取代的二酮哌嗪及其作为催产素拮抗剂的用途的制作方法

专利名称：取代的二酮哌嗪及其作为催产素拮抗剂的用途的制作方法
取代的二酮哌溱及其作为催产素拮抗剂的用途
本申请是中国发明申请(发明名称取代的二酮哌嗪及其作为催产素拮 抗剂的用途；申请日2004年6月22日；申请号200480017834.8)的分案申请。
本发明涉及对催产素受体具有有效的和逸择性的拮抗剂作用的新的二 酮哌。秦衍生物、其制备方法、含有它们的药物组合物及其在药物中的应用,
激素催产素是有效的子宫收缩剂并用于诱导或增强分娩。子宫催产素 受体的密度在妊娠期间也显著增加>100倍并且在分娩时(产期前和期间)达 到高峰，
产期前生产/分娩(在24和37周之间)导致大约60%的胎儿死亡率/发病 率，因此抑制催产素的子宫作用的化合物例如催产素拮抗剂应该对产期前 分娩的预防或控制有用。
国际专利申请PCT/EP02/14823描述了一类作为对催产素受体的选择性 拮抗剂显示出尤其有用的活性水平的二酮哌溱衍生物。其中描述的优选化 合物类别由式A表示
这些化合物包括如下化合物其中除其它因素以外R,是2'茚满基、R2
是Cw烷基、R3是经由环上碳原子连到分子的剩下部分上的5或6元杂芳
基基团、R4表示NR5R6基团，其中Rs和R6各表示烷基例如甲基或R5和R6 与其连接氮原子一起形成3至7元饱和杂环，该杂环可含有选自氧的另外 的杂原子。
现在我们已发现了新的选择性的催产素受体拮抗刑基团，其显示尤其 有利的药物动力学特征。
因此本发明提供式(l)的化合物(1)
其中！^是2-茚满基、112是l-曱基丙基、113是2-曱基-l,3-噁唑-4-基并 且R4和R5与其连接的氮原子一起表示吗啉代。
消旋物的其混合物。
本发明的优选的化合物是在实施例1中具体描述其制备的化合物。
式(l)的化合物对于大鼠和人子宫上的催产素受体具有高亲合力并且这 可使用常规方法测定。例如对大鼠子宫上催产素受体的亲合力可通过 Pettibone等,Drug Development Research 30,129-142(1993)的方法测定。本发 明的化合物也对CHO细胞中的人重组催产素受体显示出高亲合力并且这可 使用Wyatt等Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters，2001(ll)pl301-1305 中描述的方法方便地证明。
当通过静脉注射或口服给药时本发明化合物也显示出有利的药物动力 学特征包括优良的生物利用度和低内在清除率，以及对包括2C9的P450酶 的优良的稳定性以及优良的水溶性。
因此本发明的化合物用于通过催产素的作用介导的疾病及/或病症的治 疗或预防。这种疾病及/或病症的实例包括产期前分娩、痛经、子宫内膜异 位症和良性前列腺增生。
所述化合物也可在选择性剖腹产手术或将患者转移到三级护理中心之 前用于延迟分娩、性功能障碍的治疗，尤其是早泄、肥胖、进食障碍疾病、 充血性心力衰竭、动脉高压、肝硬化、肾脏或眼高压、强迫观念与行为疾 病和神经精神病学的疾病。本发明的化合物也可对改善动物例如家畜生育 率有用。
因此本发明提供式(l)的化合物在用于治疗中并且尤其是用作拮抗催产 素对催产素受体的作用的药物中的用途。
本发明也提供式(l)的化合物在制备用于拮抗催产素对催产素受体的作 用的药物中的用途。根据另外的方面，本发明也提供拮抗催产素对催产素受体的作用的方 法，该方法包括给予需要其的患者拮抗量的式(l)的化合物。
本领域的技术人员将认识到此处涉及的治疗可扩展到已确定的疾病或 症状的预防和治疗。
还将认识到需要用于治疗所需要的本发明的化合物的量将随被治疗的 病症的性质、给药途径和患者的年龄和病症而变化并且将最终按照医生的 判断。然而对于成人治疗通常采用的剂量根据给药途径将典型地为每日2~
