专利名称：二氮杂二环壬烯及四氢吡啶衍生物用作肾素抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及通式(I)的新型五-元杂芳基衍生物。本发明还涉及该化合物制备方法，包含一种或多种式(I)化合物的药物组合物，并特别涉及它们在心血管疾病和肾机能不全中作为血管紧张肽原酶抑制剂的用途。
在血管紧张肽原酶-血管紧张素系统(RAS)中，生物活性血管紧张素II(Ang II)是通过一种两步机制产生的。高度特异性的酶血管紧张肽原酶将血管紧张素原切断成血管紧张素I(Ang I)，然后通过相对较低特异性的血管紧张素转化酶(ACE)将血管紧张素I进一步处理成Ang II。已知Ang II是在至少两个被称为AT1与AT2的受体亚型上发生作用的。尽管AT1似乎传递AngII的大多数的功能，然而AT2的作用仍然是未知的。
RAS的调节代表了心血管疾病治疗中的一个重要的进步。ACE抑制剂和AT1阻滞剂已经被普遍接受用于治疗高血压(Waeber B.et al.，“The renin-angiotensin systemrole in experimental and human hypertension”，in BerkenhagerW.H.，Reid J.L.(eds)Hypertension，Amsterdam，Elsevier Science PublishingCo，1996，489-519；Weber M.A.，Am.J.Hypertens.，1992，5，247S)。此外，ACE抑制剂还被用于肾的保护(Rosenberg M.E.et al.，Kidney International，1994，45，403Breyer J.A.et al.，Kidney International，1994，45，S156)、预防充血性心力衰竭(Vaughan D.E.et al.，Cardiovasc.Res.，1994，28，159；Fouad-Tarazi F.et al.，Am.J.Med.，1988，84(Suppl.3A)，83)与心肌梗塞(Pfeffer M.A.et al.，N.Engl.J.Med.，，1992，327，669)。
开发血管紧张肽原酶抑制剂的基本原理是血管紧张肽原酶的特异性(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)。血管紧张肽原酶的唯一已知的基质是血管紧张素原，该血管紧张素原仅能通过血管紧张肽原酶(在生理条件之下)进行处理。相比之下，ACE除了可以切断Ang I之外，还可以切断缓激肽，并可通过凝乳酶(一种丝氨酸蛋白酶)加以规避(Husain A.，J.Hypertens.，1993，11，1155)。在患者中，ACE的抑制会导致引起咳嗽的缓激肽积累(5～20％)以及潜在性的危急生命的急性自发水肿(0.1～0.2％)(Israili Z.H.et al.，Annals of Internal Medicine，1992，117，234)。ACE抑制剂无法抑制凝乳酶。因此，在接受ACE抑制剂治疗的患者中，仍可能形成AngII。另一方面，AT1受体的阻断(例如通过洛沙坦)将其他的AT-受体亚型(例如AT2)过度暴露于Ang II之下，Ang II的浓度通过AT1受体的阻断而被显著的提高。总之，希望血管紧张肽原酶抑制剂在其阻挡RAS的效力方面和安全性上与ACE抑制剂和AT1阻滞剂具有不同的药性。
由于血管紧张肽原酶抑制剂具有拟肽特征(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)而导致口腔活度不足，因而仅仅对血管紧张肽原酶抑制剂进行了有限的临床实践(Azizi M.et al.，J.Hypertens.，1994，12，419；Neutel J.M.et al.，Am.Heart，1991，122，1094)。已经有数种化合物的临床研发由于它们存在成本过高的问题而被终止了。仅仅有一个具有4个手性中心的化合物进入了临床试验(Rahuel J.et al.，Chem.Biol.，2000，7，493；MealyN.E.，Drugs of the Future，2001，26，1139)。因此，需要具有良好口生物利用率和较长持续作用时间的血管紧张肽原酶抑制剂。最近，公开了首个显示出较高体外活性的非肽血管紧张肽原酶抑制剂(Oefner C.et al.，Chem.Biol.，1999，6，127；专利申请WO97/09311；Mrki H.P.et al.，Il Farmaco，2001，56，21)。然而，这些化合物的研发状态仍是未知的。
本发明涉及一种非肽性的和低分子量的血管紧张肽原酶抑制剂的鉴定。并描述了长效作用的口腔活性的血管紧张肽原酶抑制剂在血压调节之外的指示中是有作用的，在这种血压调节指示中，可以将组织的血管紧张肽原酶-凝乳酶系统活化，从而导致病理生理学改变的局部功能，例如肾、心脏和血管改型、动脉粥样硬化、和可能的再狭窄。因此，本发明描述这些非肽血管紧张肽原酶抑制剂。
本发明描述非肽血管紧张肽原酶抑制剂。
本发明特别涉及通式(I)的新型化合物。
通式I其中Y和Z独立地表示氢、氟、甲基，或Y和Z一起形成环丙基环；X表示-CH2-CH(K)-CH2-、-CH2CH2-、-CH2OCH2-、-CH2SCH2-、-CH2SOCH2-、-CH2SO2CH2-、-CO-NL-CHR6-、-CHR6-NL-CO-；W表示六-元非苯并的苯基或3-或4-位由V取代的杂芳基环。
V表示一个键、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-、-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B独立地表示-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U表示芳基、杂芳基；T表示-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-、-COO-；Q表示低级亚烷基、低级亚烯基；M表示芳基-O(CH2)vR5、杂芳基-O(CH2)vR5、芳基-O(CH2)2O(CH2)wR5、杂芳基-(CH2)2O(CH2)wR5；L表示-R3、-COR3、-COOR3、-CONR2R3、-SO2R3、-SO2NR2R3、-COCH(芳基)2；K表示-H、-CH2OR3、-CH2NR2R3、-CH2NR2COR3、-CH2NR2SO2R3、-CO2R3、-CH2OCONR2R3、-CONR2R3、-CH2NR2CONR2R3、-CH2SO2NR2R3、-CH2SR3、-CH2SOR3、-CH2SO2R3；R1表示氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基；R2和R2’独立地表示氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、环烷基-低级烷基；R3表示氢、低级烷基、低级烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基-低级烷基、芳基-低级烷基、杂芳基-低级烷基、杂环基-低级烷基、芳氧基-低级烷基、杂芳氧基-低级烷基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代、二取代或三取代羟基、-OCOR2、-COOR2、低级烷氧基、氰基、-CONR2R2’、CO-吗啉-4-基、CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’或低级烷基，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；
R4和R4’独立地表示氢、低级烷基、环烷基、环烷基-低级烷基、羟基-低级烷基、-COOR2、-CONH2；R5表示-OH、-OCOR2、-COOR2、-NR2R2’、-OCONR2R2’、-NCONR2R2’、氰基、-CONR2R2’、SO3H、-SONR2R2’、-CO-吗啉-4-基、-CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；R6表示氢、低级烷基、低级烷氧基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代羟基、-CONH2，、-COOH、咪唑啉基、-NH2、-CN、-NH(NH)NH2；p为整数1、2、3或4；r为整数1、2、3、4、5或6；s为整数1、2、3、4或5；t为整数1、2、3或4；u为整数1、2或3；v为整数2、3或4；w为整数1或2；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
在通式(I)的定义中——除非有另外的说明——术语“低级烷基”，单独或与其它基团结合时，是指含有1～7个、优选1～4个可被卤素任选取代的碳原子饱和的、直链或支链基团。低级烷基的实例为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基和庚基。优选为甲基、乙基和异丙基。
术语“低级烷氧基”是R-O基团，其中R为低级烷基。低级烷氧基的实例为甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。
术语“低级链烯基”，单独或与其它基团结合时，是指包含2～7个、优选2～4个可被卤素任选取代的碳原子以及一个烯键的直链或支链基团。低级烯基的实例为乙烯基、丙烯基或丁烯基。
术语“低级炔基”，单独或与其它基团结合时，是指包含2～7个、优选2～4个可被卤素任选取代的碳原子以及一个三键的直链或支链基团。低级炔基的实例为乙炔基、丙炔基或丁炔基。
术语“低级亚烷基”，单独或其它基团结合时，是指包含1～7个、优选1～4个可被卤素任选取代的碳原子直链或支链二价链基团。低级亚烷基的实例为亚甲基、亚乙基、亚丙基或亚丁基。在本发明的另外一个具体实例中低级亚烷基指亚乙基、亚丙基或亚丁基。在本发明的另外一个具体实例中低级亚烷基指亚甲基。
术语“低级亚烯基”，单独或其它基团结合时，是指包含2～7个、优选2～4个可被卤素任选取代的碳原子以及一个烯键的直链或支链二价链基团。低级亚烯基的实例为亚乙烯基、亚丙烯基和亚丁烯基。
术语“低级亚烷基二氧基”是指在各个末端被一个氧原子取代的低级亚烷基。低级亚烷基二氧基的实例优选为亚甲二氧基和亚乙二氧基。
术语“低级亚烷基氧基”是指在一个末端被氧原子取代的低级亚烷基。低级亚烷基氧基的实例优选为亚甲氧基、亚乙氧基和亚丙氧基。
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘，优选氟、氯和溴。
术语“环烷基”单独或结合使用时，是指含有3～7个碳原子的饱和烃环系统，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基，并且可任选地被下述基团独立地单取代或多取代低级烷基、低级烯基、低级亚烯基、低级烷氧基、低级亚烷基氧基、低级亚烷基二氧基、羟基、卤素、-CF3、-NR1R1’、-NR1COR1’、-NR1SO2R1’、-CONR1R1’、低级烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’，其中R1’代表氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基。优选的基团为环丙基。
