用作组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的苯甲酰胺衍生物的制作方法

专利名称：用作组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的苯甲酰胺衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及苯甲酰胺衍生物或其可药用盐或体内可水解酯或酰胺。这些苯甲酰胺衍生物具有组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂活性，因此在治疗与癌症(Marks等，Nature Reviews，1，194-202，(2001))，囊肿性纤维化(Li，S.等，J.Biol.Chem.，274，7803-7815，(1999))，亨廷顿舞蹈病(Steffan，J.S.等，Nature，413，739-743，(2001))和镰状细胞贫血(Gabbianelli，m.et al.，Blood，95，3555-3561，(2000))有关的疾病症状中是有价值的，因此用于治疗温血动物，例如人的方法中。本发明还涉及所述苯甲酰胺衍生物的制备，涉及含有它们的药物组合物和它们在生产用于在温血动物，例如人中抑制HDAC药物的方法。
在真核细胞中，DNA是紧凑的以避免转录因子的辅助性。当细胞被活化时，该紧凑的DNA变成有用的DNA结合蛋白质，从而，允许基因转录的诱导(Beato，m.，J.Med.Chem.，74，711-724(1996)；Wolffe，A.P.，Nature，387，16-17(1997))。核DNA结合组蛋白形成称为染色质的配合物。该核组蛋白，称为H2A、H2B、H3和H4，被DNA的146个碱基对环绕，形成染色质的基础单元，核小体。核组蛋白的N-端尾部含有赖氨酸，它们是进行转录后乙酰基化的位置。乙酰基化中和支链的电势以在赖氨酸支链上形成正电荷，这被认为影响了染色质的结构。
组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)是含锌酶，它催化由聚簇在核小体组蛋白氨基端附近的赖氨酸残基的ε-氨基末端除去乙酰基。HDAC可分成两类，由酵母Rpd3类蛋白质代表的第一类(HDAC 1，2，3和8)和由酵母Hdal类蛋白质代表的第二类(HDAC 4，5，6，7，9和10)。乙酰基的可逆过程在转录调节和细胞周期进行中是重要的。HDAC反常与若干癌症有关，HDAC抑制剂，例如曲古抑菌素A(由吸水链霉菌分离的天然产物)已显示明显的抗肿瘤效果和细胞生长的抑制(Meinke，P.T.，Currentmedicinal Chemistry，8，211-235(2001))。Yoshida等，Exper.Cell Res.，177，122-131(1988)教导了曲古抑菌素A引起小鼠纤维原细胞在细胞周期的G1和G2相的抑制，从而HDAC参与细胞周期调节。此外，曲古抑菌素A还显示诱导末端区分，抑制细胞生长，避免肿瘤中大鼠中的形成(Finnin等，Nature，401，188-193(1999))。
至今，在现有技术中仅已知少数的HDAC抑制剂，因此人们需要鉴别其它的HDAC抑制剂。
因此，本发明提供式(I)化合物 其中环A是杂环基，其中，如果所述杂环基包含-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代；R1是在碳上的取代基，其选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基；G、J和K分别选自C1-8烷基、C2-8烯基、C1-8链烷酰基、C1-8烷基磺酰基、C1-8烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-8烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-8烷基)2氨基甲酰基、苄氧基羰基、苯甲酰基、苯基磺酰基、芳基、芳基C1-6烷基或(杂环基)C1-6烷基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或C1-6烷基取代；Q是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基氨基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、(杂环基)C1-6烷氧基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、苯基或苯基C1-6烷基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)C(O)N(Rb)-、-N(Ra)C(O)O-、-OC(O)N(Ra)-、-C(O)N(Ra)-、-S(O)r-、-SO2N(Ra)-、-N(Ra)SO2-；其中Ra和Rb分别选自氢或任选被一个或多个F取代的C1-6烷基和r是0-2；D和F分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基；m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同；R2是卤素；n是0，1或2；其中R2可以是相同或不同的；R3是氨基或羰基；R4是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧基、C1-3链烷酰基、C1-3链烷酰基氧基、N-(C1-3烷基)氨基、N，N-(C1-3烷基)2氨基、C1-3链烷酰氨基、N-(C1-3烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-3烷基)2氨基甲酰基、C1-3烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-3烷氧基羰基、N-(C1-3烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-3烷基)2氨磺酰基；p是0，1或2；其中R4可以是相同或不同的；或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺；其前提是所述化合物不是N-(2-氨基-6-羟基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；N-(2-氨基-6-甲基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；N-(2-氨基苯基)-4-(1-叔丁氧基羰基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；或N-(2-氨基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺。
根据本发明的另一方面，其提供式(I)化合物，其中环A是杂环基；R1是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基或基团(B-E-)；其中，B选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、苯基、杂环基、苯基C1-6烷基或杂环基C1-6烷基；其中B可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E是-N(Ra)-、-O-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)-、-N(Ra)C(O)-、-C(O)N(Ra)-、-S(O)r-、-SO2N(Ra)-、-N(Ra)SO2-；其中Ra是氢或任选被一个或多个D取代的C1-6烷基和r是0-2；D分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基；G选自C1-4烷基、C1-4链烷酰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-4烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-4烷基)2氨基甲酰基、苄基、苄氧基羰基、苯甲酰基和苯基磺酰基；m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同；R2是卤素；n是0，1或2；其中R2可以是相同或不同的；R3是氨基或羰基；R4是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧基、C1-3链烷酰基、C1-3链烷酰基氧基、N-(C1-3烷基)氨基、N，N-(C1-3烷基)2氨基、C1-3链烷酰氨基、N-(C1-3烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-3烷基)2氨基甲酰基、C1-3烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-3烷氧基羰基、N-(C1-3烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-3烷基)2氨磺酰基；p是0，1或2；其中R4可以是相同或不同的；或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺；其前提是所述化合物不是N-(2-氨基-6-羟基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；N-(2-氨基-6-甲基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；
N-(2-氨基苯基)-4-(1-叔丁氧基羰基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；或N-(2-氨基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺。
在说明书中，术语“烷基”包括直链或支链烷基，例如“C1-8烷基”和“C1-6烷基”包括甲基、乙基、丙基、异丙基、戊基、己基、庚基和叔丁基。然而，涉及单个的烷基，例如‘丙基’仅具体地指直链情况，涉及单个的支链烷基，例如‘异丙基’仅具体地指支链情况。术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
当任选的取代基选自“一个或多个”基团时，它应理解为该定义包括包括可以是选自特定组中的一个的所有取代基，或选自特定组的两个或多个的取代基。
“杂环基”是含有3-12个原子的饱和的，部分饱和或不饱和的，单或双环，其中至少一个原子选自N、S或O，除非另有说明，它们可以是碳或氮连接的，其中环硫原子可任选氧化以形成S-氧化物。“杂环基”优选是含有5或6个原子的饱和，部分饱和或不饱和单环，其中至少一个原子选自N，S或O，或是8-10元双环，除非另有说明，它们可以是碳或氮连接的，其中环硫原子可任选氧化以形成S-氧化物。术语“杂环基”的实例和合适的基团是噻唑烷基、吡咯烷基、1，3-苯并二氧戊环基、1，2，4-噁二唑基、2-氮杂双环[2.2.1]庚基、吗啉基、四氢呋喃基、呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、硫代吗啉基、1，3-二氧戊环基、高哌嗪基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、噁二唑基、四唑基、噁唑基、噻吩并嘧啶基、噻吩并吡啶基、噻吩并[3，2d]嘧啶基、1，3，5-三嗪基、嘌呤基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲唑基、喹唑啉基、噌啉基、2，3-二氮杂萘基、喹喔啉基、1，5-二氮杂萘基、苯并三唑基、吡咯并噻吩基、咪唑并噻吩基、异噁唑基、咪唑基、噻二唑基、异噻唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、吡喃基、吲哚基、嘧啶基、噻唑基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、喹啉基、喹唑啉基和1-异喹啉基。
“杂环基团”是含有3-12个原子的饱和的，部分饱和或不饱和的，单或双环，其中至少一个原子选自N、S或O，除非另有说明，它们可以是碳或氮连接的，其中CH2基团可任选被C(O)替代，和其中环硫原子可任选氧化以形成S-氧化物。“杂环基团”优选是含有5或6个原子的饱和，部分饱和或不饱和单环，其中至少一个原子选自N，S或O，或是9或10元双环，除非另有说明，它们可以是碳或氮连接的，其中CH2基团可任选被C(O)替代，和其中环硫原子可任选氧化以形成S-氧化物。术语“杂环基”的实例和合适的基团是吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、2，5-二氧代吡咯烷基、2，4-二氧代咪唑烷基、2-氧代-1，3，4-三唑啉基、噁唑烷基、2-噁唑酮基、5，6-二氢-尿嘧啶基、1，3-苯并二氧戊环基、1，2，4-噁二唑基、2-氮杂二环[2.2.1]庚基、吗啉基、2-氧代四氢呋喃基、四氢呋喃基、呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、硫代吗啉基、1，1-二氧代硫代吗啉基、1，3-二氧戊环基、高哌嗪基、硫代苯基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、噻吩并[3，2d]嘧啶基、1，3，5-三嗪基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、1，2，3，4-四氢喹啉基、四氢异喹啉基、咪唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并硫代苯基、苯并呋喃基、吲唑基、喹唑啉基、噌啉基、2，3-二氮杂萘基、喹喔啉基、1，5-二氮杂萘基、噁唑基、异噁唑基、吡唑基、四唑基、噻二唑基、异噻唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、吡喃基、吲哚基、异吲哚基、嘧啶基、噻唑基、吡唑基、3-吡咯啉基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、吡啶酮基、嘧啶酮基和1-异喹啉基。
“芳基”是例如苯基、茚基、二氢化茚基、萘基、四氢萘基或芴基，优选苯基。
“C1-6链烷酰氧基”的实例是乙酰氧基。“C1-8烷氧基羰基”、“C1-6烷氧基羰基”和“C1-4烷氧基羰基”的实例包括甲氧基羰基、乙氧基羰基、正和叔丁氧基羰基。C2-6炔基的实例是2-丙炔基。“C1-6烷氧基”的实例是甲氧基、乙氧基和丙氧基。“C1-6链烷酰氨基”和“C1-3链烷酰氨基”的实例包括甲酰氨基、乙酰氨基和丙酰氨基。“C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2”的实例包括C1-4烷基磺酰基、C1-3烷基S(O)a、甲硫基、乙硫基、甲基亚硫酰基、乙基亚硫酰基、甲磺酰基和乙磺酰基。“C1-8链烷酰基”、“C1-6链烷酰基”和C1-4链烷酰基的实例包括C1-3链烷酰基、丙酰基和乙酰基。“N-C1-6烷基氨基”和N-(C1-3烷基)氨基”的实例包括甲基氨基和乙基氨基。“N，N-(C1-6烷基)2氨基”和N，N-(C1-2烷基)2氨基的实例包括二-N-甲基氨基、二-(N-乙基)氨基、二-(N-丁基)氨基和N-乙基-N-甲基氨基。“C2-8烯基”的实例是C2-6烯基和C2-3烯基，包括乙烯基、烯丙基和1-丙烯基。“N-(C1-8烷基)氨磺酰基”和“N-(C1-6烷基)氨磺酰基”的实例是N-(C1-3烷基)氨磺酰基、N-(甲基)氨磺酰基和N-(乙基)氨磺酰基。“N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基”的实例是N，N-(C1-3烷基)2氨磺酰基，N，N-(二甲基)氨磺酰基和N-(甲基)-N-(乙基)氨磺酰基。“N-(C1-8烷基)氨基甲酰基”和“N-(C1-6烷基)氨基甲酰基”的实例是N-(C1-4烷基)氨基甲酰基、N-(C1-3烷基)氨基甲酰基、甲基氨基乙基羰基和乙基氨基羰基。“N，N-(C1-8烷基)2氨基甲酰基”和“N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基”的实例是N，N-(C1-4烷基)2氨基甲酰基、N，N-(C1-2烷基)2氨基甲酰基、二甲基氨基羰基和甲基乙基氨基羰基。“(杂环基)C1-6烷基”的实例包括哌啶-1-基甲基、哌啶-1-基乙基、哌啶-1-基丙基、吡啶基甲基、3-吗啉代丙基、2-吗啉代乙基和2-嘧啶-2-基乙基。“(杂环基)C1-6烷氧基”的实例包括(杂环基)甲氧基、(杂环基)乙氧基和(杂环基)丙氧基。“芳基C1-6烷基”的实例包括苄基、2-苯基乙基、2-苯基丙基和3-苯基丙基。“芳氧基”的实例包括苯氧基和萘氧基。“C3-8环烷基”的实例包括环丙基和环己基。“C3-8环烷基C1-6烷基”的实例包括环丙基甲基和2-环己基丙基。“C1-6烷氧基羰基氨基”的实例包括甲氧基羰基氨基和叔丁氧基羰基氨基。
