玉米须多糖在制备治疗高血脂症的药物中的应用的制作方法

专利名称：：玉米须多糖在制备治疗高血脂症的药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明属于医药领域，尤其是指玉米须多糖的新药物用途。
背景技术：
：玉米须多糖的药理作用1、调节免疫功能的作用鲁彦等研究表明，玉米须多糖具有调节免疫功能的作用，多种多糖具有刺激巨噬细胞、B细胞、T细胞、自然杀伤细胞,增强其活性的作用；同时促进巨噬细胞分泌IL1、TNF、T淋巴细胞产生IL2;激活白细胞产生干扰素，调节抗体和补体生成等。郑鸿雁、闵伟红等也通过试验得出玉米须中具有免疫调节作用的成分为多糖。汤鲁宏等经过系统的筛选从玉米须中分离提取了具有免疫增强作用的生物活性成分。运用离子交换、分级沉淀、Sephrose柱层析等手段对成分进行了进一步的分离和纯化。初步的结构研究表明为多糖类化合物。Namba在小鼠被动皮肤过敏性反应试验中，证实玉米须提取物中分离出的糖蛋白于二硝基酚卵清蛋白(DVA)抗原对IgE的形成有抑制作用，说明此蛋白对I型过敏性疾病有效。鲁彦等研究玉米须水煎剂及其粗多糖对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠胸腺指数及胸腺DNA含量的影响，结果显示能提高免疫功能低下小鼠的胸腺指数及胸腺DNA含量;两者对小鼠胸腺指数及胸腺DNA含量的提高作用无差别。2、抗肿瘤作用吕冬霞等将玉米须多糖以不同浓度和时间作用于肝癌SMMC-7721细胞，采用MTT比色法观察细胞毒性，结果显示，玉米须多糖对SMMC-7721细胞的生长抑制具有剂量和时间依赖性，且凋亡细胞形态改变，说明玉米须多糖能抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖,诱导肝癌细胞凋亡。范晓艳等也将玉米须多糖以不同浓度和时间作用于肝癌SMMC-7721细胞，采用免疫组化法检测Caspase-3和p53的表达；分别观察制片后的Caspase-3和p53表达，发现经玉米须多糖(2080mg/L)作用于SMMC-7721细胞，随着作用时间和剂量的增加，Caspase-3及p53的表达增高，表明玉米须多糖能诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡。3、保肝作用3昌友权等研究了玉米须多糖对CCL4肝损伤小鼠的保护作用，表明玉米须多糖可增加肝脏GSH含量，提高GST活性；具有淬灭自由基、抗氧化、抑制肿瘤及护肝的作用；玉米须多糖对CYP450具有选择性抑制作用，阻止CCL4在肝微粒体内的代谢活化。4、降糖作用刘娟等研究了玉米须多糖对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影响，发现玉米须多糖能够降低糖尿病小鼠血糖，促进肝糖元合成，加快糖异生；对糖尿病小鼠糖代谢器官损伤有修复作用。同时发现玉米须多糖对正常小鼠也有一定降糖作用。5、利尿作用窦传斌等采用代谢笼法和滤纸法测大、小鼠的排尿量及尿中n^、k+、cr的含量；采用甘油致大鼠肾衰竭模型观察玉米须多糖对肾衰竭大鼠排尿的影响，发现玉米须多糖可明显增加大、小鼠的排尿量,增加尿液中K+、cr的含量，增加肾衰竭大鼠的排尿量，提示玉米须多糖具有明显的利尿作用。6、解热作用杜娟采用干酵母和2，4-二硝基苯酚致大鼠发热的模型观察玉米须多糖对大鼠发热的影响，发现玉米须多糖对大鼠干酵母混悬液致热和2，4-二硝基苯酚致热均有明显的解热作用，作用强度呈剂量依赖性。