本发明属于兽药制剂制备技术，具体涉及利用选择的非离子表面活性剂制备含伊维菌素类药物液体制剂，该制剂中含有的伊维菌素类药物不易被酸或碱催化降解。
背景技术：
：药物具有水可溶解性是药物可以经口给药的前提，也是药物穿透细胞膜和在体内转运的必要条件。对于难溶性药物或溶出速度很慢的药物来说，药物在水中的溶解度或溶出(溶解)速度便成为影响药物在体内吸收的主要因素。有资料显示，药物的溶解度低于0.1mg/ml时对其吸收不利。因此，提高难溶解性药物的水溶解度和溶出速度常成为改善其口服给药生物利用度的首要步骤。试验和资料显示：伊维菌素类药物在水中几乎不溶解。以伊维菌素为例，它在1升水中仅能溶解6-9微克。因此，在制备含伊维菌素类药物的口服制剂时，改善药物的水可溶性是需要解决的重要技术环节。伊维菌素类药物的分子结构中具有2个糖苷键，它易被酸催化水解而失去糖残基。例如伊维菌素易被酸催化水解而转化成活性较低的单糖伊维菌素B1a(MSH2B1a)和H2B1a糖苷配基(见表1)。而猪、鸡等动物的胃液多数呈酸性，其酸性最强可达到PH值1.0左右(约相当于0.1M盐酸的酸度)。这提示我们：通过提高制剂的耐酸性能，以降低酸性胃液对伊维菌素类药物的水解作用，同样是保障含这类药物的口服制剂能被更多的吸收的重要技术环节。为此，将水可溶性或溶出度(固体制剂)和它的酸催化水解率作为检查和衡量伊维菌素类药品的质量指标十分必要，这可从另一侧面更进一步的监控和反映出产品的品质，可使这类药品的质量控制和监督能够更科学、准确和全面。伊维菌素类药物在碱性环境中也不稳定，较容易被碱催化降解而失去活性。如伊维菌素，它在碱性条件中其分子结构中的C2位易发生差向异构而转化为2-差向异构体H2B1a(以下简称2-epimerH2B1a)，它的驱虫活性仅为H2B1a活性的1％左右；C3＝C4位的双键易发生位移，转化为活性很低的∧2，3H2B1a(见表2)；伊维菌素分子结构中具有的内酯键同样易被OH-攻击而遭到破坏。我们通过用含伊维菌素的制剂进行的试验显示，当制剂PH值大于6.2时，保质期内产生的杂质更多的是2-差向异构体伊维菌素B1a；当制剂PH值小于4.3时，保质期内产生的杂质更多的是单糖伊维菌素B1a。公开资料显示，该类药物在略偏酸条件下稳定，其适宜的PH值范围在4-6之间。通过以上论述可见，含伊维菌素类药物的制剂，除了存在氧化降解，还存在酸/碱催化降解的问题。因此，在制备含伊维菌素类药物的制剂，尤其是制备口服制剂时，除了要解决药物的水溶性问题，不可忽视的另一问题是如何防止药物的酸/碱催化降解。表面活性剂作为增溶剂，不但可提高一些疏水性药物的水可溶性，并且特定的表面活性剂的存在，可增强一些含有易氧化、易水解药物制剂的稳定性，“这是因为药物被嵌入到由表面活性剂形成的胶束中，形成了一种屏障”，这种裹着药物的“胶束屏障”阻碍了氧、H+、OH-对易水解或易氧化药物的进攻。但是，如果表面活性剂选择不当，反而会使药物更易被酸/碱催化降解。例如十二烷基硫酸钠，它对伊维菌素的酸催化水解具有显著的促进作用(见表3)。因此，通过应用表面活性剂的方法来提高疏水性药物的水可溶性，同时要求制剂具有耐受酸的催化水解作用和提高制剂在保存期间的稳定性(指抵抗酸或碱或氧的破坏作用)，表面活性剂种类的选择无疑是至关重要的研究环节。筛选试验显示：将伊维菌素类药物与选择的非离子表面活性剂等助剂组合，所制备的口服液体制剂，其水可溶性好，并具有显著的低抗酸催化降解的性能(见实施例1至实施例6)，这意味着本发明制剂在体内会有显著的抵抗胃酸的水解作用，会有更好的生物利用度为了能更清晰的了解本发明制剂特点，有必要将与本发明密切相关的主要基础性试验予以描述。1.伊维菌素的酸催化降解反应：分别取0.02M、0.1M、0.2M的盐酸水溶液各10ml，与含伊维菌素6mg的甲醇溶液10ml混匀，制备酸浓度为0.01M、0.05M、0.1M的反应液；将反应液在36-37℃反应3小时，在0、1、2、3小时分别取样，用HPLC测定反应液中的MSH2B1a和H2B1a，酸催化的降解程度以MSH2B1a峰面积值占H2B1a的峰面积值(％)表示，并计算H2B1a的降解率，计算公式为：(1-不同时间的H2B1a峰面积值/0小时H2B1a峰面积值)X100。试验结果见表1。表1伊维菌素在不同浓度盐酸溶液中的水解程度和H2B1a的降解率2.伊维菌素的碱催化降解反应：取0.6％伊维菌素/甲醇溶液1ml，与9ml甲醇混合后加入0.2M的氢氧化钠水溶液10ml，混匀，在21-24℃反应930分钟，不同时间取样，用HPLC法测定反应液中2-epimerH2B1a、∧2，3H2B1a与H2B1a，计算2-epimerH2B1a/H2B1a的峰面积值之比(％)和∧2，3H2B1a与H2B1a的峰面积值之比(％)，以及不同时间的H2B1a峰面积值与0分钟H2B1a峰面积值之比(％)。