本发明涉及胶原蛋白技术领域，尤其涉及一种鱼胶原蛋白的提取方法及其应用。
背景技术：
胶原蛋白是一种高分子功能性蛋白质，是皮肤的主要组成部分，占皮肤真皮层80％的比重，它在皮肤中构成了一张细密的弹力网，牢固锁住水分，支撑着皮肤。鱼胶原蛋白是以鱼皮、鱼磷为原料，通过酸碱、酶切等技术把分子量控制在6000道尔顿以内的胶原蛋白，在胃肠、血管及肌肤等极易吸收，其吸收和利用率要远远高于大分子蛋白质，如动物猪、牛的皮和骨中提取胶原蛋白。但现有的鱼胶原蛋白有较大的鱼腥味，而且纯度、品质都有待改善，故急需一种鱼胶原蛋白的提取方法，解决上述技术问题。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供了一种鱼胶原蛋白的提取方法及其应用，解决上述技术问题。
本发明采用的技术手段如下：一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料鱼皮，加入鱼皮重量的2～5倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于90～105℃蒸煮10～30min，得鱼皮酸液；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率300w～500w，微波温度80～90℃，微波提取30min～60min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为1.9～2.1kv、脉冲频率为1500～2500hz、电极间距为2～5mm，萃取30～40分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥1～2小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
进一步的，所述步骤s1中，柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为(8～12):1进行配制。
进一步的，所述步骤s1中，所述预处理的条件为加入鱼皮重量3倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于100℃蒸煮20min。
进一步的，所述步骤s1中，柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为10:1进行配制。
进一步的，所述步骤s2中，所述微波处理条件为：微波功率400w，微波温度85℃，微波提取45min。
进一步的，所述步骤s3中，电场强度为2.0kv、脉冲频率为2000hz、电极间距为3mm。
进一步的，所述步骤s4中，所述离心条件为：离心力22000g～24000g、离心温度20～30℃，离心时间15～25min。
进一步的，所述步骤s4中，所述离心条件为：离心力2300g、离心温度25℃，离心时间20min。
本发明任一项所述的鱼胶原蛋白被制成胶囊剂或者片剂或者口服液体制剂。
本发明任一项所述的鱼胶原蛋白在制备具有护肤产品中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明采用酸醇预处理结合微波提取以及强电场进行提取处理，并通过离心有效分离，最后经蒸汽干燥制得鱼胶原蛋白产品。本发明制得的鱼胶原蛋白水溶性良好，无腥味，平均分子量小，蛋白质含量高，羟脯氨酸含量高，且水分含量低。本发明的提取方法较大提高了鱼胶原蛋白的纯度，有效去除鱼腥，改善了鱼胶原蛋白的口味，水溶性良好、易于被人体吸收，总体营养价值高，且水分含量低、易于保存。其中，本发明的微波提取以及强电场萃取的条件较大提高了鱼胶蛋白的提取处理效果，提高了鱼胶原蛋白的品质。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1
一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料鳕鱼鱼皮，搅碎后加入鱼皮重量的2倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于90℃蒸煮10min，得鱼皮酸液；
柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为8:1进行配制；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率300w，微波温度80℃，微波提取30min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为1.9kv、脉冲频率为1500hz、电极间距为2mm，萃取30分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心力22000g、离心温度20℃，离心15min，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥1小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
实施例2
一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料鳕鱼鱼皮，搅碎后加入鱼皮重量的5倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于105℃蒸煮30min，得鱼皮酸液；
柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为12:1进行配制；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率500w，微波温度90℃，微波提取60min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为2.1kv、脉冲频率为2500hz、电极间距为5mm，萃取40分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心力24000g、离心温度30℃，离心25min，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥2小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
实施例3
一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料鳕鱼鱼皮，搅碎后加入鱼皮重量的3倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于100℃蒸煮20min，得鱼皮酸液；
柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为10:1进行配制；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率400w，微波温度85℃，微波提取45min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为2.0kv、脉冲频率为2000hz、电极间距为3mm，萃取35分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心力2300g、离心温度25℃，离心时间20min，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥1.5小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
实施例4
一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料鳕鱼鱼皮，搅碎后加入鱼皮重量的3倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于100℃蒸煮20min，得鱼皮酸液；
柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为10:1进行配制；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率300w，微波温度80℃，微波提取30min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为2.0kv、脉冲频率为2000hz、电极间距为3mm，萃取35分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心力2300g、离心温度25℃，离心时间20min，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥1.5小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
实施例5
一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料鳕鱼鱼皮，搅碎后加入鱼皮重量的3倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于100℃蒸煮20min，得鱼皮酸液；
柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为10:1进行配制；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率400w，微波温度85℃，微波提取45min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为2.1kv、脉冲频率为2500hz、电极间距为5mm，萃取40分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心力2300g、离心温度25℃，离心时间20min，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥1.5小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
实施例6
一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料罗非鱼鱼皮，搅碎后加入鱼皮重量的3倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于100℃蒸煮20min，得鱼皮酸液；
柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为10:1进行配制；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率400w，微波温度85℃，微波提取45min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为2.1kv、脉冲频率为2500hz、电极间距为5mm，萃取40分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心力2300g、离心温度25℃，离心时间20min，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥1.5小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
实施例7
一种鱼胶原蛋白的提取方法，包括以下步骤：
s1、预处理：取原料鲤鱼鱼皮，搅碎后加入鱼皮重量的3倍的柠檬酸和乙醇混合溶液，于100℃蒸煮20min，得鱼皮酸液；
柠檬酸和乙醇混合溶液按柠檬酸：乙醇体积比为10:1进行配制；
s2、微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率400w，微波温度85℃，微波提取45min，得初提液；
s3、强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为2.1kv、脉冲频率为2500hz、电极间距为5mm，萃取40分钟，得到萃取液；
s4、离心：将步骤s3的萃取液进行离心，离心力2300g、离心温度25℃，离心时间20min，离心后去除上清液，得到鱼胶原蛋白沉淀；
s5、蒸汽干燥：将步骤s4的鱼胶原蛋白沉淀置蒸汽干燥机中干燥1.5小时，得粉末，即得鱼胶原蛋白。
对比例1
本对比例与实施例5区别在，所述微波提取：将步骤s1的鱼皮酸液于微波条件下提取，微波功率600w，微波温度60℃，微波提取45min，得初提液。
对比例2
本对比例与实施例5区别在，所述强电场萃取：将步骤s2的初提液用强电场进行萃取，电场强度为1.5kv、脉冲频率为1200hz、电极间距为6mm，萃取40分钟，得到萃取液。
一、实施例1～7与对比例1～2制得的鱼胶原蛋白分析检测结果如下：
上述检测结果表明，本发明实施例1～实施例7制得的鱼胶原蛋白水溶性良好，无腥味，平均分子量小，蛋白质含量高，羟脯氨酸含量高，且水分含量低。表明本发明的提取方法较大提高了鱼胶原蛋白的纯度，有效去除鱼腥，改善了鱼胶原蛋白的口味，水溶性良好、易于被人体吸收，总体营养价值高，且水分含量低、易于保存。另外，根据对比例1～2制得的产品结果表明，本发明的微波提取以及强电场萃取的条件较大提高了鱼胶蛋白的提取处理效果，提高了鱼胶原蛋白的品质。
二、将发明实施例1～7的鱼胶原蛋白制成胶囊剂，将160名年龄在30至45岁的女性志愿者随机分8组，即实施例1～7测试组和对照组，每组20名，要求每个测试组相应服用本发明实施例1～7的鱼胶原蛋白胶囊，每天两次，每次1粒；对照组服用市售胶原蛋白胶囊，测试时长为30天，测试前后，利用皮肤检测仪对受试者的皮肤进行检测，并记录其皮肤状况以及变化进行记录。在测试期间，不能服用近似功效的保健品、不能注射美容针等，测试结果如表2：
上述测验结果表明，应用本发明实施例1～实施例7鱼胶原蛋白制成胶囊剂，提高肌肤的保水性，使得皮肤保持湿润感和弹性，减少细皱纹，起到美容护肤功效。另外，将本发明的鱼胶原蛋白制成片剂或者口服液体制剂，也具有同等的效果。还可将本发明的鱼胶原蛋白应用于护肤产品中。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明保护的范围之内。