在说明书中，复合术语用于描述包含超过一个官能团的基团，例如芳基C1-6烷基。该术语被认为是本领域技术人员可理解的。例如芳基C1-6烷基包括被芳基取代的C1-6烷基，例如包括苄基、2-苯基乙基、2-苯基丙基和3-苯基丙基。
本发明化合物的合适的可药用盐是，例如本发明的充分碱性的化合物的酸加成盐，例如与无机或有机酸，例如乙酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、柠檬酸或马来酸的酸加成盐。
此外，充分酸性的本发明的化合物的合适可药用盐是碱金属盐，例如钠或钾盐、碱土金属盐，例如钙或镁盐、铵盐或与提供生物可接受的阳离子的有机碱形成的盐，例如与甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、吗啉或三(2-羟基乙基)胺形成的盐。
式(I)化合物可以式(I)化合物的体内可水解酯或体内可水解酰胺的形式给药。
含有羧基或羟基的式(I)化合物的可水解酯是，例如可药用的酯，它在人体或动物体内水解以产生母体到或醇。用于羧基的合适可药用酯包括C1-6烷氧基甲基酯，例如甲氧基甲基；C1-6链烷酰氧基甲基酯，例如新戊酰氧基甲基、邻苯二甲酰基酯；C3-8环烷氧基羰基氧基C1-6烷基酯，例如1-环己基羰基氧基；1，3-二氧戊环烯-2-酮基甲基酯，例如5-甲基-1，3-二氧戊环烯-2-酮基甲基；和C1-6烷氧基羰基氧基乙酯，例如1-甲氧基羰基氧基乙基，可在本发明的化合物中的任何羧基上形成。
含有羟基的式(I)化合物的体内可水解酯包括无机酯，例如磷酸酯和α-酰氧基烷基醚和相关的化合物，由于酯的体内水解断裂得到母体羟基。α-酰氧基烷基醚的实例包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰氧基甲氧基。羟基体内可水解酯形成基团的选择包括链烷酰基、苯甲酰基、苯基乙酰基和取代的苯甲酰基和苯基乙酰基、烷氧基羰基(得到烷基碳酸酯)、二烷基氨基甲酰基和N-(N，N-二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(得到氨基甲酸酯)、N，N-二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。在苯甲酰基上的取代基的实例包括由环氮原子经亚甲基连接于苯甲酰基环的3-或4-位的吗啉代和哌嗪子基。
含有羧基的式(I)化合物的体内可水解酰胺的合适实例是，例如N-C1-6烷基或N，N-二-C1-6烷基酰胺，例如N-甲基、N-乙基、N-丙基、N，N-二甲基、N-乙基-N-甲基或N，N-二乙基酰胺。
式(I)的某些化合物可带有手性中心和/或几何异构体中心(E-和Z-异构体)，应理解本发明包含所有具有HDAC抑制活性的该旋光、非对映异构体和几何异构体。
本发明涉及具有HDAC抑制活性的式(I)化合物的任何和所有互变异构体形式。
环A、R1、R2、R3、R4、m、n和p的其它数值如下。如果需要，该数值可与任何上文或下文定义的任何定义、权利要求或实施方案结合使用。
环A是吡啶基、喹啉基、吲哚基、嘧啶基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、噻唑基、噻吩基、噻吩并嘧啶基、嘌呤基、三嗪基、噁唑基、吡唑基或呋喃基；其中如果环A含有-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代。
环A是吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、喹啉-8-基、嘧啶-6-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吗啉-4-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-基、哌嗪-4-基、哒嗪-5-基、吡嗪-6-基、噻唑-2-基、噻吩-2-基、噻吩并[3，2d]嘧啶基、噻吩并[3，2b]嘧啶基、噻吩并[3，2b]吡啶基、嘌呤-6-基或三嗪-6-基；其中如果环A含有-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代。
环A是吡啶基、喹啉基、嘧啶基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、吡嗪基、噻唑基或呋喃基。
环A是吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、喹啉-8-基、哒嗪-2-基、呋喃-3-基、吗啉基、噻唑-2-基、嘧啶-6-基、哌啶-4-基或哌嗪-4-基。
环A是吡啶-4-基、吡啶-3-基、喹啉-8-基、哌啶-4-基或哌嗪-4-基。
R1是在碳上的取代基，其选自卤素、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N-(C1-6烷基)氨基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是羟基、巯基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或C1-6链烷酰氨基；G、J和K分别选自C1-8烷基、C2-8烯基、C1-8链烷酰基、芳基、芳基C1-6烷基或(杂环基)C1-6烷基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或C1-6烷基取代；Q是氰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基氨基、芳基、芳氧基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、苯基或苯基C1-6烷基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；
E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)C(O)N(Rb)-、-N(Ra)C(O)O-、-OC(O)N(Ra)-、-C(O)N(Ra)-、-S(O)r-、-SO2N(Ra)-、-N(Ra)SO2-；其中Ra和Rb分别选自氢或任选被一个或多个F取代的C1-6烷基和r是0-2；D和F分别选自卤素、C1-6烷氧基或N，N-(C1-6烷基)2氨基。
R1是在碳上的取代基，其选自氟、氯、氨基、甲基、乙基、丙基、甲氧基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-丙基氨基、N-丁基氨基、苯基、萘基乙基、哌嗪-1-基、哌啶-1-基、哌啶-4-基、2-(硫代甲基)-嘧啶-4-基、四氢呋喃-2-基甲基、四氢吡喃-2-基甲基、1，2，5-噻二唑-3-基乙基、哌啶-1-基甲基、吡啶-2-基甲基，或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是羟基、甲基、乙基、乙氧基、N，N-(二乙基)氨基、N，N-(二丁基)氨基，或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自氟、氯、溴、硝基、氰基、羟基、甲氧基、N，N-(二甲基)氨基或甲基羰基氨基；G、J和K分别选自甲基、乙基、丙基、戊基、2-甲基丁基、丁基、乙酰基、苯甲酰基、3-(吡咯-1-基)丙基或吡咯烷-2-酮-(5S)-甲基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或甲基取代；Q是氰基、羟基、甲氧基、乙氧基、甲基羰基氧基、甲氧基羰基、叔丁氧基羰基氨基、苯基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自甲基、乙基、丙基、环己基、苯基、苄基、1，2，3，4-四氢喹啉基、3-吗啉代丙基、2-吗啉代乙基、2-吡咯烷-1-基乙基、3-吗啉代丙基、3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基、2-哌啶-1-基乙基、3-哌啶-1-基丙基、吡啶-3-基甲基或咪唑-1-基丙基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)-、-NHC(O)-、-N(Ra)C(O)O-；其中Ra是氢或任选被一个或多个F取代的甲基；
D和F分别选自氟、甲氧基或乙氧基。
R1是氟、氯、氨基、甲基、甲氧基、3-吗啉-4-基丙基氨基、(3-吗啉-4-基)乙基氨基、乙酰基、苄基、甲氧基羰基甲基、2-吡咯烷-1-基乙氧基、3-吗啉代丙氧基、N-(2-氟苯基)丙酰胺、4-(二乙基氨基)苯基羰基甲基、3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基氨基、2-哌啶-1-基乙基氨基、2-[N，N-(二乙基)氨基]乙基氨基、吡啶-3-基甲基氨基、3-哌啶-1-基丙基氨基、咪唑-1-基丙基氨基、3-甲氧基丙基氨基、3-吗啉代丙基氨基、哌嗪-1-基、N-乙基氨基、4-甲基哌嗪-1-基、1-(3-苯氧基)丙基、1-(3-氰基苯基)甲基、1-(4-氰基苯基)甲基、四氢呋喃-2-基甲基、1-(3-苄基氧基)丙基、3-甲氧基苄基、2，3-二羟基丙基、2-(甲基羰基氧基)乙基、3-(吡咯-1-基)丙基、1-[3-(2-甲氧基乙氧基)]丙基、2-(4-乙酰氨基苯基氧基)乙基、2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基、2-(叔丁氧基羰基氨基)丙基、2-[(2-甲氧基苯基)氧基]乙基、(1，2，3，4-四氢喹啉-1-基)乙酰基、2-[N-(2-氟苯基)乙酰胺]乙基、甲氧基羰基甲基、2-(乙氧基)乙基、4-甲基戊-3-烯基、四氢吡喃-2-基甲基、1-(2S)-2-甲基丁基、4-(苄氧基)丁基、2-[4-(硝基)苯氧基]乙基、2-[N，N-(二丁基)氨基]乙基氨基、3-[(N-甲基-N-苯基)氨基]丙基氨基、N-3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]丙基氨基、2-[4-(乙酰氨基)苯氧基]乙基、2-[4-(羟基苯氧基)]乙基、1，2，5-噻二唑-3-基乙基、哌啶-1-基甲基、2-[4-(氯)苯氧基]乙基、吡咯烷-2-酮-(5S)-甲基、苯基氨基羰基氧基甲基、环己基氨基羰基氧基甲基、2-(硫代甲基)-嘧啶-4-基或吡啶-2-基甲基。
R1是卤素、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-3链烷酰基氧基、N-(C1-3烷基)氨基、N，N-(C1-3烷基)2氨基、C1-3链烷酰基氨基、N-(C1-3烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-3烷基)2氨基甲酰基。
R1是卤素、氨基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
R1是卤素、氨基、甲基或甲氧基。
m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同的。
m是0，1或2；其中R1可以是相同或不同的。
m是0或1。
m是0。
m是1。
R2是卤素。
R2是氟或氯。
R2是氯。
n是0，1或2，其中R2可以是相同或不同的。
n是0或1。
n是0。
n是1。
R3是氨基或羟基。
R3是氨基。
R3是羟基。
R4是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基或氨基甲酰基。
R4是卤素、氰基、三氟甲基可三氟甲氧基。
R4是卤素。
p是0，1或2，其中R4可以是相同或不同的。
p是0或1。
p是0。
p是1。
因此，在本发明的其它方面，其提供了式(I)化合物(如上所述)，其中环A是吡啶基、喹啉基、吲哚基、嘧啶基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、吡嗪基、噻唑基、噻吩基、噻吩并嘧啶基、噻吩并吡啶基、嘌呤基、三嗪基、噁唑基、吡唑基或呋喃基；其中如果环A含有-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代；R1是在碳上的取代基，其选自卤素、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N-(C1-6烷基)氨基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是羟基、巯基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；
Y和Z分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或C1-6链烷酰氨基；G、J和K分别选自C1-8烷基、C2-8烯基、C1-8链烷酰基、芳基、芳基C1-6烷基或(杂环基)C1-6烷基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或C1-6烷基取代；Q是氰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基氨基、芳基、芳氧基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、苯基或苯基C1-6烷基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)C(O)N(Ra)-、-N(Ra)C(O)O-、-OC(O)N(Ra)-、-C(O)N(Ra)-、-S(O)r-、-SO2N(Ra)-、-N(Ra)SO2-；其中Ra和Rb分别选自氢或任选被一个或多个F取代的C1-6烷基和r是0-2；D和F分别选自卤素、C1-6烷氧基或N，N-(C1-6烷基)2氨基；m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同的；R2是氟或氯；n是0，1或2，其中R2可以是相同或不同的；R3是氨基或羟基；R4是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基或氨基甲酰基；p是0，1或2，其中R4可以是相同或不同的；或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