试验结果见表2。表2伊维菌素在0.1MNaOH溶液(甲醇/水＝1∶1)中的降解3.十二烷基硫酸钠(SDS)对伊维菌素酸催化降解的影响：a.含SDS微乳剂的制备及酸催化的水解反应：取0.7gSDS、1，2丙二醇1ml、含0.15g伊维菌素的乙酸乙酯溶液0.75ml，搅拌混匀，加水至25ml，充分搅拌，即得澄清透明的微乳液；取微乳液1ml加0.01M盐酸/水溶液19ml，36-37℃反应3小时。b.对照品制备及酸催化的水解反应：取含0.006g伊维菌素的乙酸乙酯溶液0.030ml，与9.97ml甲醇混匀，加入浓度为0.02M的盐酸/水溶液10ml，混匀，36-37℃反应3小时。用HPLC法测定反应液中的MSH2B1a、H2B1aAG、H2B1a，记录峰面积值，计算H2B1a降解率(％)、MSH2B1a与H2B1a的峰面积值之比(％)、H2B1aAG(H2B1a糖苷配基)与H2B1a的峰面积值之比(％)。试验结果见表3。从表3可见，与不含SDS的对照品比较，SDS对伊维菌素的酸催化水解具有很强的促进作用。表3十二烷基硫酸钠对伊维菌素的酸催化水解的促进作用技术实现要素：本发明主要解决的技术问题是克服伊维菌素类药物在酸性条件下易水解的缺陷，以达到保护药物在酸性胃液中不被破坏或较少被破坏的目的；其次是克服制剂在保存期间，其活性成份的酸/碱催化降解问题，使药剂的有效成份降解的更少。本发明优选HEL-40或HEL-35与选择的疏水性介质(苯甲酸苄酯或氮酮或十四烷酸异丙酯或它们的组合物)组合，来制得更耐酸/碱催化降解作用的液体制剂，以此来实现本发明目标。本发明所述的含伊维菌素类药物的液体制剂，其所述制剂组成包含：1.0.1-6％伊维菌素类药物(重量/体积百分比)；所述的伊维菌素类药物包括阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、莫西菌素、乙酰胺基阿维菌素、塞拉菌素。2.亲水亲油平衡值(HLB值)大于等于11的聚氧乙烯氢化蓖麻油缩合物，它在液体制剂中的重量/体积百分比含量为1-48％，并且，在制剂中它与伊维菌素类药物的重量之比应大于或等于3，适宜比例为5-16比1；所述的亲水亲油平衡值(HLB值)大于等于11的聚氧乙烯氢化蓖麻油缩合物包括聚氧乙烯(35)氢化蓖麻油(以下简称HEL-35)、聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油(以下简称HEL-40)、聚氧乙烯(50)氢化蓖麻油(HEL-50)、聚氧乙烯(60)氢化蓖麻油(HEL-60)中的一种。3.液体分散介质，加至液体制剂的100％体积。所述的液体分散介质包括有机溶剂或水和有机溶剂；选择的有机溶剂包括乙醇、异丙醇、1，2-丙二醇、分子量小于400的聚乙二醇、甲醛缩甘油、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮中的一种或一种以上的组合物；水需和所述的有机溶剂组合使用，由此所制备的制剂还可称之为含水的液体制剂或称之为乳状制剂(包括乳剂或亚微乳剂或微乳剂)。所述的乳状制剂的PH值适宜范围为4.2-5.7，最适的PH值范围是4.5-5.4。在所述的液体制剂中还包含体积百分比含量为0.2-78％的疏水性介质，选择的疏水性介质包括苯甲酸苄酯、氮酮、辛/癸酸三甘油酯、十四烷酸异丙酯、二丙二醇二苯甲酸酯、二乙二醇苯甲酸酯中的一种或一种以上组合物。试验发现，在制剂中加入适量的疏水性介质，可更加有效的抑制酸/碱对伊维菌素类药物的催化降解作用(见实施例1至实施例6)，其中抑制活性最强的是苯甲酸苄酯、二丙二醇二苯甲酸酯和氮酮。在每1升所述的乳状制剂中还可加入3-60克阿拉伯胶。试验过程中意外的观察到，含有阿拉伯胶的乳状制剂不需进行PH调节，并且，它比通过用酸调节PH的不含阿拉伯胶的乳状制剂更稳定。这是含阿拉伯胶的乳状制剂最显著的特点。试验显示，按上述组成制备的含伊维菌素和苯甲酸苄酯的液体制剂，在盐酸浓度为0.09-0.11M的溶液中，于36-37℃条件下保温2小时，用HPLC检测，单糖伊维菌素B1a的HPLC面积值与伊维菌素B1a的HPLC面积值之比小于3％，特别优选的液体制剂其单糖伊维菌素B1a的面积值与伊维菌素B1a的面积值之比小于1.5％(见表6和表7)。与表1比较可见，优选的制剂对酸的催化水解具有显著的阻抑作用。本发明所述液体制剂可以通过以下方法制得。方法一：按配方所述的含量称取伊维菌素类药物和聚氧乙烯氢化蓖麻油缩合物，与有机溶剂混合，加入或不加入疏水性介质，在常温至83℃条件下搅拌，使药物完全溶解，得澄清透明的含伊维菌素类药物的液体制剂。体外实验显示，应用方法一制备的液体制剂与水混合后可形成乳剂或微乳剂。