一株高效阿特拉津降解菌及其筛选方法以及在农田废水中阿特拉津的生物降解的应用_2

文档序号:9391790阅读:来源:国知局
TGGCGGCAGGCCTAACACATGCAAGTCGAGCGGATGACGGGAGCTTGCTCCCTGATTTAGCGGCGGA
CGGGTGAGTAATGCCTAGGAATCTGCCTGGTAGTGGGGGATAACGTTCCGAAAGGAACGCTAATACCGCATACGTC
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GTCTTCGGATTGTAAAGCACTTTAAGTTGGGAGGAAGGGCATTAACCTAATACGTTAGTGTTTTGACGTTACCGACA
GAATAAGCACCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCG
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实施例2:将细菌悬液(0D=1.0)转接至初始浓度100mg/L的阿特拉津无机盐培养基中培养,利用b1screener细菌生长曲线测定仪,系统每隔15min自动检测在600nm波长下的吸光度值,以时间为横坐标,吸光度OD6。。值为纵坐标,绘制生长曲线。细菌生长条件设置为温度30°C,培养基ρΗ7.0。
[0036]如图2所示,该菌在0_5h处于调整期,6h开始进入对数生长期,35h后进入稳定生长期。
[0037]实施例3:
将OD=L O的细菌悬液在30。。,ρΗ7.0,摇床转速150r/min的条件下,按照3.3%的接菌量转接至初始浓度为100mg/L的阿特拉津无机盐培养基中,每隔Ih检测阿特拉津的浓度。利用高效液相色谱法,色谱条件为:C18柱,流动相为乙腈:水=6:4 (V/V),检测波长为220nm,柱温 30°C,流速 lml/min,进样量 20 μ L0
[0038]如图3所示,菌株Pseudomonas sp.ZXY-1在10.5h内对阿特拉津的降解率可达99%。
[0039]实施例4:
将OD=L O的细菌悬液在pH7.0,摇床转速150r/min的条件下,按照3.3%的接菌量转接至初始浓度为100mg/L的阿特拉津无机盐培养基中,反应时间为24h。考察在不同的温度下阿特拉津的降解率,检测方法同实施例3。
[0040]如图4所示,菌株Pseudomonas sp.ZXY-1在不同的温度条件下对阿特拉津的降解能力不尽相同,菌株在25 °C _30°C范围内降解能力最强,达99.9%,低于25°C或高于35 °C,降解能力均下降。因此,菌株的最佳生长温度范围为25°C -30°C。
[0041]实施例5:
将OD=L O的细菌悬液在30°C,摇床转速150r/min的条件下,按照3.3%的接菌量转接至初始浓度为100mg/L的阿特拉津无机盐培养基中,反应时间为24h。考察在不同的培养基PH下阿特拉津的降解率,检测方法同实施例3。
[0042]如图5所示,菌株Pseudomonas sp.ZXY-1在不同的pH条件下对阿特拉津的降解能力不尽相同,菌株在PH7.0时降解能力最强,达99.9%,因此,菌株的最佳生长pH值为7.0。
[0043]实施例6:
将OD=L O的细菌悬液在30°C,pH7.0的条件下,按照3.3%的接菌量转接至初始浓度为100mg/L的阿特拉津无机盐培养基中,反应时间为24h。考察在不同的摇床转速下阿特拉津的降解率,检测方法同实施例3。
[0044]如图6所示,菌株Pseudomonas sp.ZXY-1在不同的摇床转速条件下对阿特拉津的降解能力不尽相同,菌株在150r/min和200r/min时降解能力最强,达99.9%,考虑耗电成本等问题,因此,自定义菌株生长的最佳摇床转速为150r/min。
[0045]
实施例7:
将OD=L O的细菌悬液在30°C,pH7.0,摇床转速为150r/min的条件下,按照3.3%的接菌量转接至不同初始浓度的阿特拉津无机盐培养基中,反应时间为24h。考察在不同的初始浓度下阿特拉津的降解率,检测方法同实施例3。
[0046]如图7所示,菌株Pseudomonas sp.ZXY-1在不同初始浓度的阿特拉津条件下有着不同的降解率,在初始浓度为100mg/L和200mg/L时,阿特拉津降解率可达99.9%,但是该菌株在初始浓度为10mg/L和500mg/L时,降解率均可达80%以上,说明该菌有很强的耐受能力。
【主权项】
1.一株高效阿特拉津降解菌,其特征在于所述菌株为Pseudomonas sp.ZXY-1,于2015年6月I日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,保藏编号为CGMCCN0.10936。2.根据权利要求1所述的高效阿特拉津降解菌,其特征在于可应用于农田废水中阿特拉津的生物降解及生物修复。
【专利摘要】一株高效阿特拉津降解菌及其筛选方法以及在农田废水中阿特拉津的生物降解的应用,属于环境微生物技术领域,其菌株(Pseudomonas?sp.?ZXY-1)是从吉林化工有限公司农药厂受污染土壤中分离得到,该菌株可以以阿特拉津作为唯一氮源生长,其具有高效降解阿特拉津的能力,10.5小时阿特拉津降解率即可达99%。菌株Pseudomonas?sp.?ZXY-1的最适生长温度为25-35℃,最适生长pH为7.0,最适生长摇床转速为150r/min。该菌种适用于农田废水阿特拉津的生物降解与生物修复。CGMCC No.1093620150601
【IPC分类】C02F3/34, C12N1/20, C12R1/38, C02F101/38
【公开号】CN105112317
【申请号】CN201510335229
【发明人】王立, 赵昕悦, 齐珊珊, 董静, 马放, 杨基先, 蔡宝立
【申请人】哈尔滨工业大学宜兴环保研究院
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年6月17日
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