预测醇降解能力和宿醉可能的引物组、探针或探针组、方法和试剂盒以及微阵列的制作方法

专利名称：：预测醇降解能力和宿醉可能的引物组、探针或探针组、方法和试剂盒以及微阵列的制作方法预测醇降解能力和宿醉可能的引物组、探针或探针组、方法和试剂盒以及微阵列技术背景本发明涉及预测醇降解能力和宿醉可能(hangoverpotential)的引物组、探针或探针组、方法和试剂盒。更具体地，本发明涉及扩增选自乙醛脱氢酶2(ALDH2)、细胞色素P4502E1(CYP2E1)、和醇脱氬酶2(ADH2)^至少一个靶序列的寡核苷酸引物组，与所述至少一个靼序列特异性杂交的探针或探针组，固定了所述探针或探针组的微阵列，用所述探针或探针组预测醇降解能力和宿醉可能的方法，和用所述引物组和所述〗笨针或揮:针组预测醇降解能力和宿醉可能的试剂盒。相关领域描述酒精饮料的主要成分是醇，它通过存在于身体肝脏中的醇脱氢酶(ADH)降解为已知导致宿醉的物质乙醛。乙醛通过乙醛脱氢酶(ALDH)代谢为乙酸和水(H20)，然后从身体排出。存在于人肝脏微粒体(microsome)中的细胞色素P4502E1(CYP2E1)是氧化乙醇和乙醛的酶。已知CYP2E1由长期醇摄入来诱导，因此，认为它在醇代谢中起重要作用。单核苷酸多态性(SNP)存在于ADH2基因、CYP2E1基因、和ALDH2基因中。根据检测SNP的常用方法，扩增SNP区并用限制性酶消化所扩增的区。然而，此方法有缺点，在于当测定每份样本的四种基因型时，PCR和限制性酶反应每个都必须进行四次，并且所有分析必须目测进行。通过CycleavePCRCoreKit和Cycleave人ALDH2TypingProbe/PrimerSet(TaKaRaCodeCY403)的组合来检测ALDH2基因外显子12中的SNP(487Glu(GAA)—Lys(AAA))。探针/引物组由引物组和两个检测SNP的探针组成，所述引物组用于扩增包含ALDH2基因的多态性位点的区域，所述探针即用于野生型检测的ROX标记的探针和用于突变型检测的FAM标记的探针。除了上述常规技术，没有公开过能预测醇降解能力和宿醉可能的引物组。也没有公开过能预测醇降解能力和宿醉可能的探针。发明概述本发明提供了能预测醇降解能力和宿醉可能的引物组。本发明还提供了能预测醇降解能力和宿醉可能的探针或4笨针组。本发明也提供了固定了所述探针或探针组的微阵列。本发明也提供了用所述引物组预测醇降解能力和宿醉可能的方法。本发明也提供了检测醇降解能力和宿醉可能的试剂盒，其包含所述？I物组和所述探针或探针组。附图简述本发明的上述及其他特征和优点通过对其例示性实施方案的详细描述和参考附图而变得更加明显，其中图1是显示PCR产物的杂交结果的图像，所述PCR产物是使用根据本发明实施方案固定在芯片上的寡核苷酸探针和根据本发明实施方案的引物组通过PCR来获得的。
发明内容本发明提供了用于扩增选自乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因、细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因、和醇脱氢酶2(ADH2)基因中的至少一个靶序列的寡核苷酸引物组，所述寡核苷酸引物组包含选自下组的至少一个寡核香酸组寡核苷酸组，其包含从寡核苦酸组成的组中选择的至少一个寡核香酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中寡核苷酸包含如SEQIDNO:1所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苦酸包含如SEQIDNO:2所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核普酸组成的组中选择的至少一个寡核芬酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:1所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸組成的组中的寡核香酸包含如SEQIDNO:2所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核香酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:3所述的核香酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核普酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:4所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苦酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:5所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核香酸的片段，而所述另一个寡核普酸组成的组中的寡核芬酸包含如SEQIDNO:6所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:7所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苦酸的片段，而所述另一个寡核香酸组成的组中的寡核苦酸包含如SEQIDNO:8所述的核苷S拼列中存在的至少10个连续核苦酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸組成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选^r的至少一个寡核苦酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:9所述的核香酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:10所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苦酸的片段；寡核苦酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苦酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:11所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:12所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核普酸的片段；和寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核香酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苦酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:13所述的核香酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:14所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核芬酸的片段。本发明的引物组中，靶序列可以是至少一个选自下组的靶序列ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区。本发明的引物组可以是用于扩增ALDH2基因的外显子XII区的寡核苷酸引物组，其包含选自下组的至少一个寡核苦酸组寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苦酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核芬酸包含如SEQIDNO:1所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苦酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:2所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核香酸的片段；和寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核普酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:3所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:4所述的核香酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段。