1.一种两阶段发酵生产胆盐水解酶的方法,其特征在于,采用表达胆盐水解酶的重组毕赤酵母为出发菌株,两阶段控制策略发酵生产胆盐水解酶;所述两阶段控制策略是:菌体生长阶段控制温度为28~30℃,pH7.0~7.5,搅拌转速500~600rpm;产酶阶段将发酵温度降至25~28℃,pH 6.0~6.5,搅拌转速500~600rpm。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述产胆盐水解酶的毕赤酵母是以pichia pastoris GS115为宿主,以pPIC9K为载体,表达SEQ ID NO.1所示基因的重组毕赤酵母。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述重组毕赤酵母还具有α-MF信号肽。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵是以按体积比10-15%的接种量将毕赤酵母接种至发酵培养基中。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述发酵培养基配方包括:蛋白胨20g/L,酵母粉10g/L,7-10%甲醇,YNB 13.4g/L。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵前还进行活化。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述活化是挑取毕赤酵母单菌落,接种至BMGY培养基中,30℃,200~220r/min培养16-24h。
8.权利要求1所述的方法在制备含胆盐水解酶的产品中的应用。