作为抗病毒增强剂的酰胺化合物的制作方法

专利名称：作为抗病毒增强剂的酰胺化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有CYP450抑制性质且因而可作为某些药物的增强剂(booster)的 化合物，即，它们在共同施用时可增加某些药物的至少一种药物动力学变量。本发明进一步 提供利用所述化合物作为某些药物的生物利用度增进剂的用途。还提供本发明化合物的制 备方法以及包含这些化合物的药物组合物。
背景技术：
许多药物，包括一些HIV蛋白酶抑制剂(PI)以及非核苷逆转录酶抑制剂(NNRTI)， 是通过细胞色素P450系统代谢的。该细胞色素P450系统是一组在肝及肠内发现的酶，其 在人体内具有许多功能。细胞色素P450的活性在个体间及各群间是不同的。少量的基因 改变可影响多少特定酶被表达，因而影响药物有多快被代谢。衍生自特定基因的细胞色素P450酶称为异型体。根据其化学组成的近似性，异型 体分为族与亚族，酶变体是通过一种编号和字母系统描述的，其反应映了它们的化学及基 因结构。细胞色素P450，亚族IIIA(硝苯地平(niphedipine)氧化酶)，多肽4，亦称为 CYP3A4，是一种用于裂解和清除药物以及其它物质的特别的代谢途径。某些药物通过细胞色素P450系统的代谢作用经常会导致该类药物具有不利 的药物动力学，并且非常需要施用更频繁和更高的剂量。施用此类药物与通过细胞色 素P450系统抑制代谢的药剂，可改善药物的药物动力学。在这方面，已公开一些改善某 些药物的药物动力学的方法，参见例如USP 6, 037, 157 ；D. E. Kempf et al. Antimicrob. AgentsChemother.，41，pp.654-660(1997)。在W003/049746中公开了改善含六氢呋喃并[2，3_b]呋喃基的HIV蛋白酶抑制剂 的药物动力学的方法，包括对有需要的人施用治疗有效量的含六氢呋喃并[2，3-b]呋喃基 的HIV蛋白酶抑制剂以及治疗有效量的细胞色素P450抑制剂的组合(combination)。大部份用于临床治疗的HIV蛋白酶抑制剂现在均与利托那韦(ritonavir)配 对以改善暴露，从而提高临床功效。所应用的此类型的药物药物相互作用称为“增强 (boosting)”。增强还通过减少药丸用量以及每日服用频率以支持简化的供目前PI的治疗 方法。不幸的是，PI方法的利托那韦提高作用，即使在低剂量时，并非没风险。利托那 韦本身即为一种HIV蛋白酶抑制剂。对利托那韦的抗性与数种抗性突变的一种或多种选 择相关联。由利托那韦选择的抗性突变常赋予或造成对其他的蛋白酶抑制剂的抗性。不 同的突变与对不同药物的交叉抗性相关联。例如M46I系与对茚地那韦(indinavir)、奈 非那韦(nelfinavir)及福沙那韦(fosamprenavir)的交叉抗性相关联(但与沙奎那韦 (saquinavir)无关联)；V82A，F，T，S单独与对茚地那韦的交叉抗性相关联，但与其它突变 组合时亦赋予对奈非那韦、福沙那韦及沙奎那韦的抗性；以及I84V则造成对抗所有可得的 蛋白酶抑制剂的抗性。然而这些突变中并无任一单独突变与对洛匹那韦(lopinavir)的完全抗性相关联，每一突变造成部分抗性，并且数种突变一起存在可赋予抗性，对茚地那韦的 反应在对利托那韦抗性的设定中是不可能的。因此，在有效且安全的抗HIV治疗中，对利托那韦作为增强剂的替代方式有高度 的医药需求。再者，在有效且安全的抗HIV治疗中，其中增强剂造成的抗性发展可能性被排 除时，对利托那韦作为增强剂的替代方式亦有高度的医药需求。

发明内容
根据本发明，现在发现下列的式(I)化合物具有CYP450抑制性质并且可用作增强 剂。这些化合物由下式表示 其中A和B相互独立地是H ；Cm烷基，其任选被炔基、杂芳基或选自氮、氧或硫的 杂原子取代，该杂原子任选被Cm烷基取代；或者A和B与它们所连接的氮一起形成5或6 元的饱和、部分或完全不饱和的含有1至4个各自独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环所 述杂原子任选被Cm烷基取代；R2为Cm烷基，其任选被0H、氨基烷基、吡咯烷基、吗啉基、炔基或任选被卤素取代 的C3_7环烷基取代；R3 是 0H ；R4是H或烷基；R5是吡啶基或苯基，其任选被卤素取代；X是0、S或N，其任选被(V6烷基取代。优选的化合物为下列分别具有式(II)、(III)和(IV)的化合物；分别以C1、C6及 C7备选地描述于后文。
