专利名称：用于治疗免疫炎性疾病的联合疗法的制作方法
技术领域：
本发明涉及免疫炎性疾病的治疗。
背景技术：
免疫炎性疾病(例如类风湿性关节炎、银屑病、溃疡性结肠炎、局限性回肠炎、中风诱发的脑细胞死亡、关节强硬性脊椎炎、纤维性肌痛(fibromyalgia)、以及炎性皮肤病、哮喘、多发性硬化、I型糖尿病、系统性红斑狼疮、硬皮病、全身性硬皮病和斯耶格伦综合征(Sjgren′s syndrome))的特征在于免疫系统的调节异常以及导致对健康组织损害的机体防御的不适当激活。
全世界1％的人罹患类风湿性关节炎(RA)——一种导致关节严重肿胀、疼痛且最后变形及破坏的残酷进行性疾病。根据关节炎基金会(the Arthritis Foundation)所说，类风湿性关节炎现在影响超过二百万的美国人，在他们当中，被折磨的妇女大概是三倍多。类风湿性关节炎的特征在于关节内衬和/或其它内部器官的炎症，以及存在数目升高的淋巴细胞和高水平的促炎细胞因子。
类风湿性关节炎的诊断通常包括(i)关节晨僵至少持续1小时，稍后好转，(ii)同时具有软组织肿胀或液体的三个或更多个关节区的关节炎，(iii)至少一个手关节的关节炎，(iv)对称性关节炎，即同时牵涉身体两侧的同样关节区，(v)类风湿性小结，(vi)异常的血清类风湿性因子，以及(vii)后前位手和手腕放射照片的典型类风湿性关节炎的X射线照相的变化，这些包括位于所涉及关节或极明显邻近所涉及关节的侵蚀或明确的骨脱钙作用。如果有这七条标准中的至少四条，且(i)至(iv)必须已存在至少六周，则患者诊断为患有RA。(美国风湿病学学会(American College of Rheumatology)，1987，类风湿性关节炎的急性关节炎的分类标准，根据Arnett FC等，Arthritis Rheum.1988；31315-324)。对于RA的诊断，疼痛本身则不是必需的。
RA的治疗一般包括针对消除关节炎临床表现的消炎策略，所述的关节炎临床表现包括滑液增稠、关节触痛以及关节僵硬的关节炎临床表现。用来对付这些体征与症状的药物通常包括(i)非类固醇抗炎药(NSAID；例如地托洛芬(detoprofen)、双氯芬酸、二氟尼柳、依托度酸、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、甲氯芬那酸(meclofenameate)、甲芬那酸、美洛昔康、萘丁美酮、萘普生钠、噁丙嗪、吡罗昔康、舒林酸、托美丁、塞来考昔、罗非考昔、阿司匹林、水杨酸胆碱、双水杨酯(salsalte)、以及水杨酸钠和水杨酸镁)——这些药可能适用于轻度RA，但好像不改变所述疾病的长期进程；以及(ii)类固醇抗炎药(例如可的松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙、泼尼松、曲安西龙)。
RA的治疗也可以包括针对限制由关节炎症导致的关节长期损害与变形的策略。这样的治疗通常被称作DMARD，即疾病调修抗风湿药(例如环孢菌素、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、来氟米特、环磷酰胺、羟氯喹、柳氮磺吡啶、D-青霉胺、二甲胺四环素、金、依那西普(可溶性TNF受体)以及英夫利昔单抗(嵌合抗-TNF单克隆抗体))。
对于免疫炎性疾病的治疗，需要开发新的方案。
发明概述我们已经发现，四取代的嘧啶并嘧啶例如双嘧达莫(也称为2，6-二(二乙醇氨基)-4，8-二哌啶基嘧啶并(5，4-d)嘧啶)与皮质类固醇例如氟氢可的松(即9-α-氟-11-β，17-α，21-三羟基-4-孕烯-3，20-二酮乙酸酯)或泼尼松龙(也称为1-脱氢皮质醇、1-脱氢氢化可的松、1，4-孕甾二烯(pregnadiene)-11-β，17-α，21-三醇-3，20-二酮、以及11-β，17-α，21-三羟基-1，4-孕甾二烯-3，20-二酮)的组合，导致显著抑制外周血单核细胞(PBMC)中诱导的TNFα水平。
因此，本发明的特征为一种治疗免疫炎性疾病患者或治疗处于发生免疫炎性疾病危险之中的患者的方法。该方法包括给予(i)一种皮质类固醇和(ii)一种具有下面式(I)的、四取代的嘧啶并嘧啶， 其中每个Z和每个Z′独立地为N、O、C、 或 如果Z或Z′为O或 则p＝1，如果Z或Z′为N、 或 则p＝2，且如果Z或Z′为C，则p＝3。在式(I)中，每个R1独立地为X、OH、N-烷基(其中所述烷基具有1-20个碳原子)、具有1-20个碳原子的支链或直链烷基、或者杂环基。另一方面，当p＞1时，共用Z或Z′原子的两个R1基团可以相互结合为-(CY2)k-，其中k为4与6之间的整数，包括4和6在内。每个X独立地为Y、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1-5OY、结构CnY2n-1的取代或未取代的环烷，其中n＝3-7(包括3和7在内)。每个Y独立地为H、F、Cl、Br或I。在一个实施方案中，每个Z是相同的部分，每个Z′是相同的部分，而Z和Z′是不同的部分。所述的两种化合物按当与第二种所述化合物联合时足以治疗或预防免疫炎性疾病的量分别给予。
在一个相关方面，本发明的特征为一种抑制有需要的患者体内产生一种或多种促炎细胞因子的方法，所述方法即通过给予(i)一种皮质类固醇和(ii)一种具有式(I)的、四取代的嘧啶并嘧啶。
在特别有用的四取代的嘧啶并嘧啶中，R1是取代或未取代的呋喃、嘌呤或嘧啶，或是(CH2CH2OY)、(CH2CH(OH)CH2OY)、(HCH2CH(OH)CX3)、((CH2)nOY)(其中n＝2-5)、 或 在其它有用的四取代的嘧啶并嘧啶中，每个Z为N，且两个结合的R1基团的组合为-(CH2)5-；而每个Z′为N，且每个结合的R1基团是-CH2CH2OH。
所述四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇可以是存在于包含药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药用组合物中的；且按足以充分抑制TNFα水平从而对患者产生治疗好处的剂量和次数，来给予四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇。可以在彼此的14天内(例如，在彼此10天内、在彼此5天内、彼此的24小时或彼此的1小时，乃至同时)，给予所述四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇。每种化合物的给予可出现例如每天1至5次，或者按需给予，以减轻症状。
因此，本发明的特征也在于包含一种或多种四取代的嘧啶并嘧啶和一种或多种皮质类固醇的药用组合物、药物包装以及药盒。本发明的方法和组合物(药用组合物和药物包装)可以以四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇的较高等级组合为特色。具体地说，可以使一种、两种、三种或更多种四取代的嘧啶并嘧啶与一种、两种、三种或更多种皮质类固醇混合。在优选的实施方案中，美国食品及药物管理局(USFDA)批准所述四取代的嘧啶并嘧啶、所述皮质类固醇或它们两者用于给予人类。