7、利胆作用杜娟采用胆管引流法分别收集并计量给药后0.5，1，1.5，2，2.5h后的胆汁量来观察玉米须多糖对肝脏分泌胆汁的影响，发现对大鼠胆囊分泌有明显的促进作用；采用测定小鼠胆囊重量的方法观察玉米须多糖对胆囊的影响，发现玉米须多糖能减轻胆囊重量，并推测其可能有加速小鼠胆囊收縮排空的作用。8、延长胃排空时间和降低体重杜娟等以黑色炭末为指示剂，以正常小鼠小肠炭末推进百分率、小鼠首次排黑便时间和数量为指标，观察玉米须多糖对小鼠肠运动的影响；以甲基橙为指示剂，以甲基橙残留率为指标，观察玉米须多糖对小鼠胃排空的影响；以美蓝为指示剂，以胃排空时间、肠内容物移动速度为指标，观察玉米须多糖对大鼠胃肠运动的影响，发现玉米须多糖能延长胃排空时间。杜娟等报道玉米须多糖具有降低动物体重的作用，并指出其可能的机制是增加血浆胆囊收縮素(CCK)含量，使胃排空时间延长，食欲降低，肠蠕动加速，排便数量增加有关。4玉米须水提取物有降血脂作用MiuraT报道玉米须水提物能够明显降低正常小鼠和实验小鼠血中胆固醇含量。对正常小鼠血中甘油三酯能够显著降低。对实验小鼠血中甘油三酯含量未影响。结果提示,玉米须水提物降胆固醇作用是由于阻止胆固醇在肝脏合成。王大为观察玉米花丝饮品(CFB)对高脂血症鼠的降血脂作用，予末次给药16h除空白对照组外,所有各组小鼠每只均腹腔注射75%蛋黄生理盐水溶液0.5mL，并且开始饥饿;末次给药后lh测定血清TCHO及TG含量，取肝脏测MDA含量。结果:与模型组比较，CFB7.00mL.kg"组大鼠血清TCHO和TG含量有明显降低趋势(PO.OOl)，CFB各剂量组大鼠肝组织MDA含量明显降低(PO.OOl,PO.OOl,PO.05)，并呈现出一定的量效关系。与四氧嘧啶模型组比较，CFB10.0mL.kg"组小鼠血清TCHO和TG含量有明显降低趋势(PO.Ol)，CFB各剂量组小鼠肝脏组织MDA水平明显降低(PO.001,PO.001,PO.05),并呈现出一定的量效关系。与蛋黄性模型组比较，CFB10.0mL.kg-l组小鼠血清TCHO含量有明显降低趋势(PO.Ol),CFB10.0和5.0mL.kg-l组小鼠血清TG含量有明显降低趋势(PO.01,P〈0.05),CFB10.0和5.0mL.kg"组小鼠肝脏组织MDA水平明显降低(PO.OO1，PO.01)。在降低TCHO和TG含量及小鼠肝脏MDA水平方面CFB7.0mL.kg"组优于康立舒胶囊组,CFBlO.OmL.kg"组优于排毒清脂胶囊组。结论CFB对高脂血症鼠有明显的降血脂作用。急性毒性玉米须多糖小鼠急性毒性毒性太低,无法测得LD50;最大耐受量为45g/kg。
发明内容本发明提供一种玉米须多糖在制备治疗高血脂症的药物中的应用，目的在于提供一种新型的降血脂药物，满足人们对该类药物的需要。玉米须多糖在制备治疗高血脂症的药物中的应用玉米须多糖在制备治疗糖尿病伴高血脂症的药物中的应用。本发明玉米须多糖可采取常规方法或文献中记载的方法获得，优选为包括下列步骤①备料选取无虫蛀、无霉变、新鲜的青玉米须为原料，洗净、干燥、粉碎，过40目筛，待用；②脱脂玉米须粉料加入95%乙醇，浸泡过夜，以除去脂溶性杂质，真空过滤，5滤饼再用相同浓度乙醇处理一次，待用；回收乙醇；③水提将脱脂后的药材分料投入浸提器中，加入1020倍量的的去离子水，搅拌，浸泡24h后，于8090'C加热30min，提取3次，合并提取清液，待用；④浓縮把浸提清夜投入真空旋转蒸发仪中浓縮，减压、低温浓縮至料液原体积1/5,得浓縮液，待用；⑤脱色把浓縮液投入脱色釜中，在搅拌下加入浓度为20~30%的双氧水，混合均匀，加热，脱色时间2h，加热温度50'C，趁热过滤，得脱色液，加热回去残留双氧水，待用；⑥