其盐及立体异构型，其中 R为H、苯基、吡啶基、C^e烷基或N: 氏选自
式(I)、(II)、(III)和(IV)化合物经发现能赋予抗HIV的极小抗性或无抗性，并 且因此是对利托那韦(RTV)作为HIV抑制剂的增强剂的有用替代方式。还发现式(I)化合物可作为其它病毒抑制剂如HCV和/或RSV抑制剂的病毒抑制 剂。式(I)化合物与其它药物如HIV、HCV或RSV抑制剂的组合有利于允许给感染的患者提 供治疗，而且该提供是安全、有效的，并允许抗病毒剂与其单独施用时相比可采用较低的有 效治疗剂量。根据毒性与药丸用量，较低剂量一直是期望的，由此可分别减少不良作用和的 发生率及增加治疗适应性。式(I)化合物与HIV或其它病毒抑制剂的组合，在施用该组合 至有需要的患者时，可对这些抗病毒剂提供协同作用。正如上文和下文中所使用的，除非另有说明，否则下列定义均适用。当术语“取代的”用于定义本发明化合物时，其意指在用“取代的”表达中所提及 的或包含的原子上的一个或多个氢被选自所指定的基团置换，前题是未超过所述原子的正 常价数，并且该取代作用将产生化学上稳定的化合物，即一种可以有用程度的纯度经过方 便长的时间维持其结构与分子同一性的化合物，该方便长的时间将视应用领域而定。
术语卤代(素)概括地指氟、氯、溴和碘。本文中所使用的作为基团或基团的一部分的‘％_4烷基”意指具有1至4个碳 原子的直链或支链的饱和烃基，例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1- 丁基、2- 丁基、2-甲 基-1-丙基；“Cu烷基”则包含"(V4烷基”及其更高级的具5或6个碳原子的同系物，例 如1-戊基、2-戊基、3-戊基、1-己基、2-己基、2-甲基-1- 丁基、2-甲基-1-戊基、2-乙基-1- 丁基、3-甲基-2-戊基等等。在Cm烷基中感举的是(V4烷基，尤其是异丁基。C3_7环烷基概括地指环丙基、环丁基、环戊基、环己基及环庚基。“杂芳基”是本领域 知晓的并且意指含有一个或两个(稠合的)芳环的单环或双环系统；所述环系统含有至少 一个选自氮、氧或硫的杂原子，且该杂原子任选被Cm烷基取代。应注意在这些定义中所使用的任一分子部分上的基团位置可能是在该部分上的 任何位置，只要化学上稳定的即可。除非另外指出，否则这些变量的定义中所使用的基团包括所有可行的异构体，例 如吡啶基包括2-吡啶基、3-吡啶基及4-吡啶基。在下文中所使用的，术语“式(I)化合物例如”、“本化合物”、“本发明化合物”或类 似名词，意指包括式(I)化合物及其任何亚组、在表中以及下面实施例中描述的化合物，以 及前体药物、立体化学异构体、消旋混合物、酯类、加成盐、溶剂化物、季胺类、N-氧化物、金 属复合物、以及以上任一化合物的代谢物。一个实施方案包含式(I)化合物，或此处记载的 其任一亚组，以及N-氧化物、盐及其可能的立体异构体。在下文中所使用的，术语“HIV抗病毒剂”和“HIV抑制剂”是可互相交换的，且在 本案叙述的上下文中具有相同的意义。式(I)化合物可在其取代基中包含不对称中心，因此可以立体化学异构体型式存 在。此处所使用的术语“立体化学异构体”、“立体异构体”及等同术语是定义所有由相同的 原子组成、通过相同的键连结但具有不同的三维空间结构(无法互相改变)的可能的化合 物，其是式(I)化合物可能具有的。例如(R)或(S)，或另择地以星号(*)标示的，是用来指定取代基中不对称原子的 绝对构型，该指定系将整个化合物考虑在内而非单独就该取代基而言。除非另外提及或指出，否则化合物的化学命名包括该化合物可能具有的所有可能 的立体化学异构体的混合物。该混合物可能含有该化合物的基本分子结构的所有的非对映 异构体和/或对映异构体。本发明化合物的所有立体化学异构体不论是纯化形式或互相混 合的，均属本发明的范畴。此处所提及的化合物及中间体的纯立体异构体被定义为基本上不含该化合物或 中间体的具相同基本分子结构的其它对映异构或非对映异构形式。特别地，术语“立体异构 上纯的”是指具有立体异构过量至少80% (例如至少90%的一种异构体和最多10%的其 它可能的异构体)至多达立体异构过量100% (亦即100%的一种异构体且不含其它的异 构体)的化合物或中间体，更特别地，是指具有立体异构过量90 %至多达100 %的化合物或 中间体，再更特别地，是具有立体异构过量94%至多达100%的化合物或中间体，且最特别 地，是具有立体异构过量97%至多达100%的化合物或中间体。