专利名称：含有甾体糖苷的hoodia植物萃取物的制造方法
技术领域：
本发明涉及制造植物萃取物的方法。
背景技术：
可获自萝摩G^c/ep/at/aceae)科植物，详细地说是//ood/a属(原来 的火地亚(7oo&a)和亚罗汉(7Wc/zoc"w/o")属)，的萃取物已经表现出具 有食欲抑制活性。美国专利6376657公开了这些植物包含具有式1的 甾体糖苷
其中
R-烷基；
R]=H、烷基、曱基巴豆酰基(tiglyol)、苯曱酰基或者任何其它的 有机酯基团；
R2=H或者一种或多种6-脱氧碳水化合物，或者一种或多种2,6-二脱氧碳水化合物，或者葡萄糖基团或者其组合；并且其中虚线表示 任选存在于碳原子C4和C5之间或者碳原子C5和C6之间的另外的 键。
美国专利6376657还公开了从//ooc//a植物中萃取式1的甾体糖 苦的方法，包括用溶剂处理植物材料来萃取具有食欲抑制活性的部 分，将萃取溶液与植物材料剩余部分分离，从该萃取物溶液中除去溶剂，任选的用另外的溶剂处理该溶液，和回收萃耳又物。明确公开的溶剂包括亚曱基氯，也称为二氯曱烷(dichloromethane)。该专利还公开了合成不同的甾体糖苦的方法。US7060308 (Rajendran等人)公开了紫龙角(Caralluma)萃取物。 US7008648 (Corley等人)公开了萃取物，该萃取物可获自豹皮花属(Stapelia)和Orbea属植物。WO2005/099737(Rutgers大学)也公开了萃取物和从萝摩(Asclepias)植物中获得萃取物的方法。WO2005/116049 (Unilever)公开了可以依靠液态或者超临界二氧化碳，将甾体糖苷从萝摩G^c/印/ac/"c^e)科植物材料中存在的不期望的成分中进行萃取或者分离。这里存在着对于制备i/ooc^ 萃取物的替代的方法的需要，其产生高含量的甾体糖苷并且适用于食品中(例如氯化溶剂的使用是不需 要的)。取决于植物材料的来源，它们可以包含痕量的重金属如铜或者锌 以及聚芳族烃(PAH),其在萃取加工过程中会富集。因此，这里还需 要获得具有最小的重金属和PAH含量的萃取物的方法。所以，本发明的目标是发展一种制造方法，该方法用来获得具有 高含量甾体糖苷的Z/ooA》植物萃取物，并且其使用食品级溶剂。本发明还有的另外一个目标是从i/oo^a植物中获得副产物如水 溶性短链活性成分(active principles),长链蜡和脂肪酸，该副产物具有 使得它们能够用于其它目的纯度，目的是使得所述的方法更加经济。本发明还有的另外一个目标是发展一种制造方法，其用于获得具 有最小重金属和/或PAH含量的//ood/a萃取物。发明说明由本发明达到了上述和其它目标，本发明包括，其第一方面，获 得含有甾体糖苷的Z/oo^"植物萃取物的方法，该方法包含步骤(a) 将Z/oo^a植物用含水C,-C3脂肪族醇进行萃取来提供水不溶 的废残留物和第一含水萃取物El;(b) 将该第一萃取物El用低级链烷烃(paraffin hydrocarbons)进行 至少一次液-液萃取来提供有机相Al和第二含水萃取物E2;(c) 将第二萃取物E2用低级链烷烃和低级二烷基酮类的含水混合物进行至少一次液-液萃取来提供至少一个含水相A2和至少一个有机萃取物E3;和 (d)将有机萃取物E3干燥到期望的干物质含量来提供包含甾体糖苦的//ooc//a植物萃取物。 根据本发明的方法包括使用所定义的有机溶剂的所定义的多级 液-液萃取，其能够得到/foo^a萃取物，该萃取物表现出基于干燥的 最终产物计算的大于35和典型的大于70重量％的甾体糖苦总含量。 该平衡的多级溶剂避免了使用非食品级材料；所以，可根据本发明所 获得的萃取物符合食品使用所规定的条件。