药根碱的提取制备方法及其在制备预防和治疗结肠癌药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种从中药中提取制备药根碱的方法及药根碱在制备预防和治疗结肠癌药物中的应用。该制备方法采用酸碱系统溶剂法，将药材粉碎后加入酸(0.1％-2％)性水性溶剂回流提取，回收溶剂后再经酸碱溶剂法得到纯度大于80％的药根碱。采用本法制备的药根碱具有纯度高、周期短、成本低的优势，是一种环保型制备方法，适合于工业化生产。
【专利说明】药根碱的提取制备方法及其在制备预防和治疗结肠癌药物 中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种利用酸碱溶剂法从中药中提取制备药根碱的方法及其在预防和 治疗结肠癌药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 药根碱（Jatrorrhizine)是原小檗碱型异喹啉类生物碱，分子式为C20H20N04,分 子量为338. 39,红黄色针状结晶，熔点208-2KTC。具有广泛的生理活性，包括抗菌、镇痛、 降压、调节免疫等功能，在医药领域有广泛的应用。
[0003] 功劳木、黄连、黄柏、黄藤、三颗针为中国药典2010年版一部收载的药材，均具有 清热燥湿，泻火解毒之功效，主治湿热泻痢、黄疸尿赤、目赤肿痛、疮疖痈肿、痢疾及黄疸型 肝炎等。现代药理研究表明他们均具有抗菌、抗溃疡、抗真菌等作用。其中活性成分为异喹 啉类生物碱，均含有小檗碱、药根碱、巴马汀等成分。
[0004] 现有技术中，有从功劳木、黄连、黄柏、三颗针等药材中提取得到小檗碱，未见从黄 连、黄柏、三颗针中提取制备药根碱的研究。专利技术（201210371939.X)发明了一种从功 劳木中制备药根碱的方法，主要采用饱和1 %氨水浸泡，以85-95%乙醇溶液为提取溶剂， 进行闪式提取，调PH1-3,滤去不溶物，滤液调节pH8-9,上大孔树脂柱富集，50 %乙醇洗脱， 进而采用制备型液相色谱分离得到药根碱。但该方法采用大孔树脂洗脱、制备色谱分离 等技术，操作复杂，成本高。专利技术（200910167852.9)提供了一种提取黄藤总生物碱、 分离药根碱的方法，其中分离药根碱采用〇. 1 % -1. 〇%的硫酸溶液，浸渍，大孔吸附树脂， 10% -60%乙醇洗脱，盐酸调pH为2,盐析后，上硅胶柱精制后，加盐酸调pH为2,干燥得药 根碱。该法采用大孔树脂洗脱，硅胶色谱柱条带分离工艺比较繁琐，并且周期长，成本高，不 适合工业化生产。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种从中药中提取制备药根碱的方法，以及药根 碱、药根碱组合物在制备预防和治疗结肠癌药物方面的应用。发明的目的是提供一种提取 制备方法操作简单，提取效率高，周期短，成本低，纯度高，适合工业化生产的药根碱的制备 方法，并将其应用于制备预防和治疗结肠癌药物。
[0006] 为解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：
[0007] -种从中药中制备药根碱的方法，其特征包括以下步骤：
[0008] 将药材粉碎置于提取容器中，加入酸性水性溶剂，回流，过滤，回收溶剂，然后用碱 调PH，静置，过滤，滤液浓缩后用酸调pH，加入5-30 %的氯化钠，静置，过滤，得干燥沉淀物；
[0009] 干燥沉淀物用碱性水性溶剂复溶，回流提取，过滤，滤液用碱调节pH，静置，过滤， 滤液浓缩后用酸调节PH，加入5-30 %的氯化钠，静置，过滤，干燥沉淀；反复重复上述步骤， 沉淀用碱性水性溶剂复溶，回流提取，过滤，得沉淀，沉淀用碱性水性溶剂复溶，过滤，滤液 浓缩，加入0-30%的氯化钠，静置，过滤，干燥沉淀，即得含量> 80%的药根碱；
[0010] 所述药材优选功劳木、黄柏、黄藤、黄连、三颗针、金果榄；
[0011] 所述提取溶剂为酸性水性溶剂，溶剂中酸的含量优选〇. 1% -2%，水性溶剂优选 水、乙醇、甲醇，酸优选盐酸、硫酸、醋酸；
[0012] 所述复溶溶剂为碱性水性溶剂，溶剂的pH优选8-14,水性溶剂优选水、乙醇、甲 醇，碱优选氨水、石灰水、氢氧化钠、氢氧化钾；
[0013] 所述酸碱溶剂系统中的酸性条件pH为0.5-7,碱性条件pH为8-14,碱优选氨水、 石灰水、氢氧化钠、氢氧化钾，酸优选盐酸、硫酸、醋酸；
[0014] 所述的药根碱在制备预防和治疗结肠癌药物中的应用；
[0015] 一种药用组合物，其特征在于含有所述的药根碱，以及含有药学上可接受的载 体；
[0016] 所述药根碱及含药根碱的组合物在制备预防和治疗结肠癌药物中的应用，其特征 在于所述的药根碱或药用组合物可制备成口服制剂、注射剂、吸入制剂或外用制剂。
[0017] 本发明经进一步研究发现药根碱采用10mg/kg、20mg/kg口服给药，与模型组相比 具有明显抑制ApcMin/+miCe结肠及小肠中肿瘤的大小、肿瘤数量的作用，并能延长生存周期。 因此，可用药根碱预防和治疗结肠癌。
