用于H5N8禽流感病毒检测的试剂、检测方法及应用与流程

文档序号:12743931阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于H5N8禽流感病毒检测的试剂,其特征在于:所述试剂包括引物对和探针,所述探针在引物对的扩增靶标区域内,所述引物对的上游引物为Seq ID No.1所示序列,所述引物对的下游引物为Seq ID No.2所示序列,所述探针为Seq ID No.3所示序列或者Seq ID No.3所示序列的反向互补序列;

Seq ID No.1:5’-CTGCACATAAATACCCAACYCTGTA-3’

Seq ID No.2:5’-TGAGGAATGTTCTTGTTATCCAAATGA-3’

Seq ID No.3:5’-CCACTGTATCCCGACCAATT-3’

Seq ID No.1所示序列中,Y为C或者T碱基。

2.根据权利要求1所述的用于H5N8禽流感病毒检测的试剂,其特征在于:所述探针的5’端标记有HEX荧光基因,3’端标记有BHQ淬灭基团。

3.根据权利要求1或2所述的用于H5N8禽流感病毒检测的试剂在H5N8禽流感病毒检测中的应用。

4.根据权利要求1或2所述的用于H5N8禽流感病毒检测的试剂在制备H5N8禽流感病毒检测试剂盒或设备中的应用。

5.一种用于H5N8禽流感病毒检测的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中含有权利要求1或2所述的用于H5N8禽流感病毒检测的试剂。

6.一种用于H5N8禽流感病毒检测的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中含有至少一组混合试剂,每组混合试剂由12.5μL 2×real time PCR Buffer、1μL 25×enzyme mix、终浓度0.4μM/L的引物对和终浓度0.2μM/L的探针组成;所述引物对的上游引物为Seq ID No.1所示序列,所述引物对的下游引物为Seq ID No.2所示序列,所述探针为Seq ID No.3所示序列或者Seq ID No.3所示序列的反向互补序列。

7.一种H5N8禽流感病毒的逆转录实时荧光PCR检测方法,其特征在于:包括以下步骤:

(1)提取待测样品的基因组RNA;

(2)采用权利要求6所述的试剂盒,向所述混合试剂中加入步骤(1)提取的基因组RNA,配制成反应溶液;

(3)将步骤(2)配制的反应溶液,在50℃反转录30min、95℃热启动10min,然后进入45个循环:95℃15s、55℃45s,在循环过程中于55℃时采集荧光。

8.根据权利要求7所述的H5N8禽流感病毒的逆转录实时荧光PCR检测方法,其特征在于:所述基因组RNA的提取采用RNA提取试剂盒,或者Trizol核酸抽提法。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1