专利名称：d4T-5′-氢亚磷酸异丙酯的合成方法
技术领域：
本发明涉及一种核苷氢亚磷酸酯，尤其是涉及一种如式I所示结构的具有潜在抗艾滋 病病毒活性的2', 3，-双脱氢-2，， 3，-双脱氧胸苷(2，， 3，-didehydro-2，， 3，-dideoxythymidine，简称 为d4T) -5'-氢亚磷酸异丙酯(简称为d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯)的合成方法。
自1987年第一个在临床上使用的治疗HIV感染药物齐多夫定(Zidovudine,AZT,又称叠氮 胸苷)问世以来，核苷类药物在治疗艾滋病引起的相关疾病中一直占据着重要的地位。到2007 年，美国FDA批准在美国上市的29种治疗艾滋病感染药物中有13种属于核苷类药物，占总 数的45%。但在临床上长期单独使用核苷类药物都会有不同程度的耐药性出现，如使用AZT 半年就会导致病毒变异株的出现(AntonelIi G Turriziani 0, et al. AIDS Res. Hum. Retroviruses 1996，12:223~228.)。另外，有些核苷类药物在使用中也会产生其它毒副作用。比如，AZT对 造血系统会产生毒性，由它引起的骨髓抑制效应，比如白血病和贫血症等已有报道(1、 Inoue T, Tsushita K, Itoh T, et al. Antimicrob. Agents Chemother. 1989, 33: 576~579 ; 2、 Dornsife R E, Averett D R. Antimicrob. Agents Chemother. 1996， 40: 514~519)。因此通过对这类药物进行改性 修饰从而降低药物毒性和病毒耐药性是目前抗艾滋病药物设计的一个研究热点。
一些核苷氢亚磷酸酯，如AZT-5'-氢亚磷酸环己酯(结构如下式II所示)，d4T-5'-氢亚磷 酸异丙酯等，由于它们的结构中具有亲酯性的基团，使其比相应的核苷具有更强的对细胞膜 的穿透能力，从而拥有更高的抗艾滋病病毒的活性，更低的细胞毒性；亲酯性基团的引入也 使得它们更不易引起艾滋病病毒的变异。临床实验数据显示,在几种核苷氢亚磷酸酯中，d4T-5'
背景技术：
-氢亚磷酸异丙酯具有很强的抗艾滋病病毒活性(Prokrovsky A G， Pronayeva T R， KrayevskyA A， et al. 7Vwc/eas7'fife& iVwc/eo//^ M/c/e/c Jc/成2001， 20(4—7), 767.)。
O
d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法与其它核苷氢亚磷酸酯的合成方法类似；核苷氢亚磷
酸酯的合成方法通常有以下4种
(a)通过核苷氢亚磷酸单酯在耦合试剂的存在下和另外一分子羟基化合物进行耦合(文
献Stawinski， J.o/Og朋0/7/w印/20rwj CTze/w^^y, Marcel Dekker Inc., New York, 1992:
377-434)。该方法步骤少，操作简单，但需首先制备出较难分离得到的核苷氢亚磷酸单酯。
(b) 通过二苯基氢亚磷酸酯的在碱的作用下进行连续酯交换合成((a)KersA， Kers, I， Kraszewski A， Sobkowski M， Szabo T， Thelin M， Zain， R.; Stawinski, J. iVwc/e柳'^ M/c/W/fifes 1996, 75, 361. (b) Xiao， Q.; Sun, J.; Ju， Y.; Zhao， Y. F.; Cui, Y. X. r"ra/2e^0"2002, ￥3(30), 5281.);该方法无须使反应体系严格无水，给操作带来一定方便，但产物较难分离纯化；
(c) 通过核苷磷酰胺二酯在1//-四氮唑的水溶液中水解制备得到(PadiyaKJ， SalunkheM M.历oorg. MM. Ozem. 2000, & 337.)。该方法步骤少，操作简单，但需要首先制备出较难分 离得到的核苷磷酰胺二酯。
(d) 从三氯化磷和核苷出发，用类Abuzov反应合成这类化合物(文献SunXB， KangJX， ZhaoYF， C/ e肌Co柳w. 2002,20: 2414.)。该方法原料易得，但所需步骤相对较多，反应时 间长，反应产物较复杂，往往需要多次用硅胶柱层析才能得到纯化的产物。
发明内容
本发明的目的在于提供一种d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法。
本发明的技术方案是用氯化一2 —氯一1， 3 — 二甲基咪唑啉DMC(2-chloro-l， 3-dimethylimidazolinium Chloride,结构如下式VH所示)为縮合剂，使d4T (结构如式IV 所示)和异丙醇在碱性溶剂里，先后与亚磷酸(结构如下式V所示)的两个羟基縮合，用一 锅法合成d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯。