800mg。
因此对于肠胃外给药，日剂量将典型地为每日2~50mg,优选地5~ 25mg。对于口服给药的日剂量将典型地为每日10~ 800mg,例如20~ 150mg。
想要的剂量可方便地以单次剂量或在合适的间隔作为分剂量给药，例 如每日2、 3、 4或更多的分剂量(sub-doses)。
在用于治疗时，本发明的化合物可作为原料药给药是可以的，优选将 活性成分作为药物制剂。
因此本发明还提供药物制剂，该药物制剂包括式(1)的化合物连同其一 种或更多种的可药用载体和任选地其他的治疗及/或预防成份。载体必须是 与该制剂的其他成份相容并对其接受者无害的意义上的"可接受的"。
本发明的组合物包括配制成尤其是口服、含服(buccal)、肠胃外的、吸 入或吹入、植入或直肠给药形式的那些组合物。
对于口服给药的片剂和胶嚢剂可含有常规赋形剂如粘合剂，例如糖浆、 阿拉伯胶、明胶、山梨醇、西黄蓍胶、淀粉或聚乙烯吡咯烷酮的胶浆剂； 填料，例如乳糖、糖、微晶纤维素、玉米淀粉、磷酸钙或山梨醇；润滑剂， 例如硬脂酸镁、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或硅石；崩解剂，例如马铃薯淀 粉或淀粉羟乙酸钠，或湿润剂如十二烷基硫酸钠。可将片剂根据本领域众 所周知的方法包衣。口服液体制剂可以以例如水或油状的混悬液、溶液、 乳剂、糖浆剂或酏剂的形式或可作为在使用前用水或其他的适合的载体配 制的干产品。这种液体制剂可含有常规添加剂如悬浮剂，例如山梨醇糖浆、 曱基纤维素、葡萄糖/糖糖浆、明胶、羟乙基纤维素、羧曱基纤维素、硬脂 酸铝凝胶或氢化可食用的脂肪；乳化剂，例如卵磷脂、单油酸脱水山梨醇 酯或阿拉伯胶；无水的载体(其可包括可食用的油类)，例如杏仁油、分馏的椰子油、油酯、丙二醇或乙醇；增溶剂如表面活性剂，例如聚山梨酯或其 他的试剂如环糊精；和防腐剂，例如对羟基苯曱酸曱酯或丙酯，或抗坏血 酸。组合物也可配制为栓剂，例如含有常规栓剂基质如可可脂或其他的甘 油酯。
对于含服给药，组合物可采取用常规方法配制的片剂或锭剂形式。
根据本发明组合物可配制成注射或连续输注的肠胃外给药形式。对于 注射制剂可以以安瓶或增添有防腐剂的多剂量容器的单位剂量形式存在。 组合物可采取如混悬液、溶液或含油或含水载体的乳剂的形式，并且可含 有配制剂如悬浮剂、稳定剂及/或分散剂。或者活性成分可以以粉末形式在 使用前用适合的载体例如无菌的、无热原的水配制。
根据本发明组合物可包含O.l ~99%的活性成分，对于片剂和胶嚢剂方 便地为1 ~ 50%并且对于液体制剂为3 ~ 50%。
本发明化合物的有利的药物动力学特征使用测定生物学活性化合物的 药物动力学特性的常规方法容易地证明。
式(l)的化合物可通过羧酸(ll，其中R,、 112和113具有式1定义的意义) 或其活化衍化物与NHR4Rs胺，其中NR4Rs具有式(l)定义的意义，在用羧 酸或其混合酐和HKR4Rs胺制备酰胺的标准条件下反应来制备。
因此式(l)的酰胺可通过在非质子溶剂如二氯曱烷中任选地在有dL胺如 三乙胺的情况下，将式(ll)的羧酸用活化剂如BOP(六氟磷酸苯并三唑-l-基 氧基-三(二曱氨基)辚)、TBTU(四氟硼酸2-(lH-苯并三唑-l-基)-l,l,3,3-四曱 基脲镥)、BOP-Cl(二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(phosphinic chloride)或乙二 酰氯处理，以及如此形成的产物与NHR4Rs胺的后续反应来制备。
或者式(l)的酰胺可通过羧酸(ll)衍生的混合酐与NHR4R5胺在非质子 溶剂如四氢呋喃中反应来制备。方^f更地该反应在j氐温如大约-78。C进行。该 混合酐方便地通过羧酸(ll)与适合的酰基氯如新戊酰氯在非质子溶剂如乙酸乙酯中，在有叔有机碱如三烷基胺如三乙基胺的情况下在低温如大约 -78匸下反应制备。
