专利名称：一种新的化合物司丹托宁及其制法和其药物组合物与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的化合物-3β-羟基-18-过氧羟基-15，20α18，20β-二环氧-13，1414，15-二断孕甾-5，12-二烯-14-羧酸-16-氧内酯，其制备方法，含有它的药物组合物，和在制备舒张血管药物中的应用。
背景技术：
柳叶白前Cynanchum stauntonii(decne.)Schltr.ex Lev是中药白前的基源植物之一，为直立半灌木，高30～60cm。茎圆柱形，有细棱。叶对生，披针形或线状披针形，长6～13cm，宽0.3～0.5cm，两端渐尖，中脉明显。聚伞花序腋生，有花3～8；花萼5深裂；花冠紫红色，辐射状，内面被长柔毛，裂片狭三角形；副花冠裂片盾状，先端稍厚而内卷；雄蕊5，与雌蕊合生成蕊柱，花药2室；柱头微凸，包于花药的薄膜内。骨突果单生。花期5～8月，果期9～10月。生于溪畔、河边、山谷阴湿处。主产浙江、安徽、福建、江西、湖北、湖南、广西、河南等省。具有止咳、化痰、镇痛、消炎功能。中医用于治疗水肿、腮腺炎、支气管炎等。在其化学成分研究方面，至今报道很少，仅教科书有记载其含有皂苷类成分。
心脑血管疾病是威胁21世纪人类生命健康的最严重、最常见的疾病，其患病率和死亡率均占各类疾病之首，被誉为″21世纪生命的第一杀手″。统计资料表明从1991年到1999年间我国成年男性因心脑血管疾病而死于脑卒中的比例为45％，女性为41％；死于冠心病的男性和女性均为15％。近十年来，随着膳食结构的变化和生活运动方式的改变，我国心脑血管疾病的发病率和死亡率均呈上升趋势，已成为严重影响我国人民健康和制约经济发展的最严重的潜在危险因素之一。其中我国高血压不仅发病人数最多(已超过1亿)，而且已证实是多种心血管疾病的共同的危险因素。它可以诱发人体动脉血管硬化、脑卒中和心肌梗塞，引起心肾功能衰竭，造成多器官的损害。
具有舒张血管功能的制剂是临床上治疗一些较常见的心血管疾病，如各种类型的心绞痛、冠心病、心肌缺血、充血性心力衰竭、高血压急症等的基本药物。按其化学结构和作用机理可分为3类硝酸酯类、α肾上腺素能受体阻滞剂和影响肾素--血管紧张素-醛固酮系统的药物。临床上较常见的制剂有硝酸甘油、消心痛、哌唑嗪、三甲唑嗪、吲哚拉明、肌丙抗增压素、巯甲丙脯酸、乙丙脯氨酸等。
尽管至今已经开发了上述诸多药物，但是，由于上述药物在防治疾病的同时，仍不同程度地产生一些副作用，如三类血管扩张剂均可引起低血压、心动过缓或过急速、心律失常、循环虚脱、变性血红蛋白含量增加、心室颤动、颅内压增高、嗜睡、性功能紊乱、肾功能减退等，因此，继续寻找和开发具有适当舒张血管活性的、安全有效的血管扩张剂是非常必要的。
国内目前在舒张血管药物的研制方面以中药居多，化学药无新药问世。研制最多的是一些已知具有舒张血管，改善供血功能药物的剂型改进。没有全新的舒张血管，改善供血功能的化学实体出现。
发明内容
为了克服现有舒血管药物的过度舒张血管的不良反应，本发明的目的在于提供一种新的具有适当的舒张血管活性的化合物司丹托宁。
本发明的另一目的在于提供一种制备这种化合物的方法。
本发明的又一目的在于提供一种药物组合物，包括作为活性成分的本发明化合物和制药领域中常用的载体。
本发明的再一目的在于提供司丹托宁在制备具有舒张血管功能的药物中的应用。
具体讲，本发明涉及的化合物司丹托宁的结构如式(1)所示 命名3β-羟基-18-过氧羟基-15，20α18，20β-二环氧-13，1414，15-二断孕甾-5，12-二烯-14-羧酸-16-氧内酯为完成本发明的目的，本发明采用如下的技术方案取柳叶白前(Cynanchum stauntonii(decne.)Schltr.ex Lev)的植株，包括植株的整体或部分，例如叶、茎、皮、根均可作为原料，优选柳叶白前的根茎为原料，原料适度干燥。为提高提取的效率可以适当粉碎，以利于增大与溶剂的接触面积，提高效率。
