专利名称：邻氨基苯甲酰胺及其药学应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的邻氨基苯甲酰胺衍生物、其制备方法、在人或兽治疗方法上的应用即单独或与一种或多种其他药学上的活性化合物联合特别应用于如肿瘤疾病的瘤形成疾病的治疗、或者视网膜病变及年龄相关性的黄斑变性治疗；本发明还涉及特别是人的动物中治疗所述疾病的方法以及这些化合物单独或与一种或多种其他药学上的活性化合物联合在生产治疗瘤形成疾病、视网膜病变或年龄相关性的黄斑变性的药用制剂(药物)中的用途。
已知某些疾病与血管生成失调(deregulated)相关，尤其是由眼新血管生成引起的疾病，如视网膜病变(包括糖尿病视网膜病变)、年龄相关性的黄斑变性、银屑病、血管母细胞瘤、血管瘤、动脉粥样硬化、如风湿病样的或风湿性的炎性疾病，尤其是风湿性关节炎，或者如慢性哮喘的其他慢性炎性病变，动脉的或移植后的动脉粥样硬化，子宫内膜异位症，尤其如所谓的实体瘤和液体瘤(如白血病)的瘤形成疾病。
在胚胎发育期、正常生长期以及出现大量病理异常和疾病期间，在调节血管系统及其成分生长和分化的网络中心，存在着称为“血管内皮生长因子”(VGEF)的血管生成因子，为带有细胞受体的二硫化物连接的46-kDa的糖蛋白二聚体(参见Breier，G.，等，Trends in Cell Biology6，454-6)。
VEGF受体为跨膜的受体酪氨酸激酶。已知多种类型的VEGF受体如VEGFR-1、VEGFR-2和VEGFR-3。
大量人源肿瘤中，尤其是神经胶质瘤和癌中，VEGF及其受体的表达水平很高。由此导致人们作出了这样一个假设，即肿瘤细胞以旁分泌的方式释放VEGF从而刺激毛细血管的生长和肿瘤内皮的增殖，所以血液供应的改善，加速了肿瘤的生长。从抗体抑制VEGF活性的研究中，已经获得VEGF在体内作为肿瘤血管生成因子角色的直接证据。
对那些生长至最大直径远超过约1-2mm的肿瘤来说，血管生成被认为是绝对的先决条件；在到达这个极限后，氧及营养物质就通过分散的方式供应给肿瘤。
在血管生成抑制剂抑制肿瘤的活性中，起重要作用的三种主要机制1)抑制血管、尤其是毛细血管生长为血管休眠期(vascular resting)的肿瘤(由于细胞凋亡和增殖之间达到平衡所以导致肿瘤没有继续生长)血管中；2)由于缺少通往肿瘤的血流入和流出，阻止肿瘤细胞的转移；和3)抑制内皮细胞增殖，因而避免由通常顺血管排列的内皮细胞对周围组织产生的旁分泌生长刺激效应。
在WO00/27820中，所描述的化合物为据报道可抑制VEGF受体酪氨酸激酶活性、肿瘤生长以及VEGF依赖型细胞增殖的邻氨基苯甲酰胺类的化合物。
令人惊奇的是，申请人发现如下所述式I的邻氨基苯甲酰胺的衍生物具有优良的药理学性质并可抑制如VEGF受体酪氨酸激酶的活性、肿瘤生长及VEGF依赖型的细胞增殖。
在疾病治疗中应用式I的邻氨基苯甲酰胺衍生物是适当的，尤其在很好的血管生成和/或VEGF受体酪氨酸激酶抑制作用具有有益作用的疾病的治疗和预防中。
本发明是关于式I的邻氨基苯甲酰胺、其N-氧化物及其互变异构体，以及这些邻氨基苯甲酰胺、它们的N-氧化物和它们的互变异构体的盐 其中Ar由亚式Ia代表，
其中Ra代表H或低级烷基，R1代表H或全氟代的低级烷基，且R2代表H、卤素、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或低级炔基；或者Ar由亚式Ib代表， 而且R1代表全氟代的低级烷基，且R2代表溴、碘、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基，或者R1代表H，且R2代表氟、溴、碘、乙基、C5-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基。
除非有其他说明，在公开文本的上下文中所用的一般术语优选有如下含义前缀“低级”表示最多并包含7个、尤其最多并包含4个碳原子的基团，该基团可为线性或具有单支或多支的支链。
用于化合物、盐等的复数形式，也意指单一的化合物、盐等。
任何不对称的碳原子(例如R9为低级烷基的式I化合物中)可以为(R)-、(S)-或(R，S)-构型，优选(R)-或(S)-构型。因此，化合物可以为异构体的混合物或单一的异构体，优选对映体纯的非对映异构体。
本发明也涉及式I化合物的可能的互变异构体。
在优选的实施方案中，烷基最多可为12个碳原子，尤其是低级烷基。
低级烷基优选为1(包括1)至7(包括7)个碳原子的烷基，更优选为1(包括1)至4(包括4)个碳原子的线性或支链的烷基；低级烷基优选如为正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基的丁基，如正丙基或异丙基的丙基，乙基或优选甲基。
文中所用的术语“全氟代的低级烷基”是指所有氢原子都由氟原子代替的低级烷基。
卤素优选为氟、氯、溴或碘，更优选氟、氯或溴。
优选将有碱性氮原子的式I化合物与有机或无机酸形成这些酸加成盐，尤其是药学上可接受的盐。适当的无机酸为如盐酸的氢卤酸、硫酸或磷酸。适当的有机酸为羧酸、膦酸、磺酸、氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、乙醇酸、乳酸、富马酸、琥珀酸、脂肪酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸，如谷氨酸或天冬氨酸的氨基酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、环己烷甲酸、金刚烷甲酸、苯甲酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、苯二甲酸、苯乙酸、扁桃酸、肉桂酸、甲基或乙磺酸、2-羟基乙磺酸、乙基-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘-二磺酸、2-、3-或4-甲基苯磺酸、甲基硫酸、乙基硫酸、十二烷基硫酸、N-环己基氨基磺酸、N-甲基、N-乙基或N-丙基氨基磺酸或者其他如抗坏血酸的有机质子酸。