示范性的、在本发明方法和组合物中有用的四取代的嘧啶并嘧啶包括例如2，6-二取代的4，8-二苄基氨基嘧啶并[5，4-d]嘧啶。特别有用的四取代的嘧啶并嘧啶包括双嘧达莫(也称为2，6-二(二乙醇氨基)-4，8-二哌啶基嘧啶并(5，4-d)嘧啶)、莫哌达莫(mopidamole)、单乙酸双嘧达莫、NU3026(2，6-二-(2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-甲氧基-4，8-二哌啶基嘧啶并嘧啶)、NU3059(2，6-二-(2，3-二甲氧基丙氧基)-4，8-二哌啶基嘧啶并嘧啶)、NU3060(2，6-二[N，N-二(2-甲氧基)乙基]-4，6-二哌啶基嘧啶并嘧啶)和NU3076(2，6-二(二乙醇氨基)-4，8-二-4-甲氧基苄基氨基嘧啶并嘧啶)。
已经用皮质类固醇氟氢可的松(即9-α-氟-11-β，17-α，21-三羟基-4-孕烯-3，20-二酮乙酸酯)和泼尼松龙(也称为1-脱氢皮质醇、1-脱氢氢化可的松、1，4-孕甾二烯-11-β，17-α，21-三醇-3，20-二酮、以及11-β，17-α，21-三羟基-1，4-孕甾二烯-3，20-二酮)举例说明了本文描述的发明；然而，技术人员将会认识到也可以与本发明方法和组合物中的四取代的嘧啶并嘧啶联合在一起地使用这些皮质类固醇的结构和功能类似物。可以根据皮质类固醇在皮质类固醇家族中所共享的结构特征和明显的作用机制，来确定其它有用的皮质类固醇。
可以以相同或不同的药物制剂形式，给予所述四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇。可以通过相同或不同的途径，给予药用组合物或药物包装的成分；且包括口服给药、直肠给药、静脉内给药、肌内给药、皮下给药、关节内给药、吸入给药、局部给药或透皮给药、阴道给药以及眼部给药。
可以逐一地确定所述四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇的剂量；然而，一般以大约0.5-800mg/天、18-600mg/天或50-400mg/天的量，将四取代的嘧啶并嘧啶给予病人。一般以大约0.1-1500mg/天、0.5-30mg/天或0.5-10mg/天的量，给予皮质类固醇。优选低剂量的皮质类固醇(例如，10mg/天或更低剂量的泼尼松龙或其同等物)。可以以一剂、二剂、三剂、四剂或更多剂的方式，给予四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇的每日总剂量。没有必要按同样数目的日剂量来给予所述四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇。此外，没有必要每天给予或通过同一给药途径给予所述四取代的嘧啶并嘧啶和/或皮质类固醇。例如，可以通过每隔一天静脉内注射来给予四取代的嘧啶并嘧啶，而通过每天两次的局部应用来给予皮质类固醇。因此，考虑到以不同的组合物形式给药，故以适合于实现所需治疗方案的形式和剂量，来制备药用制剂、药物包装和药盒。
使用本发明的方法和组合物治疗的疾病或障碍是免疫炎性疾病，包括例如类风湿性关节炎、银屑病、溃疡性结肠炎、局限性回肠炎、中风诱发的脑细胞死亡、关节强硬性脊椎炎、纤维性肌痛、哮喘、多发性硬化、I型糖尿病、系统性红斑狼疮、硬皮病、全身性硬皮病、炎性皮肤病或斯耶格伦综合征。
本发明的特征也在于一种鉴定可用于治疗免疫炎性疾病患者的化合物的方法。该方法包括下述步骤使免疫细胞在体外与(i)一种选自式(I)四取代的嘧啶并嘧啶的免疫调节化合物或皮质类固醇接触，以及使免疫细胞在体外与(ii)一种候选化合物接触；并确定(a)和接触了免疫调节化合物但没与候选化合物接触的免疫细胞有关的免疫应答是否被调节，且确定(b)和接触了候选化合物但没与免疫调节化合物接触的免疫细胞有关的免疫应答是否被调节。如果候选化合物与一种免疫调节化合物联合时调节免疫应答达到大于对照的程度，则对于治疗免疫炎性疾病患者来说，候选化合物是潜在有用的化合物。
本发明中有用的化合物包括本文描述的、在任何其药学上可接受形式中的那些化合物；不仅包括其异构体例如非对映体和对映体、盐、溶剂化物和多晶型物，而且包括本文描述化合物的外消旋混合物。
所谓“杂环”指的是环中一个或更多个环原子为除碳以外之原子的任何环状分子。优选的杂环由一个或两个环结构组成。优选的杂原子为N、O和S。杂环中的每个环结构由3-10个原子组成，优选由4-8个原子组成，且最优选由5-7个原子组成。只要杂原子在至少一个环结构中存在，则每个环结构不需要都含有一个杂原子。优选的杂环例如是β-内酰胺、呋喃、四氢呋喃、吡咯、吡咯烷、噻吩、四氢噻吩、噁唑、咪唑烷、吲哚、鸟嘌呤和吩噻嗪。
所谓“治疗”指的是为了治疗或预防炎性疾病而给予或医嘱一种药用组合物。
所谓“患者”指的是任何动物(例如人)。
术语“免疫炎性疾病”包含各种各样的病症，包括自身免疫病。免疫炎性疾病通过一个炎症性过程而导致健康组织的破坏。免疫炎性疾病的实例包括类风湿性关节炎、银屑病、溃疡性结肠炎、局限性回肠炎、中风诱发的脑细胞死亡、关节强硬性脊椎炎、纤维性肌痛、哮喘、多发性硬化、I型糖尿病、系统性红斑狼疮、硬皮病、全身性硬皮病、炎性皮肤病、重症肌无力和斯耶格伦综合征。
所谓“皮质类固醇”指的是任何天然存在的或合成的、可来源于胆固醇的类固醇激素，且其特征在于氢化环戊烷多氢菲环系。天然存在的皮质类固醇通常是由肾上腺皮质产生的。可以卤化合成的皮质类固醇。对于活性所需的官能团包括在Δ4的一个双键、一个C3酮和一个C20酮。皮质类固醇可以有糖皮质激素和/或盐皮质激素的活性。在优选的实施方案中，所述皮质类固醇或者是氟氢可的松，或者是泼尼松龙。
示范性的皮质类固醇包括阿尔孕酮、6-α-氟代泼尼松龙、6-α-甲泼尼龙、21-醋酸6-α-甲泼尼龙、6-α-甲泼尼龙21-半琥珀酸钠盐、21-乙酸17-丁酸6-α，9-α-二氟泼尼松龙、安西法尔、倍氯米松、二丙酸倍氯米松、二丙酸倍氯米松一水合物、6-β-羟基皮质醇、倍他米松、17-戊酸倍他米松、布地奈德、氯倍他索、丙酸氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、新戊酸氯可托龙、可的松、醋酸可的松、可托多松、地夫可特、21-脱氧皮质醇、地泼罗酮、地西龙、地奈德、去羟米松、地塞米松、21-醋酸地塞米松、二氯松、二氟拉松、双醋二氟拉松、二氟可龙、多倍他索、氟氢可的松、氟米松、新戊酸氟米松、氟莫奈德、氟尼缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、9-氟代可的松、氟羟基雄甾烯二酮、氟米龙、醋酸氟米龙、氟甲睾酮、氟泼尼定(flupredidene)、氟泼尼龙、氟氢缩松、福莫可他、哈西奈德、卤米松、卤泼尼松、hyrcanoside、氢化可的松、醋酸氢可的松、丁酸氢化可的松、环戊丙酸氢化可的松、氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠、氢化可的松probutate、戊酸氢化可的松、6-羟基地塞米松、异氟泼尼龙、醋酸异氟泼尼龙、异泼尼定、甲氯松、甲泼尼龙、醋酸甲泼尼龙、琥钠甲泼尼龙、帕拉米松、醋酸帕拉米松、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙间位磺基苯甲酸酯(prednisolone metasulphobenzoate)、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松龙叔丁乙酯、21-游离半琥珀酸泼尼松龙、21-醋酸泼尼松龙、21-(β-D-葡糖苷酸)泼尼松龙、泼尼松、泼尼立定、普西奈德、曲洛奈德、曲安西龙、曲安奈德、21-棕榈酸曲安奈德、双醋曲安西龙、己曲安奈德和渥曼青霉素。所希望的是，该皮质类固醇为氟氢可的松或泼尼松龙。
