专利名称：一种大豆肽生产方法
技术领域：
本发明涉及一种大豆肽生产方法，是以发酵豆粕为原料，再利用动物源性的蛋白酶生产大豆多肽的一种生产方法，属于微生物技术领域。
背景技术：
大豆肽是大豆的深加工产品。大豆蛋白是最优良的植物蛋白，但是因为大豆中含有多种抗营养因子，降低了人体对它的吸收利用率。由于大豆蛋白资源丰富、价格低廉、营养丰富，同时对其深加工后的大豆多肽具有比大豆蛋白更丰富的加工特性、营养特性和生理功能，以大豆，豆粕或大豆蛋白为主要原料，用酶解法或微生物发酵法生产的，且分子量分布在IOOOODa以下的肽称为大豆多肽。大豆多肽的氨基酸组成与大豆蛋白质完全一样， 必需氨基酸平衡且含量丰富。大豆多肽与传统大豆食品蛋白相比，虽然大豆肽的生产工艺较复杂、生产成本相对较高，但是其具有易消化吸收、能迅速供给机体能量、低豆腥味等特性，特别是具有降低血清胆固醇、降血压和促进脂肪代谢、抗疲劳、抗氧化等独特的生理功能。因此大豆肽相对大豆蛋白具有更加诱人的市场应用前景，如食品、医药领域等。由于大豆多肽的众多功效和应用前景，对其生产和利用已有大量研究。目前根据生产方法特点，现有技术主要采用的是液体酶解的方法。液体酶解法是将大豆粉或大豆分离蛋白加水混合，然后直接加入一种或多种复合蛋白酶进行保温酶解，水解完成后，再依次通过加热灭酶、冷却、分离、浓缩和干燥，最后制成大豆肽产品。在酶解过程中，在不同阶段加入不同的酶，这些酶有毛酶来源的蛋白酶、黑曲霉来源的酸性蛋白酶、米曲霉来源的中性蛋白酶、细菌来源的蛋白酶(Alcalase、 Alcakase, Protamex等)、植物来源的蛋白酶(木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等)但是液体酶解的方法均存在生产成本偏高的问题，从而限制了大豆肽产品的应用。成本高的原因一是，液体酶解法对大豆粉等低价格粗原料水解吸收率低，因此，使用高纯度高价格的原料，一般采用大豆分离蛋白作为生产原料，等量蛋白原料成本较大豆粉增加了 5倍以上；二是，液体酶解法使用的酶量大，外购酶的成本高。因此，需要一种新的生产工艺来降低大豆肽生产成本。发明专利CN 1827772A中提到采用两段法、即通过固体发酵和液体酶解相结合的方法降低了大豆肽的生产成本。而本专利吸收专利CN 1827772A的一部分优点，进行了创新。一是本专利直接使用发酵豆粕作为原料(市场成熟购买方便)，不但避免原料固体发酵的设备厂房的成本投入，而且可以减少或消除大豆粉中含有的各种酶抑制剂对水解酶的影响。二是本专利使用的水解酶是动物源的胰蛋白酶与专利CN 1827772A中的植物源复合蛋白酶不同，因此，所得到的功能小肽不同。
发明内容
本发明的目的在于吸收液体酶解法的优点，克服了它的不足，提供一种利用发酵豆粕作为原料，生产大豆多肽。从而1)以发酵豆粕为原料，消除了原料中的蛋白酶抑制剂； 2)可以完成对豆粕中大豆蛋白质的预水解；3)大量减少了外加酶的量，有效的降低了成本、获得较高的水解率。本发明的技术方案是一种大豆肽生产方法，它是以发酵豆粕为原料，其工艺步骤包括1)液体酶解将发酵豆粕与水按重量比为1:4 一 8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2) 高温灭酶；3)过滤将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4)脱色除味；5)精炼；6)喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。在上述方案的基础上进一步的技术方案是
所述大豆肽生产方法，所述液体酶解步骤中，所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加 30-800U的胰蛋白酶；酶解温度是45 - 65°C，酶解液pH7. 8-9. 0，酶解时间为1 一 8小时。所述大豆肽生产方法，所述高温灭酶是在保温酶解后，升温至70 - 80°C，维持 15-35分钟。所述大豆肽生产方法，所述过滤是通过板框过滤机去除酶解液中的固体杂质，从而得到大豆肽粗滤液。所述大豆肽生产方法，所述脱色除味是将大豆粗滤液按1 一 5ml/min的洗脱流速通过大孔树脂脱色除味，得到大豆肽清液。所述大豆肽生产方法，大孔树脂选自于为AB-8，或DM-130，或DlOl类型的树脂。所述大豆肽生产方法，所述精炼是将大豆肽清液用超滤膜按分子量进行分级分离，得到不同分子量和不同功能大豆肽溶液；截留分子量分别为200Da，或lOOODa，或 5000Da，或 8000Da。所述大豆肽生产方法，所述喷雾干燥是在干燥器中将不同分子量的大豆肽溶液在 0. 08 - 0. 15mpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度130 — 140°C，干燥器内温度 102 一 110°C，出口温度75 — 90°C，经灭菌最终获得粉状大豆肽产品。一种用于大豆肽生产方法中的脱色除味的大孔树脂的预处理方法，其大孔树脂选自于AB-8，或DM-130，或DlOl类型的树脂，预处理步骤是先将树脂用10%NaCl溶液浸泡M 小时，充分溶胀后，除去上浮的树脂碎片；然后，经水洗后湿法半流体装柱，以免混入气泡； 再用95%乙醇冲洗至流出液，加适量水无白色浑浊出现为止；再用去离子水洗去乙醇，去醇后再用3%HC1 (V/V)冲洗，最后用去离子水洗至中性，烘干备用。本发明优点是克服了现有技术的不足，提供一种利用发酵豆粕作为原料，生产大豆多肽。从而1)以发酵豆粕为原料，消除了原料中的蛋白酶抑制剂；2)可以完成对豆粕中大豆蛋白质的预水解的；3)大量减少了外加酶的量，有效的降低了成本、获得较高的水解率。
