抗凝化合物、组合物及其用途的制作方法

专利名称：：抗凝化合物、组合物及其用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种抗凝化合物，具体涉及一种新的香豆素类衍生物。技术背景凝血功能的障碍可以导致中风、心肌梗死以及外周动脉阻塞性疾病等严重危害人体健康的疾病。尽管目前有肝素和口服香豆素等药物可用于抗凝血，但这些药物自身存在的毒副作用一直是临床大夫头痛的问题。随着医药基础研究的不断推进，人们对参与凝血过程的多种酶、活性因子以及相关受体的认识逐渐深入。以下是用于抗凝血作用的几种常用药物。凝血酶抑制剂。凝血酶是丝氨酸蛋白酶，它是凝血级联反应中的关键酶。凝血酶可以将可溶性的纤维蛋白原转变为不溶的纤维蛋白，还可激活凝血因子v、M、xi和xn。静脉用肝素和口服香豆素都是常用的凝血酶间接抑制剂。随着对凝血酶三维结构的了解，陆续开发了一些与凝血酶特异性结合的直接抑制剂。RWJ-27755、阿加曲班、Hirugen、Aptamers、水蛭素以及水蛭素衍生多肽都是凝血酶的直接抑制剂能与催化位点结合。这些药物的主要优点是可以抑制与凝血块结合的凝血酶，但缺点是比较昂贵，而且半衰期比较短，只适用于急性治疗。阿加曲班已经上市用于治疗外周动脉阻塞性疾病以及急性心肌梗死。除了直接抑制凝血酶的活性之外，另外一个途径是开发凝血酶受体阻断剂。凝血酶可以通过细胞表面的凝血酶受体激活多种类型细胞，如血小板、血管平滑肌细胞等。由于凝血酶受体阻断剂并不影响纤维蛋白原-纤维蛋白途径，因此在完成特定的生物学作用时引起出血的可能性很小。现在开发的凝血酶受体阻断剂分为3类多肽类阻断剂、多肽模拟物阻断剂和非肽类受体阻断剂。Xa因子抑制剂。一个Xa因子可以催化138个凝血酶分子，因此Xa因子抑制剂是抗凝血药开发中一个诱人的方向。目前开发方向集中于非肽类、具有口6说明书第2/28页服活性的Xa因子直接抑制剂。随着对Xa因子晶体结构的了解，一些位点选择性的抑制剂也在开发之中。组织因子抑制剂。组织因子(TF)是细胞因子超家族的一个成员，其存在于脉管系统外的某些细胞表面上。当血管损伤后，TF可以和血液中的VH和VIIa因子高特异性高亲和性结合，并进一步激活凝血酶。Vila因子是一种弱丝氨酸蛋白酶，但在和TF结合后其酶活性可以增强100万倍。一旦TF:VIIa复合物形成，可以通过两种途径触发凝血级联反应。因此，抑制组织因子的活性也是抗凝血药的开发途径之一。目前还没有合成的TF抑制剂，但在内皮细胞上发现了生理性的TF通路抑制剂(TFPI)，其可以预防血栓形成。目前已经开发了基因重组的TFPI(rTFPI)，在动物模型上显示出预防急性血管内血栓形成的能力。另外，与凝血酶直接抑制剂不同，rTFPI并不引起出血时间的延长。纤溶酶原激活物抑制因子-1抑制剂。血栓的形成和清除通过tPA和PAI-1之间的平衡来调节。前者介导纤溶酶的产生，后者是裂解纤维蛋白，是血管再通的关键因子。在一些病理情况下，如静脉血栓、不稳定心绞痛、急性心肌梗死，PAI-1的水平都有可能升高。直接注射溶栓药物，如链激酶、尿激酶以及tPA可能引起严重的出血不良反应，而通过抑制PAI-1来达到溶栓目的更安全。PAI-1抑制剂包括三类，一类是针对PAI-1基因的反义核酸抑制剂，一类是针对PAI-1蛋白的抗体，还有一类是可以结合PAI-1的小分子化合物。血小板膜gpIIb/IIIa受体拮抗剂。gpIIb/IIIa受体是纤维蛋白原整合素受体，纤维蛋白原a链的精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(RGD)序列介导纤维蛋白原和gpIIb/IIIa受体的结合，这是血小板激活反应的最后一步。Centocor/礼来公司的血小板膜IIb/IIIa抑制剂一单克隆抗体ReoPro(Abciximab)是这一类药中的第一个成员。该药可以有效降低经皮冠状动脉成形术后的缺血并发症，虽然2001年7月报道的GUSTOIV-ACS临床试验结果表明Abciximab对不稳定心绞痛患者并无所预想的疗效，而且Abciximab针对急性心肌梗死的GUST0V试验也遭遇到失败(在该项试验中ReoPro与半剂量的Ret印lase联合应用治疗急性心肌梗死，但结果表明与全剂量Ret印lase单独使用相比，联合治疗组30天死亡率并没有明显降低)。但作为新一类抗血小板药，Abciximab在某些适应证上疗效显著，是现有抗血小板药的有力竞争对手。其它gpIIb/IIIa受体拮抗剂含包括环七肽Eptifibatide和非肽类RGD序列模拟物替罗非班(Tirofiban)。Eptifibatide是从一种响尾蛇的毒液中提取的一种称为Barbourin的物质经合成制得，其可用于治疗不稳定型心绞痛和心肌梗死(MI)引发的并发症。替罗非班是由默克公司开发的非肽类血小板膜IIb/IIIa受体拮抗剂，用于治疗急性心肌梗死和不稳定性心绞痛，1998年5月在美国上市。口服血小板膜IIb/IIIa受体拮抗剂生物利用度不够理想，半衰期短，而且与受体的解离速度也快。二磷酸腺苷受体拮抗剂。二磷酸腺苷(ADP)存在于血小板细胞内的高密度颗粒内，当血小板发生凝聚反应时被释放，ADP可通过血小板膜上的ADP受体对血小板的形状以及生物学行为产生影响，从而进一步加速血小板的凝聚过程。血小板膜上有3种ADP受体，即P2Y1、P2Y12和P2X1。P2Y1存在于血小板和血管内皮细胞，而P2Y12仅存在于血小板膜上，因此P2Y12拮抗剂可以抑制血小板聚集而不影响ADP介导的血管反应。目前，P2Y12拮抗剂类药物有氯吡格雷(Clopidogrel)、噻氯匹定(Ticlopidine)以及CS-747。P2Y1拮抗剂也有显著的抗凝效应，目前这一类化合物包括A2P5P(2'，5，-二磷酸腺苷)和A3P5P(3，，5，-二磷酸腺苷)以及MRS-2197。虽然上述抗凝药物具有一定的抗凝效果，但是目前本领域还需要抗凝效果更好、副作用更少、毒性更小、使用更方便且制备容易的药物。