所谓“有效量”指的是在本发明的组合方面治疗或预防免疫炎性疾病所必需的化合物量。用于治疗性治疗由炎性疾病引起的病症或者用于治疗性治疗对炎性疾病产生影响的病症而用来实施本发明的活性化合物的有效量随给药方式和患者的年龄、体重以及一般健康状况等因素而变化。归根结底，主治医师或兽医将决定合适的量与给药方案。这样的量称之为有效量。
所谓术语“抑制细胞因子之量”指的是，为了预防性或治疗性治疗由于过量的或不受调节的促炎细胞因子产生而加重或导致的免疫炎性疾病，当将其给予患者时，将导致体内促炎细胞因子的存量减少或水平下降的所述组合之量。
根据下面的详细描述，以及根据权利要求书，本发明的其它特征和优点则将是显而易见的。
详细描述我们已经发现，四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇的组合明显地具有针对受刺激白细胞的显著TNFα抑制活性。双嘧达莫和氟氢可的松的组合，以及双嘧达莫和泼尼松龙的组合，是特别有效的。因此，四取代的嘧啶并嘧啶和皮质类固醇的组合对治疗免疫炎性疾病是有用的。
双嘧达莫双嘧达莫(2，6-二(二乙醇氨基)-4，8-二哌啶基嘧啶并(5，4-d)嘧啶)是一种被用作血小板抑制剂的四取代的嘧啶并嘧啶，所述血小板抑制剂即例如在心瓣膜外科手术后防止血凝块形成以及减少与凝块疾病有关的濒死状态包括心肌梗死和脑梗死的血小板抑制剂。通常，以大约75-200mg的量，每日二次、每日三次或每日四次地或者通过单独给予双嘧达莫或者通过与阿司匹林联合一起地给予双嘧达莫，来实现抗凝治疗(预防或者治疗)。
四取代的嘧啶并嘧啶在本发明的方法与组合物方面，四取代的嘧啶并嘧啶是能替代双嘧达莫的结构类似物。四取代的嘧啶并嘧啶具有下面的通用结构 其中每个Z和每个Z′独立地为N、O、C、 或 如果Z或Z′为O或 则p＝1，如果Z或Z′为N、 或 则p＝2，且如果Z或Z′为C，则p＝3。每个R1独立地为X、OH、N-烷基、具有1-20个碳原子的支链或直链烷基、杂环基。另一方面，当p＞1时，共用Z或Z′原子的两个R1基团可以相互结合为-(CY2)k-，其中k为4与6之间的整数，包括4和6在内。每个X独立地为Y、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1-5OY、结构CnY2n-1的取代或未取代的环烷，其中n＝3-7，包括3和7在内。
每个Y独立地为H、F、Cl、Br或I。
在特别有用的四取代的嘧啶并嘧啶中，R1是取代或未取代的呋喃、嘌呤或嘧啶，或是(CH2CH2OY)、(CH2CH(OH)CH2OY)、(HCH2CH(OH)CX3)、((CH2)nOY)(其中n＝2-5)、 或 在其它的四取代的嘧啶并嘧啶中，每个Z为N，且两个结合的R1基团的组合为-(CH2)5-；而每个Z′为N，且每个结合的R1基团是-CH2CH2OH。
示范性的四取代的嘧啶并嘧啶是2，6-二取代的4，8-二苄基氨基嘧啶并[5，4-d]嘧啶；包括例如莫哌达莫、单乙酸双嘧达莫、NU3026(2，6-二-(2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-甲氧基-4，8-二哌啶基嘧啶并嘧啶)、NU3059(2，6-二-(2，3-二甲氧基丙氧基)-4，8-二哌啶基嘧啶并嘧啶))、NU3060(2，6-二[N，N-二(2-甲氧基)乙基]-4，6-二哌啶基嘧啶并嘧啶)和NU3076(2，6-二(二乙醇氨基)-4，8-二-4-甲氧基苄基氨基嘧啶并嘧啶)(参见例如Curtin等，Br.J.Cancer 801738-1746，1999)。
治疗可以单独地或与另一种治疗联合在一起地实施根据本发明的联合疗法，且可以在家里、在医生的办公室、在诊所、在医院的门诊部或在医院提供所述联合疗法。通常在医院开始治疗，以便医生能仔细观察治疗的效果而做出任何必要的调整。所述联合疗法的持续时间取决于所治疗免疫炎性疾病的类型、患者的年龄与状态、患者之病的病期和类型以及患者对治疗的反应如何。另外，有发生免疫炎性疾病的较大风险的人(例如遗传上易患免疫炎性疾病的人或先前患有免疫炎性疾病的人)，可以接受预防性治疗，以抑制或延迟炎症反应。
可以独立地控制所述组合物中每种组分的给药剂量、次数和方式。例如，可以每天三次口服给予一种化合物，却可以每天一次肌内给予第二种化合物。可以以断断续续的、包括休息期的长时期方式，给予联合疗法；以便患者的机体有从任何还未预见到的副作用中恢复的机会。也可以将所述化合物配制在一起，以致于一次给药则给予两种化合物。
药用组合物的配制所述组合中每种化合物的给予，则可以通过任何产生该化合物的抗炎浓度的合适方式，所述抗炎浓度即在该化合物到达靶部位时的、联合另一组分的抗炎浓度。在任何适宜的载体物质中，可以包含任何适当量的所述化合物，且一般含量为所述组合物总重量的1-95％(重量)。所述组合物可以为适合于口服、胃肠外(例如静脉内、肌内)、直肠、皮肤、鼻、阴道、吸入剂、透皮(贴剂)或眼部给药途径的剂型。因此，所述组合物可以呈例如片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒体、混悬剂、乳剂、溶液剂、包括水凝胶的凝胶剂、糊剂、软膏剂、乳膏剂、硬膏剂、兽用顿服药、渗透递药装置、栓剂、灌肠剂、注射剂、植入物、喷雾剂或气雾剂的形式。可以按照常规制药实践来配制所述药用组合物(参见例如Remington《药剂学的科学与实践》(The Science and Practice of Pharmacy)(第20版)，A.R.Gennaro编辑，Lippincott Williams & Wilkins，2000以及《制药技术百科全书》(Encyclopedia of Pharmaceutical Technology)，J.Swarbrick和J.C.Boylan编辑，1988-1999，Marcel Dekker，New York)。
可以配制按照本发明的、一给药就立即充分释放活性化合物或在给药后任一预定时间或时期释放活性化合物的药用组合物。后者类型的组合物通常被称为控释制剂；它们包括(i)在一段持续的时期期间在体内产生大体上恒定的药物浓度的制剂，(ii)在预定的延迟时间之后于一段持续的时期期间在体内产生大体上恒定的药物浓度的制剂，(iii)在预定时期期间通过在体内保持相对恒定有效的药物水平来维持药物作用从而相伴地使与药物有效物质的血浆水平波动(动力学的锯齿图形)有关的不良副作用减到最小限度的制剂，(iv)通过例如控释组合物的邻近患病组织或器官的或者在病患病组织或器官中的间隙放置而使药物作用限于局部的制剂，以及(v)通过用载体或递送药物至特定靶细胞类的化学衍生物来使药物作用定向的制剂。
在所述化合物单独具有或在组合方面具有下述特性的情况下，以控释制剂形式给予化合物是特别优选的，所述下述特性即(i)窄治疗指数(即导致有害副作用或中毒反应的血浆浓度与产生治疗作用的血浆浓度之间的差异小，通常，把治疗指数TI定义为半致死剂量(LD50)与半有效剂量(ED50)之比)；(ii)在胃肠道中的窄吸收窗；或(iii)很短的生物学半寿期，以致于为了维持治疗水平的血浆浓度，需要在一天期间频繁给药。