醇析把脱色液投入醇析釜中，加入适量的95%乙醇，使料液中乙醇浓度为70%~75%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑦除杂把玉米须多糖加适量去离子水或蒸馏水溶解，加木瓜蛋白酶，酶底比1.0%、pH值5.5、体系在水浴中水解1.5h,温度为4(TC，反应完后沸水浴灭酶IOmin;离心，除沉淀，待用；⑧透析把玉米须多糖澄清液装入透析袋中，用去离子水或蒸馏水透析48h，以去除无机盐、低分子量杂质，透析处理后，取出透析内液，待用；⑨醇析把脱透析液投入醇析釜中，加入95%乙醇、使料液中乙醇浓度为75%~85%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑩干燥把玉米须多糖沉析物至真空干燥箱中，干燥，过100目筛，得玉米须多糖。所得干燥物用a-萘酚、茚三酮鉴定为多糖、用苯酚硫酸法进行含量测定。每克玉米须纯化多糖(含量40~50%以上)相当于玉米须80100g。本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂、注射剂。本发明专利的有益效果是1、多糖的提取方法很多，但在提取过程中都有蛋白质伴随产生。传统的除蛋白方法有机溶剂的消耗量大，多糖损失严重，并存在废液处理等问题。应用蛋白酶除多糖中的杂蛋白是一种反应温和，操作相对简单且对多糖活性影响较小的方法,使多糖的纯化过程高效、安全。2、玉米须多糖为纯天然药物，在降低血糖的同时，还能够降低血脂，说明其降血糖机制不是单一环节，而是多方面、多靶点综合作用的结果，将其作为防治糖尿病及其并发症的药物开发具有重要的现实意义。3、增加植物资源的新用途玉米须现阶段作为废弃物被白白扔掉，作为药用资源对其研究亦甚少，属未开发利用品种。将玉米须总多糖开发成糖尿病伴有高血脂的降糖制剂是对中草药资源的有效利用。4、带动区域经济的发展吉林省是玉米的主产区之一，可年产玉米须90万吨，现阶段还未进行有效的利用，由于降糖降脂药物临床需求量较大，必将带动区域产业经济的发展。本发明制成的药物降血脂作用显著。服用剂量可以根据服用方式，病人的年龄和体重及病情严重程度和其它类似的因素而改变，口服量为1.530g/日'人，每日分一三次服用。具体实施例方式下面通过药效学实验进一步验证本发明。(一)玉米须多糖对单纯高血脂大鼠降血脂作用1材料与仪器1.1动物Wistar大鼠，雄性，体重120160g(吉林大学实验动物中心提供合格证号医动字第10-5112)。1.2实验仪器1.DY89-I型电动玻璃匀浆机宁波新芝科器研究所2.LG16-W低温高速离心机北京医用离心机厂3.LDZ5-2型普通离心机北京医用离心机厂4.754型紫外分光光度计山东高密彩虹分析仪器厂5.DR-HW-1电热恒温水温箱北京西城区医疗器械厂6.YKH-II型液体快速混合器江西医疗器械厂7.LBY-N6A自清洗旋转式粘度计北京普利生8.GAMMAmaticII型r计数器瑞士KONTRON公司1.3主要试剂与药品1.玉米须多糖按本发明实施例2方法所得。2.胆固醇上海新兴化工研究所批号090108德国SIGMA产品上海复星朝辉药业江苏大洋制药解放军总院科技放免所解放军总院科技放免所中国上海批号081009批号090715批号090101批号090128批号091021批号0806123.胆酸钠4.丙硫氧嘧啶片5.洛伐他汀(胶囊)6.6-Keto-PGFla药盒7.TXB2放免药盒8.戊巴比妥钠2.