术语“纯对映异构”及“纯 非对映异构”亦应以类似方式理解，但分别是所提的混合物中对映异构体过量与非对映异 构体过量。本发明化合物及中间体的纯对映异构体可利用本领域已知的操作法获得。例如， 可使对映异构体相互分离，其方式是利用光学活性酸或碱将其非对映异构体盐选择性结 晶。其实例为酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸、及樟脑磺酸。另选地，对映异 构体可通过色谱分析技术利用手性固定相予以分离。假使反应是以立体特异性进行，所述 纯立体化学异构体亦可衍生自适宜的起始物质的对应的纯立体化学异构体。优选地，若需要特定的立体异构体，该化合物将通过立体特异性制法合成。这些方法将以采用纯对映异 构的起始物质较有利。 本发明化合物的非对映异构消旋物可通过公知方法分离获得。可采用的适当物理 分离法为例如选择结晶法与色谱分析法，如柱色谱法。 对于某些本发明化合物、其前体药物、N-氧化物、盐、溶剂化物、季胺类或金属复合 物、以及在其制法中使用的中间体，并未实验测定绝对立体化学构型。本领域技术人员能利 用本领域已知的方法，例如X-射线衍射法，测定此类化合物的绝对构型。本发明亦包括在本发明化合物上出现的所有原子的同位素。同位素包括那些具有 相同的原子数但质量数不同的原子，举例但非限制性的，氢的同位素包括氚及氘，碳的同位 素包括C-13及C-14。本文中所使用的术语“前体药物”意指药学可接受的衍生物，例如酯类、酰胺类及 磷酸酯类，因而在体内生成的该衍生物的生物转化产物为如同式(I)化合物定义的活性药 物。Goodman禾口 Gilman 的参考文献(ThePharmacological Basis of Therapeutics, 8th ed, McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, "Bio-transformation of Drugs", p 13-15) f'^l^^mWM 物乃概括地并入本文。前体药物优选具有良好的水溶性、增加的生物利用度，并且在体内可 容易地代谢为活性抑制剂，本发明化合物的前体药物可通过修饰化合物中存在的官能基而 制得，其修饰方式是，使修饰物通过常规操作或在体内即分解为母体化合物。优选的是可在体内水解且衍生自那些具有羟基或羧基的式(I)化合物的药学可 接受的酯前体药物。在体内可水解的酯类为一种在人体或动物体内会水解产生母体酸或醇 的酯。适合的药学可接受的羧基酯类包括Cm烷氧基甲基酯例如甲氧基-甲基，CM烷酰基 氧基甲基酯例如特戊酰基氧基甲基，酞基酯，C3_8环烷氧基羰基氧基烷基酯例如1-环 己基羰基-氧基乙基；1，3- 二氧杂环戊烯-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3- 二氧杂环戊 烯-2-酮基甲基；以及(V6烷氧基羰基氧基乙基酯例如1-甲氧基羰基-氧基乙基其可在本 发明化合物的任何羧基上形成。含有羟基的式(I)化合物的体内可水解酯包括无机酯类，例如磷酸酯类及a _酰 基氧基烷基醚类及相关的化合物，其在体内经水解作用将酯裂解后即生成原来的羟基。 a-酰基氧基烷基醚类包括乙酰氧基-甲氧基和2，2_ 二甲基丙酰基氧基-甲氧基。羟 基的在体内可水解的酯形成基团的选择包括烷酰基、苯甲酰基、苯乙酰基和取代的苯甲酰 基及苯乙酰基、烷氧基羰基(生成烷基碳酸酯类)、二烷基氨甲酰基和N_( 二烷基氨基乙 基)-N-烷基氨基甲酰基(生成氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。苯甲酰基上 的取代基实例包括吗啉代和哌嗪子基，其由环氮原子经亚甲基连结至苯甲酰基环的3-或 4-位。供治疗使用时，式(I)化合物的盐为那些其中的抗衡离子为药学可接受的。然而， 非药学可接受的酸或碱的盐也可能有用，例如在制备或纯化药学可接受的化合物时，所有 的盐，不论药学可接受或不可接受的，均包含在本发明的范围内。前面提及的药学可接受的酸和碱的加成盐意指包括式(I)化合物能形成的具有 治疗活性的无毒性酸和碱加成盐。药学可接受的酸加成盐可通过此种适当的酸处理该盐基 形式而方便地获得。