另外的益处得自于这样的 事实，即所述的方法产生(deliver)有机和含水副产物部分，该部分还 含有高产率和良好质量的令人感兴趣的分子如短链活性成分，长链蜡 或者脂肪酸，其可以用于其它的目的，例如化妆品应用中，这赋予了 所述方法附加价值，并使得它更经济。其第二个方面，本发明包括获得含有甾体糖普的Z/oo^a植物萃 取物的方法，该方法包含步骤(a) 萃取Z/ooA"植物来获得萃取物，(b) 用选自吸收剂(absorbents)(例如用于吸附PAH的活性炭)、螯 合剂(例如EDTA或者柠檬酸)和它们的混合物的处理物处理 该萃取物，来获得净化的萃取物；(c) 干燥该净化的萃取物到期望的干物质含量来提供含有甾体糖 苷的Z/ooAa植物萃取物。在还有的另外一方面，本发明包括可获自这些方法的/^o&"植 物萃取物，和混有这样的萃取物的食品。发明详述除了操作和对比实施例，或者这里另有明确指示，否则在该说明 中全部的表示材料量或者反应条件、材料的物理性能和/或用途的数值 被理解为用措词"大约"来修饰。应当指出的是在指定的任何浓度或者量的范围内，任何具体的较 高的浓度可以与任何具体的较低的浓度或者量相组合。为了避免疑义，措词"含有"目的是表示"包括"但是不必定是 "由......组成"或者"由......构成"。换句话说，所列出的步骤或者选项不必是无遗漏的。此处使用的"甾体糖苷(steroidal glycoside)，，表示一种类固醇(四个 稠合的环)，其进一步包含至少一个取代侧基，该侧基是糖苷(一种分 子，在其中糖基团通过它的异头碳(anomeric carbon)，经由O-糖苷键 结合到另一基团上)，优选是脱氧或者二-脱氧糖苷，并且包括如在下 述的HPLC甾体糖苷分析中所述洗提15分钟之后的全部的甾体糖苷。歩骤a-预萃取本发明方法的步骤(a)从//oo&a植物中制造第 一 液体萃取物E1 。 适于作为初始材料的植物是Z/oo^a属的那些。合适的植物包括但不//ooWa goniom'/(丽杯角)，/food/a /wgarW/和它们的混合物。将所述的植物用含水CrC3脂肪族醇，更具体的是用含水甲醇， 乙醇，正丙醇或者异丙醇或者它们的混合物进行萃取。高级脂肪族醇 如例如丁醇是较不优选的，由于其极性较低。所述醇的水含量可以是 1-25,优选2-15,并特别是5-15%w/w。但是，优选的溶剂是含有10% 水的甲醇。用于萃取的甲醇的量可以由本领域技术人员容易的进行选 择，并且其应当足以进行萃取，该萃取优选是在渗滤器(percolator)中 进行的。最大萃取温度受溶剂沸点(其取决于压力)的限制；低于沸点 的萃取同样是可能的。典型的步骤(a)是在50-80。C的温度，优选在大 约60-7(TC的温度进行的。优选首先将所述的植物进行干燥，目的是降低待萃取的植物的体 积。如果干燥，则通常干燥到小于12%,优选小于5%的含湿量。干 燥后的植物材料优选进行切割，优选切割成2x2x2 mm的片，最优选 切割成小于lxlxl mm的片。 一种典型的比例是1份的干燥植物材料 比3-15份的溶剂。可以使用整个的植物，但是为了减少潜在的微生物污染，优选将 根部切掉而使用无根的植物。一旦萃取完成，则优选将水/醇相进行过滤来除去废植物材料，其 作为产生热的燃料来干燥起始材料仍然是有用的。在 一 种另外优选的 实施方案中，通过蒸发全部或部分的溶剂来浓缩滤出液，以得到第一 萃取物E1，在醇除去后，该第一萃取物表现出典型20-40重量％的水 含量。从该萃取物中分离出的醇可以再循环。7歩骤b-有机副产物的分离步骤(b)涉及除去不想要的有机副产物如长链蜡和脂肪酸。所以， 用低级链烷烃对含水萃取物El进行液-液萃取。合适的低级链烷烃包 括但不限于正戊烷，正己烷，正庚烷。优选使用正己烷，正庚烷或者它们的混合物。这个步骤典型的是在20-70°C,优选40。C-70。C的温度 进行。