术语“芳基”，单独或结合使用时，是指苯基、萘基或茚满基，优选苯基，并且优选被下述基团独立地单取代或多取代低级烷基、低级烯基、低级炔基、低级亚烯基或低级亚烷基从而与芳环形成五元或六元环、低级烷氧基、低级亚烷基二氧基、低级亚烷基氧基、羟基、羟基-低级烷基、卤素、氰基、-CF3、-OCF3、-NR1R1’、-NR1R1’-低级烷基、-NR1COR1’、-NR1SO2R1’、-CONR1R1’、-NO2、低级烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’、苯甲氧基，其中R1’定义如上。
对于取代基U，术语芳基指2-氯-3，6-二氟苯基或2，6-二氯-4-甲基苯基。
术语“芳氧基”是指Ar-O基团，其中Ar为芳基。芳氧基的实例为苯氧基。
术语“杂环基”，单独或结合使用时，是指包含一个或两个可相同或不同的氮、氧或硫原子的饱和或不饱和(但非芳香性的)五-、六-或七-元环，并且该环任选可被低级烷基、羟基、低级烷氧基和卤素任选取代。氮原子(如果存在)可以被-COOR2取代。这种环的实例为哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、1，4-二氧六环基、吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、咪唑烷基、二氢吡唑基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基。
术语“杂芳基”，单独或结合使用时，是指包含1～4个氮原子的六元芳环；包含1～3个氮原子的苯并六元芳环；包含1个氧原子、1个氮原子或1个硫原子的五元芳环；包含1个氧原子、1个氮原子或1个硫原子的苯并五元芳环；包含1个氧原子和1个氮原子的五元芳环及其苯并衍生物；包含1个硫原子和1个氮原子或1个原子的五元芳环及其苯并衍生物；包含2个氮原子的五元芳环及其苯并衍生物；包含3个氮原子的五元芳环及其苯并衍生物，或四唑环。这种环系统的实例为呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、茚满基、喹啉基、异喹啉基、咪唑啉基、三嗪基、噻嗪基、噻唑基、异噻唑基、哒嗪基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、香豆素基、苯并噻吩基、喹唑啉基、喹喔啉基。这类环可被下述取代基所充分取代低级烷基、低级烯基、低级炔基、低级亚烷基、低级亚烯基、低级亚烷基二氧基、低级亚烷氧基、羟基-低级烷基、低级烷氧基、羟基、卤素、氰基、-CF3、-OCF3、-NR1R1’、-NR1R1’-低级烷基、-N(R1)COR1、-N(R1)SO2R1、-CONR1R1’、-NO2、低级烷基羰基、-COOR1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-SO2NR1R1’、另一个芳基、另一个杂芳基或另一个杂环基等，其中R1’定义如上。
对于取代基M，术语杂芳基指3-甲基呲啶-4-基。
术语“杂芳氧基”是指Het-O基团，其中Het为杂芳基。
术语“环烷基-低级烷基”指由低级烷基取代的如上定义的环烷基。
术语“芳基-低级烷基”指由低级烷基取代的如上定义的芳基。
术语“杂芳基-低级烷基”指由低级烷基取代的如上定义的杂芳基。
术语“杂环基-低级烷基”指由低级烷基取代的如上定义的杂环基。
术语“芳氧基-低级烷基”指由低级烷基取代的如上定义的Ar-O基团。
术语“杂芳氧基-低级烷基”指由低级烷基取代的如上定义的Het-O基团。
术语“羟基-低级烷基”指由羟基取代的如上定义的低级烷基。
术语“低级烷基羰基”指低级烷基-CO-基团。
术语“sp3-杂化”指一个碳原子以四个键和四个取代基相连，且这四个取代基围绕该碳原子形成一个四边形。
术语“药学上可接受的盐”包括与无机酸或有机酸诸如盐酸或氢溴酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、马来酸、酒石酸、苯甲酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等所形成的对生物活体无毒性的盐，并且当式(I)的化合物为酸性的化合物时与无机碱比如碱金属或碱土金属例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙等所形成的盐。
通式(I)的化合物还可以包含两个或多个不对称碳原子，并且可以制备成光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映的消旋物的混合物、和内消旋形式及其药学上可接受的盐。
本发明包含全部这些形式。可以通过本身已知的方式，例如柱色谱法、薄层色谱法、HPLC或结晶法对混合物进行分离。
一组优选的通式(I)的化合物为其中Z、Y、W、V、U、T、Q和M定义如通式(I)的化合物，且X表示-CH2CH2-。
一组优选的通式(I)的化合物为其中Z、Y、X、W、V、U、T、Q和M定义如通式(I)的化合物，且L表示H、-COR3”、-COOR3”、-CONR2”R3”；其中R2”和R3”分别独立地表示低级烷基，低级环烷基-低级烷基，低级烷基，低级环烷基-低级烷基是不可取代的或被卤素、氰基、羟基、-OCOCH3、-CONH2、-COOH、-NH2所单取代，附带条件是如果该碳原子是sp3-杂化其至多连接一个杂原子。
另一组优选的通式(I)的化合物为其中Z、Y、X、W、V和U定义如通式(I)的化合物，且T为-CONR1-；Q为亚甲基；M为芳基-O(CH2)VR5、杂芳基-O(CH2)VR5。
另一组更优选的通式(I)的化合物为其中Z、Y、X、V、U、T、Q和M定义如通式(I)的化合物，且W表示4-取代的苯基。
另一组更优选的通式(I)的化合物为其中Z、Y、X、W、V、Q、T和M定义如通式(I)的化合物，且
U是由卤素、低级烷基或低级烷氧基单-、二-或三取代的苯基。
一组最优选的通式(I)的化合物为Z和Y表示氢；U表示独立地由卤素或C1-C4烷基三取代的苯环；V表示-O-CH2-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-、-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-CH2-O-、-CH2-CH2-CH2-O-；W表示4-位由V取代的苯环，且该苯环连接四氢吡啶环1-位上的双键碳原子；X表示-CH2-CH2-、-CH2-SO-CH2-、-CH2-SO2-CH2-、-CH2-O-CH2-；T表示-CONR1-，其中R1为环烷基；Q表示-CH2-；M表示由C1-C4烷基取代的吡啶-O(CH2)VR5，其中R5为羟基；-COOR2，其中R2为氢或C1-C4烷基；或-CONR2R2’，其中R2和R2’为氢或C1-C4烷基。
另一组最优选的通式(I)的化合物为Z和Y表示氢；U表示独立地由卤素三取代的苯环、或在2-和6-位由氯取代且在4-位由甲基取代的苯环。
V表示-O-CH2-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-O-；W表示4-位由V取代的苯环，且该苯环连接四氢吡啶环1-位上的双键碳原子；X表示-CH2-CH2-、-CH2-SO2-CH2-、-CH2-O-CH2-；T表示-CONR1-，其中R1为环丙基；Q表示-CH2-；
M表示取代的吡啶基-O(CH2)VR5，这里吡啶环由甲基取代，其中R5表示羟基；或-COOR2，其中R2表示氢或甲基；或R5为-CONH2且v为整数2或3；在本发明的一个具体实例中p为整数1或2。
在本发明的一个具体实例中r为整数1、2或3。
在本发明的一个具体实例中s为整数1、2或3。
在本发明的一个具体实例中t为整数3。
在本发明的一个具体实例中u为整数1或2。
在本发明的一个具体实例中v为整数2或3。
在本发明的一个具体实例中w为整数1。
在本发明的一个具体实例中w为整数2。
在本发明的一个具体实例中A和B独立地表示-O-。
在本发明的一个具体实例中取代基R2表示OH或甲基。
在本发明的一个具体实例中取代基R5表示-OH、-COOR2或-CONR2R2’(其中R2和R2’为氢)。
特别优选的通式(I)的化合物选自下列化合物所组成的组(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂-二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[2-(2，6-二氯-4-甲基苯氧基)乙氧基]苯基}-8-氮杂-二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧代-3λ6-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-3-(4-{[(3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]-苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羰基)环丙胺]甲基}-3-甲基-吡啶-2-基氧基)丙酸，(消旋)-(1R*，5S*)-3-(4-{[(3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羰基)环丙胺]甲基}-3-甲基-吡啶-2-基氧基)丙酸甲酯，和(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂-二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸[2-(2-氨甲酰基乙氧基)-3-甲基-吡啶-4-基甲基]环丙酰胺。
本发明的一个具体实例是通式(I)的化合物。
通式I其中Y和Z相互独立地表示氢、氟、甲基，或Y和Z一起形成环丙基环；如果k表示整数1，Y和Z同时表示氢。
X表示-(CH2)m-N(L)-(CH2)m-、-CH2-CH(K)-CH2-、-CH2CH2-、-CH2OCH2-、-CH2SCH2-、-CH2SOCH2-、-CH2SO2CH2-、-CO-NL-CO-、-CO-NL-CHR6-、-CHR6-NL-CO-；
W表示六-元非苯并的苯基或3-或4-位由V取代的杂芳基环。
V表示一个键、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-、-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B独立地表示-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U表示芳基、杂芳基；T表示-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-、-COO-；Q表示低级亚烷基、低级亚烯基；M表示芳基-O(CH2)vR5、杂芳基-O(CH2)vR5、芳基-O(CH2)2O(CH2)wR5、杂芳基-(CH2)2O(CH2)wR5；L表示-R3、-COR3、-COOR3、-CONR2R3、-SO2R3、-SO2NR2R3、-COCH(芳基)2；K表示-H、-CH2OR3、-CH2NR2R3、-CH2NR2COR3、-CH2NR2SO2R3、-CO2R3、-CH2OCONR2R3、-CONR2R3、-CH2NR2CONR2R3、-CH2SO2NR2R3、-CH2SR3、-CH2SOR3、-CH2SO2R3；R1表示氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基；