这提示我们该给药系统在体温条件下，遇体液后可在胃肠道蠕动的促使下自发形成乳液，因此认为，用方法一制备的液体制剂是一种自乳化释药系统，可称之为自乳化制剂(贾伟，高文远主编，邱明丰副主编，药物控释新剂型，化学工业出版社，2005年4月第1版，第71-83页)。该自乳化液体制剂可直接给动物灌服，也可兑水后灌服或供动物饮用，或混在饲料中饲喂；含有异丙醇、苯甲酸苄酯和少量氮酮的制剂或含有异丙醇、苯甲酸苄酯、十四烷酸异丙酯和少量氮酮的制剂也可作为浇泼剂，透皮给药；含有甲醛缩甘油、苯甲酸苄酯、十四烷酸异丙酯的制剂还可作为注射剂，以皮下或肌内注射的方式给药。方法二：按配方所述的含量称取伊维菌素类药物和聚氧乙烯氢化蓖麻油缩合物，与有机溶剂混合，加入或不加入疏水性介质，在常温至65℃条件下搅拌，使药物完全溶解，之后将溶液温度降到室温，边搅拌边加入适量的水，调PH值为4.7-5.4，或加入阿拉伯胶水溶液后，补加水至终体积，得外观为透明或半透明(微乳液或亚微乳液)或乳白色(乳液)的液体，即所述的液体制剂。选择以上两种操作过程进行本发明制剂的制备，并不意味着本发明制剂的制备程序仅限于此。就是说，任何操作过程的改变并不意味着超出了本发明制剂组成的保护范围。用本技术制备的制剂，由于选择的表面活性剂具有很好的“胶束屏障作用”，使得其中包含的伊维菌素类药物在酸性介质中具有优良的稳定性，如口服给药，在一定程度上降低了药物被酸性胃液水解的程度或概率，从而克服了因胃酸作用造成药物利用率降低的缺陷。本发明提出了通过检测制剂中2-差向异构体伊维菌素B1a的相对百分比含量和MSH2B1a的相对百分比含量来判定制剂的稳定性的方法；用本发明筛选出的聚氧乙烯氢化蓖麻油缩合物制备的液体制剂在保质期内MSH2B1a和2-epimerH2B1a产生的更少，稳定性更好，优于筛选过的其它表面活性剂。在本发明的研究过程中还观察到，用选择的非离子表面活性剂(如HEL-40)与一定量的苯甲酸苄酯或与氮酮或与辛/癸酸三甘油酯或与十四烷酸异丙酯组合使用，可更有效的抑制酸、碱对伊维菌素类药物的催化降解作用(见实施例2至实施例6)，从而使产品保存期2-差向异构体H2B1a产生量减少，尤其是在微乳剂或亚微乳剂或乳剂中加入适量的阿拉伯胶，制剂更稳定。具体实施方式实施例1通过伊维菌素的酸催化水解试验进行表面活性剂的筛选制剂组成：制剂中伊维菌素含量均为0.6g，表面活性剂含量均为6g，用乙酸乙酯/1，2-丙二醇/异丙醇(5∶5∶70)共溶剂溶解伊维菌素，制备的含0.6％伊维菌素、含6％表面活性剂的液体制剂的组成见表4。酸催化的降解反应：取表4中所示的液体制剂1ml、水17ml，与1M的盐酸水溶液2ml混合，在36-37℃反应2小时，用HPLC测定反应液中的MSH2B1a、H2B1a，记录峰面积，计算MSH2B1a与H2B1a的峰面积之比(％)。试验结果见表4。由表4可见，聚氧乙烯氢化蓖麻油缩合物类表面活性剂和泊洛沙姆188对伊维菌素的酸催化降解具有更强的抑制作用。表4含不同表面活性剂的伊维菌素制剂的酸催化水解试验结果表面活性剂MSH2B1a/H2B1a％H2B1a降解率％聚氧乙烯(35)蓖麻油对MSH2B1a峰面积有干扰4.1-4.3聚氧乙烯(90)蓖麻油对MSH2B1a峰面积有干扰4.1-4.5壬基酚聚氧乙烯醚(OP-10)5.3-5.84.3-4.8聚氧乙烯(23)月桂醇醚(苄泽35)5.6-6.94.8-5.7聚氧乙烯(20)鲸蜡醇醚(苄泽58)5.8-6.34.9-5.5聚乙二醇硬脂酸酯SG-406.2-7.14.9-5.3聚乙二醇硬脂酸酯SG-1006.5-6.94.6-5.3聚氧乙烯(9)月桂酸酯LAE-96.6-6.94.2-4.8聚乙二醇400单月桂酸酯6.9-7.53.3-3.9泊洛沙姆1882.8-3.22.7-3.3吐温-804.3-4.93.8-4.5聚氧乙烯(35)氢化蓖麻油2.9-3.33.2-3.6聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油2.8-3.12.7-3.1聚氧乙烯(50)氢化蓖麻油3.0-3.32.9-3.4聚氧乙烯(60)氢化蓖麻油3.3-3.63.1-3.6十二烷基硫酸钠59.6-64.798.2-99.7实施例2含不同疏水性介质的制剂及其酸催化的水解试验1.制剂的基本配方(重量比)：0.6％伊维菌素、10％HEL-40、16％1，2-丙二醇、疏水性介质按表5所示量添加、异丙醇加至100％。2.酸催化水解试验：参考第【0039】段所述的方法进行检测。试验结果见表5。表5疏水性介质对伊维菌素的酸催化水解作用的影响从表5可见，苯甲酸酯类或氮酮与HEL-40组合使用对伊维菌素的酸催化降解的阻抑作用最强，其次是辛/癸酸三甘油酯、十四烷酸异丙酯和油酸乙酯。