式(l)的化合物也可通过式(l 1 l)的化合物(其中R,R2和R3具有式(l)定义 的意义并且&是2-羟基苯基)与羰基二咪唑或硫代羰基二咪唑在适合的溶 剂如二氯曱烷中反应，以及如此形成的产物与HNR4R5胺的后续反应来制 备。
<image>image see original document page 8</image>
式(ll)的化合物可由其中R6是2-羟苯基的式(lll)的化合物与羰基二咪 唑或硫代羰基二咪唑在适合的溶剂如二氯曱烷中反应，以及如此形成的产 物与含水丙酮的后续反应来制备。
其中R6是2-羟基苯基的式(lll)的化合物可使用氢和钯催化剂进行氢解 由其中R6是2-苄氧基苯基基团的式(lll)的相应化合物得到。
其中R6是2-千氧基苯基苯基基团的式(111)的化合物方便地通过下述方 法制备。因此式(111)的化合物可由式(IV)的化合物<image>image see original document page 8</image>其中R,、 R2和R3具有式(1)定义的意义，R7是2-苄氧基苯基并且Rs是 N-苄氧羰基，通过在有钯炭催化剂和乙酸的情况下与氢反应得到。该反应 方便地在ii:剂如乙醇或三氟乙醇或其混合物中进行。
式(IV)的化合物可通过盐酸氨基酯(V)其中R2具有式(l)定义的意义，
<image>image see original document page 8</image>在有三乙胺的情况下在溶剂如三氟乙醇中与醛R3CHO(VI)反应，其中
R3具有(l)定义的意义，，然后该反应产物与化合物(VII)其中R,具有式(l)定 义的意义并且R7是苄氧羰基
,C02H
R '…CH
NHR7
(V")
和异氰化物CNR6(VIII)其中R6是2-苄氧基苯基基团，在溶剂如三氟乙 醇中反应制备。
R2取代基是1-曱基丙基基团并且其中R2是具有(S)或(R)构型的1-曱基 丙基基团的式(1 )化合物可从其中R2基团具有需要的(S)或(R)构型的氨基酯 (V)开始制备。
下列实施例是说明性的，但不是本发明的实施方案的限制。 一il殳纯化和分析方法
分析HPLC是在Supelcosil LCABZ+PLUS柱(3.3cm x 4.6mm ID)上，用 0.1% HC02H和0.01 M乙酸铵水溶液(溶剂A),和0.05% HC02H 5%乙腈水 溶液(溶剂B)洗脱，使用下列洗脱梯度0-0.7分钟0% B、 0.7-4.2分钟 0%-100% B、 4.2 ~ 5.3分钟100% B、 5.3 ~ 5.5分钟0% B，在3ml/分钟流速 下实施的。使用Micromass系列2或Waters ZQ质谱仪上的电喷雾正[(ES+ve 以产生MlT和M(NK4)+分子离子]或电喷雾负[(ES-ve以产生(M-H)-分子离子] 模式,在Fisons VG Platform谱仪上记录质i普(MS)。采用四曱基硅烷作为外标 使用Bruker DPX400MHz谱仪记录NMR谱。Biotage 色语法指4吏用 Dyax公司出售的设备(或者Flash 40i或者Flash 150i)和KPSil预包装的柱子 进行的纯化。定向于质谱的自动制备(Mass directed autoprep)指其中物质通 过高效液相色谱法在HPLCABZ+5pm柱(5cmx 10mmi.d.)上用0.1 °/。 HC02H 水溶液和95%MeCN, 5%水(0.5% HC02H)利用梯度洗脱以每分钟8ml的流速 进行纯化。 一旦检测到兴趣质量，Gilson202-馏分收集器就通过VG Platform 质谱仪而启动。