[0018] 本发明所涉及的药根碱提取制备方法，采用无毒、全的溶剂、材料提取制备，提取 率高，周期短，操作简单，成本低，更适合于工业化生产。
【专利附图】
【附图说明】
[0019] 图1为药根碱对ApcMin/+MiCe小鼠生存周期的影响。
[0020] 下面结合具体实施例进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下 列实施方式。
【具体实施方式】
[0021] 实施例1 :
[0022] 取功劳木药粉Ikg加入提取容器中，加入12L的0. 2 %酸醇（50% )溶液，回流，合 并滤液，回收溶剂，浓缩药液，碱调pH为10,静置，过滤。滤液浓缩后调节pH为2,加入15% 的氯化钠，静置，过滤。干燥沉淀后，用30倍体积的碱性水溶液复溶，回流，滤液调节pH为 10,滤液浓缩后调节pH为2,加入15%的氯化钠，静置，过滤。干燥沉淀。将此沉淀用20倍 体积的碱性水溶液复溶，回流，过滤。沉淀用9的水溶液复溶，过滤，滤液浓缩，静置，过滤， 得到干燥沉淀，HPLC法检测其含量为89. 1 %。
[0023] 实施例2 :
[0024] 取黄连药粉Ikg加入提取容器中，加入12L的0. 2 %醋酸醇（50% )溶液，回流，合 并提取液，回收溶剂，浓缩药液，然后用碱调PH为9,静置，过滤。滤液浓缩后调节pH为1， 加入15%的氯化钠，静置，过滤。干燥沉淀后，用30倍体积的碱性水溶液复溶，回流，过滤， 滤液调节PH9,静置，过滤，滤液浓缩后调节pH为1，加入15 %的氯化钠，静置，过滤。干燥沉 淀。将此沉淀用10倍体积的碱性水溶液复溶，回流提取1次，过滤。沉淀用PH9的水溶液 复溶，过滤，滤液浓缩，静置，过滤，得到干燥沉淀，HPLC法检测其含量为91. 3%。
[0025] 实施例3 :
[0026] 取黄柏药粉Ikg加入提取容器中，加入12L的0. 2 %酸醇（50% )溶液，回流，合并 提取液，回收溶剂，浓缩药液，然后用碱调PH为9,静置，过滤。滤液浓缩后调节pH为1，加 入15%的氯化钠，静置，过滤。干燥沉淀后，用30倍体积的碱性水溶液复溶，回流，过滤，滤 液调节PH9,静置，过滤，滤液浓缩后调节pH为1，加入15 %的氯化钠，静置，过滤。干燥沉 淀。将此沉淀用10倍体积的碱性水溶液复溶，回流提取1次，过滤。沉淀用PH9的水溶液 复溶，过滤，滤液浓缩，静置，过滤，得到干燥沉淀，HPLC法检测其含量为85. 1 %。
[0027] 实施例4 :
[0028]ApcMin/+MiCe小鼠分笼饲养，自由饮水，从ApcMin/+MiCe小鼠出生第八周开始，给药 组分别口服给予l〇mg/kg、20mg/kg的药根碱，模型组给予高脂饲料，连续给药40周，测定小 肠与结肠中肿瘤大小，统计肿瘤数量（表1)及生存周期（图1)。
[0029] 从表1和图1可见，药根碱高剂量组明显降低ApcMin/+MiCe小肠及结肠肿瘤数量、 肿瘤的大小，延长ApcMin/+MiCe小鼠的生存周期。
[0030] 表1.药根碱对ApcMin/+Mice小鼠的影响
[0031]
【权利要求】
1. 一种从中药中提取制备药根碱的方法，其特征包括以下步骤： (1) 将药材粉碎置于提取容器中，加入酸性水性溶剂，回流，过滤，回收溶剂，然后用碱 调pH，静置，过滤，滤液浓缩后用酸调pH，加入5-30%的氯化钠，静置，过滤，得干燥沉淀物； (2) 干燥沉淀物用碱性水性溶剂复溶，回流提取，过滤，滤液用碱调节pH，静置，过滤， 滤液浓缩后用酸调节PH，加入5-30 %的氯化钠，静置，过滤，干燥沉淀； (3) 反复重复步骤（2)，沉淀用碱性水性溶剂复溶，回流提取，过滤，得沉淀，沉淀用碱 性水性溶剂复溶，过滤，滤液浓缩，加入0-30 %的氯化钠，静置，过滤，干燥沉淀，即得含量> 80 %的药根碱； (4) 其中（1)中药材优选功劳木、黄柏、黄藤、黄连、三颗针、金果榄。
2. 根据权利要求1所述，其特征在于提取溶剂为酸性水性溶剂，溶剂中酸的含量优选 0. 1% -2%，水性溶剂优选水、乙醇、甲醇，酸优选盐酸、硫酸、醋酸。
3. 根据权利要求1所述，其特征在于复溶溶剂为碱性水性溶剂，溶剂的pH优选8-14， 水性溶剂优选水、乙醇、甲醇，碱优选氨水、石灰水、氢氧化钠、氢氧化钾。
4. 根据权利要求1所述，其特征在于酸碱溶剂系统中的酸性条件pH为0. 5-7,碱性条 件pH为8-14,碱优选氨水、石灰水、氢氧化钠、氢氧化钾，酸优选盐酸、硫酸、醋酸。
5. 权利要求1所述的药根碱在制备预防和治疗结肠癌药物中的应用。
6. -种药用组合物，其特征在于含有权利要求1所述的药根碱，以及含有药学上可接 受的载体。
7. 权利要求1和6所述在制备预防和治疗结肠癌药物中的应用，其特征在于所述的药 根碱或药用组合物可制备成口服制剂、注射剂、吸入制剂或外用制剂。
【文档编号】C07D455/03GK104327072SQ201410685815
【公开日】2015年2月4日 申请日期:2014年11月25日 优先权日:2014年11月25日
【发明者】张春凤, 张素丽 申请人:中国药科大学