实施例3不同比例的伊维菌素/苯甲酸苄酯/HEL-40制剂及其酸催化的水解试验1.制剂的基本配方(重量比)：1％伊维菌素、16％1，2-丙二醇、苯甲酸苄酯和HEL-40的含量按伊维菌素的重量比计算(见表6)，异丙醇加至100％。2.酸催化的水解试验：取样品0.3ml与0.1M盐酸水溶液4.7ml混合，于36.5-37.5℃反应2小时，加10％氢氧化钠溶液约225μl，混匀，加甲醇定容至10ml，过滤，用HPLC法检测反应液中的MSH2B1a、H2B1a，记录峰面积值，计算H2B1a的水解率，以MSH2B1a与H2B1a的峰面积值之比(％)衡量水解率的大小。试验结果见表6。表6不同比例的伊维菌素/苯甲酸苄酯/HEL-40制剂其酸催化的水解试验制剂编号伊维菌素/苯甲酸苄酯/HEL-40的重量比MSH2B1a/H2B1a％制剂11∶1∶62.23制剂21∶2∶61.94制剂31∶3∶61.67制剂41∶4∶61.29制剂51∶3∶92.01制剂61∶4.5∶91.58制剂71∶2∶92.31对照品-1乙酸乙酯替代苯甲酸苄酯，比例为1∶3∶94.27对照品-2乙酸乙酯替代苯甲酸苄酯，比例为1∶4∶64.22由表6可见，苯甲酸苄酯/HEL-40的重量比为1比1.5时(制剂4)MSH2B1a与H2B1a的比值最小。用乙酸乙酯替代苯甲酸苄酯时MSH2B1a与H2B1a的比值最大。实施例4不同比例的伊维菌素/氮酮/HEL-40制剂及其酸催化的水解试验1.制剂的基本配方(重量比)：1％伊维菌素、3％1，2-丙二醇、氮酮和HEL-40的含量按伊维菌素的重量比计算(见表7)，异丙醇加至100％。2.酸催化的水解试验：试验方法与第【0051】段所述方法相同。试验结果见表7。表7不同比例的伊维菌素/氮酮/HEL-40制剂其酸催化的水解试验制剂编号伊维菌素/氮酮/HEL-40的重量比MSH2B1a/H2B1a％制剂81∶1∶62.86制剂91∶2∶61.99制剂101∶3∶61.72制剂111∶4∶61.46制剂121∶3∶92.20制剂131∶6∶91.62制剂141∶4.5∶91.85对照品-3乙酸乙酯替代氮酮，比例为1∶3∶94.23由表7可见，氮酮/HEL-40的重量比为1比1.5时(制剂11)MSH2B1a与H2B1a的比值最小。用乙酸乙酯替代氮酮时MSH2B1a与H2B1a的比值最大。实施例5含伊维菌素制剂的酸/碱催化降解试验制剂组成及其酸、碱催化降解试验结果见表8。碱催化的水解反应试验方法为：取含2-6mg伊维菌素的溶液，用氢氧化钠水溶液定容至20ml(反应液氢氧化钠浓度为0.1M)，混匀，在21-24℃反应2小时，用酸中和后，用HPLC法测定反应液中2-epimerH2B1a和H2B1a，计算2-epimerH2B1a与H2B1a峰面积值之比(％)、H2B1a降解率(％)。酸催化的水解反应为：取含2-6mg伊维菌素的溶液，用盐酸水溶液定容至20ml(反应液酸浓度为0.1M)，混匀，于36-37℃反应1小时，用氢氧化钠溶液调PH值在5左右，用甲醇稀释至100-300μg/ml，用0.45um的膜过滤，滤液用HPLC分析，记录MSH2B1a峰面积值和H2B1a峰面积值，计算MSH2B1a峰面积值占H2B1a峰面积值的百分比(％)，并计算伊维菌素的酸催化降解率(％)。表8制剂组成及伊维菌素的酸/碱催化降解试验实施例6含苯甲酸苄酯或氮酮的制剂与不含苯甲酸苄酯或氮酮的制剂的稳定性试验将含氮酮(制剂14)或含苯甲酸苄酯的制剂15、16、17、18和不含氮酮或苯甲酸苄酯的制剂14-1、15-1、16-1、17-1、18-1，于40℃放置60天，于第30天、第60天取样测定H2B1a的降解率、2-epimerH2B1a/H2B1a的相对百分比，结果示于表9。注：0天所有制剂均不含有2-epimerH2B1a，60天期间，MSH2B1a/H2B1a(％)的比值无明显变化。表9苯甲酸苄酯或氮酮对制剂稳定性影响表9显示，氮酮或苯甲酸苄酯对2-epimerH2B1a的产生有显著的阻抑作用。实施例7含伊维菌素/苯甲酸苄酯/氮酮/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.5％伊维菌素、2.6％氮酮、3.5％苯甲酸苄酯、2.5％HEL-40，异丙醇加至100％。2.制备过程：按配方称取伊维菌素、氮酮、苯甲酸苄酯、HEL-40和异丙醇，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后过0.45微米膜，即得本制剂。本制剂可兑水给羊灌服；也可作为浇泼剂，透皮给药，按0.5-0.7mg/kg.b.w.猪、牛、羊寄生虫病防治，一次给药，药效期可维持一个月。本剂稳定性好，室温存放1年，伊维菌素降解率小于标示量的0.8％，优于不含氮酮和苯甲酸苄酯的制剂(伊维菌素减少2.6-3.1％)。