在相分离之后，可以除去上面的含有所述有机副产物的有机层 Al，同时期望的甾体糖苷保持在含水萃取物E2中。所述的有机相可 以任选的进行进一步的净化，特别是将蜡和脂肪酸进行分离，这二者 作为例如化妆品应用的稠度因子(consistency factor)或者稳定剂都是 有用的。优选将含水相浓缩来得到第二萃取物E2,其水含量是40-70 重量％，按含水相重量计。 步骤c-甾体糖普的萃取含水萃取物E2包含不同的(较长的)甾体糖苷以及对于目标来说 不期望的一些其它的分子。所以，在步骤(c)中，将期望的甾体糖苷与 其它分子以另一液-液萃取来分离，该萃取是用低级链烷烃和低级二烷 基酮类的含水混合物来进行的。合适的低级链烷烃已经在上面进行了 描述。合适的低级二烷基酮类包括但不限于曱乙酮(乙甲酮)。优选步 骤(c)是用(1 )正己烷和/或正庚烷和(2)丙酮和/或曱乙酮(MEK)的含水混 合物来进行的。但是，优选的溶剂是正庚烷和MEK的混合物。对于 溶剂(1)和(2)的重量比没有严格限制，因为它在宽的范围内起作用。但 是，优选的范围是25:75-75:25，并且特别是40:60-60:40来得到有机 相和水相之间的最佳分配。该萃取是在水存在下进行的，该水一部分 来自于进行所述萃取的含水相，另一部分来自加入到所述工艺中的 水。水的总量必须足以实现有机相和含水相的分离，并且通常位于基 于有机溶剂的重量计算的20-80重量％的范围内。该萃取可以在室温 进行；但是，它典型的是在20-50。C进行的。步骤(c)萃取产生相分离，并获得了包含全部的短链分子的含水相A2以及包含期望的甾体糖苦的有机相E3。由于所述的植物可以包含 许多不同的甾体糖苦，因此一次萃取可能不足以将全部量的甾体糖苷 转换到有机相E3中。所以特别有用的是重复步骤(c)2-10次，优选3-5 次，并将由此所获得的有机相合并来得到萃取物E3。在重复步骤(c) 的过程中，不必改变溶剂(a)和(b)的比例或者温度。由于这样的事实，即在多次重复中，含水相中的甾体糖苷的量降低，因此极性本身发生 改变，并允许萃取更高极性的甾体糖苷。依靠这种操作保证了基本上
萃取物E2中所存在的全部的甾体糖苷被转移到萃取物E3中。 歩骤d-净化
一旦通过任选的合并步骤(c)全部的有机相获得了萃取物E3,则 将该产物进行进一步的净化。优选将该萃取物用水或者含水碱 (alkaline base)进行清洗，并将因此所获得的有机相进行浓缩和干燥来 得到最终产物。
重金属和PAH的除去
取决于植物材料的来源，它们会包含痕量的重金属如铜或者锌以 及PAH(聚芳族烃类)，其会在所述的加工过程中富集。尤其已知的是 栽植的Z/ooAa会包含更高含量的金属，这是因为灌溉水的使用，其 会产生盐和金属的积累。
已经发现，作为本发明的一部分，用吸收性(absorption)材料(如例 如活性炭，硅石，高岭土，漂白土(fullersearth)和tonsil)来处理7/oo^" 植物萃取物以吸附PAH,和/或用螯合剂例如诸如EDTA或者杆檬酸 来处理//ooc//a植物萃耳又物以通过形成络合物来消除重金属，并优选 随后进行漂白土(bleaching earth)过滤步骤。活性炭处理优选是在最终 的产物干燥之前进行，而螯合剂可以被加入到清洗水中。这个除去重 金属和PAH的方法构成了本发明的第二方面。该方法在处理通过任 何的方法所获得的萃取物中是有用的，并且还是上述本发明处理萃取 物E3的方法中优选的步骤。
作为此处使用的"重金属"包括但不限于砷、锑、铅、铋、铬、镉、 铁、钴、铜、镍、银、汞、钛、锌、锡、锰。
获自本发明方法的萃取物中的总重金属含量通常低于200 ppm(相对于每百万份的份数)，优选低于100ppm，最优选低于50ppm, 和最理想小于10ppm。
