专利名称：2,3-二氮杂萘酮衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及2，3-二氮杂萘酮衍生物及其作为药物的用途。具体地讲，本发明涉及这些化合物用于抑制聚(ADP-核糖)聚合酶(也称作聚(ADP-核糖)合酶和聚ADP-核糖基转移酶，通常称作PARP)的活性的用途。
哺乳动物的酶PARP(一种113-kDa的多结构域蛋白质)通过其识别和快速结合DNA单链或双链裂口的能力参与DNA损伤的信号传导(D′Amours等人，1999，Biochem.J.342249-268)。
根据许多观察结果所得出的结论是PARP参与一系列与DNA有关的功能，包括基因扩增、细胞分裂、分化、细胞凋亡、DNA碱基切除修复，并且影响端粒长度和染色体稳定性(d′Adda di Fagagna等人，1999，NatureGen.，23(1)76-80)。
对PARP调控DNA修复及其它过程的机理的研究证实了其对于在细胞核内形成聚(ADP-核糖)链的重要性(Althaus，F.R.和Richter，C.，1987，蛋白质的ADP-核糖基化酶学和生物学的重要性，Springer-Verlag，Berlin)。与DNA结合的活化的PARP利用NAD在一系列细胞核靶点蛋白(包括拓扑异构酶、组蛋白和PARP本身)上合成聚(ADP-核糖)(Rhun等人，1998，Biochem.Biophys.Res.Commun.，2451-10)。
聚(ADP-核糖基)化还与恶性转化有关。例如，在分离出的用SV40-转化的成纤维细胞细胞核内的PARP活性升高，而白血病细胞和结肠癌细胞比相应的的正常白细胞和结肠粘膜层表现出更高的酶活性(Miwa等人，1977，Arch.Biochem.Biophys.181313-321；Burzio等人，1975，Proc.Soc.Exp.Bioi.Med.149933-938；和Hirai等人，1983，Cancer Res.433441-3446)。
许多低分子量的PARP抑制剂已用于阐明聚(ADP-核糖基)化在DNA修复中的功能性作用。在用烷基化试剂处理的细胞中，对PARP的抑制导致了DNA链断裂和细胞死亡的显著增加(Durkacz等人，1980，Nature 283593-596；Berger，N.A.，1985，Radiation Research，1014-14)。
后来证实，该抑制剂可以通过抑制潜在的致命性损伤的修复而增强放射响应的效果(Ben-Hur等人，1984，British Journal of Cancer，49(Suppl.VI)34-42；Schlicker等人，1999，Int.J.Radiat.Bioi.，7591-100)。据报道，PARP抑制剂对放射致敏的低氧肿瘤细胞有效(US 5,032,617、US 5,215,738和US 5,041,653)。
此外，PARP敲除(PARP-/-)的动物对烷基化试剂和γ-辐射表现出基因组不稳定性(Wang等人，1995，Genes Dev.，9509-520；Menissier deMurcia等人，1997，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，947303-7307)。
在某些血管疾病、脓毒性休克、局部缺血性损伤和神经毒性中也证实了PARP的作用(Cantoni等人，1989，Biochim.Biophys.Acta，10141-7；Szabo等人，1997，J.Clin.Invest.，100723-735)。经PARP抑制剂研究证实，引起可在随后被PARP识别的DNA链断裂的氧自由基DNA损伤是发生这些疾病的主要诱因(Cosi等人，1994，J.Neurosci.Res.，3938-46；Said等人，1996，Proc.Natl. Acad.Sci.U.S.A.，934688-4692)。最近，已证实PARP在出血性休克的发病中起着重要作用(Liaudet等人，2000，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，97(3)10203-10208)。
还证实，可以通过抑制PARP活性来阻止哺乳动物细胞的逆转录病毒感染。已证实这种对重组逆转录病毒载体感染的抑制作用可在各种不同的细胞类型中发生(Gaken等人，1996，J.Virology，70(6)3992-4000)。因此，已将PARP抑制剂开发用于抗病毒治疗和癌症治疗(WO91/18591)。
此外，还有人提出了通过抑制PARP来延迟人类成纤维细胞中老化特征的出现(Rattan和Clark，1994，Biochem.Biophys.Res.Comm.，201(2)665-672)。这可能与PARP在控制端粒功能中所起的作用有关(d′Adda diFagagna等人，1999，Nature Gen.，23(1)76-80)。
US 5,874,444公开了一系列PARP抑制剂，其中的一个是1(2H)-2，3-二氮杂萘酮(100) 本发明人现已发现，某些1(2H)-2，3-二氮杂萘酮及相关化合物的衍生物能够抑制PARP的活性。
因此，本发明的第一方面提供了下式化合物及其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药在制备用于抑制PARP活性的药物中的用途 其中A和B合在一起表示取代或未取代的稠合的芳香族环；Rc用-L-RL表示，其中L是式-(CH2)n1-Qn2-(CH2)n3-其中n1、n2和n3分别选自0、1、2和3，n1、n2和n3的总和是1、2或3，Q选自O、S、NH、C(＝O)或-CR1R2-，其中R1和R2彼此独立地选自氢、卤素或取代或未取代的C1-7烷基，或者与它们所连接的碳原子合在一起形成C3-7环状烃基，所述的C3-7环状烃基可以是饱和的(C3-7环烷基)或不饱和的(C3-7环烯基)，或者R1和R2之一可以连接到RL中的原子上形成不饱和的C3-7环烯基，该不饱和的C3-7环烯基含有Q中与R1和R2相连的碳原子、-(CH2)n3-(如果存在的话)和RL的一部分；RL是取代或未取代的C5-20芳基；并且RN选自氢、取代或未取代的C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基、羟基、醚、硝基、氨基、酰氨基、巯基、硫醚、亚砜和砜。
本发明的第二方面涉及下式化合物及其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药 其中A和B合在一起表示取代或未取代的稠合的芳香族环；Rc是-CH2-RL；RL是取代或未取代的苯基；且RN是氢。
本发明的第三方面涉及包含本发明第二方面的化合物和可药用载体或稀释剂的药物组合物。
本发明的第四方面涉及本发明第二方面的化合物在治疗人类或动物体的方法中的用途。
本发明的另一个方面提供了本发明第一方面所定义的化合物在制备用于治疗如下疾病的药物中的用途血管疾病、脓毒性休克、局部缺血性损伤、神经毒性、出血性休克、病毒感染或可以通过抑制PARP活性而缓解的疾病。
本发明的另一个方面提供了本发明第一方面所定义的化合物在制备用作癌症治疗附加剂或用于增强电离辐射或化疗剂对肿瘤细胞的治疗效果的药物中的用途。
附图简述
图1至19显示了本发明的化合物。
定义在本文中使用的术语“芳香族环”是指环状的芳香族结构，也就是含有离域π-电子轨道的环状结构。
与主核稠合的芳香族环、也就是由-A-B-形成的芳香族环还可以进一步带有稠合的芳香族环(生成例如萘基或蒽基)。芳香族环可以仅包含碳原子，或者可以包含碳原子以及一个或多个杂原子，包括但不限于氮、氧和硫原子。芳香族环优选含有五或六个环原子。
芳香族环可以是取代的或未取代的。如果取代基本身包含有芳基，则不能将该芳基认为是其所连接的芳基的一部分。例如，在本文中将联苯基认为是用苯基取代的苯基(包含一个芳香族环的芳基)。类似地，将苄基苯基认为是用苄基取代的苯基(包含一个芳香族环的芳基)。
在一组优选的实施方案中，芳香族基团包括含有五或六个环原子的单个芳香族环，所述环原子选自碳、氮、氧和硫，并且该环是取代的或未取代的。这些基团的例子包括苯、吡嗪、吡咯、噻唑、异噁唑和噁唑。2-吡喃酮也可以看作是芳香族环，但是是次优选的。
如果芳香族环含有六个原子，则优选环原子中至少有四个、或者甚至五个或全部均是碳。其它的环原子选自氮、氧和硫，优选氮和氧。适宜的基团包括无杂原子的环(苯)、含有一个氮环原子的环(吡啶)、两个氮环原子的环(吡嗪、嘧啶和哒嗪)、一个氧环原子的环(吡喃酮)以及含有一个氧和一个氮环原子的环(噁嗪)。
如果芳香族环含有五个环原子，则优选环原子中至少有三个是碳。剩余的环原子选自氮、氧和硫。适宜的环包括含有一个氮环原子的环(吡咯)、两个氮环原子的环(咪唑、吡唑)、一个氧环原子的环(呋喃)、一个硫环原子的环(噻吩)、一个氮和一个硫环原子的环(噻唑)以及一个氮和一个氧环原子的环(异噁唑或噁唑)。
芳香族环可以在环上任何适当的位置含有一个或多个取代基。这些取代基选自卤素、硝基、羟基、醚、巯基、硫醚、氨基、C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基。芳香族环还可以含有一个或多个可以合在一起形成环的取代基。特别是，这些取代基可以是式-(CH2)m-或-O-(CH2)p-O-，其中m是2、3、4或5且p是1、2或3。
C1-7烷基本文中所用的术语“C1-7烷基”是指从含有1至7个碳原子的C1-7烃化合物中除去一个氢原子所得到的一价基团，所述的烃化合物可以是脂肪族或脂环族的或是其组合形式，并且可以是饱和的、部分饱和的或完全饱和的。
(未取代的)饱和的直链C1-7烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基和正戊基(戊基)。
(未取代的)饱和的支链C1-7烷基的例子包括但不限于异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基和新戊基。
饱和的脂环族的(碳环的)C1-7烷基(也称作“C3-7环烷基”)的例子包括但不限于未取代的基团诸如环丙基、环丁基、环戊基和环己基以及取代的基团(例如包含该基团的基团)诸如甲基环丙基、二甲基环丙基、甲基环丁基、二甲基环丁基、甲基环戊基、二甲基环戊基、甲基环己基、二甲基环己基、环丙基甲基和环己基甲基。
含有一个或多个碳碳双键的(未取代的)不饱和C1-7烷基(也称作“C2-7链烯基”)的例子包括但不限于乙烯基(-CH＝CH2)、2-丙烯基(烯丙基，-CH2-CH＝CH2)、异丙烯基(-C(CH3)＝CH2)、丁烯基、戊烯基和己烯基。
含有一个或多个碳碳三键的(未取代的)不饱和C1-7烷基(也称作“C2-7炔基”)的例子包括但不限于乙炔基和2-丙炔基(炔丙基)。
含有一个或多个碳碳双键的不饱和脂环族的(碳环的)C1-7烷基(也称作“C3-7环烯基”)的例子包括但不限于未取代的基团诸如环丙烯基、环丁烯基，环戊烯基和环己烯基以及取代的基团(例如包含该基团的基团)诸如环丙烯基甲基和环己烯基甲基。
C3-20杂环基本文中所用的术语“C3-20杂环基”是指从非芳香族的C3-20杂环化合物的环原子上除去一个氢原子所得到的一价基团，所述的化合物含有一个环或两个或多个环(例如螺环、稠环、桥接的环)并含有3至20个中有1至10个是环杂原子的环原子，其中所述的环中至少有一个是杂环。优选所有的环都含有3至7个其中有1至4个是环杂原子的环原子。“C3-20”是指环原子，无论是碳原子还是杂原子。
含有一个氮环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、氮杂环丁烯、吡咯烷、吡咯啉、哌啶、二氢吡啶、四氢吡啶和二氢吡咯(吡咯啉)的基团。
含有一个氧环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、氧杂环戊烷(四氢呋喃)、氧杂环戊烯(二氢呋喃)、氧杂环己烷(四氢吡喃)、二氢吡喃和吡喃的基团。取代的C3-20杂环基的例子包括环状的糖例如呋喃糖和吡喃糖，包括例如核糖、来苏糖、木糖、半乳糖、蔗糖、果糖和阿糖。
含有一个硫环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自硫杂环戊烷(四氢噻吩)和四氢噻喃的基团。
含有两个氧环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自二噁烷例如1，3-二噁烷和1，4-二噁烷的基团。
含有两个氮环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自二氮杂环戊烷(吡唑烷)、吡唑啉、咪唑烷、咪唑啉和哌嗪的基团。
含有一个氮环原子和一个氧环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自四氢噁唑、二氢噁唑、四氢异噁唑、二氢异噁唑、吗啉、四氢噁嗪、二氢噁嗪和噁嗪的基团。
含有一个氧环原子和一个硫环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自氧硫杂环戊烷和氧硫杂环己烷的基团。