为了获得控释过程中上述化合物的释放速率大于代谢速率的控释，可以采取许多策略中的任一种。在一个实施例中，通过适当地选择不同的制剂参数和成分(包括例如控释组合物和包衣的不同类型)，而获得控释。因此，用合适的赋形剂把药物配制到一给药就以控释方式释放该药物的药用组合物中去。实例包括单个或多个单位的片剂或胶囊组合物、油溶液剂、混悬剂、乳剂、微囊剂、微球体、纳米粒、贴剂和脂质体。
口服用固体剂型口服用制剂包括在与药学上可接受的无毒赋形剂的混合物中含有有效成分的片剂。这些赋形剂例如可以是惰性稀释剂或填充剂(例如蔗糖、山梨糖醇、糖、甘露糖醇、微晶纤维素、包括马铃薯淀粉的淀粉、碳酸钙、氯化钠、乳糖、磷酸钙、硫酸钙或磷酸钠)、颗粒剂和崩解剂(例如包括微晶纤维素的纤维素衍生物、包括马铃薯淀粉的淀粉、交联羧甲基纤维素钠、藻酸盐或藻酸)、粘合剂(例如蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、阿拉伯胶、藻酸、藻酸钠、明胶、淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、硅酸镁铝、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇)以及润滑剂、助流剂和抗胶粘剂(例如硬脂酸镁、硬脂酸锌、硬脂酸、硅石、氢化植物油或滑石粉)。药学上可接受的其它赋形剂可以是着色剂、矫味剂、增塑剂、湿润剂、缓冲剂等等。
片剂可以是未包衣的，或者可以用已知的技术将它们包衣；从而可任选地延迟在胃肠道中的崩解和吸收，且因此在较长期间内提供持续的作用。为了以预定的方式释放活性药物(例如为了得到一种控释制剂)，可以采用包衣；或者可以采用包衣，从而直到通过胃后才释放活性药物(肠溶包衣)。所述包衣可以是糖包衣、薄膜包衣(例如基于羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、丙烯酸酯共聚物、聚乙二醇和/或聚乙烯吡咯烷酮)或肠溶包衣(例如基于甲基丙烯酸共聚物、醋酞纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、醋酸-琥珀酸羟丙基甲基纤维素、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、虫胶和/或乙基纤维素)。此外，可以使用时间延迟材料，例如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯等。
所述固体片剂组合物可以包括适合于保护所述组合物避免不想的化学变化(例如在释放所述活性药物之前发生的化学降解)的包衣剂。所述包衣剂可以以Encyclopedia of Pharmaceutical Technology(参见上文)中描述的相似方法包裹在所述固体剂型表面。
可以将这两种药物在片剂中混合在一起，或者它们可以是独立的。在一个实例中，在片剂的里层包含第一种药物，而第二种药物位于所述片剂的外层，致使所述第二种药物的绝大部分在所述第一种药物释放之前释放。
口服用制剂也可以为咀嚼片剂，或者为硬明胶胶囊剂(其中将有效成分与惰性固体稀释剂(例如马铃薯淀粉、乳糖、微晶纤维素、碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合)或软明胶胶囊剂(其中将有效成分与水溶性或油溶性介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合)。采用以上在片剂和胶囊剂中提及的成分，以常规方式，使用例如混合器、流化床装置或喷雾干燥设备，可以制备散剂和颗粒剂控释口服剂型可以例如构建口服用的控释组合物，从而通过控制活性药物的溶出和/或扩散来释放活性药物。
溶出或扩散受控型释放，可以通过对化合物的片剂、胶囊剂、丸剂或颗粒剂制剂进行适当包衣，或者通过将所述化合物掺入适当的基质中来达到。控释包衣可包括一种或多种上述的包衣材料和/或例如虫胶、蜂蜡、glycowax、蓖麻蜡、巴西棕榈蜡、硬脂醇、一硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、棕榈酰硬脂酸甘油酯、乙基纤维素、丙烯酸树脂、dl-聚乳酸、醋酸-丁酸纤维素、聚氯乙烯、聚乙酸乙烯酯、乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯、2-羟基甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸水凝胶、1，3-丁二醇、甲基丙烯酸乙二醇酯和/或聚乙二醇。在控释基质制剂中，基质材料也可包括例如水合甲基纤维素、巴西棕榈蜡以及硬脂醇、卡波普934、硅氧烷、三硬脂酸甘油酯、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲酯、聚氯乙烯、聚乙二醇和/或卤代含氟烃。
含有要求保护的组合中一种或多种化合物的控释组合物，也可以为漂浮型(buoyant)片剂或胶囊剂的形式(即口服给药时漂浮在胃内容物顶部一段时间的片剂或胶囊剂)。所述化合物的漂浮型片剂制剂可以通过将药物的混合物与赋形剂和20-75％w/w氢化胶体如羟乙基纤维素、羟丙基纤维素或羟丙基甲基纤维素一起制粒来制备。然后将所获得的颗粒压制成片剂。在与胃液接触时，所述片剂在其周围形成基本上不透水的凝胶屏障。这种凝胶屏障参与保持密度低于1，从而使片剂保持在胃液中漂浮。
口服用液体剂适于通过添加水而制备含水混悬剂的散剂、可分散散剂或颗粒剂，是口服用的便利剂型。作为混悬剂的制剂提供了与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合在一起的有效成分。适宜的分散剂或润湿剂例如是天然存在的磷脂(例如卵磷脂或环氧乙烷与脂肪酸的缩合产物、长链脂肪醇或由脂肪酸衍生的部分酯)和己糖醇或脱水己糖醇(如聚氧乙烯硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨醇一油酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇一油酸酯等)。合适的悬浮剂例如是羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、藻酸钠等。
胃肠外组合物药用组合物也可通过以含有方便的药学上可接受的无毒载体和辅助剂的剂型、制剂或通过合适的递药装置或植入物注射、输注或植入来胃肠外(静脉内、肌内、皮下等)给予。这类组合物的配方和制备是药用制剂领域技术人员所熟知的。关于制剂可以在RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy，(参见上文)中找到。
胃肠外应用的组合物可以在其中可添加合适防腐剂的单位剂型(如单剂量安瓿)或含有若干剂量的管形瓶中提供(见下文)。所述组合物可以呈溶液剂、混悬剂、乳剂、输注装置或植入用的递药装置的形式，或者可以以临用前用水或另一种适宜溶媒重建的干粉存在。除活性药物之外，所述组合物还可以包括合适的胃肠外可接受的载体和/或赋形剂。所述活性药物可以掺入到微球体、微囊剂、纳米粒、脂质体等中用于控释。此外，所述组合物可以包括悬浮剂、增溶剂、稳定剂、pH调节剂和/或分散剂。
