专利名称：一种含有冰片的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及ー种含有吉马酮、呋喃ニ烯、莪术ニ酮、β -榄香烯、莪术醇、莪术烯、冰片的药物组合物。
背景技术：
人乳头瘤病毒(HPV)是ー种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属，是球形DNA病毒，能引起人体皮肤黏膜的鱗状上皮増殖。目前已分离出130多种，不同的亚型引起不同的临床表现，侵犯不同的组织部位。按发癌性分类，可分为低危型HPV和高危型HPV。 HR-HPV主要包括13种亚型，与宫颈癌、宫颈鳞状上皮瘤变(CIN)的发生密切相关。宫颈持续感染HR-HPV 8 10年即可发展成宫颈癌，而“宫颈癌”是继乳腺癌后的第二大妇科癌症，全球新发病例46万/年，亚洲占一半，80%发生在发展中国家，毎年死于宫颈癌的患者近20万人。我国新发病例13万/年，死于宫颈癌4-5万/年，发病率和死亡率均呈现増加趋势。“宫颈癌”是目前唯一病因明确的可防治的癌症，清除HR-HPV是阻断病程、预防宫颈癌的决定因素。近十几年来，以保妇康栓(主要成分为莪术油和冰片)为代表的中药被广泛应用于女性生殖道HPV感染的治疗，并取得了一定的疗效，但所使用的莪术油成分复杂，活性成分含量多变，且易挥发，明显影响疗效；因此，急需开发成分明确，含量稳定的药物组合物来预防治疗HPV感染以及其诱发的良性或恶性病变，特别是对至宫颈癌的HR-HPV感染。冰片最早见于《名医别录》,称龙脑香,系龙脑香科植物龙脑香Dryobalarops aramatica Gaerta. f.树脂的加工品，又称梅片。始载于宋《开宝本草》之艾纳香冰片系从菊科植物艾纳香Blum ea balsam ifera(L. )DC.叶提取的,又称艾片。近代以樟脑、松节油等为原料经化学反应人工合成的，称为合成冰片，又称机片。龙脑香即龙脑冰片的主要成分为右旋龙脑(d-borneol);艾片主要为左旋龙脑(Ι-borneol);合成冰片为目前临床所常用，除含有不低于55%消旋龙脑外，还含有约35%的异龙脑(isoborneol)以及其它成分。龙脑化学名称为1，7，7_三甲基ニ环[2，2，1]庚-2_醇，分子式为CltlH18O,在化学上属職类物质。龙脑具有内向构型(endo-configuration)和外向构型(exo-configuration)两种类型之分。其分子结构式分别如下
ゾ丫
ム、Zh
OHH正龙脑异龙脑从结构图中可以看出主要为_0H(羟基)位置不一样。在化学应用上，一般把正龙脑简称龙脑，而异龙脑仍称异龙脑。现在书面上的龙脑名称如没有作说明的话，一般就是正龙脑。正龙脑按旋光不同分为左旋龙脑(艾片)和右旋龙脑(梅片)。由正龙脑和异龙脑结构式可以看出，它们分子结构中有三个不对称碳原子，二分子中的偕ニ甲基桥为顺式，因此它的异构体有四个，即d-正龙脑，L-正龙脑，d-异龙脑，L-异龙脑。其d与L的区别就在于它们的旋光性不同，即-OH与偕ニ甲基桥界面所成角度的不同，即d-正龙脑为34° 37.7°，而L-正龙脑为143. 3° 146°。因龙脑空间结构中-OH位置的不一样，从而带来物理化学性质的不同，比如顔色、气味、药用价值均有所差异《冰片的药理实验研究概況》(天津中医药，Aug.2003，Vol. 20，NO. 4 :85 87)报道龙脑的LD5tl大于异龙脑，表明龙脑的毒性较异龙脑小，合成冰片的毒性则介于二者之间，可能与合成冰片含的异龙脑的LD5tl较小有关；同时文献中进ー步指出粘膜给药时异龙脑的刺激性大于龙脑。
发明内容
