9964。由该工作曲线计算未知5-横基水杨酸的浓度。
[0051] 实施例2.1
[0052] 本实施例设及壳聚糖与果胶的用量配比对分子印迹吸附模板分子性能的影响。检 测实施例1.1~1.3获得的分子印迹对5-横基水杨酸的吸附量Q，如下表所示：
[0。[。1
[0054] 表中实施例2.1.1中实施例1.1(0)代表实施例1.1的分子印迹材料，即采用与实施 例1.1基本相同的物质、物质用量及制备方法，唯一不同之处在于制备过程不加入模板分子 5-横基水杨酸;选择因子a为实施例1.1与实施例1.1(0)吸附量的比值，用于表征选择性吸 附性能。同理，实施例1.2(0)、1.3(0)分别代表实施例1.2、1.3的材料。
[0055] 由上表结果可见，实施例2.1.2中实施例1.2的分子印迹对模板分子的吸附量明显 大于其余实施例的吸附量，且选择因子a值也明显大于另外两组实施例的选择因子，说明当 壳聚糖与果胶质量配比为3:1时其吸附模板分子效果较好，此时壳聚糖与果胶的聚合效果 较好，为模板分子提供了较好的分子印迹，更利于对5-横基水杨酸的吸附。
[0056] 实施例2.2
[0057] 本实施例设及致孔剂PEG6000的用量对分子印迹吸附模板分子性能的影响。检测 实施例1.4~1.8获得的分子印迹对5-横基水杨酸的吸附量Q，绘制PEG6000用量对吸附量的 影响曲线，如图3所示。
[005引从图3的影响曲线可见，当PEG6000用量为6mL，制得的分子印迹(实施例1.7)对模 板分子5-横基水杨酸的吸附量最大。而大于或小于运个用量，吸附量均呈现减少的状态，且 减小的速率较快，说明致孔剂PEG6000起到了重要作用，但用量要适当，否则会造成负面效 果。
[0059] 实施例2.3
[0060] 本实施例设及模板分子5-横基水杨酸的用量对分子印迹吸附模板分子性能的影 响。检测实施例1.9~1.13获得的分子印迹对5-横基水杨酸的吸附量Q，绘制5-横基水杨酸 用量对吸附量的影响曲线，如图4所示。
[0061] 由图4的影响曲线可见，5-横基水杨酸在用量0-20mg范围内随着用量增加，吸附量 随之明显增大，大于20mg后，吸附量趋于平缓，无明显增大趋势。因此壳聚糖为0.6g、果胶为 0.2g，5-横基水杨酸用量为20m加达到了最优条件，使5-横基水杨酸得到了充分的利用。
[00创实施例S
[0063] 本实施例设及本发明分子印迹对模板分子的特异性吸附验证。
[0064] 实施例3.1
[0065] 本实施例设及一组材料对模板分子的特异性吸附性能的对比，采用实施例一所述 的制备方法，制备如下表所示的材料：
[0066]
[0067] 将实施例3.1.1~3.1.4获得材料分别记为^?、^?、11?〇、仍？〇，将^?分别于浓度 为4ug/血、6ug/mL、8ug/mL、1 Oug/mL、12ug/mL、14ug/mL的5-横基水杨酸溶液中采用平衡吸 附法(方法同实施例二）测定对5-横基水杨酸的吸附量，绘制吸附等溫线，同法测定NIP、 MIPo及NIPo的吸附等溫线，将四条吸附等溫线绘于同一坐标图上，如图5所示。
[0068] 从图5可见，随着溶液中5-横基水杨酸初始浓度的增加，MIP、NIP、MW〇和NIPo对模 板分子5-横基水杨酸的吸附量都在逐渐增加，并最终趋于平衡。比较四条曲线，得到MIP的 吸附效果最佳，且吸附量齡口〉化口〉11口〇〉化口〇，说明^口结构中的特异性立体空穴对模板分子 有较高的吸附性能。
[0069] 实施例3.2
[0070] 本实施例设及本发明分子印迹对模板分子和非模板分子吸附性能的对比，采用平 衡吸附法(方法同实施例二)检测本发明所述的分子印迹(W材料MIP为例)对5-横基水杨酸 的吸附量、选择因子，对心酪氨酸的吸附量、选择因子，进行对比，结果如下表所示：
[00711
[0072] 由上表结果可见，W5-横基水杨酸为模板分子的MIP对5-横基水杨酸的吸附量明 显高于NIP，11?对心酪氨酸的结合量也要高于NIP，但MIP对5-横基水杨酸的选择因子值要 远高于^?对心酪氨酸的选择因子值，说明MIP对5-横基水杨酸具有特异性吸附能力。
[0073] 本实施例中为得到レ酪氨酸的吸附量，需要测定k酪氨酸的标准曲线，具体操作 如下：
[0074] 取一定量心酪氨酸置入烘箱在105°C下烘烤化，将烘干的酪氨酸，先配置成500ug/ 1111的心酪氨酸溶液，稀释10倍得到50ug/mL溶液，再由50ug/mL的酪氨酸溶液做母液，分别配 制出 1 ug/mL，加 g/mL，1 Oug/mL，15ug/mL，2〇11旨/1111的 k酪氨酸溶液。