如上所述，本发明的药用组合物可以呈适于无菌注射剂的形式。要制备这样一种组合物，将适宜的活性药物溶于或悬浮于胃肠外可接受的液体溶媒中。在可使用的可接受的溶媒和溶剂中有水，通过添加适量的盐酸、氢氧化钠或适当的缓冲剂调至适当pH的水、1，3-丁二醇、Ringer氏溶液和等渗氯化钠溶液。含水制剂也可含有一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)。当所述化合物之一仅微溶或略溶于水时，可以添加溶解增强剂或增溶剂，或者溶剂可以包括10-60％w/w的丙二醇等。控释胃肠外组合物控释胃肠外组合物可以呈含水混悬剂、微球体、微囊剂、磁性微球体、油溶液剂、油性混悬剂或乳剂。另一方面，活性药物可以掺入到生物相容性载体、脂质体、纳米粒、植入物或输注装置中。
供制备微球体和/或微囊剂用的材料例如是生物可降解性/生物可腐蚀性聚合物，如polygalactin、聚(氰基丙烯酸异丁酯)、聚(2-羟乙基-L-谷氨酰胺)和聚乳酸。当配制控释胃肠外制剂时可使用的生物相容性载体，有碳水化合物(例如葡聚糖)、蛋白质(如白蛋白)、脂蛋白或抗体。用于植入物的材料可以是非生物降解性的(如聚二甲基硅氧烷)或是生物降解性的(如聚己内酯、聚乳酸、聚乙醇酸或聚原酸酯)。直肠组合物对于直肠用药，供组合物用的适宜剂型包括栓剂(乳剂型或混悬剂型)和直肠明胶胶囊剂(溶液剂或混悬剂)。在典型的栓剂制剂中，使活性药物与合适的药学上可接受的栓剂基质如可可脂、酯化脂肪酸、甘油明胶和各种水溶性或水可分散性基质，如聚乙二醇和聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯。可掺入各种添加剂、增强剂或表面活性剂。
吸入用组合物对于吸入给药，典型的剂型包括鼻喷雾剂和气雾剂。在典型的鼻喷雾剂中，使有效成分溶于或分散于合适溶媒中。根据常规制药实践，以制药领域技术人员所理解的方式，选择药学上可接受的溶媒和赋形剂(以及所述组合物中存在的其它药学上可接受的材料，如稀释剂、增强剂、矫味剂和防腐剂)。
透皮和局部组合物药用组合物也可以在皮肤上局部给予，以便以含有常规无毒药学上可接受的载体和赋形剂的剂型或制剂(包括微球体和脂质体)的剂型透皮吸收。所述制剂包括乳膏剂、软膏剂、洗剂、搽剂、凝胶剂、水凝胶、溶液剂、混悬剂、粘着剂、喷雾剂、糊剂、硬膏剂和其它种类的经皮递药系统。药学上可接受的载体或赋形剂可以包括乳化剂、抗氧化剂、缓冲剂、防腐剂、保湿剂、渗透促进剂、螯合剂、胶凝剂、软膏基质、香料和皮肤保护剂。
乳化剂的实例有天然存在的树胶(例如阿拉伯胶或西黄蓍胶)和天然存在的磷脂(例如大豆卵磷脂和脱水山梨醇一油酸酯衍生物)。抗氧化剂的实例有丁羟茴醚(BHA)、抗坏血酸及其衍生物、生育酚及其衍生物、丁羟茴醚和半胱氨酸。防腐剂的实例有对羟基苯甲酸酯如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯和苯扎氯铵。保湿剂的实例有甘油、丙二醇、山梨醇和尿素。渗透促进剂的实例有丙二醇、DMSO、三乙醇胺、N，N-二甲基乙酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、2-吡咯烷酮及其衍生物、四氢呋喃醇和AZONETM。螯合剂的实例有乙二胺四乙酸钠、柠檬酸和磷酸。胶凝剂的实例有CARBOPOLTM、纤维素衍生物、膨润土、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮。软膏基质的实例有蜂蜡、石蜡、棕榈酸鲸蜡酯、植物油、脂肪酸脱水山梨醇酯(Span)、聚乙二醇和脂肪酸脱水山梨醇酯和环氧乙烷的缩合产物(例如聚氧乙烯脱水山梨醇一油酸酯(TWEENTM))。
用于皮肤上局部给药的上述药用组合物，也可以与机体上待治疗部分上或其附近局部给药结合使用。可使所述组合物直接应用或用于引入机体相关的孔(如直肠、尿道、阴道或口腔)中。所述组合物可以借助特殊的递药装置如敷料或者硬膏剂、垫子、海绵、条带或其它形式的适宜的可固定的材料来应用。
控释透皮局部组合物有几种途径提供药物的控制释放速率和经皮渗透，包括膜调节(moderated)系统、粘胶扩散控制系统、骨架分散型系统和微贮库型系统。通过采用上述方法的合适混合物，可以获得控释透皮和/或局部组合物。
在膜调节系统中，活性药物以存在于贮库中，完全包封于由不透药的薄片如金属塑料薄片和控制速率的聚合膜如微孔或无孔聚合膜(如乙烯乙酸乙烯酯共聚物)模制成的浅室中。活性药物仅仅通过控制速率的聚合膜释放。在药物贮库中，活性药物可以分散于固体聚合基质中，或者悬浮于粘性液体介质如硅氧烷流体中。在聚合膜的外表面，施加一粘胶聚合物薄层，从而达到透皮系统与皮肤表面紧密接触。粘胶聚合物优选为可与活性药物配伍的低变应原聚合物。
在粘胶扩散控制系统中，通过直接将活性药物分散于粘胶聚合物中，然后将含活性药物的粘胶涂在基本不透药的金属塑料衬背上，形成一药物贮库薄层，形成活性药物贮库。骨架分散型系统的特征为如下形成活性药物贮库将活性药物基本均匀地分散于亲水性或亲脂性聚合基质中，然后将含药物聚合物模制成表面积和厚度基本调好(well-defined)的盘状物。沿圆周展开粘胶聚合物，在盘状物周围形成粘胶条。
在微贮库型系统中，通过首先将药物固体悬浮于水溶性聚合物的水溶液中，然后将药物悬浮液分散在亲脂性聚合物中，形成众多药物贮库微球体，从而形成活性药物贮库。
剂量所要求保护组合中的每种化合物的剂量取决于若干因素，包括给药方法、待治疗的病症、病症的严重程度、所述病症有待治疗还是预防以及待治疗的人的年龄、体重和健康状况。另外，关于特定患者的药物基因组学信息(药物动力学、药效学或治疗药的疗效谱的基因型效果)也可影响所用的剂量。
如上所述，所述化合物可以片剂、胶囊剂、酏剂或糖浆剂的形式口服给药，或者以栓剂的形式直肠给药。化合物的胃肠外给药可例如以盐水溶液的形式或者以掺入到脂质体中的化合物适当进行。在所述化合物本身不足以溶解时，可以应用增溶剂，如乙醇。下文为了说明，描述了双嘧达莫和氟氢可的松的剂量。
给药途径对于四取代的嘧啶并嘧啶的经口、肌内、皮下、局部、吸入、直肠、阴道和眼部给药，剂量通常约为0.5-800mg/天，优选约18-600mg/天，更优选约50-400mg/天。可以每日给药1-4次，给予一日至一年，甚至可以终身给药。在许多病例中，指明要慢性长期给药。最高至1600mg/天的剂量可能是必需的。对于四取代的嘧啶并嘧啶的静脉给药，剂量通常约为0.1-200mg/天，优选约0.5-150mg/天，更优选约1-100mg/天。给药可以每日1-4次。系统给药将导致稳态的血浆浓度，优选为0.1-7.0μM，更优选0.5-50μM，最优选1.0-2.0μM。
与四取代的嘧啶并嘧啶联合应用的皮质类固醇的剂量通常约为0.1-1500mg/天，优选约0.5-30mg/天，更优选约0.5-10mg/天。可以每日给予1-4次，给予一日至一年，甚至可以终身给药。在许多病例中指明要慢性长期给药。可能必需最高达3000mg/天的剂量。
以下实施例用以说明本发明。这些实施例决不意味着限制本发明。