含有一个氮环原子和一个硫环原子的C3-20杂环基的例子包括但不限于那些衍生自噻唑啉、噻唑烷和硫代吗啉的基团。
其它的C3-20杂环基的例子包括但不限于噁二嗪。
如果C3-20杂环基被取代，则取代基在碳或氮原子(如果存在的话)上。
C5-20芳基本文中所用的术语“C5-20芳基”是指从C5-20芳香族化合物的芳香族环原子上除去一个氢原子所得到的一价基团，所述化合物含有一个环或两个或多个环(例如稠环)并含有5至20个环原子，其中所述的环中至少有一个是芳香族环。优选所有的环均含有5至7个环原子。
环原子可以均为碳原子，如同“碳环芳基”那样，在该情况下，该基团可以简称为“C5-20碳环芳基”。
不含有环杂原子的C5-20芳基(也就是C5-20碳环芳基)的例子包括但不限于那些衍生自苯(即苯基)(C6)、萘(C10)、蒽(C14)、菲(C14)和芘(C16)的基团。
另外，环原子也可以包括一个或多个杂原子，包括但不限于氧、氮和硫，如同“杂芳基”那样。在这种情况下，基团可以简称为“C5-20杂芳基”，其中“C5-20”是指无论是碳原子还是杂原子的环原子。优选所有的环均含有5至7个其中有0至4个是环杂原子的环原子。
C5-20杂芳基的例子包括但不限于衍生自呋喃、噻吩、吡咯、咪唑(1，3-二唑)、吡唑(1，2-二唑)、三唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、噁二唑和噁三唑的C5杂芳基以及衍生自异噁嗪、吡啶(氮杂苯、哒嗪(1，2-二嗪)、嘧啶(1，3-二嗪；例如胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、吡嗪(1，4-二嗪)、三嗪、四唑和噁二唑(呋咱)的C6杂芳基。
杂芳基可以通过碳或杂环原子结合。
包含稠合环的C5-20杂芳基的例子包括但不限于衍生自苯并呋喃、异苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、异吲哚的C9杂芳基；衍生自喹啉、异喹啉、苯并二嗪、吡啶并吡啶的C10杂芳基；衍生自吖啶和氧杂蒽的C14杂芳基。
上述的C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基，无论是其本身还是作为其它取代基的一部分，它们均可以是未取代的或被一个或多个选自它们自己的取代基以及如下列出的另外的取代基所取代卤素-F、-Cl、-Br和-I。羟基-OH。醚-OR，其中R是醚取代基例如C1-7烷基(也称作C1-7烷氧基)、C3-20杂环基(也称作C3-20杂环氧基)或C5-20芳基(也称作C5-20芳氧基)，优选C1-7烷基。硝基-NO2。氰基(腈、甲腈)-CN。酰基(酮)-C(＝O)R，其中R是酰基取代基例如C1-7烷基(也称作C1-7烷基酰基或C1-7烷酰基)、C3-20杂环基(也称作C3-20杂环基酰基)或C5-20芳基(也称作C5-20芳基酰基)，优选C1-7烷基。酰基的例子包括但不限于-C(＝O)CH3(乙酰基)、-C(＝O)CH2CH3(丙酰基)、-C(＝O)C(CH3)3(丁酰基)和-C(＝O)Ph(苯甲酰基，苯酮)。羧基(羧酸)-COOH。酯(羧酸酯、氧基羰基)-C(＝O)OR，其中R是酯取代基例如C1-7烷基、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选C1-7烷基。酯基的例子包括但不限于-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OCH2CH3、-C(＝O)OC(CH3)3和-C(＝O)OPh。酰氨基(氨基甲酰基、氨基羰基、甲酰胺)-C(＝O)NR1R2，其中R1和R2彼此独立地是关于氨基所定义的氨基取代基。酰氨基的例子包括但不限于-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)NHCH2CH3和-C(＝O)N(CH2CH3)2以及其中的R1和R2与它们所连接的氮原子合在一起形成杂环结构的酰氨基，例如1-哌啶基羰基、4-吗啉羰基、4-硫代吗啉基羰基和1-哌嗪基羰基。氨基-NR1R2，其中R1和R2彼此独立地是氨基取代基例如氢、C1-7烷基(也称作C1-7烷基氨基或二-C1-7烷基氨基)、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选H或C1-7烷基，或者在“环状”氨基的情况下，R1和R2与它们所连接的氮原子合在一起形成含有4至8个环原子的杂环。氨基的例子包括但不限于-NH2、-NHCH3、-NHCH(CH3)2、-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2和-NHPh。环状氨基的例子包括但不限于1-氮杂环丙基、1-氮杂环丁基、1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、1-全氢二氮杂环庚三烯基、4-吗啉基和4-硫代吗啉基。环状氨基可以在其环上被本文所定义的任何一个取代基例如羧基、羧酸酯和酰氨基所取代。氨基的一个特殊形式是R1和R2中的一个是砜(S(＝O)2R)的氨基，其中R是砜取代基，并且该基团可以称为磺酰氨基。磺酰氨基的例子包括但不限于-NHS(＝O)2CH3、-NHS(＝O)2Ph和-NHS(＝O)2C6H4F。酰基氨基-NR1C(＝O)R2，其中R1是酰胺取代基例如氢、C1-7烷基、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选H或C1-7烷基，最优选H；R2是酰基取代基，例如C1-7烷基、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选C1-7烷基。酰基酰胺基团的例子包括但不限于-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CH2CH3和-NHC(＝O)Ph。酰基氨基的一种特殊形式是其中的R2是氨基(-NR3R4)的酰基氨基，其中R3和R4彼此独立地是氨基取代基，该基团可以称为脲基。脲基的例子包括但不限于-NHC(＝O)NHCH3、-NHC(＝O)NHCH2CH3和-NHC(＝O)NHPh。酰氧基(反的酯)-OC(＝O)R，其中R是酰氧基取代基，例如C1-7烷基、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选C1-7烷基。酰氧基的例子包括但不限于-OC(＝O)CH3(乙酰氧基)、-OC(＝O)CH2CH3、-OC(＝O)C(CH3)3、-OC(＝O)Ph、-OC(＝O)C6H4F和-OC(＝O)CH2Ph。巯基-SH。硫醚(硫化物)-SR，其中R是硫醚取代基，例如C1-7烷基(也称作C1-7烷硫基)、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选C1-7烷基。C1-7烷硫基的例子包括但不限于-SCH3和-SCH2CH3。亚砜(亚磺酰基)-S(＝O)R，其中R是亚砜取代基例如C1-7烷基、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选C1-7烷基。亚砜基的例子包括但不限于-S(＝O)CH3和-S(＝O)CH2CH3。砜(磺酰基)-S(＝O)2R，其中R是砜取代基例如C1-7烷基、C3-20杂环基或C5-20芳基，优选C1-7烷基。砜基的例子包括但不限于-S(＝O)2CH3(甲磺酰基)、-S(＝O)2CF3、-S(＝O)2CH2CH3和4-甲基苯磺酰基(甲苯磺酰基)。
如上所述，形成上面所列出的取代基的基团例如C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基本身也可以被取代。因此，上述定义包括取代的取代基。
形成环的取代基构成RC一部分的环上的取代基和稠合的芳香族环(用-A-B-表示)上的取代基可以合在一起形成环内连接，由此在化合物中形成另一个环状结构。
位于芳香族环上的形成环内连接的取代基优选在与中心部分相邻的原子上(也就是在α位置)。
位于Rc上的形成环内连接的取代基优选在与结合到中心部分的原子相隔一个原子的原子上。
两个环之间的连接可以是单键，或者是下式-(CH2)n1′-Q′n2′-(CH2)n3′-，其中n1′、n2′和n3′均选自0、1、2和3，n1′、n2′和n3′的总和小于或等于3。Q′可以是O、S、NH或C(＝O)。
进一步优选的含义如下优选的含义可以应用于本发明适用的每一个方面。
在本发明中，-A-B-所表示的稠合的芳香族环优选仅由碳环原子组成，因此，它可以是苯、萘，更优选苯。如上所述，这些环可以是取代的，但是在某些实施方案中优选是未取代的。
RN优选选自氢和酰氨基。在一个实施方案中，RN优选为其中的一个酰氨基取代基是未取代的或被氟取代的(优选在对位取代的)苯基的酰氨基。在另一个实施方案中，RN优选为H。
在L中，优选所有的Q(如果n2大于1)均选自O、S、NH或C(＝O)。
L优选为式-(CH2)n1-Qn2-，其中n1选自0、1、2和3且n2选自0和1(其中n1和n2的总和是1、2或3)，更优选n2是0。n1优选为1或2，更优选1。 L的最优选为-CH2-。
如果L中的Q是-CR1R2-，则n2优选为1。在一个实施方案中，R1是取代或未取代的C1-7烷基且R2是氢。更优选R1是取代或未取代的C1-4烷基，最优选未取代的C1-4烷基。在另一个实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳原子合在一起形成饱和的C3-7环烷基、更优选C5-7环烷基。在另一个实施方案中，R1连接到RL中的原子上形成不饱和的C3-7环烯基、更优选C5-7环烯基，所述环烯基包含与R1和R2连接的Q中的碳原子、-(CH2)n3-(如果存在的话)和RL的一部分并且R2是氢。
RL优选为苯环、萘、吡啶或1，3-苯并间二氧杂环戊烯，更优选苯环。
当RL是苯环时，优选它是取代的。一个或多个取代基可以选自C1-7烷基、更优选甲基、CF3；C5-20芳基；C3-20杂环基；卤素、更优选氟；羟基；醚，更优选甲氧基、苯氧基、苄氧基和环戊氧基；硝基；氰基；羰基，诸如羧基、酯和酰氨基；氨基(包括磺酰氨基)，更优选-NH2、-NHPh和环氨基诸如4-吗啉；酰基氨基，包括脲基，其中酰基或氨基取代基优选是苯基，所述的苯基本身可以是未取代的或被氟取代的；酰氧基；巯基；硫醚；亚砜；砜。
在一组实施方案中，特别优选的取代基是氟以及含有苯基或者氟代苯基部分的取代基。
当RL是苯基时，苯环的优选取代基包括(i)酰基氨基，其中的酰胺取代基选自C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基，更优选C1-7烷基和C5-20芳基，这些基团可以任选地被进一步取代。这些任选存在的取代基可以选自以上所列的任一种，但特别优选C1-7烷基和C5-20芳基、卤素、醚、硫醚和砜；(ii)脲基，其中的一个胺取代基优选是氢，另一个选自C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基，更优选C1-7烷基和C5-20芳基，这些基团可以任选地被进一步取代。这些任选存在的取代基可以选自以上所列的任一种，但特别优选C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基、卤素和醚；(iii)磺酰氨基，其中胺取代基优选是氢并且砜取代基选自C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基，更优选C1-7烷基和C5-20芳基，这些基团可以任选地被进一步取代。这些任选存在的取代基可以选自以上所列的任一种，但特别优选C5-20芳基和酰基氨基；(iv)酰氧基，其中酰氧基取代基选自C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基，更优选C1-7烷基和C5-20芳基，这些基团可以任选地被进一步取代。这些任选存在的取代基可以选自以上所列的任一种，但特别优选C1-7烷基和C5-20芳基、卤素、醚、硫醚、砜和硝基。
如果A和B合在一起表示取代的稠合芳香族环，则优选该取代基不会与构成RC一部分的环上的取代基形成环内连接。特别优选5位的取代基。
在适当的时候，上述优选的含义可以相互组合。
包括的其它形式这些取代基的公知的离子、盐、溶剂化物和保护的形式也包括在内。例如，所指的羧酸(-COOH)也包括阴离子(羧酸盐)的形式(-COO-)、盐或其溶剂化物以及常规的保护形式。类似地，所指的氨基包括氨基的质子化的形式(-N+HR1R2)、盐或其溶剂化物例如盐酸盐的形式以及氨基的常规保护形式。类似地，所指的羟基也包括羟基的阴离子形式(-O-)、盐或其溶剂化物的形式以及常规的保护形式。