实验方法2.1高脂血症模型的复制方法2丄1高脂饲料的配方1%胆固醇、0.2%丙硫氧嘧啶、0.5%胆酸钠、2%猪油、5%黄豆、0.5%蛋清、0.5%鱼粉、2%蛋黄粉、88.3%基础饲料2丄2给食方法高脂饮食组于给药前15天开始，每晚67时给予高脂词料，每只鼠平均20g，白天补充足量的普通词料。第16天起，按照组别给予药物，同时按上述方法给予高脂饲料，继续饲养21天。2.2动物分组、给药方法Wistar雄性大白鼠72只，体重120160g，随机分成6组，每组12只。其中1组为空白对照组，其余为高脂饮食组，分别给予普通饲料和高脂饲料15天，第15天采血测血脂，再按血脂水平将高脂饮食组随机分为5组。1.空白对照组普通词料蒸馏水10ml/kg/d蒸馏水10ml/kg/d玉米须多糖0.5g/kg/d玉米须多糖lg/kg/d玉米须多糖2g/kg/d洛伐他汀30mg/kg/d每天上午8:009:00灌胃给药1次，共21天。杀鼠前一晚，动物禁食不禁水。杀鼠当日上午，将动物用3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉，腹主动脉采血，并取肝脏。2.3血样与组织样的采集与制备(1)腹主动脉采血2ml，静置分离血清，湖!l定TC、TG、HDL、LDL。2.模型对照组3.小剂量组4.中剂量组5.大剂量组6.阳性对照组高脂饲料高脂饲料高脂饲料高脂饲料高脂饲料8(2)腹主动脉采血lml用1%肝素抗凝测定全血粘度。(3)腹主动脉采血1.5ml用EDTA'2Na抗凝3000r/min离心10min分离血浆，用放免法测定PGI2和TXA2。(4)取部分肝脏，置12%甲醛溶液中固定，病理切片观察肝组织中脂肪沉积情况。2.4观测指标及测定方法(O测定血清TG、HDL—c、LDL—c、TC，计算动脉硬化指数(AI)。用酶学法测定分析TC、TG等的原理是通过特殊氧化酶使底物生成过氧化氢，然后经过过氧化酶使它们结合成生色团。因生色团生成量可用比色法进行测定，所以产生的颜色与分析物的量成正比例。据此先绘已知分析物量的标准曲线，然后进行待测分析物的测定。测定TG、HDL-c、LDL—c、TC后，通过TC及HDL-c计算AI，AI=(TC-HDL-c)/HDL-c。(2)全血粘度测定取经1%肝素抗凝的全血lml，加入EBY-N6A自清洗旋转式粘度计测定全血低切(10/S)、中切(80/S)、高切(160/S)粘度。(3)PGl2及TXA2的测定取用EDTA.Na2抗凝分离出的血浆，根据解放军总医院科技开发中心放免所提供的6-Keto-PGFia及TXB2放免盒说明书用放免法测定6-Keto-PGFia(代表PGl2)及TXB2(代表TXA2)的含量。(4)取1/2肝脏置12%甲醛液中固定，进行病理观察。2.5统计方法实验数据以均值士标准差(X±S)表示，采用组间差异比较的差异性t检验进行统计分析。2.6实验结果2.6.1玉米须多糖对实验性高脂血症大鼠血脂代谢的影响与空白对照组比较,模型对照组可见血清TC、TG、LDL-c及AI含量明显升高(p〈0.00D，HDL-c含量明显下降(p〈0.01)，表明大鼠高脂血症模型复制成功。与模型对照组相比，玉米须多糖中剂量组和大剂量组可明显降低血清TC、TG、LDL-c及AI(p〈0.05或p〈0.01)，升高HDL-c(p〈0.05或p〈0.01)，见表l、2<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表3.玉米须多糖对高血脂大鼠PGl2、TXB2及PGI2/TXA2的影响(x±s，n=10)GroupPGl2(pg/ml)TXB2(pg/m！