去除残余表面活性剂，沉淀物复溶于Mi I ipore水中，3次水洗，干燥，即得PLGA纳米粒。
[0067]实施例12
离子交联法制备微粒:壳聚糖溶于稀醋酸水溶液，过夜溶胀，配成0.5%(w/v)的壳聚糖溶液，三聚磷酸钠溶于蒸馏水，配成0.5%(w/v)的溶液，不断磁力搅拌，以滴速约为3ml/min将三聚磷酸钠液加入壳聚糖液中，溶液由澄清渐变为淡蓝色乳光，根据乳光判断纳米粒的形成。
[0068]实施例13
静电喷雾法制备微粒:常温，将PLGA溶解在三氟乙醇中48hr，磁力搅拌，15%w/v，将此溶液转入连有高压发生器的微量注射栗中，调节电压V 5-35kV，接收距离L 9cm，溶液流速f
0.6ml/h，电喷，招箔接收板或载玻片接收所得微粒，干燥箱中干燥2d，即得纳米粒。扫描电镜观察所制微粒形貌。
[0069]实施例14
速释片的制备:碳酸氢钠:氢氧化镁=1:2，硬脂酸镁1%、交联羧甲基纤维素钠3%、Starch1500 10%，100目过筛，将上述制备的微粒适量，全部混合均匀，直接压片，硬度为6 kg/mm2 ο
[0070]实施例15
速释片的制备:甘露醇40%、微晶纤维素35%、适量乳糖，过100目筛，等量递增混匀，加5%聚乙烯吡咯烷酮K30溶液为黏合剂，制粒，60°C烘干I h，整粒，再与适量羧甲基纤维素钠、微粉硅胶混匀，压片。
[0071]实施例16
胃溶包衣:将速释片置包衣锅内，包衣锅倾角45°，进风温度35 ± 5°C，喷枪雾化空气压力414KPa，喷雾速率10g/min，速释片温度控制在25 ± 2°C，转速15r/min。
[0072]实施例17
胃溶包衣:取pH敏感点在1-2的胃溶型丙烯酸树脂(VI号)，用丙酮/乙醇(l/l，v /V)配成2.0%的溶液，附加剂用量10-20%，混匀，调节包衣增重为3%。调节包衣锅转速，使片芯呈抛物线滚动、旋转打磨，约60±5 r/min。吹风机进风预热片芯，温度约50°C，调节进风位置，出风速度，使包衣液均匀喷出。15min后，观察片芯，边缘光滑，无缺损或裂片，包衣片不粘片，衣膜均匀平整;包衣完毕，取出，约60°C烘箱干燥;称重，以包衣增重百分比作为包衣控制指标。
[0073]实施例18
微粒的胃溶包衣:制得的微粒置流化床包衣装置中沸腾流化，喷枪喷洒5-7%的乙醇羟丙基甲基纤维素液，鼓风干燥，排气口排出挥发溶剂，得包衣厚度均匀、无粘连的胃溶包衣微粒。
[0074]实施例19
胃溶包衣胶囊及微粒的填充:高效包衣机，喷嘴直径0.5-1.5 mm,雾化压力0.1MPa，风量60-80m3/h，物料温度23-25 °C，喷液速度1.5-2.5g/min，数显千分尺测定厚度，25 °C下熟化30-40 min，包衣完成，取出胃溶包衣胶囊，室温干燥。灌装胃溶空心胶囊，10%乙基纤维素溶液封口，置干燥器备用。可加入适量抗粘剂硬脂酸镁或二氧化硅等，或稀释剂、润滑剂、崩解剂等。
[0075]实施例20
肠溶速释片崩解测定:参考国家食品药品监督管理局药品审评中心的静态方法，将筛篮(孔内径400μπι)放入装有2ml人工肠液的试管中，再垂直放入37°C水浴中，待试管内温上升后，将I片肠溶速释片置筛篮中，从肠溶速释片接触人工肠液开始计时，至完全崩解停止，立刻将筛篮提离试管，筛网上无明显留存，测试6片，均<15s。
[0076]实施例21