因此，在本发明的其它方面，其提供了式(I)化合物(如上所述)，其中环A是吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、喹啉-8-基、嘧啶-6-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吗啉-4-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-基、哌嗪-4-基、哒嗪-5-基、吡嗪-6-基、噻唑-2-基、噻吩-2-基、噻吩并[3，2d]嘧啶基、噻吩并[3，2b]嘧啶基、噻吩并[3，2b]吡啶基、嘌呤-6-基或三嗪-6-基；其中如果环A含有-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代；R1是在碳上的取代基，其选自氟、氯、氨基、甲基、乙基、丙基、甲氧基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-丙基氨基、N-丁基氨基、苯基、萘基乙基、哌嗪-1-基、哌啶-1-基、哌啶-4-基、2-(硫代甲基)-嘧啶-4-基、四氢呋喃-2-基甲基、四氢吡喃-2-基甲基、1，2，5-噻二唑-3-基乙基、哌啶-1-基甲基、吡啶-2-基甲基，或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是羟基、甲基、乙基、乙氧基、N，N-(二乙基)氨基、N，N-(二丁基)氨基，或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自氟、氯、溴、硝基、氰基、羟基、甲氧基、N，N-(二甲基)氨基或甲基羰基氨基；G、J和K分别选自甲基、乙基、丙基、戊基、2-甲基丁基、丁基、乙酰基、苯甲酰基、3-(吡咯-1-基)丙基或吡咯烷-2-酮-(5S)-甲基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或甲基取代；Q是氰基、羟基、甲氧基、乙氧基、甲基羰基氧基、甲氧基羰基、叔丁氧基羰基氨基、苯基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自甲基、乙基、丙基、环己基、苯基、苄基、1，2，3，4-四氢喹啉基、3-吗啉代丙基、2-吗啉代乙基、2-吡咯烷-1-基乙基、3-吗啉代丙基、3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基、2-哌啶-1-基乙基、3-哌啶-1-基丙基、吡啶-3-基甲基或咪唑-1-基丙基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)-、-NHC(O)-、-N(Ra)C(O)O-；其中Ra是氢或任选被一个或多个F取代的甲基；D和F分别选自氟、甲氧基或乙氧基；m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同的；
R2是氟；n是0或1；R3是氨基；R4是卤素；p是0，1或2，其中R4可以是相同或不同的；或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
在另一方面，本发明的优选化合物是实施例的任何之一或其可药用盐或可水解酯或酰胺。
在本发明的另一方面，其提供式(I)化合物或其可药用盐。
本发明的另一方面提供制备式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯的方法，该方法(其中环A、R1、R2、R3、R4、m、n和p是如式(I)中所定义，除非另有说明)包括(a)式(II)化合物 其中X是反应基团，与式(III)化合物反应 其中L1和L2是配体；(b)式(IV)化合物
其中L1和L2是配体，与式(V)化合物反应 其中X是反应基团；或(c)在4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物存在下，式(VI)化合物 与式(VII)化合物反应
随后，如果需要i)转化式(I)化合物为式(I)的另一化合物；和/或ii)除去任何保护基团。
用于方法(a)，(b)或(c)的合适碱是，例如有机胺碱，例如吡啶、1，6-二甲基吡啶、三甲基吡啶、4-二甲基氨基吡啶、三乙胺、吗啉、N-甲基吗啉或二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，或例如碱金属或碱土金属碳酸盐或氢氧化物，例如碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙、氢氧化钠或氢氧化钾，或例如碱金属氢化物，例如氢化钠，或金属醇盐，例如乙醇钠。
合适的反应基团X是，例如卤素、烷氧基、芳氧基或磺酰氧基，例如氯、溴、甲氧基、苯氧基、甲磺酰氧基、三氟甲基磺酰氧基或甲苯-4-磺酰氧基。反应便利地在合适惰性溶剂或稀释剂存在下进行，惰性溶剂或稀释剂是例如醇或酯，例如甲醇、乙醇、异丙醇或乙酸乙酯；卤代溶剂，例如二氯甲烷、氯仿或四氯化碳或醚，例如四氢呋喃、1，2-二甲氧基乙烷或1，4-二噁烷；芳香溶剂，例如甲苯或偶极非质子传递溶剂，例如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷-2-酮或二甲基亚砜。反应便利地在例如10-250℃温度范围，优选在40-80℃的范围内进行。
存在于硼原子上的合适配体L1和L2包括，例如羟基、(1-4C)烷氧基或(1-6C)烷基配体，例如羟基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、甲基、乙基、丙基、异丙基或丁基配体。此外，配体L1和L2可连接，使得它们和与它们相连的硼原子一起形成环。例如L1和L2一起可定义氧基-(2-4C)亚烷基氧基，例如氧基亚乙基氧基或氧基三亚甲基-氧基，从而和与它们相连的硼原子一起形成环硼酸酯基；用于方法(a)或(b)的合适催化剂包括，例如金属催化剂，例如钯(O)、钯(II)、镍(O)或镍(II)，例如四(三苯基膦)钯(O)、氯化钯(II)、溴化钯(II)、双(三苯基膦)氯化钯(II)、四(三苯基膦)镍(O)、氯化镍(II)、溴化镍(II)或双(三苯基膦)氯化镍(II)。此外，可便利地加入游离基引发剂，例如偶氮化合物，例如偶氮(双异丁基腈)；显然，在本发明的化合物中的某些环取代基可用标准芳香取代反应引入或通过在上述方法之前或随后的常规官能团改性产物，同样包括在本发明的方法中。该反应和改性包括，例如通过芳香取代反应、取代基还原、取代基烷基化和取代基氧化引入取代基。用于该方法的试剂和反应条件是化学领域中已知的。芳香取代反应的具体实例包括使用浓硝酸引入硝基、使用例如酰氯或路易斯酸(例如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下引入酰基、使用烷基卤和路易斯酸(例如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下引入烷基。改性的具体实例包括硝基通过例如用镍催化剂催化氢化或在盐酸和加热下用铁处理还原成氨基；烷基硫基氧化为烷基亚硫酰基或烷基磺酰基。
还显然，在本文上述的某些反应中，必需/需要保护在化合物中的任何敏感基团。保护是必需或需要的情况和用于保护的合适方法是本领域技术人员已知的。根据标准实践可使用常规保护基团(例如参见T.W.Green，Protectivegroups in Organic Synthesis，John Wileyand Sons，1991)。因此，如果反应物包括基团，例如氨基、羧基或羟基，它会需要在某些上述反应中保护基团。
用于氨基或烷基氨基的合适保护基团是，例如酰基，例如链烷酰基，如乙酰基；烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基；芳基甲氧基羰基，例如苄氧基羰基；或芳酰基，例如苯甲酰基。用于上述保护基团的脱保护条件需要根据保护基团的选择而变化。因此，例如酰基，例如链烷酰基或烷氧基羰基或芳酰基可通过用合适的碱，例如碱金属氢氧化物，例如氢氧化锂或钠水解除去。此外，酰基，例如叔丁氧基羰基可例如通过用合适的酸，例如盐酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸处理除去，芳基甲氧基羰基，例如苄氧基羰基可例如通过在催化剂，例如钯/碳存在下氢化，或通过用路易斯酸，例如三(三氟乙酸酸)硼处理除去。用于伯氨基的合适的其它保护基团是邻苯二甲酰基，它可通过用烷基胺，例如二甲基氨基丙基胺或用肼处理除去。
用于羟基的合适保护基团是，例如酰基，例如链烷酰基，例如乙酰基；芳酰基，例如苯甲酰基；或芳基甲基，例如苄基。用于上述保护基团的脱保护条件需要根据保护基团的选择而变化。因此，例如酰基，例如链烷酰基或芳酰基可例如通过用合适的碱，例如碱金属氢氧化物，例如氢氧化锂或钠水解除去。此外，芳基甲基，例如苄基可例如通过在催化剂，例如钯/碳存在下氢化除去。
用于羧基的合适保护基团是，例如酯化基团，例如甲基或乙基，它们可，例如通过用碱，例如氢氧化锂水解除去，或例如叔丁基，它可，例如通过用酸，例如有机酸，例如三氟乙酸处理除去，或对于苄基，它可例如通过在催化剂，例如钯/碳存在下氢化除去。
保护基团可在合成中在任何方便的阶段使用化学领域已知的常规技术除去。
生物试验如下试验可用于测量本发明的化合物作为HDAC抑制剂、作为由人体子宫颈癌细胞系HeLa制备的核提取物的混合组蛋白脱乙酰基酶体外抑制剂、作为在Hi5插入细胞中产生的重组人体HDAC1体外抑制剂、和作为在全细胞中组蛋白H3乙酰基化的体外诱导物的效果。
(a)混合组蛋白脱乙酰基酶的体外酶试验HDAC抑制剂用由人体子宫颈癌细胞系HeLa制备的核提取物的混合组蛋白脱乙酰基酶筛选。
脱乙酰基酶试验在40μl反应中进行。在15μl反应缓冲液(25mMTrisHCl(pH 8)，137mMNaCl，2.7mMKCl，1mMMgCl2)中稀释的2.5μg核提取物单独地与缓冲液(5μl)或与含有化合物(5μl)的缓冲液在室温下混合30分钟，随后向反应物中加入在20μl缓冲液中稀释的25μMfluor-de-lys酶作用物(Biomol)，在室温下培养1小时。反应通过加入等体积(40μl)的含有2μM Trichostatin A的fluor de lys显影剂(Biomol)停止。使反应物在室温下显影30分钟，随后在360nM激发波长和465nM发射波长下测量荧光。HDAC酶抑制剂的IC50值通过确定单个化合物的剂量响应曲线和测定产生最大信号(无抑制剂对照)50％下降的抑制剂浓度而确定。
(b)重组HDAC1的体外酶试验HDAC抑制剂用在Hi5插入细胞中产生的重组人体HDAC1筛选，酶用FLAG标签在基因的C-末端克隆和用SIGMA(A2220)的Anti-FLAGm2琼脂糖亲和纯化。
脱乙酰基酶试验在50μl反应中进行。在15μl反应缓冲液(25mMTrisHCl(pH 8)，137mMNaCl，2.7mMKCl，1mMMgCl2)中稀释的75ng核提取物单独地与缓冲液(5μl)或与含有化合物(10μl)的缓冲液在室温下混合30分钟，随后向反应物中加入在25μl缓冲液中稀释的25μMfluor-de-lys酶作用物(Biomol)，在室温下培养1小时。反应通过加入等体积(50μl)的含有2μM Trichostatin A的fluor de lys显影剂(Biomol)停止。使反应物在室温下显影30分钟，随后在360nM激发波长和465nM发射波长下测量荧光。HDAC酶抑制剂的IC50值通过确定单个化合物的剂量响应曲线和测定产生最大信号(无抑制剂对照)50％下降的抑制剂浓度而确定。
(c)在全细胞中组蛋白脱乙酰基酶活性的体外酶试验在全细胞中使用免疫组织化学进行组蛋白H3乙酰基化，使用Cellomics arrayscan分析。A549细胞以1×104细胞/孔在96孔板中接种，使之粘附过夜。它们用抑制剂处理24小时，随后在tris缓冲盐水(TBS)中在1.8％甲醛中固定1小时。细胞用冰冷却的甲醇通透5分钟，在TBS中漂洗，随后在TBS3％低脂干牛奶中阻断90分钟。细胞随后用在TBS3％奶中以1比500稀释的专用于乙酰基化组蛋白H3的多克隆抗体(Upstate #06-599)培养1小时。细胞用TBS漂洗3次，随后用在TBS1％胎牛血清(Sigma #B6917)中的荧光素共轭的第二抗体(Molecular Probes#A11008)& Hoechst 333542(1μg/ml)(MolecularProbes#H3570)培养1小时。通过用TBS漂洗3次除去未结合的抗体，在最终漂洗后，向细胞中加入100μl TBS，板密封，使用Cellomicsarrayscan分析。
HDAC酶抑制剂的EC50值通过确定单个化合物的剂量响应曲线和测定产生最大信号(参考化合物对照-Trichostatin A(Sigma))的50％的抑制剂浓度而确定。
尽管根据预计，式(I)化合物的药理学性质随结构改变变化，但通常式I化合物所具有的活性可在上述试验(a)和(b)的一项或多项以如下浓度或剂量说明-试验(a)-IC50在例如，＜50.0μM范围；
试验(b)-IC50在例如，＜2.5μM范围；试验(c)-EC50在例如，＜9.0μM范围；根据本发明的另一方面，其提供了药物组合物，其含有如上定义式(I)化合物或其可药用盐或体内可溶解酯或酰胺，和可药用的稀释剂或载体。
组合物可以适用于口服给药，例如片剂或胶囊形式，适用于作为无菌溶液、悬浮液或乳液的肠胃外注射(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或灌输)形式、作为软膏或乳油的适用于局部给药的形式或作为栓剂适用直肠给药形式。
通常上述组合物可以常规方法使用常规赋形剂制备。
式(I)化合物通常向温血动物以每平方米动物体表面积5-5000mg，即约0.1-100mg/kg范围的单元剂量，通常提供治疗有效剂量。单元剂量形式，例如片剂或胶囊通常将含有，例如1-250mg活性成分，优选采用1-50mg/kg范围的日剂量。然而，日剂量将需要根据所治疗的宿主、特定的给药途径和所治疗疾病的严重程度变化。因此，最佳剂量可由治疗任何具体患者的从业者确定。
我们发现，本发明定义的化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺是有效的细胞周期抑制剂(抗细胞繁殖剂)，该性质被认为是由它们的HDAC抑制性质产生的。我们还相信本发明的化合物可包含在血管生成抑制、细胞凋亡和分化活化。因此，本发明的化合物被预期用于治疗单独地或部分地由HDAC酶传递的疾病或临床症状，即化合物可用于在需要该治疗的温血动物中产生HDAC抑制效果。因此本发明的化合物提供了以抑制HDAC酶为特征的治疗恶性细胞繁殖的方法，即化合物可用于对单独或部分地由HDAC抑制传递的抗繁殖效果。
根据本发明的一个方面，其提供了通过治疗用于治疗人体或动物体的方法的如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
因此，根据本发明的另一个方面，其提供了用作药物的如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
因此，根据本发明的另一个方面，其提供了如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺在生产用于在温血动物，例如人体中产生HDAC抑制效果的药物中的应用。
根据本发明该方面的其它特性，其提供了在所需该治疗的温血动物，例如人体中产生HDAC抑制效果的方法，其包括向所述动物给药治疗有效量的如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
因此，根据本发明的另一个方面，其提供了如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺在生产用于在温血动物，例如人体中产生细胞周期抑制(抗细胞繁殖)效果的药物中的应用。
根据本发明该方面的其它特性，其提供了在所需该治疗的温血动物，例如人体中产生细胞周期抑制(抗细胞繁殖)效果的方法，其包括向所述动物给药治疗有效量的如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
根据本发明该方面的另一特性，其提供了在所需该治疗的温血动物，例如人体中治疗癌症的方法，其包括向所述动物给药治疗有效量的如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
因此，根据本发明的另一个特性，其提供了如上定义的式(I)的74a化合物或其可药用盐或体内可水解酯或酰胺在生产用于治疗癌症的药物中的应用。
根据本发明该方面的另一特性，其提供了用于治疗癌症的如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
在本发明的另一个方面，其提供了如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺在生产用于肺癌、结肠直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、淋巴瘤和白血病的药物中的应用。
