专利名称：一种总不饱和蟾蜍内酯及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种总不饱和蟾蜍内酯及其制备方法，以及该总不饱和蟾蜍内酯在制备预防和治疗前列腺癌药物中的应用；本发明的总不饱和蟾蜍内酯是以蟾蜍内酯为原料经修饰后得到的。
背景技术：
前列腺癌是男性多发癌症之一，其发病率与人种、年龄及生活方式有关。在上世纪八十年代以前，我国的发病率明显低于西方国家。分析其原因主要有两个1)中国传统饮食中脂肪比例少，而蔬菜和豆制品比例多，因而中国人饮食中含有大量植物雌激素类成分，这类成分可抑制前列腺癌细胞生长；2)中国男性前列腺受体基因中CAG多肽重复序列相对 较长。但是，近三十年来，我国老百姓的生活水平明显提高，饮食中脂肪比例显著上升，前列腺癌发病率有逐年上升的趋势。流行病学数据显示，中国前列腺癌发病率从1993年的1. 71人/10万男性人口增加到2005年的7. 9人/10万男性人口。随着我国社会老龄化现象日趋严重，未来10年，我国前列腺癌的发病可能会进入高峰期。因此，寻找高效低毒的预防和治疗前列腺癌的药物显得十分迫切。中药蟾酥为来源于中华大蟾蜍(Bufo bufo gar gar i z an s Cantor)或黑眶蟾蜍(Bufo melanostictus Schneider)的干燥分泌物,辛、温、有毒,具有解毒、止痛、开鸾醒神的功效，用于痈疽疔疮，咽喉肿痛等症(国家药典编委会.中华人民共和国药典(一部).北京化学工业出版社· 2005 :265.)。含蟾酥的中成药较多，六神丸、六应丸、喉症丸、蟾酥丸等。现代研究表明，蟾蜍内酯类化合物为蟾蜍的主要活性成分，具有很强的强心、抗肿瘤等药理作用(Yoshiaki Kamano,Ayano Kotake, Hirofumi Hashima. Structures-cytotoxicactivity relationship for the toad poison bufadienolides[J]. Bioorg. Med.Chem, 2002, 45:5440-5447)0其作用机制主要表现为抑制肿瘤细胞生长、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导恶性肿瘤细胞分化等多方面(夏俊，江敏，姜彦峰.蟾酥及其有效成分体外抗肿瘤作用研究进展，现代肿瘤医学.2008，16:1441-1444.)。但这类化合物具有与地高辛极为类似的留体骨架，能引起显著的心脏毒性(Roger, J. B. ;Brian, J. P. ;Roxanne, RS. ;Amitavaj D. Effects of Chan Suj a traditio-nal Chinese medicine. Lifesciences. 2002，72 (6) ,699-709.)。此外该类化合物是Na+，K+-ATPase的专属性抑制剂，能引起心律失常、传导阻滞、心功能障碍等(Ma，H. Y. ; Zhang, J. F; Jiang, J. J; Zhou, J. ;Xu，H.Q; Zhanj Ζ· ; Wuj Q. N. ; Duanj J. A. Cardiovascular toxicology. 2012，12，83-89)。 由于其毒性较大，安全窗口小，常由于误服或过量服用而中毒[韩静田，陈小艺，徐瑞成.蟾毒灵的药理活性研究进展[J].中药药物与临床，2002，2 (2) :120-122.]，甚至引起死亡[Ko，R.，Greenwald，M.，Loscutoff，S.，Au，Α· M. ;Appel，B. R. ; Kreutzer，R. A. ; Haddonj W. F. ; Jackson, T. Y. ; Boo, F. 0. ; Presicekj G. Western JournalofMedicine. 1996，164:71 - 75]。因此，对于中药蟾酥中蟾蜍内酯类化学成分进行转化以获得高效低毒的抗肿瘤药物具有重要意义。