发明内容为了解决上述技术问题，本发明的发明人经过大量研究发现，一些香豆素类衍生物具有非常好的抗凝效果，且其副作用更少、毒性更小、使用更方便且帝'J备容易。本发明提供了一种下式I表示的化合物或其药学上可接受的盐，式I式中X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的C1一C10烷基、取代或未取代的C6—C10芳基、取代或未取代的C3—C10环烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的C2—C10烯基、取代或未取代的CI-C10烷氧基或取代或未取代的C2-C10炔基；R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1一C10垸基、取代或未取代的C1一C10烷氧基、取代或未取代的C6—C10芳基、取代或未取代的C3—C10环烷基和取代或未取代的杂芳基；上述取代基可以是相同或不同，各自选自氢、卤素、羟基、C1一C10烷基、C1一C10烷氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。在本发明的一个优选实例中，X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的C1一C6垸基、取代或未取代的C6—C9芳基、取代或未取代的C3一C6环烷基、取代或未取代的五元环或六元环杂芳基、取代或未取代的C2—C6烯基、取代或未取代的Cl-C6烷氧基或取代或未取代的C2-C6炔基；X和Y优选各自选自氢、取代或未取代的Cl-C4烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的C3-C5环烷基、取代或未取代的五元环杂芳基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的CI-C4烷氧基或取代或未取代的C2-C4炔基；X和Y最好各自选自氢、取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的丙基、取代或未取代的丁基、苯基、垸基取代的苯基、垸氧基取代的苯基、取代或未取代的环戊烷基、取代或未取代的乙烯基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的乙炔基、取代或未取代的的甲氧基、取代或未取代的乙氧基、取代或未取代的丙氧基、取代或未取代的丁氧基、取代或未取代的呋喃基和取代或未取代的吡咯基。、在本发明的一个优选实例中，R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1一C6烷基、取代或未取代的C1一C6烷氧基、取代或未取代的C6—C8芳基、取代或未取代的C3—C6环垸基和取代或未取代的五元环或六元环杂芳基；R优选选自氢、齒素、羟基、取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的丙基、取代或未取代的丁基、取代或未取代的甲氧基、取代或未取代的乙氧基、取代或未取代的丙氧基、取代或未取代的丁氧基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的环丙基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的呋喃基和取代或未取代的吡咯基。在本发明的一个优选实例中，所述取代基选自氢、氧、卤素、羟基、ci一C6垸基、C1一C6烷氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基；所述取代基更好选自氢、氧、卤素、羟基、C1一C4烷基、C1一C4垸氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。所述取代基最好选自氢、氧、卤素、羟基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基和甲酰胺基。本发明还提供了一种用于抗凝血的药物组合物，所述组合物包含本发明所述化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。在本发明的一个优选实例中，药物组合物为粒剂、粉剂、片剂、胶囊、糖浆、栓剂、注射剂、乳剂、酊剂、悬浮液、溶液的形式口服或非口服剂型。本发明所述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗凝血药物中的用途。在本发明的一个优选实例中，所述抗凝血药物用于预防和治疗血栓栓塞性疾病；预防和治疗手术后或创伤后的静脉血栓形成；预防和治疗心肌梗塞；预防血栓栓塞病患者的并发症及术后血栓并发症。附图简述图1是实施例1所得化合物的核磁共振图。图2是实施例2所得化合物的核磁共振图。图3是实施例3所得化合物的核磁共振图。图4是实施例4所得化合物的核磁共振图。图5是实施例5所得化合物的核磁共振图。图6是实施例6所得化合物的核磁共振图。图7是实施例7所得化合物的核磁共振图。