实施例1成对化合物混合的组合连续稀释矩阵的制备用二甲基亚砜(DMSO)制备16mg/ml的双嘧达莫贮备液及1.6mg/ml的醋酸氟氢可的松贮备液(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO；目录号分别为D9766和F6127)。通过添加25μl浓贮备液到用75μl无水DMSO预填充的384孔聚丙烯贮藏板的3列、9列和15列(C排一直到N排)中，来制备双嘧达莫的标准板。用一把TomTec Quadra Plus液体操作器，将25μl的双嘧达莫贮备液连续稀释4次至相邻列(4-7列、10-13列、16-19列)。第六列(8、14和20)不加入任何化合物而用作溶媒对照。通过将25μl所述浓贮备液加入到合适的384孔聚丙烯标准贮藏板的适当孔(C排，3-8列；C排；9-14列；C排；15-20列；I排；3-8列；I排；9-14列；I排；15-20列)中，而制备氟氢可的松标准板。这些标准板已预先注入75μl无水DMSO。用TomTecQuadra Plus液体操作器，将25μl连续稀释4次至相邻排(D-G排和J-M排)。第六排(H和N)不加入任何化合物以用作载体对照。密封标准板，并将其贮藏于-20℃而随时可以用。
通过用TomTec Quadra Plus液体操作器，分别从双嘧达莫和氟氢可的松标准板中转移1μl到装有100μl培养基(RPMI，Gibco BRL，#11875-085；10％胎牛血清(Gibco BRL，#25140-097)；2％青霉素/链霉素(Gibco BRL，#15140-122))的稀释板中，来产生最终的双嘧达莫/氟氢可的松组合板。然后将该稀释板混合，并将10μl等分试样转移到最终的分析板上；该板已预先注入用含有激活TNFα分泌的合适刺激剂的40μl/孔RPMI培养基(参见下文)。
实施例2用双嘧达莫和氟氢可的松的组合分析TNFα抑制活性采用TNFα ELISA法，分析所述化合物的稀释矩阵。简单地说，通过用终浓度10ng/ml的13-乙酸12-肉豆蔻酸佛波醇(Sigma)和750ng/μl的伊屋诺霉素(Sigma)处理，刺激384孔聚苯乙烯板(NalgeNunc)各孔中装有的100μl经稀释的人白细胞悬浮液分泌TNFα。在刺激的时候，添加不同浓度的每种试验化合物。在湿润培养箱中于37℃温育16-18小时后，离心所述板，并将上清液转移到用一种抗TNF抗体(PharMingen，#18631D)包被的384孔不透明聚苯乙烯白色板(NalgeNunc，Maxisorb)中。在温育2小时后，用含有0.1％吐温20(聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯)的磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗涤(TecanPowerWasher 384)该板，然后将其与生物素标记的抗TNF的另一种抗体(PharMingen，18642D)和与链霉抗生物素蛋白偶联的辣根过氧化物酶(HRP)(PharMingen，#13047E)一起再温育1小时。在用0.1％吐温20/PBS洗涤该板后，向各孔中加入HRP底物(该底物包含鲁米诺、过氧化氢和一种增强剂例如对碘苯酚)，并用一台LJL Analyst发光计来测量光强度。对照孔含有终浓度1μg/ml的环孢菌素A(Sigma)。
总之，在用13-乙酸12-肉豆蔻酸佛波醇和伊屋诺霉素刺激过的血液中，双嘧达莫和氟氢可的松能够抑制TNFα的分泌。正如在表1和表2中所见到的，双嘧达莫能够增加氟氢可的松的效力达60倍。氟氢可的松在947nM的浓度时，单独抑制TNFα的分泌达39％。添加124nM双嘧达莫到浓度仅15nM的氟氢可的松中，则导致TNFα分泌的抑制达39％(表1)。尽管减少总药物量超过80％即从947nM减到163nM，却保持功效。在存在2μM双嘧达莫的情况下，仅用4nM的氟氢可的松则达到50％的TNFα抑制。以预期会导致盐皮质激素诱发的严重副作用的浓度单独用氟氢可的松，则这种抑制水平是不可能发生的。在第二次筛选中，观测到双嘧达莫增强氟氢可的松的活性(表2)。在另一方面，低剂量495nM的双嘧达莫增加氟氢可的松的效力超过135倍。具体地说，实现TNFα分泌的52％的减少需要单独的氟氢可的松947nM。对7nM氟氢可的松和495nM双嘧达莫的组合，则测量到类似的减少(49％)。此外，在氟氢可的松的浓度低至59nM时，添加248nM的双嘧达莫，则对TNFα分泌的抑制产生超最大(supramaximal)效应。
实施例3成对化合物混合的组合连续稀释矩阵的制备按照实施例1的方法，制备双嘧达莫和泼尼松龙的化合物矩阵。最初的双嘧达莫贮备液是16mg/ml，且泼尼松龙是1.6mg/ml。
实施例4用双嘧达莫和泼尼松龙的组合分析TNFα抑制活性用实施例2的TNFα的ELISA法，来分析实施例3的化合物稀释矩阵。结果示于表3中。总之，在用13-乙酸12-肉豆蔻酸佛波醇和伊屋诺霉素刺激过的血液中，双嘧达莫和泼尼松龙能够抑制TNFα的分泌，且这种抑制程度大于两种化合物中每一种的单独抑制程度。具体地说，双嘧达莫大大地增加泼尼松龙的效力。单独的泼尼松龙在250nM的浓度时，能抑制TNFα的分泌达38％。用仅仅1nM的泼尼松龙配合2μM的双嘧达莫，则能够达到同样的抑制水平(41％)。这相对于在泼尼松龙效力方面的超过250倍的变化。此外，与单独的泼尼松龙(38％)相比，添加2μM的双嘧达莫到250nM的泼尼松龙中，则产生超最大效应(57％)。因此，双嘧达莫和泼尼松龙的低剂量组合导致TNFα的抑制达到先前达不到的水平且没有糖皮质激素诱发的副作用的高风险。
其它的实施方案不偏离本发明范围与精神的情况下，本发明所描述方法和系统的各种修改和变化，对本领域技术人员将会是显而易见的。虽然结合所要求的具体实施方案描述了本发明，但应该明白，要求保护的本发明不应该过分限于这样的具体实施方案。实际上，对医学、免疫学、药理学、内分泌学领域或相关领域技术人员显而易见的、对已描述的实施本发明方式的各种修改计划在本发明范围内。
本说明书中引用的所有出版物和专利申请通过引用结合到本文中，其程度如同每个出版物或专利申请具体而单独地通过引用结合到本文中一样。
权利要求
1.一种治疗免疫炎性疾病患者或治疗处于发生免疫炎性疾病危险之中的患者的方法，所述方法包括给予所述患者(a)一种皮质类固醇，以及(b)一种具有下式的化合物， 其中每个Z和每个Z′独立地为N、O、C、 或 其中如果Z或Z′为O或 则p＝1，如果Z或Z′为N、 或 则p＝2，如果Z或Z′为C，则p＝3；每个R1独立地为X、OH、N-烷基、具有1-20个碳原子的支链或直链烷基、杂环基，或者，当p＞1时，共用Z或Z′原子的两个R1基团可相互结合为-(CY2)k-，其中k为4与6之间的整数，包括4和6在内。每个X独立地为Y、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1-5OY、CnY2n-1，其中n＝3-7，包括3和7在内；且每个Y独立地为H、F、Cl、Br或I；其中所述化合物和所述皮质类固醇按足以治疗所述患者的量和持续时间同时给予或者在彼此的14天内给予。
2.权利要求1的方法，其中所述化合物为2，6-二取代的4，8-二苄基氨基嘧啶并[5，4-d]嘧啶。
3.权利要求1的方法，其中所述化合物是双嘧达莫、莫哌达莫、单乙酸双嘧达莫、NU3026(2，6-二-(2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)-甲氧基-4，8-二哌啶基嘧啶并嘧啶)、NU3059(2，6-二-(2，3-二甲氧基丙氧基)-4，8-二哌啶基嘧啶并嘧啶)、NU3060(2，6-二[N，N-二(2-甲氧基)乙基]-4，6-二哌啶基嘧啶并嘧啶)或NU3076(2，6-二(二乙醇氨基)-4，8-二-4-甲氧基苄基氨基嘧啶并嘧啶)。