异构体、盐、溶剂化物、保护的形式和前药某些化合物可以以一种或多种特殊的几何学、光学、对映体、非对映体、差向异构体、立体异构体、互变异构体、构象或端基异构形式存在，包括但不限于顺式-和反式-形式；E-和Z-形式；c-、t-和r-形式；内型和外型形式；R、S-和内消旋型形式；D-和L-形式；d-和l-形式；(+)和(-)形式、酮、烯醇和烯醇化物形式；顺式和反式形式；顺错和反错形式、α-和β-形式；轴向和平伏形式；船式、椅式、扭型、信封型和半椅式形式及其组合，在下文中都称作“异构体”(或者“异构体形式”)。
如果化合物是结晶形式，它可以以多种不同的多晶型存在。
应该注意，除了以下所述的互变异构体形式外，本文中所用的术语“异构体”不包括结构性(或组成)异构体(也就是原子之间的连接不同而不仅仅是原子的空间位置不同的异构体)。例如，所指的甲氧基-OCH3不能解释成是指其结构性异构体羟基甲基-CH2OH。类似地，所指的邻氯苯基不能解释成其结构性异构体间氯苯基。但是，所指的一类结构则可以包括在该类型内的结构性异构体形式(例如C1-7烷基包括正丙基和异丙基；丁基包括正-、异-、仲-和叔丁基；甲氧基苯基包括邻-、间-和对-甲氧基苯基)。
以上的排除不涉及互变异构体形式，例如酮、烯醇和烯醇化物形式，例如下面的互变异构体对酮/烯醇、亚胺/烯胺、酰胺/亚氨基醇、脒/脒、亚硝基/肟、硫酮/烯硫醇、N-亚硝基/羟基偶氮基和硝基/酸式硝基。
与本发明特别相关的是RN为H时所存在的互变异构体对，如下所示 应该注意，具体包括在术语“异构体”内的是具有一个或多个同位素取代的化合物。例如，H可以是任何的同位素形式，包括1H、2H(D)和3H(T)；C可以是任何的同位素形式，包括12C、13C和14C；O可以是任何的同位素形式，其包括16O和18O等。
除非另有说明，所指的特定化合物包括所有这样的异构体形式，包括(全部或部分地)外消旋形式及其其它的混合物。所述异构体形式的制备(例如非对称合成)和分离(例如分级结晶和色谱方法)方法是本领域公知的，或者很容易按照公知方式通过对本文所教导的方法或已知方法进行适应性修改而得到。
除非另有说明，所指的特定化合物也包括例如其离子、盐、溶剂化物和保护形式以及其不同的多晶型，如下所述。
可以方便地或者需要制备、纯化和/或处理活性化合物的相应的盐例如可药用盐。可药用盐的例子记载于Berge等人，1977，“可药用盐”，J.Pharm.Sci.，66卷，1-19页。
例如，如果化合物是阴离子型的，或者含有可以形成阴离子的官能团(例如-COOH可以形成-COO-)，则可以用适当的阳离子形成盐。适当的无机阳离子的例子包括但不限于碱金属离子诸如Na+和K+、碱土金属阳离子诸如Ca2+和Mg2+和其它的阳离子诸如Al3+。适当的有机阳离子的例子包括但不限于铵离子(即NH4+)和取代的铵离子(例如NH3R+、NH2R2+、NHR3+、NR4+)。一些适当的取代的铵离子的例子是衍生自如下物质的铵离子乙胺、二乙胺、二环己基胺、三乙胺、丁基胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苄基胺、苯基苄基胺、胆碱、葡甲胺和氨丁三醇以及氨基酸诸如赖氨酸和精氨酸。常用的季铵离子的例子是N(CH3)4+。
如果化合物是阳离子型的，或者含有可以形成阳离子的官能团(例如-NH2可以形成-NH3+)，则可以用适当的阴离子形成盐。适当的无机阴离子的例子包括但不限于衍生自如下无机酸的阴离子盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、亚硫酸、硝酸、亚硝酸、磷酸和亚磷酸。适当的有机阴离子包括但不限于衍生自如下有机酸的阴离子乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、棕榈酸、乳酸、苹果酸、扑酸、酒石酸、柠檬酸、葡糖酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、天门冬氨酸、苯甲酸、肉桂酸、丙酮酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸、戊酸和葡糖酸。适当的高分子阴离子的例子包括但不限于衍生自如下高分子酸的阴离子鞣酸、羧甲基纤维素。
可以方便地或者需要制备、纯化和/或处理活性化合物的相应的溶剂化物。本文中所用的术语“溶剂化物”在常规意义上是指溶质(例如活性化合物、活性化合物的盐)和溶剂的复合物。如果溶剂是水，则溶剂化物通常被称作水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。
可以方便地或者需要制备、纯化和/或处理化学保护形式的活性化合物。本文中所用的术语“化学保护的形式”是指其中的一个或多个反应性官能团被保护以防止发生不需要的化学反应、也就是被保护或保护基(也称作被掩蔽的或掩蔽基团或被封闭的或封闭基团)形式的化合物。通过保护反应性官能团可以进行涉及其它未保护的反应性官能团的反应而不会影响被保护的基团；保护基通常在随后的步骤中除去，而基本上不会影响分子的剩余部分。例如，参见Protective Groups in Organic Synthesis(T.Green和P.Wuts，Wiley，1991)。
例如，羟基可以以醚(-OR)或酯(-OC(＝O)R)例如叔丁基醚；苄基、二苯甲基(二苯基甲基)或三苯甲基(三苯基甲基)醚；三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基醚或乙酰基酯(-OC(＝O)CH3，-OAc)的形式进行保护。
例如，醛基或酮基可以分别以缩醛或缩酮的形式进行保护，其中通过与例如伯醇反应将羰基(＞C＝O)转化成二醚(＞C(OR)2)。通过在酸存在下用大大过量的水水解可以很容易地再生醛基和酮基。
例如，胺基团可以以例如酰胺或氨基甲酸乙酯的形式进行保护，例如以甲基酰胺(-NHCO-CH3)、苄氧基酰胺(-NHCO-OCH2C6H5、-NH-Cbz)、叔丁氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)3、-NH-Boc)、2-联苯基-2-丙氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5，-NH-Bpoc)、9-芴基甲氧基酰胺(-NH-Fmoc)、6-硝基藜芦基氧基酰胺(-NH-Nvoc)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基酰胺(-NH-Teoc)、2，2，2-三氯乙氧基酰胺(-NH-Troc)、烯丙氧基酰胺(-NH-Alloc)、(2-苯基磺酰基)乙氧基酰胺(-NH-Psec)或适当情况下的N-氧化物(＞NO·)的形式进行保护。
例如，羧酸基团可以以酯例如C1-7烷基酯(例如甲酯、叔丁酯)、C1-7卤代烷基酯(例如C1-7三卤代烷基酯)、三C1-7烷基甲硅烷基-C1-7烷基酯或C5-20芳基-C1-7烷基酯(例如苄酯、硝基苄酯)或酰胺例如甲基酰胺的形式进行保护。
例如，巯基基团可以以硫醚(-SR)例如苄基硫醚；乙酰氨基甲基醚(-S-CH2NHC(＝O)CH3)的形式进行保护。
可以方便地或者需要制备、纯化和/或处理前药形式的活性化合物。本文中所用的术语“前药”是指当进行代谢(例如在体内)时能生成所需的活性化合物的化合物。前药通常是无活性的，或者其活性小于活性化合物，但却具有有利的操作、给药或代谢特性。
例如，某些前药是活性化合物的酯(例如生理上可接受的代谢不稳定的酯)。在代谢过程中，酯基(-C(＝O)OR)裂解生成活性药物。所述的酯可以通过例如将母体化合物中的任何一个羧酸基团(-C(＝O)OH)的进行酯化而形成，如需要，可先将母体化合物中存在的任何其它反应性基团进行保护然后再根据需要脱保护。所述代谢不稳定的酯的例子包括其中的R是C1-7烷基(例如-Me、-Et)；C1-7氨基烷基(例如氨基乙基、2-(N，N-二乙基氨基)乙基、2-(4-吗啉基)乙基)和酰氧基-C1-7烷基(例如酰氧基甲基、酰氧基乙基，例如新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基、1-乙酰氧基乙基、1-(1-甲氧基-1-甲基)乙基羰基氧基乙基、1-(苯甲酰氧基)乙基、异丙氧羰基氧基甲基、1-异丙氧基-羰基氧基乙基、环己基-羰基氧基甲基、1-环己基-羰基氧基乙基、环己基氧基-羰基氧基甲基、1-环己基氧基羰基氧基乙基、(4-四氢吡喃基氧基)羰基氧基甲基、1-(4-四氢吡喃基氧基)羰基氧基乙基、(4-四氢吡喃基)羰基氧基甲基和1-(4-四氢吡喃基)羰基氧基乙基)的酯类。
其它适宜的前药形式包括膦酸酯和羟乙酸酯。具体地讲，可以通过与氯代二苄基亚磷酸酯反应，然后氢化形成膦酸酯基团-O-P(＝O)(OH)2将羟基(-OH)制成膦酸酯前药。该基团在代谢过程中可以通过磷酸酯酶清除以生成含有羟基的活性药物。
另外，一些前药可通过酶催化活化生成活性化合物，或是生成可通过进一步的化学反应产生活性化合物的化合物。例如，前药可以是糖衍生物或其它的糖苷结合物，或者可以是氨基酸酯衍生物。
首字母缩拼词为了方便，许多化学基团用公知的缩写词表示，包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、正丙基(nPr)、异丙基(iPr)、正丁基(nBu)、叔丁基(tBu)、正己基(nHex)、环己基(cHex)、苯基(Ph)、联苯基(biPh)、苄基(Bn)、萘基(naph)、甲氧基(MeO)、乙氧基(EtO)、苯甲酰基(Bz)和乙酰基(Ac)。
为了方便，许多化合物用公知的缩写词表示，包括但不限于甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、异丙醇(i-PrOH)、甲乙酮(MEK)、乙醚(Et2O)、乙酸(AcOH)、二氯甲烷(DCM)、三氟乙酸(TFA)、二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)和二甲基亚砜(DMSO)。
合成本发明的化合物可以通过许多方法合成，所述方法的例子如下。一些合成路线示于Yamaguchi等人，J.Med.Chem.1993，36，4502-4068中，在本文中将该文献引入作为参考。
通常，在这些化合物的合成过程中，关键步骤是肼的加成/插入，由此在中心部分提供相邻的氮环原子。所述的肼的加成具体是通过如下所列路线中的环插入步骤完成的。
形成的芳香族环(用-A-B-表示)通常是在如下所示路线之前衍生化，并且具有所需结构和取代基模式的原料要么是可购买的，要么是容易合成的。
路线2列举了其中的芳香族环在合成路线开始时已经被取代的策略。
所示路线可以生成其中RN是H的化合物。在该位置上的可能的取代基可以用适宜的亲电试剂在适当的反应条件下引入。
可以用各种常规的方法将RC上的基团进一步衍生化，其中的一些表示在“进一步衍生化的步骤”中。路线1第一部分2-芳基二氢化茚-1，3-二酮的合成 向2-苯并[c]呋喃酮或其等同物(13.41g；0.1mol)和芳香族醛(0.1mol)在甲醇(50ml)和丙酸乙酯(50ml)的混合物中的冰冷溶液中加入甲醇钠的甲醇溶液[钠(9.20g；0.4mol)的甲醇(50ml)溶液]并将温度保持在10℃以下。然后将溶液温和地加热回流3小时，冷却至室温并倒入水(500ml)中。将混合物用乙醚洗涤(5×100ml)，将水层用乙酸酸化并滤出固体。然后将其直接用于下一步骤。第二部分2-芳基二氢化茚-1，3-酮与水合肼的反应 将2-芳基二氢化茚-1，3-二酮(20mmol)的肼一水合物(40ml)悬浮液加热回流4小时，冷却并滤出产物。将固体用乙醇洗涤。路线2 在室温下将新戊酰氯(120g，1mol)滴加到搅拌中的2-甲氧基苯胺(123g，1mol)和三乙胺(111g，1.1mol)的1，4-二氧六环(1200ml)溶液中，将混合物室温搅拌2小时，然后将其倒入水(3000ml)中。将产物用乙酸乙酯萃取(3×300ml)，然后将合并的萃取液干燥(MgSO4)并真空除去溶剂得到低熔点的固体状N-(2-甲氧基苯基)新戊酰胺(198g；96％)，其不经进一步的纯化即可使用。
在氮气氛下，将正丁基锂(1.6M的己烷溶液；200ml，0.32mol)于-10℃下滴加到搅拌中的N-(2-甲氧基苯基)新戊酰胺(27.6g，0.133mol)的四氢呋喃(600ml)溶液中，将混合物升温至室温并继续搅拌2小时，然后将其加入到大大过量的压碎的固态二氧化碳中。将混合物升温至室温，然后加入3M盐酸(200ml)并真空蒸除四氢呋喃。过滤收集生成的固体并用乙腈结晶得到固体状3-甲氧基-2-新戊酰氨基苯甲酸(21g；63％)，熔点117-120℃。浓缩溶液得到第二批产物(2.6g；8％)。
将搅拌中的3-甲氧基-2-新戊酰氨基苯甲酸(20g，0.08mol)和7M盐酸(280ml)的混合物回流加热2小时，然后冷却至0℃。在＜5℃下滴加亚硝酸钠(5.8g，0.09mol)的水溶液(46ml)并将混合物在0-5℃搅拌2小时，然后在0-5℃滴加碘化钾(17.8g，0.11mol)的水溶液(39ml)。将搅拌中的混合物在70-80℃加热2小时，然后在冰中冷却。将产物用乙酸乙酯萃取(3×300ml)，将合并的萃取液用20％硫代硫酸钠水溶液洗涤(3×300ml)，然后将其干燥(MgSO4)并真空除去溶剂得到固体状2-碘-3-甲氧基苯甲酸(13g，58％)，熔点142-146C。