特定的单个重金属(其影响萃取物在食品中使用的适宜性，并且是 铅，镉，汞，铬和砷)的具体含量是通过该方法来降低到通常低于5 ppm,优选低于3 ppm和理想的低于1 ppm的程度。
在本发明的萃取物中的重金属含量是如下来测量的
将一个已知重量的样品在硝酸中使用密封的微波消解容器进行消解。该消解过的样品用超纯水稀释。标准样是从市售储备标准溶液 来制备的。将这些，以及空白样品与所述的样品萃取物中的硝酸含量 相匹配。
除了汞之外，金属是使用感应耦合等离子体-原子发射光谱
(ICP-AES)来分析的。将标准样和样品经由具有Scott型喷室的交叉流 动宝石尖端雾化器(Cross Flow Gem Tip Nebuliser)引入到该ICP-AES 中，或者对于砷，镉和铅来说，经由超声波雾化器(Ultrasonic Nebuliser) (USN)引入。样品的金属含量是通过将在每个元素的特性波长的它们 的发射强度与已知标准样的发射强度比较来量化的。
对于汞的测定，将一个等分的样品萃取物和标准样用盐酸掺合 (spike)来产生有利的酸性条件。将标准样和样品在流动注射系统(FIAS) 中使用硼氩化钠进行还原，来形成挥发性基态汞，并将其扫入原子吸 收分光计的(AAS)的测定池中。使用AAS中的灯来将合适波长的光发 射(shine)通过该测定池。样品的金属含量是通过将它们对这个光的吸 收与已知标准品比较来量化的。
获自本发明方法的萃取物还具有低的聚芳族烃。聚芳族烃包括但 不卩艮于苯并(c)药(benzo(c)fluorine), 环五(cd)芘(cyclopenta(cd)pyrene)， 苯并(a)蒽(benz(a)anthracene)， 窟(chrysene) ， 5隱甲基蕭(5-methyl chrysene), 苯并(b)荧蒽(benzo(b)fluoranthene), 苯并(j)荧蒽(benzo(j)画 fluoranthene), 苯并(k)荧蒽(benzo(k)fluoranthene)， 苯并(a)芘(benzo-(a)pyrene), 茚并(123，cd)芘(indeno(123，cd)pyrene), 苯并(ghi)菲 benzo(ghi)perylene， 二苯并(ah)蒽(dibenz(ah)anthracene)， 二苯并(al) 芘(dibenz(al)pyrene), 二苯并(ae)芘(benzo(ae)pyrene), 二苯并(ai)芘 (benzo(ai)pyrene) ， 二苯并(ah)芘(dibenz(ah)pyrene)。 苯并(a)芘典型的 被用作这些有毒的PAH总量的标志。
2ppb(相对于每十亿(billion;分的7分数)，优选小于02ppb。 ^
对于PAH的测量，精确地称出lg的萃取物并加入适当的氖标记 的内标物(各5 ng的D8-萘，D8-苊(acenaphthene)， D10画药，D10國菲， D10-蒽，D10-荧蒽，D10-芘，D12-苯并(a)蒽，D12-蒽，D12-苯并(b) 荧蒽，D12-苯并(k)荧蒽，D12-苯并(a)芘，D12-茚并(123，cd)芘，D12-苯并(ghi)-茈，D14-二苯并(ah)蒽和D14-二苯并(ai)芘)。将该样品用超
10纯水(5ml)润湿。随后，加入二甲基甲酰胺(50ml)并将该混合物置于超 声波浴中1小时。接着，将萃取物进行溶剂交换到己烷(液-液萃取)中， 皂化(用曱醇氢氧化钾回流3小时)并使用吸附色谱法(失活硅胶)进一 步净化。最后，将萃取物浓缩到大约100pL,加入一种合适的氘化回 收标准样(各5 ng的D8-苊，D14-对三联苯和D12-苯并(e)芘)，并通过 气相色谱法使用高解析度质谱检测进行分析。数据的特性通过参考材 料(橄榄油，由FAPAS提供(来自FAPAS study T0618))的分析来确定， 该参考材料具有可接受的浓度范围的苯并(a)蒽，苯并(b)荧蒽，苯并(a) 芘，茚并(123，cd)芘和苯并(ghi)茈。每个这些化合物在参考材料中所测 得的浓度必须落入规定的界限内。还分析了 一个空白剂样。