R2和R2’独立地表示氢、低级烷基、低级烯基、环烷基、环烷基-低级烷基；R3表示氢、低级烷基、低级烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基-低级烷基、芳基-低级烷基、杂芳基-低级烷基、杂环基-低级烷基、芳氧基-低级烷基、杂芳氧基-低级烷基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代、二取代或三取代羟基、-OCOR2、-COOR2、低级烷氧基、氰基、-CONR2R2’、CO-吗啉-4-基、CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’或低级烷基，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；R4和R4’独立地表示氢、低级烷基、环烷基、环烷基-低级烷基、羟基-低级烷基、-COOR2、-CONH2；R5表示-OH、-OCOR2、-COOR2、-NR2R2’、-OCONR2R2’、-NCONR2R2’、氰基、-CONR2R2’、SO3H、-SONR2R2’、-CO-吗啉-4-基、-CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；R6表示氢、低级烷基、低级烷氧基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代羟基、-CONH2，、-COOH、咪唑啉基、-NH2、-CN、-NH(NH)NH2；k为整数0或1；m和n表示整数0或1，附带条件是如果m表示该整数1，n表示整数0；n如果表示整数1，m表示整数0；k如果表示整数0，n表示整数0；X不表示-(CH2)m-N(L)-(CH2)m-，n表示整数0。
p为整数1、2、3或4；r为整数1、2、3、4、5或6；s为整数1、2、3、4或5；t为整数1、2、3或4；
u为整数1、2或3；v为整数2、3或4；w为整数1或2；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
本发明涉及一种用于预防和/或治疗与下列相关的疾病的方法，如高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、肾功能不全、肾缺血、肾衰竭、肾纤维化、心功能不全、心脏肥大、心脏纤维化、心肌缺血、心肌病、血管球性肾炎、肾绞痛、糖尿病性并发症比如肾病、血管病变和神经病、青光眼、高眼内压、动脉粥样硬化、再狭窄柱血管成形术、血管或心脏术后并发症、勃起功能障碍、醛甾酮过多症、肺部纤维化、硬皮病、焦虑、认知紊乱、使用免疫抑制剂治疗引起的并发症、以及其他目前已知的与肾素-血管紧张素系统相关的疾病，该方法包括给人或动物服用以上定义的化合物。
在另一个具体实例中，本发明涉及一种用于预防和/或治疗与下列相关的疾病的方法，如高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、肾功能不全、肾缺血、肾衰竭、肾纤维化、心功能不全、心脏肥大、心脏纤维化、心肌缺血、心肌病、糖尿病性并发症比如肾病、血管病变和神经病。
在另一个具体实例中，本发明涉及一种用于预防和/或治疗与肾素-血管紧张素系统调节异常相关的疾病，以及上述疾病的治疗。
本发明还涉及通式(I)化合物用于制备一种治疗和/或预防上述疾病的药剂的用途。
本发明还另外涉及一种药物组合物，其包含至少一种式(I)的化合物和药学上可接受的载体材料或辅助剂。该药物组合物可以用于治疗或预防上述病症；以及用于制备一种治疗和/或预防上述疾病的药剂。
式(I)化合物的衍生物和上述药物组合物还可被用于与一种或多种其它的药理学活性物质联合使用，包括ACE-抑制剂、中性肽链内切酶抑制剂、血管紧张素II受体拮抗体、内皮素受体拮抗体、血管扩张剂、钙拮抗剂、钾活化剂、利尿剂、交感神经阻滞剂、β-肾上腺素能拮抗剂、α-肾上腺素能拮抗剂或与其它对上述疾病的预防或治疗有益的药物联合。
在优选的具体实例中，使用量为每天2mg～1000mg。
在特别优选的具体实例中，使用量为每天1mg～500mg。
在更特别优选的具体实例中，使用量为每天5mg～200mg。
所有形式的导致一个包含在通式(I)中的活性组分的前药也包括在本发明中。
式(I)化合物及其药学上可接受的酸加成盐可以例如包含至少一种式(I)的化合物和药学上可接受的载体材料或辅助剂的药物组合物的形式用作药剂。这些药物组合物可以用于肠道给药、非肠道给药、或局部给药。其可以例如经口给药的(例如片剂、糖衣片、糖锭剂、硬胶囊或软胶囊、溶液、乳液或悬浮液的形式)、直肠给药的(例如栓剂形式)、非肠道给药的(例如注射溶液或浸剂溶液形式)、或表面给药的(例如以膏剂、乳膏或油类形式)。
可以本领域熟练技术人员熟知的方式来制造药物制剂，即，通过一种已知方法方式，将所述的式(I)化合物及其药学上可接受的酸加成盐，任选地与其他有治疗价值的物质混合，与适当的、非毒性、惰性、治疗上相容的固体或液体载体材料，以及如果需要，常见的药品辅助剂，制成一种盖仑制剂服用形式。
适当的载体材料不仅可以是无机载体材料，也可以是有机载体材料。因此，例如乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐等可被用作例如片剂、糖衣片剂、糖锭剂、和硬胶囊的载体材料。用于软胶囊的适当的载体材料为例如植物油、蜡脂肪以及半固体和液体多元醇(取决于活性成分的性质，然而，在软胶囊中并不需要载体)。用于该制造的溶液和糖浆适当的载体材料为例如水、多元醇、蔗糖、转化糖等等。用于注射液的适当的载体材料为例如水、醇、多元醇、甘油和植物油。用于栓剂的适当的载体材料为例如天然或硬化油类、蜡、脂肪和半或液体多元醇。用于局部给药的制剂适当的载体材料为甘油酯、半和合成物甘油酯、氢化油、液体蜡、液体石蜡、液体脂肪醇、甾醇、聚乙二醇和纤维素衍生物。
可以考虑将常见的稳定剂、防腐剂、湿润剂和乳化剂、稠度改善剂、气味改善剂、用于改变渗透压力的盐、缓冲剂、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧化剂作为药品辅助剂。
式(I)化合物的剂量可以在很大范围内变化并取决于所控制的疾病、患者的年龄和个体情况以及给药模式，并且在各个具体情形中应适应于个体的要求。
本发明的另外形式涉及一种制备含通式(I)衍生物的药物组合物的方法。根据所述步骤，通式(I)的一种或多种活性成分与已知的惰性赋形剂混合。
可以通过下述实施例中所描述的方法或类似方法制造通式(I)的化合物。
前体的制备前体是指被制备成关键中间体和/或砌块并同时适合于进行进一步转化的化合物。此处大多数化学应用在专利申请WO03/093267和WO04/002957中已有描述。
如
图1所述，已知的化合物A可被衍生为三氟甲磺酸B。X1表示通式(I)中取代基X的前体。取代基X1可以在任何合成阶段很方便地变成取代基X。Negishi-型偶联(或使用过渡金属进行其它任何偶联催化)得到C型化合物，其中Ra表示如通式(I)中所定义的U-V基团的前体。通过基本的化学操作可以很容易将Ra转化为U-V基团。经保护基处理(→D型化合物)，通过去保护和Mitsunobo-型反应调整W-V-U连接程序，得到E型化合物。水解酯得到F型羧酸，然后酰胺与G型化合物耦合。除去Boc-保护基和烷化或酰化作用，得到H型的前体。
图1 图2描述了溴代芳基成分的制备。Mitsunobo偶联(→J型化合物)或一种醇和一种苄型氯化物(或溴化物→K型化合物)烷化通常是最便利的方法。按照这些方法，从1-(3-氯代丙氧基甲基)-2-甲氧苯(Vieira E.et al.，Bioorg.Med.Letters，1999，9，1397)或3-(5-溴代吡啶-2-基氧基)丙烷-1-醇(专利申请WO 98/39328)一步制得衍生物L和M。也可以使用用于制备醚或硫醚的其它方法，像韦廉穆森(Williamson)合成法(见例如March，J，″Advanced Organic Chemistry，″，3rded.，John Wiley and sons，1985)。
图2 仲胺的制备仲胺的制备可以如图3举例描述的方法。吡啶衍生物N可以市售的2-氯-异烟酰氯化物制得。比如用BuLi在该衍生物的3-位脱质子化，随后用适合的亲电子试剂烷化得到O型衍生物，其中Rd表示可用化学引进且之后可转化为通式(I)描述的所需取代基的合适取代基。用DIBAL酰胺还原为醛得到P型化合物，然后还原胺化得到O型胺，这里R1表示如上定义的取代基。最后用HO(CH2)VR5型醇取代氯原子得到R型胺，其中R5可以仍是保护的。可以用同样的方法制备HO(CH2)2O(CH2)WR5型醇。
图3 对苯基衍生物而言，最好从S型化合物开始，其中PG’表示适合的保护基。酰胺与N-甲苯胺偶联得到T型衍生物，然后去保护得到U型衍生物。经Mitsunobu型反应或由相应的卤代烷构成醚键，得到V型化合物。还原得到W型醛，然后还原胺化得到X型胺。可以用同样的方法制备HO(CH2)2O(CH2)WR5型醇。
图4 最终化合物的制备从如上所述制备的前体，最终化合物可以用类似化学技术制备。具体实例参见试验部分。H型二氮杂二环壬烯可以用标准步骤(图5)去保护。通过预备的HPLC纯化产生相应的TFA盐或甲酸盐。
图5 下述实施例用于更具体地说明本发明。但是，这些实施例并非是对本发明的范围的任何限制。
实施例缩写ACE血管紧张肽转化酶Ang血管紧张素aq.含水的Boc叔丁氧基羰基BSA牛血清白蛋白Bu 正丁基BuLi 正丁基锂conc. 浓缩DIBAL 二异丁基氢化铝DIPEA 二异丙基乙胺DMAP 4-N，N-二甲基氨基吡啶DMFN，N-二甲基甲酰胺DMSO 二甲基亚砜EDC·HCl 乙基-N，N-二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸盐EIA酶免疫测定Et 乙基EtOAc 乙酸乙酯FC 快速闪蒸色谱HOBt 羟基苯并三唑MeOH 甲醇org. 有机PG 保护基