将搅拌中的2-碘-3-甲氧基苯甲酸(20g，0.07mol；按照与上述方法相类似的方式制备)、甲醇(300ml)和浓硫酸(3.5ml)的混合物回流加热8小时，然后冷却至室温并将其加入到水(1500ml)中。将产物用二氯甲烷萃取(3×500ml)，将合并的萃取液用5％氢氧化钠水溶液洗涤(3×500ml)，然后将其干燥(MgSO4)并真空蒸除溶剂得到固体状2-碘-3-甲氧基苯甲酸甲酯(18.5g，90％)，熔点58-61℃。
在氮气氛下，将适当取代的苯乙炔(0.063mol)在室温下加入到搅拌中的碘化亚铜(I)(0.1g，6.3mmol)、二(三苯基膦)氯化钯(II)(0.43g，6.3mmol)和2-碘3-甲氧基苯甲酸甲酯(18.5g，0.063mol)的三乙胺(375ml)溶液中，将混合物室温搅拌72小时，然后将其加入到5M盐酸(1000ml)中。将产物用乙酸乙酯萃取(3×400ml)，将合并的萃取液干燥(MgSO4)并真空蒸除溶剂得到不经纯化即可使用的3-甲氧基-2-(取代的苯基乙炔基)苯甲酸甲酯。
将粗品3-甲氧基-2-(取代的苯基乙炔基)苯甲酸甲酯和30％氢氧化钠水溶液(302ml)的混合物搅拌并回流加热4小时，冷却至室温并加入浓硫酸进行酸化。将产物用乙醚萃取(3×500ml)，将合并的萃取液用10％碳酸钠水溶液(2000ml)洗涤，然后将其干燥(MgSO4)并真空蒸除溶剂得到不经纯化即可使用的4-甲氧基-3-(取代的亚苄基)-2-苯并[c]呋喃酮。
将粗品4-甲氧基-3-(取代的亚苄基)-2-苯并[c]呋喃酮(14g)和水合肼(83ml)的混合物回流加热5小时，然后冷却至室温。过滤收集生成的固体，用乙醇充分洗涤然后真空干燥得到所需的化合物。
原料中芳香族环的取代情况可以根据情况进行改变。路线3 在氮气氛下，将亚磷酸二甲酯(11g，0.1mol)和2-甲酰基苯甲酸(10.51g，0.07mol)或其等同物于0℃下依次滴加到搅拌中的甲醇钠溶液[用钠(2.3g)在甲醇(80ml)中制备]中，将混合物室温搅拌30分钟，然后通过加入甲磺酸(10.6g，0.11mol)终止反应。真空蒸除甲醇，将残余物在二氯甲烷(200ml)和水(50ml)之间进行分配，然后将二氯甲烷溶液用水洗涤(2×50ml)并干燥(MgSO4)。真空蒸除溶剂得到二甲基3-氧代苯并[c]呋喃-1-基磷酸酯或其等同物。
在氮气氛下，将六甲基二硅氮烷基锂(1M的己烷溶液；33ml，0.033mol)于-78℃下滴加到搅拌中的二甲基3-氧代苯并[c]呋喃-1-基磷酸酯(8g，0.033mol)或其等同物的四氢呋喃(300ml)溶液中，然后将混合物在-78℃下搅拌1小时。加入适当的芳基烷基酮(0.03mol)，将混合物在-78℃搅拌1小时并升温至0℃，然后通过加入过量的饱和氯化铵水溶液终止反应。将水相分离并与二氯甲烷(100ml)一起振摇，然后将合并的有机溶液干燥(MgSO4)并真空蒸除溶剂。将残余物与己烷(50ml)一起研磨，过滤收集生成的固体并晾干得到不经纯化即可使用的3-(α-烷基亚芳基)-2-苯并[c]呋喃酮或其等同物。
将3-(α-烷基亚芳基)-2-苯并[c]呋喃酮(0.019mol)或其等同物和水合肼(20ml)的混合物加热回流18小时，然后冷却至0℃。过滤收集生成的固体，用乙醇充分洗涤并晾干得到所需化合物。进一步衍生化(a)4-(甲氧基苄基)-1(2H)-2，3-二氮杂萘酮的脱甲基化 在氮气氛下，向甲氧基苄基-2，3-二氮杂萘酮或其等同物(0.7g；2.65mmol)的二氯甲烷(5ml)悬浮液中于室温下加入三溴化硼的二氯甲烷溶液(1M；6ml；6.0mmol)。将混合物加热回流24小时，冷却并倒入氢氧化钠(10％；25ml)中。除去有机层，将水层酸化(HCl)并滤出固体。(b)4-(氨基苄基)-1(2H)-2，3-二氮杂萘酮的衍生化 向搅拌中的氨基苄基-2，3-二氮杂萘酮或其等同物(0.6g；2.4mmol)和三乙胺(0.24g；2.4mmol)的1，4-二氧六环(50ml)溶液中滴加亲电试剂(2.4mmol)。然后将混合物加热回流2小时，冷却并倒入水(100ml)中。然后滤出固体并用水和乙醇洗涤，然后真空干燥。(c)羟基苄基-2，3-二氮杂萘酮的酰化酰化通常在适当的条件下，通过向羟基苄基-2，3-二氮杂萘酮中加入适当的酰氯来完成。下面给出了这样的例子(i) 向搅拌中的羟基苄基-2，3-二氮杂萘酮或其等同物(例如164)(0.7g；2.79mmol)和三乙胺(0.28g；2.79mmol)的1，4-二氧六环(40ml)溶液中滴加乙酰氯(0.2ml；2.79mmol)。然后将混合物加热回流2小时，冷却并倒入水(100ml)中。然后0滤出固体并用水和乙醇洗涤，然后真空干燥。(ii) 将搅拌中的羟基苄基-2，3-二氮杂萘酮(1.36g；5.41mmol)、三乙胺(0.61g；6.00mmol)和4-氟苯甲酰氯(0.86g；5.41mmol)的干燥1，4-二氧六环(50ml)悬浮液加热回流并除去水分(CaCl2)2小时，然后冷却至室温。然后将反应混合物倒入水(250ml)中并滤出固体。然后将粗品固体在环己烷(10ml)中煮沸并滤出。(iii) 将搅拌中的羟基苄基-2，3-二氮杂萘酮(0.70g；2.79mmol)或其等同物、三乙胺(0.4ml；2.79mmol)和乙酰氯(0.2ml；2.79mmol)的干燥1，4-二氧六环(40ml)悬浮液加热回流并除去水分(CaCl2)2小时，然后冷却至室温。然后将反应混合物倒入水(250ml)中并滤出固体。(iv) 将适当的酰氯(0.24mmol)加入到搅拌中的4-(3-羟基苄基)-2，3-二氮杂萘-1(2H)-酮(50mg，0.2mmol)或其等同物和三乙胺(33μl)的1，4-二氧六环(0.5ml)溶液中并将混合物室温搅拌，同时利用tlc监测反应的进展。在某些情况下，需要加热回流以促进反应进行完全。一旦反应完成，将混合物用冰水稀释并将产物用乙酸乙酯萃取。将萃取液用饱和氯化钠水溶液洗涤并干燥(MgSO4)，然后真空蒸除溶剂。将残余物纯化得到所需要的酯。纯化通过制备型HPLC在Gilson LC上进行，使用Jones ChromatographyGenesis4μC18柱，用三氟乙酸水溶液和乙腈作为洗脱剂进行梯度洗脱。(d)3-(氨基苄基)-1(2H)-2，3-二氮杂萘酮的衍生化(i) 向搅拌中的氨基苄基-2，3-二氮杂萘酮(160)(1.00g；40mmol)或其等同物的干燥1，4-二氧六环(25ml)溶液中在40℃下加入适当的异氰酸酯(40mmol)。将混合物继续搅拌2小时，冷却至室温并滤出固体。(ii) 向搅拌中的氨基-2，3-二氮杂萘酮(197)(1.00g；2.97mmol)或其等同物的乙腈(25ml)溶液中加入二甘醇酸酐(0.35g；3.00mmol)。将混合物室温搅拌1小时并滤出固体。将粗品固体溶于NaOH(10％；20ml)并通过硅藻土过滤。然后将水溶液酸化并滤出固体。(iii) 将适当的酰氯(0.2mmol)加入到搅拌中的氨基苄基-2，3-二氮杂萘酮160(0.05g，0.2mmol)或其等同物和三乙胺(33μl)的1，4-二氧六环(0.5ml)溶液中并将混合物室温搅拌18小时，然后将其用水(10ml)稀释。过滤收集产物，用水(5ml)洗涤并真空干燥得到所需的酰胺。(iv) 将氨基苄基-2，3-二氮杂萘酮160(0.5g，2mmol)或其等同物和1，4-二氧六环(15ml)的混合物在室温下搅拌直至所有固体溶解(5-15分钟)。加入适当的异氰酸酯(2mmol)并将混合物室温搅拌2小时，然后在室温下放置18小时。过滤收集生成的固体，用水充分洗涤并真空干燥得到所需的脲基产物。(v)(a) 将适当的磺酰氯(1mmol)加入到氨基苄基-2，3-二氮杂萘酮160(0.25g，1mmol)或其等同物的吡啶(10ml)溶液中，将搅拌的混合物加热回流2小时，然后将其用水(200ml)稀释。过滤收集生成的固体，用水充分洗涤并真空干燥得到所需的磺酰氨基产物。(v)(b) 将适当的磺酰氯(1mmol)加入到氨基苄基-2，3-二氮杂萘酮160(0.25g，1mmol)或其等同物和三乙胺(0.1g，1mmol)的1，4-二氧六环(10ml)溶液中并将搅拌的混合物加热回流2小时，然后将其用水(200ml)稀释。过滤收集生成的固体，用水充分洗涤并真空干燥得到所需的磺酰氨基产物。(e)227的合成 向搅拌中的4-氟苯甲酰氯(159)(0.95g；5.97mmol)的干燥1，4-二氧六环(50ml)溶液中加入三乙胺(0.60g；5.97mmol)和氨基苄基-2，3-二氮杂萘酮(1.50g；5.97mmol)或其等同物。将混合物加热回流并除去水分(CaCl2)2小时，然后冷却至室温。然后将反应混合物倒入水(250ml)中并滤出固体。(f)239的合成 氮气氛下，向搅拌中的苄氧基甲氧基苄基-2，3-二氮杂萘酮(187)(5.00g；13.0mmol)的二氯甲烷(11.5ml)溶液中加入三溴化硼的二氯甲烷溶液(1.0M溶液；4.4ml；4.40mmol)。然后将反应混合物加热回流24小时，冷却至室温并倒入冰/水(250ml)中。然后加入固体氢氧化钠将混合物碱化并除去有机层。然后将水层用二氯甲烷(3×50ml)洗涤并用浓HCl酸化。将固体滤出，用水洗涤并晾干。(g)247的合成 将搅拌中的原料甲氧基化合物(241)(1.50g；5.27mmol)在三溴化硼的二氯甲烷溶液(1.0M溶液；12ml；12.00mmol)中的悬浮液在氮气氛下加热回流8小时。然后将反应混合物冷却至室温并倒入冰/水(250ml)中。然后加入固体氢氧化钠将混合物碱化并除去有机层。然后将水层用二氯甲烷(3×50ml)洗涤并用浓HCl酸化。将固体滤出，用水洗涤并晾干。(h)277的合成 将羧酸(276)(8g，0.028mol)的二氯甲烷(240ml)溶液在室温下滴加到搅拌中的二环己基碳二亚胺(5.8g，0.028mol)、4-(二甲基氨基)吡啶(0.2g，0.0014mol)、甲醇(0.92g，0.028mol)和二氯甲烷(40ml)的混合物中，然后将混合物室温搅拌18小时并过滤。将滤饼用二氯甲烷(280ml)洗涤，将滤液和洗涤液合并并真空蒸除溶剂。将残余物用乙醚(1000ml)稀释，通过过滤除去生成的沉淀物，然后将乙醚滤液用饱和碳酸氢钠水溶液(400ml)、1.5M盐酸(400ml)、水(400ml)和饱和氯化钠水溶液(400ml)洗涤。将溶液干燥(MgSO4)并真空蒸除溶剂得到277。(i)278的合成 将羧酸(276)(3g，0.01mol)的二氯甲烷(90ml)溶液在室温下滴加到搅拌中的二环己基碳二亚胺(2.2g，0.01mol)、4-(二甲基氨基)吡啶(0.08g，0.5mmol)、苯胺(0.9g，0.01mol)和二氯甲烷(15ml)的混合物中，然后将混合物室温搅拌18小时并过滤。将滤饼用二氯甲烷(105ml)洗涤，将滤液和洗涤液合并并真空蒸除溶剂。将残余物用乙醚(375ml)稀释，通过过滤除去生成的沉淀物，然后将乙醚滤液用饱和碳酸氢钠水溶液(150ml)、1.5M盐酸(150ml)、水(150ml)和饱和氯化钠水溶液(50ml)洗涤。将溶液干燥(MgSO4)并真空蒸除溶剂得到278。(j)197的衍生化
将3-氯甲基苯甲酰氯(0.56g，3mmol)加入到搅拌中的197(1g，3mmol)和三乙胺(0.4ml)的1，4-二氧六环(50ml)溶液中并将混合物室温搅拌2小时，然后将其用水(100ml)稀释。将产物用乙酸乙酯(3×50ml)萃取，将合并的萃取液干燥(MgSO4)并真空蒸除溶剂。将残余物用热的甲苯(50ml)研磨，将热溶液过滤(硅藻土)，加入环己烷(50ml)并将混合物冷却至室温。过滤收集生成的固体并真空干燥得到固体状3-(氯甲基)-N-[2-(4-吗啉基)-5-(1-氧代-2，3-二氮杂萘-4-基甲基)苯基]苯甲酰胺(1.32g，90％)，熔点117-122℃。
将3-(氯甲基)-N-[2-(4-吗啉基)-5-(1-氧代-2，3-二氮杂萘-4-基甲基)苯基]苯甲酰胺(0.66g，1.35mmol)、适当的胺(27mmol)和1，4-二氧六环(50ml)的混合物加热回流2小时，冷却至室温并用水(100ml)稀释以析出粘性固体。通过倾析除去水层并将残余固体用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。将合并的萃取液用水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，然后真空蒸除溶剂。将残余物用热的甲苯(50ml)研磨，通过倾析将热溶液与不溶物相分离，加入环己烷(50ml)并将混合物冷却至室温。过滤收集生成的固体，用环己烷(30ml)洗涤并真空干燥得到所需的化合物。(k)265的合成 将4-氯丁酰氯(1.26g，8.9mmol)加入到搅拌中的197(3g，8.9mmol)和三乙胺(0.9g，8.9mmol)的1，4-二氧六环(50ml)溶液中，将混合物室温搅拌2小时，然后将其用水(100ml)稀释以析出粘性半固体沉淀。通过倾析除去水相，将残余物用热的乙酸乙酯(100ml)研磨。将热溶液与不溶残余物相分离并真空蒸除溶剂。将残余物用环己烷(50ml)研磨，过滤收集生成的固体并真空干燥得到4-氯-N-[2-(4-吗啉基)-5-(1-氧代2，3-二氮杂萘-4-基甲基)苯基]-丁酰胺。