甾体糖普
其中
R二烷基；
R]=H、烷基、曱基巴豆酰基(tiglyol)、苯曱酰基或者任何其它的 有机酯基团；
R2-H或者一种或多种6-脱氧碳水化合物，或者一种或多种2,6-二脱氧碳水化合物，或者葡萄糖基团，或者它们的组合；并且其中虚 线表示任选存在于碳原子C4和C5之间或者碳原子C5和C6之间的 另外的键。
特别优选的甾体糖苷是式(l)化合物的类似物，包括式(2)-式(8)的化合物，和它们的混合物(Me = CH3)。
(2)<formula>formula see original document page 12</formula>其它此处没有明确提及的甾体糖苷可以包括在本发明的产物中。 应当理解本发明还包括所述的甾体糖普的异构体、衍生物、盐、酯和
《'可通过本发明方法获得的萃取物包含至少35%,优选35-100%， 更优选60-100%,最优选70-100%的甾体糖苷，基于该无水的萃取物。 含湿量可以用任何的重量分析方法或者卡尔费希尔(Karl Fisher)滴定
来测量。
甾体糖苷浓度是使用具有UV检测的高性能液体色谱法(HPLC)在萃取或者溶解之后来测量的。在干燥的植物材料的情况中，将大约5g
的材料用大约80ml的沸腾曱醇回流lhr。过滤所形成的萃取物，并将 固体材料用甲醇进^f亍清洗。将合并的滤出液和清洗液(washing)转移到 100ml烧瓶中，并用曱醇调整体积。蒸发干燥lml的滤出液，并重新 构成在lml乙腈/水(50/50 v/v)中。在萃取物的情况中，将大约20mg 的材料通过超声波处理IO分钟溶解在50ml的甲醇中。过滤之后，将 lml的滤出液蒸发干燥并重新构成在lml乙腈/水(50/50 v/v)中。
甾体糖苦是通过220nm的LC-UV来测量的。为此目的，将20(^1 的萃取物注入到250x4.6mm的Zorbax RX-C8分析柱上，该分析柱用 5jim粒子填充并且装备有12.5x4.6mm的用相同的固定相填充的 Zorbax RX-C8保护柱。将柱系统保持在40°C。在41.2%乙腈/曱醇 (85/15 v/v)和58.8%水/甲醇(85/15 v/v)，以lml/min的流速开始进行梯 度洗提。在30分钟内线性增加到88.20/。乙腈/曱醇(85/15v/v)和11.8% 水/甲醇(85/15v/v)之前，将初始条件保持10分钟。在最后保持5分钟 之后，将该系统重新平衡到初始条件。使用已知纯度的式2的化合物 (例如在该情况中为95%)来校准。化合物2可以使用制备液体色谱法 从干燥的T/oo^a gordonii中进行分离，或者可以被合成(参见例如美 国专利6376657,其在此引入作为参考)。在乙腈/水(1/1 v/v)中制备 100[ig/ml的储备溶液，并进一步稀释制备来产生在75、 50、 20、 10 和5|ag/ml的另外的校准标准物。使用220nm的UV响应来量化相对 于化合物2的校准线。使用基于分子量的相对响应因子来量化甾体糖 苷相对于化合物2的校准线。甾体糖苷被定义为在洗提15min之后的 全部的峰，其不存在于空白的乙腈/水(l/lv/v)样品中。例如，式2-8 的化合物与它们的相对保留时间以及响应因子 一 起汇总在表1中。表1
一些甾体糖普相对保留时间以及响应因子
化合物.对于化合物2的 相对于化合物2的
相对保留时间 响应因子
2 1.000 1.000 8 1.066 1.164
3 1.128 1.164
4 1.191 1.130
5 1.292 1.146
6 1.328 1.146
7 1.399 1.309
