阔叶丰花草三萜化合物的制备方法及其在制备糖苷酶抑制剂药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了阔叶丰花草三萜化合物的制备方法及其在制备糖苷酶抑制剂药物中的应用。本发明的六种具强效抑制α-糖苷酶活性的化合物为安全性高并在环境中能快速自然降解无残留的天然化合物，它们可自阔叶丰花草等植物材料中分离获得，植物材料来源丰富，制备过程易于操作。所述的六种化合物的单体均较稳定、易存放，它们的α-糖苷酶抑制活性显著强于临床用药阿卡波糖，极可能进一步发展为有效、安全的预防和治疗Ⅱ型糖尿病的α-糖苷酶抑制剂类药物，具有较好前景。
【专利说明】阔叶丰花草三萜化合物的制备方法及其在制备糖苷酶抑制 剂药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物化学领域，具体涉及六种三萜类化合物即 mesembryanthemoidigenic acid (I)>29-hydroxyhederagenin(2)>3 β , 6 β -dihydroxy-〇l ean_12_ene_28_oic acid(3)、scutellaric acid(4)、arjunic acid(5)、3β，6β，23_trih ydroxy-〇lean-12-en_28-〇ic acid(6)或其可药用的盐在制备糖苷酶抑制剂或药物中的应 用，以及它们的制备方法。
[0002] 发明背景
[0003] 糖尿病为临床上常见的内分泌代谢失调性疾病，其与心血管疾病和癌症等逐年高 发具有重要的相关性，是人类健康重要的杀手。目前，在全球范围内糖尿病的发病率正在提 高，在我国更是有超过1亿人的患病率，并呈现逐年增加的趋势。糖尿病正给我国人民健康 和国民经济造成越来越重大的损失。
[0004] 糖尿病西医分为I型糖尿病（或称胰岛素依赖性，DM1)和II型糖尿病（或称 非胰岛素依赖性，DM2)，其中II型糖尿病发病与患病率均远高于I型糖尿病，因而危害更 大。竞争性α-糖苷酶抑制剂具有推迟糖类物质消化吸收、控制饭后血糖急剧升高、进而 使血糖浓度在一天内变化波动幅度减小等功能，是可开发用于治疗II型糖尿病的潜在药 物。目前已开发上市正临床试用作治疗II型糖尿病的重要α-糖苷酶抑制剂包括一线用药 acarbose (阿卡波糖）、voglibose、miglitol 和 emigliate 等。
[0005] 六种三猫化合物 me s embr yan themo i d i gen i c ac i d (1)、 29_hydroxyhede;ragenin (2)、3 β，6 β _dihydroxy_olean_12_ene_28_oic acid (3)、 scutellaric acid (4) > ar junic acid(5)、30，60,2 3_tri hydroxy _〇 lean-12_en_2 8-oic acid(6)分别曾自其他植物中分离获得（具体见文献：Magina et al.,Quim Nova, 2012, 35:1184-1188 ；Huu et al. , J Chem, 2007, 45:363-367 ；Kuo et al., Chem Pharm Bull, 1988, 36:3619-3622 ；Ponouet al. , Chem Biodivers, 2011, 8:1301-1309 ；Lavaud et al., Phytochemistry, 2001, 57:469-478 ；Khan et al. , J Nat Prod, 1993, 56:2163-2165), 它们的化学结构式如下式（I )所示，到目前还未见这些化合物具有糖苷酶抑制剂活性的 报道，以及未见其自阔叶丰花草（Spermacoce Iatifolia)植物中分离获得的报道。
[0006]
【权利要求】
1. 六种三 化合物 mesembryanthemoidigenic acid、29_hydroxyhederagenin、 30.60 -dihydroxy-〇lean-12-ene-28-〇ic acid、 scutellaric acid、 arjunic acid 或 30，60，23-trihydroxy-〇lean-12_e n_28-〇ic acid，或它们的可药用盐，在制备 a-糖苷 酶抑制剂或药物中的应用，所述六种三萜化合物结构如式（I )所示：