为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种药物组合物及其制剂。本发明的目的是提供一种药物组合物，该组合物对HR-HPV和/或LR-HPV感染有效。本发明的目的是提供ー种药物组合物，该组合物对阴道炎有效。本发明的目的是提供ー种药物组合物，该药物组合物中控制莪术烯和莪术醇的用量。本发明的目的是提供ー种药物组合物，该药物组合物中的冰片中龙脑的含量大于等于70%。本发明的目的是提供ー种含有该药物组合物的制剂。本发明的目的是提供ー种含有该药物组合物的制剂，所得制剂的刺激性较小。本发明的目的是提供ー种含有该药物组合物的制剂在抗HPV病毒中的应用。本发明的目的是提供ー种含有该药物组合物的制剂在治疗阴道炎中的应用。具体而言，本发明提供了 ー种药物组合物，其特征药物组合物包含吉马酮、呋喃ニ烯、莪术ニ酮、榄香烯、莪术醇、莪术烯、冰片，其中所述的冰片中龙脑的含量大于等于70%且小于100%。上述所述的药物组合物，包含以下重量份的成分吉马酮5-16重量份；呋喃ニ烯10-40重量份；義术ニ丽5-25重量份；β -揽香稀4-11重量份；義术醇0-0. 5重量份；義术稀0-0. 5重量份；冰片30-90重量份。上述所述的冰片选自天然冰片和/或合成冰片。上述所述的冰片中龙脑的含量大于等于70%。上述所述的药物组合物制备成阴道给药制剂或直肠给药制剂。
所述制剂包括栓剂，软膏剂、胶囊剂、泡腾片、凝胶剂、洗剂、膜剂或泡沫剂。上述所述的药物组合物在制备预防和/或治疗人乳头瘤病毒感染的药物中的应用。其中人乳头瘤病毒感染包含高危型人乳头瘤病毒感染和/或低危型人乳头瘤病毒感染。上述所述的药物组合物在制备预防和/或治疗阴道炎、宫颈糜烂、宫颈癌的药物中的应用。 本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果I、本方明所述的药物组合物成分明确，质量可控；2、本发明所述的药物组合物不受原料产地的限制，适合エ业大生产；3、本发明所述的药物组合物对HR-HPV和/或LR-HPV、宫颈疾病等具有很好的治疗作用，适于临床广泛应用。
图I空白血浆样品色谱图。图2加入内标物和对照品的空白血浆样品色谱图(I.内标物对羟基苯甲酸こ酷，
2.莪术醇，3.莪术ニ酮)。图3阴道给予莪术油的血浆样品色谱图(I.内标物对羟基苯甲酸こ酷，2.莪术醇，
3.莪术ニ酮)。药理学试验以下通过具体实施方式
的描述对本发明作进ー步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。莪术油由江西省吉水药用油提炼厂生产；吉马酮、呋喃ニ烯、莪术ニ酮、榄香烯、莪术醇、莪术烯购自上海顺勃生物有限公司。合成冰片(龙脑59.9%，异龙脑37.5% )由广州化工厂生产；合成冰片(龙脑70. 3%,异龙脑29. 7% )、合成冰片(龙脑83.9%，异龙脑16. 3% )购自天津利朗化工科技有限公司。保妇康栓，由海南碧凯药业有限公司生产，根据CN03178501. 8所述的方法测定冰片的含量，姆粒含龙脑为标示量的62. 3%,异龙脑为标示量的28. 7%。试验例I:阴道刺激性实验动物健康性成熟雌性大耳白家兔25只，体重2. 5 3. 0kg。试验药物药物I组保妇康栓，海南碧凯药业有限公司生产，每粒重I. 74g，其中含莪术油88mg,冰片75mg,其余成分为基质。药物2组实施例I所得栓剂(冰片中龙脑的含量为83. 9% )。药物3组根据实施例I所得栓剂(冰片中龙脑的含量为59. 9% )。
试验方法雌兔25只，随机分为5组，分别为空白组、机械刺激组、药物I组、药物2组、药物3组。每天定时以消毒的玻璃套管将栓剂缓缓推入阴道深处(机械刺激组只使用玻璃套管不加药物)，给药前用消毒过的玻璃套管刺激使其排尿，给药后将家兔仰卧位固定IOmin后放回，连续给药7天，给药量为8mg活性成分/kg。于末次试验后24h内将雌兔处死解剖，肉眼观察并记录阴道充血和炎症情況。取阴道组织，以10%甲醛液固定，分成上、中、下三段，制成5 μ m石蜡包埋切片，常规染色进行组织学炎症刺激程度判定染色，光镜下观察。按Eckstein标准，以充血、水肿、炎症细胞浸润及上皮细胞坏死4项指标评分。每项刺激程度分别判定为O 4分，O分为无刺激反应，4分为严重损伤，总分在O 8分为可接受，9 10分为边缘值，^ 11分为不可接受。试验结果肉眼观察5组雌兔阴道均未见异常。各组雌兔阴道溃疡、浸润、水肿和充血评分及总分值见表I。 表I :雌兔阴道刺激实验结果