在本发明的其它方面，其提供了在所需该治疗的温血动物，例如人体中治疗肺癌、结肠直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、淋巴瘤和白血病的方法，其包括向所述动物给药治疗有效量的如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
可用本发明的治疗的癌症包括食管癌、骨髓瘤、肝细胞、胰腺和子宫颈癌、尤因瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳胰癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌[包括非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)]、胃癌、头和颈癌、脑癌、淋巴瘤和白血病。
还提供如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺，它用于治疗炎性疾病、自免疫疾病和过敏性/遗传性过敏疾病方法中。
尤其提供如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺，其用于治疗关节炎症(尤其是风湿性关节炎、骨关节炎和痛风)、肠胃道炎症(尤其是炎性肠炎、溃疡性结肠炎和胃炎)、皮肤炎症(尤其是牛皮癣、湿疹、皮炎)、多发性硬化、动脉硬化、脊椎关节病(僵硬脊椎炎、牛皮癣关节炎、与溃疡性结肠炎相关联的关节炎)、AIDS相关的神经病、系统性红斑狼疮、哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管炎、胸膜炎、成份呼吸窘迫综合症、脓血症、急性和慢性肝炎(病毒性、细菌性或毒性)的方法中。
其它提供如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺，它在温血动物，例如人体中治疗炎性疾病、自免疫疾病和过敏性/遗传性过敏疾病中用作药物。
尤其提供如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺，其在治疗关节炎症(尤其是风湿性关节炎、骨关节炎和痛风)、肠胃道炎症(尤其是炎性肠炎、溃疡性结肠炎和胃炎)、皮肤炎症(尤其是牛皮癣、湿疹、皮炎)、多发性硬化、动脉硬化、脊椎关节病(僵硬脊椎炎、牛皮癣关节炎、与溃疡性结肠炎相关联的关节炎)、AIDS相关的神经病、系统性红斑狼疮、哮喘、慢性障碍性肺病、支气管炎、胸膜炎、成份呼吸窘迫综合症、脓血症、急性和慢性肝炎(病毒性、细菌性或毒性)中用作药物。
还提供如上定义的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺在生产用于在温血动物，例如人体中治疗炎性疾病、自免疫疾病和过敏性/遗传性过敏疾病中的药物中的用途。
如上所述，用于治疗或预防处理特定细胞繁殖疾病所需的剂量大小将需要根据所治疗的宿主、给药途径和所治疗的疾病严重程度变化。预计单元剂量范围是例如1-100mg/kg，优选1-50mg/kg。
如上定义的HDAC抑制活性可作为单一的治疗施用，或者除本发明的化合物外，可包含一种或多种其它物质和/或治疗。该共同治疗可通过同时、依次或分别给药治疗的单个组分而实现。在临床肿瘤学领域，通常的实践是使用不同治疗形式的结合以治疗患有癌症的每个患者。在临床肿瘤学中，除如上定义的细胞周期抑制治疗外，这种共同治疗的其它组分可以是手术、放射治疗或化学治疗。该化学治疗可包括一种或多种如下各类的抗肿瘤药(i)以如上定义的相同或不同机理工作的其他细胞周期抑制剂，例如细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)抑制剂，尤其是CDK2抑制剂；(ii)细胞繁殖抑制剂，例如细胞增殖抑制剂，如抗雌激素药(例如它莫西芬、托米芬、雷洛昔芬，屈洛昔芬，iodoxyfene)、孕激素(例如甲地孕酮乙酸盐)，芳香酶抑制剂(例如ahastrozole，letrazole，伏罗唑、依西马丁)，抗孕激素药、抗雄激素药(例如氟利坦、尼鲁米特、bicalutamide，去乙酰环氯地孕酮乙到盐)，LHRH激动剂和拮抗剂(例如醋酸性瑞林、亮丙瑞林(luprolide))、睾丸激素5α-二氢还原酶抑制剂(例如非那甾胺)，抗侵袭素(例如，金属蛋白酶抑制剂，如marimastat和尿激酶血浆酶原活化受体功能抑制剂)和生长因子功能抑制剂，(该生长因子包括例如血管内皮生长因子、上皮生长因子、血小板产生的生长因子和肝细胞生长因子，该抑制剂包括生长因子抗体、生长因子受体抗体、酪氨酸激酶抑制剂和丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂)；(iii)用于临床肿瘤学的抗繁殖/抗肿瘤药物和其组合，例如抗代谢物(例如antifolates，如甲氨蝶呤、氟嘧啶，如5-氟尿嘧啶、嘌呤和腺苷类似物，胞核嘧啶阿拉伯糖苷)、抗肿瘤抗生素(例如蒽环类抗生素，如阿霉素、道诺霉素、表阿霉素和去甲氧柔红霉素、丝裂霉素-C、更生霉素、光神霉素)、铂衍生物(例如顺铂、卡铂)、烷基化试剂(例如氮芥、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、环磷酰胺、异环磷酰胺、亚硝基脲、噻替派)、细胞分裂阻止剂(例如长春花生物碱，如长春新碱和taxoid，如太平洋紫杉素、taxotere)、拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼脂素，如依托泊甙和替尼泊甙，安吖啶，托泊替堪)；(iv)通过如上定义的不同机理工作的抗血管生成剂(例如受体酪氨酸激酶，如Tie-2，整合素αVβ3功能抑制剂、血管紧张素(angiostatin)、丙亚胺、酞胺哌啶酮)，和包括血管目标药；和(v)辨别药(例如视黄酸和维生素D)。
根据本发明的该方面，其提供了用于共同治疗癌症的药物产物，其含有如上定义的式(I)化合物和如上定义的附加抗肿瘤药。
除了它们在治疗医学中的用作，式(I)化合物和其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺还在体外和体内测试体系的开发和标准化中用作药理学工具，作为研究新治疗药物的部分，用于评价在实验动物，例如猫、狗、兔子、猴子、大鼠和小鼠中细胞周期活性抑制剂的效果。
为有利于读者，在本文描述含有式(I)化合物的药物组合物，或式(I)化合物作为药物的用途，或式(I)化合物在治疗方法中的应用，或式(I)化合物在生产药物中的用途，或式(I)化合物在生产药物中的用途，或式(I)化合物在治疗癌症中的用途的情况时，应理解式(I)化合物的定义包括化合物N-(2-氨基-6-羟基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；N-(2-氨基-6-甲基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；N-(2-氨基苯基)-4-(1-叔丁氧基羰基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；和N-(2-氨基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺。
本发明在如下实施例中举例说明，其中一般(i)操作在室温下进行，即17-25℃，在惰性气体气氛，例如氩气中进行，除非另有说明；(ii)蒸发过程用真空旋转蒸发进行，操作过程在通过过滤除去残余固体后进行；(iii)柱色谱法(用快速方法)和中压液相色谱(MPLC)用由E.Merck，Darmstadt，Germany获得的merck Kieselgel硅胶(Art.9385)或Merck Lichroprep RP-18(Art.9303)逆相硅胶进行或高压液相色谱(HPLC)在C18逆相硅胶，例如Dynamax C-1860A制备性逆相柱中进行；(iv)如果存在，收率不必需是最大可获得的；(v)通常式(I)的最终产物的结构由核磁共振(NMR)和/或质谱技术证实；快速原子轰击(FAB)质谱数据用Platform分光仪获得，如果需要，收集阳离子数据或阴离子数据；NMR化学位移数值以δ等级测定[质子磁共振数据用以400MHz的场强度操作的Jeol JNM EX 400分光仪、以300MHz的场强度操作的Variange mini 2000分光仪或以300MHz的场强度操作的Bruker AM300分光仪测定]；使用如下缩写s，单峰；d，双重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，宽峰；(vi)中间体通常不完全表征，纯度用薄层色谱法、HPLC、红外(IR)和/或NMR分析测定；(vii)熔点未校正，用Mettler SP62自动熔点装置或油浴装置测定；用于式(I)的最终产物的熔点在由常规有机溶剂，例如乙醇、甲醇、丙酮、乙醚或己烷(单独或其混合物)结晶后测定；(viii)使用如下缩写DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲基亚砜THE四氢呋喃实施例11N-(2-氨基苯基)-4-吡啶-4-基苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-吡啶-4-基苯甲酰胺(方法1；100mg，0.26mmol)，1，4-二噁烷(2ml)和盐酸在二噁烷(2ml)中的4M溶液在室温下搅拌约20小时。得到的沉淀物用过滤收集，用异己烷和乙醚洗涤，真空干燥得到标题化合物盐酸盐(43mg，46％)；NMR谱(DMSO-d6)7.31(m，2H)，7.39(t，1H)，7.54(t，1H)，8.17(d，2H)，8.30(d，2H)，8.40(d，2H)，8.96(d，2H)，10.62(s，1H)；质谱M+H+290。
实施例2使用实施例1中描述的类似方法，使合适的N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-苯甲酰胺原料反应得到表1中所述的化合物。除非另有说明，每个化合物以其盐酸盐得到。
表1
实施例3N-(2-氨基苯基)-4-吗啉代苯甲酰胺将1-(N-叔丁氧基羰基氨基)-2-氨基苯(方法17；104mg，0.5mmol)在DMF(1.6ml)中的溶液加入4-吗啉代苯甲酸(149mg，0.5mmol)，随后加入4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物(方法18，138mg，0.5mmol)，反应混合物在室温下搅拌48小时。真空除去溶剂，得到的残余物在乙酸乙酯和水之间分配。分离有机相，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并过滤。有机提取物浓缩至一半，加入盐酸在1，4-二噁烷(1ml)中的4M溶液。反应混合物在室温下再搅拌64小时，过滤收集生成的沉淀物。固体用制备性质量触发的HPLC纯化，用乙腈在水中的增加梯度洗脱(含有5％(v/v)的1％(v/v)甲酸在甲醇中的溶液)得到标题化合物(17mg，12％)；NMR谱(DMSO-d6)3.25(m，4H)，3.76(m，4H)，4.83(s，2H)，6.60(m，1H)，6.79(dd，1H)，6.96(m，1H)，7.01(d，2H)，7.16(dd，1H)，7.90(d，2H)，9.31(brs，1H)；质谱M+H+298。
实施例4N-(2-氨基苯基)-4-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺将N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-4-基苯甲酰胺(实施例5，48mg，0.16mmol)在室温下搅拌并溶解在无水DMF(2ml)中，加入碳酸钾(23mg，0.16mmol)，随后加入碘甲烷(0.01ml，0.16mmol)，混合物搅拌3小时。反应混合物用水(20ml)稀释，用乙酸乙酯提取。合并的提取物用盐水洗涤1次，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂得到标题化合物无色固体(16mg，3 2％)；NMR谱(DMSO-d6)1.70(m，4H)，1.96(m，2H)，2.18(s，3H)，2.85(m，2H)，3.03(m，1H)，4.84(b，2H)，6.57(m，1H)，6.76(d，1H)，6.95(m，1H)，7.16(d，1H)，7.36(d，2H)，7.99(d，2H)，9.54(b，1H)；质谱M+H+310。
实施例5N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-4-基苯甲酰胺将盐酸在二噁烷中的4M溶液(5ml，20mmol)加入N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(1-叔丁氧基羰基哌啶-4-基)苯甲酰胺(方法15，693mg，1.40mmol)在二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中，混合物在室温下搅拌18小时。过滤出生成的沉淀物，用乙醚洗涤。生成的固体溶解在水中，用2M含水氢氧化钠溶液碱化至pH 12。过滤生成的沉淀物，用水洗涤，真空干燥得到标题化合物(338mg，82％)；NMR谱(DMSO-d6)1.52(m，2H)，1.69(m，2H)，2.60(m，3H)，3.02(m，2H)，4.84(br，2H)，6.58(m，1H)，6.76(d，1H)，6.95(m，1H)，7.16(d，1H)，7.34(d，2H)，7.89(d，2H)，9.53(br，1H)；质谱m+H+296。
实施例6N-(2-氨基苯基)-4-(1-甲基哌嗪-4-基)苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(1-甲基哌嗪-4-基)苯甲酰胺(方法16，196mg，0.48mmol)溶解在盐酸在乙醚中的1M溶液(7.2ml，7.2mmol)中，在室温下搅拌24小时。过滤收集生成的沉淀物，用乙醚洗涤。向固体中加入含水氢氧化钠的2M溶液(5ml)，混合物用乙酸乙酯提取。有机提取物用硫酸镁干燥，过滤，蒸发得到标题化合物无色固体(16mg，11％)；NMR谱(CDCl3)2.36(s，3H)，2.57(t，4H)，3.33(t，4H)，3.88(br，2H)，6.81(m，2H)，6.91(d，2H)7.06(t，1H)，7.27(d，1H)，7.79(s，1H)，7.80(m，2H)；质谱M+H+311。
实施例7N-(2-氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基丙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺将N-(2-氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基丙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺三盐酸盐(方法19，28mg，0.052mmol)溶解在水(2ml)中，通过加入28％氨水溶液(2滴)碱化至pH 10。过滤收集生成的沉淀物，在40℃下真空干燥过夜得到标题化合物黄色固体(9mg，40％)；NMR(DMSO-d6)1.75(m，2H)，2.37(m，6H)，3.41(brm，2H)，3.59(m，4H)，4.92(s，2H)，6.62(t，1H)，6.80(d，1H)，6.99(t，1H)，7.21(m，2H)，7.28(t，1H)，8.11(d，2H)，8.22(d，2H)，8.39(d，1H)，9.74(s，1H)；质谱M+H+433。