1)PGI2/TXA2NCMC玉米须多糖0.5g/kglg/kg2g/kg洛伐他汀30mg/kg499.69±98.64"331.32±98.48386.29±102.11447.75±72.65**455.89±68.46**415.45±73.37*46.63±8.67**63.32±12.1753.08±14.3350.61±11.24*48.98±9.29**49.13±10.32*11.04±2.恥"5.30±1.447.75±2.789.24士2.6r9.57±2.16"8.84±2.51**与模型组比T〈0.05，**p〈0.01,***p〈0.001，2.6.3玉米须多糖对高血脂大鼠血粘度的影响高脂对照组与正常对照组比较，全血低切、中切及高切粘度均明显增加(P0.05)，表明高脂血症大鼠伴有血液流变学的改变。与高脂对照组比较，中剂量组和大剂量组明显降低高脂血症大鼠全血低、中、高切粘度(PO.05或PO.01)。小剂量组能明显降低高脂血症大鼠全血低切粘度(PO.05)，见表4。表4.玉米须多糖对高血脂大鼠血粘度的影响(x±s,n=10)BloodviscosityGroup10/s80/s160/s(mPas)(mPa*s)(mPas)NC9.82±1.48"4.09土0.64'3.51±0.38材MC12.28±1.695.25±0.354.20±0.47玉米须多糖0.5g/kg11.56±2.124.71±0.35*4.11±0.66lg/kg10.55±1.57'4.42±0.54*3.68±0.44*2g/kg10.29±1.12"4.35士0.41'3.60±0.55*洛伐他汀30mg/kg10.48±1.29*4.43±0.35*3.81±0.19*与模型组比承P〈0.05,**p〈0.01，2.6.4玉米须多糖对实验性高脂血症大鼠肝脏的保护作用对各组大鼠肝脏进行病理观察，结果如下(1)空白对照组肝小叶结构清楚，肝细胞围绕小叶中央静脉呈放射状，汇管区见少许淋巴细胞。个别动物汇管区炎细胞浸润明显，肝小叶偶见坏死灶及炎细胞浸润，有的肝细胞内淤血。(2)模型对照组肝细胞可见灶状分布的肝细胞变性、坏死区。肝细胞呈明显的水样变性及脂变。坏死区炎细胞浸润明显，并见出血及纤维蛋白的渗出(3)小剂量组肝小叶中央区肝细胞脂变明显，部分肝细胞胞浆疏松化。炎细胞浸润灶，多数肝细胞变性及坏死明显(4)中剂量组肝小叶近中央区肝细胞脂变，亦见肝细胞胞浆呈现疏松化。部分动物肝脏可见有明显炎细胞浸润及坏死灶。(5)大剂量组仅少数动物肝细胞脂变明显，并见胞浆疏松化及炎细胞浸润。多数动物肝细胞脂变程度轻，炎症反应不甚明显。个别动物肝脏内有坏死灶。(6)阳性药组部分肝细胞表现为弥漫脂肪变性及胞浆疏松化，并见肝细胞灶状坏死及炎细胞浸润。通过形态学观察，可见给ACE药物组肝细胞脂变程度有所减轻，且有随剂量的增大而作用效果更明显的趋势。由此可见，ACE可降低大鼠肝脂肪蓄积，对减轻和防止肝脏的脂肪性具有一定作用。(二)玉米须多糖对糖尿病伴高血脂小鼠作用l实验材料u动物昆明小鼠100只，雌雄各半，体重1822g，由长春高新医学动物研究中心提供，生产许可证号SCXK-(吉)2003-0004。实验前适应性饲养至少7d,所有动物均自由取食和饮水。1.2试剂格列吡嗪(扬子江药业有限公司，批号20070712)临用时用0.5。/。CMC配成0.030/0混悬液；四氧嘧啶(sigma公司，批号A7413)临用时用生理盐水配成0.4。/。的溶液；正丁醇(北京化工厂，化学纯，批号20080214);乙醇(吉林市龙潭试剂厂，医药用，批号20080407);蒽酮(国药集团化学试剂有限公司，批号20071127);硫脲(沈阳试剂厂，批号930208)。