一种复合镇痛药物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种复合镇痛中药，属于中草药领域。
【背景技术】
[0002] 附子（Aconitum carmichaeli Debx.)，又名鶴儿花、铁花、五毒，为毛茛科植物的 子根的加工品。主治亡阳虚脱、肢冷脉微、阳瘘、宫冷、心腹冷痛、虚寒吐泻、阴寒水肿、寒湿 痹痛等。其回阳救逆、补火助阳、散寒止痛功效较佳。主产于四川、湖北、湖南等地。附子为 常用中药，是毛茛科乌头（Aconitum carmichaeli Debx.)属植物子根的加工品，具有回阳 救逆、补火助阳、散寒除湿等功效，为中药中"回阳救逆第一品"。附子生品有大毒，其中所含 的乌头碱既是有效成分，又是毒性成分，且治疗量与中毒量接近，经加工炮制后此类成分转 化为单酯型生物碱，从而减小毒性。《中国药典》虽然对附子中的乌头碱进行限度控制，但检 测方法的专属性仍然较低。
[0003] 细辛（Asarum sieboldii Miq.)，又名华细辛、小辛、少辛、盆草细辛，为马兜铃科 植物的干燥根和根茎。主治风寒感冒、头痛、牙痛、风冷头痛、鼻渊、齿痛、痰饮咳逆等。细辛 既能外散风寒，又能内祛阴寒，同时止痛、镇咳功效较佳。主产于东北及山东、山西、河南、陕 西等地。
[0004] 附子细辛汤引自《伤寒论》，为临床常用方剂，现代药理研宄证实有抗炎、镇痛、免 疫调节等作用，其他作用如清除身体局部产生的活性氧。
[0005] 芍药（Paeonia lactiflora Pall·)，又名将离、离草，为毛茛科植物的干燥根。主 治月经不调、痰滞腹痛、关节肿痛、胸痛、肋痛等症，有较高的药用价值。同时清热凉血、活血 祛瘀功效较佳。主产于东北、华北、陕西及甘肃等地。
[0006] 白芍是常用的传统中药，味苦酸，性微寒，炒制后性缓、柔肝、止泻，酒炒后借酒 行经止中寒腹痛。能养血敛阴，滋润筋脉，又可柔肝缓急止痛，《神农本草经》谓之"主邪气 腹痛，除血痹，破坚积，寒热疝瘕，止痛"。白芍的炮制方法，现行全国各地尚有"炒制""酒 制" "土制""醋制""麸制" "酒麸焯""制炭" "煨制""盐制"等制法；药典收载有白芍、炒白 芍、酒白芍三种饮片规格的炮制方法。现代认为白芍经炒后，性稍缓，以养血敛阴为主， 酒炙后，能降低酸寒之性，擅于和中缓急，止痛。现代研宄结果表明，白芍主要含有芍药 苷、牡丹酚、芍药花苷等成分；具有镇静、解痉、抗炎、抗应急性溃疡病、扩张冠状动脉、对抗 应急性心肌缺血以及抑制血小板聚集等多种药理作用。
[0007] 甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.)，又名生甘草、甜草、乌拉尔甘草、甜根子， 为豆科植物的干燥根和根茎。主治脾胃虚弱、倦怠乏力、心气不足、心悸气短等。其补脾益 气、润肺止咳、缓急止痛、缓和药性功效较佳。主产于内蒙古、甘肃、新疆、东北、河北、山西等 地。
[0008] 甘草甘缓，与芍药均为缓急止痛的要药，合用其效更好，可谓缓急止痛最佳配伍， 被历代医家推崇。其与甘草二药相伍，酸甘化阴，调和肝脾，有柔筋止痛之效。一般需经净 制切片或炮制后入药用。张元素称芍药"炙甘草为辅，治腹中痛；如夏月腹痛，少加黄芩；若 恶寒腹痛，加肉桂一分，白芍药二分，炙甘草一分半，此仲景神品药也"。
[0009] 附子细辛与芍药甘草药对源自于张仲景的《伤寒论》，分别由附子和细辛、芍药和 甘草各两味药组成，配伍后产生了较好的止痛作用，其化学成分和药理学的研宄已有较多 报道，但对于其止痛作用的分子机理研宄却比较少。附子细辛主治少阴病，始得之，反发热， 脉沉者。现代药理研宄证实有抗炎镇痛作用、免疫调节作用等。除了被用于治疗感冒外，还 被用于治疗疼痛、水肿、呼吸系统疾病（如哮喘）、心血管疾病、代谢性疾病、肌肉关节疾病、 五官科疾病（如变应性鼻炎和皮肤疾病）等。近年来，新的治疗用途也不断被发掘出来， 如治疗顽固性失眠、抖动症等。芍药甘草有柔肝舒筋、缓急止痛之功效，主治筋脉挛急、脘 腹胀痛。现代研宄表明芍药甘草复方具有明显的解痉作用和胃肠道作用。二药相伍，酸甘 化阴，调和肝脾，有柔筋止痛之效。