提取原药材的提取溶剂使用水、有机溶剂或两者的混合物，有机溶剂包括醋酸乙酯、氯仿、石油醚、醇类。优选的提取溶剂是水与醇类的混合物，例如含有醇1-95％(体积比)的水；优选的醇类包括甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇，最优选的是乙醇。提取溶剂的量为原药重量的1-14倍，每次加入提取溶剂的量最好没过药材原料。提取可以在静态或动态下，优选在动态条件下。为了提高提取的效率，可以使用超声波等。提取的温度是从室温(例如20℃)到溶剂回流温度的范围内，优选在回流的温度下。提取可连续或间歇进行，间歇提取时可重复1-4次，提取结束后，回收溶剂得粗浸膏。粗浸膏可用水或含水的乙醇或甲醇重新溶解，优选是醇浓度为50-90％。然后用低级性的有机溶剂萃取以除去粗浸膏中的低级性成分，优选的低级性有机溶剂包括苯、环己烷、石油醚、溶剂油，更优选的是石油醚、溶剂油，最优选的是石油醚。所用的低级性有机溶剂量可以是粗浸膏醇溶液的1-6倍。萃取的次数为2-5遍，优选是3-4次。萃取完成后弃去低级性有机溶剂部分。醇溶液部分进行浓缩，并转移到蒸发皿中进一步蒸干，得二级浸膏。
上步所得的二级浸膏用水溶解，水溶液再用有机溶剂萃取，保留有机溶剂层，弃去水层以除去水溶性成分。优选的有机溶剂包括醋酸乙酯、氯仿、乙醚、苯、二氯甲烷，更优选的是醋酸乙酯。可以萃取1-6次，优选是2-5次，更优选是3次。每次萃取使用的有机溶剂的量是水体积的0.1-5倍，优选是0.2-1.5倍。合并有机溶剂萃取液并可以先用NaHCO3水溶液萃取、再用H2O洗涤至中性。最后浓缩蒸干得总提物。
总提物用少量有机溶剂溶解，优选是有机溶剂甲醇。用2-13倍重量的硅胶拌样，用硅胶柱色谱法分离。分离用硅胶的重量是上样量的15-80倍，优选是20-30倍，硅胶的规格可以是柱色谱或薄层色谱用硅胶，优选是200-300目柱色谱硅胶。硅胶柱的洗脱液可以使用极性从小到大的溶剂洗脱，优选的洗脱液是石油醚-醋酸乙酯或石油醚-丙酮混合溶剂，其体积比例可以从9∶1开始，逐步增加醋酸乙酯或丙酮的含量，以提高极性。石油醚-醋酸乙酯的比例可以按9∶1，8∶1，7∶1，6∶1……逐步变大。当石油醚∶醋酸乙酯按体积比调为5∶1，比重为0.708g/cm3时，不久即洗脱得到含本发明化合物的洗脱流分。分别回收各洗脱流份的洗脱溶剂，含有本发明化合物的流份即有结晶析出，并可用有机溶剂如醋酸乙酯、甲醇、丙酮等重结晶，得本发明的化合物，为无色棱晶。当然也可以使用其他方法检测本发明化合物的流出，例如核磁共振技术等。也可以合并含有本发明化合物的洗脱流份，减压浓缩。残余物用少量醋酸乙酯溶解，放置，结晶，过滤，得本发明的化合物根据本发明还涉及含有作为活性成份的本发明的化合物和常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1-95重量％的本发明化合物。
本发明化合物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明化合物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。
本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等，优选口服。
本发明化合物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射和皮内注射等。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。
本发明化合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。其它载体如聚丙烯酸树脂类、脂质体，水溶性载体如PEG4000和PEG6000、PVP等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
例如为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。
例如为了将给药单元制成胶囊，将有效成分即本发明化合物与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
例如，将本发明化合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。这些辅料是本领域常用的。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。