为了分离和纯化的目的，可以用药学上不能接受的盐，如苦味酸盐或高氯酸盐。用于治疗的目的时，仅可以用并且优选药学上可接受的盐或游离的化合物(以药学制剂的形式应用时)。
考虑到新颖化合物的游离形式与其盐形式(包括那些在新颖化合物的纯化或鉴别中作为中间体的盐)的密切关系，在上下文中所涉及的游离化合物最好也理解为也指相应的盐。
如上下文所描述的式I化合物及其N-氧化物有较佳的药理学性质。
如下证明了本发明化合物作为VEGF受体酪氨酸激酶活性抑制剂的效果VEGF受体酪氨酸激酶活性试验。用Flt-1 VEGF受体酪氨酸激酶进行试验。详细步骤如下将溶于20mM Tris·HClpH 7.5中的30μl激酶溶液(10ng Flt-1激酶域，Shibuya等，Oncogene5，519-24)、3mM二氯化锰(MnCl2)、3mM二氯化镁(MgCl2)、10μM钒酸钠、0.25mg/ml聚乙二醇(PEG)20000、1mM 4∶1的二硫苏糖醇和3μg/μl聚(谷氨酸、酪氨酸)4∶1(Sigma，Buchs，Switzerland)、8μM[33P]-ATP(0.2μCi)、1％二甲基亚砜以及0至100μM的试验化合物在室温下共同孵育10分钟。加入10μl 0.25 M的pH 7的乙二胺四乙酸(EDTA)结束反应。采用多通道配药机(LAB SYSTEMS，USA)，将等分的20μl放入PVDF(＝二氟聚乙烯)Immobilon P膜(Millipore，USA)上，通过多头与真空抽滤器连接的Millipore微量过滤器过滤。除去全部溶液后，用含有0.5％磷酸(H3PO4)的洗液将膜连续洗涤4次并用乙醇洗涤一次，每次边摇动边孵育10分钟，然后放入Hewlett Packard TopCount Manifold中固定并在加入10μlMicroscint(β-闪烁计数液)后测定放射能。通过对三种浓度(0.01、0.1和1μmol)中每种化合物的抑制百分比的线性回归分析测定IC50值。发现式I化合物的IC50值在0.001至1μM之间，优选在0.001至0.1μM之间。
如下为本发明化合物体内测定的抗癌效果在无胸腺小鼠的外来移植模型中的体内活性将雌性BALB/c无胸腺小鼠(8-12周龄)，Novartis Animal Farm，Sisseln，Switzerland)置于无菌的随意进水和食物的条件下。通过向小鼠皮下注射瘤细胞(如前列腺癌细胞系Du 145(ATCC No.HTB 81；参考Cancer Research37，4049-58(1978))或者在Forene(Abbott，Switzerland)麻醉下通过用13号规格的套管针皮下向小鼠的左肋腹植入瘤组织碎片(约25mg)的方法诱导瘤形成。只要瘤的平均体积达到100mm3就开始用试验化合物进行治疗。在最后治疗后的一周及24小时内通过测量两个垂直轴的长度来测量瘤的生长2-3次。根据公开的方法计算瘤的体积(参见Evans等，Brit.J.Cancer45，466-8)。抗癌效果由治疗动物的瘤体积的平均增长/未治疗动物(对照)的瘤体积的平均增长来决定，然后乘以100，表示为T/C％。瘤的消退(以％的形式给出)为最小平均瘤体积/治疗开始时平均瘤体积。通过管饲法每日给予试验化合物。
另一些可以相同方法应用的细胞系，如-乳腺腺癌细胞系MCF-7(ATCC No.HTB 22；也参考J.Natl.CancerInst.(Bethesda)51，1409-16)；-乳腺腺癌细胞系MDA-MB 468(ATCC No.HTB 132；参考In Vitro14，911-15)；
-乳腺腺癌细胞系MDA-MB 231(ATCC No.HTB 26；也参考J.Natl.Cancer Inst.(Bethesda)53，661-74)；-结肠癌细胞系Colo 205(ATCC No.CCL 222；也参考Cancer Res.38，1345-55)；-结肠癌细胞系HCT 116(ATCC No.CCL 247；也参考Cancer Res.41，1751-6)；-前列腺癌细胞系DU 145(ATCC No.HTB 81；也参考Cancer Res.37，4049-58)；及-前列腺癌细胞系PC-3(ATCC No.CRL 1435；也参考Cancer Res.40，524-34)。
通过进一步的体外细胞试验可证实VEGF诱导的KDR受体自磷酸化的抑制作用将稳定通常表达人VEGF受体(KDR)的转染的CHO细胞接种在6孔培养板内的完全培养基(含有10％胎牛血清＝FCS)中，并在37℃有5％CO2的情况下孵育直到约80％汇合。试验化合物在培养基(无FCS，有0.1％牛血清白蛋白)内稀释并加入细胞内。(对照组的培养基内不含试验化合物)。在37℃下孵育两个小时后，加入重组VEGF；VEGF的终浓度为20ng/ml。在37℃下再孵育5分钟后，用冰预冷的PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤细胞两次并立即放入每孔100μl的溶胞缓冲液内溶胞。然后将溶胞产物离心，去除细胞核，用常规蛋白测定法(BIORAD)测定上清液中的蛋白浓度。可立即应用溶胞产物或者贮存在-20℃下以备需要时应用。
用夹层ELISA技术进行KDR受体磷酸化的测定抗KDR的单克隆抗体(如Mab 1495.12.14；由H.Towbin制备)固定在黑色ELISA板(来自Packard的OptiPlateTMHTRF-96)上。然后洗涤培养板并用溶于PBS中的1％BSA使残留的游离蛋白结合位点饱和。在这些培养板上将溶胞产物(20μg蛋白/孔)和与碱性磷酸酶偶联的自磷酸化抗体(来自TransductionLaboratories的PY20AP)共同在4℃下孵育过夜。再次洗涤培养板并用发光AP底物(CDP-Star，备用，带Emerald II；TROPIX)来证明抗磷酸酪氨酸抗体与捕获的磷酸化受体结合的存在。用Packard Top CountMicroplate Scintillation Counter(Top Count)测定发光。阳性对照(用VEGF刺激)和负对照(无VEGF刺激)的信号的差异相应于VEGF诱导的KDR受体磷酸化(＝100％)。以VEGF诱导KDR受体磷酸化的抑制作用百分比来计算试验物质的活性，其中诱导出最大抑制作用一半的物质浓度被定义为ED50(50％抑制作用时的有效剂量)。