本发明的组可以是用于扩增CYP2E1基因的5，-控制区的寡核苷酸引物组，其包含选自下组的至少一个寡核苷酸组寡核苦酸组，其包含从寡核香酸组成的组中选择的至少一个寡核苦酸和从另一个寡核香酸组成的组中选择的至少一个寡核普酸，所述寡核香酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:5所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:6所述的核苦酸序列中存在的至少10个连续核芬酸的片段；和寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:7所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:8所述的核香S吏序列中存在的至少10个连续核普酸的片段。本发明的引物组可以是用于扩增ADH2基因的外显子III区的寡核苷酸引物组，其包含选自下组的至少一个寡核苷酸组寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:9所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:10所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片^殳；和寡核苷酸组，其包含从寡核普酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苦酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苦酸包含如SEQIDNO:11所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:12所述的核苦酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段。本发明的引物组可以是用于扩增ADH2基因的外显子IX区的寡核苷酸引物组，其包含寡核苷酸组，所述寡核苷酸组包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:13所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:14所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核香酸的片段。本发明的引物组可以是用于扩增至少一个靶序列的寡核苷酸引物组，所述靶序列选自ALDH2基因的外显子XI1区、CYP2E1基因的5'-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区，所述寡核苦酸引物组包含选自下组寡核苷酸组的至少一个寡核苷酸组寡核香酸组，其包含具有如SEQIDNO:1所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:2所述的核苷酸序列的寡核普酸；寡核普酸组，其包含具有如SEQIDNO:3所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:4所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:5所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:6所述的核苷酸序列的寡核苦酸；寡核香酸组，其包含具有如SEQIDNO:7所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:8所迷的核芬酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:9所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:10所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苦酸组，其包含具有如SEQIDNO:11所述的核苷酸序列的寡核芬酸和具有如SEQIDNO:12所述的核苷酸序列的寡核苷酸；和寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:13所述的核香酸序列的寡核香酸和具有如SEQIDNO:14所述的核苷酸序列的寡核脊酸。基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子m区和IX区的寡核苦酸引物组，该寡核苷酸引物组包含寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:1所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:2所述的核苷酸序列的寡核苦酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:3所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:4所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:5所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:6所述的核香酸序列的寡核香酸；寡核普酸组，其包含具有如SEQIDNO:7所述的核香酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:8所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:9所述的核苷酸序列的寡核苦酸和具有如SEQIDNO:10所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:11所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:12所述的核苦酸序列的寡核苷酸；和寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:13所述的核香酸序列的寡核苦酸和具有如SEQIDNO:14所述的核香S吏序列的寡核苷酸。对于醇代谢的关键酶ADH2的基因，一些亚洲人(Oriental)有编码具有良好活性的酶的ADH2基因的非典型形式(ADH2-2),这与ADH2基因的典型形式(ADH2")不同。对ADH2基因特征的研究可以确定个体中的内在(intrinsic)醇降解能力，并根据基因型预测醇的饮用量。对于在醇代谢中起辅助作用并且在乙醇存在时诱导性表达的酶CYP2E1,在CYP2E1基因的5，-控制区存在多态性，并且由CYP2E1基因的多态性确定CYP2E1酶的表达水平。CYP2E1基因的典型形式(cl基因)显示了低转录速度。然而，CYP2E1基因的非典型形式(c2基因)由于高转录速度而产生了很多酶。CYP2E1对于醇氧化的Km值为约10mM,这比ADH2高10倍。因此，已知CYP2E1在低醇浓度时仅负责醇氧化整个过程的10%,而在高醇浓度时负责醇氧化整个过程的很大一部分。对于降解引起宿醉的物质醛的关键酶ALDH2的基因，一些亚洲人有编码无活性酶的ALDH2基因的非典型形式(八1^)112*2),这与ALDH2基因的典型形式(ALDH2")不同。对ALDH2基因特征的研究可以确定个体中的内在醇降解能力，并根据基因型预测宿醉可能的程度。本文所用术语"引物"指与待拷贝的核S臾序列互补的单链寡核苷酸序列，并作为合成引物延伸产物的起点。确定引物的长度和序列以适于启动延伸产物的合成。优选地，引物为大约5-50个核苷酸长。可根据輩巴DNA或RNA的复杂性，和引物的使用条件如温度和离子强度，来适当地确定引物的长度和序列。