实施例8N-(2-氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基乙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺将N-(2-氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基乙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺三盐酸盐(方法24，22mg，0.042mmol)以类似于实施例7中所述的方法反应得到标题化合物浅黄色固体(12mg，68％)；NMR(DMSO-d6)2.45(m，4H)，2.54(m，2H)，3.51(m，2H)，3.59(m，4H)，4.92(s，2H)，6.62(t，1H)，6.80(d，1H)，6.99(t，1H)，7.07(t，1H)，7.20(d，1H)，7.24(d，1H)，8.11(d，2H)，8.23(d，2H)，8.40(d，1H)，9.74(s，1H)；质谱M+H+419。
实施例9采用实施例1中所述的类似方法，使合适的N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)苯甲酰胺原料反应得到表2中所述的标题化合物。除非另有说明，每个化合物作为其盐酸盐获得。
表2






实施例10采用实施例1中所述的类似方法，使合适的N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)苯甲酰胺反应得到表3中所述的标题化合物。除非另有说明，每个化合物作为其盐酸盐得到。
表3
实施例11采用实施例7中所述的类似方法，使合适的N-(2-氨基苯基)-苯甲酰胺盐酸盐原料反应得到表4中所述的化合物。除非另有说明，每个化合物作为其游离碱得到。
表4

实施例12N-(2-氨基苯基)-4-[5-(哌啶-1-基甲基)-1，3-噻唑-2-基]苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[5-(哌啶-1-基甲基)-1，3-噻唑-2-基]苯甲酰胺(方法51，271mg，0.54mmol)悬浮在1，4-二噁烷(4ml)中，加入盐酸在1，4-二噁烷(4ml)中的4M溶液。反应混合物在室温下搅拌17小时，过滤收集生成的沉淀物，用乙醚洗涤，空气干燥得到标题化合物盐酸盐。粗固体用OasismCX柱纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-100％)，随后用在甲醇中的2M氨水/甲醇(0-20％)洗脱得到标题化合物游离碱(119mg，56％)；NMR谱(DMSO-d6)1.40(m，2H)，1.50(m，4H)，2.41(m，4H)，3.74(s，2H)，4.94(s，2H)，6.61(t，1H)，6.80(d，Im，6.99(t，1H)，7.18(d，1H)，7.80(s，1H)，8.06(d，2H)，8.09(d，2H)，9.78(s，1H)；质谱m+H+402。
实施例13N-(2-氨基苯基)-4-[2-({3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]丙基}氨基)嘧啶-4-基]苯甲酰胺向二甲基氨基乙氧基丙胺(2.02mg，12.5μmol)在N，N-二甲基乙酰胺(125μl)中的溶液中加入N-(2-氨基苯基)-4-[2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基]苯甲酰胺(方法62，2.2mg，5μmol)在N，N-二甲基乙酰胺(100μl)中的溶液。反应混合物加热到50℃，搅拌16小时，随后蒸发至干得到标题化合物；质谱M+H+435。
实施例14
采用实施例13中所述的类似方法，使N-(2-氨基苯基)-4-[2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基]苯甲酰胺(方法62)与合适的胺反应得到表5中所述的化合物。
表5 实施例15采用实施例5中所述的类似方法，使合适的N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺盐酸盐原料反应得到表6中所述的化合物。除非另有说明，每个化合物作为其游离碱得到。
表6
实施例16N-(2-氨基苯基)-4-哌嗪-1-基苯甲酰胺向4-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)苯甲酸(1.0g，3.3mmol)和1-(叔丁氧基羰基氨基)-2-氨基苯(方法17，0.68g，3.3mmol)在DMF(10ml)中的溶液中加入4-(4，6-一甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物(1.1g，4.0mmol)(方法18)。混合物在室温下搅拌20小时，混合物真空浓缩，残余物在水和乙酸乙酯间分配。分离有机相，水相用乙酸乙酯反提取。合并的有机提取物用硫酸镁干燥并蒸发。残余物用快速色谱法(用4∶1-1∶1异己烷/乙酸乙酯)纯化。产物溶解在1，4-二噁烷(2.5ml)中，用盐酸在1，4-二噁烷(2.5ml)中的4M溶液处理。混合物在室温下搅拌4小时。过滤收集生成的固体，用2M氢氧化钠水溶液处理，用乙酸乙酯提取。有机提取物用硫酸镁干燥得到标题化合物无色固体(176mg，92％)；NMR谱(DMSO-d6)2.89(t，4H)，3.25(t，4H)，4.90(s，2H)，6.66(t，1H)，6.84(d，1H)，7.01(m，3H)，7.21(d，1H)，7.92(d，2H)，9.48(s，1H)；质谱M+H+297。
实施例17(RS)-N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-3-基苯甲酰胺向N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-吡啶-3-基苯甲酰胺(2.0g，5.1mmol)(方法3)在乙醇(20ml)中的溶液中加入PtO2(200mg)，得到的混合物在80Bar氢气气氛下在80℃加热16小时。使混合物冷却，过滤并蒸发得到(RS)-N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-哌啶-3-基苯甲酰胺(1.9g，94％)。
向(RS)-N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-哌啶-3-基苯甲酰胺(1.0g，2.5mmol)在1，4-二噁烷(9.5ml)中的溶液中加入盐酸溶液(4M的1，4-二噁烷溶液，9.5ml，38mmol)，混合物在室温下搅拌6小时。过滤收集形成的固体，用乙醚洗涤，真空干燥。用2M的氢氧化钠水溶液处理，用乙酸乙酯提取3次。合并的有机提取物用硫酸镁干燥，蒸发得到产物无色固体(0.73g，99％)；NMR谱(DMSO-d6)1.71(m，4H)，2.61(m，2H)，2.75(m，1H)，3.03(m，2H)，4.92(s，2H)，6.65(t，1H)，6.83(d，1H)，7.02(t，1H)，7.23(d，1H)，7.42(d，2H)，7.96(d，2H)，9.61(s，1H)；质谱M+H+296。
实施例18N-(2-氨基苯基)-4-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)苯甲酰胺二盐酸盐将4-{4-[({2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基}氨基)羰基]苯基}-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯(方法71，62mg，0.13mmol)搅拌，并溶解在1，4-二噁烷(0.4ml)中，加入盐酸在1，4-二噁烷(0.4ml)中的4M溶液。反应混合物在室温下搅拌24小时，过滤收集生成的沉淀物，用乙醚洗涤，在60℃下真空干燥得到标题化合物灰白色固体(34mg，89％)；NMR谱(DMSO-d6)2.70(m，2H)，3.30(m，2H)，3.76(m，2H)，6.33(m，1H)，7.23(m，2H)，7.33(m，1H)，7.49(m，1H)，7.61(d，2H)，8.10(d，2H)，9.27(s，1H)；质谱M+H+294。
实施例19N-(2-氨基苯基)-4-(1-{3-[(2-氟苯基)氨基]3-氧代丙基}哌啶-4-基)苯甲酰胺将N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-4-基苯甲酰胺(实施例5，162mg，0.55mmol)、碳酸钾(153mg，1.1mmol)和(2-氟苯基)-3-溴丙酰胺(149mg，0.61mmol)在DMF(5ml)中在室温下搅拌约20小时。真空浓缩混合物，残余物在水和乙酸乙酯间分配。分离有机层，用硫酸镁干燥并蒸发。残余物用快速色谱法(用0-25％甲醇/二氯甲烷洗脱)纯化得到产物无色固体(76mg，30％)；NMR谱(CDCl3)1.92(m，4H)，2.18(m，1H)，2.57(t，2H)，2.64(m，2H)2.72(t，2H)，3.19(d，2H)，3.62(s，2H)，6.80(m，2H)，7.05(m，4H)，7.31(d，1H)，7.34(d，2H)，7.87(d，2H)，8.08(s，1H)，8.44(t，1H)，11.39(s，1H)；质谱M+H+461。
实施例204-(1-乙酰基哌啶-4-基)-N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺将N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-4-基苯甲酰胺(实施例5，30mg，0.10mmol)搅拌，并溶解在N，N-二甲基乙酰胺(2ml)中，加入乙酐(0.011ml，0.11mmol)。反应物在室温下搅拌1小时，随后在水和乙酸乙酯间分配。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发得到标题化合物无色固体(23mg，68％)；NMR谱(DMSO-d6)1.48(m，1H)，1.64(m，1H)，1.79(m，2H)，2.02(s，3H)，2.59(m，1H)，2.84(m，1H)，3.13(m，1H)，3.92(d，1H)，4.53(d，1H)，4.85(s，2H)，6.58(m，1H)，6.76(d，1H)，6.95(m，1H)，7.15(d，1H)，7.37(d，2H)，7.9 0(d，2H)，9.55(s，1H)；质谱M+H+338。
实施例21采用实施例19中所述的类似方法，使N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-4-基苯甲酰胺(实施例5)反应得到表7中所述的化合物。
表7



实施例22N-(2-氨基苯基)-4-[1-(4-溴苯甲酰基)哌啶-4-基]苯甲酰胺向4-溴苯甲酸(1.0g，3.3mmol)在DMF(5ml)中的溶液中加入苯并三唑基氧基三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐(99mg，0.19mmol)，混合物在室温下搅拌30分钟。加入N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-4基苯甲酰胺(实施例5，50mg，0.17mmol)，混合物在搅拌24小时。生成的溶液吸收在SCX-2柱上，用甲醇(2倍柱体积)洗涤，用在甲醇中的2M氨溶液(2倍柱体积)洗脱得到产物。产物用快速色谱法(用0-20％甲甲醇/二氯甲烷洗脱)纯化得到标题化合物无色固体(29mg，18％)；NMR谱(DMSO-d6)1.70(m，4H)，2.60(m，1H)，2.91(m，2H)，3.31(m，2H)，4.89(s，2H)，6.60(t，1H)，6.78(d，1H)，6.97(t，1H)，7.16(d，1H)，7.43(d，4H)，7.67(d，2H)，7.93(d，2H)，9.60(s，1H)；质谱m+H+478。
实施例23采用实施例19中所述的类似方法，使(RS)-N-(2-氨基苯基)-4-哌啶-3-基苯甲酰胺反应得到表8中所述的化合物。
表8


实施例24采用实施例19中所述的类似方法，使N-(2-氨基苯基)-4-哌嗪-1-基苯甲酰胺(实施例16)反应得到表9中所述的化合物。
表9

原料的制备用于上述实施例的原料是商业可获得的或容易地通过标准方法由已知物质制备。例如如下反应举例，但不限制，说明用于上述反应的某些原料的制备方法。
方法1N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-吡啶-4-基苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-溴苯甲酰胺(方法14；136mg，0.33mmol)，吡啶-4-硼酸(48mg，0.39mmol)，四(三苯基膦)钯(5mg，0.005mmol)，THF(2ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(2ml)在氩气气氛下在55℃搅拌96小时。冷却的混合物在乙酸乙酯和水间分配，有机物用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发得到标题化合物(103mg，80％)，它无需进一步纯化直接使用；质谱M+H+390。
方法2N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-喹啉-8-基苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-溴苯甲酰胺(方法14；200mg，0.5mmol)、8-喹啉硼酸(104mg，0.6mmol)、四(三苯基膦)钯(8mg，0.007mmol)，1，2-二甲氧基乙烷(3ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(3ml)在氩气气氛下在80℃搅拌20小时。使混合物冷却，随后在乙酸乙酯和水间分配。有机物用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发。生成的残余物用快速柱色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-10％)洗脱，得到标题化合物(201mg，84％)；NMR谱(DMSO-d6)1.47(s，9H)，7.20(m，2H)，7.60(m，4H)，7.73(t，1H)，7.84(t，3H)，8.06(d，2H)，8.47(d，1H)，8.68(s，1H)，8.93(m，1H)，9.91(s，1H)，质谱M+H+440。
方法3N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-吡啶-3-基苯甲酰胺采用方法2的类似方法制备标题化合物，直接使用无需纯化；质谱M+H+390。
方法4N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-吡啶-2-基苯甲酰胺N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13；132mg，0.3mmol)、2-溴吡啶e(40mg，0.25mmol)、四(三苯基膦)钯(4mg，0.004mmol)，1，2-二甲氧基乙烷(1.5ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(1.5ml)在氩气气氛下在80-85℃搅拌24小时。使混合物冷却，随后在乙酸乙酯和水间分配。分离出有机物，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发得到标题化合物(86mg，74％)，它用于下一步骤，无需进一步纯化；质谱M+H+390。
方法5-12采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺原料与合适的溴化合物反应得到表10中所述的化合物。如果需要，粗残余物用快速柱色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(1∶10)洗脱。
表10