组别~例数(只)τκ 炎症细胞上皮细总分
浸润胞坏死
机械刺激52.21.31.20.9 5.4
药物 I 组5332Α1.3OJ _ ~ 1.1
药物 2 组5OJ0904OJ 2.1"
H物 3 组5— ~ " "1.4O".8 ' OJ0.1 3.0
~$15OlOl0801 LI~试验结论从上表可知的机械刺激组、药物I组、药物2组、药物3组的总分均在可接受的范围内；其中药物2组、药物3组的总分数明显低于药物I组(P < O. 01)，且低于机械刺激组(P < O. 05);药物2组的总分数低于药物3组(P < O. 05)。试验例2 :豚鼠体内的莪术醇、莪术ニ酮的血药浓度测定实验仪器、试药与动物试药甲醇、こ腈均为色谱纯，二次蒸馏水。内标对羟基苯甲酸こ酯(分析纯)。药物I组实施例I所得栓剂(冰片中龙脑的含量为83. 9% )。药物2组根据实施例I所得栓剂(冰片中龙脑的含量为70. 3% )。药物3组根据实施例I所得栓剂(冰片中龙脑的含量为59. 9% )。动物军事医学科学院动物中心提供的短毛雌性豚鼠，体重500g±21g，共30只，分五组，每组6只，依次为空白对照组、辅料空白组、药物I组、药物2组、药物3组，通过阴道给予药物，连续给药21天。采血及提取连续给药21天后，于第22天，将每组4只豚鼠心脏取血约2ml，离心得血浆1ml，用こ醚提取3次，合井吹干，加入含内标的丙酮液待測。每组余2只豚鼠，正常喂养21天，第22天同样心脏取血及提取。方法与结果I、豚鼠血浆中莪术ニ酮的含量测定I. I色谱条件柱前压为50kPa ;不分流；气化室温度280°C ;检测器温度300°C ;柱温采用程序升温起始温度100°C，以5°C /min升温至200°C，保持3min，再以30°C /min的升温速率，升至250°C，保持lOmin，进样量为5μ I。I. 2对照品贮备液的配制和内标液的准备分别精密量取莪术醇、莪术ニ酮，用甲醇稀释到2. 57mg/ml和5. 08mg/ml的浓度，作为贮备液备用 。精密称取对羟基苯甲酸こ酯用甲醇配制成3. 12mg/ml的溶液备用。I. 3血浆样品的处理方法本实验采用蛋白沉淀法处理血浆，沉淀剂选择3倍量甲醇，具体处理方法为吸取血浆100 μ 1，精密加入内标液10 μ 1，精密加入甲醇300 μ 1，涡旋混合3min，12000r/min离心20min，精密吸取上清液300 μ 1，40°C水浴吹干，精密加入50 μ I甲醇，涡旋Imin，取上清液5 μ L进样。I. 4标准曲线的绘制分别取豚鼠空白血浆7份，加入适量体积的对照品贮备液，按照 I. 3 项方法处理，制得莪术醇浓度 O. 001028,0. 02056,0. 04112,0. 08224,0. 1645、
0.3290、0·6580mg/ml 和莪术 ニ酮浓度(λ 04064、0· 08128、0· 1626、0· 3251、0· 6502、
1.300mg/ml的血浆样品。进样5 μ 1，记录色谱图，分别以莪术醇和莪术ニ酮与对羟基苯甲酸こ酯的峰面积比Y对浓度X进行线性回归，得莪术醇的标准曲线Y = 2. 0765Χ+0. 0031，r = O. 997，表明在O. 02056 O. 6580mg/ml浓度范围内，莪术醇线性关系良好；莪术ニ酮的标准曲线Y = O. 1606Χ+0. 0071,r = O. 992，表明在 O. 04064 I. 300mg/ml 浓度范围内，莪术ニ酮线性关系良好。I. 5方法专属性考察豚鼠空白血浆加入莪术醇、莪术ニ酮对照品贮备液及内标物对羟基苯甲酸こ酯之后，按照I. 3项样品处理方法处理后吸取5 μ I进样，与空白血浆比较，内源性杂质与对照品及内标物与相邻色谱峰分离度均在1.3以上，表明分离良好，色谱图见图I。I. 6精密度实验按照I. 3项血浆样品处理方法，分别配制O. 04112,0. 1645、
