生物菌肥14天后，草莓根腐病的发 病率与空白对照相比，有显著差异(P〈〇.01)，且明显好于菌肥M-CK。
[0127] 本发明的枯草芽胞杆菌生物菌肥及其制备方法，通过上述发酵液与营养复合体、 增效剂、助剂的复配，提供了一种新型、稳定、无公害的生物菌肥，在该生物菌肥的生产过程 中不会产生任何三废污染，对环境友好，而且制得的生物菌肥既可以有效防治土传病害，还 可以促进作物生长，提尚农广品的品质。
[0128] 本发明通过发酵的方法，将决明子中的有效成份全部释放出来，并连同原料全部 在菌肥中得到利用，这样既简单也无废渣、污染物产生，并且其有效成分在菌肥中可以有效 地抑制菌肥体系杂菌的产生，提高了菌肥的效果稳定性，同时与菌剂起到协同增效的杀菌 作用，提高菌肥的药效。为该类成分的应用开创了一条新的道路。
[0129] 本发明选用决明子为发酵原料之一，既提供了枯草芽胞杆菌在发酵过程中所需要 的营养物质氮源，同时决明子含多种蛋白质和粘液，发酵后有一定的粘性，有增稠作用，可 以较好地替代黄原胶，解决了菌肥的分层问题。其次，通过发酵过程使得决明子中的大黄素 和大黄素甲醚得以很好的释放，能起到杀菌作用，抑制杂菌生长，保证了菌肥的防病效果的 稳定性。同时，这些抑菌成分能与芽胞杆菌起到协同增效的作用，可以提高枯草芽胞杆菌的 稳定性，提高菌肥药效。再者，本发明制备的菌肥常温条件下贮藏稳定性很好，存放12个月 有效孢子含量在85%以上（国家标准，液肥贮藏时间为最低3个月有效孢子含量在85%以 上)。
【主权项】
1. 一种枯草芽胞杆菌生物菌肥，其特征在于，组分以重量百分比计，包含:枯草芽胞杆 菌菌液10 %~95 %，余量为水； 所述枯草芽胞杆菌菌液通过发酵得到，其发酵配方如下:组分以重量百分比计，决明子 粉5~45 %、玉米粉20~30 %、氯化钠1~3 %、硫酸镁1~3 %、碳酸钙2~4 %、磷酸二氢钾0.5 ~3%，聚硅氧烷消泡剂SXP-101适量，余量为水。2. 根据权利要求1所述的枯草芽胞杆菌生物菌肥，其特征在于:所述枯草芽胞杆菌生物 菌肥还包括营养复合体5~30重量％，增效剂1~5重量％，助剂0.5~1重量％，所述营养复 合体为海藻酸、腐植酸、氨基酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尿素中一种或几种任意比例的混 合;所述增效剂为硫酸锰;所述助剂为缩聚萘磺酸盐分散剂D-425,所述消泡剂为聚硅氧烷 消泡剂SXP-101;所述枯草芽胞杆菌菌液的发酵配方中还含有豆柏5~30重量份％。3. 根据权利要求1所述的枯草芽胞杆菌生物菌肥，其特征在于:所述枯草芽胞杆菌生物 菌肥的配方为:枯草芽胞杆菌菌液60重量％，海藻酸5重量％，氨基酸10重量％，磷酸氢二钾 7重量％，硫酸锰2.5重量％，D-4250.5重量％，余量为水。4. 根据权利要求1-3中任一项所述的枯草芽胞杆菌生物菌肥，其特征在于:所述枯草芽 胞杆菌为枯草芽胞杆菌R31、枯草芽胞杆菌B-001、枯草芽胞杆菌S9、枯草芽胞杆菌B2、枯草 芽胞杆菌Bs-916、枯草芽胞杆菌B-332或枯草芽胞杆菌BS-2。5. 权利要求1-3中任一项所述枯草芽胞杆菌生物菌肥的制备方法，其步骤如下： (1)枯草芽胞杆菌菌液的制备 1) 发酵液制备：发酵罐培养基采用的发酵配方为：决明子粉5~45重量份％、玉米粉20 ~30重量份％、氯化钠1~3重量份％、硫酸镁1~3重量份％、碳酸钙2~4重量份％、磷酸二 氢钾0.5~3重量份％，聚硅氧烷消泡剂SXP-101适量，余量为水； 2) 接种用菌株种子液制备:将斜面保存的枯草芽胞杆菌菌株活化培养，将其划线接种 于牛肉膏蛋白胨培养基上培养;待菌株充分生长后，挑取单菌落，接种到LB培养基中培养， 得到枯草芽胞杆菌的种子液，备用； 3) 菌液的制备:将步骤2)培养好的枯草芽胞杆菌的种子液以0.5 %~2 %的接种量接种 到步骤1)所得发酵罐中的发酵液进行发酵;发酵后开始检测，当芽胞形成率达95 %以上时， 停止发酵，得菌液； 2)枯草芽胞杆菌生物菌肥的制备:将步骤(1)所得菌液加入水，得枯草芽胞杆菌生物菌 肥。