疏水性的frits指Whatman出售的过滤管。SPE(固相萃取)指International Sorbent Technology Ltd.出售的柱子的使用。TLC(薄层色谱分析法)指涂有硅胶60F254的Merck出售的TLC板的使用。Oasis 指Waters Corporation 出 售的Waters Oasis HLB萃取柱。
中间体1
2-{(3R,6R)-3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-6-[l(lS)-l-曱基丙基]-2,5-二氧代-l腸 哌嗪基} -N-O羟苯基)-2-(2_曱基-1 ，3 -噁唑4-基)乙酰胺
将饱和碳酸氬钠溶液(l 50ml)加到剧烈搅拌的(D)-别异亮氨酸曱酯盐酸 盐(5.0g)的二氯曱烷(150ml)溶液中。将得到的二层用疏水性的frit分离并且 将水相用二氯曱烷(50ml)洗涤两次。合并的二氯曱烷相用甲醇(200ml)稀释并 加入(2R)-[(千氧羰基)氨基](2,3-二氢-lH-茚-2-基)乙酸(14.64g)并且将混合物 剧烈搅拌1小时以使溶液反应。将溶液蒸干并将残留物溶于1:1三氟乙醇/ 曱醇(140ml)的混合物中，然后加入2-卡氧基苯基异氰化物(9.43g)，随后加 入2-曱基-4-曱酰噁唑(5.0g)并且将反应物在室温下搅拌4天。将该混合物蒸 千并将残留物溶于乙醇(500ml)中并加入钯碳(4.0g)和乙酸(10ml)并且将反应 混合物在氢气氛下搅拌3小时。进一步地加入新鲜的钯碳(4.0g)和乙酸 (20ml)并将反应混合物在氢气氛下再搅拌16小时。将该混合物用西莱特 (Celite)过滤、蒸干并将残留物溶于乙酸乙酯(300ml)中，用水(2xl00ml)、 饱和碳酸氢钠溶液(2 x 100ml)和盐水(100ml)洗涤然后通过疏水性的frit并蒸 千。将粗品用柱层析法(二氧化硅)以乙酸乙酯(100%~0%):曱醇洗脱进行纯 化得到2-{(3R,6R)-3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-6-[(lS)-l-曱基丙基]-2，5-二氧代 -1 -哌。秦基} -N-(2-羟苯基)-2-(2-曱基-1,3-噁唑-4-基)乙酰胺(11. 8g 51 %)
HPLC Rt=3.2分钟；m/z [M+H]+=517 。
同样地由(D)-异亮氨酸甲酯盐酸盐制备 中间体2
2-{(3民6尺)-3-(2,3-二氢-1&茚-2-基)-6-[(111)-1-曱基丙基]-2,5-二氧代-1-哌嗪基} -N-P-羟苯基)-2-0曱基-1,3 -噁唑-4-基)乙酰胺 HPLC Rt=3.17和3.22分钟;m/z[M+H]^517。
中间体3((3R,6R)-3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-6-(lS)-l-曱基丙基]-2,5-二氧代-1-哌 嗪基}(2-曱基-1 ，3-噁唑-4-基)乙酸
将羰基二咪唑(352mg,1.6叫uiv.)加到2-((3R,6R)-3-(2，3-二氢1H-茚-2-基)-6-[(lS)-l-曱基丙基]-2,5-二氧代-l-哌嗪基)-N-(2-羟苯基)-2-(2-曱基-l，3-噁唑4-基)乙酰胺(11.8g,用P401()真空预干燥24小时)的二氯曱烷pOml)溶 液中，并将该溶液在室温下放置16 hr。将该混合物蒸干并将残留物溶于丙 酮(20ml)中并加入水(20ml)，随后加入2N HCl(2ml)并将混合物在室温下放 置4.5小时。将此用乙酸乙酯(2 x 30ml)萃取并合并经疏水性的frit干燥的有 机相并蒸干。将残留物收集在乙酸乙酯(30ml)中用2N HCl(2x 10ml)洗涤然 后用饱和碳酸氢钠溶液(2x 15ml)萃取。合并的水相用2N HCI酸化并用乙 酸乙酯(2x20ml)萃取并将合并的有机相用盐水洗涤经疏水性的frit干燥并 蒸干得到((3R，6R)-3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-6[(lS)-l-曱基丙基]-2,5-二氧代-l-哌嗪基K2-甲 基-1,3_噁 唑-4-基) 乙 酸(0.355mg,73。/。)的 白 色 固 体 。