用途本发明提供了活性化合物，特别是可抑制PARP活性的化合物。
本文中所用的术语“活性”是指能抑制PARP活性的化合物，具体地讲，其包括具有固有活性的化合物(药物)以及该化合物的前药，所述的前药本身没有或只有很弱的固有活性。
在如下实施例中记载了可以方便地用于评价由特定化合物提供的PARP抑制作用的一个试验。
本发明还提供了抑制细胞内PARP活性的方法，该方法包括将所述细胞与有效量的活性化合物(优选以可药物组合物的形式)接触。所述的方法可以在体外或体内进行。
例如，可以使细胞样品在体外生长并将活性化合物与所述细胞接触，然后观察化合物对这些细胞的效果。作为“效果”的例子，可以测定某一时间内完成的DNA修复的量。当发现活性化合物对细胞产生影响时，可将其在对携带有相同细胞类型的患者进行治疗的方法中用作活性化合物的效力的预后或诊断的标志。
在本文中，在治疗病症时所用的术语“治疗”通常是指对人或动物的治疗(例如在兽医应用中)，在治疗中可以达到所需要的治疗效果，例如，抑制病症的进展，包括减缓病症进展的速率、中断病症的进展、缓解病症和治愈病症。也包括诸如预防性措施之类的治疗(即预防)。
本文所用的术语“附加剂”涉及将活性化合物与已知的治疗方法结合使用。所述方法包括用于治疗不同癌症类型的药物的细胞毒方案和/或电离辐射。
还可将活性化合物用作细胞培养物添加剂以抑制PARP，例如，用于在体外使细胞对已知的化疗或电离辐射疗法辐射致敏。
还可将活性化合物用作体外试验的一部分，例如，用于确定候选的宿主是否能够从所述化合物的治疗中受益。
给药可将活性化合物或含有活性化合物的药物组合物以任何常规的途径对个体给药，无论是全身性/外周给药还是在所需的作用位点给药，包括但不限于，口服(例如吞服)；局部给药(包括例如经皮、鼻内、眼部、口腔和舌下)；肺部给药(例如通过吸入或吹入疗法，使用例如气雾剂通过例如口腔或鼻给药)；直肠给药；阴道给药；胃肠外给药，例如通过注射，包括皮下、真皮内、肌肉内、静脉内、动脉内、心内、鞘内、脊髓内、囊内、囊下、眼窝内、腹膜内、气管内、表皮下、关节内、蛛网膜下和胸骨内注射；通过例如皮下或肌肉内植入药物储库进行给药。
所针对个体可以是真核生物、动物、脊椎动物、哺乳动物、啮齿类动物(例如豚鼠、仓鼠、大鼠、小鼠)、鼠科动物(例如小鼠)、犬科动物(例如狗)、猫科动物(例如猫)、马科动物(例如马)、灵长类动物、类人猿(例如猴子或猿)、猴子(例如小猿、狒狒)、猿(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、长臂猿)或人。
制剂虽然可以将活性化合物单独给药，但是优选以药物组合物(例如制剂)的形式给药，所述药物组合物包含至少一种如上所定义的活性化合物和一种或多种可药用载体、辅剂、赋形剂、稀释剂、填充剂、缓冲剂、稳定剂、防腐剂、润滑剂或本领域技术人员公知的其它物质以及任选的其它治疗性或预防性试剂。
因此，本发明还提供了如上所定义的药物组合物以及制备药物组合物的方法，该方法包括将如上所定义的至少一种活性化合物与一种或多种可药用载体、赋形剂、缓冲剂、辅剂、稳定剂或本文中所述的其它物质相混合。
本文中所用的术语“可药用的”是指在合理的医学判定的范围内，适于同个体(例如人类)的组织接触而没有过量的毒性、刺激性、过敏反应或其它问题或并发症并具有合理的利/害比的化合物、物质、组合物和/或剂量形式。所有的载体、赋形剂等在与制剂的其它成分相容的意义上也必须是“可接受的”。
适当的载体、赋形剂等可以参见标准的药学教科书例如Remington′sPharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，1990。
制剂可方便地以单位剂量形式提供，并可通过制药领域内的任何公知的方法制备。该方法包括将活性化合物与构成一种或多种辅助成分的载体进行混合的步骤。通常，所述制剂通过将活性化合物与液体载体或细分散的固体载体或两者均匀、紧密地混合进行制备，然后，如果需要的话，成型成产品。
制剂可以是液体、溶液、混悬液、乳液、酏剂、糖浆剂、片剂、锭剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂、扁囊剂、丸剂、安瓿、栓剂、子宫套、软膏剂、凝胶、糊剂、霜剂、喷雾剂、烟雾剂、泡沫、洗剂、油类、大丸剂、药糖剂或气雾剂的形式。
适于口服(例如通过吞服)给药的制剂可以呈含有预定量活性化合物的不连续的单位诸如胶囊剂、扁囊剂或片剂的形式；呈粉末或颗粒剂的形式；呈在水性或非水性液体中的溶液或混悬液的形式；或呈水包油液体乳液或油包水液体乳液的形式；呈大丸剂、药糖剂或糊剂的形式。
片剂可以通过常规方法例如压制或模压的方法制备，可任选地含有一种或多种辅助成分。压缩片剂可以通过在适当的机器中将自由流动形式的活性成分诸如粉末或颗粒压缩制得，所述活性成分可任选地与一种或多种粘合剂(例如聚维酮、明胶、阿拉伯胶、山梨醇、西黄蓍胶、羟丙甲基纤维素)、填充剂或稀释剂(例如乳糖、微晶纤维素、磷酸氢钙)、润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石、二氧化硅)、崩解剂(例如羟乙酸淀粉钠、交联的聚维酮、交联的羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂或润湿剂(例如十二烷基硫酸钠)和防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、山梨酸)混合。模压片剂可通过在适当的机器中模压用惰性液体稀释剂润湿的粉末化合物的混合物制得。可任选地对片剂进行包衣或刻痕，并可将片剂制成能够缓释或控释其中所含的活性成分的形式，例如用不同比例的羟丙甲基纤维素来提供所需的释放特性。可任选地对片剂进行肠溶包衣，以便能够在肠道而不是胃中释放。
适于局部给药(例如经皮、鼻内、眼、口腔和舌下)的制剂可以配制成软膏剂、霜剂、混悬液、洗剂、散剂、溶液、糊剂、凝胶、喷雾剂、气雾剂或油的形式。或者，制剂可以包括贴剂或敷料，诸如用活性化合物以及任选的一种或多种赋形剂或稀释剂浸渍的绷带或粘性硬膏剂。
适于在口腔内局部给药的制剂包括在矫味基质、通常是蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶中包含活性化合物的锭剂；在惰性基质诸如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中包含活性化合物的含片以及在适当的液体载体中包含活性化合物的漱口剂。
适于对眼局部给药的制剂还包括滴眼剂，其中将活性化合物溶解或悬浮在适当的载体、特别是活性化合物的含水溶剂中。
其中的载体是固体的适于鼻内给药的制剂包括粒径例如约为20至约500微米的粗粉末，该制剂以经鼻吸入的方式给药，即，通过鼻腔从靠近鼻子的含有粉末的容器迅速吸入。其中的载体是液体的用于以例如鼻喷雾剂、滴鼻剂或通过雾化器以气雾剂的形式给药的适宜制剂包括活性化合物的水溶液或油溶液。
适于通过吸入法给药的制剂包括从加压的包装产生的气雾剂，所述加压包装使用适宜的抛射剂诸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它适当的气体。
适于经皮局部给药的制剂包括软膏剂、霜剂和乳剂。当配制成软膏剂时，活性化合物可任选地和石蜡或可与水混溶的软膏基质一起使用。或者，可用水包油霜剂基质将活性化合物配制成霜剂。如果需要，霜剂基质的水相可以包含例如至少约30％w/w的多羟基醇，即含有两个或多个羟基的醇诸如丙二醇、丁烷-1，3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇及其混合物。局部制剂优选包含能增强活性化合物通过皮肤或其它患病区域的吸收或渗透的化合物。该皮肤渗透增强剂的例子包括二甲亚砜和相关的类似物。
当配制成局部制剂时，油相可任选地仅包含乳化剂或者可以包含至少一种乳化剂与脂肪和/或油的混合物。优选同时含有亲水性乳化剂和亲脂性乳化剂，所述亲脂性乳化剂起稳定剂的作用。还优选同时含有油和脂肪。含或不含稳定剂的乳化剂构成所谓的乳化蜡，该蜡同油和/或脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质，该基质构成霜剂制剂的油分散相。
适宜的乳化剂和乳化稳定剂包括吐温60、司盘80、鲸蜡/硬脂醇、肉豆蔻醇、甘油单硬脂酸酯和十二烷基硫酸钠。对于制剂中适宜的油或脂肪的选择是基于获得所需的美学特性，因为活性化合物在大部分可用于药用乳剂的油中的溶解度非常低。因此，霜剂应优选是不油腻、不着色并且可以洗掉的产品，并具有适当的稠度以防止从药管或其它容器中漏出。可以使用直链或支链、一元或二元的烷基酯例如二异己二酸酯(diisoadipate)、硬脂酸异鲸蜡醇酯、椰子脂酸的丙二醇二酯、肉豆蔻酸异丙酯、油酸癸酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、棕榈酸2-乙基己酯或称为Crodamol CAP的支链酯的混合物，最后三种是优选的酯。这些物质可以单独使用或根据所需的性质组合使用。或者，可以使用高熔点的液体例如白凡士林和/或液体石蜡或其它矿物油。
适于直肠给药的制剂可以是用适宜的基质制成的栓剂的形式，所述基质包括例如可可脂水杨酸酯。
适于阴道给药的制剂可以是含有活性化合物以及本领域已知的适宜载体的子宫套、棉球、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫剂或喷雾剂的形式。
适于胃肠外给药(例如通过注射，包括皮肤、皮下、肌肉内、静脉内和真皮内)的制剂包括含水和非水的等渗、无热源、无菌的注射溶液，其可含有抗氧剂、缓冲剂、防腐剂、稳定剂、抑菌剂和可以使制剂与准备接受该制剂的个体的血液等渗的溶质；以及含水和非水的无菌混悬液，其可含有助悬剂和增稠剂，以及脂质体或其它旨在使化合物靶向于血液成分或一个或多个器官的微颗粒系统。适用于所述制剂的适宜等渗赋形剂的例子包括氯化钠注射液、林格溶液或加有乳酸盐的林格溶液。通常，活性化合物在溶液中的浓度为约1ng/ml至约10μg/ml，例如约10ng/ml至约1μg/ml。制剂可以存在于单剂量或多剂量的密封容器例如安瓿和小药瓶中，并可以在冷冻干燥条件下存放，其仅需在临用前加入无菌的液体载体例如注射用水即可。现场制备的注射溶液和混悬液可以由无菌的粉末、颗粒和片剂制得。制剂可以是脂质体或其它旨在使活性化合物靶向于血液成分或一个或多个器官的微颗粒系统的形式。
剂量可以理解，活性化合物以及含有活性化合物的组合物的适宜剂量在不同患者之间或有所不同。最佳剂量的确定通常涉及平衡本发明治疗方法的治疗益处与危险性或有害副作用的水平。选择的剂量水平取决于各种因素，包括但不仅限于，具体化合物的活性、给药途径、给药时间、化合物的排泄速率、治疗的持续时间、联合使用的其它药物、化合物和/或材料、患者的年龄、性别、体重、病症、一般健康状况以及先前的用药史。化合物的用量以及给药途径最终应由医生决定，但通常，所述剂量应能够在作用位点产生可以达到所需效果而不会引起明显有害或不利的副作用的局部浓度。
在整个治疗过程中，体内给药可以以单次给药、连续或间歇给药(例如以分割的剂量以适宜的间隔给药)的方式来进行。测定最有效的给药方式和剂量的方法是本领域技术人员公知的，并随着治疗所用的制剂、治疗的目的、所治疗的靶细胞以及所治疗的个体而改变。可以进行单次或多次给药，剂量水平和模式由主治医师进行选择。
通常，活性化合物的适宜剂量为每天每公斤患者体重约100μg至约250mg。当活性化合物是盐、酯、前药等时，给药量根据母体化合物来计算，从而使所用的实际重量成比例地增加。