RAS 血管紧张肽原酶血管紧张素系统rt. 室温sat.饱和的sol.溶液TBAF四正丁基氟化铵TBDMS 叔丁基二甲基甲硅烷基TEMPO 2，2，6，6-四甲基吡啶-1-烃氧基Tf 三氟甲磺酰基TFA 三氟乙酸THF 四氢呋喃前体的制备(消旋)-(1R*，5S*)-8-甲基-3-三氟甲烷硫酰氧基-8-氮杂二环-[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸甲酯(B1)将化合物8-甲基-3-氧代-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸甲酯(Majewski，M.，Lazny，R.，J.Org.Chem.，1995，60，5825，1.81g，9.12mmol)的THF(35mL)溶液冷却至0℃，加入NaH(约60％，溶于矿物油，435mg，约10.0mmol)。观察到逸出气体。20分钟后，加入Tf2NPh(3.86g，10.8mmol)。10分钟后，除去冰浴。搅拌该溶液一整夜并用EtOAc稀释，用盐水洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化，得到标题化合物(2.37g，78％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-三氟甲烷硫酰氧基-3-硫-9-氮杂-二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(B2)从二异丙基胺(5.8mL，41.2mmol)、BuLi(1.6M，溶于己烷，26.2mL，42.0mmol)和THF(60mL)制得LDA溶液。该溶液冷却至-78℃并逐滴加入9-甲基-3-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬烷-7-one(Jerchel，D；et al.；JustusLiebigs Ann.Chem.，1957，607，126；Zirkle，C.L.；et al.；J.Org.Chem.，1961，26，395，6.42g，37.5mmol)的THF(70mL)溶液超过3分钟。该反应混合物在-78℃下搅拌3小时，然后加入甲基氰基甲酸酯(3.87mL，48.9mmol)。该反应混合物在-78℃下搅拌1小时，然后加入溶有AgNO3(9.12g，53.7mmol)的H2O/THF(1∶1，70mL)溶液。10分钟后加入H2O(35mL)和AcOH(35mL)并将反应混合物升温至室温。加入氨树胶(25％，溶于水，120mL)。用CH2Cl2萃取反应混合物(2次)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化残渣，得到中间体甲酯(7.59g，88％)。
将之前二环壬酮产物(550mg，2.40mmol)的THF(10mL)溶液冷却至0℃，加入NaH(约60％，溶于矿物油，144mg，约3.60mmol)。观察到逸出气体。20分钟后，加入Tf2NPh(1.11g，3.12mmol)。10分钟后，除去冰浴。搅拌该溶液一整夜并用EtOAc稀释，用盐水洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化，得到油状标题化合物(667，77％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-三氟甲烷硫酰氧基-3-氧杂-9-氮杂-二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(B3)将溶有NaH(0.91g，60％，溶于油，21mmol)和二甲基碳酸盐(2.18g，24mmol)的环己烷(16mL)混合物在氮气下加热至60℃。加入9-甲基-7-氧代-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬烷(Jerchel，D；et al.；Justus Liebigs Ann.Chem.，1957，607，126；Zirkle，C.L.；et al.；J.Org.Chem.，1961，26，395，1.55g，10.0mmol)并在回流中搅拌混合物2小时。将混合物冷却至室温，加入冰和水。分离相，并用水洗涤有机相(1次)。含水萃取物用NH4Cl饱和溶解并用CHCl3萃取。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化残渣，得到中间体甲酯(1.02g，48％)。
将以上得到产物(4.67g，21.9mmol)的THF(100mL)溶液冷却至0℃，加入NaH(约60％，溶于矿物油，1.13g，约26mmol)。观察到逸出气体。20分钟后，加入Tf2NPh(10.0g，28mmol)。10分钟后，除去冰浴。搅拌该溶液一整夜并用EtOAc稀释，用盐水洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化，得到油状标题化合物(6.11g，81％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(叔丁二甲基硅烷氧基)丙基]苯基}-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸甲酯(C1)将[3-(4-溴苯基)丙氧基]-叔丁基二甲基硅烷(Kiesewetter D.O.，Tetrahedron Asymmetry，1993，4，2183；16.47g，50.0mmol)的THF溶液(250mL)冷却至-78℃。加入BuLi(1.6M，溶于己烷，31.0mL，50mmol)。30分钟后加入ZnCl2(1M，溶于THF，52mL，52mmol，由ZnCl2在150℃下干燥整夜和THF制得)。将混合物升温至室温。加入乙烯基三氟甲磺酸B1(7.90g，24.0mmol)的THF(20mL)，然后加入Pd(PPh3)4(500mg，0.43mmol)。加热该混合物至回流90分钟，并加入1M HCl(1mL)水溶液。混合物用EtOAc稀释并用1M NaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化残渣，得到标题化合物(8.44g，82％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[2-(叔丁二甲基硅烷氧基)乙氧基]苯基}-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸甲酯(C2)将[2-(4-溴代苯氧基)乙氧基]-叔丁基二甲基硅烷(专利申请WO03/093267，26.2g，79.0mmol)的THF(450mL)溶液冷却至-78℃。加入BuLi(1.6M，溶于己烷，49.4mL，79.0mmol)。30分钟后加入ZnCl2(1M，溶于THF，85.3mL，85.3mmol，由ZnCl2在150℃下干燥整夜和THF制得)。将混合物升温至室温。加入乙烯基三氟甲磺酸B1(14.5g，44.0mmol)的THF(50mL)，然后加入Pd(PPh3)4(913mg，0.78mmol)。加热该混合物至40℃30分钟，并加入1M HCl(1mL)水溶液。混合物用EtOAc稀释并用1MNaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC(MeOH/CH2Cl22∶98→4∶96→10∶90→15∶85)纯化残渣，得到标题化合物(13.6g，71％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(叔丁二甲基硅烷氧基)丙基]苯基}-9-甲基-3-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(C3)将[3-(4-溴苯基)丙氧基]-叔丁基二甲基硅烷(Kiesewetter D.O.，Tetrahedron Asymmetry，1993，4，2183；1.52g，4.61mmol)的THF溶液(20mL)冷却至-78℃。加入BuLi(1.6M，溶于己烷，2.88mL，4.61mmol)。30分钟后加入ZnCl2(1M，溶于THF，5.00mL，5.00mmol，由ZnCl2在150℃下干燥整夜和THF制得)。将混合物升温至室温。加入乙烯基三氟甲磺酸B2(667mg，1.85mmol)的THF(20mL)，然后加入Pd(PPh3)4(107mg，0.093mmol)。加热该混合物至50℃30分钟，并加入1M HCl(1mL)水溶液。混合物用EtOAc稀释并用1M NaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化残渣，得到标题化合物(818mg，96％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(叔丁二甲基硅烷氧基)丙基]苯基}-9-甲基-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(C4)将[3-(4-溴苯基)丙氧基]-叔丁基二甲基硅烷(Kiesewetter D.O.，Tetrahedron Asymmetry，1993，4，2183；9.88g，30.0mmol)的THF溶液(200mL)冷却至-78℃。加入BuLi(1.6M，溶于己烷，18.7mL，30.0mmol)。30分钟后加入ZnCl2(1M，溶于THF，30mL，30mmol，由ZnCl2在150℃下干燥整夜和THF制得)。将混合物升温至室温。加入乙烯基三氟甲磺酸B3(5.87g，17.0mmol)的THF(30mL)，然后加入Pd(PPh3)4(390mg，0.34mmol)。加热该混合物至40℃持续30分钟，并加入1M HCl(1mL)水溶液。混合物用EtOAc稀释并用1M NaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化残渣，得到标题化合物(5.87g，77％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-[4-(3-(羟基丙基)苯基]-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2，8-二羧酸8-叔丁酯2-甲酯(D1)将1-氯乙基氯甲酸酯(7.98g，56.0mmol)加入二环辛烯C1(8.07g，18.8mmol)的1，2-二氯乙烷(120mL)溶液中。加热溶液至回流。4小时后，冷却该反应混合物至室温，在减压条件下除去溶剂。加入MeOH(100mL)。在75℃下搅拌该混合物30分钟，并在减压条件下除去溶剂。用EtOAc稀释残渣并用1M NaOH水溶液洗涤(2次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。残渣溶于CH2Cl2(50mL)，加入DIPEA(4.70g，36.0mmol)，并将该混合物冷却至0℃。加入Boc2O(4.65g，21.0mmol)并在0℃下搅拌该混合物1小时，然后在室温下搅拌2小时。该混合物用1M HCl水溶液(1次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化残渣，得到标题化合物(4.81g，64％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-[4-(2-(羟基乙氧基)苯基]-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2，8-二羧酸8-叔丁酯2-甲酯(D2)将1-氯乙基氯甲酸酯(34.5mL，316mmol)和NaHCO3(29.2g，348mmol)加入二环辛烯C2(13.6g，31.6mmol)的1，2-二氯乙烷(270mL)溶液中。加热溶液至回流。90分钟后，冷却该反应混合物至室温，过滤，在减压条件下除去溶剂。残渣在高真空中干燥。加入MeOH(200mL)。在75℃下搅拌该混合物30分钟，并在减压条件下除去溶剂。