姜黄素粉末溶解于乙醇水混合体系（50:50，乂八），制得浓度为104旨/1111 的姜黄素乙醇水体系。依据实施例2得到的姜黄素纳米颗粒的包封率值，复溶纳米粒冻干粉 末得到具有相同姜黄素浓度的Zein-NaCas纳米粒水性分散体。将上述两种体系分别放置于 180°C烘箱中加热和354皿紫外光波长下照射，然后在不同加热时间点(0、10、20、40、60min) 和光照时间点(0、20、40、60、90、120111^)下取样测定体系中残留姜黄素的百分比。
[0147]结果如图5、6所示，包裹在纳米粒中的姜黄素的稳定性大大提高，180°C条件下加 热60min，仍可保持60% W上的活性，并且粒径和多分散指数无明显变化，而醇水体系中的 游离姜黄素在180°C条件下加热60min基本完全丧失活性。图7显示了加热lOmin (A)和60min (B)时的姜黄素纳米体系的透射电镜图。从图中可W看出，在高溫加热下，纳米粒的大小，分 布和形貌均无明显改变。本发明的姜黄素纳米体系的光照稳定性如图8所示，包裹在纳米粒 中的姜黄素对紫外线(254nm)的敏感性大大降低，紫外线照射60min，可保持90%W上的活 性，紫外线照射120min，仍可保持50%左右的活性，远优于游离姜黄素。上述结果表明，本发 明的姜黄素纳米颗粒具有极好的稳定性，适应于食品烘赔等加工处理。
[014引实施例5
[0149] 姜黄素纳米体系的复水性实验
[0150] 将冻干的姜黄素纳米粒粉末再次复溶到相同体积的双蒸水中，用满旋振荡仪振荡 2min后室溫静置、观察体系的状态，并与新鲜制备的姜黄素纳米颗粒的各项参数进行比较。
[0151] 结果如下：
[0152] 新鲜制备的姜黄素纳米颗粒与冻干复水的姜黄素纳米粒的粒径分布情况如图9所 示，部分表征数据如下表所示，二者的粒径、多分散性指数W及表面电位并无明显差别。结 果表明，本发明的姜黄素纳米颗粒具有良好的冻干复水性。
[0153]
[0154] 实施例6
[0155] 姜黄素纳米体系的溶解度实验
[0156] 将一定量的姜黄素纳米粒粉末复溶于双蒸水中，根据实施例2得到的姜黄素纳米 颗粒的包封率值和复溶后纳米粒的浓度来计算姜黄素纳米颗粒的溶解度。
[0157] 本发明的姜黄素纳米颗粒的溶解度可W达到0.1-0.5mg/mL，远高于文献报道的游 离姜黄素的水溶解度llng/mL。姜黄素溶解度的大幅度提高有利于提高其生物利用度。
[015引实施例7
[0159] 细胞摄取率实验
[0160] 将化C0-2细胞接种于96孔黑板，细胞浓度为2 X 105个/孔，于37°C、5 % C〇2培养箱中 培养21-29天，使其形成单层细胞，并保持每两天换一次液。试验前先进行换液，然后分别加 入相同剂量的游离姜黄素溶液和姜黄素纳米体系，培养4h、24h、4化、7化后，加入4°C空白 PBS溶液终止细胞摄取。将细胞单分子层冲洗3次，加入细胞裂解液(0.5 % Triton X-100， 0.2M NaOH)作用3min，在425皿，518nm波长下测巧光强度。此夕h每孔取20化用BCA定量蛋白 质含量，细胞对两种姜黄素的摄取率用巧光强度与相应的蛋白质含量比值表示。
[0161] 结果如图11所示，对于测试的4个时间点，Caco-2细胞对包裹在纳米粒中的姜黄素 均具有更高的摄取率。
[0162] 实施例8
[0163] 细胞跨膜转运实验
[0164] 取化CO-2细胞经0.25%膜酶消化，细胞计数为6 Xl〇5个/血加于12孔transwell培 养板中培养。培养板上室(apical，AP)先用O.lmL完全培养基浸润2min，然后加入0.5mL细 胞，下室（basolateral，BL)加入1.5mL完全培养基，于37°C、5 % C〇2培养箱中培养，6-1化后 进行换液，除去不贴壁细胞，之后每两天换一次液。在转运实验开始前化进行换液，然后测 定跨膜电阻，当电阻为600-800 Ω/cm2时开始正式实验。分别将具有相同剂量（2扣M)的 0.5mL游离姜黄素溶液和姜黄素纳米体系加到上室作为供给池，同时下室加入1.5mL的完全 培养基作为接收池，每组设3个重复，于37°C、5%C02培养箱中培养，分别在l、2、3、4h时，从 下室取50化于96孔板中，重复Ξ次，同时补加37°C完全培养基15化L，在激发光425nm，发射 光518nm波长下测巧光强度，并通过下面的公式计算得到姜黄素在细胞水平的生物利用度。
