一种人egfr基因突变检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型涉及一种人EGFR基因突变检测试剂盒，属于生物医药辅助检测设备
技术领域。
【背景技术】
[0002] 肺癌是全世界公认的恶性肿瘤之一，其中非小细胞肺癌占肺癌总量的75%~85%。 近年来随着分子生物学机制的研究，非小细胞肺癌分子靶向治疗取得了很大进展。EGFR 是（HER-1/ErbBl) -种TK受体蛋白，属于ErbB家族，此受体蛋白在肿瘤发生发展中发挥 着主要的功能。在癌细胞表面，EGFR的活化启动了RAS-抗凋亡反应，细胞生长，存活，细 胞周期的进展，分化及血管生成的活化。肺腺癌患者中，EGFR突变集中在为18，19,20,21 号外显子，有缺失，点突变等。以表皮生长因子受体（EGFR)为靶标的酪氨酸激酶抑制剂 (tyrosinekinaseinhibitor，TKI)如吉非替尼、厄洛替尼在治疗晚期非小细胞肺癌中受到 普遍关注，临床研究发现，携带EGFR基因突变的患者对KTIs更为敏感，总生存期和无进展 生存期较无EGFR基因突变的患者显著增加。因此，对肺癌患者进行基因检测，是应用KTIs 治疗的重要前提。
[0003] 现有的EGFR突变检测试剂盒，存在检测试剂原料配备较多，实验过程加样环节繁 琐，耗时较长，容易污染，另外冷冻的试剂反复冻融多次会造成试剂失效，所以探索一种检 测EGFR基因快速可靠的方法已经成为临床实验迫切需要解决的问题。 【实用新型内容】
[0004] 针对上述问题，本实用新型提供了一种人EGFR基因突变检测试剂盒，其目的在 于：实现EGFR基因检测快速可靠。
[0005] 本实用新型的技术解决方案：
[0006]-种人EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于，包括：1个带盒盖的盒体、1个长隔 板、1个短隔板、2个海绵衬底、2个装有无核酸水的试管、2个装有PCR反应预混液的试管、 2个装有阳性质控物试管、2个八连管架，12个带盖八连管；所述的八连管，自上而下依次为 装有18号外显子检测引物及探针溶液的管孔、装有19号外显子检测引物及探针溶液的管 孔、装有20号外显子插入型突变的引物及探针溶液的管孔、装有S768I检测引物及探针溶 液的管孔、装有T790M检测引物及探针溶液的管孔、装有L861Q检测引物及探针溶液的管 孔、装有L858R检测引物及探针溶液的管孔、装有内参检测引物及探针溶液的管孔。
[0007]其中，所述长隔板置于盒体内，将盒体分成两部分；所述的短隔板将盒体中空间较 小的隔间再隔开；所述的2个海绵衬底置于短隔板的两侧，每个海绵底衬上打有容器孔；所 述的2个装有无核酸水的试管、2个装有PCR反应预混液的试管、2个装有阳性质控物的试 管分别置于2个海绵衬底的容器孔中。
[0008] 进一步，所述的2个海绵衬底，优选使用不同颜色，例如红色和蓝色。
[0009] 进一步，所述的2个装有无核酸水的试管、2个装有PCR反应预混液的试管、2个阳 性质控物试管，优选与海绵衬底颜色一致的试管。
[0010] 进一步，八连管架优选采用6排式，即每个八连管架上可放置6个八连管，优选的， 每个试剂盒中放置2个八连管架。
[0011] 本实用新型的有益效果：
[0012] 本实用新型试剂盒结构完全基于一种新的实验方法设计，结构简单合理、操作方 便，在检测新鲜组织及石蜡组织切片样品的EGFR基因突变时具有敏感性高、特异性强、耗 时短等优点；本试剂盒中设置的2个隔板，使得一个空间变为三个空间，能有效防止试剂交 叉等引起的污染，将所有引物试剂分成两管存储，所用到的带盖的八连管内已预装有检测 用引物和探针溶液，可以有效减少试剂反复冻融的风险，使得实验操作更为简单、更准确。
【附图说明】
[0013] 图1:本实用新型结构原理示意图。
[0014] 图2:本实用新型中八连管架部分示意图。
[0015] 其中：1、盒体2、海绵底衬3、短隔板4、装有无核酸水的试管5、装有PCR Mix的试管6、装有阳性质控物的试管7、容器孔8、长隔板9、八连管架9-1、八连管 架9-2、带盖八连管9-3、八连管标号9-4、装有18号外显子检测引物及探针溶液的管 孔9-5、装有19号外显子检测引物及探针溶液的管孔9-6、装有20号外显子插入型突变 的引物及探针溶液的管孔9-7、装有S768I检测引物及探针溶液的管孔9-8、装有T790M 检测引物及探针溶液的管孔 9-9、装有L861Q检测引物及探针溶液的管孔 9-10、装有 L858R检测引物及探针溶液的管孔9-11、装有内参检测引物及探针溶液的管孔。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合附图和实施例来对本实用新型做进一步描述：
[0017] 如图1至2所示的一种人EGFR基因突变检测试剂盒，包括：1个带盒盖的盒体1、1 个长隔板8、1个短隔板3、2个海绵衬底2、2个装有无核酸水的试管、2个装有PCR反应预混 液的试管5、2个装有阳性质控物试管6、2个八连管架9,12个带盖八连管9-2 ;所述的八连 管，自上而下依次为装有18号外显子检测引物及探针溶液的管孔9-1、装有19号外显子检 测引物及探针溶液的管孔9-5、装有20号外显子插入型突变的引物及探针溶液的管孔9-6、 装有S768I检测引物及探针溶液的管孔9-7、装有T790M检测引物及探针溶液的管孔9-8、 装有L861Q检测引物及探针溶液的管孔9-9、装有L858R检测引物及探针溶液的管孔9-10、 装有内参检测引物及探针溶液的管孔9-11。
[0018] 其中，所述长隔板8置于盒体1内，将盒体1分成两部分；所述的短隔板3将盒体 1中空间较小的隔间再隔开；所述的2个海绵衬底2置于短隔板3的两侧，每个海绵底衬2 上打有容器孔；所述的2个装有无核酸水的试管、2个装有PCR反应预混液的试管5、2个装 有阳性质控物的试管6分别置于2个海绵衬底2的容器孔中。
[0019] 所述的2个海绵衬底2,优选使用不同颜色，例如红色和蓝色。
[0020] 所述的2个装有无核酸水的试管、2个装有PCR反应预混液的试管、2个阳性质控 物试管，优选与海绵衬底2颜色一致的试管。
[0021] 八连管架9优选采用6排式，即每个八连管架上可放置6个八连管，优选的，每个 试剂盒中放置2个八连管架。
[0022] 实施例1
[0023] 如图1所示，一种EGFR基因突变检测试剂盒，包括盒体1、2个海绵底衬2、短隔板 3、 2个装有无核酸水的试管4、2个装有PCRMix的