发明内容
本发明的首要目的在于提供一种毒性较小的，同时具有抗肿瘤作用的总不饱和蟾蜍内酯。本发明的另一目的在于提供上述的总不饱和蟾蜍内酯的制备方法，即以蟾酥中的总蟾蜍内酯为原料经化学转化后得到本发明的总不饱和蟾蜍内酯。本发明的再一目的在于提供上述的总不饱和蟾蜍内酯在制备预防和治疗前列腺癌药物中的应用。本发明的目的通过下述技术方案实现一种总不饱和蟾蜍内酯,含有化合物Bu-l、Bu-2、Bu-3、Bu-4、Bu-5中的至少两种；化合物Bu-1、Bu-2、Bu-3、Bu-4、Bu-5的结构式如下所示
权利要求
1. 一种总不饱和蟾蜍内酯，其特征在于含有化合物Bu-1、Bu-2、Bu-3、Bu_4、Bu-5中的至少两种；化合物Bu-1、Bu-2、Bu-3、Bu-4、Bu-5的结构式如下所示
2.根据权利要求1所述的总不饱和蟾蜍内酯，其特征在于所述的总不饱和蟾蜍内酯含有化合物 Bu-1、Bu-2、Bu-3、Bu-4 和 Bu_5。
3.权利要求1或2所述的总不饱和蟾蜍内酯的制备方法，其特征在于包括以下步骤(I)将蟾酥粉碎，用乙醇溶液超声提取3-4次，过滤除渣，得到蟾酥提取液；(2)将蟾酥提取液减压浓缩为浆状物，为蟾酥总提物；(3)将蟾酥总提物用水混悬，二氯甲烷萃取，减压蒸除二氯甲烷后得到二氯甲烷部位；(4)将二氯甲烷部位用溶剂A溶解，调节溶液的pH值为1-6;然后在0-100°C下搅拌反应l-8h，当检测到溶液中含有Bu-l、Bu-2、Bu-3、Bu-4、Bu-5中的至少两种化合物时，加水终止反应，用溶剂B萃取，减压蒸除溶剂B后得到总不饱和蟾蜍内酯。
4.根据权利要求3所述的总不饱和蟾蜍内酯的制备方法，其特征在于步骤(I)所述的乙醇溶液为乙醇体积分数为95%的乙醇溶液。
5.根据权利要求3所述的总不饱和蟾蜍内酯的制备方法，其特征在于步骤(4)所述的溶剂A为二氯甲烷。
6.根据权利要求3所述的总不饱和蟾蜍内酯的制备方法，其特征在于步骤(4)所述的搅拌反应为反应4h。
7.根据权利要求3所述的总不饱和蟾蜍内酯的制备方法，其特征在于步骤(4)所述的加水终止反应，是当检测到溶液中含有Bu-1、Bu-2、Bu-3、Bu-4和Bu_5时，加水终止反应。
8.根据权利要求3所述的总不饱和蟾蜍内酯的制备方法，其特征在于步骤(4)所述的溶剂B为乙酸乙酯。
9.权利要求1或2所述的总不饱和蟾蜍内酯在制备预防和治疗前列腺癌的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的总不饱和蟾蜍内酯在制备预防和治疗前列腺癌的药物中的应用，其特征在于所述预防和治疗前列腺癌的药物的剂型为片剂、注射剂、栓剂、气雾剂或纳米制剂。
全文摘要
本发明公开了一种总不饱和蟾蜍内酯及其制备方法和用途，该总不饱和蟾蜍内酯的制备方法包括以下步骤(1)将蟾酥粉碎，用乙醇溶液超声提取3-4次，过滤除渣，得到蟾酥提取液；(2)将蟾酥提取液减压浓缩为浆状物，为蟾酥总提物；(3)将蟾酥总提物用水混悬，二氯甲烷萃取，减压蒸除二氯甲烷后得到二氯甲烷部位；(4)将二氯甲烷部位用溶剂A溶解，调节溶液的pH值为1-6；然后在0-100℃下搅拌反应1-8h，当检测到溶液中含有Bu-1、Bu-2、Bu-3、Bu-4、Bu-5中的至少两种化合物时，加水终止反应，用溶剂B萃取，减压蒸除溶剂B后得到总不饱和蟾蜍内酯。本发明的总不饱和蟾蜍内酯具有抑制雄性激素依赖型及非雄性激素依赖型前列腺癌细胞增殖的活性，可用于制备预防和治疗前列腺癌的药物。
文档编号A61K31/585GK103006670SQ201210376689
公开日2013年4月3日 申请日期2012年9月29日 优先权日2012年9月29日
发明者江仁望, 余通, 田海妍, 李娟 , 叶文才 申请人:暨南大学