一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一株植物乳杆菌及其在发酵果蔬汁制作中的应用。本发明提供了一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum ZZU 208，其保藏号CGMCC NO.8990。本发明的实验证明了，从玉米青贮饲料中分离纯化到的乳酸菌ZZU 208对病原菌具有较好的抑菌活性。在发酵果蔬汁制作中能够有效抑制病原菌的生长，延长果蔬汁的保存期，改善果蔬汁的口感，增加乳酸菌及其代谢产物，有益于健康，在作为发酵果蔬汁制作方面具有潜在的应用价值。CGMCC NO.89902014.04.02
【专利说明】-株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物【技术领域】，尤其涉及一株植物乳杆菌及其在发酵果蔬汁制作中的 应用。
【背景技术】
[0002] 益生菌是指有益于人类生命健康的一类肠道生理细菌。益生菌发挥作用需要满足 2个基本条件，一是活的微生物，二是通过摄入充足的数量，对宿主产生功能性健康益处。益 生菌有很多种，乳酸菌是一类常见的益生菌，可W通过与有害菌竞争营养素来抑制有害菌 生长，或通过释放抗菌性物质杀伤有害菌，也可W在肠道上皮细胞形成一层保护粘膜，阻止 有害菌的入侵，还能够在肠道内产生酸性物质，抑制有害菌生长，W起到改善肠道微生态环 境，保持健康的胃肠道功能。另外，乳酸菌还可W产生乳糖酶，缓解乳糖不耐受症，合成短链 脂肪酸和维生素炬族、K族），加强营养物质的吸收。此外，乳酸菌还能够增强免疫功能。因 此，乳酸菌的补充不仅可W改善胃口不好，吸收差的症状，还有益于体质弱，反复生病感染， 过敏等症状的改善。目前市场上发酵饮品种类较少，且产品多集中于各种发酵乳制品。果 蔬汁含有丰富的维生素、矿物质、果胶质等天然营养元素，服用果蔬汁可W降低癌症的发病 率，同时还能有效防止动脉硬化、高血脂和冠也病等也血管疾病的发生。W果蔬汁为原料， 接种乳酸菌进行发酵，进行果蔬汁发酵饮品的开发，有助于丰富风味发酵饮品的种类，能够 满足在补充果蔬营养的同时，增加益生菌。
【发明内容】
[0003] 本发明的一个目的是提供一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum ZZU 208。
[0004] 本发明提供的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum ZZU 208,其保藏号为CGMCC NO. 8990。
[0005] 上述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌息液或其培养液在作为发酵果蔬汁添加 剂或制备发酵果蔬汁添加剂中的应用。
[0006] 上述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌息液或其培养液在发酵果蔬汁中的应用。
[0007] 上述应用中，所述果蔬汁按照包括如下的方法制备；将质量百分含量分别为25% 西红柿、12. 5%胡萝K25%苹果、7. 5%的白糖和水混合匀浆后，灭菌，得到果蔬汁。
[0008] 上述应用中，所述灭菌温度为9(TC，所述灭菌的时间为5min。
[0009] 本发明的另一个目的是提供一种发酵果蔬汁的方法。
[0010] 本发明提供的方法，包括如下步骤：
[0011] 1)、将质量百分含量分别为25%西红柿、12. 5%胡萝K25%苹果、7. 5%的白糖和 水混合匀浆后，灭菌，得到果蔬汁；
[0012] 2)将上述的植物乳杆菌接入所述果蔬汁中，发酵，得到发酵后果蔬汁。
[0013] 上述方法中，所述植物乳杆菌是W植物乳杆菌种子液接入，所述植物乳杆菌种子 液中菌含量大于等于IO 8C化/g。
[0014] 所述植物乳杆菌种子液按照体积百分含量2. 5%接入果蔬汁中，其植物乳杆菌种 子液中菌含量大于等于IO8C化/g。
[0015] 上述植物乳杆菌种子液按照包括如下步骤的方法进行；将所述植物乳杆菌在MRS 固体培养基3(TC厌氧培养箱培养4她，收集菌体，将其重息于水中；
[0016] 上述方法中，所述发酵条件为3(TC静置培养17h-23h。
[0017] 本发明的第H个目的是提供一种发酵果蔬汁添加剂。
[0018] 本发明提供的发酵果蔬汁添加剂，其活性成分为上述的植物乳杆菌或其发酵产物 或其菌息液或其培养液。
[0019] 上述的植物乳杆菌在制备抑菌产品中的应用；
[0020] 所述抑菌为抑制 Salmonella enterica、抑制 Escherichia coli 或抑制 Micrococcus Iuteus。