HPLC Rt=3.0和3.1分钟;m/z [M+H]+=426
同样地从中间体2制备
((3R,6R)-3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-6-[(lR)-1-曱基丙基]-2,5-二氧代-l-哌 嗪基} (2-曱基-1 ，3 -噁唑-4_基)乙酸(中间体4) HPLC Rt=3.14分钟；m/z [M+H]+=426
实施例1
(3R,6R)-3-(2,3-二氢陽lH-茚'2-基)-l-[(lR)-l-(2-甲基-l,3-噁唑-4-基)画2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基]-6-[(lS)-l-曱基丙基]-2，5-哌嗪二酮
将二异丙基乙胺(100mg,3.3叫uiv.)、 pyBOP (159mg，1.3equiv.)和吗啉 (102pL， 5 equiv.)顺序地加入到((3R,6R)-3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-6-[(lS)-l國 曱基丙基]-2,5-二氧代-l-哌嗪基)(2-曱基-l,3-噁唑-4-基)乙酸(100mg)的二曱 基曱酰胺(2ml)溶液中，并将混合物在室温下搅拌4天。将反应物用二氯曱 烷(10ml)稀释并加入2N HCl(10ml)。将有机相分离，用饱和碳酸氩钠溶液 (10ml)洗涤经frit干燥并蒸干。将残留物用制备HPLC纯化得到 (3R,6R)-3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-l-[(lR)-l-(2-曱基-l,3-噁唑-4-基)-2-(4-吗啉 基)-2-氧代乙基]-6-[(1S)-l-曱基丙基]-2,5-哌嗪二酮(9mg)的无色固体。
HPLC Rt=2.8分钟;m/z[M+H]^495'H丽R(CDCl3)S7.72(s,lH),7.26-7.15(m,4H),6.93(d,lH),6.30(s,lH), 4.18(d, 1H),4.06(dd, 1H),3.70-3.30(m,8H),3.17-3.10(m,3H)，2.98-2,86 (m, 1 H),2.81隱2.75(m, 1 H)，2.49(s,3H)， 1.69-1.60(m, 1 H)， 1.50-1.43(m, 1 H)， 1.05-0.95 (m,lH),0.80-0.75(m，6H)。
同样地从中间体4和吗啉制备
实例2
(311,610-3(2,3-二氢-旧-茚-2-基)-1-[(111)-1-(2-曱基-1,3-噁唑-4-基)-2-(4-吗啉基)-l氧代乙基]-6-[(lR)-l-曱基丙基]々,5-哌嗪二酮 HPLC Rt=2.92分钟;m/z[M+H]、495
实施例3
(3R,6R)-3-(2，3-二氢-lH-茚-2-基)-l-[(lR)-l-(2-曱基-1,3-噁唑-4-基)-2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基]-6-[(l S)-1 -曱基丙基]-2,5-哌嗪二酮