[01 化]
[0166] 结果如图12和下表所示，包裹在纳米粒中的姜黄素均具有更高的细胞水平上的生 物利用度。
[0167]
[0168] 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独 引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可 W对本发明作各种改动或修改，运些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范 围。
【主权项】
1. 一种姜黄素复合颗粒，其特征在于，所述的复合颗粒含有： 组分(a):姜黄素； 组分(b):醇溶蛋白； 组分（c):酪蛋白、食品学上或药学上可接受酪蛋白盐、或食品学上或药学上可接受的 酪蛋白衍生物； 其中，所述组分(a)姜黄素和所述组分(b)醇溶蛋白处于混合状态并且被所述组分（c) 所包裹； 并且，所述的复合颗粒为亲水性颗粒。2. 如权利要求1所述的复合颗粒，其特征在于，所述的姜黄素复合颗粒具有核-壳结构。3. 如权利要求1所述的复合颗粒，其特征在于，所述组分(a)姜黄素和组分(b)醇溶蛋白 的质量比为(0.2-5 ):(5-100)，较佳地为(0 · 5-3): (10-50 )，更佳地为（1 -2): (10-20)。4. 如权利要求1所述的复合颗粒，其特征在于，所述组分(b)和组分(c)质量比为(0.8_ 2) :(0.8-2)，更佳地为(0.8-1.2): 1。5. 如权利要求1所述的复合颗粒，其特征在于，所述的醇溶蛋白包括玉米醇溶蛋白、小 麦醇溶蛋白。6. 如权利要求1所述的复合颗粒，其特征在于，所述的组分(c)为酪蛋白酸盐，并且所述 的酪蛋白酸盐包括酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钾、酪蛋白酸钙、或其组合。7. -种组合物，其特征在于，所述组合物包含(a)权利要求1所述的姜黄素复合颗粒;和 (b)药学上可接受的载体或食品学上可接受的载体。8. -种饮料组合物，其特征在于，所述组合物包含(a)权利要求1所述的姜黄素复合颗 粒;和(b)饮料学上可接受的载体。9. 一种制备权利要求1所述的复合颗粒的方法，其特征在于，所述方法包括步骤： (i)提供第一溶液和第二溶液，其中， 所述第一溶液包含第一溶剂以及溶于第一溶剂中的组分(a)姜黄素和组分(b)醇溶蛋 白； 所述第二溶液包含第二溶剂以及溶于第二溶剂中的组分(c); (ii)将第一溶液与第二溶液混合，从而形成权利要求1的所述的姜黄素复合颗粒。10. 如权利要求1所述的复合颗粒的用途，其特征在于，用于制备一组合物，所述组合物 用于降血脂、抗肿瘤、抗炎、利胆、和/或抗氧化。
【专利摘要】本发明提供了一种姜黄素复合颗粒及其制备方法和应用。具体地，本发明公开了一种姜黄素复合颗粒，其含有组分(a)姜黄素；组分(b)醇溶蛋白；组分(c)酪蛋白、酪蛋白盐、或酪蛋白衍生物；其中，所述组分(a)和所述组分(b)处于混合状态并且被所述组分(c)所包裹。本发明的姜黄素复合颗粒可以显著提高姜黄素的水溶解性、生物利用度和稳定性，在功能食品和医药领域具有良好的应用前景。
【IPC分类】A23L2/02, A61K9/16, A61P1/16, A23F3/14, A61K9/14, A61K47/42, A23L33/105, A61P39/06, A61P3/06, A61K31/12, A23L2/66, A23L33/17, A23L33/185, A61P35/00, A23F5/14, A23C11/08, A23C9/152, A23L2/52
【公开号】CN105456196
【申请号】CN201510819903
【发明人】张亚琼, 姚芳懿
【申请人】上海交通大学
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2015年11月23日