-2000mg/日。在另一实施方案中，所述剂量 为1000-2000mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为1500-2000mg/日。
[0185] 0-3脂肪酸、W-6脂肪酸或另外的EPA的每种剂量代表本发明的一个独立的实施 方案。
[0186] 在另一实施方案中，本发明的方法和组合物中包含的尿巧的剂量在IO-SOOmg/日 之间（包括端值）。在另一实施方案中，所述剂量为20-500mg/日。在另一实施方案中，所述剂 量为30-500mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为50-500mg/日。在另一实施方案中，所述 剂量为IOO-SOOmg/日。在另一实施方案中，所述剂量为150-500mg/日。在另一实施方案中， 所述剂量为200-500mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为300-500mg/日。在另一实施方案 中，尿巧的剂量在10-400mg/日之间。在另一实施方案中，所述剂量为20-400mg/日。在另一 实施方案中，所述剂量为30-400mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为50-400mg/日。在另 一实施方案中，所述剂量为100-400mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为150-400mg/日。 在另一实施方案中，所述剂量为200-400mg/日。在另一实施方案中，尿巧的剂量在10-300mg/日之间。在另一实施方案中，所述剂量为20-300mg/日。在另一实施方案中，所述剂量 为30-300mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为50-300mg/日。在另一实施方案中，所述剂 量为100-300mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为150-300mg/日。在另一实施方案中，所 述剂量为200-300mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为约50mg/日。在另一实施方案中，所 述剂量为约70mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为约IOOmg/日。在另一实施方案中，所述 剂量为约150mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为约200mg/日。在另一实施方案中，所述 剂量为约300mg/日。在另一实施方案中，所述剂量为约400mg/日。在另一实施方案中，所述 剂量为约500mg/日。
[0187]每种尿巧剂量代表本发明的一个独立的实施方案。
[018引在另一实施方案中，本发明的方法和组合物中包含的胆碱的剂量在IOOmg-IOg/日 之间（包括端值）。在另一实施方案中，所述剂量为lg-3g。在另一实施方案中，所述剂量为 150mg-8g。在另一实施方案中，所述剂量为200mg-6g。在另一实施方案中，所述剂量为 300mg-5g。在另一实施方案中，所述剂量为400mg-4.5g。在另一实施方案中，所述剂量为 500mg-4g。在另一实施方案中，所述剂量为600mg-4g。在另一实施方案中，所述剂量为 800mg-3.5g。在另一实施方案中，所述剂量为1.2g-3g。在另一实施方案中，所述剂量为 1.5g-2.5g。在另一实施方案中，所述剂量为约0.5g。在另一实施方案中，所述剂量为约 0.7g。在另一实施方案中，所述剂量为约Ig。在另一实施方案中，所述剂量为约1.2g。在另一 实施方案中，所述剂量为约1.5g。在另一实施方案中，所述剂量为约2g。在另一实施方案中， 所述剂量为约2.5g。在另一实施方案中，所述剂量为约3g。在另一实施方案中，所述剂量为 约4g。上述剂量中的每种均是胆碱等价物的量;因此，胆碱化合物(如:氯化胆碱或酒石酸胆 碱)的实际剂量将相应地更高。