其中化合物1为mesembryanthemoidigenic acid ; 化合物2为 29-hydroxyhederagenin ;化合物 3 为 3 0，6 0 -dihydroxy-〇lean-12-ene_28-〇ic acid ;化 合物 4 为 scutellaric acid ;化合物 5 为 ar junic acid ;化合物 6 为 3 0，6 0，23-trihydr oxy-〇lean-12-en-28-〇ic acid〇
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述a _糖苷酶抑制剂或药物，其剂型为 可湿性粉剂、片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、滴丸、控释或缓释剂型或纳米制剂。
3. -种a-糖苷酶抑制剂或药物，其特征在于，包含有效量的三萜化合物 mesembryanthemoi digenic acid、29-hydroxyhederagenin、3 0，6 0 -dihydroxy-olean-1 2_ene_28_oic acid、scutellar ic acid、arjunic acid 或 30，60，23_trihydroxy_olea n-12-en-28-〇ic acid中的一种或多种，或它们的可药用盐，和药学上可以接受的载体或辅 料。
4. -种 化合物 mesembryanthemoidigenic acid、29_hydroxyhederagenin、 30.60 -dihydroxy-olea n-12-ene-28-〇ic acid、scutellaric acid、arjunic acid、30， 6 0，23-trihydroxy-〇lean-12-en_28-〇 ic acid的制备方法，其特征在于，所述的化合物 mesembryanthemoidigenic acid、29-hyd roxyhederagenin、3 0，6 0 -dihydroxy-olean-1 2_ene_28_oic acid、scutellaric acid、arjunic acid、30，60，23_trihydroxy_olean_l 2-en_28-〇ic acid 是从阔叶丰花草（Spermacoce latifolia Aubl.K.Schum.)植株中分离 得到的。
5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，具体步骤为： 将干燥的阔叶丰花草全株粉碎后用乙醇或乙醇水溶液提取，提取液经浓缩后得到浸 膏，浸膏加水混悬，依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，浓缩后分别得到石油醚萃取部分和乙酸 乙酯萃取部分；石油醚萃取部分经正相硅胶柱层析，以石油醚/丙酮从体积比100 :0-0-100 梯度洗脱，收集石油醚-丙酮体积比10 :1洗脱的馏分E6,馏分E6经MCI柱除去色素， 用甲醇洗脱得到甲醇洗脱部分E6-1，E6-1依次通过反相中压柱层析，甲醇/水体积比从 30:70-100:0梯度洗脱、Sephadex LH-20凝胶柱，以甲醇洗脱，和正相娃胶层析，以氯仿/甲 醇体积比100:1洗脱，得到化合物1 ; 乙酸乙酯萃取部分经正相硅胶柱层析，以氯仿/甲醇从体积比100:1-0:100梯度洗 脱，收集氯仿/甲醇体积比25:1洗脱的馏分F5, F5经反相中压柱层析，甲醇/水从体积比 30:70-100:0,梯度洗脱，收集甲醇/水体积比80:20洗脱的馏分F 5_4和甲醇/水体积比 90:10洗脱的馏分F5_5;馏分F 5_4经S印hadex LH-20凝胶柱以甲醇洗脱，再经正相硅胶层析 柱分离纯化，以氯仿/甲醇体积比50:1洗脱，得到化合物3,4,5和6 ;馏分F5_5经Sephadex LH-20凝胶柱以甲醇洗脱，得到化合物2。 6?阔叶丰花草在制备化合物mesembryanthemoidigenic acid、 29-hydroxyhederageninN3 0,60 -dihydroxy-〇lean-12-ene-28-〇ic acid、scutellaric acid、ar junic acid 或 3 0，6 0，23_trihydroxy_olean_12_en_28_oic acid 中的应用。
【文档编号】A61K31/56GK104490894SQ201410718340
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年12月1日 优先权日:2014年12月1日
【发明者】谭建文, 罗应, 周忠玉, 任慧, 徐巧林 申请人:中国科学院华南植物园