式I化合物或其N-氧化物也不同程度地抑制其他由营养因子(如来自Scr家族的激酶，尤其是c-Scr激酶、Lck，和Fyn；以及如c-erbB2激酶(HER-2)、c-erbB3激酶、c-erbB4激酶的EGF家族的激酶；胰岛素样生长因子受体激酶(IGF-1激酶)，尤其是如PDGF受体激酶、CSF-1受体激酶、Kit受体激酶和VEGF受体激酶的PDGF受体酪氨酸激酶家族的因子；以及丝氨酸/苏氨酸激酶)调节的信号传导中的其他酪氨酸激酶。在哺乳动物(包括人)的细胞生长调节和转化中中，所有上述激酶的营养因子都扮演重要角色。
在这些研究的基础上，本发明的式I化合物对由蛋白激酶决定的疾病(尤其是增殖性疾病)表现出治疗效果。
如下证明了式I化合物在关节炎(其示例为炎性风湿或风湿病样疾病)治疗中的用途用公认的大鼠佐剂关节炎模型(Pearson，Proc.Soc.Exp.Biol.91，95-101(1956))来测试式I化合物或其盐的抗关节炎活性。有两种不同的治疗佐剂型关节炎的给药方案时间表开始时即用佐剂免疫法(预防性给药)；或者出现关节炎反应15天后再给药(治疗性给药)。优选治疗性给药方案。为了加以对照，在单独一组给予环加氧酶-2抑制剂，如5-溴-2-(4-氟苯基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]噻吩或双氯芬酸。
详述如下，在雄性Wistar鼠(每组5只，约重200g，由Iffa Credo，France提供)尾根部的真皮内注射含有0.6mg冻干型高温灭菌的肺结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)的矿物油。从第15天到第22天(治疗性给药方案)用试验化合物(每天口服3、10或30mg/kg)或者溶媒(水)治疗该鼠。在试验结束时，用测微计测量跗骨关节肿胀程度。以溶媒治疗过的关节炎动物(0％抑制)和溶媒治疗过的正常动物(100％抑制)为标准计算出抑制爪子的肿胀的百分比。
在这些研究的基础上，令人惊讶的是式I化合物适于炎性疾病(尤其风湿性或风湿病样的)的治疗。
以其作为VEGF受体酪氨酸激酶活性抑制剂的效能为基础，式I化合物主要是抑制血管生长，因此可有效对抗与血管生成失调相关的多种疾病，尤其是由眼新血管生成引起的疾病，如糖尿病视网膜病变的视网膜病变或年龄相关性的黄斑变性、银屑病、如血管瘤的血管母细胞瘤、如慢性或急性肾炎(如糖尿病性肾病、恶性肾硬化、血栓形成的微血管病综合征或移植排斥反应)的肾小球膜细胞增殖性疾病或者如血管球性肾炎(尤其是肾小球膜增殖性血管球性肾炎)的炎性肾疾病、溶血性尿毒症综合征、糖尿病肾病、高血压性肾硬化、动脉粥样化、动脉狭窄、自身免疫性疾病、急性炎症、纤维化病变(如肝硬化)、糖尿病、子宫内膜异位症、慢性哮喘、动脉的或移植后的动脉粥样硬化、神经变性疾病以及尤其是如白血病的瘤形成疾病，如急性淋巴细胞白血病、急性粒细胞白血病及慢性粒细胞白血病，以及其他那些表达c-kit、KDR或flt-1的“液体瘤”和如乳癌、结肠癌、肺癌(尤其是小细胞肺癌)、前列腺癌或Kaposi’s肉瘤的固体瘤。式I化合物(或其N-氧化物)可以抑制瘤的生长，尤其适于预防瘤的转移扩散和微转移的生长。
式I化合物可单独给药或与一种或多种治疗剂联合给药，联合治疗可以是固定结合或者给予本发明化合物及一种或多种其他治疗剂错开或相互独立给药，或者固定结合与一种或多种其他治疗剂联合给药。除给予式I化合物外，还可以采用化疗、放疗、免疫疗法、外科手术或这些的联合来联合治疗肿瘤。如上所描述，在上下文的其他治疗方法中长期治疗极有可能成为辅助治疗。其他可能的治疗为在瘤消退后维持患者状态的治疗，甚至是如在患者病危时进行的化学预防治疗。
可能联合的治疗剂尤其是为一种或多种抗增殖的、抑制细胞生长的或细胞毒的化合物，如一种或几种选自包括但不限于下列的化疗剂多胺生物合成抑制剂、蛋白激酶(尤其是如蛋白激酶C的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或者酪氨酸蛋白激酶如PKI166的EGF受体酪氨酸激酶、如PTK787的VEGF受体酪氨酸激酶、或如STI571的PDGF受体酪氨酸激酶)抑制剂、细胞因子、如TGF-β或IFN-β的反生长调节剂、如来曲唑或阿那曲唑的芳化酶抑制剂、SH2域与磷酸化蛋白质相互作用抑制剂、抗雌激素、如伊诺替康的I型拓扑异构酶抑制剂、II型拓扑异构酶抑制剂、如帕尼特西、discodermolide或埃坡霉素的微管活性剂、烷化剂、如吉西他滨或卡培他滨的抗肿瘤的抗代谢物、如卡铂或顺铂的铂类化合物、抗血管形成化合物、促黄体生成素释放素促效剂、抗雄激素、如AREDIA或ZOMETA的双磷酸盐类以及赫赛汀。可从当前版的标准纲要“The Merck Index”或从如Patents International(如IMS World Publications)的数据库中获得通用名或商品名以及编号所代表活性剂的结构。因此其相关内容在此引入作参考。
关于在下文中所提及的式I化合物及其N-氧化物的优选基团，可适当应用在上文中所提及的从概括定义中引申出的取代基的定义，如用更具体的定义或具有优选特征的定义取代概括的定义。
而且，本发明涉及基团和符号如上所定义的式I化合物或其N-氧化物或药学上可接受的盐在治疗视网膜病或年龄相关性的黄斑变性的药物制备中的应用。