[0189] 每种胆碱剂量代表本发明的一个独立的实施方案。
[0190] 在另一实施方案中，本发明的组合物被长期给药。在另一实施方案中，"长期"是指 给药至少1周。在另一实施方案中，该术语是指给药至少2周。在另一实施方案中，该时间期 限为至少10天。在另一实施方案中，该时间期限为至少3周。在另一实施方案中，该时间期限 为至少4周。在另一实施方案中，该时间期限为至少5周。在另一实施方案中，该时间期限为 至少6周。在另一实施方案中，该时间期限为至少2个月。在另一实施方案中，该时间期限为 至少3个月。在另一实施方案中，该时间期限为至少4个月。在另一实施方案中，该时间期限 为至少6个月。在另一实施方案中，该时间期限为至少6个月。在另一实施方案中，该时间期 限为至少1年。在另一实施方案中，该时间期限为至少2年。在另一实施方案中，该时间期限 为至少3年。在另一实施方案中，该时间期限为至少5年。在另一实施方案中，该时间期限为 至少10年。
[0191] 在另一实施方案中，该时间期限为1周。在另一实施方案中，该术语是指给药2周。 在另一实施方案中，该时间期限为10天。在另一实施方案中，该时间期限为3周。在另一实施 方案中，该时间期限为4周。在另一实施方案中，该时间期限为5周。在另一实施方案中，该时 间期限为6周。在另一实施方案中，该时间期限为2个月。在另一实施方案中，该时间期限为3 个月。在另一实施方案中，该时间期限为4个月。在另一实施方案中，该时间期限为6个月。在 另一实施方案中，该时间期限为6个月。在另一实施方案中，该时间期限为1年。在另一实施 方案中，该时间期限为2年。在另一实施方案中，该时间期限为3年。在另一实施方案中，该时 间期限为5年。在另一实施方案中，该时间期限为10年。
[0192] 在另一实施方案中，本发明组合物的多不饱和脂肪酸成分的给药持续上述时间期 限之一。在另一实施方案中，本发明组合物的《-3成分的给药持续上述时间期限之一。在另 一实施方案中，本发明组合物的《-6成分的给药持续上述时间期限之一。在另一实施方案 中，本发明组合物的尿巧成分的给药持续上述时间期限之一。在另一实施方案中，本发明组 合物的胆碱或胆碱盐成分的给药持续上述时间期限之一。
[0193] 每种时间期限代表本发明的一个独立的实施方案。
[0194] 在另一实施方案中，"接触"是指将本发明的组合物直接向所述个体给药。在另一 实施方案中，"接触"是指将本发明的组合物间接地向所述个体给药。因此，在另一实施方案 中，本发明的方法包括运样的方法，其中所述个体与化合物或组合物接触，所述化合物或组 合物在脑脊液、血流等中被代谢为《 -3或CO -6脂肪酸，之后所述CO -3或CO -6脂肪酸通过扩 散或本领域已知的化合物在体内循环的任何其他主动转运过程或被动转运过程与所述脑 细胞接触。在另一实施方案中，所述化合物由祀细胞代谢为《 -3或《 -6脂肪酸。每种可能性 代表本发明的一个独立的实施方案。
[01M]在另一实施方案中，本发明的方法和组合物中使用C0-3或0-6脂肪酸的衍生物。 在另一实施方案中，所述衍生物是《 -6脂肪酸衍生物丫-亚麻酸。在另一实施方案中，所述 衍生物是本领域已知的《-3或0-6脂肪酸的任何其他衍生物。每种衍生物代表本发明的一 个独立的实施方案。