实施例8含伊维菌素/苯甲酸苄酯/HEL-35的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：1％伊维菌素、4.7％苯甲酸苄酯、13％HEL-35，15％1，2-丙二醇，异丙醇加至100％。2.制备过程：按配方称取伊维菌素、苯甲酸苄酯、HEL-35、1，2-丙二醇和异丙醇，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后过0.45微米膜，即得本制剂。本制剂用于猪寄生虫病防治，通过饮水方式给药，使用时，兑水稀释5000-8500倍(夏季稀释8500倍左右，冬季稀释5000倍左右)，连续饮用7-10天。本剂稳定性好，40℃放置90天，伊维菌素降解率为标示量的0.98-1.05％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为1.22-1.45％，而不含苯甲酸苄酯的对照样品其伊维菌素降解率为标示量的3.18-3.32％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为2.41-2.67％。实施例9含伊维菌素/氮酮/苯甲酸苄酯/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.5％伊维菌素、2.8％氮酮、20％1，2-丙二醇、50％苯甲酸苄酯、4％HEL-40，异丙醇加至100％。2.制备过程：按配方称取伊维菌素、氮酮、1，2-丙二醇、HEL-40和异丙醇，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后过0.45微米膜，即得本制剂。本制剂可兑水给猪、牛、羊灌服；也可作为浇泼剂，透皮给药，按0.5-0.7mg/kg.b.w用于猪、牛、羊寄生虫病防治，一次给药，药效期可维持一个月。本剂稳定性好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的1％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.92-0.98％，而不含氮酮和苯甲酸苄酯的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为2.53-2.88％。实施例10含伊维菌素/苯甲酸苄酯和十四烷酸异丙酯/HEL-40的液体制剂1.制剂配方(重量比)：3％伊维菌素、57％苯甲酸苄酯、9％HEL-40，13％甲醛缩甘油，十四烷酸异丙酯加至100％。2.制备过程：按配方称取伊维菌素、苯甲酸苄酯、HEL-40、甲醛缩甘油和十四烷酸异丙酯，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后过0.45微米膜，乙酰氨基阿维菌素即得本制剂。本制剂用于猪、牛羊寄生虫病防治，通过注射方式给药，给药剂量为0.6-2.5毫克/公斤体重，一次给药，寄生虫驱净率大于95％，药效维持期为42-105天(给药剂量越大药效维持时间越长)。本剂稳定性好，40℃放置90天，伊维菌素降解率为标示量的0.98-1.05％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为1.22-1.45％，而不含苯甲酸苄酯和十四烷酸异丙酯的对照样品(用丙二醇和甲醛缩甘油替代苯甲酸苄酯和十四烷酸异丙酯)其伊维菌素降解率为标示量的3.18-3.32％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为3.04-3.37％。实施例11含伊维菌素/苯甲酸苄酯和十四烷酸异丙酯/HEL-40的液体制剂1.制剂配方(重量比)：5％乙酰氨基阿维菌素、60％苯甲酸苄酯、15％HEL-40，12％甲醛缩甘油，十四烷酸异丙酯加至100％。2.制备过程：按配方称取乙酰氨基阿维菌素、苯甲酸苄酯、HEL-40、甲醛缩甘油和十四烷酸异丙酯，于配制罐中，搅拌，待乙酰氨基阿维菌素溶解后过0.45微米膜，即得本制剂。本制剂用于奶牛寄生虫病防治，通过注射方式给药，给药剂量为0.3-0.9毫克/公斤体重，一次给药，寄生虫驱净率大于95％，药效维持期为48-112天(给药剂量越大药效维持时间越长)。本剂稳定性好，40℃放置90天，乙酰氨基阿维菌素降解率为标示量的0.72-0.95％，而不含苯甲酸苄酯和十四烷酸异丙酯的对照样品(用丙二醇和甲醛缩甘油替代苯甲酸苄酯和十四烷酸异丙酯)其乙酰氨基阿维菌素降解率为标示量的2.78-3.11％。实施例12阿维菌素制剂的组成与稳定性研究本实施例所述的6种阿维菌素(AVM)制剂的组成见下表。