而且，本发明还涉及对受体酪氨酸激酶活性的抑制作用有反应的瘤形成性疾病的治疗方法，该方法包括给予需要治疗的温血动物治疗所需疾病有效量的式I化合物或其N-氧化物或药学上可接受的盐，在式I中，各基团和符号的定义与上述相同。
而且，本发明还涉及视网膜病或年龄相关性的黄斑变性的治疗方法，该方法包括给予需要治疗的温血动物治疗所需疾病有效量的式I化合物或其N-氧化物或药学上可接受的盐，在式I中，各基团和符号的定义与上述相同。
本发明尤其涉及式I化合物及其N-氧化物或互变异构体或者这些邻氨基苯甲酰胺化合物、其N-氧化物或其互变异构体的盐，其中Ar由亚式Ia代表其中Ra由H或低级烷基代表，且R1代表H或三氟甲基，
R2代表H、卤素、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或低级炔基；或Ar由亚式Ib代表，且R1代表三氟甲基，且R2代表溴、碘、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基，或者R1代表H，且R2代表氟、溴、碘、乙基、C5-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基。
优选如下定义的式I化合物，其中Ar由亚式Ia代表其中Ra代表H或低级烷基，R1代表H或三氟甲基，且R2代表H、卤素、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或低级炔基。
还优选如下定义的式I化合物，其中Ar由亚式Ib代表，R1代表三氟甲基，且R2代表溴、碘、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基，或者R1代表H，且R2代表氟、溴、碘、乙基、C5-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基。
更优选如下定义的式I化合物，其中Ar由亚式Ib代表，R1代表三氟甲基，且R2代表溴、丙基、丙烯基或丙炔基，或R1代表H，且R2代表氟、溴、丙烯基或丙炔基。
在一个实施方案中，本发明涉及如下定义的式I邻氨基苯甲酰胺化合物，其中Ar由亚式Ib的N-氧化物代表，R1代表三氟甲基，R2代表溴、丙基、丙烯基或丙炔基。
更优选如下所列的式I化合物及其互变异构体或者这些化合物及其互变异构体的盐2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-溴-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-(4-溴苯基)苯甲酰胺，2-[[3-[(甲基氨基)羰基]-苯基]甲基]氨基-N-[3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-[(Z)-1-丙烯基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺 盐酸盐，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-[(1-氧基-吡啶-4-基甲基)-氨基]-苯甲酰胺，及N-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-[(1-氧基-吡啶-4-基甲基)-氨基]-苯甲酰胺。
通过本身公知的方法制备本发明化合物，尽管该方法至今未用于本发明的新化合物，该方法的特征在于对于R2代表氢或卤素且其余符号R1和Ar如对式I化合物所定义的式I化合物的合成，使其中R1和R2如上所定义的式II化合物 与其中Ar如上对式I化合物所定义的式III的羰基化合物在还原剂存在的情况下反应， 其中式II和III的原料化合物也可以功能基团被保护的形式存在，如必要的话，和/或以盐的形式存在，只要存在形成盐的基团，并且可以以盐形式发生反应；脱除在式I化合物的被保护衍生物中存在的任何保护基；以及，如果需要，可将得到的式I化合物转换成另一个式I化合物或其N-氧化物，将游离的式I化合物转换成盐，将得到的式I化合物的盐转换成游离的化合物或其他的盐，和/或将异构的式I化合物的混合物分离成单独的异构体。
或者，式II化合物与式III化合物在如樟脑-10-磺酸的酸存在的情况下，在如甲苯或苯的适当溶剂中、在回流温度下进行反应15分钟-6小时，得到R2代表氢或卤素且其余符号R1和Ar如对式I化合物所定义的式IV的双环化合物， 式IV的双环化合物可在60℃-90℃下、在适当的含有三乙基硅烷和三氟乙酸的溶剂中进一步反应4-12个小时，得到R2代表氢或卤素且其余符号R1和Ar如对式I化合物所定义的式I化合物。
还原性烷基化的详述方法更详细的描述如下，R1、R2和Ar如式I化合物所定义，除非有特别说明。
式III的羰基化合物也可以反应性衍生物形式存在；然而优选游离的醛或酮。
式III的反应性衍生物为如相应的酸式亚硫酸盐加合物或者尤其为式III化合物与醇类(如低级烷醇)的半缩醛、缩醛、半缩酮或缩酮；或者式III化合物与硫醇(如低级链烷硫化物)的硫缩醛或硫缩酮。
还原性烷基化优选在如醇类(如甲醇或乙醇)或醚类(如四氢呋喃的环醚类)的常规溶剂(有/无水)中，通过在催化剂(优选与载体物质(如碳)结合的铂或尤其是钯的贵金属催化剂或者如阮内镍的重金属催化剂)存在的情况下，在大气压下或0.1-10兆帕(MPa)压力下进行氢化作用，或者通过如硼氢化物(尤其是如氰基硼氢化钠的碱金属氰硼氢化物)的配位氢化物在适当优选如低级烷羧酸(尤其是乙酸或磺酸(如对甲苯磺酸))的相关弱酸存在的情况下进行还原作用。
保护基在式II或式III化合物中，如果一个或多个功能基团(如羧基、羟基、氨基或巯基)被保护或需要被保护，因为它们不参加反应，这些保护基团通常与可用于肽化合物、头孢菌素和青霉素的合成以及核酸衍生物和糖的合成中的相同。
