专利名称：环孢素a前体脂质体、药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种环孢素A的前体脂质体制剂及其制备方法。
背景技术：
环孢素A(C62H111N11O12)是由11个氨基酸组成的环状多肽，是一种强效的免疫 抑制剂，能特异而可逆地作用于淋巴细胞，而不影响造血及吞噬细胞的功能。现已被广 泛应用于器官移植病人抗排斥反应以及多种自身免疫疾病，是临床上的重要用药。由于 环孢素A的水溶性很差，口服生物利用度低，为其设计合理的剂型具有重要意义。环孢 素A首选为口服给药，目前国内外上市产品有口服溶液剂、胶囊剂和自乳化软胶囊剂。 其中，口服溶液剂为非水溶液，需要与牛奶等饮品混服，用药多有不便。普通胶囊剂药 物溶出较差，药物吸收易药物溶解度和进食等影响，据报道其生物利用度很不稳定。而 自乳化软胶囊剂，例如瑞士诺华公司的环孢素A自微乳化软胶囊(新山地明)，是目前 市面上的重要产品，通过自乳化技术使药物在胃肠道内形成高度分散的乳滴，促进药物 吸收。但该技术由于引入了大量的表面活性剂，引起一系列毒副作用，例如胃肠道刺 激性、过敏反应、肾毒性等。为了改善环孢素A现有制剂的不足，近年来国内外一直 在进行探索和研究，例如，在中国专利(授权公告号CN1245212C) “环孢素A固体分 散体及其制备方法”中提供了一种环孢素A固体分散体制剂，其体外药物溶出速率较原 料药有显著提高，与环孢素A自微乳化软胶囊(新山地明，瑞士诺华制药公司)相似。 在中国专利(授权公告号CN1233413C) “供口服的纳米粒给药系统”中提供了一种环 孢素A肠溶纳米粒制剂，口服生物利用度与新山地明相似。在中国专利申请(公开号 CN101239048A) “环孢素A速释固体剂型及其制备方法”中公开了一种速释固体剂型， 系将环孢素A溶于加热熔融的脂质材料中，再加入微粉硅胶等多孔材料予以充分吸收， 制的固体粉末。该发明增加了环孢素A的溶出速度，有利于药物吸收，并具有良好的稳 定性。脂质体是由磷脂双分子层组成的微小囊泡，是近年来最有潜力的药物新剂型之 一。具有较强的载药和递药能力，并且无毒无刺激性，生物相容性极佳。除静脉注射给 药，近年来脂质体在口服给药系统中的应用也逐渐展现出应用潜力。研究表面，脂质体 能够显著促进难溶性和难吸收药物的口服吸收，这得益于脂质体独特的膜融合传递机制 和增溶能力。但脂质体制备工艺复杂，难以工业化生产，限制了其实际应用。申请人:在最近的研究中令人意外地发现，将环孢素A与适当的药用辅料相配合 并通过特定的制备方法可得到一种环孢素A前体脂质体，能够实现与脂质体相同的载药 和递药效果。前体脂质体是基于脂质体技术的新剂型，系将磷脂吸附于固体载体表面形 成的固态粉末形成的一种固体剂型，临用时加水复溶，或者与胃肠液接触，就能形成脂 质体，发挥脂质体的作用。前体脂质体具有一系列优点，例如解决了脂质体储存时的 稳定性问题、适合口服给药、制备工艺较简单、适合工业化生产等。研究证明，前体 脂质体能够改善难溶性药物的口服生物利用度，例如Hongtao Xu等报道(Hongtao Xu,etal，J Control.Release, 2009，140 61-68),将难溶性药物长春西汀(vinpocetine)制
备成前体脂质体，其口服生物利用度为普通混悬剂的3.5倍。林薇等报道(药学学报， 2009，44 192-196)，将川陈皮素制备成前体脂质体，与混悬剂相比，相对生物利用 度为264.3%，并且药物的平均滞留时间得到延长。邓英杰等在中国专利(授权公告号 CN1444948B) “灯盏花素脂质体及其制备方法”中，描述了一种灯盏花素前体脂质体， 改善了灯盏花素口服吸收差、生物利用度低的不足，并提高了脂质体制剂的稳定性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可供口服的环孢素A前体脂质体及其制备方法。进 一步目的在于提供环孢素A前体脂质体药物组合物及其制备方法。其特点是能够提高环 孢素A的溶出度和口服生物利用度，稳定性良好，并且适合于工业化生产。本发明是通过以下技术方案来实现的—种环孢素A前体脂质体，其特征在于由以下重量百分比的药学活性成分和非 活性成分组成环孢素A -25%卵磷脂2% -25%胆固醇0.5%-12.5%多元醇36.00%-96.45%维生素E 0.05%-1.50%。