本发明涉及丝素蛋白的制备，更具体地说是涉及一种再生丝素蛋白的制备方法。
背景技术：
天然丝素蛋白具有反向平行的β-折叠结构，在分子间和分子内氢键以及范德华力的作用下结构稳定，因此不溶于水。把不溶的天然丝素蛋白转变为可溶性再生丝素蛋白(regenerated silk fibroin，RSF)，可扩大其应用领域；再生丝素蛋白与人体组织生物相容性高，药物渗透强，以及良好的机械性能和降解性，可被应用于生物医学、医疗器材、组织工程和药物输送系统；在食品方面，研究表明再生丝素蛋白具有降血脂、促进酒精代谢和降血糖等功效，添加于食品中可以增加营养、促进健康；研究还发现，再生丝素蛋白还可以改善食品的加工特性。日本早已研发出一系列添加再生丝素蛋白的饮料、果酒和糕点，国内也有研究者利用再生丝素蛋白良好的起泡性改善蛋糕的口感。
经检索发现，现有技术主要是对再生丝素蛋白的应用进行了研究，而对丝素蛋白的溶解未作深入研究，对于再生丝素蛋白的制备过程基本未进行专题研究，尤其是未对再生丝素蛋白的制备方法与产率、效率和产品性能的关系进行研究。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种溶解性好、生产效率高的再生丝素蛋白的制备方法。
本发明再生丝素蛋白的制备方法，具体是将经热碱脱胶的废弃茧丝包括经盐溶、粗滤、超滤、干燥在内的步骤而得；所述盐溶，是将经热碱脱胶得到的脱胶丝素蛋白投入混合盐溶液，在85～100℃下加热10～15min；所述混合盐溶液优选采用3.5～4.5mol/L的氯化钙的乙醇水溶液，其中乙醇水溶液中的乙醇体积占比为20～40％。该混合盐溶液的投入量可由所属领域技术人员根据常识选择，优选按每克脱胶丝素蛋白投入15ml～20ml混合盐溶液。
以上方法中，优选的超滤、干燥工艺为：所述盐溶步骤后得到的丝素蛋白溶液经粗滤后，采用5KDa超滤脱盐，然后进行喷雾干燥。
本发明研究了不溶性丝素蛋白向可溶性再生丝素蛋白转变的条件，以丝素蛋白的生产效率和再生丝素蛋白的溶解性为指标分析了溶解体系、温度、盐浓度和乙醇浓度对丝素蛋白溶解的影响，研究出一种可应用于食品的再生丝素蛋白的制备工艺。实验表明：通过以上优选的丝素蛋白盐溶工艺，本发明方法制备再生丝素蛋白的方案与现有技术相比，丝素蛋白的溶解效率和所获取的再生丝素蛋白溶解性、产品得率等参数同时达到极佳值；所得到的再生丝素蛋白产品的分子量分布于35～245kDa，适宜作为微胶囊产品的壁材原料。本发明方法工艺耗时短、效率高、效果好，有助于再生丝素蛋白在食品等领域的进一步推广应用。
具体实施方式
下面结合具体实施例、对比例及相应实验数据，进一步对本发明再生丝素蛋白的制备方法的具体技术方案及效果进行阐述。应理解，这些实施例仅是用于说明本发明而不用于限制本发明的实施方式。
本发明再生丝素蛋白制备方法的实施例：本发明再生丝素蛋白的制备是先将废弃茧丝用热碱脱胶，再经包括盐溶、粗滤、超滤、干燥在内的步骤而得到粉末状再生丝素蛋白产品；其中热碱脱胶、粗滤、超滤、干燥可参照采用现有技术，而盐溶采用如下工艺：将经热碱脱胶得到的脱胶丝素蛋白，按每克脱胶丝素蛋白投入15ml混合盐溶液，在85～100℃下加热10～15min；所述混合盐溶液为3.5～4.5mol/L的氯化钙的乙醇水溶液，其中乙醇水溶液中的乙醇体积占比为20～40％。盐溶步骤后得到的丝素蛋白溶液经粗滤后，优选经5KDa超滤脱盐，然后进行喷雾干燥，即得到再生丝素蛋白粉末状产品。实验表明，采用本工艺制备再生丝素蛋白，丝素蛋白的完全溶解时间平均为3～13min，平均再生丝素蛋白得率达94％，再生丝素蛋白溶解性(NSI)为91～93％，平均脱盐时间为1.5～2.5小时，表明丝素蛋白的溶解效率较高；所获取的再生丝素蛋白溶解性好，再生丝素蛋白分子量分布于35～245kDa，后续实验证实与其它原料配合使用时具有较优的乳化能力和乳化稳定性，适宜作为微胶囊产品的壁材原料。
下表1－3分别是不同工艺制备再生丝素蛋白的实施对比例及相应实验数据(注：表中各实施例的不同之处在于盐溶步骤采用了不同的工艺参数，而其它步骤均采用上文所述的、相同的工艺)：
表1
表2
表3
以上实验数据表明，通过优选的丝素蛋白盐溶工艺，采用本发明方法制备再生丝素蛋白时，丝素蛋白的溶解效率和所获取的再生丝素蛋白溶解性、再生丝素蛋白得率同时达到极佳值，而脱盐时间较短。
以上内容仅是为介绍本发明技术方案而例举的一些较佳实施方式，不应视为用于限定本发明的实施形式。凡所属领域技术人员能依本发明技术方案作出的等同变化与改进，均应属于本发明技术方案的涵盖范围之内。