[0196] 在另一实施方案中，本发明提供增加个体的神经细胞的神经突分支的方法，其包 括向所述个体给药《 -3脂肪酸或其代谢前体，其中所述CO -3脂肪酸或其代谢前体提高所述 神经细胞对憐脂的合成，从而增加其神经突分支。在另一实施方案中，本发明提供增加个体 的神经细胞的神经突分支的方法，其包括向所述个体给药《-6脂肪酸或其代谢前体，其中 所述《-6脂肪酸或其代谢前体增加所述神经细胞对憐脂的合成，从而增加神经细胞的神经 突分支。
[0197] 在另一实施方案中，本发明提供增加个体的神经细胞的神经突分支的方法，其包 括向所述个体给药包含(a)尿巧、其酷基衍生物、尿巧憐酸或CDP-胆碱;和(b) 0-3脂肪酸或 其代谢前体的组合物，其中所述组合物增加所述神经细胞对憐脂的合成，从而增加其神经 突分支。在另一实施方案中，本发明提供增加个体的神经细胞的神经突分支的方法，其包括 向所述个体给药包含(a)尿巧、其酷基衍生物、尿巧憐酸或CDP-胆碱;和(b) 0-6脂肪酸或其 代谢前体的组合物，其中所述组合物增加所述神经细胞对憐脂的合成，从而增加个体的神 经细胞的神经突分支。
[0198] 在另一实施方案中，本发明提供增加个体的神经细胞的神经突向外生长的方法， 其包括向所述个体给药包含(a)尿巧、其酷基衍生物、尿巧憐酸或CDP-胆碱;和(b) 0-3脂肪 酸或其代谢前体的组合物，其中所述组合物增加所述神经细胞对憐脂的合成，从而增加其 神经突向外生长。在另一实施方案中，本发明提供增加个体的神经细胞的神经突向外生长 的方法，其包括向所述个体给药包含(a)尿巧、其酷基衍生物、尿巧憐酸或CDP-胆碱;和(b) ?-6脂肪酸或其代谢前体的组合物，其中所述组合物增加所述神经细胞对憐脂的合成，从 而增加个体的神经细胞的神经突向外生长。
[0199] 在另一实施方案中，本发明提供增加个体的神经细胞的神经突向外生长的方法， 其包括向所述个体给药《 -3脂肪酸或其代谢前体，其中所述《 -3脂肪酸或其代谢前体增加 所述神经细胞对憐脂的合成，从而增加其神经突向外生长。在另一实施方案中，本发明提供 增加个体的神经细胞的神经突向外生长的方法，其包括向所述个体给药《-6脂肪酸或其代 谢前体，其中所述《-6脂肪酸或其代谢前体增加所述神经细胞对憐脂的合成，从而增加个 体的神经细胞的神经突向外生长。
[0200] 在另一实施方案中，本发明提供一种试剂盒，其包含在实施本发明的方法中使用 的化合物或组合物。
[0201] 在另一实施方案中，"药物组合物"是指食物增补剂。在另一实施方案中，该术语是 指营养增补剂。在另一实施方案中，该术语是指已富含《-3脂肪酸的任何类别的食品。在另 一实施方案中，该术语是指已富含《-6脂肪酸的食品。在另一实施方案中，该术语是指已富 含尿巧的食品。在另一实施方案中，该术语是指已富含胆碱的食品。在另一实施方案中，该 术语是指已富含胆碱盐的食品。
[0202] 在另一实施方案中，"食品"是指固体食物。在另一实施方案中，该术语是指饮料。 在另一实施方案中，该术语是指粉末饮品混合物。在另一实施方案中，该术语是指W食品为 基础的制剂、功能性食品、食物增补剂或营养食品。
[0203] 在另一实施方案中，食品可W是若干形式，包括:液体、悬浮液、粉末、半固体和固 体。半固体意在包括软冻(custards)、甜点布下、高脂稀奶油、奶油冻、冰糕、酸奶酪和加糖 明胶(sweetened gelatin)。不限于具体的实施方案，固体形式可制备为与能量棒相似的棒 状、片状、小甜饼、饼干、面团（pasta)或膨化物质如爆米花或米饼样食物。一些实施方案要 求个体将小吃食品溶解、悬浮或重新水合。
[0204] 每种类型的药物组合物代表本发明的一个独立的实施方案。