方法13N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺在氩气气氛下，在80℃20小时内，将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-溴苯甲酰胺(方法14；3.0g，7.7mmol)加入双频哪酮二硼(bis-pinacolato diboron)(2.3g，9.2mmol)、1，1′-双(二苯基膦)二茂铁二氯合钯(II)氯化物(157mg，0.19mmol)和乙酸钾(2.3g，23mmol)在DMF(48ml)中的溶液中。使混合物冷却，真空除去溶剂。残余物在乙酸乙酯和水间分配。有机物用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，蒸发得到标题化合物(3.9g，定量)，它直接使用，无需进一步纯化；NMR(DMSO-d6)1.14(s，6H)，1.31(s，9H)，1.43(s，6H)，7.16(m，2H)，7.52(m，2H).7.79(d，2H)，7.95(d，2H)，8.66(s，1H)，9.86(s，1H)；质谱(M+H+-Boc)383。
方法14N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-溴苯甲酰胺将4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物(方法18；5.4g，19.4mmol)加入4-溴苯甲酸(3.5g，17.4mmol)和1-(N-叔丁氧基羰基氨基)-2-氨基苯(方法17；4.3g，20.9mmol)在DMF(100ml)中的溶液中，在室温下搅拌20小时。反应混合物在水和乙酸乙酯间分配，有机物用饱和碳酸氢钠水溶液、水、1M含水盐酸、水和盐水洗涤，随后用硫酸镁干燥。蒸发有机物得到标题化合物(7.1g，定量)，它直接使用，无需进一步纯化。NMR谱(DMSO-d6)1.45(s，9H)，7.18(m，2H)，7.54(m，2H)，7.76(d，2H)，7.90(d，2H)，8.63(s，1H)，9.86(s，1H)；质谱(M+H+Boc)291。
方法15N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(1-叔丁氧基羰基哌啶-4-基)苯甲酰胺1-(N-叔丁氧基羰基氨基)-2-氨基苯(方法17，3.1g，14.7mmol)加入4-(1-叔丁氧基羰基哌啶-4-基)苯甲酸(4.1g，13.4mmol)在DMF(50ml)中的搅拌溶液中，混合物在室温下搅拌10分钟。加入4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物(方法18，4.45g，16.1mmol)，混合物在室温下搅拌24小时。蒸发溶剂，残余物溶解在乙酸乙酯(100ml)中，用水洗涤。有机物用硫酸镁干燥，过滤和蒸发。生成的胶状物用快速柱色谱法纯化，例如1％甲醇/二氯甲烷洗脱得到标题化合物泡沫(5.44g，82％)；NMR谱(DMSO-d6)1.41(s，9H)，1.43(s，9H)，1.54(m，2H)，1.77(m，2H)，2.79(m，3H)，4.08(m，2H)，7.15(m，2H)，7.40(d，2H)，7.52(m，2H)，7.87(d，2H)，8.60(br，1H)，9.74(br，1H)，质谱(M+H+-Boc)396。
方法16N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(1-甲基哌嗪-4-基)苯甲酰胺将4-(1-甲基哌嗪-4-基)苯甲酸(250mg，1.13mmol)1-(N-叔丁氧基羰基氨基)-2-氨基苯(方法17，331mg，1.59mmol)溶解在DMF(3ml)中，加入4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物(方法18，313mg，1.13mmol)，生成的溶液在室温下搅拌20小时。将溶液倾入水中，用乙酸乙酯提取几次。合并的有机物用硫酸镁干燥，蒸发。残余物用快速色谱法(用99∶1→9∶1二氯甲烷∶甲醇洗脱)纯化得到标题化合物无色胶状物，它以研制结晶(240mg，52％)；质谱M+H+411。
方法171-(N-叔丁氧基羰基氨基)-2-氨基苯标题化合物根据在Seto，C，T.；mathias，J.P.；Whitesides，g.M.；J.Am.Chem.Soc.，1993，115，1321-1329中描述的文献方法制备。
方法184-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物根据在Kunishima，m.，Kawachi，C.，morita，J.，Terao，K.，Iwasaki，F.，Tani，S.，Tetrahedron，1999，55，13159-13170中描述的文献方法制备。
方法19N-(2-氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基丙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺三盐酸盐将N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基丙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺(方法20，64mg，0.120mmol)悬浮在1，4-二噁烷(1.5ml)，加入盐酸在1，4-二噁烷(1ml)中的4M溶液，反应混合物在室温下搅拌64小时。反应混合物用乙醚稀释，过滤收集生成的沉淀物，用乙醚洗涤，空气干燥得到标题化合物(盐酸)灰白色固体(62mg，95％)；质谱M+H+433。
方法20N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基丙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-(2-甲基磺酰基-嘧啶-6-基)苯甲酰胺(方法21，62.5mg，0.133mmol)溶解在THF(2ml)和N，N-二甲基乙酰胺(2ml)中，加入N-(3-氨基丙基)吗啉(60μl，0.411mmol)。反应混合物加热到50℃，搅拌2小时。随后冷却反应混合物，减压除去溶剂。生成的油状物通过硅胶纯化，用在二氯甲烷中的5％甲醇洗脱，得到标题化合物无色固体(65mg，92％)；NMR谱(DMSO-d6)1.45(s，9H)，1.74(m，2H)，2.37(m，6H)，3.40(br，2H)，3.59(m，4H)，7.20(m，2H)，7.23(d，1H)，7.34(t，1H)，7.5 7(d，1H)，8.08(d，2H)，8.26(d，2H)，8.40(m，1H)，8.72(s，1H)，9.94(s，1H)；质谱M+H+534。
方法21N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-(2-甲基磺酰基-嘧啶-6-基)苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-(2-硫代甲基-嘧啶-6-基)苯甲酰胺(方法22，140mg，0.32mmol)溶解在甲醇(8ml)和少量乙酸乙酯中，随后加入Oxone(630mg，1.02mmol)在水(4ml)中的溶液。生成的悬浮液在室温下搅拌1小时，随后在乙酸乙酯和水与饱和碳酸氢钠的混合物间分配。分离有机相，水相用等分的乙酸乙酯提取。合并的有机提取物用盐水洗涤，用硫酸镁干燥。蒸发至干得到标题化合物灰白色粉末(126mg，84％)；NMR谱(DMSO-d6)1.45(s，9H)，3.54(s，3H)，7.20(m，2H)，7.57(t，2H)，8.18(d，2H)，8.48(d，2H)，8.54(s，1H)，8.73(s，1H)，9.20(d，1H)，10.02(s，1H)；质谱(M+H+-Boc)369。
方法22N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-(2-硫代甲基-嘧啶-6-基)苯甲酰胺4-碘-2-甲基硫代嘧啶(方法23，360mg，1.43mmol)与N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，631mg，1.44mmol)以方法4中所述的类似方法反应得到粗标题化合物。它通过硅胶纯化，用乙酸乙酯在异己烷中的溶液(25％至50％(v/v))洗脱得到纯标题化合物浅黄色泡沫(306mg，49％)；NMR谱(DMSO-d6)1.45(s，9H)，2.63(s，3H)，7.20(m，2H)，7.57(t，2H)，7.91(d，1H)，8.13(d，2H)，8.37(d，2H)，8.72(s，1H)，8.77(d，IH)，9.97(s，1H)；质谱(M+H+-tBu)381。
方法234-碘-2-甲基硫代嘧啶将4-氯-2-甲基硫代嘧啶(5g，31.15mmol)滴加到57％含水氢碘酸溶液(0℃)中，在0℃持续搅拌30分钟，随后温热到室温，搅拌24小时。随后仔细加入含水碳酸氢钠，通过加入碳酸钠将生成的悬浮液碱化至pH 9。混合物用乙酸乙酯提取，提取物用硫酸镁干燥，减压浓缩。生成的固体溶解在沸腾的异己烷中，通过冷冻冷却过夜。过滤出生成的固体，干燥得到标题化合物无色针状物(5.4g，69％)；NMR谱(CDCl3)2.55(s，3H)，7.40(d，1H)，7.98(d，1H)；质谱M+H+253。
方法24N-(2-氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基乙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺三盐酸盐使N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基乙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺(方法25，59mg，0.113mmol)以方法19中所述的类似方法反应得到标题化合物(其盐酸盐)米色固体(56mg，94％)；质谱M+H+419。
方法25N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉代氨基乙基)-嘧啶-6-基]苯甲酰胺N-(2-叔丁氧基氨基苯基)-4-(2-甲基磺酰基-嘧啶-6-基)苯甲酰胺(方法21，62.5mg，0.133mmol)与N-(2-氨基乙基)吗啉(601，0.457mmol)以实施例20中所述的类似方法反应得到标题化合物浅黄色固体(66mg，96％)；NMR谱(DMSO-d6)1.46(s，9H)，2.45(brm，4H)，3.30(m，2H)，3.50(brm，2H)，3.58(m，4H)，7.14(t，1H)，7.17(m，1H)，7.22(m，1H)，7.25(d，1H)，7.57(d，2H)，8.09(d，2H)，8.27(d，2H)，8.42(d，1H)，8.73(s，1H)，9.94(s，1H)；质谱M+H+519。
方法29N(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-{2-[(3-哌啶-1-基丙基)氨基]嘧啶-4-基}苯甲酰胺在装入3-氨基丙基哌啶(73mg，0.51mmol)的24mm×150mm pyrex管中加入N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)苯甲酰胺(方法52，85mg，0.20mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(4.6ml)中的溶液。反应混合物随后加热到50℃，搅拌16小时，随后蒸发至干。生成的残余物在硅胶(10g)上经快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(5-15％)洗脱得到标题化合物(48mg，45％)；质谱M+H+531。
方法30-36采用方法29中所述的类似方法，N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)苯甲酰胺原料(方法52)与合适的胺反应得到表11中所述的化合物。如果需要，粗残余物在硅胶(10g)上经快速柱色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(5-15％)洗脱。
表11 方法37N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(3-吗啉-4-基丙氧基)吡啶-4-基]苯甲酰胺向氢化钠在四氢呋喃(1ml)中的悬浮液中用注射器加入3-N-吗啉代丙醇(147mg，1.01mmol)。在氩气气氛下搅拌反应混合物30分钟，随后经套管加入N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-2-氟吡啶-4-基苯甲酰胺(方法8，119mg，0.29mmol)在四氢呋喃(2ml)中的溶液中。混合物随后在氩气气氛下在室温下搅拌2小时，随后加热到50℃，再搅拌5.5小时。冷却反应混合物，随后在乙酸乙酯和水间分配。分离有机物，水相再用乙酸乙酯提取。随后合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发。生成的残余物在硅胶(20g)上经快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-10％)洗脱，得到标题化合物(70mg，45％)；NMR谱(DMSO-d6)1.46(s，9H)，1.92(m，2H)，2.38(m，4H)，2.45(m，2H)，3.59(t，4H)，4.36(t，2H)，7.20(m，3H)，7.39(dd，1H)，7.57(d，2H)，7.97(d，2H)，8.08(d，2H)，8.26(d，1H)，8.67(s，1H)，9.91(s，1H)；质谱M+H+533。
方法38N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(6-甲基吡啶-3-基)苯甲酰胺采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，1.20g，2.74mmol)与2-甲基-5-bromo吡啶(505mg，2.94mmol)反应。粗残余物在硅胶(90g)上经快速色谱法纯化，用乙酸乙酯/异己烷(40-100％)洗脱得到标题化合物(504mg，46％)；NMR谱(DMSO-d6)1.46(s，9H)，2.51(s，3H)，7.19(m，2H)，7.40(d，1H)，7.58(m，2H)，7.91(d，2H)，8.08，(d，3H)，8.66(s，1H)，8.86(d，1H)，9.89(s，1H)；质谱M+H+404。
方法39N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-{2-[(3-哌啶-1-基丙基)氨基]噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基}苯甲酰胺将3-氨基丙基哌啶(60μl，0.38mmol)和N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(甲基磺酰基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基]苯甲酰胺(方法54，81mg，0.15mmol)在N，N-二甲基乙酰胺中的溶液首先加热到50℃23小时，随后再加热到75℃16小时。反应混合物蒸发至干，粗残余物在硅胶(10g)上用快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-15％)洗脱得到标题化合物(23mg，26％)；质谱M+H+587。
方法40N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-噻吩并[3，2-dl嘧啶-4-基苯甲酰胺采用方法4中所述的类似方法，4-氯噻吩并[3，2-dl嘧啶(538mg，3.15mmol)与N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，1.53g，3.50mmol)反应。粗残余物在硅胶上经快速色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷(25-75％)洗脱得到标题化合物(1.08g，69％)；NMR谱(DMSO-d6)1.47(s，9H)，7.21(m，2H)，7.57(t，2H)，7.79(d，1H)，8.23(d，2H)，8.34(d，2H)，8.64(d，1H)，8.75(s，1H)，9.35(s，1H)，10.03(s，1H)；质谱M+H+447。