为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
本发明化合物、药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次数、治疗目的，因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。一般来讲，本发明中药学成分的使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明化合物组合物中最后的制剂中所含有的实际药物数量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防或治疗目的。本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.01-100mg/Kg体重，更优选为0.01-60mg/Kg体重，最优选为0.1-10mg/Kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药，这受限于给药医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。
药理学试验结果表明1.司丹托宁对内皮完整大鼠主动脉血管环的舒张作用司丹托宁能够浓度依赖性地舒张苯肾上腺素所致血管收缩，pIC50为5.24±0.87(n＝7)。
2.司丹托宁对去内皮大鼠主动脉血管环的舒张作用司丹托宁在较低浓度时(10-8～10-5M)舒张血管的作用不强，但在10-4M浓度下，仍能够舒张血管达64.78±26.87％。
3.司丹托宁对高钾(100nM)所致大鼠主动脉收缩的作用在较低浓度下，司丹托宁作用很弱，而在10-4M浓度下可舒张血管达53.41±7.28％。
从实验结果看出，司丹托宁可对抗苯肾上腺素、高钾引起钙通道开放所致血管收缩的作用。
具体实施例方式
下面的实施例及药物活性实验用来进一步说明本发明，但这并不意味着对本发明的任何限制。
实施例1、本发明化合物的制备取干燥的柳叶白前(Cynanchum stauntonii(decne.)Schltr.ex Lev)根5kg，用95％酒精加热回流提取，共提取3次，每次加入酒精量以刚没过白前样品为准。过滤，合并3次提取液，减压浓缩回收酒精。
提取物用2500ml约80％的酒精重新溶解，然后用石油醚萃取4遍，第一次萃取用1500ml石油醚，后三次各用1000ml。弃去石油醚部分。酒精部分进行浓缩，并转移到蒸发皿中进一步蒸干，然后重新用2500ml水溶解，再用乙酸乙酯进行萃取，共萃取3次，每次用1000ml有机溶剂，合并3次乙酸乙酯萃取液。将乙酸乙酯用5％NaHCO3水溶液、H2O各洗3次，每次均用1500ml。最后将乙酸乙酯溶液浓缩蒸干并称重得22g总提物。
将总提物用少量甲醇加热溶解，加40g硅胶(200-300目)拌样后上柱(硅胶用量为500g)。用石油醚-醋酸乙酯混合溶剂按极性递增(9∶1，8∶1，…)进行洗脱。将石油醚∶醋酸乙酯按体积比调为5∶1，比重为0.708g/cm3时，不久即洗脱得到该化合物的流分；将洗脱剂回收后，残余物用少量醋酸乙酯溶解，放置结晶；将结晶过滤得无色棱晶，即得式(I)化合物。
mp173-175°分子式C21H28O7IR v max KBr cm-13398，3170(OH)，2941，1724(C＝O)，1631(C＝C)，1486，1385，1365，1132和1043。
FAB-MS m/z375[M+H-H2O]+和359[M+H-H2O2]+。
EI-MS m/z374，358，340，191，166，145(100)，83。
1H和13C NMR数据见表1。
表1司丹托宁的1H(500MHz)和13C NMR(125MHz)光谱数据原子δCDEPTδHJH-H(Hz)1H-1HCOSY中的偶合1 38.4 CH2Hα:1.18 td 13.5，4.0 H-1β，H-2α，H-2βHβ1.93 dt 13.5，3.5 H-1α，H-2α，H-2β2 32.3 CH2Hα1,80 br d 13.5，H-1α，H-1β，H-2βHβ1.47 tdd 13.5，11.0，4.0 H-1α，H-1β，H-2α3 71.9 CH Hα3.39 tt 11.0，4.5 H-2α，H-2β，H-4α，H-4β4 42.7 CH2Hα2.28 ddd 13.0，5.0，2.0H-3α，H-4β，Hβ2.17 overlappedH-3α，H-4α，H-65 141.4 C6 120.6 CH 5.32 br sH-4β，H2-77 30.9 CH2Hα2.17 overlappedH-6，H-8βHβ2.17 overlapped8 42.4 CH Hβ2.37dt11.5，5.0H2-7，H-9α