1.3供试药物玉米须，2007年10月在吉林省吉林市郊区采集，经吉林大学药学院王广树教授鉴定为玉蜀黍玉米(ZeamaysL)甜粘l号的干燥花柱和柱头。玉米须多糖制备同前。临用前用去离子水配成2g(干膏)/100mL的溶液，置冰箱内IC藏，临用前摇匀。121.4仪器血糖仪长沙三诺生物传感技术有限公司，三诺SXT-1型；血糖试纸20080210;分析天平上海精密科学仪器有限公司FA2004N;紫外分光光度法山东高密彩虹分析仪器有限公司752N;Olympus显微镜BX51。2方法与结果2.1实验方法2丄1建立小鼠高血糖模型本实验采用以尾静脉注射四氧嘧啶的方法造小鼠高血糖模型。造模前，小鼠常规饲养3d后，测量小鼠空腹血糖值，即为小鼠给药前血糖值；禁食不禁水12h后，以给药体积为20mL/kg尾静脉注射(iv)0.4。/。的四氧嘧啶生理盐水溶液，艮卩80mg/kg。造模后常规饲养72h，尾静脉取血，测定造模后小鼠的血糖值(测量前禁食不禁水12h)。选择血糖值高于11.1mmol/L的小鼠为高血糖模型小鼠。2丄2分组给药取70只造模成功的小鼠，根据血糖值和体重随机分组，g卩模型组、阳性药组、玉米须纯化多糖低、中、高剂量组，每组10只，另随机取10只小鼠(未造模)作为空白组，给药方案如表5:表5给药方案组别药品给药剂量以上各组均灌胃(ig)给药，给药体积为20mL/kg,每天一次，连续给药30d。2丄3相关指标的测定给药第10d、20d时，尾静脉取血，测定药后lh空腹血糖值，即为给药第10d、20d给药后空腹血糖值；末次药后lh尾静脉取血，测定空腹血糖值，即为给药第30d的药后空腹血糖值；摘眼球取血，离心取血清，测定血清中CHO、TG含量(在吉化总医院用半自动生化分析仪测定)。2.2实验结果蒸馏水20mL/kg蒸馏水20mL/kg玉米须纯化多糖200mg/kg玉米须纯化多糖400mg/kg玉米须纯化多糖800mg/kgrTT1rTTjTTT^自對经组组遣遣遣白塾剂剂剂空模低中高以下所有结果均采用Excel进行组间差异性t检验，结果以均值士标准差(i士s)表示。2.2.1玉米须多糖对小鼠血糖的影响与空白组比较，模型组第0d、10d、20d和30d的血糖均显著升高(P<0.05)，表明小鼠高血糖模型成功；与模型组比较，阳性药组第20d和30d血糖值降低(PO.05)，纯化多糖中剂量组和大剂量组第30d血糖值降低(P<0.05)，结果见表6。表6玉米须多糖对小鼠血糖的影响(3f士s，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>与空白组比较，*P<0.05;与模型组比较，#P<0.052.2.2玉米须多糖对小鼠血清胆固醇和甘油三酯的影响与空白组比较，模型组小鼠血TG水平显著升高(P<0.05)，表明高血糖小鼠伴有明显血脂异常；与模型组比较，纯化多糖大剂量组高血糖小鼠血中CHO和TG水平显著降低(PO.05),结果见表7。表7玉米须多糖对小鼠胆固醇和甘油三酯的影响(3f±S，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>与空白组比较，*P<0.05;与模型组比较，#P<0.05实施例1本发明的制备方法①备料选取无虫蛀、无霉变、新鲜的青玉米须为原料，洗净、干燥、粉碎，过40目筛，待用；②脱脂玉米须粉料加入95%乙醇，浸泡过夜，以除去脂溶性杂质，真空过滤，滤饼再用相同浓度乙醇处理一次，待用；回收乙醇；③水提将脱脂后的药材分料投入浸提器中，加入10倍量的的去离子水，搅拌，浸泡24h后，于8(TC加热30min，提取3次，合并提取清液，待用；④浓縮把浸提清夜投入真空旋转蒸发仪中浓縮，减压