专利名称：一种防治禽流感的药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种防治高致病性禽流感的药物及其制备方法，尤其涉及一种从植物材料的提取物中制备得到的用于防治禽流感的药物及其制备方法，属于生命科学领域。
背景技术：
高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza，简称HPAI)，也称为鸡瘟。它是由高致病性流感病毒H5N1(或H7N1)经呼吸道、消化道或气源性媒介传播的一种烈性传染病。2002-2004年度相继在东南亚国家越南、泰国、马来西亚、印度尼西亚、韩国、日本等和中国中南部各省、香港和台湾发生的禽流感，不仅大批鸡、鸭、鹅和火鸡被感染致死或被扑杀，造成严重的经济损失，而且发生了禽-人之间的传播，引起人类感染并有死亡。例如，香港、越南和泰国均有报告因禽流感病毒H5N1感染的病人致死病例总计达到几十例、泰国50只老虎也因禽流感致死。因此，禽流感的暴发曾引起人们的极大恐慌。这种病毒的肆虐，不但给养禽业遭受严重打击，同时向人类的健康发出了新的挑战，开展对禽流感病毒的研究关系到公共健康、国计民生和社会发展。
目前，国际上仍无防治高致病H5N1禽流感的特效药物。扑灭禽流感主要是采用隔离、封锁、朴杀焚烧或深埋、紧急免疫接种、消毒等综合手段。其中，后者使用的消毒剂有石灰、漂泊粉、氢氧化钠稀溶液。这些无机制剂最大的不足是造成环境污染，也不能用于高危人群和污染织物的消毒。因此，从药用植物中寻找纯天然、高效低毒，对人禽安全使用，同时不污染环境的新型消毒剂，对禽流感的防治具有重要的现实意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种新的能够有效防治流感的药物。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术途径来实现的本发明的防治禽流感的药物组合物，主要由以下步骤制备而成将香薷、薄荷、连翘、金荞麦、茶叶、贯众、淫羊藿分别提取其活性成分，将纯化后的提取物经组方配制而得。
详细的制备方法如下将香薷、连翘粉碎，以稀乙醇或水淹过药面，加热蒸馏得到挥发油，经油水分离、干燥得提取物；将薄荷、金荞麦、茶叶、贯众、淫羊藿粉碎后加热回流提取3～4次，每次1～2小时，过滤除去药渣，合并滤液，减压浓缩得到的浸膏，加入适量水转溶，澄清的水溶液经过大孔吸附树脂(或聚酰胺)柱，去除无机盐、氨基酸、糖类等杂质，被吸附物以乙醇解吸，在减压下浓缩解吸液至干，得到提取物。最后将所得的提取物根据消毒剂要求和不同用途进行组方配制而得。
香薷为唇形科植物，拉丁文名称为Elsholtzia splendens Nakai或E.ciliata。
薄荷为唇形科植物，拉丁文名称为Mentha hyplocalyx Briq(M.aroensisL.var.hyplocalyx Briq)或M.hyplocalyx Briq var.piperascens.
连翘为木犀科植物，拉丁文名称为Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl L.
金荞麦为蓼科植物，拉丁文名称为Fagopyrum cymosun(F.dibotrys)茶为茶科植物，拉丁文名称为Camellia sinensis Kuntnze或C.japonica L.
贯众为鳞毛蕨科植物，拉丁文名称为Dryopteris crassirhizoma Nakai；Cyrtomium fortunei；Osmunda japonica；Blechnum orientale.
淫羊藿为小檗科植物，拉丁文名称为Epimedium koreanum Nakai；E.Sagitatum；E.Breivicornum；E.Macroamthum；E.Wanshanense.
本发明药物中含有木质素类、儿茶素、黄烷醇衍生物、间苯三酚衍生物、黄酮类及挥发油、迷迭香酸、连翘酯苷、儿茶酚及其二聚或三聚体衍生物、贯众素和淫羊藿苷等多种活性成分，这些活性成分混合在一起，各种药效相互协调、配合能够有效灭活禽流感病毒H5N1，也可灭活或抑制其他流感病毒，如甲型、乙型流感病毒等。此外，本发明药物还有杀菌的功效，可有效杀灭金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌等，可以进一步加工制成适用于养鸡场、养鸭场、公共场所等的空气消毒剂及高危人群的洗手消毒用洗手液等。
具体实施例方式
以下通过实施例来进一步描述本发明，应该理解的是，这些实施例仪用于例证的目的，决不限制本发明的范围。
本发明药物的制备取1kg粉碎的香薷，加水过面，加热蒸馏，收集挥发油，经油水分离、干燥得提取物(A)15g；取1kg粉碎的薄荷生药干品，加水过面，回流提取3次，每次1小时，过滤，合并的滤液通过聚酰胺柱，以90％乙醇解吸附，乙醇溶液在减压下浓缩至干，得提取物(B)62g；取连翘600g，加开水3500ml，加热蒸馏提取4次，每次2小时，并收集挥发油和水提取物。合并的油层经脱水干燥得挥发油(C)20.8g，水提取物过滤，滤液经大孔吸附树脂柱，以乙醇解吸，减压下浓缩乙醇溶液至干得提取物(D)40.6g；茶叶1kg，加水过面，回流提取3次，每次1小时，过滤，合并的滤液通过大孔吸附树脂柱，以乙醇解吸，减压下浓缩乙醇溶液至干得提取物(E)70g。