图8是实施例8所得化合物的核磁共振图。图9是实施例9所得化合物的核磁共振图。具体实施例方式目前商业上使用的一种抗凝药物是华法林，但是华法林过量使用易致各种出血。早期表现有瘀斑、紫癜、牙龈出血、鼻衄、伤口出血经久不愈、月经量过多等。出血可发生在任何部位，特别是泌尿和消化道。肠壁血肿可致亚急性肠梗阻，也可见硬膜下颅内血肿和穿刺部位血肿。偶见不良反应有恶心、呕吐、腹泻、瘙痒性皮疹、过敏反应及皮肤坏死。大量口服华法林甚至出现双侧乳房坏死、微血管病或溶血性贫血以及大范围皮肤坏疽；一次量过大的尤其危险。而且华法林对于个体差异较大，治疗期间应严密观察病情，并依据凝血酶原时间INR值调整用量。治疗期间还应严密观察口腔黏膜、鼻腔、皮下出血及大便隐血、血尿等，用药期间应避免不必要的手术操作，选期手术者应停药7天，急诊手术者需纠正PTINR值^1.6，避免过度劳累和易致损伤的活动。若发生轻度出血，或凝血酶原时间已显著延长至正常的2.5倍以上，应即减量或停药。严重出血可静注维生素K11020mg，用以控制出血，必要时可输全血、血浆或凝血酶原复合物。本发明在华法林原有的化学结构基础上，根据构效关系进行结构修饰，以提高或保持华法林原由的抗凝和抗血小板聚集功能，同时降低毒副作用。华法林原有的治疗窗范围窄，而且个体差异较大。而华法林衍生物(香豆素衍生物)可以扩大治疗窗范围，从而降低毒副作用，保证用药的安全性。在本发明中，除非另有说明，"垸基"指CI-C10的取代或未取代、直链或支链垸基，较好是C1-C8、更好具有C1-C6、最好是C1-C4的取代或未取代、直链或支链垸基。在本发明中，除非另有说明，"垸氧基"指CI-C10的取代或未取代、直链或支链烷基，较好是C1-C8、更好是C1-C6、最好是C1-C4的取代或未取代、直链或支链烷基。在本发明中，除非另有说明，"卤"或"卤素"指氟、氯、溴和/或碘。在本发明中，除非另有说明，"卤代"表示被一个或多个卤原子取代，例如一卤代、二卤代、全卤代(例如全氟)等。在本发明中，除非另有说明，"芳香基"或"芳基"指具有C6-C20的取11代或未取代芳香族基团，较好是C6-C16、更好是C6-C14、最好是C6-C10的取代或未取代的芳香族基团。例如苯基在本发明中，除非另有说明，"杂芳基"表示母环中具有一个或多个杂原子的芳基。所述杂原子可以是氧、硫和/或氮。在本发明中，除非另有说明，"酰基"表示下式的取代基-C(0)R"其中R为烷基。在本发明中，除非另有说明，"酰胺基"表示下式的取代基-C(0)NR2R3，其中&和Ri可以是相同或不同的，各自表示氢、烷基、烷氧基等，且&和R:,可以组合形成环。在本发明中，除非另有说明，"取代基"表示氢、氧、卤素、羟基、Cl一C10烷基、C1一C10烷氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。在本发明中，除非另有说明，百分含量以及份都表示重量。除非另有所述，本发明所述的所有较佳技术方案可以任意方式组合，组合而成的这些技术方案均包括在本发明所要求保护的范围内。本发明提供了一种下式I表示的化合物，式I式中X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的C1一C10垸基、取代或未取代的C6—C10芳基、取代或未取代的C3—C10环垸基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的C2—C10烯基、取代或未取代的C1-C10烷氧基或取代或未取代的C2-C10炔基；R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1一C10烷基、取代或未取代的C1一C10垸氧基、取代或未取代的C6—C10芳基、取代或未取代的C3—C10环垸基和取代或未取代的杂芳基；上述取代基可以是相同或不同，各自选自氢、卤素、羟基、C1一C10烷基、C1一C10烷氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。在本发明式I化合物中，X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的C1一C10垸基、取代或未取代的C6—C10芳基、取代或未取代的C3—C10环垸基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的C2—C10烯基、取代或未取代的CI-C10烷氧基或取代或未取代的C2-C10炔基。在一个优选的实例中，X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的C1一C6垸基、取代或未取代的C6—C9芳基、取代或未取代的C3—C6环垸基、取代或未取代的五元环或六元环杂芳基、取代或未取代的C2—C6烯基、取代或未取代的Cl-C6垸氧基或取代或未取代的C2-C6炔基。在本发明的另一个优选实例中，X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的Cl-C4垸基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的C3-C5环烷基、取代或未取代的五元环杂芳基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的CI-C4垸氧基或取代或未取代的C2-C4炔基。