其它的甾体糖普在洗提15分钟之后的峰具有相对于化合物2为 1.081的响应因子。
可通过本发明方法获得的萃取物特别适用于食品中，特别是体重 控制产品。
虽然上面概括了本发明，但是对于本领域技术人员来说，显而易 见的是可以进行更改、变化和变更而不脱离此处的所述的和所主张的 本发明的范围和主旨。本发明现在将在下面的非限制性实施例中进一 步进行说明。
实施例1
含有80%甾体糖普的萃取物的制备
步骤a.将甾体含量为大约0.9重量％的25kg的干燥的和磨碎的 //ood/a植物(平均直径小于1.400)im)放置在ln^渗滤器中，并在大约 50°C的温度通过加入200 kg含水甲醇(95。/。w/w)在36 h的时间期间内 进行萃取。将萃取物冷却到大约20°C,然后通过50|im的纤维素过滤 器进行过滤。随后，使用标准蒸发装置在60°C将滤出液浓缩直到水 含量达到大约30重量％的值，来得到大约28kg萃取物El，其表现出 大约6.5重量％的干物质含量，将释放出的甲醇再循环用于另外的萃 取。
步骤b.将因此所获得的萃取物El通过加入3.75 kg的正庚烷来进
15行液-液萃取。将该产物在大约50°C搅拌大约5分钟。在30分钟之后 完成相分离。分离干物质含量为大约3重量％的有机层(大约4kg)并进 行进一步的净化步骤来获得叶绿素、蜡和脂肪酸。将表现出干物质含 量为大约7重量％的含水相Al(大约28kg)使用标准蒸发装置在大约 60°C进行浓缩，直到水含量达到大约55重量％的值，来得到大约17kg 萃取物E2，其表现出大约12重量％的干物质含量。
步骤c.将因此所获得的萃取物E2通过首先加入1.25kg正庚烷和 1.87kgMEK的混合物，然后加入2.5kg水来进行另外一次液-液萃取。 将该混合物在大约40。C搅拌大约15分钟。20分钟之后完成相分离。 除去干物质含量为大约0.7重量％的含水层A2(大约20kg)，并进行进 一步的净化步骤来获得短链活性分子。但是，将有机层用相同的溶剂 /水混合物进行另外一次萃取。该萃取总共进行4次，随后将全部的有 机相合并来得到大约7.7kg的干物质含量为2.5重量％的萃取物E3。
步骤d.将因此所获得的萃取物E3用含有0.1重量。/。EDTA的大约 2kg水进行清洗。 一旦有机相分离，则通过活性炭床进行过滤并在大 约60°C进行干燥直到获得0.16kg的最终Z/ooAg萃取物，其具有大于 90重量％的干物质含量和81重量％的甾体糖普含量。
该萃取物具有下面的金属含量Co0.65ppm, Cu 48,3ppm, Zn 2.16ppm , MnO.09ppm ， TiO,2ppm , Ni<0.82ppm ， VO,2ppm , Cr0.27ppm, Fe 5.69ppm。该萃取物具有0.2ppb的苯并(a)芘含量和 <0.2ppb的总PAH含量。
显而易见的是，为了商业化，前述工艺步骤可以按比例增加到在 具体的或者相关的食品或者农业产业实践中应用的适当的加工和装 置规模、类型和标准。
应当理解的是此处所举例说明和所述的本发明的特定形式仅仅 是代表性的，可以在其中进行一些变化而不脱离所公开内容的清楚的 教导。
权利要求
1. 一种制造Hoodia植物萃取物的方法，该方法包含步骤(a)将该植物用含水C1-C3脂肪族醇进行萃取来提供水不溶的废残留物和第一含水萃取物E1；(b)将该萃取物E1用低级链烷烃进行液-液萃取来提供有机相A1和第二含水萃取物E2；(c)将萃取物E2用低级链烷烃和低级二烷基酮类的含水混合物进行至少一次液-液萃取来提供至少一个含水相A2和至少一个有机萃取物E3；和(d)将萃取物E3干燥到期望的干物质含量来提供最终的产物。
2. 根据权利要求1的方法，其中在步骤(a)中的萃取是用含水甲醇 来进行的。