方法41N-(2-氨基苯基)-4-{2-[(3-哌啶-1-基丙基)氨基]嘧啶-5-基}苯甲酰胺向N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(2-chloro嘧啶-5-基)苯甲酰胺(方法53，80mg，0.19mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(3.5ml)中的溶液中加入3-氨基丙基哌啶(108mg 0.76mmol)。反应混合物在50℃搅拌20小时，随后使其冷却。反应混合物在水和乙酸乙酯间分配，随后通过Varian Chem Elut(CE1010)硅藻土柱重力过滤。生成的溶液随后减压浓缩，经快速柱色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-20％)洗脱，得到标题化合物，它直接使用，无需进一步纯化；质谱M+H+531。
方法42-43采用方法41中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(2-氯嘧啶-5-基)苯甲酰胺(方法53)与合适的胺反应得到表12中所述的化合物。如果需要，粗残余物在硅胶(10g)上经快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-20％)洗脱。
表12 方法44N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-3-氟-4-吡啶-3-基苯甲酰胺将2-[(4-溴-3-氟苯甲酰基)氨基]苯基氨基甲酸叔丁基酯(方法63，205mg，0.5mmol)、3-吡啶硼酸(74mg，0.6mmol)、四(三苯基膦)钯(104mg，0.09mmol)，1，2-二甲氧基乙烷(3ml)和碳酸氢钠饱和水溶液(3ml)在80℃氩气气氛下搅拌48小时。冷却的混合物在乙酸乙酯和水间分配，用Varian Chem Elut column(CE1010)除去水层，得到的溶液随后减压浓缩，经快速柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/异己烷(25-75％)洗脱得到标题化合物(186mg，91％)。质谱M+H+408。
方法45N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)嘧啶-5-基]苯甲酰胺采用方法44中所述的类似方法，将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，219mg，0.5mmol)与5-溴-2-(2-吡咯烷-基乙氧基)嘧啶(方法64，136mg，0.5mmol)反应得到标题化合物(71mg；28％)。质谱M+H+504。
方法46-50采用实施例1中所述的类似方法，使合适的N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)苯甲酰胺原料反应得到表13中所述的化合物，为其盐酸盐。
表13
方法51N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[5-(哌啶-1-基甲基)-1，3-噻唑-2-基]苯甲酰胺采用方法44中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，219mg，0.5mmol)与1-[(2-氯-1，3-噻唑-5-基)甲基]哌啶(108mg，0.5mmol)反应得到标题化合物(271mg，＞100％)，它被用于下一步骤；质谱M+H+493。
方法52N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)苯甲酰胺采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，3.9g，8.9mmol)与2，4-二氯嘧啶(3.06g，20.5mmol)反应。粗残余物在硅胶上经快速色谱法纯化，用乙酸乙酯/异己烷(1∶1)洗脱得到标题化合物(1.2g，32％)；NMR谱(DMSO-d6)1.45(s，9H)，7.23(m，2H)，7.57(t，2H)，8.15(d，2H)，8.29(d，1H)，8.38(d，2H)，8.73(s，1H)，8.91(d，1H)，10.00(s，1H)；质谱m-H+423。
方法53N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(2-氯嘧啶-5-基)苯甲酰胺将N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，4.0g，9.12mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(1.76g，9.12mmol)、四(三苯基膦)钯(527mg，0.46mmol)、1，2-二甲氧基乙烷(40ml)和碳酸氢钠饱和水溶液(40ml)在80℃下在氩气气氛下搅拌18小时。将冷却的混合物减压浓缩，残余物随后与乙酸乙酯一起搅拌1小时，通过抽吸过滤收集生成的固体，干燥得到标题化合物(2.38g；61％)；NMR谱(DMSO-d6)1.47(s，9H)，7.20(m，2H)，7.58(d，2H)，8.02(d，2H)，8.11(d，2H)，8.66(s，1H)，9.23(s，2H)，10.93(s，1H)；质谱M+H+-tBu 369。
方法54N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(甲基磺酰基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基]苯甲酰胺向N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(甲硫基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基]苯甲酰胺(方法55，960mg，1.95mg)在DMF(40ml)中的冷却(0℃)溶液中加入间氯过苯甲酸(57％，630mg，2.08mmol)，搅拌反应混合物，使其温热到室温。3小时后，加入另一部分的间氯过苯甲酸(70％，589mg，2.40mmol)，持续搅拌2小时。将反应混合物仔细地倾入含水偏亚硫酸氢钠(0.25M，100ml)中，随后加入乙酸乙酯(100ml)。过滤除去不溶解物质，真空干燥得到标题化合物(586mg，57％)；NMR谱(DMSO-d6)1.46(s，9H)，3.57(s，3H)，7.18(t，1H)，7.24(t，1H)，7.59(m，2H)，8.00(d，1H)，8.27(d，2H)，8.41(d，2H)，8.75(s，1H)，8.90(d，1H)，10.07(s，1H)；质谱m+Na+547。
方法55-59采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13)与合适的卤化物反应得到表14中所述的化合物。如果需要，化合物由反应混合物中过滤出，随后分配或如果需要，粗残余物在硅胶上经快速柱色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-20％)洗脱。
表14
方法60N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)嘧啶-4-基]苯甲酰胺采用方法41中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)苯甲酰胺(方法52，59mg，0.14mmol)与1-甲基哌嗪(77mg，0.69mmol)反应，残余物经快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-20％)洗脱得到标题化合物(48mg，71％)；质谱M+H+489。
方法614-碘-N-(3-吗啉-4-基丙基)吡啶-2-胺将4-碘-2-氟吡啶(2.32g，10.00mmol)和N-(3-氨基丙基)吗啉(4.2ml，26.00mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(30ml)中的溶液加热至100℃20小时，随后真空浓缩，得到粗标题化合物，它直接使用无需进一步纯化；质谱M+H+348。
方法62N-(2-氨基苯基)-4-[2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基]苯甲酰胺采用实施例1中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基]苯甲酰胺(方法21，1.097g，2.34mmol)反应得到标题化合物盐酸盐(1.01g，98％)；NMR谱(DMSO-d6)3.53(s，3H)，7.31(m，3H)，7.52(d，1H)，8.30(d，2H)，8.48(d，2H)，8.53(d，1H)，9.20(d，1H)，10.56(s，1H)；质谱M+H+369。
方法63
2-[(4-溴-3-氟苯甲酰基)氨基]苯基氨基甲酸叔丁基酯使1-(N-叔丁氧基羰基氨基)-2-氨基苯(方法17，1.25g，6mmol)与4-溴-3-氟苯甲酸(1.1g，5.0mmol)以方法16中所述的类似方法反应得到标题化合物，它直接使用，无需进一步纯化；质谱(M+H+-Boc)311。
方法645-溴-2-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)嘧啶向N-2-羟基乙基吡咯烷(0.9ml，7.71mmol)和5-溴-2-氯嘧啶(1.2g，6.20mmol)在DMF(7ml)中的溶液中加入氢化钠(在矿物油中60％，0.35g，8.75mmol)。混合物在氩气气氛下在室温搅拌1小时，随后加热到90℃，再搅拌1小时。反应混合物随后在乙酸乙酯和水间分配，分离有机物，用硫酸镁干燥，并蒸发至干。生成的油状物在硅胶上经快速色谱法纯化，用在二氯甲烷中的甲醇的增加梯度(含有1％氨水溶液，0.88m)洗脱得到标题化合物(640mg，38％)；NMR谱(CDCl3)1.76(m，4H)，2.39(m，4H)，3.90(t，2H)，4.48(t，2H)，8.50(s，2H)；质谱M+H+272。
方法65-66采用方法39中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-[2-(甲基磺酰基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基]苯甲酰胺(方法54)与合适的胺反应得到表15中所述的化合物。如果需要，生成的残余物在硅胶上经快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-15％)洗脱。
表15 方法67[2-(4-{[(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)氨基]羰基}苯基)-1，3-噻唑-5-基]甲基环己基氨基甲酸酯采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，219mg，0.5mmol)与(2-氯-1，3-噻唑-5-基)甲基环己基氨基甲酸酯(138mg，0.5mmol)反应。粗残余物在乙酸乙酯中搅拌16小时，随后过滤，与水混合，用Varian Chem Elut Column(CE1010)除去含水物。浓缩生成的溶液，在硅胶上经快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-30％)洗脱得到标题化合物；质谱M+H+551。
方法68N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-{5-[2-(甲基硫代)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}苯甲酰胺采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，219mg，0.5mmol)与4-(5-溴噻吩-2-基)-2-(甲硫基)嘧啶(145mg，0.5mmol)反应。粗残余物在乙酸乙酯/水中搅拌1小时，随后过滤，用Varian Chem Elut Column(CE1010)除去含水物。浓缩生成的溶液，由甲醇重结晶得到标题化合物；质谱M+H+-Boc463。
方法69[2-(4-{[(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)氨基]羰基}苯基)-1，3-噻唑-5-基]甲基苯基氨基甲酸酯采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13，219mg，0.5mmol)与(2-氯-1，3-噻唑-5-基)甲基N-苯基氨基甲酸酯(136mg，0.5mmol)反应。粗残余物在乙酸乙酯/水中搅拌16小时，随后过滤，用Varian Chem Elut Column(CE1010)除去含水物。浓缩生成的溶液，在硅胶上经快速色谱法纯化，用甲醇/二氯甲烷(0-30％)洗脱得到标题化合物；质谱M+H+-Boc 489。
方法70[2-(4-1[(2-氨基苯基)氨基]羰基)苯基]-1，3-噻唑-5-基]甲基苯基氨基甲酸酯采用实施例12中所述的类似方法，使合适的N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)苯甲酰胺原料反应得到表16中所述的化合物盐酸盐。
表16
方法714-{4-[({2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基}氨基)羰基]苯基}-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸异丁基酯将碳酸氢钠的饱和溶液(3ml)加入4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯(方法72，200mg，0.60mmol)在1，2-二甲氧基乙烷(3ml)中的搅拌溶液中。加入N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13)(318mg，0.72mmol)，随后加入四(三苯基膦)钯(100mg，0.09mmol)，混合物在80℃下搅拌18小时。冷却的混合物在乙酸乙酯和水间分配，分离有机物，用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发。生成的残余物经快速柱色谱法纯化(用在二氯甲烷中的0-15％甲醇洗脱)得到标题化合物(220mg，74％)；NMR谱(DMSO-d6)1.42(s，9H)，1.43(s，9H)，2.48(m，2H)，3.55(m，2H)，4.02(m，2H)，6.31(s，1H)，7.17(m，2H)，7.52(m，2H)，7.58(d，2H)，7.92(d，2H)，8.62(s，1H)，9.79(s，1H)；质谱M+H+494。
方法724-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯将正丁基锂在己烷中的1.6m溶液(6.9ml，11mmol)在-78℃下加入二异丙基胺(1.5ml，11mmol)在THF中的搅拌溶液中，混合物搅拌30分钟。加入4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.0g，10mmol)在THF中的溶液，20分钟后，加入N-苯基-二(三氟甲基磺酰亚胺)(3.9g，11mmol)在THF中的溶液。混合物在室温下搅拌过夜，蒸发溶剂。生成的残余物在乙醚和2M氢氧化钠水溶液间分配，分离有机层，用盐水洗涤1次，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发得到标题化合物(3.01g，83％)；NMR谱(DMSO-d6)1.48(s，9H)，2.44(m，2H)，3.63(t，2H)，4.04(d，2H)，5.76(s，1H)。