具体实施例方式实施例1: 一种大豆肽生产方法，它是以发酵豆粕为原料，其工艺步骤为1)液体酶解将发酵豆粕与水按重量比为1:4 一 8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2)高温灭酶；3) 过滤将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4)脱色除味；5)精炼；6)喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。具体是
1)液体酶解取发酵豆粕原料300公斤，按发酵豆粕与水重量比为1:8混合，加入胰蛋白酶，所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加30-800U的胰蛋白酶；酶解温度是45 -65°C，酶解液pH7. 8-9.0，酶解时间为1 一 8小时，本实施例酶的加入量为每克干料加入650U的酶酶解温度55°C，酶解液pH8. 5，酶解5小时；
2)高温灭酶在保温酶解后，升温至70- 80°C，维持15-35分钟，本实施例升温至 75 °C，维持30分钟；
3)过滤通过板框过滤机去除酶解液中的固体杂质，从而得到大豆肽粗滤液；
4)脱色除味将大豆粗滤液按1一 5ml/min的洗脱流速通过大孔树脂脱色除味，得到大豆肽清液；本实施例将大豆肽粗液按5ml/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为AB-8，也可以选DM-130，或DlOl类型的树脂
5)精炼是将大豆肽清液用超滤膜按分子量进行分级分离，得到不同分子量和不同功能大豆肽溶液；截留分子量分别为200Da，或lOOODa，或5000Da，或8000Da ；本实施例用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为lOOODa，也可为200Da，或5000Da，或 8000Da
6)喷雾干燥是在干燥器中将不同分子量的大豆肽溶液在0.08 - 0. 15mpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度130 - 140°C，干燥器内温度102 - 110°C，出口温度75 — 90°C，经灭菌最终获得粉状大豆肽产品。本实施例在0. OSmpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度130°C，干燥器内温度102°C，出口温度75°C。实施例2:与上述实施例1不同的是1)取发酵豆粕原料150公斤，发酵豆粕与水重量比为1:1所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加30U的胰蛋白酶；酶解温度45°C、 PH 7. 8，酶解7小时；2)高温灭酶在保温酶解后，升温至70°C，维持35分钟；4)将大豆肽粗液按lml/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为DM-130，也可以选AB-8， 或DlOl类型的树脂；用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为5000Da，也可为 200Da,或 lOOODa,或 8000Da。实施例3:与上述实施例1不同的是取发酵豆粕原料350公斤，发酵豆粕与水重量比为1:6所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加800U的胰蛋白酶；酶解温度65°C、pH 9，酶解6小时；2)高温灭酶在保温酶解后，升温至80°C，维持15-20分钟；将大豆肽粗液按 3ml/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为D101，也可以选AB-8，或DlOl 类型的树脂；用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为200Da，也可为lOOODa， 或 5000Da，或 8000Da。实施例4:与上述实施例1不同的是取发酵豆粕原料200公斤，发酵豆粕与水重量比为1:7所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加500U的胰蛋白酶；酶解温度50°C、pH 9，酶解5小时；2)高温灭酶在保温酶解后，升温至76°C，维持15-15分钟；将大豆肽粗液按^il/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为DM-130，也可以选AB-8，或 DlOl类型的树脂，用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为8000Da，也可为 200Da,或 lOOODa,或 5000Da。