在本发明的另一个优选实例中，X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的丙基、取代或未取代的丁基、苯基、烷基取代的苯基、烷氧基取代的苯基、取代或未取代的环戊垸基、取代或未取代的乙烯基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的乙炔基、取代或未取代的的甲氧基、取代或未取代的乙氧基、取代或未取代的丙氧基、取代或未取代的丁氧基、取代或未取代的呋喃基和取代或未取代的吡咯基。在本发明中，R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1一C10烷基、取代或未取代的C1一C10垸氧基、取代或未取代的C6—C10芳基、取代或未取代的C3—C10环烷基和取代或未取代的杂芳基。在本发明的一个优选实例中，R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1一C6垸基、取代或未取代的C1一C6垸氧基、取代或未取代的C6—C8芳基、取代或未取代的C3—C6环烷基和取代或未取代的五元环或六元环杂芳基。在本发明的另一个优选实例中，R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1一C4烷基、取代或未取代的C1一C4烷氧基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的环丙基和取代或未取代的五元环杂芳基。在本发明的另一个优选实例中，R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的丙基、取代或未取代的丁基、取代或未取代的甲氧基、取代或未取代的乙氧基、取代或未取代的丙氧基、取代或未取代的丁氧基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的环丙基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的呋喃基和取代或未取代的吡咯基。在本发明中，上述取代基可以是相同或不同，各自选自氢、氧、卤素、羟基、C1一C10烷基、C1—C10烷氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。在本发明的一个优选实例中，所述取代基选自氢、氧、卤素、羟基、Cl一C6垸基、C1一C6垸氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。在本发明的另一个优选实例中，所述取代基选自氢、氧、卤素、羟基、Cl一C4烷基、C1一C4垸氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。在本发明的另一个优选实例中，所述取代基选自氢、氧、卣素、羟基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基和甲酰胺基。在本发明的一个优选实例中，所述式I化合物选自下式表示的化合物14<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>本发明的化合物还包括上述化合物的烯醇异构体或者其药学上可接受的盐，例如钠盐、钾盐等。可以认为，本发明所述化合物的烯醇异构体或其药学上可接受的盐也具有相同的技术效果。本发明另一方面提供了上述化合物在制备治疗和预防下列的药物中用途-预防和治疗血栓栓塞性疾病；预防和治疗手术后或创伤后的静脉血栓形成；预防和治疗心肌梗塞；预防血栓栓塞病患者的并发症及术后血栓并发症。本发明的化合物作用机制为竞争性对抗维生素K的作用，抑制肝细胞中凝血因子的合成，还具有降低凝血酶诱导的血小板聚集反应的作用，因而具有抗凝和抗血小板聚集功能。本发明还提供了包含上述化合物的药物组合物，所述药物组合物包括治疗有效量的式I所示的化合物以及治疗有效量的药学上可接受的载体。本发明所述的药物组合物可通过常规方法制成常用的药物剂型。常用的药物剂型包括粒剂、粉剂、片剂、胶囊、糖浆、栓剂、注射剂、乳剂、酊剂、悬浮液、溶液的形式口服或非口服给药。17对于口服给药，可使用片剂、锭剂、胶囊、丸剂、粉末、颗粒、糊剂、混悬剂、乳剂或者溶液剂。对于非胃肠道给药，可使用注射剂和输液剂。对于关节内注射，可使用相应配置的混悬剂。对于肌肉内注射，可使用水溶液和油溶液或者混悬剂以及相应的IC存库制剂。对于体外局部用药，可使用洗剂、霜剂和凝胶剂等。本发明的活性化合物可以配制成口服给药，颊部给药.鼻内给药，非肠道给药(例如静脉注射，肌内或皮下给药)或直肠给药形式，或者配制成吸入或吹入的适当给药形式。本发明的活性成分还可以制成的缓释给药的制剂。对于口服给药，药物组合物例如可以采用片剂或胶囊的形式，使用药学上可接受的赋形剂通过常规方法制备。赋形剂例如有黏合剂(例如预凝胶化的玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷基酮或羟基丙基甲基纤维素)；填充剂(例如乳糖，微晶纤维素或磷酸钙)；润滑剂(例如滑石粉或氧化硅)；崩解剂(例如玉米淀粉或淀粉羟基乙酸钠)；或润湿剂(例如十二垸基硫酸钠)。片剂可以使用本领域公知的方法包衣。口服给药的液体制剂例如可以是溶液，糖浆或悬浮液，或者它们可以是干的产品，使用前用水或者其他适当的赋形剂制成液体制剂。