<formula>formula see original document page 6</formula>本发明所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的结构式为式I :
<formula>formula see original document page 6</formula>本发明所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法可以通过下式来表示:
<formula>formula see original document page 6</formula>式中，Base:指有机碱。
由亚磷酸出发，在碱性条件下用縮合剂氯化一2—氯一1，3 — 二甲基咪唑啉(2-chloro-1, 3-dimethylimidazolinium Chloride, DMC)使其与2，， 3'-双脱氢-2，， 3，-双脱氧胸苷(d4T)缩合 生成式VI所示结构的d4T-5'-氢亚磷酸单酯，然后在碱性条件下用縮合剂DMC使d4T-5'-氢亚 磷酸单酯与异丙醇縮合，生成如式I所示的目标产物d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯。
本发明包括以下步骤
1)在氮气或氩气保护下，把1. 0eq的2', 3'-双脱氢-2', 3，-双脱氧胸苷(d4T)溶解在液态有
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机碱中，再加入1.0 1.2eq的亚磷酸，搅拌使其溶解，得溶液A;
2) 在氮气或氩气保护下，把1.0 1.5eq的氯化一2 —氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉(DMC)溶 解在第l有机溶剂中，得溶液B，然后在搅拌及氮气或氩气保护下将溶液B加到溶液A中反 应，得反应液，直到点板发现2'，3'-双脱氢-2',3'-双脱氧胸苷(d4T)消失；
3) 在氮气或氩气保护下，把0.8 1.0eq的异丙醇溶解在第2有机溶剂中，得溶液C， 然后在搅拌及氮气或氩气保护下将溶液C加至反应液中，得溶液D;
4) 在氮气或氩气保护下，把1.0 1.5eq氯化一2—氯一1， 3 — 二甲基咪唑啉(DMC)溶解 在第3有机溶剂中，得溶液E，然后在搅拌及氮气或氩气保护下将溶液E加到溶液D中反应， 直到点板发现式d4T-5'-氢亚磷酸单酯消失；
5) 反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后用第4有机溶剂溶解，并用硅胶柱 层析纯化，即分离出d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯。
所述的液态有机碱最好选自吡啶，2-甲基吡啶，3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，2，3-二甲基 吡啶，2，4-二甲基吡啶，2，5-二甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，2，3，5-三甲基吡啶，2， 4,6_三 甲基吡啶，六氢吡啶，四氢吡咯，三甲胺，三乙胺，三丁胺等中的至少一种。
在步骤2)中，所述的反应的温度最好为一10 60"C，反应的时间最好为2 30min。第 l有机溶剂选自二氯甲垸，三氯甲烷，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氢呋喃，1，4-二氧六环， 乙腈等中的至少一种。
第2有机溶剂选自二氯甲垸，三氯甲烷，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，1,4-二 氧六环，乙腈等中的至少一种。
在步骤4)中，所述的反应的温度最好为一10 60。C，反应的时间最好为2 30min。第 3有机溶剂选自二氯甲烷，三氯甲垸，1，2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氢呋喃，1，4-二氧六环， 乙腈等中的至少一种。
第4有机溶剂选自二氯甲烷，三氯甲烷，1,2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，1,4-二 氧六环，乙腈等中的至少一种。