将(2R)-[(苄氧羰基)氨基](2，3-二氢-lH-茚-2-基)乙酸(35.84g,0.110mol)在 500mL圆底的烧瓶中用2，2,2-三氟乙醇(165mL)处理接着用曱醇(55ml)和三 乙胺(11.13g,15.33mL,0.110mmol)处理，将浆液搅拌3.5小时直到观察到溶 解。然后将溶液加到另外烧瓶中的(D)-别异亮氨酸曱酯盐酸盐(20g，. 11 Omol) 中。将浆液搅拌直到观察到溶解。然后加入2-曱基-4-曱酰噁唑 (12.24g,0.110mmol)随后加入2-,氧基苯基异氰化物
(benzyloxyphenylisocynanide)(23.04g,0.110 mmol)。然后将暗褐色反应混合物 在20 ~ 25。C搅拌24小时。然后将溶液通过减压蒸馏浓缩到ca.l30mL体积。 将溶液用二氯曱烷(200mL)稀释并用水洗涤(2 x 200mL)。然后将有^4目用 N-曱基吡咯烷酮(460mL)稀释并且通过在40。C在真空下搅拌2小时除去二 氯曱烷。加入乙酸(46mL)随后加入钯碳催化剂(69.0g的10%Pdwt、 57%水、 Johnson Matthey类型87L)并且该混合物在氢瓶氬气压下(ballon pressure of hydrogen)快速搅拌2小时进行氬化。然后将反应混合物过滤，通过乙酸乙 酯(960mL)洗涤并且用3。/。w/v氯化钠水溶液(960mL)洗涤。然后将该双相的 混合物过滤并将有片几相分离并且用3% w/v氯化钠水溶液(2 x 960mL)洗涤。 然后将有机溶液用乙酸乙酯(200mL)稀释并且在大气压下通过蒸馏浓缩蒸 馏出385mL的溶剂。将浓缩溶液在20 - 25。C用l,l'-羰基二咪唑(21.46g,0.132mol)处理并且在20 ~ 25。C搅拌1小时然后用水(2卯mL)处理并 且在20 25。C快速地搅拌24小时。将混合物静置并且将乙酸乙酯层分离并 除去。将水相用乙酸乙酯(290mL)洗涤并将混合物静置并将水相分离并通过 加入浓盐酸(18mL)酸化到pHl-2。然后将水相萃取到乙酸乙酯(2卯mL然后 是145mL)中。然后将合并的乙酸乙酯溶液通过大气压下蒸馏浓缩到ca.93mL 体积。然后将溶液用四氢呋喃(62mL)稀释并用三乙胺
(11.02g，15.20mL,0.109mol)处理并冷却到-78。C。然后将溶液用三曱基乙酰氯 (4.81g,4.92mL,39.90mmol)处理并在-78。C搅拌7小时。然后将反应混合物用 吗啉(15.82g,15.83mL,0.181mol)的四氢呋喃(23mL)溶液处理并在-78。C搅拌1 小时20分钟，然后加温到20~25°C。然后将溶液用乙酸乙酯(76mL)稀释并 用饱和^碳酸氬钠水溶液(2x 153mL)洗涤随后用水(153mL)洗涤。然后将有才几 溶液用乙酸乙酯(54mL)稀释并在大气压下蒸馏至69mL体积。然后将溶液冷 却到20-25。C,在该温度点发生了标题化合物的结晶。将浆液进一步地冷 却到0'C然后将标题化合物通过过滤分离并吸入式干燥。生成8.92g。
制剂实施例
这些实施例说明含有本发明化合物的代表性药物制剂的制备。
A.肠胃外的制剂 成分
本发明的化合物 lg 无水乙醇 5mL 丙二醇 25mL
含有0.9%氯化钠的50mM乙酸中有5°/。 w/v 2-羟丙基卩环糊精，用氢 氧化钠调节到pH 4.0 适量(q.s.) 100 mL
将本发明的化合物分散在乙醇中并在加热的帮助下溶于丙二醇。然后 在搅拌下加入水组分以提供10 mL的i.v.溶液。可将溶液通过适当手^殳如无 菌过滤或高压灭菌法而灭菌。
这可通过推注或稀释到包含例如生理盐水的输注袋中给药。B.用于口服给药的胶嚢剂
成分 ％wt./wt. 本发明的化合物 25.0 乳糖 74.5 硬脂酸镁 0.5 将上述成分混合并分装到硬胶嚢中，每个包含100mg。
C.用于口服给药的片剂
成分 ％ wt./wt.