本发明中，基于已知具有降解醇的能力的ADH2和CYP2E1和负责降解引起宿醉的物质醛的关键酶ALDH2的遗传特征，设计了能够检测ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区的特异性(specific)引物组，来预测醇降解能力和宿醉可能。也就是说，设计了对ALDH2基因的外显子XII区特异的两个引物组，对CYP2E1基因的5，-控制区特异的两个引物组，对ADH2基因的外显子m区特异的两个引物组，和对ADH2基因的外显子IX区特异的引物组。用本发明的引物组进行PCR时，待扩增的耙序列区选自ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子ni区和IX区。本发明的引物组包含预测醇降解能力和宿醉可能的序列。才艮据本发明例示性实施方案的引物组见下表1。表l:根据本发明例示性实施方案的引物组<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>SEQIDNO:1和2的引物组和SEQIDNO:3和4的引物组用于扩增ALDH2基因的外显子XII区，SEQIDNO:5和6的引物组和SEQIDNO:7和8的引物组用于扩增CYP2E1基因的5，-控制区，SEQIDNO:9和10的引物组和SEQIDNO:11和12的引物组用于扩增ADH2基因的外显子III区，和SEQIDNO:13和14的引物组用于扩增ADH2基因的外显子IX区。在说明书中，用作引物的寡核苷酸可包含核苷酸类似物，例如硫代磷酸(phosphorothioate)、烷基石克^/痒酸(alkylphosphorothioate)、或肽冲亥酸、或4#入剂(intercalatingagent)。本发明也提供了能够与选自ALDH2基因的外显子XI1区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区的至少一个靶序列杂交的寡核苷酸探针或探针组，所述寡核苷酸探针或探针组选自下组能够与ALDH2基因的外显子XII区杂交的寡核普酸冲采针，其包含选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核香酸组成的组中的寡核香酸包含如SEQIDNO:15所述的核香酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第11位核苦酸；能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苦酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:17所述的核苦酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；能够与ADH2基因的外显子III区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核香酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:19所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苦酸；和能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核香酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:23所迷的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苦酸的片段并包含所述核苷酸序列的第13位核苦酸。本发明的探针或探针组还可包含选自下组的至少一个寡核苷酸至少一个寡核苷酸，其选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:16所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第ll位核苷酸；至少一个寡核苷酸，其选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:18所述的核香酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；至少一个寡核苷酸，其选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:20所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；至少一个寡核普酸，其选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:22所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；和至少一个寡核苷酸，其选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:24所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第13位核苷酸。本发明的探针或探针组可以是能够与ALDH2基因的外显子XII区杂交的寡核苷酸纟笨针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸选自由寡核香酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:15所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核普酸的片段并包含所述核苷酸序列的第11位核苷酸。本发明的探针或探针组可以是能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:17所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苦酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸。本发明的探针或探针组可以是能够与ADH2基因的外显子III区杂交的寡核苷酸探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核香酸包含如SEQIDNO:19所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸。本发明的探针或探针组可以是能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核香酸包含如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苦酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸。本发明的探针或探针组可以是能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸选自由寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:23所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苦酸的片段并包含所述核苷酸序列的第13位核苷酸。本发明的探针或探针组可以是能够与至少一个靶序列杂交的寡核苷酸探针或探针组，所述靶序列选自下组ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区，所述寡核苷酸探针或探针组包含选自下组的至少一个寡核苷酸探针或探针组包含具有如SEQIDNO:15所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ALDH2基因的外显子XII区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:17所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:19所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子III区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核香酸探针；和包含具有如SEQIDNO:23所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针。