4.权利要求3的方法，其中所述化合物为双嘧达莫。
5.权利要求1的方法，其中所述皮质类固醇是阿尔孕酮、6-α-氟代泼尼松龙、6-α-甲泼尼龙、21-醋酸6-α-甲泼尼龙、6-α-甲泼尼龙21-半琥珀酸钠盐、21-乙酸17-丁酸6-α，9-α-二氟泼尼松龙、安西法尔、倍氯米松、二丙酸倍氯米松、二丙酸倍氯米松一水合物、6-β-羟基皮质醇、倍他米松、17-戊酸倍他米松、布地奈德、氯倍他索、丙酸氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、新戊酸氯可托龙、可的松、醋酸可的松、可托多松、地夫可特、21-脱氧皮质醇、地泼罗酮、地西龙、地奈德、去羟米松、地塞米松、21-醋酸地塞米松、二氯松、二氟拉松、双醋二氟拉松、二氟可龙、多倍他索、氟氢可的松、氟米松、新戊酸氟米松、氟莫奈德、氟尼缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、9-氟代可的松、氟羟基雄甾烯二酮、氟米龙、醋酸氟米龙、氟甲睾酮、氟泼尼定、氟泼尼龙、氟氢缩松、福莫可他、哈西奈德、卤米松、卤泼尼松、hyrcanoside、氢化可的松、醋酸氢可的松、丁酸氢化可的松、环戊丙酸氢化可的松、氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠、氢化可的松probutate、戊酸氢化可的松、6-羟基地塞米松、异氟泼尼龙、醋酸异氟泼尼龙、异泼尼定、甲氯松、甲泼尼龙、醋酸甲泼尼龙、琥钠甲泼尼龙、帕拉米松、醋酸帕拉米松、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙间位磺基苯甲酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松龙叔丁乙酯、21-游离半琥珀酸泼尼松龙、21-醋酸泼尼松龙、21-(β-D-葡糖苷酸)泼尼松龙、泼尼松、泼尼立定、普西奈德、曲洛奈德、曲安西龙、曲安奈德、21-棕榈酸曲安奈德、双醋曲安西龙、己曲安奈德或渥曼青霉素。
6.权利要求5的方法，其中所述皮质类固醇是氟氢可的松或泼尼松龙。
7.权利要求6的方法，其中所述化合物是双嘧达莫。
8.权利要求1的方法，其中在彼此的10天内给予所述化合物和所述皮质类固醇。
9.权利要求8的方法，其中在彼此的5天内给予所述化合物和所述皮质类固醇。
10.权利要求9的方法，其中在彼此的24小时内给予所述化合物和所述皮质类固醇。
11.权利要求10的方法，其中同时给予所述化合物和所述皮质类固醇。
12.权利要求11的方法，其中在同一药用制剂中给予所述化合物和所述皮质类固醇。
13.权利要求1的方法，其中所述免疫炎性疾病是类风湿性关节炎、银屑病、溃疡性结肠炎、局限性回肠炎、炎性皮肤病或中风诱发的脑细胞死亡。
14.权利要求1的方法，其中以0.5-800mg/天的量给予所述化合物，而以0.1-1500mg/天的量给予所述皮质类固醇。
15.权利要求14的方法，其中以18-600mg/天的量给予所述化合物，而以0.5-30mg/天的量给予所述皮质类固醇。
16.权利要求15的方法，其中以0.5-10mg/天的量给予所述皮质类固醇。
17.一种药用组合物，所述组合物包含(i)一种皮质类固醇，(ii)一种具有下式的化合物， 其中每个Z和每个Z′独立地为N、O、C、 或 其中如果Z或Z′为O或 则p＝1，如果Z或Z′为N、 或 则p＝2，如果Z或Z′为C，则p＝3；每个R1独立地为X、OH、N-烷基、具有1-20个碳原子的支链或直链烷基、杂环基，或者，当p＞1时，共用Z或Z′原子的两个R1基团可以相互结合为-(CY2)k-，其中k为4与6之间的整数，包括4和6在内。每个X独立地为Y、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1-5OY、CnY2n-1，其中n＝3-7，包括3和7在内；且每个Y独立地为H、F、Cl、Br或I；以及(iii)药学上可接受的赋形剂。
18.权利要求17的组合物，其中所述化合物为2，6-二取代的4，8-二苄基氨基嘧啶并[5，4-d]嘧啶。
19.权利要求18的组合物，其中所述化合物是双嘧达莫、莫哌达莫、单乙酸双嘧达莫、NU3026、NU3059、NU3060或NU3076。
20.权利要求17的组合物，其中所述皮质类固醇是阿尔孕酮、6-α-氟代泼尼松龙、6-α-甲泼尼龙、21-醋酸6-α-甲泼尼龙、6-α-甲泼尼龙21-半琥珀酸钠盐、21-乙酸17-丁酸6-α，9-α-二氟泼尼松龙、安西法尔、倍氯米松、二丙酸倍氯米松、二丙酸倍氯米松一水合物、6-β-羟基皮质醇、倍他米松、17-戊酸倍他米松、布地奈德、氯倍他索、丙酸氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、新戊酸氯可托龙、可的松、醋酸可的松、可托多松、地夫可特、21-脱氧皮质醇、地泼罗酮、地西龙、地奈德、去羟米松、地塞米松、21-醋酸地塞米松、二氯松、二氟拉松、双醋二氟拉松、二氟可龙、多倍他索、氟氢可的松、氟米松、新戊酸氟米松、氟莫奈德、氟尼缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、9-氟代可的松、氟羟基雄甾烯二酮、氟米龙、醋酸氟米龙、氟甲睾酮、氟泼尼定、氟泼尼龙、氟氢缩松、福莫可他、哈西奈德、卤米松、卤泼尼松、hyrcanoside、氢化可的松、醋酸氢可的松、丁酸氢化可的松、环戊丙酸氢化可的松、氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠、氢化可的松probutate、戊酸氢化可的松、6-羟基地塞米松、异氟泼尼龙、醋酸异氟泼尼龙、异泼尼定、甲氯松、甲泼尼龙、醋酸甲泼尼龙、琥钠甲泼尼龙、帕拉米松、醋酸帕拉米松、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙间位磺基苯甲酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松龙叔丁乙酯、21-游离半琥珀酸泼尼松龙、21-醋酸泼尼松龙、21-(β-D-葡糖苷酸)泼尼松龙、泼尼松、泼尼立定、普西奈德、曲洛奈德、曲安西龙、曲安奈德、21-棕榈酸曲安奈德、双醋曲安西龙、己曲安奈德或渥曼青霉素。
21.一种药物包装，所述药物包装包含(i)一种皮质类固醇，以及(ii)一种具有下式的化合物， 其中每个Z和每个Z′独立地为N、O、C、 或 其中如果Z或Z′为O或 则p＝1，如果Z或Z′为N、 或 则p＝2，如果Z或Z′为C，则p＝3；每个R1独立地为X、OH、N-烷基、具有1-20个碳原子的支链或直链烷基、杂环基，或者，当p＞1时，共用Z或Z′原子的两个R1基团可以相互结合为-(CY2)k-，其中k为4与6之间的整数，包括4和6在内。每个X独立地为Y、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1-5OY、CnY2n-1，其中n＝3-7，包括3和7在内；且每个Y独立地为H、F、Cl、Br或I。
22.权利要求21的药物包装，其中所述化合物为2，6-二取代的4，8-二苄基氨基嘧啶并[5，4-d]嘧啶。
23.权利要求22的药物包装，其中所述化合物是双嘧达莫、莫哌达莫、单乙酸双嘧达莫、NU3026、NU3059、NU3060或NU3076。