方法731-溴乙酰基-1，2，3，4-四氢喹啉将1，2，3，4-四氢喹啉(10g，75mmol)溶解在苯(40ml)中，冷却到10℃，在1小时内滴加溴乙酰基溴(16g，80mmol)在苯(40ml)中的溶液。混合物再搅拌15分钟，加入2M氢氧化钠水溶液(500ml)。分离有机层，用水(100ml)洗涤，用硫酸镁干燥，蒸发得到粗产物油状物。油状物经减压蒸馏，随后由60-80石油醚重结晶纯化得到产物无色固体(12.5g，66％)。分析计算C11H12ONBr得到C 52.0％，H 4.8％，N 5.5％，Br31.4％；实验值C 51.9％，4.8％，N 5.6％，Br 30.9％。
方法74-75采用方法4中所述的类似方法，使N-(2-叔丁氧基羰基氨基苯基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰胺(方法13)与所需的氯代杂环反应得到表17中所述的化合物。
表17
方法767-氯噻吩并[3，2-b]吡啶将噻吩并[3，2，b]吡啶-7-醇(200mg；1.32mmol)加入磺酰氯(1.57g；13.2mmol)中，随后加入1滴DMF。溶液在80℃下搅拌4小时，冷却的溶液用乙酸乙酯稀释，用碳酸氢钠饱和溶液(25ml)中和至pH 7。有机层用盐水洗涤，干燥和浓缩得到标题化合物(112mg；50％)；质谱M+H+170。
权利要求
1.式(I)化合物 其中环A是杂环基，其中，如果所述杂环基包含-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代；R1是在碳上的取代基，其选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基；G、J和K分别选自C1-8烷基、C2-8烯基、C1-8链烷酰基、C18烷基磺酰基、C1-8烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-8烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-8烷基)2氨基甲酰基、苄氧基羰基、苯甲酰基、苯基磺酰基、芳基、芳基C1-6烷基或(杂环基)C1-6烷基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或C1-6烷基取代；Q是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基氨基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、(杂环基)C1-6烷氧基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、苯基或苯基C1-6烷基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)C(O)N(Rb)-、-N(Ra)C(O)O-、-OC(O)N(Ra)-、-C(O)N(Ra)-，-S(O)r-、-SO2N(Ra)-、-N(Ra)SO2-；其中Ra和Rb分别选自氢或任选被一个或多个F取代的C1-6烷基和r是0-2；D和F分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基、C1-6链烷酰基氧基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6链烷酰氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基；m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同；R2是卤素；n是0，1或2；其中R2可以是相同或不同的；R3是氨基或羰基；R4是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧基、C1-3链烷酰基、C1-3链烷酰基氧基、N-(C1-3烷基)氨基、N，N-(C1-3烷基)2氨基、C1-3链烷酰氨基、N-(C1-3烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-3烷基)2氨基甲酰基、C1-3烷基S(O)a，其中a是0-2、C1-3烷氧基羰基、N-(C1-3烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-3烷基)2氨磺酰基；p是0，1或2；其中R4可以是相同或不同的；或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺；其前提是所述化合物不是N-(2-氨基-6-羟基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；N-(2-氨基-6-甲基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；N-(2-氨基苯基)-4-(1-叔丁氧基羰基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺；或N-(2-氨基苯基)-4-(1-甲基高哌嗪-4-基)苯甲酰胺。
2.权利要求1的式(I)化合物，其中环A是吡啶基、喹啉基、吲哚基、嘧啶基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、吡嗪基、噻唑基、噻吩基、噻吩并嘧啶基、噻吩并吡啶基、嘌呤基、三嗪基、噁唑基、吡唑基或呋喃基；其中如果环A含有-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代。
3.权利要求1的式(I)化合物，其中R1是在碳上的取代基，其选自卤素、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N-(C1-6烷基)氨基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是羟基、巯基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或C1-6链烷酰氨基；G、J和K分别选自C1-8烷基、C2-8烯基、C1-8链烷酰基、芳基、芳基C1-6烷基或(杂环基)C1-6烷基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或C1-6烷基取代；Q是氰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基氨基、芳基、芳氧基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、苯基或苯基C1-6烷基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)C(O)N(Rb)-、-N(Ra)C(O)O-、-OC(O)N(Ra)-、-C(O)N(Ra)-、-S(O)r-、-SO2N(Ra)-、-N(Ra)SO2-；其中Ra和Rb分别选自氢或任选被一个或多个F取代的C1-6烷基和r是0-2；D和F分别选自卤素、C1-6烷氧基或N，N-(C1-6烷基)2氨基。
4.权利要求1的式(I)化合物，其中m是1。
5.权利要求1的式(I)化合物，其中R2是氟，n是0或1。
6.权利要求1的式(I)化合物，其中R3是氨基。
7.权利要求1的式(I)化合物，其中p是0。
8.权利要求1的式(I)化合物，其中环A是吡啶基、喹啉基、吲哚基、嘧啶基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、吡嗪基、噻唑基、噻吩基、噻吩并嘧啶基、噻吩并吡啶基、嘌呤基、三嗪基、噁唑基、吡唑基或呋喃基；其中如果环A含有-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代；R1是在碳上的取代基，其选自卤素、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N-(C1-6烷基)氨基、芳基、芳氧基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是羟基、巯基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自卤素、硝基、氰基、羟基、C1-6烷氧基、N，N-(C1-6烷基)2氨基或C1-6链烷酰氨基；G、J和K分别选自C1-8烷基、C2-8烯基、C1-8链烷酰基、芳基、芳基C1-6烷基或(杂环基)C1-6烷基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或C1-6烷基取代；Q是氰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6链烷酰基氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基氨基、芳基、芳氧基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、杂环基、(杂环基)C1-6烷基、苯基或苯基C1-6烷基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)C(O)N(Ra)-、-N(Ra)C(O)O-、-OC(O)N(Ra)-、-C(O)N(Ra)-、-S(O)r-、-SO2N(Ra)-、-N(Ra)SO2-；其中Ra和Rb分别选自氢或任选被一个或多个F取代的C1-6烷基和r是0-2；D和F分别选自卤素、C1-6烷氧基或N，N-(C1-6烷基)2氨基；m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同的；R2是氟或氯；n是0，1或2，其中R2可以是相同或不同的；R3是氨基或羟基；R4是卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、羧基或氨基甲酰基；p是0，1或2，其中R4可以是相同或不同的；或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
9.权利要求1的式(I)化合物，其中环A是吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、喹啉-8-基、嘧啶-6-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吗啉-4-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-基、哌嗪-4-基、哒嗪-5-基、吡嗪-6-基、噻唑-2-基、噻吩-2-基、噻吩并[3，2d]嘧啶基、噻吩并[3，2b]嘧啶基、噻吩并[3，2b]吡啶基、嘌呤-6-基或三嗪-6-基；其中如果环A含有-NH-部分，氮可任选被选自K的基团取代；R1是在碳上的取代基，其选自氟、氯、氨基、甲基、乙基、丙基、甲氧基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-丙基氨基、N-丁基氨基、苯基、萘基乙基、哌嗪-1-基、哌啶-1-基、哌啶-4-基、2-(硫代甲基)-嘧啶-4-基、四氢呋喃-2-基甲基、四氢吡喃-2-基甲基、1，2，5-噻二唑-3-基乙基、哌啶-1-基甲基、吡啶-2-基甲基，或基团(B-E-)；其中R1，包括基团(B-E-)，可在碳上被一个或多个W任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被J取代；W是羟基、甲基、乙基、乙氧基、N，N-(二乙基)氨基、N，N-(二丁基)氨基，或基团(B’-E’-)；其中W，包括基团(B’-E’-)，可在碳上被一个或多个Y任选取代；Y和Z分别选自氟、氯、溴、硝基、氰基、羟基、甲氧基、N，N-(二甲基)氨基或甲基羰基氨基；G、J和K分别选自甲基、乙基、丙基、戊基、2-甲基丁基、丁基、乙酰基、苯甲酰基、3-(吡咯-1-基)丙基或吡咯烷-2-酮-(5S)-甲基；其中G，J和K可任选在碳上被一个或多个Q取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被氢或甲基取代；Q是氰基、羟基、甲氧基、乙氧基、甲基羰基氧基、甲氧基羰基、叔丁氧基羰基氨基、苯基或基团(B”-E”-)；其中Q，包括基团(B”-E”-)，可在碳上被一个或多个Z任选取代；B、B’和B”分别选自甲基、乙基、丙基、环已基、苯基、苄基、1，2，3，4-四氢喹啉基、3-吗啉代丙基、2-吗啉代乙基、2-吡咯烷-1-基乙基、3-吗啉代丙基、3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基、2-哌啶-1-基乙基、3-哌啶-1-基丙基、吡啶-3-基甲基或咪唑-1-基丙基；其中B、B’和B”可在碳上被一个或多个D任选取代；和其中如果所述杂环包含-NH-部分，氮可任选被选自G的基团取代；E、E’和E”分别选自-N(Ra)-、-O-、-C(O)-、-NHC(O)-、-N(Ra)C(O)O-；其中Ra是氢或任选被一个或多个F取代的甲基；D和F分别选自氟、甲氧基或乙氧基；m是0，1，2，3或4；其中R1可以是相同或不同的；R2是氟；n是0或1；R3是氨基；R4是卤素；p是0，1或2，其中R4可以是相同或不同的；或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
10.制备权利要求1的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯的方法，该方法包括(a)式(II)化合物 其中X是反应基团，与式(III)化合物反应 其中L1和L2是配体；(b)式(IV)化合物 其中L1和L2是配体，与式(V)化合物反应 其中X是反应基团；或(c)在4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物存在下，式(VI)化合物 与式(VII)化合物反应 随后，如果需要i)转化式(I)化合物为式(I)的另一化合物；和/或ii)除去任何保护基团。
11.药物组合物，其含有权利要求1-9的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺和可药用的稀释剂或载体。
12.用作药物的权利要求1-9的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
13.权利要求1-9的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺在生产用于在温血动物，例如人体中产生HDAC抑制效果的药物中的应用。
14.在所需该治疗的温血动物，例如人体中产生HDAC抑制效果的方法，其包括向所述动物给药治疗有效量的权利要求1-9的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
15.权利要求1-9的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺在生产用于治疗癌症的药物中的应用。
16.在所需该治疗的温血动物，例如人体中治疗癌症的方法，其包括向所述动物给药治疗有效量的权利要求1-9的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺。
17.用于治疗癌症的权利要求1-9的式(I)化合物或其可药用的盐或体内可水解酯或酰胺的用途。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物，其中环A是杂环基；m是0－4和每个R
文档编号C07D277/30GK1642915SQ03807431
公开日2005年7月20日 申请日期2003年4月2日 优先权日2002年4月5日
发明者E·S·E·斯托克斯, C·A·罗伯茨, M·J·瓦林 申请人:阿斯特拉曾尼卡有限公司