本发明的探针或探针组可以是能够与ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子m区和IX区杂交的寡核苷酸探针或探针组，所述寡核苷酸探针或探针组包含包含具有如SEQIDNO:15所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ALDH2基因的外显子XII区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:17所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:19所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子III区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针；和包含具有如SEQIDNO:23所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针。在本发明的探针或探针组中，与SEQIDNO:15、17、19、21和23有关的探针中的每一种特异性地结合ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子in区和IX区中的一个区，所述区存在于使用根据本发明实施方案的引物组通过PCR扩增的PCR产物中。在本发明的探针或探针组中，与SEQIDNO:16、18、20、22和24有关的探针分别为与SEQIDNO:15、17、19、21和23有关的纟笨针的突变型。具体地说，SEQIDNO:15和16的第11位核普酸是多态性位点，此多态性位点在野生型(SEQIDNO:15)中是G而在突变型(SEQIDNO:16)中是A。因此，当ALDH2基因的外显子XII区是野生型时，此外显子XII区会和与SEQIDNO:15有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:16有关的探针杂交。如果使用根据本发明实施方案的引物组从个体ALDH2基因的外显子XII区扩增的PCR产物和与SEQIDNO:15有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:16有关的探针杂交，则可确定此个体具有良好的乙趁降解能力，因此l交少宿醉。基于此杂交差异，可以预测个体的醇降解能力和宿醉可能。SEQIDNO:17和18的第12位核香酸是多态性位点，此多态性位点在野生型(SEQIDNO:17)中是G而在突变型(SEQIDNO:18)中是C。因此，当CYP2E1基因的5，-控制区是野生型时，此5，-控制区会和与SEQIDNO:17有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:18有关的探针杂交。如果使用根据本发明实施方案的引物组从个体CYP2E1基因的5，-控制区扩增的PCR产物和与SEQIDNO:17有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:18有关的探针杂交，则可确定此个体具有良好的醇降解能力。基于此杂交差异，可以预测个体的醇降解能力。SEQIDNO:19和20的第12位核苷酸是多态性位点，此多态性位点在野生型(SEQIDNO:19)中是G而在突变型(SEQIDNO:20)中是A。因此，当ADH2基因的外显子III区是野生型时，此外显子III区会和与SEQIDNO:19有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:20有关的探针杂交。如果使用根据本发明实施方案的引物组从个体ADH2基因的外显子III区扩增的PCR产物和与SEQIDNO:20有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:19有关的探针杂交，则可确定此个体具有良好的醇降解能力，因为ADH2基因的外显子III区的突变型比野生型具有更好的醇降解能力。基于此杂交差异，可以预测个体的醇降解能力。SEQIDNO:21和22的第12位核苷酸以及SEQIDNO:23和24的第13位核苦酸是多态性位点，这些多态性位点在野生型(SEQIDNO:21和23)中是T而在突变型(SEQIDNO:22和24)中是G。因此，当ADH2基因的外显子IX区是野生型时，此外显子IX区会和与SEQIDNO:21或23有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:22或24有关的探针杂交。如果使用根据本发明实施方案的引物组从个体ADH2基因的外显子IX区扩增的PCR产物和与SEQIDNO:21或23有关的探针杂交，但不和与SEQIDNO:22或24有关的纟果4f"杂交，则可确定此个体具有良好的醇降解能力。基于此杂交差异，可以预测个体的醇降解能力。可用根据本发明实施方案的探针组预测个体的醇降解能力和宿醉可能。本发明例示性实施方案的探针组见下表2。表2:本发明例示性实施方案的探针组<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>本文所用术语"探针"指可与互补单链靶序列杂交形成双链分子(杂合体)的单链核酸序列。说明书中，用作4笨针的寡核苷酸可包含核苷酸类似物，如;a代磷酸、烷基^^代磷酸、或肽核酸，或插入剂。本发明也提供了微阵列，其中在基底(substrate)上固定了至少一个本发明实施方案的寡核苷酸探针或探针组。本文所用术语"微阵列"指固定在基底上的多核苷酸组的高密度阵列。这里，每组多核香酸是固定在基底的预定区域中的微阵列。微阵列是本领域公知的。在美国专利5,445，934和5,744,305中公开了微阵列，其公开通过引用全部并入本文。微阵列中所用的寡核苷酸探针或探针组如上所述。本文所用术语"基底"指可在维持杂交特征并实现低背景杂交的条件下与寡核苷酸探针偶联的基底。常用地，所述基底可以是微滴板、膜(例如尼龙或硝化纤维素)、^鼓球(珠)、或芯片。在将核酸探针用于或固定在基底上之前，可将其修饰以便于探针固定或提高杂交效率。对核S殳探针的修饰可包含同聚物加尾、与反应性官能团如脂肪族基团、顺2基团、SH基团或羧基偶联、或与生物素、半抗原或蛋白质偶联。本发明也提供了预测醇降解能力和宿醉可能的方法，该方法包括使样本接触本发明实施方案的至少一个寡核苷酸探针或探针组，从而使样本的耙序列与探^十序列杂交；和检测探针序列与所述样本的靶序列之间的杂交程度。本文所用术语"杂交"指核酸的两条互补链的结合以形成双链分子(杂合体)。在本发明方法中，杂交可在高严格杂交条件下进行。例如，高严格杂交条件可以是在包含等摩尔的Na2HP04和NaH2P04的0.12M磷酸盐緩冲液、1mMEDTA和0.02%十二烷基硫酸钠中，65°C。本文所用的"严格性，，是用于描述杂交及随后过程中的温度和溶剂组分的术语。在高严格杂交条件下，会形成高度同源的核酸杂合体。也就是说，不会形成互补程度不足的杂合体。因此，试验条件的严格性决定应存在于两条核酸链之间以形成杂合体的互补性的量。可选择严格性以使探针-靶的杂合体与探针-非靶的杂合体之间的稳定性差别最大化。在本发明方法中，样本可包含使用本发明实施方案的引物组作为引物，及源自血液、唾液等的DNA作为模板通过PCR扩增得到的PCR产物。用作模板的DNA可源自血液、唾液等，但本发明不限于此。也可以使用根据本发明包含基因的任何样本。本发明方法中所用的核酸可选自染色体DNA、cDNA、及其片段。本文所用的"PCR"指聚合酶链式反应，并且是用聚合酶从特异性结合靶核酸的引物对扩增靶核酸的方法。PCR是本领域公知的并可使用可商购的试剂盒来进行。靶核酸的扩增也可用本领域已知的合适方法来进行，所述方法例如连接酶链式反应、基于核酸序列的扩增、基于转录的扩增系统、链置换扩增、Q(3复制酶、或其它除PCR之外的核酸扩增方法。本发明方法中，可用可检测的标记物质来标记靶序列。例如，所述标记物质可以是焚光物质、发磷光物质、或放射性物质，但本发明不限于此。