眼眶取血， 静置30min后3000rpm离心10min，取血清，在沈阳疾控中心用全自动生化仪检测血清中的 CHO、TG、LDL-C和HDL-C ;模型组小鼠血清的CHO、和LDL-C含量与空白对照组含量比较显著 升高（P〈0. 01，P〈0. 01)，血清HDL-C含量较空白对照组含量也有降低，表明造模成功。阳性 对照组血清中的CHO含量较模型组含量显著降低（P〈0. 01)，HDL-C含量与模型组含量比较 升高较显著（P〈〇. 05)，LDL-C含量降低较显著（P〈0. 01)。核桃柏提取物组血清中的CHO含 量与模型组含量比较显著降低（P〈〇. 05)，HDL-C的含量显著高于模型组（P〈0. 01)，LDL-C含 量较模型组含量有显著下降（P〈〇. 05)。结果见表4。
[0048] 表 4 各组血浆中 CHO、TG、HDL-C、LDH-C 的含量(jfcts,(mmoL/L)
[0049]
[0050] 与空白组比较，"#"表示P〈0. 05, "##"表示P〈0. 01 ;与模型组比较，表示 Ρ〈0· 05，"**" 表示 Ρ〈0· 01。
[0051] 结论：核桃柏提取物能够明显降低小鼠血浆中CHO、LDL-C水平，升高HDL-C水平。 从而可以确定核桃柏提取物具有一定抗胆结石作用。
[0052] 实施例9
[0053] 核桃柏提取物对小鼠胆汁成分的影响
[0054] 健康雄性C57BL/6J小鼠32只（20±2g)，随机分组：空白对照组、模型对照组、阳 性对照组和给药组。模型对照、阳性对照组和给药组小鼠给予致石饲料，饮水不限，空白对 照组予正常饲料。给药组和阳性对照组小鼠每日上午固定时间称重灌胃，灌给核桃柏提取 物（实施例1)和熊去氧胆酸片（UDCA)，剂量分别为0· 01mg/g和0· 02mg/g，每日1次；模 型对照组和空白对照组给予等体积的蒸馏水。喂养8周。实验最后ld，禁食24h，迅速打 开腹腔，分离胆囊，注射器吸出全部胆汁，在沈阳疾控中心用全自动生化仪检测胆汁中胆固 醇（CH0)、总胆红素（TBIL)。模型组与空白组比较，模型组小鼠胆汁中CHO含量显著升高 (P〈0. 05);熊去氧胆酸组与模型组含量比较可显著降低胆汁中的CHO含量（P〈0. 05);核桃 柏提取物组与模型组比较，核桃柏提取物组小鼠胆汁中CHO含量有显著降低（P〈0. 05)。各 组胆汁中TBIL含量以核桃柏提取物组降低的较多，但无统计学意义。结果见表5。
[0055] 结论：核桃柏粗提取物能显著降低胆汁中胆固醇的含量，对胆结石的形成有一定 的预防作用。
[0056] 表5各组小鼠胆汁成分(1?., （mmoL/L)
[0057]
[0058] 注：与空白组比较，"#"表示P〈0.05 ;与模型组比较，表示P〈0.05。
[0059] 实施例10
[0060] 核桃柏提取物对大鼠胆汁流量的影响
[0061] 取大鼠32只（体重220 ± IOg)，随机分为3组，即空白对照组、阳性药组和 核桃柏提取物组，分别称重、编号，灌胃给药7天，空白组给予蒸馏水，核桃柏提取物组 21111710(^(实施例2)。最后一天给药111后以3.5%水合氯醛11111710(^(体重）腹腔注射 麻醉，仰位固定于小动物手术板，腹部剪毛后沿腹白线（腹正中）用粗剪刀（或手术刀切 口）剖开腹腔2~3cm，可见胃幽门部，沿十二指肠降部肠系膜看到白色透明具有韧性的胆 总管，在接近十二指肠开口处，向肝脏方向剪"V"形，将胆汁引流管插入胆总管，引出腹壁， 结扎固定可见淡黄色液体顺管流出即是胆汁，稳定IOmin后，先收集30min胆汁，然后给药 组经十二指肠分别注射核桃柏提取物，阳性药，空白组注射生理盐水，以30min为一时限， 用小试管收集大鼠1.5h内的胆汁（mL)，记录各时间段胆汁流量，并将收集的胆汁在沈阳疾 控中心用全自动生化仪检测胆固醇（CHO)、胆红素（TBIL)。与空白对照组比较，十二指肠给 药后，核桃柏提取物组和阳性药能显著提高大鼠胆汁分泌物量（P〈〇. 05)。结果见表6。 [0062] 结论：核桃柏粗提取物能有效提高大鼠胆汁分泌量，有利于胆结石的排除。
[0063] 表6各组大鼠胆汁流量(feS,
[0064]
[0065] 注：与空白组比较，表示卩〈0.05，"**"表示卩〈0.01。
[0066] 实施例11
[0067] 核桃柏提取物对大鼠胆汁成分的影响
[0068] 对实施例7中接的胆汁进行成分分析，结果表明与空白组比较，给药组对胆汁中 CHO含量的影响不明显；阳性药与空白组比较，胆汁中CHO含量有升高趋势。各组胆汁中 TBIL含量均无明显差异（P > 0. 05)。结果见表7。
[0069] 结论：核桃柏粗提取物不影响正常大鼠胆固醇和胆红素的分泌，不破坏正常大鼠 胆固醇和胆红素的分泌的平衡。
[0070] 表7各组大鼠胆汁成分.(??, (mmoL/L)
[0071]
[0072] 实施例12含核桃柏提取物的颗粒剂及其制备
[0073] 处方：成分％ (重量）
[0074] 核桃柏提取物15
[0075] 蔗糖 65
[0076] 糊精 20
[0077] 制法：将核桃柏提取物（实施例4)、鹿糖和糊精混合均匀，加入适量75 %乙醇制成 软材，18目筛制湿颗粒，50°C烘箱干燥30min，取出后过18目筛整粒，分装，即得核桃柏提取 物颗粒剂。