所述的环孢素A前体脂质体，其特征在于卵磷脂是指大豆卵磷脂、蛋黄卵磷 脂、氢化大豆卵磷脂或氢化蛋黄卵磷脂中的一种或多种的混合物。所述的环孢素A前体脂质体，其特征在于多元醇是指山梨醇、木糖醇或甘露醇 中的一种或多种的混合物。所述的环孢素A前体脂质体在加入水性介质后自发形成脂质体。一种环孢素A前体脂质体药物组合物，即在于可进一步制备成用于口服的胶囊 剂、片剂、混悬剂或干混悬剂。一种环孢素A前体脂质体的制备方法，包括以下步骤将环孢素A、卵磷脂、 胆固醇和维生素E溶解于有机溶剂中形成澄清透明的溶液，将所得溶液与多元醇粉末均 勻混合，此混合物通过减压和/或加热除去有机溶剂。进一步的，所述的环孢素A前体脂质体的制备方法，其特征在于还包含以下步 骤多元醇在使用前被粉碎至粒径均勻的粉末。上述的制备方法中，所述的有机溶剂是指乙醇、丙二醇、叔丁醇、正丁醇或甲 醇中的一种或其中多种的混合物，优选为乙醇、丙二醇或叔丁醇中的一种。进一步的，所述的制备方法是通过流化床或旋转蒸发仪进行混合和移除有机溶 剂步骤。本发明的有益效果本发明所述的环孢素A前体脂质体，具有适合工业化生产、稳定性良好、具有 较高的溶出度和口服生物利用度等优点。本发明所提供的环孢素A前体脂质体的制备方法，大幅度简化了常规脂质体所需的工艺步骤，可实现实验室小批量至工业化大批量生产，产品的稳定性和重现性良 好。对采用实施例2所述方法制备的3批样品进行了稳定性考察，结果表明，所制得 的环孢素A前体脂质体在25°C储存6个月，其含量、包封率均无显著降低，有关物质和 氧化磷脂含量等指标符合要求。对采用实施例2所述方法制备的3批样品进行了溶出度考察，结果表明，本品 经30分钟时溶出度大于85%，而良好的溶出度是保证口服生物利用度的重要前提条件之。大鼠体内生物利用度研究表明，本发明所述的环孢素A前体脂质体能够促进药 物的口服吸收，获得良好的口服生物利用度。另外，本发明所提供的环孢素A前体脂质体，由于环孢素A被包裹于脂质体微 小囊泡中，在体内避免了胃肠道直接接触高浓度的药物，能够减轻药物对胃肠道的刺激 性。
具体实施例方式以下通过实施例对本发明作进一步阐述，但这些实施例不是对本发明的限制。实施例1，环孢素A前体脂质体及其的混悬液制备称取环孢素A 500mg、氢化大豆卵磷脂4000mg、胆固醇1500mg和维生素E IOOmg,加50mL乙醇超声溶解，得溶液(1)。称取山梨醇18.0g，置万能粉碎机中粉 碎，过筛，将山梨醇粉末置于圆底烧瓶中，加入溶液(1)，于54°C下减压旋转蒸发至乙 醇挥发完全，得干燥的白色粉末，取出，过筛，40°C烘箱干燥lh，即得环孢素A前体脂 质体。取本品适量分散于水中，振摇，即得半透明的环孢素A脂质体混悬液。通过微 柱离心法测定其包封率，结果大于85%。实施例2，环孢素A前体脂质体胶囊的制备称取实施例1制备的环孢素A前体脂质体粉末18.9g、微晶纤维素2.5g、交联聚 维酮1.2g和胶体二氧化硅0.25g，混合均勻，填充至0号硬胶囊壳中，即得。实施例3，环孢素A前体脂质体制备工艺取山梨醇1.8kg，研磨、过筛备用。取环孢素A50.0g、氢化大豆卵磷脂400.0g、
胆固醇150.0g和维生素ElO.Og，溶于丙二醇中，所得溶液用流化床底喷的方式喷于上述 山梨醇粉末，干燥，过筛，即得。实施例4，环孢素A前体脂质体制备工艺称取山梨醇lO.Og，粉碎、过筛备用。称取环孢素A 500mg、大豆卵磷脂 2500mg、胆固醇IOOOmg和维生素E 50mg，溶于叔丁醇，得溶液(1)。将山梨醇粉末置 于圆底烧瓶中，加入溶液(1)，于54°C下减压旋转蒸发至叔丁醇挥发完全，得干燥的白 色粉末，取出，过筛，40°C烘箱干燥lh，即得。实施例5，环孢素A前体脂质体制备工艺称取木糖醇lO.Og，粉碎、过筛备用。称取环孢素A 500mg、大豆卵磷脂 2000mg、胆固醇500mg和维生素E50mg，溶于正丁醇，得溶液(1)。将木糖醇粉末置于圆底烧瓶中，加入溶液(1)，于54°C下减压旋转蒸发至正丁醇挥发完全，得干燥的白色 粉末，取出，过筛，40°C烘箱干燥lh，即得。实施例6，环孢素A前体脂质体大鼠口服生物利用度试验雄性韦斯特大鼠14只，体重200士20g，平均分为两组，禁食12h后分别按 15mg/kg剂量给予自制环孢素A前体脂质体粉末(实施例1)和市售参比制剂自微乳化 软胶囊(新山地明)内容物。