在前体中可能存在保护基，保护基将保护相关的功能基团免于不必要的次级反应(如酰化、醚化、酯化、氧化、溶剂解以及类似反应)。这是保护基团的特征，即它们极易由溶剂解、还原、光解或由活性酶在如类似于生理条件的情形下脱除，而无不需要的次级反应，且它们在终产物中不存在。专家知道如何或能轻易地确定适于上下文提及的反应的保护基团。
在标准参考专著中记述了这种保护基对功能基团的保护作用、保护基本身以及它们的脱除反应，如J.F.W.McOmie，″Protective Groups inOrganic Chemistry″，Plenum Press，London和New York 1973，如T.W.Greene，″Protective Groups in Organic Synthesis″，Wiley，New York 1981，如″The Peptides″；第3卷(作者E.Gross和J.Meienhofer)，AcademicPress，伦敦和纽约1981，in″Methoden der organischen Chemie″(有机化学方法)，Houben Weyl，第4版，第15/I卷，Georg Thieme Verlag，Stuttgart1974，如H.-D.Jakubke和H.Jescheit，″Aminosuren，Peptide，Proteine″(氨基酸、肽和蛋白质)，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach，和Basel 1982，以及如Jochen Lehmann，″Chemie der KohlenhydrateMonosaccharide und Derivate″(碳水化合物单糖及其衍生物)，GeorgThieme Verlag，Stuttgart 1974。
附加步骤以公知的方法制备具有形成盐的基团的式I化合物的盐。通过用酸或适当的阴离子交换剂处理可以得到式I化合物的酸加成盐。具有两个酸分子的盐(例如式I化合物的二卤化物)可以转变为每个化合物具有一个酸分子的盐(例如一卤化物)；也可通过加热熔解或在高温(如从130-170℃)高度真空加热固体，使式I化合物的每个分子释放出一个酸分子。
盐通常可转变成游离的化合物，如通过用适当的碱(如碱金属碳酸盐、碱金属碳酸氢盐或碱金属氢氧化物，尤其碳酸钾或氢氧化钠)处理。
依照如下方法，使其中R2代表卤素、优选溴的式I的邻氨基苯甲酰胺进一步反应。
其中R2代表卤素的式I的邻氨基苯甲酰胺溶解在适当的芳香溶剂(如苯、甲苯或二甲苯)中并在90℃-150℃之间、优选氩气环境下与式VII的锡烷在适当的催化剂(优选四(三苯膦)钯(0))存在下、在适当的溶剂(如苯、甲苯或二甲苯)中反应12-36个小时， 其中R3为H或低级烷基。
所得到的其中R2代表炔基-C≡C-R3的式I化合物中可通过本领域已知的反应转化为对应的链烯基或烷基化合物。
例如，将其中R2代表炔基-C≡C-R3的式I化合物在大气压下、15℃-30℃之间经阮内镍催化在甲醇中进行氢化，得到其中R2代表C2-7链烯基的式I化合物。这种获得的R2代表C2-7链烯基的式I化合物可以在在大气压下、在15℃-30℃之间经5％的铂炭催化在甲醇中进一步氢化，得到其中R2代表C2-7烷基的式I化合物。
缩写DMF 二甲基甲酰胺EtOAc乙酸乙酯MS 质谱RT 室温TLC 薄层色谱如下实施例用于说明本发明并不限制本发明的范围。温度以摄氏度(℃)测定。反应于室温下发生，除非特别说明。
实施例参考实施例12-[[6-甲氧基-3-吡啶基]甲基]氨基-N-[4-溴-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(未要求保护)在25℃，将氰基硼氢化钠(8.80g，95％，133mmol)在30分钟内逐份地加入搅拌的乙酸(3.8mL)、6-甲氧基-3-吡啶甲醛(Fluka，Buchs，Switzerland；7.80g，57mmol)和2-氨基-N-(4-溴-3-三氟甲基苯基)苯甲酰胺(步骤1.2；13.65g，38mmol)的、甲醇(380mL)混合物中。将混合物搅拌16个小时。减压蒸发溶剂，得到的残余物用饱和的碳酸氢钠水溶液(500mL)处理并用二氯甲烷(3×150mL)萃取。干燥(Na2SO4)合并的萃取物，过滤并减压蒸发溶剂，得到粗产物，通过硅胶柱层析纯化，二氯甲烷中5％EtOAc的洗提液，经乙醚-己烷重结晶，得到浅褐色晶体的标题化合物，熔点101-103℃。
步骤1.12-硝基-N-(4-溴-3-三氟甲基苯基)苯甲酰胺在室温下，将EtOAc(240mL)中的3-氨基-6-溴三氟甲苯(Fluka，Buchs，Switzerland；24.0g，100mmol)溶液加入搅拌的氢氧化钠水溶液(110mL，1M)中。然后通过在30分钟内滴加2-硝基苯甲酰氯(Fluka，Buchs，Switzerland；14.5mL，110mmol)的EtOAc(150mL)溶液处理该搅拌的溶液。在室温下，将所得的混合物再搅拌30分钟。用EtOAc(3×100mL)萃取混合物，然后用盐酸(2×100mL，2M)、水(2×100mL)、饱和的碳酸氢钠水溶液(2×100mL)以及饱和的氯化钠溶液(1×100mL)依次洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤并减压蒸发溶剂，得到粗产物，经EtOAc-己烷重结晶纯化，得到浅褐色晶体的标题化合物，熔点157-158℃。
步骤1.22-硝基-N-(4-溴-3-三氟甲基苯基)苯甲酰胺将甲醇(1000mL)中的2-硝基-N-(4-溴-3-三氟甲基苯基)苯甲酰胺(中间体1a；32g，82mmol)溶液在21℃的大气压下、经阮内镍(6g)催化氢化。7个小时后吸收了计算量的氢。过滤混合物，减压蒸发溶剂，得到粗产物，经乙醚-己烷重结晶纯化，得到无色晶体的标题化合物，熔点142-144℃。