优选地，所述标记物质可以是Cy-5或Cy-3。当使用其5'末端以Cy-5或Cy-3标记的引物通过PCR来扩增耙序列时，可用可^r测的标记物质来标记革巴序列。当用放射性物质进行PCR时，将放射性同位素如"P或"S加入PCR溶液，因此用掺入PCR产物的放射性同位素标记PCR产物。在本发明方法中，可将寡核苷酸探针或探针组固定在微阵列的基底上。固定在微阵列基底上的寡核苷酸探针或探针组如上所述。在本发明方法中，对醇降解能力和宿醉可能的预测可通过用可检测的信号发射物质标记PCR产物，使标记的PCR产物与寡核苷酸探针或探针组杂交，并检测杂交产物产生的信号来进行。可检测的信号可以是光信号或电信号，但本发明不限于此。光活性物质可以是荧光物质或发磷光物质。荧光物质可以是荧光素、Cy-5或Cy-3。PCR产物可以不标记或在杂交之前或之后用可检测的信号发射物质标记。在PCR产物未被标记的情况中，PCR产物与寡核苷酸探针或探针组之间的杂交可通过电信号检测，但本发明不限于此。本发明也提供了预测醇降解能力和宿醉可能的试剂盒，其包含本发明实施方案的引物组和本发明实施方案的寡核苷酸探针或探针组。本发明试剂盒可通过用本发明实施方案的引物组扩增靶基因，并进行扩增产物与本发明实施方案的纟笨针或探针组之间的杂交，来预测个体的醇降解能力和宿醉可能。本发明试剂盒可包含进行扩增的试剂，该试剂可包含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等。本发明试剂盒还可包含详细说明最佳反应条件的说明手册。在下文，将参照如下实施例更具体地描述本发明。如下实施例仅为了说明的目的而不是意图限制本发明的范围。实施例实施例1:选择用于预测醇降解能力和宿醉可能的引物在实施例1中，选择用于预测醇降解能力和宿醉可能的引物。为此，从Genbank获得ALDH2基因序列、CYP2E1基因序列、和ADH2基因序列，并用DNASTAR程序选择用于预测醇降解能力和宿醉可能的靶序列ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区。结果，设计了7组寡核苷酸引物组具有如SEQIDNO:1和2所述的序列的寡核苷酸引物组，具有如SEQIDNO:3和4所述的序列的寡核苷酸引物组，具有如SEQIDNO:5和6所述的序列的寡核苷酸引物组，具有如SEQIDNO:7和8所述的序列的寡核苷酸引物组，具有如SEQIDNO:9和10所述的序列的寡核苷酸引物组，具有如SEQIDNO:11和12所述的序列的寡核苦酸引物组，和具有如SEQIDNO:13和14所述的序列的寡核苷酸引物组。这些寡核苷酸引物组中的每一组可扩增ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子in区和IX区中的一个区。实施例2:用本发明的引物组扩增用于预测醇降解能力和宿醉可能的基200710096012.9说明书第16/23页虽用实施例1中设计的7组引物组来扩增用于预测醇降解能力和宿醉可能的基因。1)提取口细胞的gDNA从每个测试受试者收集唾液，并根据QiagenDNAMiniKit方案从所述唾液提取gDNA。然后，用PicogreendsDNA试剂(分子探针)定量分析所述gDNA。为了定量分析，将gDNA进行凝胶电泳并测序(ABI3700)来确定所述gDNA的降解程度和核苷酸序列。2)靶序列扩增将l)中制备的gDNA用以Cy3标记的实施例1的引物通过PCR来扩增。使用50pl反应溶液来如下进行PCR,所述反应溶液是通过将5pl在l)中制备的gDNA加入包含正向和反向引物各400nM、200pMdNTP、5ji110x緩冲液、和1.25单位的Taq聚合酶的混合物来获得的在95°C120秒最初变性；在95°C变性20秒、在58°C退火20秒和在72°C延伸20秒的35轮循环；在72。C180秒最终延伸。用PCR纯化试剂盒(Qiagen)纯化PCR产物然后用于芯片。实施例3:在芯片上检测使用本发明的引物组扩增的基因在实施例3中，允许将实施例2中获得的PCR产物与固定在芯片上的探针杂交，测定探针-靶杂交的程度来预测醇降解能力和宿醉可能。1)制造芯片为制造芯片，使用Si02晶片(wafer)(厚度l，OOOA)。用20%3-氨丙基乙氧硅烷(Sigma)和5%FC4430的混合物涂覆所述晶片，在烤箱中于120°C焙烤40分钟，并用三蒸水清洗。作为待用于芯片的寡核苷酸探针溶液，通过将胺-修饰的核苷酸(80pM,Bioneer)溶解于9mMPEG10000(Sigma)和100%曱酰胺(Sigma)中来制备核苷酸溶液(最终浓度20pM)。使用微阵列点样器(spotter)(Cartesian,pisys5500)和SMP3针(pin)(Arrayit)将所述核苷酸溶液印在(printon)晶片上，并在条件设置为温度70。C、相对湿度(RH)40%的烤箱中保温1小时来将核苷酸固定在晶片上。然后在50mM琥珀酸肝的l-曱基-2-吡咯烷酮溶液中保温所述晶片从而制造芯片。2)在芯片上杂交将实施例2中扩增的靶DNA在94°C变性5分钟，立即置于水上来获得ssDNA。然后，将靶DNA与2x杂交緩冲液(12xSSPET緩冲液)以1:1比例混合，并将所得混合物施用于芯片上。将所述芯片在48°C保温1小时以发生探针-靶杂交，用洗涤緩沖液I(3xSSPET緩冲液)清洗5分钟同时搅拌，然后用洗涤緩冲液II(lxSSPET緩冲液)清洗5分钟同时搅拌，在3000rpm干燥1分钟。然后，用扫描仪(Axon)获得图像并用Genepix3.1程序测量图像的强度。3)测试样本分类A组3个人，这些人々欠用一杯soju后出现潮红(flushing)和宿醉B组5个人，这些人饮用一瓶或多瓶soju后转天早晨感觉不坏C组3个人，这些人饮用一瓶soju后出现潮红和宿醉4)芯片上的探针阵列点样在芯片上的探针阵列见下表所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>获得的PCR产物杂交结果的图。图l中，上排是A组的结果，中排是B组的结果，下排是C组的结果。图1所示芯片图像的强度总结在下表3中。表3:芯片图像的相对强度<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>上表3中，对于CYP、ALDH2、和ADH2-3基因，如果野生型对于突变型的相对强度(p)超过l,就意味着每个基因是野生型基因。如果p在0到l的范围，意p未着野生型和突变型以1:1的比例存在。如果p小于O,意味着每个基因是突变型基因。对于S2个体(person),ALDH2是突变型的(pO),且ADH2-3是突变型的(pO)。从这些结果，可确定S2个体仅饮用一杯酒精饮料就会喝醉并立即出现宿醉。S4、S5、S7、和S8个体显示了野生型的ALDH2(p〉1.0)和突变型的ADH2-3(p<0)。从这些结果，可确定S4、S5、S7、和S8个体甚至在饮用了多于一瓶的soju后都不会迅速喝醉，而在第二天早晨只会感到一点宿醉。S9、SIO、和Sll个体显示了异型的(hetero-type)ALDH2((Kp〈l)和突变型的ADH2-3(p<0)。这显示S9、SIO、和Sll个体在饮用了约一瓶soju后会感觉宿醉。对于具有野生型CYP(pX).5)的个体，可以说他们具有饮用高度酒精饮料(soju,威士忌)的良好能力。因此，可用本发明的引物组和^笨针组高效地预测醇降解能力和宿醉可台匕月匕。根据本发明的引物组和探针组，可高效地预测醇降解能力和宿醉可能。根据本发明的方法，可高特异性地预测醇降解能力和宿醉可能。序列表<110>三星电子株式会社(SamsungElectronicsCo.Ltd.)