这种液体制剂可以使用药学上可接受的添加剂使用常规的方法制备，所述添加剂如悬浮剂(例如山梨醇糖浆，甲基纤维素或氢化食用脂肪)；乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯胶)；非水赋形剂(例如杏仁油，油状的酯或醇)；和防腐剂(例如甲基或丙基对羟基苯甲酸酯或山梨酸)。对于颊部给药，组合物可以是常规方法制备的片剂或锭剂。本发明的活性化合物可以制成注射用的非肠道给药制剂，包括使用常规的插入导管或灌输方法给药的制剂。注射制剂以单位形式存在，例如安培或多剂量容器，其中加入防腐剂。这种组合物可以是在油或水赋形剂中的悬浮液，溶液或乳液的形式，并且可以含有配制剂如悬浮剂，稳定剂和/或分散剂。另外活性成分可以是粉末形式，使用前用合适的赋形剂如无菌无热源的水配制成液体制剂。本发明的活性化合物还可以配制成直肠给药的组合物，例如栓剂或滞留的灌肠剂，例如含有常规的栓剂基质如可可油或甘油酯的灌肠剂。所用的活性成分的有效剂量可随给药的模式和待治疗的疾病的严重程度而变化。然而，通常当本发明的化合物每天以约O.3-30mg/kg动物体重的剂量给予时，能得到令人满意的效果，较佳地每天以2-4次分开的剂量给予，或以缓释形式给药。对大部分大型哺乳动物而言，每天的总剂量约为1-30mg。适用于内服的剂量形式，包含与固态或液态药学上可接受的载体混合的约0.3-30rag的活性化合物。可调节此剂量方案以提供最佳治疗应答。例如，由治疗状况的迫切要求，可每天给予若干次分开的剂量，或将剂量按比例地减少。通常，成年人的口服每日的合适临床剂量的选择范围为1-1000mg，优选为10-200mg，成人非口服的每日剂量为0.卜100mg，优选1-30mg。在本发明的实施例中，所用试剂如下:<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>成粘稠胶状析出。倾去水层，然后用150ml水洗一次，在加入100ml乙醇。加热接近沸腾，使粗产物溶解，然后晃动下慢慢加入20ml水，放置1小时，析出大量结晶。过滤，接着用10ml乙醇洗，然后于红外灯下干燥IO小时。再用油泵于7(TC抽10小时，得到5.5g产品，产率49.5%。将以上产品5.0g悬浮于20ml甲醇中，加入O.75gNaOH(1.0当量)在10ml甲醇中的溶液，稍微加热，使之溶解。蒸去甲醇得到油状物，然后加入30ml乙酸乙酯，用玻璃棒摩擦瓶壁或加入晶种，很快析出固体。抽滤，然后用乙酸乙酯洗涤得固体。先用隔膜泵抽去大部分溶剂，再用油泵于5(TC抽3小时，得5.4g白色粉末。实施例2:式8化合物的制备把水杨醛(3.66g，30mmo1)溶于120ml丙酮中，加入8.7g(75mmo1)碳酸钾和3.7ml(60mmo1)碘甲烷。在氩气保护下回流2小时。然后过滤除去碳酸钾，蒸干。再加入30ml乙酸乙酯，然后过滤一次，蒸干得到式6的粗产物。把20.2g(0.2mol)三乙胺放入100ml三口瓶中，常温水浴搅拌下滴入23.0g(0.50mol)甲酸，滴完后撤去水浴，加入4.33g(27mmo1)香豆素和以上得到的式6化合物。在烧瓶上装上氩气球，把烧瓶放在140-15(TC油浴中搅拌2小时。然后冷却，将反应液倒入200ral水中，产品成粘稠胶状析出。倾去水层，再用lOOml水洗一次，所得胶状物用二氯甲垸溶解，再用1N的氢氧化钠水溶液60ml提取。弃去有机层，水层用2N的盐酸40ml酸化，然后用乙酸乙酯提取两次，合并有机层。用无水硫酸钠干燥有机层，抽干得泡沫状物。用大约40ral乙酸乙酯加热溶解，然后加入石油醚使产物在5(TC出现混浊，再放在5(TC油22浴中加入晶种，使油浴在5-6小时内慢慢降到室温。然后在室温放10小时，得到大颗粒的棱状晶体3.0g，产率为40%。将以上晶体990mg溶于甲醇，再加入146mgNaOH(l.O当量)在甲醇中的溶液，稍微加热，使之溶解。蒸去甲醇，再加入10ml甲醇，抽干，反复三次以除去水分。最后于7(TC水浴下用隔膜泵抽两个小时，形成粉末状固体约1,05g，得到式8化合物。实施例3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>在反应瓶中加入2ml化合物(3-1)，用20ml乙醇溶解，搅拌下加入1,3ml化合物(3-2)。滴加10%KOH1.12克，室温搅拌，析出大量固体。继续搅拌l小时，过滤。滤饼用石油醚-乙醇20:l洗涤，并减压干燥，得化合物(3-3)1.64克，收率51.5°/。。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>(3-4)(3-3)(3-5)在2.5ml吡啶中加入0.81g化合物(3-4)，搅拌全溶。再加入0.77g化合物(3-3)，于室温全溶。0.5小时后有固体析出，加入10ml水后析出大量固体。过滤，滤饼用水和乙醚洗涤，干燥得1.38g化合物(3-5)，收率91.4%。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>在30ml冰乙酸和和5inl浓盐酸中加入6.32g化合物(3-5)。加热至回流，搅拌3小时，然后冷却至室温，倒入冰水中，搅拌。过滤，滤饼加入10%K0H碱化，全溶后用乙醚萃取3次。弃去有机层，水层用lN盐酸酸化至pH4后搅拌48小时。过滤，滤饼用水洗涤，减压干燥得3.787g化合物(3-6)，收率68%。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>在反应瓶中加入310mg化合物(3-6)，834ml，5ml苯，加热至回流，将溶剂蒸出，冷却。加热至17(TC反应。