表中所述的AVM降解率测定方法是：取表中制剂1ml与0.1M盐酸水溶液19ml混合，在37-38℃反应3小时，取5ml反应液于10ml容量瓶中，加入10％氢氧化钠水溶液约250微升(PH值调到4-6范围)，用甲醇定容到10ml，用孔径为0.45微米的滤膜过滤，取滤液用HPLC测定阿维菌素含量，记录峰面积值(A1)，同法测定0小时样品中阿维菌素的含量，记录峰面积值(A2)，按公式(A2-A1)/A2X100计算AVM降解率(％)，检测结果见下表。实施例13乙酰氨基阿维菌素(Epr)制剂的组成与稳定性研究本实施例所述的6种乙酰氨基阿维菌素制剂的组成见下表。表中所述的乙酰氨基阿维菌素降解率测定方法是：取表中制剂1ml与0.1M盐酸水溶液19ml混合，在37-38℃反应3小时，取5ml反应液于10ml容量瓶中，加入10％氢氧化钠水溶液约250微升(PH值调到4-6范围)，用甲醇定容到10ml，用孔径为0.45微米的滤膜过滤，取滤液用HPLC测定乙酰氨基阿维菌素含量，记录峰面积值(A1)，同法测定0小时样品中乙酰氨基阿维菌素的含量，记录峰面积值(A2)，按公式(A2-A1)/A2X100计算乙酰氨基阿维菌素降解率(％)，检测结果见下表(在下表中简称为“降解率％”)。实施例14含伊维菌素/氮酮/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.2％伊维菌素、1.4％氮酮、20％1，2-丙二醇、4％HEL-40，水加至100％。2.制备过程：按配方称取伊维菌素、氮酮、1，2-丙二醇、HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入部分水，充分搅拌，用磷酸调液体PH为4.7-5.3，补加水至终体积，过1微米膜，即得乳状制剂。本制剂按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生虫病防治，一次经口给药，药效期可维持一个月。本剂稳定性好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的1.1％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.46-0.53％；不含氮酮的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.94-1.23％。在0.1摩尔盐酸溶液中、在36.5-37.5℃反应3小时，含氮酮的制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为1.45-1.82％；不含氮酮的对照制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为4.5-5.3％；实施例15含伊维菌素/辛-癸酸三甘油酯/阿拉伯胶/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.2％伊维菌素、2％辛-癸酸三甘油酯、12％1，2-丙二醇、4％HEL-40，2％阿拉伯胶、水加至100％。2.制备过程：按配方称取0.22克伊维菌素(纯度90-91％)、2克辛-癸酸三甘油酯、12克1，2-丙二醇、4克HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入30毫升水，充分搅拌，加入含2克阿拉伯胶的水溶液20毫升，搅拌混匀，补加水至100毫升，过1微米膜，即得乳状制剂。本制剂按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生虫病防治，一次经口给药，药效期可维持一个月。本剂稳定性十分好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的0.83％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.12-0.23％；不含阿拉伯胶和辛-癸酸三甘油酯的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为1.65-1.82％。在0.1摩尔盐酸溶液中、在36.5-37.5℃反应3小时，含十四烷酸异丙酯和阿拉伯胶的制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为1.91-2.45％；不含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯胶的对照制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为4.8-5.6％；实施例16含伊维菌素/辛-癸酸三甘油酯/阿拉伯胶/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.08％伊维菌素、1.5％辛-癸酸三甘油酯、12％1，2-丙二醇、3％HEL-40，1％阿拉伯胶、水加至100％。