取贯众1kg，加水过面，回流提取3次，每次1小时，过滤，合并的滤液通过聚酰胺柱，以90％乙醇解吸附，乙醇溶液在减压下浓缩至干，得提取物(F)68g。
粉碎的淫羊藿1kg，加稀醇过面，回流提取3次，每次1小时，过滤，合并的滤液在减压下浓缩至无醇味，加蒸馏水2000ml，过滤，滤液通过聚酰胺柱，以90％乙醇解吸附，乙醇溶液在减压下浓缩至干，得提取物(G)78g。
取粉碎的金荞麦1kg，加水过面，回流提取次4次，每次2小时，过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱，乙醇解吸附。减压下浓缩乙醇解吸液至干，得提取物(H)55g。
将以上所得到的A、B、C、D、E、F、G、H共八种提取物，根据消毒剂的要求和不同使用目的，进行组方配制成空气消毒剂或消毒洗手液。
本发明药物的体外抗流感病毒的活性测定一、试验材料细胞狗肾细胞(MDCK)(来源于中国医学科学院生物技术研究所)病毒流感甲型病毒(济防190-15)；流感乙型(济防197-13)在鸡胚尿囊腔内培养传代。
受试样品本发明实施例所制备的药物。
阳性对照药病毒唑(RBV)(上海罗氏制药有限公司)。
二、试验方法及结果试验方法以MTT法测定药物对MDCK细胞半数毒性浓度(TC50)；以CPE法测定病毒对MDCK细胞半数感染浓度(TCID50)；以CPE法测定药物抗病毒活性；试验重复两次，取平均值。结果见表1表1本发明药物体外抗流感病毒试验结果
SI＝TC50/IC50；表中TC50和IC50值(除RBV)为样品母液的稀释倍数；RBV、TC50及IC50单位为μg/ml[试验例2]本发明药物的抗禽流感病毒活性检测一、试验材料SPF种蛋；病毒AIV(H5N1)(来源于中国农业大学动物所病毒室)。
阳性血清AIV(H5N1)(来源于中国农业大学动物所病毒室)。
受试样品本发明实施例所制备的药物。
二、试验方法及结果试验方法1.测定受试样品对鸡胚毒性，获得各样品的最大稀释度；2.测定禽流感病毒EID503.受试样品的抗病毒试验(鸡胚法)4.测定半数抑制浓度(IC50)结果表明，受试样品的最大稀释度分别为1/200；1/100；1/200；1/100；1/100；1/40；1/200；1/300；1/40；1/100。受试样品中除A，B，C，D外，其余样品在这些浓度下对禽流感病毒H5N1的平均灭活率达100％(见表2)。
表2.受试样品抗禽流感病毒(H5N1)的实验结果
本发明药物用作禽流感消毒剂的制备(喷雾用)材料本发明实施例所得到的提取物A、B、E和F；95％乙醇；蒸馏水。
配方A 5g；B 10g；E 10g；F 25g；95％乙醇230ml；蒸馏水770ml。
配制方法将A用乙醇溶解，B，E和F各以50ml(蒸馏水)溶解后，合并各溶液，过滤，得到的滤液加水至1000ml即得喷雾用消毒剂。
本发明药物用作禽流感消毒洗手液的制备材料本发明实施例所得到的提取物B、C、D、E、F、G和H；烷基苯磺酸钠；Vc。
配方B 10g；C 5g；D 10g；E 10g；F 25g；G 25g；H 10g。
配制方法合并B、D、E、F、G、H和Vc(200mg)，加入120ml水，水浴加热使溶解，C与880ml烷基苯磺酸钠混合均匀后再与水溶液合并，即得洗手消毒液。
应用例1所配制的空气消毒剂和上述洗手消毒液，以试管稀释法进行抗菌实验，结果见表3。试验结果说明，本发明所配制的空气消毒剂和洗手消毒液能够有效杀灭各类细菌。
表3.空气消毒剂和洗手液抑制结果(原液浓度为1)
权利要求
1.一种防治禽流感的药物，主要由以下方法制备而成将香薷、薄荷、连翘、金荞麦、茶叶、贯众、淫羊藿分别提取其活性成分，将所得的提取物经纯化后组方配制而得。
2.按照权利要求1的药物，其特征是由以下方法制备而成将香薷、连翘粉碎后分别加热蒸馏提取挥发油，经油水分离、干燥得提取物；金荞麦、茶叶、贯众、淫羊藿、薄荷粉碎后分别加热回流，将提取液过滤，合并滤液，减压浓缩得浸膏，将浸膏用水溶解，经过大孔吸附树脂或聚酰胺柱，去除杂质，将被吸附物以乙醇解吸，在减压下浓缩解吸液至干，得提取物；最后将上述所得的提取物根据消毒剂的要求进行组方配制得到。
3.按照权利要求1或2的药物，其特征是可按本领域常规制剂方法制备成任何一种适宜的临床制剂。
4.权利要求1～3的任一药物在制备防治流感病毒药物中的用途。
5.按照权利要求4所述的用途，其特征是在制备防治禽流感病毒H5N1、甲型、乙型流感病毒药物中的用途。
6.权利要求1～3的任一药物在制备杀灭金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌药物中的用途。
7.权利要求1～3的任一药物在制备消毒剂、消毒洗手液中的用途。
全文摘要
本发明公开了一种新的防治高致病性禽流感的药物。该药物主要由下述方法制备而成将香薷、薄荷、连翘、金荞麦、茶叶、贯众、淫羊藿分别提取其活性成分，将所得的提取物经纯化后组方配制而得。试验证实，本发明药物具有完全灭活禽流感病毒(H5N1)的作用。
文档编号A61P1/16GK1799593SQ20041010398
公开日2006年7月12日 申请日期2004年12月31日 优先权日2004年12月31日
发明者陈迪华, 高微微, 潘瑞乐, 斯建勇 申请人:中国医学科学院药用植物研究所