本发明的化合物 25.0
乳糖 35.0
淀粉 34.5
交4关聚乙烯吡咯烷酮 4.0
硬脂酸镁 0.5
除硬脂酸镁外将上述成分合并并混合。然后将硬脂酸镁加入并且将制 剂混合。将制剂用合适的压片机加工成片剂。
催产素拮抗剂活性的测定
整个分析使用的分析缓冲液50mMHEPES、 10mMMgCl2、 0.125mg/ml BSA、用KOH将pH调节到7.4。
在分析緩冲液中以0.3mg蛋白/ml的浓度制备hOT-CHO膜。将试验化 合物最初溶于DMSO(到10mM)中并在DMSO(Beckman Biomek FX)中稀释。 将的化合物转入使用Biomek FX.的黑色384测定板(NTJNC)中。将20^1 的 lnM BodipyTMR Oxytocin(Perkin Elmer)分析緩冲液加到所有孑L (Labsystems Multidrop)中，然后将20|_il的膜加到所有孑L(Multidrop)中。将 板在室温孵育60分钟。
极化强度在LJL Analyst (人Ex:535nm, tEii^580nM,入Dichroic二555nm)上 读取。将数据代入4参数逻辑计算方程。Ki的估计值是以IC50/5计算的。
在上述试验中，本发明的实施例1和2的化合物分别具有9.0和8.2的 pKi值。本发明的化合物在治疗活性剂量上基本上是无毒的。因此实施例1的
化合物已经以30mg/kg的剂量给予大鼠7天并且没有观察到不良毒理学效应。
权利要求
1.式(1)的化合物其中R1是2-茚满基，R2是1-甲基丙基，R3是2-甲基-1，3-噁唑-4-基并且R4和R5与其连接的氮原子一起表示吗啉代。
2. (3R，6R)-3-(2，3-二氪-lH-茚-2-基)-l-[(lR)-l-(2-曱基-l，3-噁唑-4-基)_2-(4-吗 啉基)-2-氧代 乙 基]-6-[(1 S)-1 - 甲 基 丙 基卜2， 5-哌嗪二 酮 。
3. (3R,6R)國3-(2,3-二氢-lH-茚-2-基)-l-[(lR)-l-(2-曱基-1，3-噁唑-4-基)-2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基]-6-[(lR)-l-曱基丙基]-2，5-哌嗪二酮。
4. 药物组合物，包括如权利要求1所述的式(l)的化合物及一种或多种 可药用载体。
5. 如权利要求1所限定的式(l)的化合物在制备用于拮抗催产素对催产 素受体的作用的药物中的用途。
6. 治疗或预防通过催产素的作用介导的疾病或病症的方法，包括给予 需要的哺乳动物有效量的式(I)的化合物。
7. 制备式(I)的化合物的方法，该方法包括 (a)将式(II)的化合物或其混合酐其中R,、 R2和R3具有权利要求1中定义的意义,在由羧酸或其混合酐与胺 制备酰胺的标准条件下，与NHR4Rs胺反应，其中R4和Rs具有式(l)定义的 意义；(b)将式(III)的化合物<formula>formula see original document page 3</formula>其中R,、 R2和R3具有权利要求1定义的意义并且R6是2-羟苯基， 在适合的溶剂中与羰基双咪唑或硫代羰基双咪唑反应，以及如此形成的产 物与NHR4Rs胺的后续反应，其中R4和Rs具有式(I)中定义的意义。
全文摘要
本发明涉及取代的二酮哌嗪及其作为催产素拮抗剂的用途。具体地，本发明涉及式(1)的化合物、其制备方法、含有它们的药物组合物及其在药物中的用途，式(1)中R₁为2-茚满基、R₂为1-甲基丙基、R₃为2-甲基-1，3-噁唑-4-基并且R₄和R₅与其连接的氮原子一起表示吗啉代。
文档编号A61K31/496GK101597282SQ200810108819
公开日2009年12月9日 申请日期2004年6月22日 优先权日2003年6月24日
发明者约翰·利德尔 申请人:葛兰素集团有限公司