[0075] 用紫外分光光度计测量W上配置的溶液的吸光度，绘制如图6所示的心酪氨酸标 准曲线。通过标准曲线测定未知酪氨酸溶液的浓度，得到标准曲线方程：y = 0.00518+ 0.0359x，R2 = 0.99914。
[0076] 实施例四
[0077] 本实施例设及本发明分子印迹的结构表征。
[007引实施例4.1
[0079] 本实施例设及本发明分子印迹的表面结构表征，将材料MIP样品、材料NIP样品分 别置于扫描电子显微镜下，观察其表面形貌，得到图7所示的MIP的SEM图，图8所示的NIP的 沈M图。
[0080] 对比图7、图8可见，MIP表面均匀分布着很多的微小孔桐，且表面粗糖不平，其中明 显具有模板分子留下的印记;NIP表面均匀且比较平整，没有孔桐。因此MIP表面的烙印对模 板分子的吸附起到了重要作用，对模板分子具有较好的吸附能力。
[0081 ] 实施例4.2
[0082]本实施例设及本发明分子印迹的红外结构表征，分别将壳聚糖CS样品、材料MIP样 品、材料NIP样品用邸r进行压片，采用傅立叶红外光谱仪检测该S个样品的红外检测，得到 如图9所示的材料MIP、材料NIP和CS的红外检测光谱图。
[008；3]由图9可见，CS的红外图中，在ieOOcnfi有-畑2的特征峰;MIP与NIP的红外图中，在 ieOOcnfi的-N也峰消失，1734cm-i的-COOH峰大大减弱，而在1620cm-i附近出现-N出-OOC次价 健特征吸收峰，1530cnfi出现-NH-对称弯曲振动吸收峰；1421cnfi出现-COO-对称伸缩振动 吸收峰;MIP相对于NIP来说，1749cm-i处的-COOH峰大大减弱，而在1624cm-i处出现-NH. COO-次价键特征吸收峰。由红外光谱图分析可得，壳聚糖/果胶-PEC结构对于形成多孔性S维网 状结构具有重要意义。
【主权项】
1. 一种分子印迹，其特征在于：以壳聚糖和果胶制备所述分子印迹的材料，以5-磺基水 杨酸、L-酪氨酸或R-酪氨酸中的一种作为模板分子。2. 根据权利要求1所述的分子印迹，其特征在于:所述模板分子为5-磺基水杨酸。3. 根据权利要求1所述的分子印迹，其特征在于：制备所述分子印迹的材料使用的果胶 与壳聚糖的重量比为(1~4) :6。4. 根据权利要求1至3中任一项所述的分子印迹，其特征在于：制备所述分子印迹的材 料时增加使用致孔剂聚乙二醇6000,所述聚乙二醇6000加入量与壳聚糖的重量比为（1~ 4):10〇5. -种分子印迹的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤： a、 将壳聚糖加入到质量含量为2%的乙酸溶液中，充分搅拌至完全溶解后，再加入果胶 和模板分子，继续搅拌，充分反应得到粘稠溶液;所述果胶与壳聚糖的重量比为（1~4) :6， 所述模板分子与壳聚糖的重量比为(1~3): 60。 b、 将步骤a得到的粘稠溶液延流成膜，于40~45°C下充分干燥，然后在水中浸泡洗脱模 板分子，得到分子印迹。6. 根据权利要求5所述的分子印迹的制备方法，其特征在于:所述壳聚糖与乙酸溶液的 配比为6g :200ml。7. 根据权利要求5所述的分子印迹的制备方法，其特征在于：步骤a所述模板分子以溶 于水制成溶液的形式加入，所述模板分子溶液浓度为1 〇mg/mL。8. 根据权利要求5所述的分子印迹的制备方法，其特征在于:在步骤a所述加入果胶和 模板分子操作之前，增加加入致孔剂聚乙二醇6000,所述聚乙二醇6000加入量与壳聚糖的 重量比为（1~4):10。9. 根据权利要求8所述的分子印迹的制备方法，其特征在于:所述聚乙二醇6000以溶于 水制成溶液的形式加入，所述聚乙二醇6000溶液的质量百分数为3 %。
【专利摘要】本发明提供了一种分子印迹，以壳聚糖和果胶制备所述分子印迹的材料，以5-磺基水杨酸、L-酪氨酸或R-酪氨酸中的一种作为模板分子。获得的分子印迹，具有良好的生物相容性、可降解性和低毒性，对热溶剂、有机溶剂及强酸强碱溶剂稳定，具有抗恶劣环境的性能和使用寿命长的优点，能够满足对生物材料的毒性、降解性等具有高要求的领域需求。本发明所述的分子印迹的制备过程简单，仅利用果胶和壳聚糖在水中进行交联反应制备，不需使用改性剂、交联剂等物质，生产成本低廉，工艺安全，适于大规模工业化应用。
【IPC分类】C08J3/24, C08L5/06, C08L5/08
【公开号】CN105694071
【申请号】CN201610157326
【发明人】郑学芳, 廉琪, 贾丹丹, 王东军
【申请人】河北科技师范学院
【公开日】2016年6月22日
【申请日】2016年3月18日