[0010] TRPVl 瞬时受体电位香草酸亚型 I (transient receptor potential vanilloid 1TRPV1)是TRP超家族的成员之一，是一种非选择性的阳离子通道。TRPVl受体又被称作辣 椒素受体，是在哺乳动物身上克隆的首个瞬变感受器电位离子通道蛋白家族成员，也是目 前生理功能和病理机制研宄最为清楚的一个受体。TRPVl广泛分布于伤害性感受器上，并且 在伤害性感受器中起重要作用。TRPVl能够感受伤害性刺激，将之转化为动作电位，传至中 枢形成痛觉。炎症时释放的许多炎症介质都能够与TRPVl发生相互作用，产生疼痛或痛觉 过敏，并且通过各种不同的信号通路来调制TRPVl的活性。研宄发现，TRPVl通道蛋白不仅 与机体热觉感受（可被43°C温度启动）有关，还可被多种配体样物质、炎症介质、组织损伤 刺激物等启动，参与炎症后痛觉增敏病理机制的形成。
[0011] 深入研宄TRPVl的作用机制，有助于理解痛觉生理和开发新型镇痛药物。目前临 床上常用的镇痛药物主要为两大类，即非留体抗炎类和阿片类，代表药物分别为阿司匹林 和吗啡，前者可引起严重的胃肠道反应，后者有成瘾性。因此找寻新的无上述副作用的镇痛 药物是本领域技术人员渴望解决的技术问题。
[0012] 另一个技术问题是如何确定镇痛疗效配伍作用的存在。
【发明内容】
[0013] 本发明提供了一种复合镇痛药物，产生了配伍作用，并通过高效液相色谱法检测 药物中有效成分的含量变化来验证配伍作用的存在。
[0014] -种复合镇痛药物，包括附子和细辛，其特征在于所述复合镇痛药物由以下重量 份的组分构成：附子10份、细辛20份、白芍10份、甘草10份。
[0015] 所述复合镇痛药物的制备方法：
[0016] 称取附子10g，细辛20g，加12倍量蒸馏水用文火煎煮45min，滤过得到滤液一，滤 渣再加入10倍量蒸馏水用文火煎煮45min，滤过得到滤液二，合并滤液一和二，静置去渣， 用旋转蒸发仪浓缩为60%的水煎液一，每毫升含生药0. 6g ;
[0017] 称取白芍l〇g，白芍l〇g，甘草加12倍量蒸馏水用文火煎煮45min，滤过得到滤液 三，滤渣再加入10倍量蒸馏水用文火煎煮45min，滤过得到滤液四，合并滤液三和四，静置 去渣，用旋转蒸发仪浓缩为60%的水煎液二，每毫升含生药0. 6g ;混合后得到复合镇痛药 物。
[0018] 本发明芍药供试品的峰面积为253451 μ v/s，芍药甘草供试品峰面积为 143036 μ v/s，芍药甘草供试品峰面积较芍药供试品峰面积下降，所以在芍药甘草药对配伍 后，芍药苷的含量降低，说明药对配伍后对有效成分的含量有影响。芍药和甘草都有止痛作 用，推测芍药甘草配伍后缓急止痛作用加强。
[0019] 白芍总苷为从白芍的饮片中提取出的总苷，按照白芍的干燥品进行计算，质量合 格的白芍其芍药苷的含量应少于40.0%。对白芍进行生化提取后，从白芍干燥根中可提取 芍药苷、羟基芍药苷、芍药内酯苷、芍药花苷、苯甲酰芍药苷等诸多具有一定生理功效的苷 类混合物，这些苷类统称为白芍总苷。而芍药苷是白芍最为重要的一种苷类成分，其在白芍 总苷中的含量约在90%左右。本研宄进行高效液相色谱法对白芍总苷中的芍药苷含量进 行测定，所使用的稀释溶剂为甲醇，据相关资料表明，甲醇作为溶剂，所制得的溶液比较澄 清。本研宄建立的应用高效液相色谱法对白芍总苷中芍药苷的含量进行检测，其检测方法 简单、方便、准确性好，同时实验稳定性和重复性也比较好，在对白芍总苷中芍药苷的含量 测定上，具有良好的应用价值。
[0020] 本发明附子供试品的峰面积为14848 μ v/s，附子细辛供试品峰面积为8327 μ v/ s，附子细辛供试品峰面积较附子供试品峰面积下降，所以在附子细辛药对配伍后，乌头碱 的含量降低，说明药对配伍后可能对减毒有一定作用。
[0021] 附子为毛茛科植物乌头的子根加工品。附子性大热，味辛、甘，有毒，具回阳救 逆、补火助阳、散寒止痛等功效，具有强心、降压、抗炎和镇痛等作用。附子中生物碱主要有 乌头碱、新乌头碱、次乌头碱等双酯型生物碱为剧毒化合物。因此，为控制药物的毒性，检 测附子中乌头碱的含量是非常必要的。《药典》中记载附子中乌头碱的含量不得少于1. 0%。
[0022] 等度洗脱是用恒定配比的溶剂系统洗脱，是最常用的色谱洗脱方式，方法简便、 色谱柱易再生等是其优点。但对于成分复杂的样品，往往不能兼顾某些组分的分离要求， 所以需用梯度洗脱。样品成分低、成分复杂时就会用到梯度洗脱。中药中含的物质较西药 复杂，所以常用梯度洗脱。
【具体实施方式】
[0023] 实施例1
[0024] 附子细辛汤
[0025] 实验一：
[0026] 附子是毛茛科乌头（Aconitum carmichaeli Debx.)属植物子根的加工品，具有回 阳救逆、补火助阳、散寒除湿等功效，主治疗亡阳虚脱，肢冷脉微，肾阳虚衰，阳瘘宫冷，寒湿 痹痛等疾病。
[0027] 细辛为马兜铃科植物细辛（Asarum sieboldii M