<120〉预测醇降解能力和宿醉可能的引物组、探针或探针组、方法和试剂盒以及微阵列<130>PN069343<160>24<170〉Kopatentln1,71<210>1<211〉24<212〉DNA<213>人工序列<220〉<223〉ALDH2-fpl引物<400〉1ggtcaactgctatgatgtgtUgg24<210〉2〈211〉24<212〉DNA〈213>人工序列〈220〉<223>ALDH2-rpl引物<2ggcaggccccgagcccccaacaga24<210〉3<211〉24〈212>DNA<213〉人工序列<220><223〉ALDH2-fp2引物<400〉3ggtcaactgctatgatgtgtttgg<210>4<211〉21<212>DNA<213〉人工序列<220><223>ALDH2-rp2引物<400〉4aggccccgagcccccaacaga21<210〉<211〉<212><213><220><223〉524腿人工序列CYP-fpl引物〈400>5ccagtcgagtctacattgtcagtt24<210>6<211>24<212〉腿<213>人工序列<220><223〉CYP-rpl引物<400>6gagttatgccattctatacttgta24<210>7<211>23<212>DNA<213〉人工序列<220〉〈223>CYP-fp2引物<400>7cagtcgagtctacattgtcagtt23<210〉<211><212〉<213>824DNA人工序列<220〉<223>CYP-rp2引物<400>8gagttatgccattctatacttgta24<210>9<211>20<212〉DNA<213〉人工序列<220><223>ADH2-3-fpl引物<400>9attctgtagatggtggctgt20<210>10<211>20<212>腿<213>人工序列<220><223〉ADH2-3-rpl引物<400>10gaaggggggtcaccaggttg〈210>11<211〉20<212>腿<213>人工序列<220〉<223>ADH2-3-fp2引物<400〉11ctctttattctgtagatggt<210〉12<211〉21<212>DNA<213>人工序列<220〉<223>ADH2-3-rp2引物<400>12ccttctccaacactctccacg<210〉13<211>23<212>DNA<213>人工序列<220〉<223>ADH2-9-fp引物<400>13tggactctcacaacaagcatgtg<210〉14<211>20〈212>腿<213〉人工序列<220〉<223〉ADH2-9-rp引物<400>14tttctttggaaagcccccat2020212320<211>22<212〉DNA<213>人工序列<220〉<223>ALDH2-WP探针<400>15ggcatacactgaagtgaaaact<210>16<211〉22<212>DNA<213〉人工序列<220><223>ALDH2-MP探针<400>16ggcatacactaaagtgaaaeict〈210〉17<211>24<212〉腿<213〉人工序列<220〉<223〉CYP-WP探针<400〉17gttc鄉agaggtgcagtgttagg<210〉18<211〉24<212〉DNA<213>人工序列<220〉<223〉CYP-MP探针<400>18gttcagg卿gctgcagtgttagg<210〉19<211〉21<212〉DNA<213>人工序列<220〉<223〉ADH2-3-WP探针<400〉19aggaatctgtcgcacagatga<210>20<211〉21<212〉腿<213>人工序列<220><223〉ADH2-3-MP探针<400>20aggeiatctgtcacacagatga〈210〉21〈211〉22〈212〉DNA<213>人工序列<220><223>ADH2-9-WP1探针<400>21ctattgcagtatctgtaccgtc<210〉22<211>22<212>DNA<213>人工序列<220〉<223〉ADH2-9-MP1探针<400〉22ctattgcagtagctgtaccgtc<210>23<211>24〈212〉DNA〈213〉人工序列<220><223〉ADH2-9-WP2探针<400>23cctattgcagtatctgteiccgtcc<210>24<211〉24<212〉DNA<213>人工序列<220><223>ADH2-9-MP2探针〈400〉24cctattgcagtagctgtaccgtcc2权利要求1.寡核苷酸引物组，其用于扩增选自乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因、细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因、或醇脱氢酶2(ADH2)基因的至少一个靶序列，所述寡核苷酸引物组包含选自下组的至少一个寡核苷酸组寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO1所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO2所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO3所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO4所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO5所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO6所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO7所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO8所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO9所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO10所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO11所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO12所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段；和寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO13所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO14所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段。2.权利要求l的寡核苷酸引物组中，其中l巴序列是至少一个选自下组的序列ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区。3.寡核苷酸组，其包含从寡核香酸组成的组中选择的至少一个寡核香酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苦酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:1所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核香酸包含如SEQIDNO:2所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核香酸的片段；和寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:3所述的核苦酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:4所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核香酸的片段。4.权利要求1的寡核苷酸引物组，其为用于扩增CYP2E1基因的5，-控制区的寡核苷酸引物组，其包含选自下组的至少一个寡核香酸组寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核香酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苦酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:5所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苦酸包含如SEQIDNO:6所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:7所述的核普酸序列中存在的至少10个连续核普酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:8所述的核苦*列中存在的至少10个连续核香酸的片段。