胃溶速释片崩解测定:参考国家食品药品监督管理局药品审评中心的静态方法，将筛篮(孔内径400μπι)放入装有2ml人工胃液的试管中，再垂直放入37°C水浴中，待试管内温上升后，将I片胃溶速释片置筛篮中，从胃溶速释片接触人工胃液开始计时，至完全崩解停止，立刻将筛篮提离试管，筛网上无明显留存，测试6片，均<15s。
[0077]实施例22
大鼠体内定位试验:SD大鼠，30只，体重216.37 ± 17.53g，禁食5h，200粒肠溶速释生物粘附微粒用水灌胃，分别在灌胃后即刻，10 ’，20 ’后处死，打开腹腔，从贲门起锐性分离暴露胃肠腔，至回盲处，肉眼观察肠溶速释生物粘附微粒在胃肠道的分布。结果显示，灌胃后即刻胃中完整和少量溶胀肠溶速释生物粘附微粒160.70 ± 17.33粒，十二指肠溶胀或溶出肠溶速释生物粘附微粒35.90± 15.47粒，灌胃后10’胃中完整和少量溶胀肠溶速释生物粘附微粒1.40± 1.96粒，十二指肠溶胀或溶出肠溶速释生物粘附微粒186.40 ±7.76粒，灌胃后20 ’胃中完整和少量溶胀肠溶速释生物粘附微粒0.70 ±0.82粒，十二指肠溶胀或溶出肠溶速释生物粘附微粒191.50±4.03粒。可见，所述的肠溶速释生物粘附剂在十二指肠定位溶出。
[0078]实施例23
大鼠体内定位试验:SD大鼠，20只，体重223.17 ± 20.04g，禁食5h，200粒胃溶速释生物粘附微粒用水灌胃，分别在灌胃后5 ’，15 ’，打开腹腔，从贲门起锐性分离暴露胃肠腔，肉眼观察胃溶速释生物粘附微粒在胃肠道的分布。结果显示，灌胃后5 ’，胃中溶胀或溶出胃溶速释生物粘附微粒190.92± 13.12粒，灌胃后15’胃中溶胀或溶出肠溶速释生物粘附微粒193.75 ± 7.84粒。可见，所述的胃溶速释生物粘附剂在胃部定位溶出。
[0079]实施例24
急性毒性试验:昆明鼠20只，体重22.75 ± 2.63g，随机分为2组，试验组ip生物粘附材料浸提液，50ml/Kg，对照组ip等量生理盐水。注射后24h、48h、72h观察一般状况、毒性反应和死亡动物数。结果显示，所有试验组动物均无运动迟缓、体重下降、腹泻、瘫痪、呼吸抑制、惊厥、死亡等体征。
[0080]实施例25
亚急性毒性试验:SD大鼠24只，体重214.61 ± 18.72g，随机分为2组。生物粘附材料细粉，生理盐水配成5%混悬液，qod上午9时ig，对照组ig等量生理盐水。观察一般状况和体重，2W、4W时每组各处死6只，取心、肝、肾、脾组织，称重，并固定作病理组织切片，SPSSl2.0统计分析软件分析器官指数(器官重量/动物重量)，组间采用方差分析，组内采用t检验，以p〈0.05为差异有显著性意义。结果显示，所有试验组动物均无运动迟缓、体重下降等体征，试验组器官指数:心脏0.454 ±0.062，肝脏3.203 ±0.254，肾脏0.869 ±0.077，脾脏0.269 土
0.085，对照组器官指数:心脏0.463 ± 0.039，肝脏3.317 ± 0.472，肾脏0.878 ±0.071，脾脏
0.273±0.064，与对照组相比，心、肝、肾、脾各器官指数的差异均无显著性意义(P>0.05)。病理组织切片未发现明显异常。
[0081 ] 实施例26
皮肤刺激试验:新西兰兔3只，体重2.75±0.13kg，无菌生物粘附材料细粉10g，加入50ml生理盐水，高温高压消毒，37 °C浸提72h，2500rpm离心，5min，取上清。脊背两侧备皮，面积约10 X 10cm，一侧10个位点用浸提液id，0.5ml,另一侧等量生理盐水，观察各位点在注射后Ih、24h、48h、7 2h后体征。结果显不，注射后Ih、24h、48h、7 2h试验侧及对照侧均无明显红肿、溃烂及渗液等体征出现，未见明显皮肤刺激症状。
