/L的盐酸溶液将配制好的透明质 酸钢溶液抑值调节为5. 0。
[0067] 似称取3姐DC·肥L加入到步骤（1)中配制得到的透明质酸钢溶液中，揽拌使之 充分溶解，制得交联前体溶液。
[0068] (3)称取6g簇甲基壳聚糖，加入到盛有300mL纯化水的容器中，在揽拌条件下使之 完全溶解，配制得到20g/L的簇甲基壳聚糖溶液。
[0069] (4)将步骤（3)中配置好的簇甲基壳聚糖溶液加入步骤（2)中制得的交联前体溶 液中，在30°C溫度下揽拌15min，使之均匀，然后静置13h，使之充分交联，可得到交联凝胶。
[0070] (5)量取60mL纯化水加入到步骤（4)中得到的交联凝胶中进行洗涂，浸泡15min 进行抽滤，洗涂4次。
[00川 （6)将步骤妨中制得的交联凝胶注入冷冻盒中，待其自动流平溢出，然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平，之后将冷冻盒进行冷冻定型化，冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中，冷冻干燥35h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 阳0巧实施例5
[0073] 生物可降解止血材料体外降解试验
[0074] 对实施例1中制得可降解生物复合止血膜分别置于均含有溶菌酶的缓冲盐、纯化 水和质量百分浓度为0. 9%的生理盐水中，得到1周、2周和3周的降解数据，如下表1~3 所示。 阳07引其中，缓冲盐为抑值7. 4、浓度0.Imol/L的憐酸盐缓冲溶液。
[0076] 表1:实施例1制得的可降解生物复合止血膜的1周降解数据
[0077]
阳07引表2 :实施例1制得的可降解生物复合止血膜的2周降解数据 '
[0079]
阳080] 表3 :实施例1制得的可降解生物复合止血膜的3周降解数据 '
[0081]
[00間由表1~表3可W看出，实施例1中制得可降解生物复合止血膜能够在缓冲盐、纯 化水和质量百分浓度为0.9%的生理盐水中被降解。并且随着时间的增加其降解量均增多， 实施例1中制得可降解生物复合止血膜在3周后大部分被降解，此现象可避免二次手术给 病人带来的痛苦，减少感染机率，运在临床上具有重大意义。
[0083] W上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可W做出若干变形和改进，运些都属于本发明的保 护范围。因此，本发明专利的保护范围应W所附权利要求为准。
【主权项】
1. 一种可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 配制含有透明质酸钠和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐的交联前体 溶液； 将羧甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中，l〇°C~40°C下搅拌混匀后静置使得 充分交联，得到交联凝胶；以及 采用洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型，接着将定型后的所述交联凝胶干燥，得 到可降解生物复合止血膜。2. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述交联 前体溶液中，所述透明质酸钠的浓度为15g/L~25g/L，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基） 碳酰二亚胺盐酸盐的浓度为5g/L~20g/L。3. 根据权利要求2所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述交联 前体溶液中还含有的N-羟基琥珀酰亚胺； 所述交联前体溶液中，所述N-羟基琥珀酰亚胺与所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基） 碳酰二亚胺盐酸盐的质量比为1:1~3。4. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述配制 含有透明质酸钠和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐的交联前体溶液的操 作为：将1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐加入到pH为4. 5~5. 5的透明 质酸钠溶液中，充分搅拌直至所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐完全 溶解，得到所述交联前体溶液。5. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述羧甲 基壳聚糖溶液的浓度为15g/L~25g/L。6. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述将羧 甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中的操作中，所述羧甲基壳聚糖溶液与所述交联 前体溶液的体积比为1 :1~3。7. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述采用 洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型的操作中，所述洗涤液为纯化水或浓度为0. 5mol/ L~3mol/L的氯化钠溶液，所述洗涤的操作为：将所述洗涤液加入到所述交联凝胶中，充分 浸泡后抽滤，重复洗涤2次~5次。8. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述采用 洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型的操作中，所述定型的操作为：将洗涤干净的所述 交联凝胶搅拌均匀后注入深度为5mm~15mm冷冻盒中，待所述交联凝胶自动流平溢出后沿 所述冷冻盒的上沿刮平，接着在-10~-30°C下冷冻定型3h~6h。9. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法，其特征在于，所述将定 型后的所述交联凝胶干燥的操作中，所述干燥为在-20~5°C下冷冻干燥24h~35h。10. -种可降解生物复合止血膜，其特征在于，采用如权利要求1~9中任一项所述的 可降解生物复合止血膜的制备方法制得。
【专利摘要】本发明公开了一种可降解生物复合止血膜及其制备方法，制备方法包括如下步骤：配制含有透明质酸钠和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的交联前体溶液；将羧甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中，10℃～40℃下搅拌混匀后静置使得充分交联，得到交联凝胶；以及采用洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型，接着将定型后的所述交联凝胶干燥，得到可降解生物复合止血膜。这种可降解生物复合止血膜的制备方法制得的可降解生物复合止血膜中的透明质酸钠通过交联，相对于传统的材料为未交联的透明质酸钠的止血膜，能够在动物组织中较长时间残留。
【IPC分类】A61L26/00
【公开号】CN105381501
【申请号】CN201510934417
【发明人】李绍霞, 陈杰, 李家祯, 罗兆坤, 王婷婷, 刘玉姣
【申请人】日照天一生物医疗科技有限公司
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年12月15日