[0205] 在另一实施方案中，本发明设及CO-3或CO-6脂肪酸和/或其类似物、衍生物、异构 体、代谢物、药学可接受的盐、药品、水合物、N-氧化物或它们的组合的用途。因此，在另一实 施方案中，本发明的方法包括给药多不饱和脂肪酸的类似物。在另一实施方案中，本发明的 方法包括给药多不饱和脂肪酸的衍生物。在另一实施方案中，本发明的方法包括给药多不 饱和脂肪酸的异构体。在另一实施方案中，本发明的方法包括给药多不饱和脂肪酸的代谢 物。在另一实施方案中，本发明的方法包括给药多不饱和脂肪酸的药学可接受的盐。在另一 实施方案中，本发明的方法包括给药多不饱和脂肪酸的药品。在另一实施方案中，本发明的 方法包括给药多不饱和脂肪酸的水合物。在另一实施方案中，本发明的方法包括给药多不 饱和脂肪酸的N-氧化物。在另一实施方案中，本发明的方法包括给药多不饱和脂肪酸的类 似物、衍生物、异构体、代谢物、药学可接受的盐、药品、水合物或N-氧化物的任意组合。
[0206] 在本发明的方法和组合物的另一实施方案中，多不饱和脂肪酸作为甘油=醋给 药。
[0207] 在另一实施方案中，术语"异构体"包括，但在另一实施方案中，不限于旋光异构体 及其类似物、结构异构体及其类似物、构象异构体及其类似物等。
[0208] 在另一实施方案中，本发明还包括多不饱和脂肪酸衍生物。术语"衍生物"包括但 不限于酸衍生物、酸衍生物、酷胺衍生物、醋衍生物等。此外，本发明还包括多不饱和脂肪酸 化合物的水合物。术语"水合物"包括但不限于半水合物、一水合物、二水合物、=水合物等。
[0209] 本发明还包括多不饱和脂肪酸化合物的代谢物。术语"代谢物"是指通过代谢或代 谢过程从另一物质生成的任何物质。
[0210] 本发明还包括多不饱和脂肪酸化合物的药品。术语"药品"是指适合于药学用途的 组合物(药物组合物），如本文定义的。
[0211] 此外，本发明包括本文定义的多不饱和脂肪酸化合物的纯(Z)-和化)-异构体及其 混合物，W及纯(RR，SS)-和(RS，SR)-对映体对及其混合物。
[0212] 药物组合物与给药方法
[0213] 在另一实施方案中，含有多不饱和脂肪酸和/或尿巧的药物组合物可W通过本领 域技术人员已知的任何方法例如胃肠外、癌瘤旁、经粘膜、经皮、肌内、静脉内、皮内、皮下、 腹膜内、屯、室内、烦内、阴道内或肿瘤内向个体给药。
[0214] 在本发明的方法和组合物的另一实施方案中，所述药物组合物口服给药，因此配 制为适合于口服给药的形式，即：固体或液体制剂。合适的固体口服制剂包括片剂、胶囊剂、 丸剂、颗粒剂、弹丸剂等。合适的液体口服制剂包括溶液剂、混悬剂、分散剂、乳剂、油剂等。 在本发明的另一实施方案中，活性成分被配制在胶囊中。根据该实施方案，本发明的组合物 除了活性化合物之外还包含惰性载体或稀释剂、硬明胶胶囊。
[0215] 在另一实施方案中，所述药物组合物经静脉内、动脉内、肌内注射液体制剂来给 药。合适的液体制剂包括溶液剂、混悬剂、分散剂、乳剂、油剂等。在另一实施方案中，所述药 物组合物静脉内给药，因此配制为适合于静脉内给药的形式。在另一实施方案中，所述药物 组合物动脉内给药，因此配制为适合于动脉内给药的形式。在另一实施方案中，所述药物组 合物肌内给药，因此配制为适合于肌内给药的形式。
[0216] 在另一实施方案中，所述药物组合物局部地向身体表面给药，因此配制为适于局 部给药的形式。在另一实施方案中，合适的局部制剂包括凝胶剂、软膏剂、乳剂、洗剂、滴剂 等。
[0217] 在另一实施方案中，所述药物组合物作为栓剂给药，例如:直肠栓剂或尿道栓剂。 在另一实施方案中，所述药物组合物通过小丸(pellet)的皮下植入进行给药。在另一实施 方案中，所述小丸提供多不饱和脂肪酸和/或尿巧在一段时间内的控释。
[0218] 在另一实施方案中，所述活性化合物在囊泡例如脂质体中递送。