用乙酸乙酯溶解反应液，用水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓縮，然后用柱层析分离，层析液为石油醚乙酸乙酯2.5:1。浓縮层析液，得白色晶体107mg化合物(3-7)，收率32%。实施例4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>在反应瓶中加入2ml化合物(4-1)，用20ml乙醇溶解，搅拌下加入1.3ral化合物(4-2)。滴加10%KOH1.12克，室温搅拌，析出大量固体。继续搅拌1小时，过滤。滤饼用石油醚-乙醇20:l洗涤，减压干燥，得化合物(4-3)1.64克，收率51.5%。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>在2.5ml吡啶中加入0.81g化合物(4-4)，搅拌全溶。再加入0.77g化合物(4-3)，于室温全溶。0.5小时后有固体析出，加入10ml水，析出大量固体。过滤，滤饼用水和乙醚洗涤，干燥得1.38g化合物(4-5)，收率91.4%。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>在30ral冰乙酸和和5ml浓盐酸中加入6.32g化合物(4-5)。加热至回流，搅拌3小时，然后冷却至室温，倒入冰水中，搅拌。过滤，滤饼用加入10。復0H碱化，全溶后用乙醚萃取3次。弃去有机层，水层用1N盐酸酸化至pH4，搅拌48小时。过滤，滤饼用水洗涤，减压干燥得3.787g化合物(4-6)，收率68%。HNO在反应瓶中加入310mg化合物(4-6)，lml^~/，加热至17(TC，反应1.5小时，冷却。用乙酸乙酯溶解反应液，用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓縮，用柱层析分离，层析液石油醚乙酸乙酯2.5:1。层析液浓縮，得白色固体156mg，收率41%。用甲苯重结晶，得白色固体76mg化合物(4-7)。实施例5化合物1的合成+POCI3+DMF—将25mLN，N-二甲基甲酰胺加入100mL烧瓶中，在冰浴下冷却至0°C，慢慢滴加15mL三氯氧磷，撤去冰浴恢复至室温搅拌O.5h后加入4.2g的噻吩，慢慢升温至80"C下搅拌反应3h后冷却至室温，将反应液慢慢加入100g碎冰中，用1(^的氢氧化钠调节pH值至6后，用乙酸乙酯萃取三次，水洗三次，饱和氯化钠水溶液洗涤一次，经硫酸钠干燥后过滤，蒸干得到3.606g红褐色液体化合物1，产率64°/。。化合物的合成2将1.90g化合物1和4.92g丙酮混合于80mL水中(化合物1不溶)，加入362mg吡咯烷后溶液立刻变为绿色，红褐色的化合物1很快消失，搅拌15小时后停止反应。反应液用二氯甲垸萃取三次后水洗一次，饱和氯化钠水溶液洗涤一次，硫酸钠干燥后过滤蒸干，柱层析(石油醚乙酸乙酯=10:1)进行分离，得到455mg纯的化合物2以及1.177g略杂的化合物2，其中的杂质主要是未反应完的原料。。化合物4的合成将304mg化合物2和356rag化合物3(4-羟基香豆素)溶于5ml二甲亚砜中，加入115mg的L-脯氨酸后在25。C空气浴中搅拌，反应48h后加入蒸馏水20mL，用乙酸乙酯萃取三次，水洗两次，饱和氯化钠水溶液洗涤一次后，硫酸钠干燥，过滤蒸干。之后柱层析(石油醚乙酸乙酯=2:1)纯化得到化合物4的互变异构体混合物380mg，产率61%。实施例6化合物6的合成-CHO+CH2(CN)2.KOH(aq)EtOH将6.36g苯甲醛和3.96g丙二腈溶于60mL乙醇中，搅拌均匀后加入3.36g的10%的氢氧化钾水溶液，室温搅拌反应0.5h后，过滤出固体沉淀物，用石油醚和乙醇(20:1)的混合溶液洗涤三次后，真空千燥得到5.96g化合物6，产率65%。化合物7的合成Pyridine36了将6.2g化合物3(4-羟基香豆素)溶于30ml吡啶中，加入5.9g化合物276，室温下反应1h后加蒸馏水50mL，过滤出固体沉淀物，用水充分洗涤后再用乙醚洗涤两次，真空干燥得ll.15g的化合物7，产率92%。化合物8的合成PhconcHCI(aq)OHNH278将11g化合物7溶于50mL乙酸中，加入9.2mL浓盐酸，油浴加热到120'C，回流条件下反应3h后冷却，在室温下静置一段时间后析出大量白色沉淀，过滤出白色固体，将其溶解于四氢呋喃中，母液加入蒸馏水100mL，用10%的氢氧化钠水溶液碱化至固体全部溶解后，用乙酸乙酯洗涤两次，洗涤后水相再用2N盐酸进行酸化，过滤出析出的固体，再用75%的乙醇水溶液重结晶，第一次重结晶得到1.452g化合物8，母液保留以后进一步重结晶。化合物10的合成'CONH(CH2)2CH:将580mg化合物8溶于15mL二氯甲垸中，加入193mg三乙胺'逐滴加入203mg氯甲酸乙酯，室温下搅拌反应0.5h后加入丙胺的二氯甲垸溶液(110mg丙胺溶于5mL二氯甲烷中)。室温下搅拌反应10h去析出大量白色固体'过滤出白色固体，在四氢呋喃中重结晶得225mg的化合物10。实施例7化合物11的合成8911将143rag化合物8(见制备SAR12的中间体)溶于5mL二氯甲垸中，加入49mg三乙胺，全部溶解后逐滴加入50mg氯甲酸乙酯，室温下搅拌反应2h28后通入氨气，室温搅拌反应12h后，加入30mL蒸馏水，用2N盐酸酸化至pH值等于l后用乙酸乙酯萃取三次，水洗两次，饱和氯化钠水溶液洗涤一次，硫酸钠干燥后，过滤蒸干得到30mg化合物ll。