9 53.2CH Hα1.84，td 11.5，5.5H-8β，H-11α，H-11β1038.6C1130.2CH2Hα2.48 dt 13.0，4.5H-9α，H-11β，H-12Hβ2.41 br t12.0 H-9α，H-11α，H-1212134.3 CH 5.35 br d 12.5 H-11α，H-11β，H-18，H-17α13139.5 C14180.8 C1571.2CH2Hα4.33 dd 10.0，7.5H-15β，H-16αHβ2.85 dd 10.0，5.0H-15α，H-16α1678.9CH Hα5.53 td 7.5，4.5 H-15α，H-15β，H-17β1756.6CH Hα3.20 br d8.0 H-12，H-16α18107.5 CH Hβ5.75 br s H-121920.3CH31.06 s20116.1 C2124.1CH31.54 s结构确证其IR光谱给出羟基(3398cm-1和3170cm-1)、羰基(1724cm-1)和双键(1631cm-1)的吸收峰。
FAB-MS中有375[M+H-H2O]+和359[M+H-H2O2]+的离子碎片，表明其含有过氧羟基(参考，El-Feraly，F.S.，Chan，Y.M.，1977，Peroxycostunolide and peroxyparthenolidetwo cytotoxic germacranolidehydroperoxide from Magnolia grandiflora.Structural revision of verlotorinand artemorin.Tetrahedron Lett(23)，1973-1976)。
13C NMR谱显示21个碳信号(表1)。
在其1HNMR谱中，19位和21位的2个与季碳相连的甲基的单峰δ1.54和1.06(各3H，s，CH3-19，21)，1个连羟基的次甲基δ3.39(1H，tt，J＝11.0，4.5Hz，H-3α)和1个CH-CHO-CH2O系统δ3.20(1H，br d，J＝8.0Hz，H-17α)，4.33(1H，dd，J＝10.0，7.5Hz，H-15α)，3.86(1H，dd，J＝10.0，5.0Hz，H-15β)和5.53(1H，td，J＝7.5，4.5Hz，H-16α)可以很容易地得到辨认。结合13C和DEPT NMR谱以及HMQC实验还可以判断司丹托宁含有1个连有2个氧原子的次甲基δ5.75(1H，br s，H-18β)、2个不饱和次甲基δ5.35(1H，br d，J＝12.5Hz，H-12)和5.32(1H，br s，H-6)、2个饱和次甲基δ2.37(1H，m，H-8β)和1.85(1H，dd，J＝11.5，5.5Hz，H-9α)以及5个饱和亚甲基δ1.18(1H，td，J＝13.5，4.0Hz，H-1α)、1.93(1H，dt，J＝13.5，3.5Hz，H-1β)、1.80(1H，br d，J＝13.5，H-2α)、1.47(1H，tdd，J＝13.5，11.0，4.0Hz，H-2β)、2.28(1H，ddd，J＝13.0，5.0，2.0Hz，H-4α)、2.17(3H，m，H-4β，H-7α，H-7β)、2.48(1H，dt，J＝12.5，4.5Hz，H-11α)和2.41(1H，br t，J＝12.0Hz，H-11β)的共振信号。另外，DEPT谱还显示司丹托宁含有1个羰基δ180.8(C-14)、2个不饱和季碳δ141.4(C-5)和139.5(C-13)以及2个饱和季碳δ38.6(C-10)和116.1(C-20)。
在司丹托宁的COSY1H-1H谱中，除了19位和21位的2个与季碳相连的甲基的单峰外，其余信号构成了一个大的自旋系统；其中H-18β由于连有2个氧原子，其共振信号出现在最低场，并显示出与H-12的丙烯体系偶合的交叉峰。由此开始，可以归属分子中所有其他质子的共振信号。谱中所有的1H-1H COSY相关信号见表1。