实施例5 —种用于大豆肽生产方法中的脱色除味的大孔树脂的预处理方法，其大孔树脂选自于AB-8，也可以是DM-130，或DlOl类型的树脂，预处理步骤是先将树脂用 10%NaCl溶液浸泡M小时，充分溶胀后，除去上浮的树脂碎片；然后，经水洗后湿法半流体装柱，以免混入气泡；再用95%乙醇冲洗至流出液，加适量水无白色浑浊出现为止；再用去离子水洗去乙醇，去醇后再用3%HC1(V/V)冲洗，最后用去离子水洗至中性，烘干备用。本发明的权利要求保护范围不限于上述实施例。
权利要求
1.一种大豆肽生产方法，其特征在于，以发酵豆粕为原料，其工艺步骤包括1)液体酶解将发酵豆粕与水按重量比为1:4 一 8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2)高温灭酶；3)过滤将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4)脱色除味；5)精炼；6)喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。
2.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述液体酶解步骤中，所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加30-800U的胰蛋白酶；酶解温度是45 - 65°C，酶解液 pH7. 8-9. 0,酶解时间为1 一 8小时。
3.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述高温灭酶是在保温酶解后， 升温至70 - 80°C，维持15-35分钟。
4.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述的过滤是通过板框过滤机去除酶解液中的固体杂质，从而得到大豆肽粗滤液。
5.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于所述的脱色除味是将大豆粗滤液按l-5ml/min的洗脱流速通过大孔树脂脱色除味，得到大豆肽清液。
6.根据权利要求5所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述的大孔树脂选自于为AB-8， 或DM-130，或DlOl类型的树脂。
7.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于所述的精炼是将大豆肽清液用超滤膜按分子量进行分级分离，得到不同分子量和不同功能大豆肽溶液；截留分子量分别为:200Da,或 IOOODa,或 5000Da,或 8000Da。
8.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于所述喷雾干燥是在干燥器中将不同分子量的大豆肽溶液在0. 08 - 0. 15mpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度 130 - 140°C，干燥器内温度102 - 110°C，出口温度75 — 90°C，经灭菌最终获得粉状大豆肽产品。
9.一种用于权利要求1所述大豆肽生产方法中的脱色除味的大孔树脂的预处理方法， 其特征在于，大孔树脂选自于AB-8，或DM-130，或DlOl类型的树脂，预处理步骤是先将树脂用10%NaCl溶液浸泡M小时，充分溶胀后，除去上浮的树脂碎片；然后，经水洗后湿法半流体装柱，以免混入气泡；再用95%乙醇冲洗至流出液，加适量水无白色浑浊出现为止；再用去离子水洗去乙醇，去醇后再用3%HC1(V/V)冲洗，最后用去离子水洗至中性，烘干备用。
全文摘要
本发明涉及一种大豆肽生产方法，是以发酵豆粕为原料，再利用动物源性的蛋白酶生产大豆多肽的一种生产方法，包括1)液体酶解将发酵豆粕与水按重量比为1:4－8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2)高温灭酶；3)过滤将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4)脱色除味；5)精炼；6)喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。本发明优点是1)以发酵豆粕为原料，消除了原料中的蛋白酶抑制剂；2)可以完成对豆粕中大豆蛋白质的预水解；3)大量减少了外加酶的量，有效的降低了成本、获得较高的水解率。
文档编号A23J1/14GK102178028SQ20111016407
公开日2011年9月14日 申请日期2011年6月17日 优先权日2011年6月17日
发明者叶倩, 戴丽君, 梁运祥, 葛向阳, 陈正军 申请人:武汉百安生物科技有限责任公司