化合物12的合成1112将62mg化合物11和35mg对甲基苯磺酰氯溶于6ml二氯甲烷中，加入73mg三乙胺，室温搅拌下反应12h，加入20mL二氯甲垸，用饱和碳酸钠水溶液洗涤二次，饱和氯化钠水溶液洗涤一次，硫酸钠干燥，过滤蒸干后得到68mg化合物12，产率80%。注意这一步的盐酸三乙胺一定要洗干净，否则后面的反应无法得到目标产物。化合物13的合成将65mg化合物12溶于3mL乙腈中，再加入0.1mL甲酸和20mg多聚甲醛，在氩气的保护下回流反应11h。在反应液中加入20niL蒸馏水，用乙酸乙酯萃取，之后水洗二次，饱和氯化钠水溶液洗涤一次，硫酸镁干燥后，过滤蒸干，柱层析(石油醚乙酸乙酯=3:1)分得40mg化合物13。化合物14的合成OTsPhOHPh1314将260mg化合物13溶于10raL无水四氢呋喃中，加入2.4mL的四丁基氟化铵溶液(lmol/L的四氢呋喃溶液)，室温下搅拌反应0.5h后加入20mL蒸馏水，用乙酸乙酯萃取后，水洗一次，饱和氯化钠溶液洗涤一次，硫酸钠干29燥，过滤蒸干，柱层析(石油醚乙酸乙酯=1:1，5滴乙酸/300mL洗脱液)分得81mg的化合物14，用二氯甲垸重结晶后得到59mg纯的化合物14。实施例8香豆素(工业品，金坛市思达化工有限公司)溴甲烷二甲苯(95%,进口，深圳迈瑞尔公司)甲醇钠(CP级，上海凌峰化学试剂有限公司)把80ml四氢呋喃放入250ml三口瓶中，投入4.05克香豆素和2.70克甲醇钠。加热搅拌。加热至回流。将7.40克溴甲烷二甲苯溶解于80ml四氢呋喃，逐滴加入反应液。加完后回流反应4小时。停止反应，冷却。过滤，滤液减压浓縮，加入适量丙酮，室温结晶，过滤，得白色颗粒状晶体，真空干燥，得产物2.5克，收率30.4%。实施例9把4.0克(lOOmmol)60%的NaH放入250ral三口瓶中(一个口加干燥管，一个口加滴液漏斗)，在加入80ml四氢呋喃。把烧瓶放入常温水浴中，搅拌下慢慢滴入16.Og(lOOmmol)丙二酸二乙酯(1)在20ml四氢呋喃中的溶液(控制滴加速度使反应不要过于激烈)，滴完后搅拌十分钟。慢慢滴入17.9g(120ramo1)溴代异戊烯(2)在20ml四氢呋喃中的溶液，有大量白色沉淀出现。滴加完后在室温搅拌30分钟，然后加入80ml水，转移到500ml单口烧瓶中抽去四氢呋喃，剩余物用乙酸乙酯50ml*3提取。合并有机层，用饱和NaCl洗，然后用硫酸钠干燥。旋蒸除去溶剂，得粗产物。用少量二氯甲烷溶解，上30柱，用石油醚乙酸乙酯=35:l洗脱，浓縮得llg，收率48.2%。干燥所用仪器，通氩气保护。在50ml二口瓶中加入3.6g(20mmo1)邻乙酰氧基苯甲酸、0.lg尿素，悬浮于20ml甲苯中，然后注入1.75ral(24酬o1)氯化亚砜，加热回流。搅拌1小时，此时反应液为黄色澄清，然后冷却至室温。干燥所用仪器，通氩气保护。在150ml三口瓶中加入0.96g(24mmo1)60%的氢化钠和30ml四氢呋喃，搅拌下注入5.5g(24mmo1)化合物3在10ml四氢呋喃中的溶液，反应液逐渐变清。15分钟后注入上步反应液，于室温搅拌3小时，点板。然后加入50ml水终止反应，用乙酸乙酯萃取上次，合并有机层。依次用饱和碳酸氢钠、水、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓縮得粗产物。粗产物用少量二氯甲垸溶剂，上柱，用石油醚乙酸乙酯=8:l洗脱，浓缩得4.15g，收率53%。将1.87g(4.8mmo1)化合物(6)溶于33ml乙醇中，加入6N盐酸33ml，于室温(约2(TC)搅拌24小时，其后每隔2小时点一次板。当产物点不再变化而产物下方的那个杂点开始变大时立即停止反应。将反应液倒入500ml烧杯31中，搅拌下加入3N氢氧化钠水溶液50ml，然后加入饱和碳酸氢钠水溶液将pH值调至4-5，减压浓縮此反应液，残留液用乙酸乙酯萃取3次，合并有机层。依次用水、饱和氯化钠洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓縮得粗产物。粗产物用少量二氯甲烷溶解，上柱，用石油醚乙酸乙酯二10:1洗脱，浓縮得白色固体，将此固体用少量乙酸乙酯溶解，加入石油醚至维伟混浊，此时再加小半滴乙酸乙酯使溶液变澄清，然后静置，析出晶体。24小时后过滤，滤饼减压干燥得246mg产物，收率22.3%。实施例10取大鼠随机分组，药物组每组7只，阴性对照组14只。于实验前40小时灌胃给药，剪断鼠尾采血，测凝血时间。受试药物溶解于0.8%CMC溶液中，本发明化合物和阳性对照药用量均为20mg/kg，灌胃容积为10ral/kg，单次灌胃给药。阴性对照组给予等容量溶剂。以凝血时间为指标，进行t检验，比较组间差异的显著性。受试药物的大鼠凝血时间结果见表1。表1大鼠断尾凝血时间实验结果药品凝血时间(S)阴性对照133±27实施例1所得式4化合物131±18实施例2所得式8化合物174土40*华法林400土148氺氺华法林钠367±72***p<0.05**p<0.01各组与阴性对照组比较(t检验)实施例11取大鼠随机分组，每组8只。设阴性对照组。华法林钠、华法林为阳性对照药。于实验前40小时灌胃给药，剪断鼠尾采血，测凝血时间。受试药物溶解于0.5%CMC溶液中，本发明化合物和阳性对照药用量均为10rag/kg，灌胃容积为10ral/kg，单次灌胃给药。阴性对照组给予等容量溶剂。以凝血时间为指标，进行t检验，比较组间差异的显著性。受试药物的大鼠凝血时间结果见表2。