与现有的合成d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的方法相比，本发明具有以下突出优点 (l)原料易得，反应所需的d4T是一种上市多年的抗艾滋病药物，在国内有多家企业大 量生产，可方便的购得；亚磷酸，二氯甲烷，乙酸乙酯，吡啶等都是常规试剂，也可方便购 得；DMC需要自己制备，但制备方法成熟，且制备所需时间短，整个制备DMC的过程只需 10h;所合成的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的纯度一般可达到98%以上。 (2) 反应时间短，本发明所述的合成d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的反应在15 40min之内就 可以完成，比其它合成d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的方法要短许多，提高了效率；且产率可以达 到66%，与其它合成d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的方法的产率相近；
(3) 反应条件温和，本发明所述的合成d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的反应，无需加热，无需 冷却，在室温下就可以进行，节约能耗；
(4) 反应步骤少，本发明所述的4成d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的反应只需两步就可以合成 出d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯；节省了溶剂和试剂；
(5) 产物易于分离纯化，反应结束后，用硅胶柱层析就可以得到纯度98X以上的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯。
具体实施例方式
以下通过实施例对本发明作进一步的说明。 实施例1
在氮气保护下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL吡啶中，然后加入1. leq亚磷酸，25 t:搅拌使其溶解；在氮气保护下用2mL.的二氯甲烷把l.leq DMC溶解；25°C，搅拌及氮气保 护下把DMC的二氯甲烷溶液滴加到上述d4T和亚磷酸的吡啶溶液中，滴加完毕后，25。C搅拌 5minc
在氮气保护下，把0.9eq的异丙醇溶解lmL在的二氯甲烷中，然后在搅拌及氮气保护下 把该异丙醇的二氯甲烷溶液滴加到上述反应液中。
在氮气保护下，把l. leq DMC溶解在2mL二氯甲垸中，25'C，搅拌及氮气保护下把DMC 的二氯甲烷溶液滴加到上述溶液中，滴加完毕后，25。C搅拌10min。
反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后得淡黄色液体，加入少量二氯甲烷溶 解后用硅胶柱层析纯化，洗脱剂用二氯甲烷甲醇=30: 1 。
得白色固体218mg，产率66%。 .'H NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 84(br, 1H， H-3)， 6.86'6.85*(d， JP—H= 700Hz, 1H，P-H), 7. 32 (d, J = 20Hz， 1H， H-6) ， 7. 05-7. 03 (m, 1H, H—1')， 6. 35-6. 33(m, 1H,H-2， ), 5. 93_5. 92(m, 1H, H-3， )' 5. 02 (br， 1H'H-4， ) ， 4. 85-4. 73 (m, 1H, 0-C H(CH3)2)， 4.34-4.20(m, 2H,H-5， )， 1. 93(s, 3H， CHa-5), 1. 37(d'J = 8Hz'6H, O-CH (CH3) 2)卯m; 13CNMR(100MHz， CDC13): S = 163.64， 150.77, 135.79， 133.00， 127.72, 111.25, 89.58， 84.55, 71.92, 65.25， 24.04， 23.77， 12. 38ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13): S =8.35, 7.89 卯m; ESI-MS: 353.1 (M+Na)+。
实施例2
在氩气保护下，把224mg (l醒ol) d4T溶解在5mL 2-甲基吡啶中，然后加入1.0eq亚磷 酸，0'C搅拌使其溶解；在氩气保护下用2mL三氯甲烷把1.0eq DMC溶解；0°C，搅拌及氩气 保护下把DMC的三氯甲垸溶液滴加到上述d4T和亚磷酸的2-甲基吡啶溶液中，滴加完毕后， O'C搅拌10min。
在氩气保护下，把0.9eq的异丙醇溶解在lmL三氯甲垸中，然后在搅拌及氩气保护下把 该异丙醇的三氯甲垸溶液滴加到上述反应液中。
在氩气保护下，把1.0eqDMC溶解在2mL三氯甲垸中，0'C，搅拌及氩气保护下把DMC的 三氯甲烷溶液滴加到上述溶液中，滴加完毕后，0'C搅拌15min。
反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后得淡黄色液体，加入少量三氯甲烷溶 解后用硅胶柱层析纯化，洗脱剂用三氯甲垸乙醇=40: 1 。