[0219] 在其他实施方案中，本发明的方法中使用的载体或稀释剂包括但不限于:树胶、淀 粉(如:玉米淀粉、预胶化淀粉）、糖(如:乳糖、甘露醇、薦糖、葡萄糖）、纤维素材料(如:微晶 纤维素）、丙締酸醋(如:聚甲基丙締酸醋）、碳酸巧、氧化儀、滑石或其混合物。
[0220] 在其他实施方案中，液体制剂的药学可接受的载体是水溶液或非水溶液、悬浮液、 乳液或油。非水溶剂的实例为丙二醇、聚乙二醇和可注射有机醋如油酸乙醋。水性载体包括 水、醇/水溶液、乳液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质。油的实例为动物油、植物油或合成来 源的油，例如:花生油、大豆油、橄揽油、葵花子油、鱼肝油、其他海生生物油或来自奶或蛋类 的脂质。
[0221] 在另一实施方案中，胃肠外载体(用于皮下、静脉内、动脉内或肌内注射)包括氯化 钢溶液、林格葡萄糖、葡萄糖和氯化钢、乳酸林格溶液和不挥发油。静脉内载体包括液体和 营养补充剂、电解质补充剂如基于林格葡萄糖的补充剂等。实例为无菌液体如水和油，加入 或不加入表面活性剂及其他药学可接受的辅剂。一般而言，水、盐水、葡萄糖水溶液和相关 糖溶液W及多元醇如丙二醇或聚乙二醇是优选的液体载体，特别是对于可注射溶液剂而 言。油的实例为动物油、植物油或合成来源的油，例如:花生油、大豆油、橄揽油、葵花子油、 鱼肝油、其他海生生物油或来自奶或蛋的脂质。
[0222] 在其他实施方案中，所述组合物还包含粘合剂(如：阿拉伯树胶、玉米淀粉、明胶、 卡波姆、乙基纤维素、瓜耳胶、径丙基纤维素、径丙基纤维素、聚维酬）、崩解剂（如：玉米淀 粉、马铃馨淀粉、褐藻酸、二氧化娃、交联簇甲基纤维素钢、交聚维酬、瓜耳胶、淀粉径乙酸 钢）、各种pH和离子强度的缓冲剂(如:Tris-HCU乙酸盐、憐酸盐）、防止表面吸附的添加剂 如白蛋白或明胶、洗涂剂(如：吐溫20、吐溫80、聚氧丙締 F68 (PluroniC F68)、胆汁酸盐）、蛋 白酶抑制剂、表面活性剂（如：十二烷基硫酸钢）、渗透促进剂、助溶剂（如：甘油、聚乙締甘 油）、抗氧化剂(如:抗坏血酸、偏亚硫酸钢、下径茵酸）、稳定剂(如:径丙基纤维素、径丙基甲 基纤维素）、增粘剂（如：卡波姆、胶体二氧化娃、乙基纤维素、瓜耳胶）、甜味剂（如：阿司帕 坦、巧樣酸）、防腐剂（如：硫柳隶、节醇、尼泊金类）、润滑剂（如：硬脂酸、硬脂酸儀、聚乙二 醇、十二烷基硫酸钢）、助流剂（如：胶体二氧化娃）、增塑剂（如：献酸二乙醋、巧樣酸=乙 醋）、乳化剂(如：卡波姆、径丙基纤维素、十二烷基硫酸钢）、聚合物包衣剂(如：泊洛沙姆或 泊洛沙胺）、包衣剂和成膜剂(如：乙基纤维素、丙締酸醋、聚甲基丙締酸醋)和/或辅剂。上述 赋形剂中的每种均代表本发明的一个独立的实施方案。
[0223] 在另一实施方案中，本文提供的药物组合物是控释组合物，即：其中多不饱和脂肪 酸和/或尿巧在给药后的一段时间释放的组合物。控释组合物或持续释放的组合物包括在 亲脂性储库（如:脂肪酸、蜡、油）中的制剂。在另一实施方案中，所述组合物是速释组合物， 良P :其中全部多不饱和脂肪酸和/或尿巧在给药后立即释放的组合物。
[0224] 在另一实施方案中，所述药物组合物在控释系统中递送。例如：可使用静脉内输 注、可植入渗透累、透皮贴剂、脂质体或其他给药方式给药该试剂。在一个实施方案中，可使 用累（参见Langer,上述；Sef ton,CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14: 201 (1987);Buchwald等 人，Surge巧 88:507( 1980);Saudek等人，N.Engl.J.Med.321:574( 1989)。在另一实施方案 中，可使用高分子材料;例如在微球或植入物中使用。在又一实施方案中，将控释系统置于 治疗祀如脑的附近，运样只需要全身剂量的一部分（参见例如Goodson，in Medical Applications of Controlled Release,上述，vol. 2 ,pp. 115-138( 1984);和Langer R, Science 249:1527-1533(1990)〇