O.6580mg/ml浓度的莪术醇和O. 08128,0. 3251,1. 300mg/ml浓度的莪术ニ酮空白血浆样品。连续进样3d，根据各色谱图中峰面积比值计算日内、日间精密度。结果显示，日内精密度的RSD%莪术醇高、中、低3个浓度分别为6. 8、7. 8和8. 2，莪术ニ酮高、中、低3个浓度分别为7. I、5. 4和9. 4 ;日间精密度的RSD%莪术醇高、中、低3个浓度分别为7. 3、6. 9和11. 1，莪术ニ酮高、中、低3个浓度分别为9. 5,7. 7和12. 3，均符合血浆药品測定要求。I. 7稳定性实验及融冻次数考察分别取O. 1645mg/mL浓度的莪术醇和O. 3251mg/mL浓度的莪术ニ酮的空白血衆样品各6份，室温放置,分别于O、l、2、4、6、8h和第1、2、3、4、5天进样。另取-25°C冰箱保存的O. 1645mg/mL莪术醇和O. 3251mg/mL莪术ニ酮血浆样品，反复冻融5次，按I. 3项下确定的血浆样品预处理方法进行样品处理，根据各色谱图峰面积比考察日内、日间稳定性，及融冻次数影响。结果见表2。表2莪术醇和莪术ニ酮的日内、日间稳定性及融冻次数考察
权利要求
1.ー种药物组合物，其特征药物组合物中包含吉马酮、呋喃ニ烯、莪术ニ酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯、冰片，其中冰片中龙脑的含量大于等于70%且小于100%。
2.根据权利要求I所述的药物组合物，其中所述的药物组合物，包含以下重量份的成分 吉马酮5-16重量份； 呋喃ニ烯10-40重量份； 莪术ニ酮5-25重量份； β -榄香烯4-11重量份； 莪术醇0-0. 5重量份； 莪术烯0-0. 5重量份； 冰片30-90重量份。
3.根据权利要求I或2所述的药物组合物，其中所述的冰片选自天然冰片和/或合成冰片。
4.根据权利要求3所述的冰片，其中所述的冰片中龙脑的含量大于等于70%且小于100%。
5.根据权利要求I或2所述的药物组合物制备成阴道给药制剂或直肠给药制剂。
6.根据权利要求5所述的制剂，其中制剂包括栓剂，软膏剂、胶囊剂、泡腾片、凝胶剂、洗剂、膜剂或泡沫剂。
7.根据权利要求I或2所述的药物组合物在制备预防和/或治疗人乳头瘤病毒感染的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其中人乳头瘤病毒感染包含高危型人乳头瘤病毒感染和/或低危型人乳头瘤病毒感染。
9.根据权利要求I或2所述的药物组合物在制备预防和/或治疗阴道炎、宫颈糜烂、宫颈癌的药物中的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，本发明提供了一种含有冰片的药物组合物，该药物组合物含有吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯，冰片的药物组合物。该药物组合物成分明确，质量可控；该药物组合物控制冰片中龙脑的含量，以提高药物组合物的血药浓度及粘膜吸收率；本发明所述的药物组合物可以用于制备栓剂，软膏剂、胶囊剂、泡腾片、凝胶剂、洗剂、膜剂或泡沫剂；本发明所述的药物组合物对HR-HPV和/或LR-HPV、宫颈疾病等均有很好的治疗作用，适于临床广泛应用。
文档编号A61K31/045GK102846592SQ201210347689
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月19日 优先权日2012年9月19日
发明者陈容, 徐扬, 冯仲异, 史朝辉 申请人:海南碧凯药业有限公司