在不同时间间隔眼眶取血，按一定方法处理，精密量取 全血lmL，置IOmL具塞离心管中，加入内标液100 μ L及0.1mol/L氢氧化钠0.5mL， 水浴孵化5min后，加入石油醚-乙醚3mL，旋涡5min，离心，取醚层水浴挥干，残渣 分别加入70%甲醇300 μ L和正庚烷2mL，旋涡5min，离心，移除上层液后于50°C水 浴氮气流下挥干，用50 μ L甲醇溶解后以HPLC进样20 μ L分析环孢素A浓度，色谱 条件为色谱柱Diamasil C18 (4.6 X 200mm，5 μ m)；流动相乙腈-甲醇-水-磷酸 (70 12 18 0.03)；检测波长210nm;柱温70°C ；流速1.0mL/min。测定结果如 下表所示。表大鼠口服给药后环孢素A平均血药浓度随时间的变化，参比制剂为新山地 明，受试制剂为自制环孢素A前体脂质体。
时间(h)C 参比(ng/mL)C 受试(ng/mL)0. 5919. 5633. 411480. 3876. 921722. 21406. 031431. 51572. 241134. 71325. 66855. 0970. 38724. 8761. 312540. 2556. 8 经计算可知，受试制剂的平均药时曲线下面积AUCcht为 10.12 X IO3ng · mL1 · h， 参比制剂的平均药时曲线下面积AUCcht为 11.16X103ng · mL1 · h,相对生物利用度为90.7%，表明本发明所述的环孢素A前体脂 质体与自微乳化软胶囊新山地明一样，能够获得良好的口服生物利用度，但避免了自微 乳化软胶囊中的表面活性剂所导致的毒副作用。
权利要求
1.一种环孢素A前体脂质体，其特征在于由以下重量百分比的药学活性成分和非活 性成分组成环孢素A 1% -25%,卵磷脂2% -40%,胆固醇 0.5%-12.5%，多元醇 21.00%-96.45%，维生素 E 0.05% -1.50%。
2.根据权利要求1所述的环孢素A前体脂质体，其特征在于卵磷脂是指大豆卵磷脂或 蛋黄卵磷脂或氢化大豆卵磷脂或氢化蛋黄卵磷脂中的一种或其中多种的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的环孢素A前体脂质体，其特征在于多元醇是指山梨醇或 木糖醇或甘露醇中的一种或其中多种的混合物。
4.采用权利要求1所述的环孢素A前体脂质体的脂质体，其特征在于加入水性介质后 自发形成脂质体。
5.根据权利要求1所述的环孢素A前体脂质体的药物组合物，其特征在于制备成用于 口服的胶囊剂、片剂、混悬剂或干混悬剂。
6.根据权利要求1所述的环孢素A前体脂质体的制备方法，包括以下步骤将环孢 素A、卵磷脂、胆固醇和维生素E溶解于有机溶剂中形成澄清透明的溶液，将所得溶液与 多元醇粉末均勻混合，此混合物通过减压和/或加热除去有机溶剂。
7.根据权利要求6所述的环孢素A前体脂质体的制备方法，其特征在于还包含以下步 骤多元醇在使用前被粉碎至粒径均勻的粉末。
8.根据权利要求6所述的环孢素A前体脂质体的制备方法，其特征在于有机溶剂是指 乙醇或丙二醇或叔丁醇或正丁醇或甲醇中的一种或其中多种的混合物。
9.根据权利要求8所述的环孢素A前体脂质体的制备方法，其特征在于有机溶剂为乙 醇或丙二醇或叔丁醇中的一种。
10.根据权利要求6所述的环孢素A前体脂质体的制备方法，其特征在于包括通过流 化床或旋转蒸发仪进行混合和移除有机溶剂步骤。
全文摘要
本发明公开了一种可供口服的环孢素A前体脂质体、药物组合物及其制备方法。所述的环孢素A前体脂质体，由以下重量百分比的药学活性成分和非活性成分组成环孢素A1-25％，卵磷脂2-40％，胆固醇0.5-12.5％，多元醇21-96.45％，维生素E0.05-1.50％。由环孢素A、脂质膜材和亲水性基质等通过超声波分散法及逆相蒸发法制备成前体脂质体，遇水分散后即自发形成脂质体。所述的前体脂质体能够提高难溶性药物环孢素A的分散度和口服生物利用度，稳定性良好，并且相对于普通脂质体更适合于工业化生产。
文档编号A61K9/10GK102008713SQ20101057025
公开日2011年4月13日 申请日期2010年12月2日 优先权日2010年12月2日
发明者崔婧, 李宁, 王丽丽, 王志国 申请人:深圳海王药业有限公司