甜味料组合物及其制造方法以及其用图_4

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剂、摄食抑制剂、膜岛素抵抗性改善剂、低热量甜味剂、血压抑制剂的特质。
[0134] 应该特别写出的是得到的本发明的甜味料组合物与一直W来已知的单糖不同,低 热量,并且具有食欲抑制效果,因此,具备抗肥胖效果也优异等新型的特质。另外,本发明的 甜味料组合物甜味品质接近砂糖,且热量低,因此,可W广泛地用作低热量甜味剂。
[0135] 上述饮食物可W通过将本发明的甜味料组合物作为其原料配合来进行加工制造, 本发明的甜味料组合物相对于上述饮食物的配合量根据作为对象的饮食物的形态而不同, 没有特别地限定,通常在饮食物中优选为0. 1~50质量%。
[0136] 本发明的新型糖组合物不仅可W期待广泛地用作软饮料或其它饮料的甜味料,还 可W期待利用于食品、医药品或准医药品、口腔用组合物、化妆品中。 阳137]实施例
[0138] 通过实验例和实施例来更详细地说明本发明,但本发明并没有被任何实施例限 定。
[0139] <实验例A :砂糖的酸水解〉
[0140] 使用砂糖和盐酸,调制含有砂糖3% (w/v)的0. 7m〇Vl盐酸溶液。对其W溫度 40°C分别进行20分钟、30分钟、50分钟、80分钟的水解。用氨氧化钢将分解液中和之后,用 HPLC (检测器:RI,柱:S菱化成MCI GEL CK 08EC,移动相:水,流速:0. 4ml/min)进行分析 (该分析条件在W下的实验例中也相同。)。 阳141]将得到的水解物的糖组成(% )示于W下的表1中。
[0142][表 U阳 143]
[0144] 接着,为了确认由酸水解得到的糖组成在不同的浓度下是否也同样地发生分解, 对砂糖80% (w/w)溶液确认了在90°C下酸水解条件下的糖组成,结果确认了分解。
[0145] 另外,为了确认由酸水解得到的糖组成是否通过不同的酸浓度都发生分解,确认 了利用盐酸浓度为0. 01~5mol/l的各浓度的盐酸通过水解得到的糖组成,结果确认了分 解。 阳146] <实验例B~D:砂糖的酶水解〉
[0147] 使用砂糖和转化酶(MP Biomeicals, Inc.制造,lOOunit/mg),调制含有转化酶 (0. 003% w/w,砂糖g)的3% (w/v)砂糖溶液。对其在溫度40°C下分别进行20分钟、30分 钟、40分钟的水解,用与实施例1同样的方法进行HPLC分析。
[0148] 将得到的水解物的糖组成(% )示于W下的表2中。 阳1例[表引 阳1加]
阳151] 接着,调制含有转化酶(0. 00075% w/w,砂糖g)的25%(w/v)砂糖溶液,对其在溫 度40°C下分别进行10分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、60分钟、70分钟、80分钟的 水解,同样地进行HPLC分析。 阳152] 将得到的水解物的糖组成(% )示于W下的表3中。
[0153][表引阳 154]
[01巧]进一步,将市售转化酶值SM公司制造,200U/mg)固定化于离子交换树脂(树脂: 1^904,柱内径1.5畑1,固定化酶150011/湿重(扣)(关于方法,示于^下。),使用该树脂 20ml,在溫度45°C、送液速度3ml/min、速度2ml/min、速度Iml/min下将砂糖30 %溶液送液 使之反应。对此时从柱中洗脱的反应液进行取样,进行了 HPLC分析。 阳156]将得到的水解物的糖组成(% )示于W下的表4中。 阳157][表" 阳15引
阳159] 转化酶的固定化:
[0160]将0. 2g市售转化酶值SM公司制造,200000U/g)溶解于憐酸缓冲液(pH7)中,在 4°C下将其200ml对20ml柱填充树脂通液(SV = 1),由此使转化酶蛋白质结合于离子交换 树脂。固定化效率为75%。接着,通入1L的精制水进行清洗,最终得到了固定化酶(1500U/ 湿重(g))。 阳161] <实验例E :砂糖的酶水解物的通过碱的异构化反应〉 阳162]将实验例2中的实验区C3、C4、巧中得到的酶水解物的各液调制成0.1 MNaOH,在 溫度60°C下进行2小时异构化反应。对异构化反应后的一部分反应液进行取样,通过HPLC 分析糖组成。 阳163] 将得到的碱异构化反应物的糖组成示于W下的表5中。
[0164][表引 阳1化]
[0166] <实验例F :砂糖的酶水解物的通过酶的异构化反应〉
[0167] 将实验例2的实验区C1、C3、C4、C8中得到的水解物供给于从球形节杆菌M30 (保 藏号NITE BP-1111)中提取从而固定化于离子交换树脂的酶(对于固定化的方法示于W 下),进行了异构化反应。异构化通过在溫度45°C、送液速度0. 5ml/min下送液于离子交换 树脂50ml (树脂:Amberlite IRA900J,柱内径1. 5cm)进行,对柱洗脱液进行取样,分析其糖 组成。
[0168] 将得到的酶异构化反应物的糖组成(% )示于W下的表6中。 阳 169][表6] 阳 170]
阳171] ※节杆菌属生产的异构化酶的固定化: 阳172] <通过超声波的菌体内酶的提取〉
[0173]将通过培养得到的菌体60g悬浊于600ml lOmM憐酸缓冲液(pH7. 0)中,在冰水中 一边冷却一边用超声波均质机(株式会社SONICS&MTERIAL巧进行细胞破碎之后,在50°C 下赋予15分钟的热休克。将对该破碎物通过1200化pm '20分钟的离屯、分离而得到的上清 液约500ml作为粗酶液。 阳174]<粗酶的固定化〉 阳1巧]对于柱填充后的离子交换树脂(Amberlite IRW904J,柱内径1. 5cm)通液上述粗 酶液(4°C、SV = 1),并使粗酶蛋白质结合于离子交换树脂。接着,通入1L精制水进行清洗, 得到了固定化酶(固定化酶1000U/湿重(g))。
[0176] <通液反应〉
[0177] 作为原料糖,使用lOmM憐酸缓冲液(pH 7. 5)调制高果糖液糖W成为Bx30, W送液 速度0. 5ml/min送液至上述固定化酶树脂50ml (40°C )。半衰期为第51天,本固定化法在 产业上可W说非常优异。 阳17引[实施例^ 阳1巧] < 糖组合物的感官评价1〉
[0180] 使用20多岁~40多岁的味觉上精通的专业评价人员5人,对于在实验例E、F中得 到的糖液的组合物巧1、E3、F1、F3)、将各糖适当混合制成的G1 (葡萄糖49:果糖42:D-阿 洛酬糖7)、G2 (葡萄糖51:果糖36:D-阿洛酬糖10)、G3 (砂糖10:葡萄糖48:果糖38) W 及G4(砂糖40:葡萄糖25:果糖25)的各糖组合物的味道进行感官评价。糖组合物全部使 用调整为固体成分10%后的组合物,评价对甜味的"浓厚感"和"平衡"W 5分满分(1分: 差~5分:非常良好)进行评价,将其结果巧名专业评价人员的合计分数)表示于表7中。 阳181][表 7] 阳 182]
阳183] 与G1、G2、G3和G4比较,E1、E3、F1 W及F3浓厚感和甜味的平衡都良好。
[0184] 目P,可知通过使砂糖不完全水解至最后,并且在该组合物中存在D-阿洛酬糖,从 而与将砂糖完全水解后异构化所得到的糖组合物相比较,改善了甜味的浓厚感和平衡性。
[0185] 另外,在甜味料中砂糖的比例为10份W下的情况下或超过75份的情况下,发现有 浓厚感或平衡性变坏的倾向,优选W设定为该范围的砂糖比例的方式进行制造。
[0186] <糖组合物的感官评价2〉 阳187] 接着,对于E1、E3、F1、F3化及将各甜味料适当混合制成的HUD-阿洛酬糖10:赤 薛糖醇30: S氯薦糖0. 1)、肥值-阿洛酬糖60:赤薛糖醇20: S氯薦糖0. 055)的各糖组合 物的味道,W与之前同样的顺序进行了感官评价。将结果巧名专业评价人员的合计分数) 示于表8中。