[0225] 在另一实施方案中，所述组合物还包括将活性物质渗入高分子化合物如聚乳酸、 聚乙醇酸、水凝胶等的粉粒制剂之中或之上，或者渗入至脂质体、微乳、微胶粒、单层或多层 囊泡、红细胞影或球形体之上。）运样的组合物将影响物理状态、溶解度、稳定性、体内释放 速率和体内清除速率。
[0226] 本发明还包括用聚合物(如:泊洛沙姆或泊洛沙胺)包衣的颗粒组合物W及与针对 组织特异性受体、配体或抗原的抗体偶联的化合物或与组织特异性受体的配体偶联的化合 物。
[0227] 本发明还包括通过水溶性聚合物例如聚乙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物、 簇甲基纤维素、葡聚糖、聚乙締醇、聚乙締化咯烧酬或聚脯氨酸的共价连接修饰的化合物。 已知与相应的未修饰的化合物相比，修饰的化合物在静脉内注射后在血液中的半衰期显著 更长(Abuchowski等人，1981;化wmark等人，1982和Katre等人，1987)。运样的修饰还可提高 化合物在水溶液中的溶解度、消除聚集、增强化合物的理化稳定性并大大降低化合物的免 疫原性和反应性。因此，通过比未修饰化合物更少剂量或更低频率地给药运样的聚合物-化 合物加合物可能获得期望的体内生物学活性。
[0228] 通过混合、制粒或压片方法制备包含活性组分的药物组合物的制剂在本领域是熟 知的。所述活性治疗成分通常与药学可接受且与所述活性成分相容的赋形剂混合。对于口 服给药，将多不饱和脂肪酸和/或尿巧或其生理学耐受的衍生物如盐、醋、N-氧化物等与用 于该目的的常规添加剂如载体、稳定剂或惰性稀释剂混合，并通过常规方法转化为适当的 给药形式如片剂、包衣片剂、硬明胶胶囊剂或软明胶胶囊剂、水溶液剂、醇溶液剂或油溶液 剂。对于胃肠外给药，将多不饱和脂肪酸和/或尿巧或其生理学耐受的衍生物如盐、醋、N-氧 化物等转化为溶液剂、混悬剂或乳剂，如果需要，则与对于该目的常规和合适的物质如助溶 剂或其他物质一起转化。
[0229] 在另一实施方案中，活性组分作为中性的药学可接受的盐形式被配制成所述组合 物。药学可接受的盐包括与无机酸如盐酸或憐酸或者有机酸如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸 等形成的酸加成盐(与多肤或抗体分子的游离氨基形成）。从游离簇基形成的盐还可W来自 无机碱例如钢、钟、锭、巧或铁的氨氧化物W及有机碱如异丙胺、=甲胺、2-乙基氨基乙醇、 组氨酸、普鲁卡因等。
[0230] 上述添加剂、赋形剂、制剂和给药方法中的每种均代表本发明的一个独立的实施 方案。
[0Z31] 实验详述 脚。实施例1 脚引用W -3脂肪酸处理PC-12细胞提高憐脂合成 脚4] 材料与实验方法
[0235] 试剂
[0236] 从Perkin-Elmer (Boston ,MA)获得I4C标记的氯化胆碱。从Biomol (Plymouth Meeting,PA)获得DHA、油酸或栋桐酸。从Amersham Biosciences Corp(Piscataway,NJ)获 得I4C-胆碱。
[0237] 细胞培养物
[023引将PC-12细胞保持在达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM) + 10%胎牛血清(FBS)中。 为进行实验，将细胞生长于一式五份胶原铺板的35毫米(mm)培养皿中。将细胞在含有 胆碱+/-5微摩尔(山0畑A、油酸或栋桐酸