工序进行将砂糖作为原料的水解和异构化工序，此外，一直W来没有将由该 菌种得到的酶固定化从而用于制造中的制造方法，可W说是新型的制造法。酶异构化使用 具有1000U/湿重树脂（g)的活性的固定化酶来进行。节杆菌属产生的异构化酶可W将通 过培养得到的菌体悬浊于缓冲液（pH7. 0)，一边冷却一边通过超声波处理进行细胞破碎，或 者使用通过溶菌酶的处理将存在于该菌体的细胞壁的多糖类成分消化从而将该菌体细胞 破坏，从由此得到的破坏细胞的溶液中采集作为粗酶液。可W对进行了柱填充的离子交换 树脂，在低溫（4°C)下使上述粗酶液通液，使粗酶蛋白质结合于离子交换树脂，通过精制水 进行清洗，得到固定化酶。从能够完全满足商业上生产的稳定性（活性维持）的观点出发， 可W得到能够承受连续生产的固定化体系。使用得到的固定化酶可W连续地进行大量的差 向异构化反应。 阳107]对于上述M30菌体的固定化，由于已知在通过0. 1~2%氯化钢和溶菌酶的破碎处 理之后，在40~70°C进行5~60分钟的加热处理之后得到的上清液中能够得到较多的具 有活性的酬糖-3-差向异构酶，因此，预计另外进行专利申请。
[0108] 作为将原料砂糖分解后进行异构化的方法，不限于通过上述酶的异构化（差向异 构化），也可W选择利用了碱异构化的方法。作为进行碱异构化反应时使用的碱性溶液，可 W列举氨氧化钢、氨氧化钟、氨、氨氧化巧、氧化巧、氨氧化领、氨氧化铅、氨氧化锁、氨氧化 儀、氨氧化锡、氨氧化侣，从安全性和费用方面出发，优选为氨氧化钢和氨氧化巧。
[0109] 最佳的碱浓度受是否并用离子交换树脂影响，但通常在己糖（六单糖）溶液中优 选含有0. 005mol/l W上。
[0110] 关于碱异构化的反应溫度，优选为20°C W上，进一步优选为30°C~100°C。 阳111] 进一步，使用了巧离子的催化作用的异构化在生成巧离子的巧盐的存在下进行己 糖的异构化反应来进行。
[0112] 在专利文献3中记载了使用了氯化巧的葡萄糖的异构化方法，在本发明中也可W 进行使用了巧离子的催化作用的异构化反应。在本发明中，可W在生成巧离子的巧盐，例如 氯化巧的存在下进行己糖的异构化反应，即，例如由果糖来制造含有D-阿洛酬糖和D-阿洛 糖的糖组合物。巧盐优选在碱共存下，优选在糖液中含有0.005mol/l W上。在巧盐存在的 体系中不一定需要碱性离子交换树脂的共存。 阳11引[最终产物]
[0114]通过作为原料的砂糖的水解反应的程度来调节最终产物中的砂糖的含量。最终产 物W特定比例含有砂糖、D-葡萄糖、D-果糖W及至少包含D-阿洛酬糖的稀少糖，或者W特 定的组成比例含有D-葡萄糖、D-果糖W及至少包含D-阿洛酬糖的稀少糖。如果进行碱异 构化，则生成包含D-阿洛酬糖、D-阿洛糖、化k山梨糖、D-塔格糖W及D-甘露糖的稀少 糖，最终产物成为运些单糖、砂糖、葡萄糖W及果糖的混合物。使用了巧离子的催化作用的 异构化由果糖生成包含D-阿洛酬糖和D-阿洛糖的稀少糖，最终产物成为运些单糖、砂糖、 葡萄糖W及果糖的混合物。如果进行酶异构化，则由果糖仅生成D-阿洛酬糖，最终产物成 为D-阿洛酬糖、砂糖、葡萄糖化及果糖的混合物，或者成为D-阿洛酬糖、葡萄糖化及果糖的 混合物。使用碱异构化或酶异构化的哪一种都可W根据水解的量和所要得到的产物的组成 分别使用，可W仅使用任一种，也可W使用两者。
[0115] 此外，通过适当改变原料砂糖浓度、酸浓度、碱浓度、酶浓度、反应溫度等，可W调 整生成的组合物的糖组成，即，最终作为甜味料可W得到调整为优选的味道、物性的组合 物。另外，特别在需要严密的组成比调整的情况下，也可W适当添加砂糖、葡萄糖、果糖、稀 少糖等来调整。在想要提早反应时间的情况下，也可W施加压力提高生产性。