5.权利要求1的寡核苷酸引物组，其为用于扩增ADH2基因的外显子III区的寡核苷酸引物组，其包含选自下组的至少一个寡核苷酸组寡核苦酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所迷寡核苷酸组成的组中的寡核苦酸包含如SEQIDNO:9所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:10所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片,殳；和寡核苷酸组，其包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所迷寡核苷酸组成的组中的寡核香酸包含如SEQIDNO:11所述的核香酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:12所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段。6.权利要求1的寡核苷酸引物组，其为用于扩增ADH2基因的外显子IX区的寡核苷酸引物组，其包含寡核苷酸组，所述寡核苷酸组包含从寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸和从另一个寡核苷酸组成的组中选择的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:13所述的核苦酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段，而所述另一个寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:14所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段。7.权利要求1的寡核苷酸引物组，其为用于扩增至少一个选自下组的靶序列的寡核苷酸引物组ALDH2基因的外显子XI1区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区，所述寡核苷酸引物组包含从如下寡核苦酸组组成的组中选择的至少一个寡核苦酸组寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:1所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:2所述的核香酸序列的寡核苷酸；寡核香酸组，其包含具有如SEQIDNO:3所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:4所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:5所述的核苷酸序列的寡核香酸和具有如SEQIDNO:6所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:7所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:8所述的核苦酸序列的寡核香酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:9所述的核苦酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:10所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:11所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:12所述的核苷酸序列的寡核苷酸；和寡核香酸组，其包含具有如SEQIDNO:13所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:14所述的核苷酸序列的寡核苦酸。8.权利要求1的寡核苷酸引物组，其为用于扩增ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区的寡核苷酸引物组，该寡核苷酸引物组包含寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:1所述的核香酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:2所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:3所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:4所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:5所述的核苷S臾序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:6所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:7所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:8所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:9所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:IO所述的核苷酸序列的寡核苷酸；寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:11所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:12所述的核苷酸序列的寡核苷酸；和寡核苷酸组，其包含具有如SEQIDNO:13所述的核苷酸序列的寡核苷酸和具有如SEQIDNO:14所述的核苷酸序列的寡核苷酸。9.寡核苷酸探针或探针组，其能够与至少一个选自下组的靶序列杂交ALDH2基因的外显子XI1区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区，所述寡核苷酸探针或探针组选自下组能够与ALDH2基因的外显子XI1区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:15所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第ll位核苷酸；能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:17所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核香酸；能够与ADH2基因的外显子m区杂交的寡核苷S吏探针，其包含选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:19所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；和能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针，其包含选自寡核香酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:23所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第13位核香酸。10.