用CH2Cl2稀释残渣并用10％Na2CO3水溶液洗涤(2次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。残渣在高真空中干燥。残渣溶于CH2Cl2(270mL)，加入DIPEA(21.6mL，126mmol)，并将该混合物冷却至0℃。加入Boc2O(7.60g，34.8mmol)并在0℃下搅拌该混合物1小时，然后在室温下搅拌整夜。该混合物用1M HCl水溶液(1次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(EtOAc/heptane 1∶8→1∶4→3∶7→1∶1→7∶3→EtOAc)纯化残渣，得到标题化合物(5.66g，44％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-[4-(3-(羟基丙基)苯基]-3-硫-9-氮杂二环[3.3.1]-壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔丁酯6-甲酯(D3)将1-氯乙基氯甲酸酯(1.93mL，17.7mmol)加入二环壬烯C3(818mg，1.77mmol)和NaHCO3(1.49g，17.7mmol)的1，2-二氯乙烷(20mL)溶液中。加热溶液至回流。3小时后，冷却该反应混合物至室温，过滤，在减压条件下彻底除去溶剂。加入MeOH(20mL)并在60℃下搅拌该混合物20分钟。冷却混合物至室温并在减压条件下除去溶剂。残渣溶于CH2Cl2(20mL)，加入DIPEA(1.82mL，10.6mmol)，并将该混合物冷却至0℃。加入Boc2O(1.16g，5.31mmol)并在0℃下搅拌该混合物30分钟，然后在室温下搅拌30分钟。该混合物用1M HCl水溶液(1次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化残渣，得到标题化合物(586mg，76％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-[4-(2-(羟基丙基)苯基]-3，3-二氧代-3λ6-硫-9-氮杂-二环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔丁酯6-甲酯(D4)化合物D3(586mg，1.35mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液冷却至0℃并加入3-氯过苯甲酸(70％，359mg，2.97mmol)。在室温下搅拌混合物2小时并再次加入3-氯过苯甲酸(70％，359mg，2.97mmol)。再次搅拌混合物2小时并用更多CH2Cl2稀释。该混合物用饱和的NaHCO3水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化残渣，得到标题化合物(578mg，92％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-[4-(3-(羟基丙基)苯基]-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]-壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔丁酯6-甲酯(D5)
将1-氯乙基氯甲酸酯(5.90g，41mmol)加入二环壬烯C4(5.72g，12.8mmol)的1，2-二氯乙烷(75mL)溶液中。加热溶液至回流。4小时后，冷却该反应混合物至室温，在减压条件下除去溶剂。用MeOH(50mL)稀释残渣，在室温下搅拌混合物20分钟，然后在80℃下搅拌45分钟。在减压条件下除去溶剂且残渣溶于CHCl3。该混合物用1M NaOH水溶液(1次)和盐水(1次)洗涤。用CHCl3萃取该结合的含水萃取物(2次)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。残渣溶于CH2Cl2(60mL)，加入DIPEA(3.18g，24.6mmol)，并将该混合物冷却至0℃。加入Boc2O(3.14g，14.4mmol)并在0℃下搅拌该混合物1小时，然后在室温下搅拌2小时。该混合物用1M HCl水溶液(1次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化残渣，得到标题化合物(4.17g，78％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-3，8-二羧酸8-叔丁酯2-甲酯(E1)向溶有二环辛烯D1(1.04g，2.59mmol)、2-氯-3，6-三氟苯酚(833mg，5.10mmol)和偶氮二羧基二哌啶(1.29g，5.10mmol)的甲苯溶液(25mL)中加入三丁基磷化氢(1.61mL，7.2mmol)。加热该混合物至回流2小时，并冷却至室温。在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化，得到标题化合物(1.11g，78％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[2-(2，6-二氯-4-甲基苯氧基)乙氧基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2，8-二羧酸8-叔丁酯2-甲酯(E2)向溶有化合物D2(5.56g，14.0mmol)、2，6-二氯-p-甲酚(3.71g，21.0mmol)和偶氮二羧基二哌啶(5.30g，21.0mmol)的甲苯溶液(120mL)中加入PBu3(12.1mL，42mmol)。加热该混合物至回流1小时。冷却至室温，在减压条件下除去部分溶剂。使用EtOAc稀释残渣。用1M NaOH水溶液洗涤混合物(2次)并在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC(EtOAc/庚烷1∶9→2∶8→3∶7)纯化残渣，得到标题化合物(5.95g，76％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧代-3λ6-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔丁酯6-甲酯(E3)向溶有二环壬烯D4(578mg，1.24mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(407mg，2.48mmol)和偶氮二羧基二哌啶(626mg，2.48mmol)的甲苯溶液(10mL)中加入三丁基磷化氢(85％，1.08mL，3.72mmol)。加热该混合物至回流2小时，并冷却至室温。在减压条件下除去部分溶剂。使用FC纯化残渣，得到标题化合物(668mg，88％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔丁酯6-甲酯(E4)向溶有二环壬烯D5(4.04g，9.7mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(2.89g，17.5mmol)和偶氮二羧基二哌啶(7.05g，30.0mmol)的甲苯溶液(80mL)中加入三丁基磷化氢(7.05g，30.0mmol)。加热该混合物至回流2小时，并冷却至室温。在减压条件下除去部分溶剂。使用FC纯化残渣，得到标题化合物(4.60g，84％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2，8-二羧酸8-叔丁酯(F1)二环辛烯E1(2.42g，4.40mmol)溶于EtOH(50mL)。加入1M NaOH(40mL)水溶液并加热混合物至80℃。在80℃下搅拌该溶液5小时并冷却至室温。用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后用EtOAc萃取混合物(3次)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化残渣，得到标题化合物(2.48g，定量的产量)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[2-(2，6-二氯-4-甲基苯氧基)乙氧基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2，8-二羧酸8-叔丁酯(F2)将化合物E2(5.95g，10.6mmol)的EtOH(120mL)溶液加热至70℃。加入1M NaOH(95mL)水溶液并在70℃下搅拌混合物。4小时后冷却混合物至室温。在减压条件下除去部分溶剂。用EtOAc稀释残渣并加入1M HCl水溶液至pH＝1。振荡并分离相。用EtOAc萃取水相(2次)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。在高真空中干燥残渣得到标题原生化合物(5.88g，定量的产量)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧代-3λ6-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔丁酯(F3)二环壬烯E3(668mg，1.09mmol)溶于EtOH(7mL)。加入1M NaOH(3mL)水溶液并加热混合物至80℃。在80℃下搅拌该溶液5小时并冷却至室温。用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后用EtOAc萃取混合物(3次)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。残渣可直接用于下一步反应而无需纯化(624mg，96％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔丁酯(F4)二环壬烯E4(4.60g，25mmol)溶于EtOH(200mL)。加入1M NaOH(200mL)水溶液并加热混合物至80℃。在80℃下搅拌该溶液5小时并冷却至室温。用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后用EtOAc萃取混合物(3次)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。使用FC纯化残渣，得到标题化合物(4.50g，定量的产量)。