[0082]实施例27
离体胃粘膜粘附试验:昆明鼠8只，体重21.36±2.41g，禁食24h(供水)，颈椎脱位处死，立即取胃，自贲门沿胃大弯切开至幽门，平铺于载玻片，均匀铺撒胃溶定位速释生物粘附微粒，置饱和氯化钠溶液容器中，密闭保湿lOmin，取出，用pHl.3的盐酸氯化钠溶液20ml/min冲洗5min，观察微粒脱落面积，并等距离数码拍照，必要时图像分析比较脱落面积。结果显示，仅肉眼观察即胃溶定位速释生物粘附微粒无明显脱落。
[0083]实施例28
离体胃粘膜粘附试验:SD大鼠10只，体重227.83± 19.41g，禁食24h(供水)，同上取胃，将胃溶速释生物粘附剂压成平片，用人工胃液润湿10 min后，桥连扭力天平并固定，天平指针调零。升降平台放置存有胃粘膜的培养皿(保湿)，调节升降平台，使胃粘膜恰与润湿后的胃溶速释生物粘附剂接触粘附，10 min后，予胃溶速释生物粘附剂2mg/s拉力，直至粘膜与胃溶速释生物粘附剂恰好分开，记录天平读数。结果显示，胃溶速释生物粘附剂对胃粘膜具有良好粘附作用。
[0084]实施例29 离体肠粘膜粘附试验:SD大鼠10只，体重231.42 ± 15.89g，禁食24h (供水)，颈椎脱位处死，立即取十二指肠至空肠上段，平铺，PH6.8的磷酸盐缓冲液冲洗，置饱和氯化钠溶液容器中，密闭保湿。将肠溶速释生物粘附剂压成平片，用PH6.8的磷酸盐缓冲液润湿10 min后，桥连扭力天平并固定，天平指针调零。升降平台放置存有小肠粘膜的培养皿(保湿)，调节升降平台，使小肠粘膜恰与润湿后的肠溶速释生物粘附剂接触粘附，10 min后，予肠溶速释生物粘附剂2mg/s拉力，直至粘膜与肠溶速释生物粘附剂恰好分开，记录天平读数。结果显示，肠溶速释生物粘附剂对十二指肠至空肠上段粘膜具有良好粘附作用。
[0085]实施例30
在体灌注粘膜粘附试验(肠溶):SD大鼠6只，体重253.10 ± 19.24g，禁食24h (供水)，乌拉坦麻醉，腹部中线切开，贲门部结扎，钝性分离胃、小肠整个肠段，冲洗内容物，远端结扎，胃近端与小肠远端两端分别接玻璃管，胃近端玻璃管接蠕动栗。取肠溶速释生物粘附微粒200粒，混悬于100 ml生理盐水中，将肠溶速释生物粘附微粒混悬液灌入，收集流出物并计数流出肠溶速释生物粘附微粒粒数，计算不同部位的包衣微粒滞留率。肠溶速释生物粘附微粒在不同部位的粘附性能不同，在胃、小肠的粘附性能分别为3.5 3 ± 0.21 %，8 7.3 6 土5.59%ο
[0086]实施例31
在体灌注粘膜粘附试验(胃溶):SD大鼠6只，体重244.31 ± 17.37g，禁食24h(供水)，乌拉坦麻醉，腹部中线切开，贲门部结扎，钝性分离胃、小肠整个肠段，冲洗内容物，远端结扎，胃近端与小肠远端两端分别接玻璃管，胃近端玻璃管接蠕动栗。取胃溶速释生物粘附微粒200粒，混悬于100 ml生理盐水中，将胃溶速释生物粘附微粒混悬液灌入，收集流出物并计数流出胃溶速释生物粘附微粒粒数，计算不同部位的包衣微粒滞留率。胃溶速释生物粘附微粒在不同部位的粘附性能不同，在胃、小肠的粘附性能分别为90.13±3.74%，8.45 土
0.67%。
[0087]实施例32
离体灌注粘膜粘附试验(肠溶):SD大鼠10只，体重230.07±15.83g，颈椎脱位处死，腹部中线切开，取出十二指肠，用PH