2.制备过程：按配方称取0.0968克伊维菌素(纯度90-91％)、1.5克辛-癸酸三甘油酯、12克1，2-丙二醇、3克HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入30毫升水，充分搅拌，加入含1克阿拉伯胶的水溶液20毫升，搅拌混匀，补加水至100毫升，过1微米膜，即得乳状制剂。本制剂按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生虫病防治，一次经口给药，药效期可维持一个月。本剂稳定性十分好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的0.77％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.18-0.36％；不含阿拉伯胶和辛-癸酸三甘油酯的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为1.9-2.2％。在0.1摩尔盐酸溶液中、在36.5-37.5℃反应3小时，含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯胶的制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为1.71-2.14％；不含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯胶的对照制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为4.65-5..22％；实施例17含伊维菌素/辛-癸酸三甘油酯/阿拉伯胶/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.5％伊维菌素、6.4％辛-癸酸三甘油酯、22％1，2-丙二醇、8％HEL-40，3％阿拉伯胶、水加至100％。2.制备过程：按配方称取0.55克伊维菌素(纯度90-91％)、6.4克辛-癸酸三甘油酯、22克1，2-丙二醇、8克HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入30毫升水，充分搅拌，加入含3克阿拉伯胶的水溶液24毫升，搅拌混匀，补加水至100毫升，即得乳状制剂。本剂稳定性十分好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的0.95％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.23-0.35％；不含阿拉伯胶和辛-癸酸三甘油酯的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为2.2-2.6％。在0.1摩尔盐酸溶液中、在36.5-37.5℃反应3小时，含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯胶的制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为1.55-2.08％；不含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯胶的对照制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为4.9-5.4％。实施例18含伊维菌素/氮酮/阿拉伯胶/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：1％伊维菌素、5.3％氮酮、22％1，2-丙二醇、16％HEL-40，4％阿拉伯胶、水加至100％。2.制备过程：按配方称取1.1克伊维菌素(纯度90-91％)、5.3克氮酮、22克1，2-丙二醇、16克HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入20毫升水，充分搅拌，加入含4克阿拉伯胶的水溶液24毫升，搅拌混匀，补加水至100毫升，即得乳状制剂。