合成数据结构如表1中所示的编号大于100的化合物按照以上合成路线进行合成，其特征性数据如下。表1中编号小于100的化合物可从Maybridge plc，Cornwall，UK获得。路线1(-A-B-＝苯环)126；Ar＝4-氯苯基收率31％；熔点218-220℃；δH4.30(2H，s)，7.30(4H，s)，7.75-8.00(3H，s)，8.25-8.45(1H，m)，12.40(1H，br s)；m/z(M+H)+271(100％)，273(35％)。129；Ar＝4-溴苯基收率59％；熔点232-235℃；δH4.40(2H，s)，7.30(2H，d，J＝8.7Hz)，7.45(2H，d，J＝8.7Hz)，7.60-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.40(1H，br s)；m/z(M+H)+314(100％)，316(95％)。131；Ar＝1-萘基收率58％；熔点228-231℃；δH4.80(2H，s)，7.25-8.50(11H，m)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+287(100％)。132；Ar＝4-氟苯基收率54％；熔点194-197℃；δH4.30(2H，s)，7.10(2H，d，J＝8.5Hz)，7.25(2H，d，J＝8.5Hz)，7.25-7.50(1H，m)，7.75-8.00(2H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.55(1H，br s)；m/z(M+H)+255(100％)。138；Ar＝4-甲氧基苯基收率66％；熔点194-196℃；δH3.70(3H，s)，4.50(2H，s)，6.85(2H，d，J＝8.5Hz)，7.30(2H，d，J＝8.5Hz)，7.70-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+267(100％)。139；Ar＝4-甲基苯基收率80％；熔点205-207℃；δH2.15(3H，s)，4.25(2H，s)，7.00-7.30(4H，m)，7.60-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.60(1H，br s)；m/z(M+H)+251(100％)。141；Ar＝2-氟苯基收率85％；熔点235-238℃；δH4.40(2H，s)，7.10-7.45(4H，m)，7.70-8.05(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.40(1H，br s)；m/z(M+H)+255(100％)。142；Ar＝2-甲氧基苯基收率74％；熔点158-160℃；δH3.70(3H，s)，4.25(2H，s)，6.70-6.95(3H，m)，7.10-7.35(1H，m)，7.60-7.95(3H，m)，8.45-8.55(1H，m)，11.15(1H，br s)；m/z(M+H)+281(100％)。145；Ar＝苯基收率85％；熔点201-204℃；δH4.45(2H，s)，7.20-7.45(5H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.40(1H，br s)；m/z(M+H)+237(100％)。151；Ar＝4-碘苯基收率86％；熔点233-236℃；δH4.20(2H，s)，7.15(2H，d，J＝8.2Hz)，7.60(2H，d，J＝8.2Hz)，7.75-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.15(1H，br s)；m/z(M+H)+362(100％)。159；Ar＝4-氨基苯基收率28％；熔点233-236℃；δH4.15(2H，s)，4.85(2H，s)，6.50(2H，d，J＝7.1Hz)，7.00(2H，d，J＝7.1Hz)，7.75-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+252(100％)。160；Ar＝3-氨基苯基收率95％；熔点178-180℃；δH4.15(2H，s)，5.00(2H，br s)，6.35-6.55(3H，m)，6.80-7.05(1H，m)，7.75-7.90(3H，m)，8.25-8.40(1H，m)；m/z(M+H)+252(100％)。163；Ar＝2-甲基苯基收率72％；熔点201-204℃；δH2.15(3H，s)，4.10(2H，s)，6.95-7.25(4H，m)，7.80-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.25(1H，br s)。177；Ar＝4-吡啶基收率40％；熔点214-216℃；δH4.25(2H，s)，7.45(2H，d，J＝5.7Hz)，7.75-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，8.55(2H，d，J＝5.7Hz)，12.00(1H，brs)；m/z(M+H)+238(100％)。178；Ar＝3-吡啶基收率62％；熔点196-199℃；δH4.30(2H，s)，7.25-7.45(1H，m)，7.60-7.95(4H，m)，8.25-8.45(2H，m)，8.55(1H，s)，12.15(1H，br s)；m/z(M+H)+238(100％)。180；Ar＝3，4-亚甲二氧基苯基收率59％；熔点225-228℃；δH4.25(2H，s)，6.00(2H，s)，6.85-7.00(3H，m)，7.70-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.25(1H，br s)；m/z(M+H)+281(100％)。186；Ar＝3-氯苯基收率69％；熔点192-194℃；δH4.30(2H，s)，7.30-7.50(3H，s)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，1 2.60(1H，br s)；m/z(M+H)+271(100％)，273(35％)。187；Ar＝3-苄氧基4-甲氧基苯基收率51％；熔点150-152℃；δH3.60(3H，s)，4.20(2H，s)，5.05(2H，s)，7.30-7.50(3H，s)，7.55(5H，s)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+371(100％)。191；Ar＝3-(三氟甲基)苯基收率71％；熔点195-198℃；δH4.30(2H，s)，7.50-8.00(7H，m)，8.25-8.45(1H，m)，11.60(1H，br s)；m/z(M+H)+305(100％)。192；Ar＝3-氟苯基收率70％；熔点187-190℃；δH4.30(2H，s)，6.90-7.45(4H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.30(1H，br s)；m/z(M+H)+255(65％)。193；Ar＝3-苯氧基苯基收率52％；熔点146-148℃；δH4.20(2H，s)，6.80-7.50(9H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.00(1H，br s)；m/z(M+H)+329(45％)。194；Ar＝3-苄氧基苯基收率83％；熔点177-180℃；δH4.20(2H，s)，5.00(2H，s)，6.80-7.50(9H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.00(1H，br s)。198；Ar＝3-氨基-4-硫代吗啉基苯基收率6％；熔点235-238℃；δH2.75(4H，br s)，2.95(4H，br s)，4.10(2H，s)，4.65(2H，s)，6.50-6.85(3H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+353(100％)。202；Ar＝3，4-二氟苯基收率70％；熔点186-191℃；δH4.25(2H，br s)，7.00-7.55(3H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+271(100％)。204；Ar＝3-硝基-4-吡咯烷基苯基收率1％；熔点268-270℃；δH2.75(4H，br s)，3.10(4H，br s)，4.10(2H，s)，6.85(1H，d，J＝8.15Hz)，7.45(1H，dd，J＝＜2Hz和8.15Hz)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+351(100％)。211；Ar＝3-溴苯基收率80％；熔点199-202℃；δH4.35(2H，s)，7.20-7.60(4H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.40(1H，s)；m/z(M+H)+316(95％)和318(100％)。222；Ar＝4-苄氧基-3-甲氧基苯基收率29％；熔点173-175℃；δH3.60(3H，s)，4.10(2H，s)，5.00(2H，s)，6.60-6.95(3H，m)，7.40(5H，s)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+373(100％)。241；Ar＝4-氟-3-甲氧基苯基收率55％；熔点211-214℃；δH3.80(3H，s)，4.25(2H，s)，6.75-7.25(3H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+285(100％)。248；Ar＝2-氟苯基收率86％；熔点234-236℃；δH4.30(2H，s)，4.65(2H，s)，7.00-7.45(4H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+255(100％)。249；Ar＝2-吡啶基收率84％；熔点180-184℃；δH4.45(2H，s)，7.10-7.45(2H，m)，7.50-8.00(4H，m)，8.25-8.45(1H，m)，8.45-8.55(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+238(100％)。266；Ar＝2-苯基乙基收率9％；熔点124-126℃；m/z(M)+250(70％纯度)。276；Ar＝3-羧基苯基收率59％；熔点277-280℃；δH4.40(2H，s)，7.3-8.0(7H，m)，8.1-8.4(1H，m)和12.60(1H，s)；m/z(M+H)+281(88％纯度)。路线2279；R″＝4-甲基7步的收率为5％；熔点215-217℃；δH2.20(3H，s)，3.80(3H，s)，4.40(2H，s)，7.10(4H，s)，7.40(1H，dd)，7.70-7.90(2H，m)和12.60(1H，br s)；m/z(M+H)+281(100％纯度)。路线3(-A-B-＝苯环)中间体化合物3-氧代苯并[c]呋喃-1-基膦酸二甲酯，收率90％；熔点95-96.5℃。283；Ar＝苯基，RL1＝丙基两步的收率为49％；熔点158-159℃；δH0.90(3H，t)，1.0-1.5(2H，m)，1.8-2.5(2H，m)，4.40(1H，t)，7.1-7.4(5H，m)，7.5-7.9(3H，m)，8.4-8.6(1H，m)和12.0(1H，br s)；m/z(M+H)+279(98％纯度)。284(为非对映异构体对的7∶1混合物)；ArCORL1＝2-甲基二氢茚酮两步的收率为46％；熔点204-206℃；δH0.70和1.10(3H，2xd)，2.5-3.4(3H，m)，4.50和5.1(1H，2xd)，6.8-7.3(4H，m)，7.95(3H，s)，8.3-8.5(1H，m)和12.5(1H，br s)；m/z(M+H)+277(以2个非对映异构体对计，纯度为100％)。285；Ar＝苯基、RL1＝甲基两步的收率为50％；熔点169-171℃；δH1.60(3H，d)，4.80(1H，q)，7.1-7.4(5H，m)，7.7-7.9(3H，m)，8.25-8.4(1H，m)和12.7(1H，br s)；m/z(M+H)+251(100％纯度)。进一步衍生化(a)164；4-羟基收率99％；熔点231-234℃；δH4.15(2H，s)，6.60(2H，d，J＝8.0Hz)，7.10(2H，d，J＝8.0Hz)，7.80-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+253(100％)。165；3-羟基收率68％；熔点198-201℃；δH4.15(2H，s)，6.50-6.80(3H，m，)，6.95-7.10(1H，m)，7.80-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+253(100％)。(b)166；R″＝4-NHC(＝O)CH3收率57％；熔点267-271℃；δH2.00(3H，s)，4.25(2H，s)，7.25(2H，d，J＝7.7Hz)，7.55(2H，d，J＝7.7Hz)，7.75-7.95(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，9.80(1H，s)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+294(100％)。167；R″＝4-NHC(＝O)Ph收率87％；熔点293-296℃；δH4.25(2H，s)，7.20-8.00(12H，m)，8.25-8.45(1H，m)，10.15(1H，s)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+356(100％)。