得白色固体204mg，产率62%。 !H NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 83(br, 1H， H-3)， 6. 86， 6. 85*(d, JP—H = 700Hz， 1H， P-H)， 7. 31 (d， J = 20Hz， 1H' H-6)， 7. 04-7. 02(m， 1H， H_l，)， 6. 35-6.33(m， 1H,H-2' ) ， 5. 93-5. 92 (m, 1H， H-3， )' 5. 02(br, 1H, H-4' ) ， 4, 85—4. 73 (m, 1H, 0-C H(CH3)》，4. 34-4. 20(m，2H,H-5' )， 1. 93(s， 3H， CHj-5) ， 1. 37 (d, J = 8Hz， 6H， O-CH (CH3) 2) ppm; 13CNMR(100MHz， CDC13): S = 163.62， 150.75, 135.79, 133.01， 127.72， 111.25' 89.58' 84.55， 71.92, 65.22, 24.04, 23.77, 12. 38ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13): S =8.34' 7.88 ppm; ESI-MS: 353.1 (M+Na)+。
本实施例2所用的2-甲基吡啶可用3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，或2-甲基吡啶，3-甲基 吡啶，4-甲基吡啶的任意配比混合液代替。
实施例3
在氮气保护下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL 2,3-二甲基吡啶中，然后加入1. 2eq 的亚磷酸，25'C搅拌使其溶解；在氮气保护下用2mL四氢呋喃把1.2eq的DMC溶解；一10'C， 搅拌及氮气保护下把DMC的四氢呋喃溶液滴加到上述d4T和亚磷酸的2， 3-二甲基吡啶溶液中， 滴加完毕后，在一l(TC下搅拌15min。
在氮气保护下，把1.0eq的乙醇溶解lmL在四氢呋喃中，然后在搅拌及氮气保护下把该 乙醇的四氢呋喃溶液滴加到上述反应液中。
在氮气保护下，把1.2eq DMC溶解在2mL四氢呋喃中，在一10'C下，搅拌及氮气保护下 把DMC的四氢呋喃溶液滴加到上述溶液中，滴加完毕后，在一10'C下搅拌15min。
反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后得淡黄色液体，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅胶柱层析纯化，洗脱剂用乙酸乙酯甲醇=30: 1 。
得白色固体177mg,产率56%。 NMR (400MHz， CDC13): S = 9. 03(br， 1H， H-3)， 6.86，6.85*(d， Jp— = 700Hz， 1H, P-H), 7. 30(d, J = 16Hz， 1H， H-6), 7. 06-7. 04(m， 1H， H-1，)， 6. 36-6.32(m, 1H，H-2， ) ， 5. 96-5. 92 (m, 1H， H-3， ), 5. 02(br， 1H, H_4， ), 4. 35-4. 26 (m， 2H, 0-C H2CH3) ， 4. 23-4. 13 (m， 2H, H-5， ) ， 1. 92 (s， 3H' CHa-5) ， 1. 37 (t' J = 7. 2Hz, 3H, 0-CH2CH3)卯m; 13C NMR(100MHz， CDC13): S= 163.71， 150.82, 135.75, 132.90， 127.77, 111.24, 89.59, 84.53， 65.38， 62.36, 16.32, 12. 32ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13，) S =9.75， 9. 36ppm; ESI-MS: 339.1 (M+Na)+。
本实施例3所用的2，3-二甲基吡啶可用2,4-二甲基吡啶，2,5-二甲基吡啶，2,6-二甲基 吡啶，2，3，5-三甲基吡啶，2,4,6-三甲基吡啶或2，3-二甲基吡啶，2,4-二甲基吡啶，2， 5-二 甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，2,3,5-三甲基吡啶，2，4,6-三甲基吡啶的任意配比混合液代替。
实施例4
在氮气保护下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5raL六氢吡啶中，然后加入1. leq的亚磷 酸，4(TC搅拌使其溶解；在氮气保护下用2mL 1， 2-二氯乙烷把1. leq的DMC溶解；40°C，搅 拌及氮气保护下把DMC的1， 2-二氯乙烷溶液滴加到上述d4T和亚磷酸的六氢吡啶溶液中，滴 加完毕后，4(TC搅拌10min。