(消旋)-(1R*，5S*)-2-({2-[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}环丙基氨基甲酰)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟-苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(G1)向化合物F1(3.45g，6.46mmol)的CH2Cl2(60mL)溶液中加入胺R(2.26g，6.46mmol)、DMAP(197mg，1.62mmol)、DIPEA(4.42mL，25.8mmol)、HOBt(1.30g，9.69mmol)和EDC.HCl(3.09g，16.2mmol)。在室温下搅拌混合物一整夜。加入EDC.HCl(2.00g，1.00mmol)和DIPEA(3.50mL，20.4mmol)。在室温下搅拌混合物3天。加入胺R(2.00g，5.71mmol)、EDC.HCl(2.00g，1.01mmol)、和HOBt(1.00g，7.40mol)。2天后(共6天)用更多CH2Cl2稀释该混合物，并用1M HCl水溶液(3次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(EtOAc/庚烷1∶4→3∶7→2∶4)纯化残渣，得到标题化合物(3.43g，61％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-2-({2-[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}环丙基氨基甲酰)-3-{4-[2-(2，6-二氯-4-甲基-苯氧基)乙氧基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(G2)向化合物F2(3.50g，6.38mmol)的CH2Cl2(60mL)溶液中加入胺R(2.28g，6.38mmol)、DMAP(195mg，1.60mmol)、DIPEA(4.26mL，25.5mmol)、HOBt(1.29g，9.57mmol)和EDC.HCl(3.06g，16.0mmol)。在室温下搅拌混合物一整夜。加入EDC.HCl(2.00g，1.01mmol)和DIPEA(3.50mL，21.0mmol)。在室温下搅拌混合物3天。加入胺R(2.00g，5.60mmol)、EDC.HCl(2.00g，1.01mmol)、和HOBt(1.00g，7.40mol)。2天后(共6天)用更多CH2Cl2稀释该混合物，并用1M HCl水溶液(3次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(EtOAc/庚烷1∶4→3∶7→2∶4)纯化残渣，得到标题化合物(2.95g，52％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-6-({2-[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}环丙基氨基甲酰)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟-苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧代-3λ6-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔丁酯(G3)向化合物F3(2.23g，3.72mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中加入胺R(1.96g，5.59mmol)、DMAP(114mg，0.93mmol)、DIPEA(2.25mL，14.9mmol)、HOBt(757mg，5.59mmol)和EDC.HCl(1.79g，9.32mmol)。在室温下搅拌混合物一整夜。加入EDC.HCl(716mg，3.72mmol)。2天后(共3天)用更多CH2Cl2稀释该混合物，并用1M HCl水溶液(3次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl21∶99→2∶98→3∶97→4∶96→5∶95→1∶9)纯化残渣，得到标题化合物(2.16g，62％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-6-({2-[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}环丙基氨基甲酰)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟-苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔丁酯(G4)向化合物F4(2.05g，3.72mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中加入胺R(1.96g，5.59mmol)、DMAP(114mg，0.93mmol)、DIPEA(2.25mL，14.9mmol)、HOBt(757mg，5.59mmol)和EDC.HCl(1.79g，9.32mmol)。在室温下搅拌混合物一整夜。加入EDC.HCl(716mg，3.72mmol)。2天后(共3天)用更多CH2Cl2稀释该混合物，并用1M HCl水溶液(3次)和饱和的NaHCO3水溶液(1次)洗涤。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl21∶99→2∶98→3∶97→4∶96→5∶95)纯化残渣，得到标题化合物(3.00g，91％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-2-{环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基-吡啶-4-基甲基]-氨基甲酰}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(G5)在0℃下，向实施例1(1.19g，1.82mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入DIPEA(0.80mL，4.56mmol)和Boc2O(0.61g 2.74mmol)。混合物在0℃下搅拌30分钟并在减压条件下蒸馏。加入饱和NH4Cl(5mL)水溶液，并用CH2Cl2萃取混合物(3次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(EtOAc/庚烷＝1∶1)纯化残渣，得到标题化合物(1.09g，80％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-2-{[2-(2-羧基乙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]环丙基氨基甲酰}-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(G6)向化合物G5(400mg，0.53mmol)的含TEMPO(0.4mg)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入含KBr(6.4mg)和Bu4NCl(7.8mg)的饱和NaHCO3(0.22mL)水溶液。混合物冷却至0℃并逐滴加入NaOCl(2M，1.2ml)、NaHCO3(0.56mL)和盐水(1.2mL)溶液超过45分钟。得到分离的两层。含水层用浓缩的HCl溶液酸化并用CH2Cl2萃取(3x)。在Na2SO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl21∶9)纯化残渣，得到标题化合物(154mg，38％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-2-{环丙基-[2-(2-甲酯基乙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]-氨基甲酰}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(G7)将化合物G6(110mg，0.14mmol)和Dowex 50H+(0.13g)的MeOH(5mL)溶液在室温下搅拌24小时。过滤后在减压条件下蒸馏反应混合物，原生的标题化合物可直接用于下-步反应而无需纯化(70mg，64％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-2-{[2-(2-氨基甲酰乙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]环丙基氨基甲酰}-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(G8)将溶有化合物G6(70mg，0.09mmol)、EDC.HCl(44.6mg，0.228mmol)和NH3(25％，0.10ml)水溶液的CH2Cl2(5ml)溶液在室温下搅拌24小时。得到分离的两层，并用CH2Cl2萃取水相(1x)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl29∶1)纯化残渣，得到标题化合物(54mg，79％)。
2-氯-N-苯基异烟酰胺(N)在0℃下，在约30分钟内，向2-氯异烟酰氯化物(Anderson，W.K.，Dean，D.C.，Endo，T.，J.Med.Chem.，1990，33，1667，10g，56.8mmol)的1，2-二氯乙烷(100mL)溶液加入溶有苯胺(5.70mL，62.5mmol)和DIPEA(10.2ml，59.6mmol)的1，2-二氯乙烷(10mL)溶液。该反应在0℃下搅拌约30分钟随后在95℃下搅拌1小时。在室温下加入水(30mL)并滤出混合物。滤液用CH2Cl2(200mL)萃取。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。残渣在MeOH/水1∶10(110mL)中结晶得到标题化合物(12.12g，92％)。LC-MSRT＝0.87min；ES+＝233.1。
2-氯-3-N-二甲基-N-苯基异烟酰胺(O)在-78℃下，向化合物N(8.79g，37.8mmol)的THF(90mL)溶液中加入BuLi(1.6M，溶于己烷，52mL，83.2mmol)。30分钟后，在相同温度下逐滴加入MeI(7.70mL，124mmol)。混合物在-78℃下搅拌1小时并升温至33℃。混合物在33℃下搅拌30分钟。在室温下逐滴加入10％NH4OH水溶液，且混合物用Et2O萃取。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化，得到标题化合物(8.67g，88％)。LC-MSRT＝0.85min；ES+＝261.2。
2-氯-3-甲基吡啶-4-甲醛(P)在-78℃下，向吡啶衍生物O(9.58g，36.7mmol)的CH2Cl2(190mL)溶液加入DIBAL(1M，溶于CH2Cl2，55.1mL，55.1mmol)，该混合物在-78℃下搅拌1.5小时。加入饱和的酒石酸单钠单钾盐水溶液(20mL)并加热混合物至室温。加入水并用CH2Cl2萃取混合物。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化残渣，得到标题化合物(4.4g，77％)。LC-MSRT＝0.76min；ES+＝156.1。