[0078] 实施例13含核桃柏提取物的片剂及其制备
[0079] 处方：成分％ (重量）
[0080] 核桃柏提取物15
[0081] 微晶纤维素 77
[0082] 羧甲基淀粉钠 7
[0083] 甜菊糖苷 0· 5
[0084] 硬脂酸镁 0· 5
[0085] 制法：将核桃柏提取物（实施例2)、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠混合均匀，加入适 量75%乙醇制成软材，软材过18目筛制湿粒，湿粒于50°C烘箱中干燥30min，取出后过18 目筛整粒，加入硬脂酸镁和甜菊糖苷，混匀，压片，即得核桃柏提取物片剂。
[0086] 实施例14含核桃柏提取物的胶囊剂及其制备
[0087] 处方：成分％ (重量）
[0088] 核桃柏提取物15
[0089] 糊精 45
[0090] 淀粉 40
[0091] 制法：取处方量的核桃柏取物（实施例2)粉碎过80目筛，加入淀粉、糊精、混合均 匀，
[0092] 装入胶囊，即得核桃柏提取物胶囊。
[0093] 实施例15含核桃柏提取物的软胶囊剂及其制备
[0094] 处方：成分％ (重量）
[0095] 核桃柏提取物15
[0096] 明胶 30
[0097] 甘油 20
[0098] 水 35
[0099] 制法：取处方量的甘油和水加热至70-80°C，加入明胶，搅拌，保温l_2h，除去上浮 的泡沫过滤后制成胶板，再将处方量的核桃柏提取物（实施例4)粉碎过80目筛，置于二块 胶板之间，用钢模压制成胶囊。
[0100] 实施例16核桃柏提取物的口服液及其制备
[0101] 处方：成分％ (重量）
[0102] 核桃柏提取物15
[0103]蔗糖 25
[0104] 水 60
[0105] 制法：去处方量的核桃柏提取物加入适量的水，调节pH值至7. 0,搅匀，冷藏72小 时,过滤,滤液加入蔗糖,搅拌使溶解,加入适量香精并调节pH值至7. 0,加入适量的水，搅 拌，静置12小时，过滤，灌装，灭菌，即得核桃柏提取物口服液。
[0106] 以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的原则之 内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种核桃柏提取物，其特征在于，通过如下步骤制备： (1) 将核桃柏粉碎，核桃柏粉末用石油醚提取或超临界萃取，石油醚提取液弃去石油醚 液，过滤得滤渣或超临界提取后得滤渣； (2) 将（1)中的滤渣用水或体积浓度为30%-80%醇溶液提取，减压蒸干，得到核桃柏提 取物。2. 根据权利要求1所述的核桃柏提取物，其特征在于：步骤（1)中的石油醚沸程为 60-90°C，提取方法为回流、冷浸或闪式提取，优选冷浸。3. 根据权利要求1或2所述的核桃柏提取物，其特征在于：步骤（2)中的醇溶液体积浓 度为 40%-70%。4. 根据权利要求1-3任何一项所述的核桃柏提取物，其特征在于：步骤（2)中的所述 的醇溶液为甲醇、乙醇或正丁醇的含水溶液，所述的水或醇溶液的用量为核桃柏的8-20倍 量。5. 根据权利要求1-4任何一项所述的核桃柏提取物，其特征在于：总有机酸含量在30% 以上。6. -种药物组合物，包含权利要求1-5任何一项所述的核桃柏提取物。7. -种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的核桃柏提取物或权 利要求6所述的药物组合物与药学上可接受的载体。8. 根据权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述的药物制剂包括固体制剂和液 体制剂，所述的固体制剂为片剂、胶囊或颗粒剂；所述的液体制剂为口服液。9. 权利要求1-5任何一项所述的核桃柏提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求 7或8所述的药物制剂在制备防治消化系统疾病药物或保健品中的应用。10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的消化系统疾病药物或保健品为抗 胆结石、利胆的药物或保健品。
【专利摘要】本发明属于医药技术领域，涉及核桃粕提取物及其制备方法和用途，具体涉及核桃粕提取物在制备治疗胆结石药物和抗胆结石保健品中的应用。其制备方法为核桃粕经石油醚或超临界提取后过滤得滤渣，滤渣再用水或醇溶液提取，减压浓缩得浸膏，浸膏总有机酸含量在30%以上，总有机酸药理实验证明核桃粕提取物具有抗胆结石、利胆的作用。本发明的制备方法使用了人们常弃掉的核桃粕为原料，工艺简单，有机酸含量高。
【IPC分类】A61K36/52, A61P1/16
【公开号】CN105012382
【申请号】CN201410169677
【发明人】刘晓秋, 潘英妮, 程松, 张雪, 徐佳佳
【申请人】沈阳药科大学
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2014年4月24日