表1大鼠断尾凝血时间实验结果药品凝血时间(s)阴性对照89±25华法林192±59**华法林钠336±147**实施例3所得化合物(3-7)240±96**实施例4所得化合物(4-7)87±11实施例5所得化合物(4)72.2±50.1实施例6所得化合物(10)234.7±15.6实施例7所得化合物(14)98.3±67.4实施例8所得化合物158±33实施例9所得化合物(7)115±35*p〈0.05**p<0.01各组与阴性对照组比较(t检验)。3权利要求1.一种下式I表示的化合物或其药学上可接受的盐，式I式中X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的C1-C10烷基、取代或未取代的C6-C10芳基、取代或未取代的C3-C10环烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的C2-C10烯基、取代或未取代的C1-C10烷氧基或取代或未取代的C2-C10炔基；R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1-C10烷基、取代或未取代的C1-C10烷氧基、取代或未取代的C6-C10芳基、取代或未取代的C3-C10环烷基和取代或未取代的杂芳基；上述取代基可以是相同或不同，各自选自氢、卤素、羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于X和Y是相同或不同的，各自选自氢、取代或未取代的C1一C6垸基、取代或未取代的C6—C9芳基、取代或未取代的C3—C6环烷基、取代或未取代的五元环或六元环杂芳基、取代或未取代的C2—C6烯基、取代或未取代的Cl-C6烷氧基或取代或未取代的C2-C6炔基；X和Y优选各自选自氢、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的C3-C5环垸基、取代或未取代的五元环杂芳基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的CI-C4垸氧基或取代或未取代的C2-C4炔基；X和Y最好各自选自氢、取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的丙基、取代或未取代的丁基、苯基、烷基取代的苯基、烷氧基取代的苯基、取代或未取代的环戊烷基、取代或未取代的乙烯基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的乙炔基、取代或未取代的的甲氧基、取代或未取代的乙氧基、取代或未取代的丙氧基、取代或未取代的丁氧基、取代或未取代的呋喃基和取代或未取代的吡咯基。3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于R选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的C1一C6垸基、取代或未取代的C1一C6烷氧基、取代或未取代的C6—C8芳基、取代或未取代的C3—C6环烷基和取代或未取代的五元环或六元环杂芳基；R优选选自氢、卤素、羟基、取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的丙基、取代或未取代的丁基、取代或未取代的甲氧基、取代或未取代的乙氧基、取代或未取代的丙氧基、取代或未取代的丁氧基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的环丙基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的呋喃基和取代或未取代的吡咯基。4.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述取代基选自氢、氧、卤素、羟基、C1一C6烷基、C1一C6垸氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基；所述取代基更好选自氢、氧、卤素、羟基、C1一C4垸基、C1一C4垸氧基、酰基、酰胺基、芳基和氰基。所述取代基最好选自氢、氧、卤素、羟基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基和甲酰胺基。5.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述化合物选自下式表示的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>6.—种用于抗凝血的药物组合物，所述组合物包含权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物为粒剂、粉剂、片剂、胶囊、糖浆、栓剂、注射剂、乳剂、酊剂、悬浮液、溶液的形式口服或非口服剂型。8.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗凝血药物中的用途。9.如权利要求8所述的用途，其特征在于所述抗凝血药物用于预防和治疗血栓栓塞性疾病；预防和治疗手术后或创伤后的静脉血栓形成；预防和治疗心肌梗塞；预防血栓栓塞病患者的并发症及术后血栓并发症。全文摘要公开了一种式I表示的化合物或其药学上可接受的盐，包含该化合物或其药学可接受的盐的组合物，以及它们在抗凝血药物中的用途。文档编号C07D311/44GK101654446SQ20081004185公开日2010年2月24日申请日期2008年8月19日优先权日2008年8月19日发明者张跃良,健戴,沈康宁,良陈申请人:信谊药厂