在氮气保护下，把1.0eq的正丁醇溶解lmL在l，2-二氯乙垸中，然后在搅拌及氮气保护 下把该正丁醇的1,2-二氯乙垸溶液滴加到上述反应液中。
在氮气保护下，把l.leq DMC溶解在2mL 1,2-二氯乙烷中，4CTC，搅拌及氮气保护下把 DMC的1，2-二氯乙烷溶液滴加到上述碍液中，滴加完毕后，4(TC搅拌10min。
反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后得淡黄色液体，加入少量二氯甲烷溶 解后用硅胶柱层析纯化，洗脱剂用二氯甲烷乙醇=20: 1 。
得白色固体200mg，产率58%。 ^ NMR (400MHz， CDC13): S= 8. 96(br， 1H， H-3)， 6. 87,6. 84*(d, JP—H=704Hz， 1H, P-H), 7. 30(d， J = 16Hz， 1H, H-6)， 7. 05(s， 1H'H-l， )， 6.34(d, J =8Hz'lH，H-2' )，5.95-5.91(m, lH，H-3， )， 5. 02(br, 1H'H_4， ), 4. 37-4. 23(m， 2H， 0-CH2(CH2)2 CH3), 4. 18—4. 04 (m， 2H' H—5' )' 1. 92 (s， 3H, CHs—5), 1. 68-1. 64 (m, 2H， 0—CH2CH2CH2CH3) ， 1. 45_1. 3 5 (m, 2H, 0-CH2CH2CH2CH3) ， 0. 94 (t, J=7. 4Hz, 3H, 0-CH2CH2CH2CH3) ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.67, 150.78, 135.73， 132.90, 127.77， 111.27, 89.60, 84.52, 66.04， 65.39, 32.31， 18.63, 13.46， 12. 33ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S =9.92， 9. 57 ppm; ESI-MS:
367.1 (M+Na)十。 实施例5
在氮气保护下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL四氢吡咯中，然后加入1. leq的亚磷 酸，60。C搅拌使其溶解；在氮气保护下用2tnL 1，4-二氧六环把1.5eq的DMC溶解；6CTC，搅 拌及氮气保护下把DMC的1， 4-二氧六环溶液滴加到上述d4T和亚磷酸的四氢吡咯溶液中，滴 加完毕后，6(TC搅拌2min。
在氮气保护下，把1.0eq的异丁li溶解lmL在1,4-二氧六环中，然后在搅拌及氮气保护 下把该异丁醇的1， 4-二氧六环溶液滴加到上述反应液中。
在氮气保护下，把1.5eq DMC溶解在2mL 1,4-二氧六环中，60°C，搅拌及氮气保护下把 DMC的1，4-二氧六环溶液滴加到上述溶液中，滴加完毕后，6(TC搅拌5min。
反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后得淡黄色液体，加入少量三氯甲烷溶 解后用硅胶柱层析纯化，洗脱剂用三氯甲垸甲醇=50: 1 。
得白色固体210mg，产率61%。 & NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 94(br， 1H， H_3)， 6.86，6.85*(d, JP—H= 700Hz, 1H， P—H), 7.30(d，J= 16Hz, 1H， H—6)， 7. 06—7. 03(m, 1H， H-l，)， 6. 34(d， J=8Hz， 1H，H-2， )， 5. 95—5. 92(m, 1H， H_3， )， 5. 02(br， 1H， H_4， )， 4. 37—4. 22(m， 2H， 0_ CH2CH(CH3)2), 3.94-3.87(m，2H，H-5, )'， 1. 99-1. 93(m， 1H， 0-CH2CH(CH3)2)， 1. 92(s， 3H， CH3_5), 0.96-0.94(m'6H，0-CH2CH(CH3)2)ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.65， 150.79, 135.71, 132.90, 127.77, 111.26, 89.62, 84.52, 72.07, 65.40， 29.10， 18. 59—18. 55 (2C), 12. 35ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S = 9.93, 9. 65 ppm; ESI-MS: 367.1 (M+Na)+。
实施例6