、低温浓縮至料液原体积1/5，得浓縮液，待用；⑤脱色把浓縮液投入脱色釜中，在搅拌下加入浓度为20%的双氧水，混合均匀，加热，脱色时间2h，加热温度50'C，趁热过滤，得脱色液，加热回去残留双氧水，待用；⑥醇析把脱色液投入醇析釜中，加入适量的95%乙醇，使料液中乙醇浓度为70%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑦除杂把玉米须多糖加适量去离子水或蒸馏水溶解，加木瓜蛋白酶，酶底比1.0%、pH值5.5、体系在水浴中水解1.5h,温度为40'C，反应完后沸水浴灭酶IOmin;离心，除沉淀，待用；⑧透析把玉米须多糖澄清液装入透析袋中，用去离子水或蒸馏水透析48h，以去除无机盐、低分子量杂质，透析处理后，取出透析内液，待用；⑨醇析把脱透析液投入醇析釜中，加入95%乙醇、使料液中乙醇浓度为75%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑩干燥把玉米须多糖沉析物至真空干燥箱中，干燥，过100目筛，得玉米须多糖。实施例2本发明的制备方法-①备料选取无虫蛀、无霉变、新鲜的青玉米须为原料，洗净、干燥、粉碎，过40目筛，待用；②脱脂玉米须粉料加入95%乙醇，浸泡过夜，以除去脂溶性杂质，真空过滤，滤饼再用相同浓度乙醇处理一次，待用；回收乙醇；③水提将脱脂后的药材分料投入浸提器中，加入15倍量的的去离子水，搅拌，浸泡24h后，于85'C加热30min，提取3次，合并提取清液，待用；④浓縮把浸提清夜投入真空旋转蒸发仪中浓縮，减压、低温浓縮至料液原体积1/5，得浓縮液，待用；⑤脱色把浓縮液投入脱色釜中，在搅拌下加入浓度为25%的双氧水，混合均匀，加热，脱色时间2h，加热温度50'C，趁热过滤，得脱色液，加热回去残留双氧水，待用；⑥醇析把脱色液投入醇析釜中，加入适量的95%乙醇，使料液中乙醇浓度为72%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑦除杂把玉米须多糖加适量去离子水或蒸馏水溶解，加木瓜蛋白酶，酶底比1.0%、pH值5.5、体系在水浴中水解1.5h,温度为40'C，反应完后沸水浴灭酶IOmin;离心，除沉淀，待用；⑧透析把玉米须多糖澄清液装入透析袋中，用去离子水或蒸馏水透析48h，以去除无机盐、低分子量杂质，透析处理后，取出透析内液，待用；⑨醇析把脱透析液投入醇析釜中，加入95%乙醇、使料液中乙醇浓度为80%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；干燥把玉米须多糖沉析物至真空干燥箱中，干燥，过100目筛，得玉米须多糖。实施例3本发明的制备方法①备料选取无虫蛀、无霉变、新鲜的青玉米须为原料，洗净、干燥、粉碎，过40目筛，待用；②脱脂玉米须粉料加入95%乙醇，浸泡过夜，以除去脂溶性杂质，真空过滤，滤饼再用相同浓度乙醇处理一次，待用；回收乙醇；③水提将脱脂后的药材分料投入浸提器中，加入20倍量的的去离子水，搅拌，浸泡24h后，于90。C加热30min，提取3次，合并提取清液，待用；浓縮把浸提清夜投入真空旋转蒸发仪中浓縮，减压、低温浓缩至料液原体积1/5，得浓缩液，待用；⑤脱色把浓縮液投入脱色釜中，在搅拌下加入浓度为30%的双氧水，混合均匀，加热，脱色时间2h，加热温度50'C，趁热过滤，得脱色液，加热回去残留双氧水，待用；⑥醇析把脱色液投入醇析釜中，加入适量的95%乙醇，使料液中乙醇浓度为75%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑦除杂把玉米须多糖加适量去离子水或蒸镏水溶解，加木瓜蛋白酶，酶底比1.0%、pH值5.5、体系在水浴中水解1.5h,温度为40。