实施例22-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-溴-3-(三氟甲基)苯甲]苯甲酰胺通过类似于实施例1中所描述的方法并利用步骤1.2中的中间体和4-吡啶甲醛，制备标题化合物；熔点123-124℃。
实施例32-[4-吡啶基甲基]氨基-N-(4-溴苯基)苯甲酰胺通过类似于实施例1中所描述的方法并利用步骤3.2中的中间体和4-吡啶甲醛，制备标题化合物；熔点136-137℃。
步骤3.12-硝基-N-(4-溴苯基)苯甲酰胺与步骤1.1相似，用4-溴苯胺(Fluka，Buchs，Switzerland)制备标题化合物；熔点202-205℃。
步骤3.22-氨基-N-(4-溴苯基)苯甲酰胺与步骤1.2相似，用2-硝基-N-(4-溴苯基)苯甲酰胺(步骤3.1)，制备标题化合物；熔点139-144℃。
实施例42-[[3-[(甲基氨基)羰基]-苯基]甲基]氨基-N-[3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺通过类似于实施例1中所描述的方法并利用步骤4.2中的中间体和3-甲酰基-N-甲基-苯甲酰胺(根据WO 98/14449中所描述的方法制备)，制备标题化合物；熔点166-167℃。
步骤4.12-硝基-N-[3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺与步骤1.1相似，用3-(三氟甲基)苯甲酰胺(Aldrich，Buchs，Switzerland)制备标题化合物；熔点134-135℃。
步骤4.22-氨基-N-[(3-三氟甲基)苯基]苯甲酰胺与步骤1.2相似，用2-硝基-N-[(3-三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(步骤2.1)制备标题化合物；熔点132-133℃。
参考实施例52-[[6-甲氧基-3-吡啶基]甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(未要求保护)在25℃下，向干燥甲苯(200mL)中的2-[[6-甲氧基-3-吡啶基]甲基]氨基-N-[4-溴-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(实施例1；3.98g，8.3mmol)的搅拌溶液中吹入氩气20分钟。然后加入三丁基-1-丙炔基锡烷(4.1g，80％，9.96mmol)和四(三苯膦)钯(0)(260mg)，在100℃氩气环境下，于100℃加热获得的混合物17个小时。然后冷却混合物，用氢氧化钠水溶液(85mL，0.1M)处理并用空气吹洗2个小时。用EtOAc(3×100mL)萃取所获得的混合物。然后将有机相依次用水(2×40mL)和饱和的氯化钠水溶液(1×40mL)洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤，减压蒸发溶剂，得到粗产物，通过硅胶柱层析纯化，用己烷中33％EtOAc洗脱，经乙醚-己烷重结晶，得到暗黄色晶体的标题化合物；熔点123-124℃。
实施例62-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺通过类似于实施例5中所描述的方法并利用2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-溴-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(实施例2)制备标题化合物；熔点165-166℃。
实施例72-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)苯基]苯甲酰胺通过类似于实施例5中所描述的方法并利用2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-溴苯基]苯甲酰胺(实施例3)制备标题化合物；熔点147-155℃。
实施例82-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-[(Z)-1-丙烯基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺盐酸盐将溶于甲醇(6mL)中的2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(实施例6；0.13g，0.32mmol)溶液在22℃、大气压下经阮内镍(50mg)催化氢化。吸收氢7个小时。然后过滤混合物，减压蒸发溶剂，得到粗产物，通过硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷中50％EtOAc洗脱，得到油状产物。将油状物溶解于乙醇中，用EtOAc(2M)中的氯化氢溶液酸化并用乙醚稀释。将获得的沉淀物过滤、用乙醚洗涤、干燥并经乙醚-乙醇重结晶纯化，得到浅褐色固体的标题化合物。
实施例92-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺将溶于甲醇(25mL)中的2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-[(Z)-1-丙烯基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(实施例8；0.80g，1.75mmol)溶液在22℃、大气压下经铂炭(0.2g)催化氢化。12个小时后吸收了计算量的氢。然后过滤混合物，减压蒸发溶剂，得到粗产物，通过硅胶柱层析纯化，用EtOAc中20％二氯甲烷洗脱，经乙醚-己烷重结晶，得到无色晶体的标题化合物；熔点134-135℃。
