专利名称：一种幽门螺杆菌多表位融合蛋白及其制备的多表位疫苗的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种融合蛋白及多表位疫苗，尤其涉及一种幽门螺杆菌多表位融合蛋白及其制备的多表位疫苗。
背景技术：
幽门螺杆菌是寄居在人胃粘膜的革兰氏阴性菌，已被确定为慢性胃炎、消化性溃疡的重要致病菌和胃癌的I类致病因子。全球50%以上人群存在幽门螺杆菌感染，在中国，幽门螺杆菌感染者已超过6亿。其中，约有30%的感染者发展为慢性胃炎，10%-20%的人可发展为消化性溃疡(胃溃疡和十二指肠溃疡)，部分感染者可出现胃粘膜萎缩和肠上皮化生 甚至胃癌。目前临床主要通过抗生素联用铋剂和抗胃酸分泌药来根除幽门螺杆菌，但随着各种耐药菌株的出现，加上多联用药病人依从性差等原因，彻底根除幽门螺杆菌也愈加困难。一直以来，疫苗接种是抵抗和清除微生物感染的有效途径。目前所研究的防治幽门螺杆菌感染的疫苗大多采用幽门螺杆菌全菌体成分(灭活菌体、全菌裂解物，全菌超声物等)或单ー完整抗原蛋白，抗原蛋白包括尿素酶(UreA、UreB)、空泡毒素(VacA)、毒素相关蛋白(CagA)、粘附素(BabA、HpaA、NAP)和过氧化氢酶(KatA)等，并分别辅以不同佐剂，如霍乱毒素(CT)，大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)，铝盐等，进行ロ服或皮下或腹腔内免疫接种，均有不同程度的预防和清除效果，但(见下表I)。表I防治幽门螺杆菌感染的疫苗研究现状
权利要求
1.一种幽门螺杆菌多表位融合蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID N0:1所示。
2.根据权利要求I所述的融合蛋白，其特征在干，编码该融合蛋白的核苷酸序列如SEQID NO:2 所示。
3.权利要求I所述的融合蛋白在制备预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的制剂中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述制剂为疫苗。
5.一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的多表位疫苗，其特征在于，包含权利要求I所述的融合蛋白。
6.根据权利要求5所述的疫苗，其特征在于，还包含医学上可接受的免疫佐剂。
7.根据权利要求6所述的疫苗，其特征在干，所述免疫佐剂为霍乱毒素B亚单位(CTB)、大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)、突变体LTKA63、CPG ODN 1826、DetoxifiedMonophosphoryl Lipid A(MPLA)、N-Glycolyl-MDP 或 AddaVax。
8.—种权利要求5所述预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的多表位疫苗的制备方法，其特征在于，包含步骤 1)将编码幽门螺杆菌膜表面蛋白抗原HpaA、CagA、UreB的T细胞表位的序列进行串联，形成融合蛋白表达序列，然后与表达载体连接重组表达载体； 2)将步骤I)制得的重组表达载体转入宿主菌表达该融合蛋白； 3)将步骤2)制得的融合蛋白与医学上可接受的免疫佐剂混合，制得所述疫苗。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在干，步骤3)所述的免疫佐剂为霍乱毒素B亚单位(CTB)、大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)、突变体LTKA63、CPG ODN 1826、Detoxified Monophosphoryl Lipid A (MPLA)、N-Glycolyl-MDP 或 AddaVAx。
全文摘要
本发明涉及一种幽门螺杆菌多表位融合蛋白及其制备的多表位疫苗。所述幽门螺杆菌多表位融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的多表位疫苗中的融合蛋白可诱导胃组织中特异性sIgA的生成以及血清中高效价的特异性IgG的形成，并且能够有效降低小鼠胃内幽门螺杆菌的定值量，具有显著的保护效果。
文档编号C12R1/01GK102838680SQ20121033069
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月7日 优先权日2012年9月7日
发明者吴超, 李海波, 邹全明, 章金勇, 刘开云, 杨武晨, 陈立, 李滨, 赵 卓, 毛旭虎, 郭刚, 童文德, 鲁东水 申请人:中国人民解放军第三军医大学