司丹托宁的HMBC谱给出了其分子中碳原子的连接方式，而其NOESY谱则表明了分子的相对构型；司丹托宁的C-H远程相关和NOE相关分别为 司丹托宁主要HMBC相关 司丹托宁的NOE相关司丹托宁最后的结构确证是通过其X-射线单晶结构分析完成的，其晶体结构为。
通过光(波)谱分析，将司丹托宁的结构鉴定为3β-羟基-18-过氧羟基-15，20α18，20β-二环氧-13，1414，15-二断孕甾-5，12-二烯-14-羧酸-16-氧内酯。
结构式为
药理实验实验例1化合物司丹托宁对α受体激动剂所致大鼠主动脉收缩的影响试验材料实验动物Wistar大鼠，雄性，体重180～200g左右，购自医科院动物中心。
药品及试剂苯肾上腺素(pheylephrine，phe)，Sigma公司提供。其他试剂均为市售国产分析纯。试验化合物为实施例1制备。
仪器恒温水槽，上海科乐理化机械厂；BIOPAC system多道生物信号分析系统，美国；JZ101型肌肉张力换能器，高碑店市新航机电设备有限公司。10mL玻璃浴皿。
试验方法击昏大鼠，颈动脉放血。取大鼠胸主动脉，分离附着组织，剪成3～5mm的血管环。置充满K-H营养液的10mL浴皿中，恒温37℃，调节静息张力1g，平衡1小时，其间每20分钟换一次营养液。用Phe(10-7M)预处理两次，血管环使其收缩至平台，然后开始实验。
浓度累加化合物司丹托宁(10-8～10-4M)，记录舒张数值，求算pIC50(为IC50，mol/ml的负对数值)。
并以硝酸甘油作为阳性对照。
去内皮血管重复上述试验过程。(是否有硝酸甘油对照)表2司丹托宁对内皮完整和去内皮大鼠主动脉血管环的舒张作用(均值±方差)。
司丹托宁硝酸甘油浓度-lgC，M 舒张百分率％ 浓度-lgC，M舒张百分率％内皮完整去内皮-10 6.74±3.288 9.71±6.46 4.26±3.50-9.520.89±14.337 19.39±9.39 6.29±4.66-9 30.43±19.666 19.17±17.338.25±3.84-8.540.87±22.835 64.73±20.078.96±5.48-8 57.64±30.014 71.93±14.5664.78±26.87 -7.571.52±31.16-7 86.10±24.28-6.590.48±0pIC505.24±0.87 --pIC508.28±0.63
结论对于内皮完整的血管环，司丹托宁能够浓度依赖性地舒张Phe所致血管收缩，pIC50为5.24±0.87(n＝7)。
对于去内皮血管环，司丹托宁在较低浓度时(10-8～10-5M)舒张血管的作用不强，但在10-4M浓度下，仍能够舒张血管达64.78±26.87％。
司丹托宁对血管有一定的舒张作用，在较低浓度下，可能为内皮依赖性地舒张作用，而在高浓度下，可能直接舒张血管平滑肌。因此，能够对抗Phe所致去内皮血管所致血管的收缩作用。结果看出，司丹托宁可对抗α受体激动剂引起钙通道开放所致血管收缩的作用。
实验例2化合物司丹托宁对高钾所致大鼠主动脉收缩的影响(内皮完整？)试验材料实验动物Wistar大鼠，雄性，体重180～200g左右，购自医科院动物中心。
药品及试剂试验化合物为实施例1制备，其他均为市售国产分析纯。
仪器恒温水槽，上海科乐理化机械厂；BIOPAC system多道生物信号分析系统，美国；JZ101型肌肉张力换能器，高碑店市新航机电设备有限公司。10mL玻璃浴皿。
试验方法击昏大鼠，颈动脉放血。取大鼠胸主动脉，分离附着组织，剪成3～5mm的血管环。置充满K-H营养液的10mL浴皿中，恒温37℃，调节静息张力1g，平衡1小时，其间每20分钟换一次营养液。以高钾(100nM)收缩血管至平台，然后开始实验。
浓度累加化合物司丹托宁(10-8～10-4M)，记录舒张数值，并以维拉帕米作为阳性对照。
表3司丹托宁对高钾(100nM)所致大鼠主动脉收缩的作用(均值±方差)。
浓度-lgC，M 舒张百分率％司丹托宁 维拉帕米