本剂稳定性十分好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的1.1％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.08-0.145％；不含阿拉伯胶和氮酮的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为1.98-2.26％。在0.1摩尔盐酸溶液中、在36.5-37.5℃反应3小时，含氮酮和阿拉伯胶的制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为1.44-1.97％；不含氮酮和阿拉伯胶的对照制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为4.65-5.12％。实施例19含伊维菌素/氮酮/阿拉伯胶/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.1％伊维菌素、0.6％氮酮、16％1，2-丙二醇、2％HEL-40，0.6％阿拉伯胶、水加至100％。2.制备过程：按配方称取0.11克伊维菌素(纯度90-91％)、0.6克氮酮、16克1，2-丙二醇、2克HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入20毫升水，充分搅拌，加入含0.6克阿拉伯胶的水溶液20毫升，搅拌混匀，补加水至100毫升，即得乳状制剂。本剂稳定性十分好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的1.23％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.33-0.45％；不含阿拉伯胶和氮酮的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为1.77-2.03％。在0.1摩尔盐酸溶液中、在36.5-37.5℃反应3小时，含氮酮和阿拉伯胶的制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为1.56-2.41％；不含氮酮和阿拉伯胶的对照制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为4.82-5.32％。实施例20含伊维菌素/阿拉伯胶/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.2％伊维菌素、2％阿拉伯胶、20％1，2-丙二醇、4％HEL-40，水加至100％。2.制备过程：按配方称取伊维菌素、1，2-丙二醇、HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入部分水，充分搅拌，加入含2克阿拉伯胶的水溶液20毫升，混匀后补加水至终体积，混匀，过1微米膜，即得乳状制剂。本剂按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生虫病防治，一次经口给药，药效期可维持一个月。本剂稳定性好，室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的1.3％，2-epimerH2B1a的相对百分比含量为0.11-0.23％；不含阿拉伯胶的对照样品其2-epimerH2B1a的相对百分比含量为1.21-1.68％。实施例21含伊维菌素/二丙二醇二苯甲酸酯/阿拉伯胶/HEL-40的液体制剂制备1.制剂配方(重量比)：0.2％伊维菌素、0.9％二丙二醇二苯甲酸酯、16％1，2-丙二醇、2.8％HEL-40，0.6％阿拉伯胶、水加至100％。2.制备过程：按配方称取0.11克伊维菌素(纯度90-91％)、0.9克二丙二醇二苯甲酸酯、16克1，2-丙二醇、2.8克HEL-40，于配制罐中，搅拌，待伊维菌素溶解后，加入20毫升水，充分搅拌，加入含0.6克阿拉伯胶的水溶液20毫升，搅拌混匀，补加水至100毫升，即得乳状制剂。本剂室温存放2年，伊维菌素降解率小于标示量的1.11％，2-epimerH2B1a与H2B1a的峰面积比为0.23-0.35％；对照品2-epimerH2B1a与H2B1a的峰面积比为1.77-2.03％。在36.5-37.5℃、0.1摩尔盐酸溶液中反应3小时，含二丙二醇二苯甲酸酯和阿拉伯胶的制剂，其反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为1.56-2.41％；对照制剂反应液中MSH2B1a峰面积占H2B1a峰面积的百分比为4.82-5.32％。当前第1页1 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