169；R″＝3-NHC(＝O)-2-噻吩基收率72％；熔点232-235℃；δH4.25(2H，s)，7.00-7.45(3H，m)，7.55-7.65(2H，m)，7.75-7.95(5H，m)，8.25-8.45(1H，m)，10.10(1H，s)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+362(100％)。170；R″＝3-NHC(＝O)-4-氟苯基收率68％；熔点257-261℃；δH4.25(2H，s)，7.00-7.50(4H，m)，7.55-8.25(8H，m)，10.15(1H，s)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+374(100％)。171；R″＝3-NHC(＝O)Ph收率78％；熔点261-264℃；δH4.25(2H，s)，7.05-7.95(12H，m)，10.05(1H，s)，12.50(1H，s)；m/z(M+H)+356(100％)。172；R″＝3-NHC(＝O)CH3收率55％；熔点270-272℃；δH2.00(3H，s)，4.25(2H，s)，7.00-7.50(4H，m)，7.75(3H，s)，8.25-8.45(1H，m)，9.80(1H，s)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+294(100％)。233；R″＝3-NHC(＝O)CH(Et)Ph收率82％；熔点150-154℃；δH0.90(3H，t)，1.50-2.25(2H，m)，3.20-3.55(1H，m)，4.25(2H，s)，7.0-7.90(12H，m)，8.25-8.45(1H，m)，9.95(1H，br s)和12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+398(88％纯度)。(c)(i)179；收率45％；熔点161-164℃；δH2.15(3H，s)，4.25(2H，s)，6.90-7.35(4H，m)，7.75-7.95(3H，s)，8.25-8.45(1H，m)，12.50(1H，br s)；m/z(M+H)+295(100％)。(c)(ii)212；收率55％；熔点184-187℃；δH3.55(2H，s)，7.10-7.50(6H，m)，7.75-8.05(3H，m)，8.10-8.45(3H，m)，12.55(1H，s)。(c)(iii)213；收率12％；熔点193-196℃；δH2.20(3H，s)，3.55(2H，s)，7.10(4H，dd，J＝8.2Hz)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，12.55(1H，s)。(c)(iv)289；RE＝正C9H19；m/z(M+H)+407(纯度＞95％)290；RE＝1-苯基磺酰基吲哚-3-基291；RE＝4-(N，N-二丙基氨磺酰基)苯基；m/z(M+H)+520(纯度＞95％)292；RE＝2-(4-甲氧基苯氧基)-5-硝基苯基；m/z(M+H)+524(纯度＞95％)293；RE＝4-(4-氯苯基磺酰基)-3-甲基-2-噻吩基；m/z(M+H)+55 1(纯度＞95％)294；RE＝5-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-5-基)-4-甲基噻唑-5-基；m/z(M+H)+496(纯度＞95％)295；RE＝2-(2-噻吩基)噻唑-4-基；m/z(M+H)+446(纯度＞95％)296；RE＝3-甲基-5-(5-甲基异噁唑-3-基)异噁唑-4-基；m/z(M+H)+443(纯度＞95％)298；RE＝5-(4-氯苯基)-2-(三氟甲基)-3-呋喃基；m/z(M+H)+525(纯度＞95％)299；RE＝2-(4-甲基苯硫基)-3-吡啶基300；RE＝喹喔啉-6-基；m/z(M+H)+409(纯度＞85％)601；RE＝2-氯-3，4-二甲氧基苯乙烯基；m/z(M+H)+477(纯度＞90％)602；RE＝5-苯基噁唑-4-基；m/z(M+H)+424(纯度＞85％)603；RE＝1-苄氧基羰基哌啶-4-基；m/z(M+H)+498(纯度＞95％)604；RE＝1-(4-甲氧基苯基)-5-甲基吡唑-4-基；m/z(M+H)+467(纯度＞95％)605；RE＝4-正己基苯基；m/z(M+H)+441(纯度＞95％)607；RE＝4-正丙基苯基；m/z(M+H)+399(纯度＞95％)608；RE＝6-氟-1，3-苯并二噁烷-8-基；m/z(M+H)+433(纯度＞95％)609；RE＝2，4，5-三氟-3-甲氧基苯基；m/z(M+H)+441(纯度＞95％)610；RE＝环己基；m/z(M+H)+363(纯度＞95％)611；RE＝4-溴-1-乙基-3-甲基吡唑-5-基612；RE＝2-氯-4-吡啶基；m/z(M+H)+392/394(纯度＞95％)613；RE＝环丙基；m/z(M+H)+321(纯度＞95％)614；RE＝5-甲基-2-(三氟甲基)-3-呋喃基；m/z(M+H)+429(纯度＞95％)615；RE＝环丁基；m/z(M+H)+335(纯度＞95％)616；RE＝2-氯-6-甲基-4-吡啶基617；RE＝1-(4-氯苯氧基)-1-甲基乙基；m/z(M+H)+446/451(纯度＞95％)618；RE＝2-噻吩基；m/z(M+H)+363(纯度＞90％)619；RE＝3，4-亚甲二氧基苯基；m/z(M+H)+401(纯度＞95％)620；RE＝正庚基；m/z(M+H)+379(纯度＞95％)621；RE＝3-氯丙基；m/z(M+H)+357/359(纯度＞95％)622；RE＝5-甲基异噁唑-3-基；m/z(M+H)+362(纯度＞95％)623；RE＝1-叔丁基-5-甲基吡唑-3-基；m/z(M+H)+417(纯度＞90％)624；RE＝3-苯基噻唑-4-基；m/z(M+H)+440(纯度＞95％)625；RE＝3-叔丁基-1-(2，4-二氯苄基)吡唑-5-基626；RE＝1-氯乙基627；RE＝3，4-二氢-2H-1，5-苯并二氧杂环庚三烯-7-基628；RE-1-乙基戊基；m/z(M+H)+379(纯度＞90％)629；RE＝1-苄氧基羰基-2，3-二氢吲哚-2-基；m/z(M+H)+532(纯度＞90％)630；RE＝2-氯-1，1-二甲基乙基；m/z(M+H)+371/373(纯度＞95％)631；RE＝1-丙烯基；m/z(M+H)+321(纯度＞95％)(d)(i)215；Ar＝苯基收率31％；熔点254-257℃；δH3.55(2H，s)，6.80-7.50(13H，m)，7.85(1H，s)，9.55(1H，s)；m/z(M+H)+371(100％)。216；Ar＝4-氟苯基收率79％；熔点240-244℃；δH3.55(2H，s)，6.80-7.50(12H，m)，8.50(1H，s)，9.55(1H，s)；m/z(M+H)+389(100％)。(d)(ii)206；收率12％；熔点125-126.5℃；δH2.65(4H，br s)，3。70(4H，br s)，4.20(2H，s)，4.30(4H，s)，7.00-7.15(2H，m)，7.65-8.00(3H，m)，8.25-8.45(2H，m)，9.60(1H，s)，12.55(1H，s)。(d)(iii)640；RA＝环丁基收率77％；m/z(M+H)+334(96％纯度)。641；RA＝5-甲基-2-(三氟甲基)-3-呋喃基收率50％；m/z(M+H)+428(97％纯度)。642；RA＝4-溴-1-乙基-3-甲基吡唑-5-基收率97％；m/z(M+H)+466/468(100％纯度)。643；RA＝2-噻吩基收率100％；m/z(M+H)+362(93％纯度)。644；RA＝5-甲基异噁唑-3-基收率99％；m/z(M+H)+361(100％纯度)。645；RA＝3，4-亚甲二氧基苯基收率100％；m/z(M+H)+400(94％纯度)。646；RA＝1-叔丁基-5-甲基吡唑-3-基收率96％；m/z(M+H)+416(97％纯度)。647；RA＝1-乙基戊基收率80％；m/z(M+H)+378(100％纯度)。648；RA＝正庚基收率76％；m/z(M+H)+378(100％纯度)。649 RA＝1-氯乙基收率65％；m/z(M+H)+342/344(100％纯度)。650；RA＝1-丙烯基收率91％；m/z(M+H)+320(97％纯度)。651；RA＝3，4-二氢-2H-1，5-苯并二氧杂环庚三烯-7-基收率93％；m/z(M+H)+428(97％纯度)。652；RA＝2-氯-6-甲基-4-吡啶基收率77％；m/z(M+H)+405/407(100％纯度)。653；RA＝2-氯-4-吡啶基收率87％；m/z(M+H)+391/393(100％纯度)。654；RA＝1-(4-氯苯氧基)-1-甲基乙基收率89％；m/z(M+H)+448/450(100％纯度)。655；RA＝4-(三氟甲氧基)苯基收率100％；m/z(M+H)+440(100％纯度)。656；RA＝环己基收率75％；m/z(M+H)+362(97％纯度)。657；RA＝6-氟-1，3-苯并二噁烷-8-基收率87％；m/z(M+H)+432(97％纯度)。658；RA＝4-丙基苯基收率79％；m/z(M+H)+398(100％纯度)。659；RA＝2，4，5-三氟-3-甲氧基苯基收率83％；m/z(M+H)+440(100％纯度)。667；RA＝2-氯-3，4-二甲氧基苯乙烯基收率76％；m/z(M+H)+476/478(100％纯度)。668；RA＝4-己基苯基收率63％，m/z(M+H)+440(100％纯度)。669；RA＝2-(4-甲基苯氧基)-3-吡啶基收率41％；m/z(M+H)+463(97％纯度)。670；RA＝2-(4-甲基苯硫基)-3-吡啶基收率100％；m/z(M+H)+479(88％纯度)。671；RA＝喹喔啉-6-基收率86％；m/z(M+H)+408(100％纯度)。672；RA＝1-苄氧基羰基哌啶-4-基收率84％；m/z(M+H)+497(95％纯度)。673；RA＝1-(4-甲氧基苯基)-5-甲基吡唑-4-基收率76％；m/z(M+H)+466(97％纯度)。674；RA＝5-(2-吡啶基)-2-噻吩基收率66％；m/z(M+H)+439(100％纯度)。675；RA＝5-苯基噁唑-4-基收率63％；m/z(M+H)+423(100％纯度)。676；RA＝3-甲基-5-(5-甲基异噁唑-3-基)异噁唑-4-基收率49％；m/z(M+H)+442(100％纯度)。677；RA＝2-(2-噻吩基)异噻唑-4-基收率70％；m/z(M+H)+445(100％纯度)。678；RA＝2-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-5-基)-4-甲基噻唑5-基收率96％；m/z(M+H)+495(100％纯度)。679；RA＝5-(4-氯苯基)-2-(三氟甲基)-3-呋喃基收率95％；m/z(M+H)+524/526(98％纯度)。680；RA＝3，5-二-(三氟甲基)苯基收率69％；m/z(M+H)+492(100％纯度)。681；RA＝4-(4-氯苯基磺酰基)-3-甲基-2-噻吩基收率45％；m/z(M+H)+550/552(100％纯度)682；RA＝1-苄基-3-叔丁基吡唑-5-基收率94％；m/z(M+H)+492(98％纯度)。683；RA＝1-苯基磺酰基吲哚-3-基收率90％；m/z(M+H)+535(100％纯度)。684；RA＝正壬基收率75％；m/z(M+H)+406(94％纯度)。685；RA＝2-(4-甲氧基苯氧基)-5-硝基苯基收率98％；m/z(M+H)+523(100％纯度)。686；RA＝丙基收率56％；m/z(M+H)+322(92％纯度)。687；RA＝乙基收率68％；m/z(M+H)+308(97％纯度)。688；RA＝1-甲基乙基收率100％；m/z(M+H)+322(100％纯度)。(d)(iv)691；R＝6-氟-1，3-苯并二噁烷-8-基收率100％；熔点250-254℃(在142-146℃收缩)；m/z(M+H)+447(100％纯度)。692；R＝3，4-二氢-2H-1，5-苯并二氧杂环庚三烯-7-基收率71％；熔点205-208℃；m/z(M+H)+443(100％纯度)。693；R＝1-苄氧基羰基哌啶-4-基收率78％；熔点216-219℃；m/z(M+H)+512(100％纯度)。694；R＝丙基收率75％；熔点205-208℃；δH0.80(3H，t)，1.2-1.7(2H，m)，3.0(2H，q)，4.20(2H，s)，6.0(1H，br s)，6.8-7.3(4H，m)，7.7-7.95(3H，m)，8.3-8.45(2H，m)和12.55(1H，s)；m/z (M+H)+337(100％纯度)。