(2-氯-3-甲基吡啶-4-基甲基)-环丙基胺(Q)溶有醛P(4.70g，30.2mmol)和环丙基胺(4.20ml，60.4mmol)的MeOH(65mL)在室温下搅拌4小时。加入NaBH4(1.55g，39.2mmol)并在室温下搅拌混合物12小时。随后加入水和1M NaOH，并在减压条件下除去部分溶剂。用CH2Cl2萃取水相(2次)。在MgSO4上干燥合成的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化残渣，得到标题化合物(4.66g，79％)。LC-MSRT＝0.43min；ES+＝197.1。
{2-[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基吡啶-4-基甲基}-环丙基胺(R)溶有胺Q(1.24g，6.30mmol)和2-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-丙烷-1-醇(403mg，10.1mmol)的二氧己环(5mL)溶液在115℃下加热12小时。在减压条件下除去溶剂，加入水，用Et2O萃取混合物(2次)。在MgSO4上干燥结合的有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC纯化粗制品，得到标题化合物(192mg，9％)。LC-MSRT＝0.84min；ES+＝351.4。
最终化合物的制备实施例1(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸环丙基-[2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺将化合物G1(3.43g，3.95mmol)的CH2Cl2(35mL)溶液冷却至0℃。加入HCl/二氧己环(4M，35mL)。15分钟后除去冰浴并在室温下搅拌混合物1小时。在减压条件下迅速除去溶剂且残渣在高真空中干燥15分钟。该残渣用CH2Cl2稀释并用1M NaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl25％→10％→15％→20％)纯化残渣，得到标题化合物(1.25g，48％)。
实施例2(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[2-(2，6-二氯-4-甲基苯氧基)乙氧基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸环丙基-[2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺将化合物G2(2.95g，3.34mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液冷却至0℃。加入HCl/二氧己环(4M，30mL)。15分钟后除去冰浴并在室温下搅拌混合物1小时。在减压条件下迅速除去溶剂且残渣在高真空中干燥15分钟。该残渣用CH2Cl2稀释并用1M NaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl25％→10％→15％→20％)纯化残渣，得到标题化合物(1.32g，59％)。
实施例3(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧代-3λ6-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺将化合物G3(2.16g，2.32mmol)的CH2Cl2(25mL)溶液冷却至0℃。加入HCl/二氧己环(4M，25mL)。15分钟后除去冰浴并在室温下搅拌混合物1小时。在减压条件下迅速除去溶剂且残渣在高真空中干燥15分钟。该残渣用CH2Cl2稀释并用1M NaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl26％→8％→10％→15％→20％→30％)纯化残渣，得到标题化合物(740mg，44％)。
实施例4
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺将化合物G4(2.16g，2.32mmol)的CH2Cl2(25mL)溶液冷却至0℃。加入HCl/二氧己环(4M，25mL)。15分钟后除去冰浴并在室温下搅拌混合物1小时。在减压条件下迅速除去溶剂且残渣在高真空中干燥15分钟。该残渣用CH2Cl2稀释并用1M NaOH水溶液洗涤(1次)。在MgSO4上干燥有机萃取物，过滤，并在减压条件下除去溶剂。通过FC(MeOH/CH2Cl26％→8％→10％→15％→20％→30％)纯化残渣，得到标题化合物(1.06g，68％)。
实施例5(消旋)-(1R*，5S*)-3-(4-{[(3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]-苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羰基)环丙胺]甲基}-3-甲基-吡啶-2-基氧基)丙酸化合物G6(70mg)的HCl/Et2O(2M，2mL)溶液在室温下、在N2下搅拌一整夜。蒸馏该反应混合物并用HPLC纯化(9.9mg，15％)。
实施例6(消旋)-(1R*，5S*)-3-(4-{[(3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羰基)环丙胺]甲基}-3-甲基吡啶-2-基氧基)丙酸甲酯化合物G7(70mg)的HCl/Et2O(2M，2mL)溶液在室温下、在N2下搅拌一整夜。蒸馏该反应混合物并用HPLC纯化(13.3mg，20％)。
实施例7(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸[2-(2-氨甲酰基乙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]环丙酰胺化合物G8(50mg)的HCl/Et2O(2M，2mL)溶液在室温下、在N2下搅拌一整夜。蒸馏该反应混合物。通过HPLC纯化得到标题化合物(35mg，76％)。
进行下述试验以便测定通式(I)的化合物及其盐的活性。
通过本发明的化合物对人重组血管紧张肽原酶的抑制在384孔聚丙烯板(Nunc)中实施体外酶试验。试验缓冲剂由包含1mMEDTA和0.1％BSA的10mM PBS(Gibco BRL)BSA组成。孵化液由50μL每孔的酶混合物和2.5μL的溶于DMSO血管紧张肽原酶抑制剂组成。酶混合物是在4℃下预混和的并且包括下述组分·人重组血管紧张肽原酶(0.16ng/mL)·合成人血管紧张素(1-14)(0.5μM)·羟基喹啉硫酸酯(1mM)将该混合物在37℃下孵化3小时。
通过在384孔板(Nunc)进行酶免疫测定(EIA)检测累积的Ang I，以测定酶活性及其抑制。将5μL氟化物或标准品转移到免疫板中，其中在该免疫板上预先涂布有Ang I和牛血清清蛋白的共价配合物(Ang I-BSA)。加入溶于包含0.01％聚山梨酸酯20的上述试验缓冲液的75μL Ang I-抗体，并且在4℃下培育初步孵化一整夜。使用包含0.01％聚山梨酸酯20的PBS洗涤孵化板3次，然后使用抗兔-过氧化物酶偶联抗体(WA 934，Amersham)在室温下孵化2小时。在水洗3次后，加入过氧化物酶基质ABTS(2.2’-连氮基-二-(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸酯)，并在室温下将该板孵化60分钟。使用pH为4.3的0.1M柠檬酸终止反应后，在微板读数器中在405nm下评价该孵化板。计算每个集中点的抑制百分比并且测定在酶活性被抑制50％(IC50)时的血管紧张肽原酶抑制的浓度。所测定的所有混合物的IC50-值都低于10uM。
抑制的实施例实施例10.25nM
实施例20.18nM实施例35.51nM实施例40.55nM实施例53.0nM实施例66.7nM实施例73.0nM
权利要求
1.通式(I)的化合物。 通式I其中Y和Z独立地表示氢、氟、甲基，或Y和Z一起形成环丙基环；X表示-CH2-CH(K)-CH2-、-CH2CH2-、-CH2OCH2-、-CH2SCH2-、-CH2SOCH2-、-CH2SO2CH2-、-CO-NL-CHR6-、-CHR6-NL-CO-；W表示六-元非苯并的苯基或3-或4-位由V取代的杂芳基环。V表示一个键、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-、-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B独立地表示-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U表示芳基、杂芳基；T表示-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-、-COO-；Q表示低级亚烷基、低级亚烯基；M表示芳基-O(CH2)vR5、杂芳基-O(CH2)vR5、芳基-O(CH2)2O(CH2)wR5、杂芳基-(CH2)2O(CH2)wR5；L表示-R3、-COR3、-COOR3、-CONR2R3、-SO2R3、-SO2NR2R3、-COCH(芳基)2；K表示-H、-CH2OR3、-CH2NR2R3、-CH2NR2COR3、-CH2NR2SO2R3、-CO2R3、-CH2OCONR2R3、-CONR2R3、-CH2NR2CONR2R3、-CH2SO2NR2R3、-CH2SR3、-CH2SOR3、-CH2SO2R3；R1表示氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基；R2和R2’独立地表示氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、环烷基-低级烷基；R3表示氢、低级烷基、低级烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基-低级烷基、芳基-低级烷基、杂芳基-低级烷基、杂环基-低级烷基、芳氧基-低级烷基、杂芳氧基-低级烷基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代、二取代或三取代羟基、-OCOR2、-COOR2、低级烷氧基、氰基、-CONR2R2’、CO-吗啉-4-基、CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’或低级烷基，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；R4和R4’独立地表示氢、低级烷基、环烷基、环烷基-低级烷基、羟基-低级烷基、-COOR2、-CONH2；R5表示-OH、-OCOR2、-COOR2、-NR2R2’、-CONR2R2’、-NCONR2R2’、氰基、-OCONR2R2’、SO3H、-SONR2R2’、-CO-吗啉-4-基、-CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；R6表示氢、低级烷基、低级烷氧基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代羟基、-CONH2，、-COOH、咪唑啉基、-NH2、-CN、-NH(NH)NH2；p为整数1、2、3或4；r为整数1、2、3、4、5或6；s为整数1、2、3、4或5；t为整数1、2、3或4；u为整数1、2或3；v为整数2、3或4；w为整数1或2；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