3. 根据权利要求1或者2的方法，其中步骤(a)的萃取是在50-80°C 的温度进行的。
4. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中对步骤(a)的萃取物 El进行过滤和浓缩，目的是使萃取物El的水含量为20-40重量％。
5. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中步骤(b)的萃取是用 正己烷或者正庚烷来进行的。
6. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中步骤(b)的萃取是在 20-70。C的温度进行的。
7. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中将步骤(b)的萃取物 E2进行浓缩，以使得萃取物E2中的水含量为40-70重量％。
8. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中步骤(c)的萃取是用(a)
9.5根据〗:又利要求8的""方法，其5中该萃^又是用含有重量比为 25:75-75:25的有机溶剂(a)和(b)的含水混合物来进行的。
10. 根据权利要求8的方法，其中该萃取是用具有足以实现有机 相和含水相分离的水含量的含水溶剂混合物来进行的。
11. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中步骤(c)的萃取是在 20-50。C的温度进行的。
12. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中将步骤(c)的萃取重 复进行1-10次，并将因此所获得的有机相合并来得到萃取物E3。
13. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中该方法进一步包含 用水或者含水碱(alkaline base)来清洗萃取物E3,并浓缩所获得的有机 相。
14. 根据任何一个前述权利要求的方法，其中该方法进一步包含 用吸收性材料和/或螯合剂处理萃取物E3。
15. 可通过任何一个前述权利要求的方法所获得的植物萃取物。
16. 包含权利要求15的植物萃取物的食品。
17. 使得Z/oo^a植物萃取物中的重金属和/或聚芳族烃含量最小 化的方法，该方法包含步骤(a) 萃取//00^'"植物来获得萃取物；(b) 用选自吸收剂、螯合剂和它们的混合物的处理物来处理该萃 取物，来获得净化的萃取物；(c) 干燥该净化的萃取物到期望的干物质含量，来提供含有甾体 糖苷的//oo&a植物萃取物。
18. 权利要求17的方法，其中所述的吸收剂是活性炭。
19. 权利要求17或者18任意一个的方法，其中所述的螯合剂选 自EDTA、柠檬酸和它们的混合物。
20. 权利要求17-19任意一个的方法，其中该方法进一步包含漂 白土过滤步骤。
21. 可根据权利要求17所获得的植物萃取物。
22. 根据权利要求21的植物萃取物，其中该萃取物的重金属含量 低于200ppm。
23. 根据权利要求21的植物萃取物，其中选自铅、镉、汞、铬和 砷的金属的重金属含量低于lppm。
24. 根据权利要求21的植物萃取物，其中聚芳族烃含量低于 2ppb。
全文摘要
制造具有高含量甾体糖苷的Hoodia植物萃取物的方法以及使得Hoodia萃取物中的重金属和/或聚芳族烃含量最小化的方法。
文档编号A61K36/185GK101505771SQ200780030657
公开日2009年8月12日 申请日期2007年7月16日 优先权日2006年8月17日
发明者F·M·米尤斯, K·J·波维, S·巴赫沃尔德-沃纳, S·阿拉奥伊斯梅利 申请人:荷兰联合利华有限公司