[0116] 另外，关于得到的反应液的精制，通常可W适当使用糖质产业中使用的离子交换 树脂、活性碳W及通过过滤的精制，例如，可W从得到的反应液中通过柱色谱法分离除去不 是目标的糖，或者可W使用与糖馨合的药剂进行沉淀分离。通过本发明的方法，在通过柱色 谱仪进行分离之前不发生显著的褐变，但是考虑柱的寿命，也可W在前段加入通过活性碳 的脱臭、脱色过程等通常已知的精制工序。另外，关于色谱分离方式，对于本目的来说模拟 移动相色谱方式最佳，但没有特别地限定。
[0117] 进一步，如果鉴于分离工序的优点，也可W从得到的反应液中仅分离稀少糖，适当 添加于混合糖中来制成目标的组合物，因此，能够再利用分离目标糖后残留的糖液。目P，将 残糖液与原料糖再合一再次导入水解反应工序，从而能够构筑连续机械设备，因此，可W简 化制造工序。
[0118] 将本发明的优选的实施方式图示于图1中。
[0119] 通过本发明的制造方法，可W编组图1所示的生产流程（装置），可W采取该一连 串的工序来简便地得到本发明的甜味料组合物。
[0120] 在图1中，工序1是使原料砂糖溶解的罐，工序2是将原料砂糖酸水解的罐，3是将 原料砂糖水解的转化酶固定化柱。砂糖的水解可W考虑水解时间或反应效率等使用工序2 或3。接着，4、5的工序是通过碱的异构化工序或者通过酶的异构化工序，可W使用任一种， 由于通过碱的异构化还生成D-阿洛酬糖W外的稀少糖，而通过酶的异构化仅生成D-阿洛 酬糖作为稀少糖，因此，可W根据目标来选择该工序。工序6是离子交换树脂、活性碳、过滤 器等糖精制中所用的一般的精制工序。进一步，进行至工序7也可W分离取得稀少糖单品。 在工序7中分离取得稀少糖的情况下，可W将残留的砂糖、葡萄糖、果糖的混合糖液再次回 到工序1中作为原料糖进行再利用。 阳121][最终产物的用途]
[0122] 根据本发明，可W得到将砂糖作为原料的甜味强度和杂味少的甜味组合物。可W 得到将砂糖作为原料的提高了风味释放的甜味组合物。从上述将砂糖作为原料的包含稀少 糖的甜味料比将异构化糖作为原料的甜味料杂味少的优点的观点出发，可W得到砂糖的比 例为10份至75份的具有良好的浓厚感和甜味平衡的甜味组合物。进一步，从上述甜味和物 性方面优异，并且不会引起并发糖尿病和肥胖等疾病的甜味料的观点出发，即使将砂糖的 比例增加至约80份也可W保证为具有显著地降低膜岛素分泌量的功能的甜味组合物。因 此，本发明设及使用上述的甜味料组合物而成的饮食物，赋予了抑制体重的上升、身体脂肪 蓄积的上升的宗旨的表示的饮食物。另外，设及由甜味料组合物构成的医药品、准医药品、 化妆品，用于抑制体重的上升、身体脂肪蓄积的上升的医药品、准医药品、化妆品。
[0123] 在将本发明的甜味料组合物利用于饮食物的情况下，其形态没有特别地限定，可 W是直接的形态、稀释于油等溶剂中的形态、乳液状的形态、或者添加了食品业界中通常使 用的载体的形态等任一种形态。 阳124]作为利用本发明的甜味料组合物的具体的对象饮食物，可W列举W下的产品。即， 可w列举西点类（布下、果冻、橡皮糖、糖果、水果糖、牛奶糖、口香糖、巧克力、面粉糕饼、甜 奶油酱、卡仕达酱（州stard cream)、泡芙、薄煎饼、面包、馨片、炸馨条、爆玉米花、饼干、咸 饼干、馆饼、海绵蛋糕（sponge cake)、长崎蛋糕（Castilla)、华夫饼、蛋糕、甜甜圈、饼干、 曲奇、煎饼、烤年糕片、米花糖、包子、始糖等）、挂面产品（通屯、粉、意大利面）、蛋制品（蛋 黄酱、鲜奶油）、饮料（功能性饮料、乳酸饮料、乳酸菌饮料、浓缩乳饮料、果汁饮料、无果汁 饮料、果肉饮料、透明碳酸饮料、加果汁碳酸饮料、水果着色碳酸饮料、酒精饮料、啤酒类饮 料）、嗜好品（绿茶、红茶、速溶咖啡、可可、罐装咖啡饮料）、乳制品（冰激凌、酸奶、咖啡用 牛奶、黄油、奶油酱、奶酪、发酵乳、加工乳）、酱类（橘皮果酱、果酱、面酱（flour paste)、 花生酱、果泥、果子的糖浆騰制品）、畜肉制品（火腿、香肠、培根、风干肠、牛肉干、猪油）、 鱼类和贝类制品（鱼肉火腿、鱼肉香肠、鱼糕、竹轮、鱼肉山芋饼、晒干的鱼、干制纏鱼、干青 花鱼、小杂鱼干、海胆酱、咸乌贼、干銳鱼、腊制小干鱼、晒干的贝类、娃鱼等的熏制品）、咸 烹海味类（小鱼、贝类、野菜、磨茹、海带）、咖囑类（即食咖囑、離煮咖囑、罐装咖囑）、调味 料（味增、味增粉、酱油、酱油粉、未过滤的酱油、鱼酱、沙司、番茄酱、嘘油、固体肉汤（solid bouillon)、烤肉酱、咖囑粉、烛菜原汁、速溶汤、高汤原汁、酱、速食汤、紫菜盐、沙拉酱、色拉 油）、油炸制品（油炸豆腐、油炸点屯、、方便面）、豆浆、人造奶油、起酥油等。