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其还包含选自下组的至少一个寡核苷酸选自寡核苷S吏及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:16所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第ll位核苷酸；选自寡核香酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:18所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:20所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核香酸序列的第12位核苦酸；选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苦酸，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:22所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核苷酸；和选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组的至少一个寡核苷酸，所述寡核普酸及其互补寡核苦酸组成的组中的寡核苦酸包含如SEQIDNO:24所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第13位核苦酸。11.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其为能够与ALDH2基因的外显子XII区杂交的寡核苦酸探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苦酸包含如SEQIDNO:15所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片段并包含所述核普酸序列的第11位核苦酸。12.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其为能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针或#罙针组，其包含至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸組成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核香酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:17所述的核苷酸序列中存在的至少10个连续核苷酸的片^a并包含所述核香酸序列的第12位核香酸。13.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其为能够与ADH2基因的外显子III区杂交的寡核苷酸探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，该寡核普酸选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:19所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核香酸的片段并包含所述核香酸序列的第12位核苦酸。14.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其为能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷S臾探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第12位核香酸。15.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其为能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针或探针组，其包含至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸选自寡核苷酸及其互补寡核苷酸组成的组，所述寡核苦酸及其互补寡核苷酸组成的组中的寡核苷酸包含如SEQIDNO:23所述的核苦酸序列中存在的至少IO个连续核苷酸的片段并包含所述核苷酸序列的第13位核苷酸。16.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其为能够与至少一个靶序列杂交的寡核苷酸探针或揭^十组，所述靶序列选自下组ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子III区和IX区，所述寡核苷酸探针或4果4十组包含选自下组的至少一个寡核香酸探针或探针组包含具有如SEQIDNO:15所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ALDH2基因的外显子XII区杂交的寡核苦酸探针；包含具有如SEQIDNO:17所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:19所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子III区杂交的寡核苷酸探针，其；包含具有如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针；和包含具有如SEQIDNO:23所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核苷酸探针。17.权利要求9的寡核苷酸探针或探针组，其为能够与ALDH2基因的外显子XII区、CYP2E1基因的5，-控制区、和ADH2基因的外显子ni区和IX区杂交的寡核苷酸探针或探针组，所述寡核苷酸探针或探针组包含包含具有如SEQIDNO:15所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ALDH2基因的外显子XII区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:17所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与CYP2E1基因的5，-控制区杂交的寡核苷酸探针；包含具有如SEQIDNO:19所述的核普酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子III区杂交的寡核香酸探针；包含具有如SEQIDNO:21所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核香酸探针；和包含具有如SEQIDNO:23所述的核苷酸序列的寡核苷酸并能够与ADH2基因的外显子IX区杂交的寡核香酸探针。18.微阵列，其中在基底上固定了权利要求9到17中任一项的寡核苷酸探针或探针组。19.预测醇降解能力和宿醉可能的方法，该方法包含使样本接触权利要求9到17中任一项的寡核苷酸探针或探针组，从而使该样本的靶序列与探针序列杂交；和检测该探针序列与所述样本的靶序列的杂交程度。20.权利要求19的方法，其中所述样本包含使用权利要求1到8中任一项的引物组作为引物，及源自血液或唾液的DNA作为模板，通过PCR得到的PCR产物。21.权利要求19的方法，其中所述粑序列用可^r测的标记物质来标记。22.权利要求21的方法，其中所述标记物质是荧光物质、发磷光的物质、或放射性物质。23.权利要求19的方法，其中所述寡核苷酸探针或探针组固定在微阵列的基底上。24.预测醇降解能力和宿醉可能的试剂盒，该试剂盒包含权利要求1到8中任一项的引物组和权利要求9到17中任一项的寡核苷酸探针或探针组。全文摘要本发明提供了用于扩增选自乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因、细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因、或醇脱氢酶2(ADH2)基因的至少一个靶序列的寡核苷酸引物组，特异性地与选自ALDH2基因、CYP2E1基因、或ADH2基因的至少一个靶序列杂交的探针或探针组，用所述探针或探针组固定的微阵列，用所述所述探针或探针组预测醇降解能力和宿醉的方法，和用于预测醇降解能力和宿醉的包含所述引物组和所述探针或探针组的试剂盒。文档编号C12N15/09GK101153335SQ20071009601公开日2008年4月2日申请日期2007年4月10日优先权日2006年9月27日发明者吴祉令,李贞男,白象铉,郑钟石,金淑荣申请人:三星电子株式会社