[0021] 乳酸菌ZZU 208于2014年4月2日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通 微生物中也（简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号），保藏编号为CGMCC NO. 8990,分类命名为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum)。
[0022] 本发明的实验证明了，菌株ZZU 208在混合果汁发酵中不仅能够有效补充乳酸 菌、降低果蔬汁抑，而且能够进一步改善果蔬汁的气味、色泽及口感，在发酵果蔬汁饮料制 作方面具有潜在的应用价值。
【专利附图】
【附图说明】
[002引 图1为recA基因的PCR扩增产物电泳图。
【具体实施方式】
[0024] 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0025] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0026] 实施例1、植物乳杆菌的获得
[0027] 1、分离纯化
[0028] 从河南省郑州市取得的玉米（品种；郑超甜2号）青胆饲料中分离纯化到乳酸菌 ZZU 208,为同型发酵乳酸菌，具体如下：
[0029] 称取IOg玉米青胆饲料样品加入灭菌的90ml蒸觸水中，利用縱润振荡器震荡30s， 10倍梯度稀释，然后分别取l(Ti、l(r 3和1(T5倍样品稀释液涂布在MRS固体培养基上，放置于 厌氧培养箱培养4她，然后将其取出，依据菌落的大小、形态和颜色，挑取MRS上生长的单菌 落，进行过氧化氨酶实验及革兰氏染色。将过氧化氨酶阴性及革兰氏染色阳性者暂定为乳 酸菌，于MRS固体培养基上继续划线纯化2次。-8(TC保存于10 %二甲基亚讽的Nutrient 肉汤培养基中，该菌株命名为ZZU 208,为同型发酵乳酸菌。
[0030] 2、生理生化检测
[0031] 乳酸菌ZZU 208在IOC-45C条件下及抑3.5-9. 0条件生长良好，能够耐受3.0% 的盐浓度，部分理化特性如表1所示。该菌株能够利用的碳源如表2所示。
[0032] 表1菌株ZZU 208的生理生化特性
[0033]
【权利要求】
1?一株植物乳杆菌 Lactobacillus plantarum ZZU 208,其保藏号 CGMCC NO. 8990。
2. 权利要求1所述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液在作为发酵果 蔬汁添加剂或制备发酵果蔬汁添加剂中的应用。
3. 权利要求1所述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液在发酵果蔬汁 中的应用。
4. 根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述果蔬汁按照包括如下的方法制 备：将质量百分含量分别为25%西红柿、12. 5%胡萝卜、25%苹果、7. 5%的白糖和水混合 匀浆后，灭菌，得到果蔬汁。
5. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述灭菌温度为90°C，所述灭菌的时间为 5min〇
6. -种发酵果蔬汁的方法，包括如下步骤： 1) 、将质量百分含量分别为25 %西红柿、12. 5 %胡萝卜、25 %苹果、7. 5 %的白糖和水混 合匀浆后，灭菌，得到果蔬汁； 2) 将权利要求1所述的植物乳杆菌接入所述果蔬汁中，发酵，得到发酵后果蔬汁。
7. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于： 所述植物乳杆菌是以植物乳杆菌种子液接入，所述植物乳杆菌种子液的菌含量大于等 于 108cfu/ml。
8. 根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于： 所述发酵条件为30°C静置培养17h-23h。
9. 一种发酵果蔬汁添加剂，其活性成分为权利要求1所述的植物乳杆菌或其发酵产物 或其菌悬液或其培养液。
10. 权利要求1所述的植物乳杆菌在制备抑菌产品中的应用； 所述抑菌为抑制 Salmonella enterica、抑制 Escherichia coli 或抑制 Micrococcus luteus〇
【文档编号】C12N1/20GK104357353SQ201410607958
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年11月3日 优先权日:2014年11月3日
【发明者】王雁萍, 焦浈, 谈重芳, 李宗伟, 陆艳婷 申请人:郑州大学, 浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所