实施例10N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-[(1-氧基-吡啶-4-基甲基)-氨基]-苯甲酰胺在N2环境下，将0.50g(1.2mMol)的rac.3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-(1-氧基-吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-喹唑啉-4-酮悬浮于冰冷的8ml 1，2-二氯乙烷中。加入0.47ml(3.0mMol)的三乙基硅烷，5分钟后加入0.56ml(7.2mMol)的三氟乙酸。在80℃下搅拌所获得的溶液7个小时，冷却到室温并用100ml的EtOAc稀释。然后用饱和的NaHCO3溶液和盐水洗涤两次。用EtOAc萃取水层两次，将有机相干燥(Na2SO4)并在真空中部分浓缩直到产物结晶。过滤并用EtOAc洗涤，得到标题化合物；熔点213-214℃。由柱层析(SiO2；EtOAc/MeOH 8∶2)由滤液中又得到部分产物。
步骤10.1rac.3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-(1-氧基-吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-喹唑啉基-4-酮用具有水分离装置的容器制备10.04g(31.9mMol)2-氨基-N-[4-氯-3-三氟甲基]苯基]-苯甲酰胺(制备方法参考WO 00/27820；中间体2f)的80ml甲苯悬浮液。加入3.93g(31.9mMol)的1-氧基-吡啶-4-甲醛和23mg的樟脑-10-磺酸。将混合物在120℃下加热1个小时。然后冷却到室温，过滤反应混合物，所得到的残余物用甲苯和乙醚洗涤，获得标题化合物；熔点261-262℃。
实施例11N-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-[(1-氧基-吡啶-4-基甲基)-氨基]-苯甲酰胺在N2环境下，将1.50g(3.7mMol)的rac.3-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-(1-氧基-吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-喹唑啉-4-酮悬浮于冰冷的25ml二氯乙烷中。加入0.83ml(5.2mMol)的三乙基硅烷，然后加入1.79ml(23mMol)的三氟乙酸。在室温下搅拌所获得的溶液72个小时，再加入0.42ml的三乙基硅烷。在室温下总共138个小时后，用300ml EtOAc和300ml饱和的NaHCO3溶液稀释。将水层分开并用EtOAc萃取两次。将有机相用饱和的NaHCO3溶液和盐水洗涤两次、干燥(Na2SO4)并浓缩。在甲醇中溶解残余物，加入SiO2并浓缩混合物。将获得的粉末放置于柱层析(SiO2)中。用丙酮/EtOAc3∶1洗脱，洗涤得到标题化合物；熔点182-184℃。
步骤11.1rac.3-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-(1-氧基-吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-喹唑啉-4-酮类似于步骤10.1，将溶于20ml甲苯中的2.42g(8.1mMol)的2-氨基-N-[4-氟-3-三氟甲基]苯基]-苯甲酰胺(制备方法参考WO 00/27820；中间体2h)和980mg(7.96mMol)1-氧基-吡啶-4-甲醛以及5mg的樟脑-10-磺酸缩合，得到标题化合物；熔点257-258℃。
实施例12软胶囊5000个软明胶胶囊制备如下，每个胶囊中含有0.05g前述实施例中提及的任意一种式I化合物作为活性成分)组份活性成分250gLauroglycol 2升制备方法将研磨成粉的活性成分悬浮于Lauroglykol(丙二醇月桂酸酯，GattefosséS.A.，Saint Priest，France)中并在湿式粉碎机中磨碎，得到1-3μm大小的微粒。用胶囊填充机将0.419g的各份混合物装入软胶囊中。
权利要求
1.式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或其互变异构体，或者这些邻氨基苯甲酰胺、它们的N-氧化物或它们的互变异构体的盐 其中Ar由亚式Ia代表 其中Ra代表H或低级烷基，且R1代表H或全氟代的低级烷基，且R2代表H、卤素、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或低级炔基；或者Ar由亚式Ib代表，且 R1代表全氟代的低级烷基，且R2代表溴、碘、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基，或者R1代表H，且R2代表氟、溴、碘、乙基、C5-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基。
2.根据权利要求1的式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或互变异构体或者这些邻氨基苯甲酰胺、它们的N-氧化物或它们的互变异构体的盐，其中Ar由亚式Ia代表，其中Ra代表H或低级烷基，R1代表H或三氟甲基，且R2代表H、卤素、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或低级炔基；或Ar由亚式Ib代表，且R1代表三氟甲基，且R2代表溴、碘、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基，或者R1代表H，且R2代表氟、溴、碘、乙基、C5-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基。