80 3.00±1.8070 46.52±16.1860 97.36±8.5153.65±5.67 --453.41±7.28 --结论对于高钾所引起的血管收缩，在较低浓度下，司丹托宁作用很弱，而在10-4M浓度下可舒张血管达53.41±7.28％。维拉帕米剂量依赖性舒张高钾引起的血管收缩，在10-6M浓度下血管舒张达到97.36±8.51(见表3)。从实验结果看出，司丹托宁可对抗高钾引起钙通道开放所致血管收缩的作用。
权利要求
1.一种如式(I)所示的化合物
2.制备如权利要求1所述的化合物的方法，其特征在于(a)柳叶白前(Cynanchum stauntonii(decne.)Schltr.ex Lev)，加溶剂提取，过滤，合并提取液，浓缩得一级提取物；(b)一级提取物用醇溶解，然后用弱极性有机溶剂萃取，弃去弱极性有机溶剂部分；醇溶液浓缩至干得二级提取物；(c)二级提取物用水溶解，再用有机溶剂进行萃取，合并有机溶剂萃取液浓缩至干得总提物；(d)总提物用硅胶柱分离，用洗脱剂按极性递增进行洗脱，得到含该化合物的流分；(e)将洗脱剂回收后，残余物用少量结晶溶剂溶解，放置结晶，过滤得结晶为司丹托宁。
3.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，所述的柳叶白前(Cynanchumstauntonii(decne.)Schltr.ex Lev)是柳叶白前的根。
4.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(a)步骤中的提取溶剂选自水、有机溶剂或两者的混合物。
5.根据权利要求4的制备方法，其特征在于，所述的有机溶剂选自醋酸乙酯、氯仿、石油醚、醇类。
6.根据权利要求5的制备方法，其特征在于，所述的醇类包括甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇。
7.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(b)步骤中选用的醇是纯的或含水的甲醇或乙醇。
8.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(b)步骤中所述的弱极性有机溶剂包括苯、环己烷、石油醚、溶剂油。
9.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(C)步骤中有机溶剂萃取液在浓缩前用NaHCO3水溶液、H2O萃取。
10.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(C)步骤中所述的有机溶剂选自醋酸乙酯、氯仿、乙醚、苯、二氯甲烷。
11.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(d)步骤中所述的硅胶的重量是总提物的15-80倍、所述硅胶的规格是200-300目。
12.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(d)步骤中所述的洗脱液选自石油醚-醋酸乙酯、石油醚-丙酮混合溶剂。
13.根据权利要求12的制备方法，其特征在于，洗脱液体积比例是从9∶1开始，逐步增加醋酸乙酯或丙酮的含量。
14.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，(e)步骤中所述的结晶所用的溶剂为选自醋酸乙酯、甲醇、丙酮。
15.权利要求1所述的化合物在制备具有舒张血管功能的药物中的应用。
16.一种舒张血管的药物组合物，其特征在于，含有药物有效剂量的如权利要求1所述的化合物，及药用载体。
17.根据权利要求16的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物可以是片剂、胶囊、丸剂、注射剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。
全文摘要
本发明涉及式(I)所示的化合物司丹托宁，其制备方法，含有它们的药物组合物，及其作为药物，尤其是作为舒张血管药物的用途。
文档编号C07D493/00GK1623994SQ20031011688
公开日2005年6月8日 申请日期2003年12月2日 优先权日2003年12月2日
发明者秦海林, 王鹏, 李志宏, 朱海波, 张岭 申请人:中国医学科学院药物研究所