在氩气保护下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL三乙胺中，然后加入1. leq的亚磷酸， 25。C搅拌使其溶解；在氩气保护下用2mL乙酸乙酯把l.leq的DMC溶解；一5。C，搅拌及氮气 保护下把DMC的乙酸乙酯溶液滴加到上述d4T和亚磷酸的三乙胺溶液中，滴加完毕后，一5 "C搅袢12min。
在氩气保护下，把0.9eq的叔丁醇溶解lmL在乙酸乙酯中，然后在搅拌及氩气保护下把 该叔丁醇的乙酸乙酯溶液滴加到上述反应液中。
在氩气保护下，把l. leq DMC溶解在2mL乙酸乙酯中，—5°C，搅拌及氩气保护下把DMC 的乙酸乙酯溶液滴加到上述溶液中，滴加完毕后，一5'C搅拌20min。
反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后得淡黄色液体，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅胶柱层析纯化，洗脱剂用乙酸乙酯乙醇=40: 1 。
得白色固体193mg，产率56%。 NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 82 (br, 1H, H-3)， 6. 89， 6. 86*(d, JP—H=700Hz, 1H, P_H)， 7. 34(d， J=20Hz, 1H， H-6)， 7. 04(s, 1H, H-l， )， 6. 35-6. 32( m'lH,H-2， )' 5.93-5.91(m, 1H,H-3， )' 5. 01 (br, 1H， H_4， )' 4. 33-4. 18(m, 2H'm， 2H, H-5') 1.92(s， 3H,CHa-5)， 1. 54(s, 9H， -C(CH3):,)ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.68， 150.79， 135.90, 133.13, 127.61， 111,24, 89.56' 84.82， 84.62， 65,16, 30. 45-30. 33 (3C)， 12. 41ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S = 4.70, 3.97 ppm; ESI陽MS: 367. 1 (M+Na)+。
本实施例6所用的三乙胺可用三甲胺代替。
实施例7
在氩气保护下，把224mg (lmraol).d4T溶解在5mL三丁胺中，然后加入1. leq的亚磷酸， 25。C搅拌使其溶解；在氩气保护下用2mL乙腈把l.leq的DMC溶解；一5'C，搅拌及氮气保护 下把DMC的乙腈溶液滴加到上述d4T和亚磷酸的三丁胺溶液中，滴加完毕后，一5。C搅拌12min。
在氩气保护下，把0.9eq的叔丁醇溶解lmL在乙腈中，然后在搅拌及氩气保护下把该叔 丁醇的乙腈溶液滴加到上述反应液中。
在氩气保护下，把l. leqDMC溶解在2mL乙腈中，一5。C，搅拌及氩气保护下把DMC的乙 腈溶液滴加到上述溶液中，滴加完毕后，一5。C搅拌20min。
反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后得淡黄色液体，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅胶柱层析纯化，洗脱剂用乙酸乙酯乙醇=40: 1 。
得白色固体182mg，产率53%。〗H NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 82(br， 1H， H-3)， 6. 89, 6. 86* (d， JP—H=700Hz， 1H, P-H) ， 7. 33 (d' J=20Hz， 1H, H_6), 7. 04 (s, 1H， H-1， ) ， 6. 34-6. 31 ( m，lH,H-2， )，5. 93-5. 91(m, 1H,H—3, ), 5. 01 (br， 1H, H-4， )， 4. 32_4. 17(m， 2H， m， 2H, H—5，)， 1. 92 (s, 3H， CH3-5), 1. 54 (s， 9H, -C (Cft)》ppm; 13C NMR (100MHz ， CDC13): S = 163. 64， 150.78, 135.90, 133.13， 127.61， 111.24， 89.56, 84.81， 84.62， 65.16， 30. 46-30. 33 (3C)， 12. 40ppm; 31PNMR(160MHz， CDC13): S = 4. 70， 3. 97 ppm; ESI-MS: 367. 1 (M+Na)+。
*上述所有磷谱均用85%的磷酸作外标。
权利要求
1、d4T-5′-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于其合成路线为式中，Base指有机碱。