C，反应完后沸水浴灭酶IOmin;离心，除沉淀，待用；⑧透析把玉米须多糖澄清液装入透析袋中，用去离子水或蒸馏水透析48h，以去除无机盐、低分子量杂质，透析处理后，取出透析内液，待用；⑨醇析把脱透析液投入醇析釜中，加入95%乙醇、使料液中乙醇浓度为85%(v/v),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑩干燥把玉米须多糖沉析物至真空干燥箱中，干燥，过100目筛，得玉米须多糖。所得干燥物用a-萘酚、茚三酮鉴定为多糖、用苯酚硫酸法进行含量测定。每克玉米须纯化多糖(含量40~50%以上)相当于玉米须80100g。17实施例4本发明胶囊剂的制备玉米须多糖10.0g，药用淀粉240g,二者充分混合，装胶囊，制成1000粒胶囊，每粒重0.25g,含玉米须多糖10mg。权利要求1、玉米须多糖在制备治疗高血脂症的药物中的应用。2、玉米须多糖在制备治疗糖尿病伴高血脂症的药物中的应用。3、如权利要求1或2所述的药物中应用，其特征在于玉米须多糖的制备方法包括下列步骤①备料选取无虫蛀、无霉变、新鲜的青玉米须为原料，洗净、干燥、粉碎，过40目筛，待用；②脱脂玉米须粉料加入95%乙醇，浸泡过夜，以除去脂溶性杂质，真空过滤，滤饼再用相同浓度乙醇处理一次，待用；回收乙醇；③水提将脱脂后的药材分料投入浸提器中，加入1020倍量的的去离子水，搅拌，浸泡24h后，于8090。C加热30min,提取3次，合并提取清液，待用；④浓縮把浸提清夜投入真空旋转蒸发仪中浓縮，减压、低温浓縮至料液原体积1/5，得浓縮液，待用；⑤脱色把浓缩液投入脱色釜中，在搅拌下加入浓度为2030%的双氧水，混合均匀，加热，脱色时间2h，加热温度50'C，趁热过滤，得脱色液，加热回去残留双氧水，待用；⑥醇析把脱色液投入醇析釜中，加入适量的95%乙醇，使料液中乙醇浓度为70%~75%(V/V),搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑦除杂把玉米须多糖加适量去离子水或蒸馏水溶解，加木瓜蛋白酶，酶底比·1.0%、pH值5.5、体系在水浴中水解1.5h,温度为40'C，反应完后沸水浴灭酶IOmin;离心，除沉淀，待用；⑧透析把玉米须多糖澄清液装入透析袋中，用去离子水或蒸馏水透析48h，以去除无机盐、低分子量杂质，透析处理后，取出透析内液，待用；⑨醇析把脱透析液投入醇析釜中，加入95%乙醇、使料液中乙醇浓度为75%~85%(V/V)，搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，得沉析物为玉米须多糖，待用；⑩干燥把玉米须多糖沉析物至真空干燥箱中，干燥，过100目筛，得玉米须多糖。全文摘要本发明涉及玉米须多糖在制备治疗高血脂症的药物中的应用，属于医药领域，尤其是指玉米须多糖的新药物用途。玉米须多糖在制备治疗高血脂症或糖尿病伴高血脂症的药物中的应用。本发明的有益效果是玉米须多糖为纯天然药物，在降低血糖的同时，还能够降低血脂，说明其降血糖机制不是单一环节，而是多方面、多靶点综合作用的结果，将其作为防治糖尿病及其并发症的药物开发具有重要的现实意义。增加植物资源的新用途；带动区域经济的发展。文档编号A61K31/715GK101658528SQ200910067588公开日2010年3月3日申请日期2009年9月25日优先权日2009年9月25日发明者周鸿立,艳张,杨英杰,王亚红,俊邱,钟方丽申请人:吉林化工学院