2.根据权利要求1所述的通式(I)的化合物，其中Z、Y、W、V、U、T、Q和M定义如通式(I)且X表示-CH2CH2-。
3.根据权利要求1～2中任一项所述的通式(I)的化合物，其中Z、Y、X、W、V、U、T、Q和M定义如通式(I)且L表示H、-COR3”、-COOR3”、-CONR2”R3”；R2”和R3”分别独立地表示低级烷基，低级环烷基-低级烷基，低级烷基，低级环烷基-低级烷基是不可取代的或被卤素、氰基、羟基、-OCOCH3、-CONH2、-COOH、-NH2所单代，附带条件是如果该碳原子是sp3-杂化其至多连接一个杂原子。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的通式(I)的化合物，其中Z、Y、X、W、V和U定义如通式(I)且T为-CONR1-；Q为亚甲基；M为芳基-O(CH2)vR5、杂芳基-O(CH2)vR5。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的通式(I)的化合物，其中Z、Y、X、V、U、T、Q和M定义如通式(I)且W表示4-取代的苯基。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的通式(I)的化合物，其中Z、Y、X、W、V、Q、T和M定义如通式(I)且U是由卤素、低级烷基或低级烷氧基单-、二-或三取代的苯基。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的式(I)的化合物，其中Z和Y表示氢；U表示独立地由卤素或C1-C4烷基三取代的苯环；V表示-O-CH2-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-、-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-CH2-O-、-CH2-CH2-CH2-O-；W表示4-位由V取代的苯环，且该苯环连接四氢吡啶环1-位上的双键碳原子；X表示-CH2-CH2-、-CH2-SO-CH2-、-CH2-SO2-CH2-、-CH2-O-CH2-；T表示-CONR1-，其中R1为环烷基；Q表示-CH2-；M表示由C1-C4烷基取代的吡啶-O(CH2)vR5，其中R5为羟基；-COOR2，其中R2为氢或C1-C4烷基；或-CONR2R2’，其中R2和R2’为氢或C1-C4烷基。
8.根据权利要求1～7中任一项所述的式(I)的化合物，其中Z和Y表示氢；U表示独立地由卤素三取代的苯环、或在2-和6-位由氯取代且在4-位由甲基取代的苯环。V表示-O-CH2-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-O-；W表示4-位由V取代的苯环，且该苯环连接四氢吡啶环1-位上的双键碳原子；X表示-CH2-CH2-、-CH2-SO2-CH2-、-CH2-O-CH2-；T表示-CONR1-，其中R1为环丙基；Q表示-CH2-；M表示取代的吡啶基-O(CH2)vR5，这里吡啶环由甲基取代，其中R5表示羟基；或-COOR2，其中R2表示氢或甲基；或R5为-CONH2且v为整数2或3。
9.如权利要求1～8任一项所述的化合物，其选自下列化合物所组成的组(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂-二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[2-(2，6-二氯-4-甲基苯氧基)乙氧基]苯基}-8-氮杂-二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧代-3λ6-硫-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-3-(4-{[(3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]-苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羰基)环丙胺]甲基}-3-甲基-吡啶-2-基氧基)丙酸，(消旋)-(1R*，5S*)-3-(4-{[(3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羰基)环丙胺]甲基}-3-甲基-吡啶-2-基氧基)丙酸甲酯，和(消旋)-(1R*，5S*)-3-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-8-氮杂-二环[3.2.1]辛-2-烯-2-羧酸[2-(2-氨甲酰基乙氧基)-3-甲基-吡啶-4-基甲基]环丙酰胺。
10.通式(I)的化合物 通式I其中Y和Z相互独立地表示氢、氟、甲基，或Y和Z一起形成环丙基环；如果k表示整数1，Y和Z同时表示氢。X表示-(CH2)m-N(L)-(CH2)m-、-CH2-CH(K)-CH2-、-CH2CH2-、-CH2OCH2-、-CH2SCH2-、-CH2SOCH2-、-CH2SO2CH2-、-CO-NL-CO-、-CO-NL-CHR6-、-CHR6-NL-CO-；W表示六-元非苯并的苯基或3-或4-位由V取代的杂芳基环。V表示-个键、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-、-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B独立地表示-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U表示芳基、杂芳基；T表示-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-、-COO-；Q表示低级亚烷基、低级亚烯基；M表示芳基-O(CH2)vR5、杂芳基-O(CH2)vR5、芳基-O(CH2)2O(CH2)wR5、杂芳基-(CH2)2O(CH2)wR5；L表示-R3、-COR3、-COOR3、-CONR2R3、-SO2R3、-SO2NR2R3、-COCH(Aryl)2；K表示-H、-CH2OR3、-CH2NR2R3、-CH2NR2COR3、-CH2NR2SO2R3、-CO2R3、-CH2OCONR2R3、-CONR2R3、-CH2NR2CONR2R3、-CH2SO2NR2R3、-CH2SR3、-CH2SOR3、-CH2SO2R3；R1表示氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基；R2和R2’独立地表示氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、环烷基-低级烷基；R3表示氢、低级烷基、低级烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基-低级烷基、芳基-低级烷基、杂芳基-低级烷基、杂环基-低级烷基、芳氧基-低级烷基、杂芳氧基-低级烷基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代、二取代或三取代羟基、-OCOR2、-COOR2、低级烷氧基、氰基、-CONR2R2’、CO-吗啉-4-基、CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’或低级烷基，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；R4和R4’独立地表示氢、低级烷基、环烷基、环烷基-低级烷基、羟基-低级烷基、-COOR2、-CONH2；R5表示-OH、-OCOR2、-COOR2、-MR2R2’、-OCONR2R2’、-NCONR2R2’、氰基、-CONR2R2’、SO3H、-SONR2R2’、-CO-吗啉-4-基、-CO-((4-低级烷基)哌嗪-1-基)、-NH(NH)NH2、-NR4R4’，前提是在碳原子为sp3-杂化时，该碳原子至多与一个杂原子相连；R6表示氢、低级烷基、低级烷氧基，其中这些基团可以不取代或被以下基团单取代羟基、-CONH2，、-COOH、咪唑啉基、-NH2、-CN、-NH(NH)NH2；k为整数0或1；m和n表示整数0或1，附带条件是如果m表示该整数1，n表示整数0；n如果表示整数1，m表示整数0；k如果表示整数0，n表示整数0；X不表示-(CH2)m-N(L)-(CH2)m-，n表示整数0。p为整数1、2、3或4；r为整数1、2、3、4、5或6；s为整数1、2、3、4或5；t为整数1、2、3或4；u为整数1、2或3；v为整数2、3或4；w为整数1或2；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
11.一种药物组合物，其包含至少一种如权利要求1～10任一项所述化合物以及常见的载体材料和辅助剂，其用于治疗和或预防与血管紧张肽原酶血管紧张素系统(RAS)的调节障碍相关的病症的预防和治疗，所述的疾病包括心血管疾病和肾病、高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂处理带来并发症、以及其他目前已知的与RAS相关的疾病。
12.一种用于与RAS相关的疾病的预防和/或治疗的方法，其中所述的疾病包括高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂处理带来的并发症、以及其他目前已知的与RAS相关的疾病，该方法包括给人或动物服用一种权利要求1～10任一项所述的化合物。
13.权利要求1～10任一项所述的的化合物用于治疗和/或预防与RAS相关的疾病的用途，所述疾病包括高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂处理带来并发症、以及其他目前已知的与RAS相关的疾病。
14.如权利要求1～10任一项所述的化合物与一种或多种其他的药理学活性物质结合使用的以治疗如权利要求10～13所述的疾病的用途，其中所述的药理学活性物质包括ACE-抑制剂、血管紧张素II受体拮抗体、内皮素受体拮抗体、血管扩张剂、钙拮抗剂、钾活化剂、利尿剂的、感神经阻滞剂、β-肾上腺素能拮抗剂、以及中性肽链内切酶抑制剂、α-肾上腺素能拮抗剂。
全文摘要
本发明涉及一种新型双环衍生物及相关化合物，并以其作为活性成分制造药物组合物。本发明还涉及该化合物制备方法、包含一种或多种该化合物的药物组合物，并特别涉及它们作为血管紧张肽原酶抑制剂的用途。
文档编号A61P13/12GK1930170SQ200480030679
公开日2007年3月14日 申请日期2004年10月18日 优先权日2003年10月23日
发明者奥利维尔·贝曾康, 蒂埃里·西费朗, 丹尼尔·比尔, 瓦尔特·菲施利, 托马斯·韦勒, 尤博斯·雷门, 西尔维娅·理查德-比洛斯泰恩 申请人:埃科特莱茵药品有限公司