[0125]另外，上述饮食物也可W作为功能性食品、营养补充食品或保健食品之类使用。其 形态没有特别地限定，例如可W按照通常的方法与取得氨基酸平衡的营养价值高的乳蛋 白、大豆蛋白、卵清蛋白等蛋白质、运些的分解物、蛋白的寡肤、大豆水解物、氨基酸单体的 混合物等一起使用。另外，也可软胶囊、片剂、薄膜等的形态利用。
[01%] 作为上述营养补充食品或功能性食品的例子，可W列举配合有糖类、脂肪、微量元 素、维生素类、乳化剂、香料等的流质食品、半消化态营养食品、成分营养食品、饮料剂、胶囊 剂、经肠营养剂等的加工形态。运些各种饮食品中，例如运动饮料、营养饮料等饮食物W营 养平衡和风味的提高为目的，还可W进一步配合氨基酸、维生素类、矿物质类等营养上的添 加物、甜味料、香辛料、香料、色素等。
[0127] 本发明的甜味料组合物除了上述W外，可W作为W改善糖质代谢异常和/或脂质 代谢异常为目的的食品原材料或食品添加物来利用，在作为药剂使用的情况下，可片 剂、胶囊剂、溶解于饮料的用途的粉末或颗粒等固形剂、果冻等半固形体、饮用水等液体、稀 释使用的高浓度溶液等的形态来利用。
[0128] 进一步，将本发明的甜味料组合物适当添加到饮食品中，也可W制成W改善糖质 代谢异常和/或脂质代谢异常为目的的保健食品或病人食品，作为任意成分可W适当配合 通常添加于食品中的维生素类、碳水化合物、色素、香料等。对于其形态，也可W是液状、固 体状、或者用明胶等外包胶囊化后的软胶囊剂的形态，该胶囊例如可W用通过在原料明胶 中加入水进行溶解，在其中加入增塑剂（甘油、D-山梨糖醇等）而制得的明胶皮膜制作。
[0129] 另外，本发明的甜味料组合物可W应用于家畜、家禽、宠物类的饲料。例如，可W配 合于干狗粮、干猫粮、湿狗粮、湿猫粮、半湿狗粮、养鸡用饲料、牛、猪等的家畜用饲料中。饲 料本身可W按照通常的方法进行调制。
[0130] 运些治疗剂和预防剂也可W用于人W外的动物，例如牛、马、猪、羊等的家畜用哺 乳类、鸡、鹤譜、驼鸟等的家禽类、爬行类、鸟类或者小型哺乳类等的宠物类、养殖鱼类等。 阳131]另外，根据本发明的甜味料组合物还可W进一步与阿斯己甜、=氯薦糖、乙酷横胺 酸钟、甜菊、莫纳甜（monatin)、莫内林、非洲奇果蛋白（miraculin)等高甜味度甜味料、山 梨糖醇、木糖醇、赤薛糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇等糖醇、酬糖、醒糖等甜味料混合调节甜味来 调制甜味料。
[0132] 本发明的甜味料组合物可W利用于食品、保健用食品、病患用食品、食品原材料、 保健用食品原材料、病患用食品原材料、食品添加物、保健用食品添加物、病患用食品添加 物、饮料、保健用饮料、病患用饮料、饮用水、保健用饮用水、病患用饮用水、药剂、制剂原料、 饲料、患畜和/或患畜用饲料、医药品或准医药品、口腔用组合物、化妆品、食品添加物等的 需要甜味或功能性的全部产品中，可W简便且廉价地提供能够安全地使用的甜味料组合 物。
[0133]另外，根据本发明，可W提供着眼于特定的己糖所具有的生理作用的含有特定的 己糖的糖组合物、W及使用了其的特定用保健食品、医药品或准医药品、口腔用组合物、化 妆品等，具体来说，含有砂糖、葡萄糖、果糖W及D-阿洛酬糖，在作为进行异构化的方法选 择碱异构化反应的情况下，由于可W得到也含有D-阿洛糖等的在味道上物性上生理上都 优异的糖组合物，因此，相对于可同化糖，例如异构化糖或砂糖，能够具有作为味道优异的 甜味剂、抗肥胖