[0188] 但是,为了含有高甜味度甜味料而难W使甜味料组合物中的固体成分一定来进行 比较,从而使甜味料组合物的甜味度一定来比较甜味品质。
[0189] [表引 阳 1901
阳191] 通常已知高甜味度甜味料比低甜味度甜味料后味差(有异味),实际上在使用作 为高甜味度甜味料的=氯薦糖的情况下,评价结果为后味差(表7)。为了高甜味度甜味料 在后味有长时间残留的甜味或异味,大多采用与前味中感觉到爽快的甜味的糖醇并用的方 法,但在该情况下也非常难W使各甜味料的甜味品质具有统一性(一体感),有分别感觉到 各个甜味料的甜味的难点,结果本发明的甜味料组合物即E1、E3、F1 W及F3与含有高甜味 度甜味料的HI和肥相比,在后味也没有异味等难点,成为具有统一性的非常优秀的甜味品 质。 阳192]目P,由砂糖、葡萄糖、W及果糖构成的甜味组合物中含有至少包含D-阿洛酬糖的 稀少糖的甜味料在与由糖醇和高甜味度甜味料构成的甜味组合物中添加了 D-阿洛酬糖的 甜味料相比的情况下,可W说是甜味品质更有统一性的甜味料。 阳193] 仿照实验例C的顺序将砂糖完全酶水解的组合物进一步仿照实验例F用异构化酶 异构化,并得到了组合物II (葡萄糖50:果糖38:D-阿洛酬糖12)。另外,将市售的一般的 异构化糖(葡萄糖50:果糖45:寡糖5)仿照实验例F用异构化酶异构化,从而得到组合物 12 (葡萄糖50:果糖34:D-阿洛酬糖11:寡糖5)。对于各糖组合物的味道,通过与上述(< 糖组合物的感官评价1〉)同样的评价方法进行感官评价。但是,评价项目为"甜味的前味开 始的强度"和"杂味"。
[0194] 其结果,II与12相比不仅甜味的前味开始强,而且从杂味少方面出发,作为甜味 料也优异。由此可W说,将砂糖作为原料通过上述方法得到的异构化甜味组合物相比将异 构化糖作为原料通过上述方法得到的异构化甜味组合物,作为甜味料更优异。运或许可W 认为是由于市售的一般的异构化糖中所含的寡糖等的混杂物多少抑制甜味的前味的开始, 并使人感觉到杂味。
[0195] 由该结果可W说,相比于将市售的一般的异构化糖作为原料,将砂糖作为原料得 到的甜味组合物作为甜味料是优选的味道品质。 阳196][实施例2] 阳197] <酸性饮料的调制和感官评价1〉 阳19引使用上述实验例E、F中得到的糖组合物巧1、E3、F1、F3)、将各糖适当混合制成的 G1 (葡萄糖45:果糖42:D-阿洛酬糖7)、W及G2(葡萄糖51:果糖36:D-阿洛酬糖10)的 各糖组合物,按照表9的配合调制了酸性饮料。对于该酸性饮料,与实施例1同样由5名专 业评价人员进行感官评价。将其结果示于表10中。
[0199][表 9] 阳200]
阳201] *其中,为固体成分换算量。 阳20引[表10] 阳203]
阳204] 与糖组合物本身的感官评价结果同样地,与G1和G2相比,使用了 £1、63、尸1、尸3的 糖组合物的酸性饮料分别浓厚感和甜味平衡都良好。 阳205] <酸性饮料的调制和感官评价2〉
[0206] 使用上述实验例E、F中得到的糖组合物巧2、F4)、将各糖适当混合制成的G5 (葡 萄糖60:果糖38: D-阿洛酬糖10)、G6(葡萄糖55:果糖30: D-阿洛酬糖20)、G7(砂糖36: 葡萄糖45:果糖22) W及G8 (砂糖12:葡萄糖50:果糖33)的各糖组合物,按照表11的配 合调制酸性饮料。对于该酸性饮料,与实施例1同样地由5名专业评价人员进行感官评价。 将其结果不于表12中。
[0207] [表 11] 阳20引
阳209] *其中,为固体成分换算量。
[0210][表 12] 阳 211]
[0212] 使用了 E2、F4的糖组合物的酸性饮料与使用了欠缺砂糖或D-阿洛酬糖的任一种 的糖组合物的酸性饮料相比,浓厚感
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