24.权利要求23的药物包装，其中所述化合物是双嘧达莫。
25.权利要求21的药物包装，其中所述皮质类固醇是阿尔孕酮、6-α-氟代泼尼松龙、6-α-甲泼尼龙、21-醋酸6-α-甲泼尼龙、6-α-甲泼尼龙21-半琥珀酸钠盐、21-乙酸17-丁酸6-α，9-α-二氟泼尼松龙、安西法尔、倍氯米松、二丙酸倍氯米松、二丙酸倍氯米松一水合物、6-β-羟基皮质醇、倍他米松、17-戊酸倍他米松、布地奈德、氯倍他索、丙酸氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、新戊酸氯可托龙、可的松、醋酸可的松、可托多松、地夫可特、21-脱氧皮质醇、地泼罗酮、地西龙、地奈德、去羟米松、地塞米松、21-醋酸地塞米松、二氯松、二氟拉松、双醋二氟拉松、二氟可龙、多倍他索、氟氢可的松、氟米松、新戊酸氟米松、氟莫奈德、氟尼缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、9-氟代可的松、氟羟基雄甾烯二酮、氟米龙、醋酸氟米龙、氟甲睾酮、氟泼尼定、氟泼尼龙、氟氢缩松、福莫可他、哈西奈德、卤米松、卤泼尼松、hyrcanoside、氢化可的松、醋酸氢可的松、丁酸氢化可的松、环戊丙酸氢化可的松、氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠、氢化可的松probutate、戊酸氢化可的松、6-羟基地塞米松、异氟泼尼龙、醋酸异氟泼尼龙、异泼尼定、甲氯松、甲泼尼龙、醋酸甲泼尼龙、琥钠甲泼尼龙、帕拉米松、醋酸帕拉米松、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙间位磺基苯甲酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松龙叔丁乙酯、21-游离半琥珀酸泼尼松龙、21-醋酸泼尼松龙、21-(β-D-葡糖苷酸)泼尼松龙、泼尼松、泼尼立定、普西奈德、曲洛奈德、曲安西龙、曲安奈德、21-棕榈酸曲安奈德、双醋曲安西龙、己曲安奈德或渥曼青霉素。
26.权利要求21的药物包装，其中所述化合物与所述皮质类固醇以不同剂量独立配制。
27.权利要求21的药物包装，其中所述化合物与所述皮质类固醇以不同剂量配制在一起。
28.一种治疗免疫炎性疾病患者或治疗处于发生免疫炎性疾病危险之中的患者的方法，所述方法包括给予所述患者(a)两种或更多种皮质类固醇，以及(b)一种具有下式的化合物， 其中每个Z和每个Z′独立地为N、O、C、 或 其中如果Z或Z′为O或 则p＝1，如果Z或Z′为N、 或 则p＝2，如果Z或Z′为C，则p＝3；每个R1独立地为X、OH、N-烷基、具有1-20个碳原子的支链或直链烷基、杂环基，或者，当p＞1时，共用Z或Z′原子的两个R1基团可以相互结合为-(CY2)k-，其中k为4与6之间的整数，包括4和6在内。每个X独立地为Y、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1-5OY、CnY2n-1，其中n＝3-7，包括3和7在内；且每个Y独立地为H、F、Cl、Br或I；其中每种所述化合物及所述两种或更多种皮质类固醇按足以治疗所述患者的量给予。
29.权利要求28的方法，其中所述化合物是双嘧达莫、莫哌达莫、单乙酸双嘧达莫、NU3026、NU3059、NU3060或NU3076。
30.权利要求29的方法，其中所述化合物为双嘧达莫。
31.权利要求28的方法，其中所述皮质类固醇中至少一种是阿尔孕酮、6-α-氟代泼尼松龙、6-α-甲泼尼龙、21-醋酸6-α-甲泼尼龙、6-α-甲泼尼龙21-半琥珀酸钠盐、21-乙酸17-丁酸6-α，9-α-二氟泼尼松龙、安西法尔、倍氯米松、二丙酸倍氯米松、二丙酸倍氯米松一水合物、6-β-羟基皮质醇、倍他米松、17-戊酸倍他米松、布地奈德、氯倍他索、丙酸氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、新戊酸氯可托龙、可的松、醋酸可的松、可托多松、地夫可特、21-脱氧皮质醇、地泼罗酮、地西龙、地奈德、去羟米松、地塞米松、21-醋酸地塞米松、二氯松、二氟拉松、双醋二氟拉松、二氟可龙、多倍他索、氟氢可的松、氟米松、新戊酸氟米松、氟莫奈德、氟尼缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、9-氟代可的松、氟羟基雄甾烯二酮、氟米龙、醋酸氟米龙、氟甲睾酮、氟泼尼定、氟泼尼龙、氟氢缩松、福莫可他、哈西奈德、卤米松、卤泼尼松、hyrcanoside、氢化可的松、醋酸氢可的松、丁酸氢化可的松、环戊丙酸氢化可的松、氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠、氢化可的松probutate、戊酸氢化可的松、6-羟基地塞米松、异氟泼尼龙、醋酸异氟泼尼龙、异泼尼定、甲氯松、甲泼尼龙、醋酸甲泼尼龙、琥钠甲泼尼龙、帕拉米松、醋酸帕拉米松、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙间位磺基苯甲酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松龙叔丁乙酯、21-游离半琥珀酸泼尼松龙、21-醋酸泼尼松龙、21-(β-D-葡糖苷酸)泼尼松龙、泼尼松、泼尼立定、普西奈德、曲洛奈德、曲安西龙、曲安奈德、21-棕榈酸曲安奈德、双醋曲安西龙、己曲安奈德或渥曼青霉素。
32.一种确定可用于治疗免疫炎性疾病患者的化合物组合的方法。所述方法包括下述步骤(a)使免疫细胞在体外与(i)一种选自双嘧达莫、氟氢可的松和泼尼松龙的第一化合物接触，以及使免疫细胞在体外与(ii)一种候选化合物接触；和(b)与接触了所述第一化合物但没和所述候选化合物接触的免疫细胞比较，或与接触了所述候选化合物但没和所述第一化合物接触的外周血单核细胞比较，确定所述第一化合物与所述候选化合物的组合是否降低所述免疫细胞中TNFα的水平；其中所述TNFα水平的降低确定所述组合为可用于治疗免疫炎性疾病患者的组合。
33.一种用于抑制有需要的患者体内产生一种或多种促炎细胞因子的方法，所述方法包括给予所述患者细胞因子抑制量的权利要求17的药用组合物。
34.权利要求33的方法，其中所述细胞因子之一为TNFα。
35.一种药盒，所述药盒包含(i)权利要求21的药物包装和(ii)把所述包装给予诊断出患有免疫炎性疾病或处于发生免疫炎性疾病危险之中的患者的说明书。
36.一种治疗免疫炎性疾病患者或治疗处于发生免疫炎性疾病危险之中的患者的方法，所述方法包括按足以治疗所述患者的量与持续时间，在彼此的1小时内给予所述患者(i)双嘧达莫和(ii)泼尼松龙或氟氢可的松。
全文摘要
本发明的特征为一种治疗免疫炎性疾病患者的方法，所述方法即通过按足以减轻或抑制免疫炎症的量同时给予或者在彼此的14天内给予所述患者(i)一种四取代的嘧啶并嘧啶和(ii)一种皮质类固醇。
文档编号A61P21/00GK1599613SQ02823996
公开日2005年3月23日 申请日期2002年10月4日 优先权日2001年10月5日
发明者C·凯斯, A·博里西, G·齐默曼, E·R·约斯特－普里斯, P·马尼瓦茨坎, N·胡尔斯特, M·A·福利 申请人:康宾纳特克斯公司