2、 如权利要求l所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于包括如下步骤:1) 在氮气或氩气保护下，把1.0eq的2'，3'-双脱氢-2'，3'-双脱氧胸苷溶解在液态有机碱 中，再加入1.0 1.2eq的亚磷酸，搅拌使其溶解，得溶液A;2) 在氮气或氩气保护下，把1.0 1.5eq的氯化一2—氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉溶解在第 l有机溶剂中，得溶液B，然后在搅拌及氮气或氩气保护下将溶液B加到溶液A中反应，得反 应液，直到点板发现2'， 3'-双脱氢-2'， 3，-双脱氧胸苷消失；3) 在氮气或氩气保护下，把0.8 1.0eq的异丙醇溶解在第2有机溶剂中，得溶液C， 然后在搅拌及氮气或氩气保护下将溶液C加至反应液中，得溶液D;4) 在氮气或氩气保护下，把1.0 1.5eq氯化一2—氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉溶解在第3 有机溶剂中，得溶液E，然后在搅拌及氮气或氩气保护下将溶液E加到溶液D中反应，直到 点板发现式d4T-5'-氢亚磷酸单酯消失；5) 反应结束后过滤除去固体，滤液经减压除去溶剂后用第4有机溶剂溶解，并用硅胶柱 层析纯化，即分离出d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯。
3. 如权利要求2所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于所述的液态有 机碱选自吡啶，2-甲基吡啶，3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，2,3-二甲基吡啶,2,4-二甲基吡啶， 2,5-二甲基吡啶，2,6-二甲基吡啶，2,3,5-三甲基吡啶，2，4，6-三甲基吡啶，六氢吡啶，四 氢吡咯，三甲胺，三乙胺，三丁胺中的至少一种。
4. 如权利要求2所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于在步骤2)中， 所述的反应的温度为一10 60'C，反应的时间为2 30min。
5. 如权利要求2所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于第l有机溶剂 选自二氯甲垸，三氯甲烷，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氢呋喃，1,4-二氧六环，乙腈中的 至少一种。 '
6. 如权利要求2所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于第2有机溶剂 选自二氯甲垸，三氯甲烷，1，2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氢呋喃，1，4-二氧六环，乙腈中的 至少一种。
7. 如权利要求2所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于在步骤4)中， 所述的反应的温度为一10 6(TC,反应的时间为2 30min。
8. 如权利要求2所述的d4T-5'-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于第3有机溶剂 选自二氯甲垸，三氯甲垸，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氢呋喃，1,4-二氧六环，乙腈中的 至少一种。
9. 如权利要求2所述的d4T-5'-i亚磷酸异丙酯的合成方法，其特征在于第4有机溶剂 选自二氯甲烷，三氯甲烷，1,2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，1,4-二氧六环，乙腈中的 至少一种。
全文摘要
d4T-5′-氢亚磷酸异丙酯的合成方法，涉及一种核苷氢亚磷酸酯。提供一种d4T-5′-氢亚磷酸异丙酯的合成方法。将2’，3’-双脱氢-2’，3’-双脱氧胸苷溶解在有机碱中，加入亚磷酸溶解得溶液A；将氯化-2-氯-1，3-二甲基咪唑啉溶解在第1有机溶剂中得溶液B，将溶液B加到溶液A中反应得反应液，将异丙醇溶解在第2有机溶剂中得溶液C，将溶液C加至反应液中得溶液D；将氯化-2-氯-1，3-二甲基咪唑啉溶解在第3有机溶剂中得溶液E，将溶液E加到溶液D中反应，直到点板发现式d4T-5′-氢亚磷酸单酯消失；过滤除去固体，滤液除去溶剂后用第4有机溶剂溶解，用硅胶柱层析纯化即得。
文档编号C07H19/00GK101100478SQ20071000926
公开日2008年1月9日 申请日期2007年7月24日 优先权日2007年7月24日
发明者吴剑彬, 果 唐, 赵玉芬, 祥 高 申请人:厦门大学