6. 根据权利要求5所述的枯草芽胞杆菌生物菌肥的制备方法，其特征在于：所述步骤 (1) 中之步骤1)中所述发酵罐培养基采用的发酵配方中还含有豆柏5~30重量份％;所述步 骤（1)中之步骤2)中所述斜面保存的温度为4°C，所述活化培养的温度为32~37°C，活化培 养的时间为1~2小时;在牛肉膏蛋白胨培养上培养的温度为32~37°C，活化培养的时间为 20~28小时;在LB培养基上培养的温度为32~37°C，转速为180rpm，时间为10~18小时。7. 根据权利要求5所述的枯草芽胞杆菌生物菌肥的制备方法，其特征在于：所述步骤 (2) 如下:将步骤(1)所得菌液中按比例将营养复合体、增效剂、助剂及水，充分搅拌，得枯草 芽胞杆菌生物菌肥;所述营养复合体为海藻酸、腐植酸、氨基酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、 尿素中一种或几种任意比例的混合，所述增效剂为硫酸锰，所述助剂为缩聚萘磺酸盐分散 剂D-425。8. -种枯草芽胞杆菌菌液，其发酵配方如下：以重量配比计，决明子粉5~45重量份％、 玉米粉20~30重量份％、氯化钠1~3重量份％、硫酸镁1~3重量份％、碳酸钙2~4重量 份％、磷酸二氢钾0.5~3重量份％，消泡剂适量，余量为水。9. 根据权利要求8所述的枯草芽胞杆菌菌液，其特征在于:所述发酵配方中还含有豆柏 5~30重量份％。10. -种枯草芽胞杆菌菌液的制备方法，其步骤如下： (1) 发酵液制备:发酵罐培养基采用的发酵配方为：决明子粉5~45重量份％、豆柏5~ 30重量份％、玉米粉20~30重量份％、氯化钠1~3重量份％、硫酸镁1~3重量份％、碳酸钙2 ~4重量份％、磷酸二氢钾0.5~3重量份％，聚硅氧烷消泡剂SXP-101适量，余量为水； (2) 接种用菌株种子液制备:将4°C条件下斜面保存的枯草芽胞杆菌菌株置于32~37°C 条件下活化培养1~2小时，将其划线接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，32~37°C条件下培养 20~28小时;待菌株充分生长后，挑取单菌落，接种到LB培养基中，于32~37°C、180rpm下培 养10~18小时，得到枯草芽胞杆菌的种子液，备用； (3) 菌液的制备:将步骤(2)培养好的枯草芽胞杆菌的种子液以体积比为0.5 %~2 %的 接种量接种到步骤(1)所得发酵罐中的发酵液进行发酵;发酵22小时后开始检测，当芽胞形 成率达95 %以上时，停止发酵，得菌液。
【专利摘要】本发明公开了一种枯草芽胞杆菌生物菌肥及其制备方法，属于复合微生物菌肥领域。该枯草芽胞杆菌生物菌肥的组分以重量百分比计，包含：枯草芽胞杆菌菌液10％～95％，余量为水。所述枯草芽胞杆菌菌液的发酵配方如下：以重量配比计，决明子粉5～30重量份％、玉米粉20～30重量份％、氯化钠1～3重量份％、硫酸镁1～3重量份％、碳酸钙2～4重量份％、磷酸二氢钾0.5～3重量份％，消泡剂适量，余量为水。本发明通过发酵的方法，将决明子中的有效成份全部释放出来，并连同原料全部在菌肥中得到利用，这样既简单也无废渣、污染物产生，并且其有效成分在菌肥中可以有效地抑制菌肥体系杂菌的产生，提高了菌肥的稳定性，同时与菌剂有协同增效的作用，提高菌肥的防病效果。
【IPC分类】C05F17/00, C05G1/00
【公开号】CN105481489
【申请号】CN201511026413
【发明人】温书恒, 王勇, 吴文丹, 赵基荃, 吴雅丹, 武展
【申请人】广东植物龙生物技术有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年12月29日