3.根据权利要求1或2的式I的邻氨基苯甲酰胺或其互变异构体，或者这些邻氨基苯甲酰胺或它们的互变异构体的盐，其中Ar由亚式Ia代表，其中Ra代表H或低级烷基，R1代表H或三氟甲基，且R2代表H、卤素、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或低级炔基。
4.根据权利要求1或2的式I的邻氨基苯甲酰胺及其N-氧化物或互变异构体或者这些邻氨基苯甲酰胺、它们的N-氧化物或它们的互变异构体的盐，其中Ar由亚式Ib代表，R1代表三氟甲基，且R2代表溴、碘、C2-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基，或者R1代表H，且R2代表氟、溴、碘、乙基、C5-C7烷基、C2-C7链烯基或者低级炔基。
5.根据权利要求4的式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或互变异构体或者这些邻氨基苯甲酰胺、它们的N-氧化物或它们的互变异构体的盐，其中Ar由亚式Ib代表，R1代表三氟甲基，且R2代表溴、丙基、丙烯基或丙炔基，或R1代表H，且R2代表氟、溴、丙烯基或丙炔基。
6.根据权利要求4的式I的邻氨基苯甲酰胺或其互变异构体，或者这些邻氨基苯甲酰胺或它们的互变异构体的盐，其中Ar由亚式Ib的N-氧化物代表，R1代表三氟甲基，R2代表溴、丙基、丙烯基或丙炔基。
7.根据权利要求1的式I的邻氨基苯甲酰胺，选自下列化合物2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-溴-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-(4-溴苯基)苯甲酰胺，2-[[3-[(甲基氨基)羰基]-苯基]甲基]氨基-N-[3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙炔基)苯基]苯甲酰胺，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-[(Z)-1-丙烯基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺盐酸盐，2-[4-吡啶基甲基]氨基-N-[4-(1-丙基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺，N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-[(1-氧基-吡啶-4-基甲基)-氨基]-苯甲酰胺，及N-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-[(1-氧基-吡啶-4-基甲基)-氨基]-苯甲酰胺，或其N-氧化物或互变异构体或者这些邻氨基苯甲酰胺、它们的N-氧化物或它们的互变异构体的盐。
8.根据权利要求1-7中任意一项式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或互变异构体，或者这些化合物的药学上可接受的盐，用于人或动物的治疗方法中。
9.式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或互变异构体或者这些化合物的药学上可接受的盐在制备用于治疗瘤形成性疾病的药物中的用途，在式I中，各基团和符号的含义如权利要求1-7中任一项所定义。
10.式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或互变异构体或者这些化合物的药学上可接受的盐在制备用于治疗视网膜病变或年龄相关性黄斑变性的药物中的用途，在式I中，各基团和符号的含义如权利要求1-7中任一项所定义。
11.治疗对受体酪氨酸激酶活性的抑制作用有反应的瘤形成性疾病的方法，该方法包括给予需要此治疗的温血动物治疗所述疾病有效量的式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或互变异构体或者这些邻氨基苯甲酰胺、其N-氧化物或其互变异构体的药学上可接受的盐，在式I中，各基团和符号的含义如权利要求1-7中任一项所定义。
12.药物制剂，该制剂包括根据权利要求1-7中任一项的式I的邻氨基苯甲酰胺或其N-氧化物或互变异构体或者这些化合物的药学上可接受的盐或者其水合物或溶剂化物以及至少一种药学上可接受的载体。
13.制备式I的邻氨基苯甲酰胺的方法， 其中R2代表氢或卤素且其余的符号R1和Ar与权利要求1中定义相同，其中使式II化合物， 其中R1和R2如上式I所定义的，与式III的羰基化合物在还原剂存在的情况下反应 其中Ar如上对式I化合物所定义的；其中式II和III的原料化合物可以以功能基团被保护的形式存在，如必要的话，和/或以盐的形式存在，前提是存在形成盐的基团并且可以以盐的形式发生反应；脱除在式I化合物的被保护衍生物中存在的任何保护基；以及，如果需要，将得到的式I化合物转换成另一个式I化合物或其N-氧化物，将游离的式I化合物转换成盐，将得到的式I化合物的盐转换成游离的化合物或其他的盐，和/或将异构的式I化合物的混合物分离成单独的异构体。
全文摘要
本发明涉及式I的邻氨基苯甲酰胺衍生物及其N－氧化物和互变异构体以及这些邻氨基苯甲酰胺、它们的N－氧化物和它们的互变异构体的盐；它们的制备方法；它们在人或动物的治疗(尤其是治疗如肿瘤的瘤形成性疾病、视网膜病变或年龄相关性的黄斑变性)中单独或与一种或多种药学上的活性化合物联合的应用；在动物中治疗这些疾病的方法；以及这些化合物(单独或与一种或多种药学上的活性化合物联合)在制备治疗瘤形成性疾病、视网膜病变或年龄相关性的黄斑变性的药物中的用途，其中Ar由亚式I
文档编号A61P35/02GK1578768SQ02821430
公开日2005年2月9日 申请日期2002年11月7日 优先权日2001年11月8日
发明者G·博尔德, P·菲雷, P·W·曼利 申请人:诺瓦提斯公司