698；R＝2，3-二氢苯并[b]呋喃-5-基收率88％；熔点251-254℃；δH3.1(2H，t)，4.25(2H，s)，4.5(2H，t)，6，6(1H，d)，6.8-6.4(6H，m)，7.7-7.9(3H，m)，8.2-8.4(2H，m)，9.0(1H，s)和12.55(1H，s)；m/z(M+H)+413(94％纯度)。699；R＝3-甲氧基苯基收率67％；熔点195-200℃；δH3.7(3H，s)，4.25(2H，s)，6.4-6.6(1H，m)，6.8-7.3(7H，m)，9.7-9.9(3H，m)，8.2-8.4(1H，m)，8.6-8.7(2H，m)和12.25(1H，s)；m/z(M+H)+401(100％纯度)。700；R＝2-(三氟甲氧基)苯基收率84％；熔点229-231℃；δH4.25(2H，s)，6.9-7.3(7H，m)，9.7-9.9(3H，m)，8.2-8.4(3H，m)11.25(1H，s)和12.25(1H，s)；m/z(M+H)+455(100％纯度)。701；R＝5-甲基-3-苯基异噁唑-4-基收率39％；熔点256-258℃；m/z(M+H)+452(97％纯度)。704；R＝2-乙氧基苯基收率77％；熔点174-178℃；m/z(M+H)+415(100％纯度)。705；R＝4-丁基苯基收率78％，熔点201-205℃；δH0.80(3H，t)，1.0-1.8(4H，m)，2.5(2H，m)，4.25(2H，s)，6.9-7.4(8H，m)，9.7-9.9(3H，m)，8.2-8.6(3H，m)和12.25(1H，s)；m/z(M+H)+427(100％纯度)。706；R＝丁基收率65％；熔点225-227℃；m/z(M+H)+351(96％纯度)。(d)(v)(a)697；R＝甲基收率78％；熔点192-194℃；m/z(M+H)+330(100％纯度)。(d)(v)(b)702；R＝4-乙酰氨基苯基收率67％；熔点263-265℃；m/z(M+H)+449(97％纯度)。703；R＝5-(2-吡啶基)-2-噻吩基收率80％；熔点258-261℃；m/z(M+H)+475(100％纯度)。(e)227；收率31％；熔点124-125.5℃；δH4.25(2H，s)，7.20-7.50(4H，m)，7.60-8.45(8H，m)，10.20(1H，m)，12.55(1H，m)；m/z(M+H)+372(20％)。(f)239；收率68％；熔点230-232℃；δH3.65(2H，s)，4.10(3H，s)，6.50-7.00(3H，m)，7.75-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，8.50-9.00(1H，br s)，12.50(1H，brs)；m/z(M+H)+283(100％)。(g)247；收率89％；熔点228-231℃；δH4.25(2H，s)，6.60-7.05(3H，m)，7.80-8.00(3H，m)，8.25-8.45(1H，m)，9.80(1H，s)，12.55(1H，s)；m/z(M+H)+271(65％)。(h)277；收率36％；熔点157-162℃；δH3.80(3H，s)，4.40(2H，s)，7.3-8.0(7H，m)，8.2-8.4(1H，m)和1 2.60(1H，s)。(i)278；收率6％；熔点131-139℃；δH4.40(2H，s)，7.3-7.9(12H，m)，8.2-8.4(1H，m)，10.20(1H，s)和12.60(1H，s)；m/z(M+H)+356(79％纯度)。(j)253；RN1RN2NH＝吗啉两步的收率为19％；熔点118-120℃；δH2.3-2.6(4H，m)，2.7-2.9(4H，m)，3.4-3.9(10H，m)4.35(2H，s)，7.0-8.3(11H，m)9.70(1H，s)和12.30(1H，s)；m/z(M+H)+540(95％纯度)。254；RN1RN2NH＝吡咯烷两步的收率为42％；熔点110-113℃；δH1.6-1.8(4H，m)，2.3-2.6(4H，m)，2.7-2.9(4H，m)，3.6-3.9(6H，m)，4.35(2H，s)，7.2-8.3(11H，m)9.70(1H，s)和12.60(1H，s)。(k)265；收率46％；熔点＞75℃(分解)；δH1.9-2.2(2H，m)，2.7-2.85(4H，m)，3.5-3.9(8H，m)，4.20(2H，s)，7.0(1H，s)，7.7-8.2(6H，m)，8.80(1H，s)和12.50(1H，s)。
生物学试验为了评价化合物的抑制作用，用如下试验测定IC50值。
将从Hela细胞核提取物分离出的哺乳动物PARP与Z-缓冲液(25mMHepes(Sigma)；12.5mM MgCl2(Sigma)；50mM KCl(Sigma)；1mM DTT(Sigma)；10％甘油(Sigma)；0.001％NP-40(Sigma)，pH7.4)在96孔FlashPlates(商标)(NEN，UK)中一起保温并加入不同浓度的所述抑制剂。将所有化合物均用DMSO稀释并给出10至0.01μM的最终试验浓度，DMSO的最终浓度为1％/孔。每个孔的试验总体积为40μl。
在30℃保温10分钟后，通过加入10μl含有NAD(5μM)、3H-NAD和30个碱基对的双链DNA的反应混合物引发反应。将指定的阳性反应和阴性反应孔与化合物孔(未知的)一起进行以计算酶活性％。然后将平板振摇2分钟并在30℃保温45分钟。
保温后，通过向每个孔中加入50μl30％的乙酸终止反应。然后将平板在室温下振摇1小时。
将平板转移到TopCount NXT(商标)(Packard，UK)上进行闪烁计数。记录的数值是每分钟的计数(cpm)，每个孔的计数时间为30秒。
然后通过如下方程式计算各化合物的％酶活性 在下表1中以IC50值(酶活性被抑制50％时的浓度)的形式详细地列出了一些结果，所述IC50值是在一系列不同的浓度下、通常为10μM至0.01μM的范围内测定的。用该IC50值进行比较以确定增加的化合物的效力。
为了进行比较，用上述试验测得100(1(2H)-2，3-二氮杂萘酮)的IC50为7.2μM。
表1
在该试验中，如下化合物的IC50小于或等于1μM233、278、279、294、295、601、604、624、640-659、667-678和680-706。
在该试验中，如下化合物的IC50小于或等于3μM253、254、265和619。
在该试验中，如下化合物的IC50小于或等于5μM266、283、284和285。
剂量强因子(DEF)是测试化合物在博来霉素的存在下所引起的对细胞生长抑制的增强与仅有博来霉素时相比的比值。测试化合物以25μM的固定浓度使用。博来霉素以0.5μg/ml的浓度使用。通过如下公式计算DEF 其中，生长TC是在测试化合物存在下的细胞生长；生长对照是对照细胞的细胞生长；生长博来霉素是在博来霉素存在下的细胞生长；生长(博来霉素+TC)是在博来霉素和测试化合物存在下的细胞生长。
细胞生长利用sulforhodamine B(SRB)试验进行评价(Skehan，P.等人，1990，J.Natl.Cancer Inst.，82，1107-1112)。将2000个HeLa细胞接种到平底96孔微滴定平板的各个孔内，接种体积为100μl，然后在37℃保温6小时。用培养基本身或含有终浓度为25μM的测试化合物的培养基更换细胞的培养基。使细胞继续生长1小时，然后将博来霉素加入到未处理的细胞或用测试化合物处理的细胞中。将既未用博来霉素处理也未用测试化合物处理的细胞用作对照。将仅用测试化合物处理的细胞用于评价测试化合物的生长抑制作用。
将细胞继续放置16小时，然后更换培养基并使细胞在37℃继续生长72小时。然后除去培养基并用100μl冰冷的10％(w/v)三氯乙酸固定细胞。将平板在4℃保温20分钟，然后用水洗涤四次。然后将各孔的细胞用100μl0.4％(w/v)SRB的1％乙酸溶液染色20分钟，然后用1％乙酸洗涤四次。然后将平板在室温下干燥2小时。通过向各孔中加入100μl 10mM Tris碱使来自染色的细胞的染料溶解。将平板轻摇并在室温下放置30分钟，然后在564nm下在Microquant微滴定板读数器上测定光密度。
一些结果示于表2中。
表2
在该试验中，如下化合物的DEF值大于1233、249、254、265、278、279、283、284、640、645、648-654、655-658、667、671、672、678、680、683、684和686-688。
权利要求
1.下式化合物及其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药在制备用于抑制PARP活性的药物中的用途 其中A和B合在一起表示取代或未取代的稠合的芳香族环；Rc用-L-RL表示，其中L是式-(CH2)n1-Qn2-(CH2)n3-其中n1、n2和n3分别选自0、1、2和3，n1、n2和n3的总和是1、2或3，Q选自O、S、NH或C(＝O)；且RL是取代或未取代的C5-20芳基；RN选自氢、取代或未取代的C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基、羟基、醚、硝基、氨基、酰氨基、巯基、硫醚、亚砜和砜。
2.下式化合物及其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药在制备用作癌症治疗附加剂的药物中的用途 其中A和B合在一起表示取代或未取代的稠合的芳香族环；Rc用-L-RL表示，其中L是式-(CH2)n1-Qn2-(CH2)n3-其中n1、n2和n3分别选自0、1、2和3，n1、n2和n3的总和是1、2或3，Q选自O、S、NH或C(＝O)；和RL是取代或未取代的C5-20芳基；RN选自氢、取代或未取代的C1-7烷基、C3-20杂环基和C5-20芳基、羟基、醚、硝基、氨基、酰氨基、巯基、硫醚、亚砜和砜。
3.权利要求2所述的用途，其中所述附加剂用于和电离辐射联合使用。
4.权利要求2所述的用途，其中所述附加剂用于和化疗剂联合使用。
5.权利要求1至4中任何一项所述的用途，其中-A-B-所表示的稠合的芳香族环仅由碳环原子组成。
6.权利要求5所述的用途，其中-A-B-所表示的稠合的芳香族环是苯。
7.权利要求5或权利要求6所述的用途，其中所述的环是未取代的。
8.权利要求1至7中任何一项所述的用途，其中RN是氢。
9.权利要求1至8中任何一项所述的用途，其中L是下式-(CH2)n1-Qn2-，其中n1选自0、1、2和3且n2选自0和1，其中n1和n2的总和为1、2或3。
10.权利要求9所述的用途，其中n1是1。
11.权利要求10所述的用途，其中L是-CH2-。
12.前述权利要求中的任何一项所述的用途，其中RL是苯环。
13.权利要求12所述的用途，其中RL被一个或多个选自下列的取代基取代C1-7烷基、C5-20芳基、C3-20杂环基、卤素、羟基、醚、硝基、氰基、羰基、氨基、酰基氨基、酰氧基、巯基、硫醚、亚砜和砜。
14.权利要求13所述的用途，其中RL被选自下列的取代基取代酰基氨基、脲基、磺酰氨基和酰氧基。
15.下式化合物及其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药 其中A和B合在一起表示取代或未取代的稠合的芳香族环；Rc是-CH2-RL；RL是取代或未取代的苯基；且RN是氢。
16.权利要求15所述的化合物，其中-A-B-所表示的稠合的芳香族环仅由碳环原子组成。
17.权利要求16所述的化合物，其中-A-B-所表示的稠合的芳香族环是苯。
18.权利要求16或权利要求17所述的化合物，其中所述的环是未取代的。
19.权利要求15至18中任何一项所述的化合物，其中RL被一个或多个选自下列的取代基取代C1-7烷基、C5-20芳基、C3-20杂环基、卤素、羟基、醚、硝基、氰基、羰基、氨基、酰基氨基、酰氧基、巯基、硫醚、亚砜和砜。
20.权利要求19所述的化合物，其中RL被选自下列的取代基取代酰基氨基、脲基、磺酰氨基和酰氧基。
21.一种包含权利要求15至20中任何一项所述的化合物和可药用载体或稀释剂的药物组合物。
22.权利要求15至20中任何一项所述的化合物在治疗人或动物体的方法中的用途。
全文摘要
本发明公开了具有权利要求中所示结构式的化合物及其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药在制备用于抑制PARP活性的药物中的用途，其中A和B合在一起表示取代或未取代的稠合的芳香族环；R
文档编号C07D409/14GK1473154SQ0181835
公开日2004年2月4日 申请日期2001年10月25日 优先权日2000年10月30日
发明者N·M·B·马丁, N M B 马丁, G·C·M·史密斯, M 史密斯, C·R·怀特, 怀特, R·F·牛顿, 牛顿, D·G·道格拉斯, 道格拉斯, P·J·埃弗斯利, 埃弗斯利, J·维莱 申请人:库多斯药物有限公司, 梅布瑞有限公司