适当的酸包括例如无机酸类，如氢卤酸(如氢氯酸或氢溴酸)、硫酸、 硝酸、磷酸和类似的酸；或有机酸类，如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(亦即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(亦即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸(亦即羟基丁二酸)、酒石 酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、环己基氨基磺酸、水杨酸、对-氨基水杨 酸、棕榈酸和类似的酸。相反地，所述盐形式可通过用适当的碱处理转化为游离碱形式。含有一酸性质子的式(I)化合物亦可通过用适当的有机和无机碱处理转化为其 无毒性的金属或胺加成盐型式。适当的碱盐形式包括，例如，铵盐，碱金属和碱土金属盐如 锂、钠、钾、镁、钙盐等，与无机碱的盐，如苄星(benzathine)、N-甲基_D_葡萄糖胺、海巴胺 (hydrabamine)盐，以及与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等等的盐。术语“溶剂化物”在此处是用来说明一种分子复合物，其包含i)本发明化合物及 其盐，和ii) 一种或多种药学可接受的溶剂分子，例如乙醇、异丙醇、1-甲氧基-2-丙醇、 甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、苯甲醚、四氢呋喃或甲磺酸酯。当该溶剂为水时使用术语 “水合物”。在前面使用的术语“季胺”是定义季铵盐，其是式(I)化合物通过由式(I)化合 物的碱性氮与适当成季化剂(例如任选取代的烷基卤化物、芳基卤化物或芳烷基卤化物， 如甲基碘化物或苄基碘化物)反应而得以生成。其它具有良好离去基团的反应物亦可采 用，例如三氟甲磺酸烷基酯、甲磺酸烷基酯、和对-甲苯磺酸烷基酯。季胺具有荷正电的 氮。药学可接受的抗衡离子包括氯、溴、碘、三氟乙酸酯及乙酸酯。所选择的抗衡离子可利 用离子交换树脂予以引入。本发明化合物的N-氧化物形式意指包含式(I)中一个或数个氮原子被氧化成所 谓的N-氧化物的化合物。应当理解，式(I)化合物可能具有金属键合、螯合、复合物形成的性质，因此可以 金属复合物或金属螯合物存在。式(I)化合物的此类金属化衍生物将包括在本发明的范围 内。某些式(I)化合物亦可能以其互变异构体形式存在。此类形式虽然并未在上面的 化学式中明确地指出，但将包括在本发明的范围内。式(I)化合物具有两个不对称中心，如下式的星号所标示的 优选的式(I)化合物系具有如下面式(I-a)的结构中所示的立体化学 根据本发明的式(I)化合物可为选自下列表1、表2、表3或表4的化合物中任一 个。除了取代型式(以R、Ri、R2*X标明)夕卜，还报告了 LC-MS数据(m/z(M+l))和保留时 间(Rt)。列出的结果和实施例是用来示意本发明而不应被解释为限制本发明的范围。表 1 优选的化合物为化合物CI、C6和C7。在本发明的优选实施方案中，提供一种组合，其包含(a)式(I)化合物、其盐或立 体异构体；以及(b)HIV抗病毒剂或其药学可接受的盐；其中式(I)化合物选自C1、C6或C7。在本发明的优选实施方案中，提供一种组合，其系包含(a)式⑴化合物、 其盐或立体异构体；以及(b)HIV抗病毒剂(有时候称作HIV抑制剂)或其药学可接 受的盐；其中式⑴化合物选自C1、C6或C7;并且其中HIV抗病毒剂或HIV抑制剂 选自例如核苷逆转录酶抑制剂(NRTI)，例如齐多夫定(zidovudine ；AZT)、地达诺新 (didanosine ；ddl)、扎西他宾(zalcitabine ；ddC)、拉米夫定(lamivudine ；3TC)、司他 夫定(stavudine ；d4T)、恩曲他滨(emtricitabine ；FTC)、阿巴卡韦(abacavir ；ABC)、 阿普西它宾(apricitabine ；AVX-754)、尔夫西它宾(elvucitabine ；ACH-126, 443)、 phosphazide、KP-1461、MIV-210、雷西夫(racivir ；PSI-5004)等等；或者非核苷逆转录酶 抑制剂(NNRTI)，例如地拉夫定(delavirdine ；DLV)、依法韦仑(efavirenz ；EFV)、奈韦拉 平(nevirapine ；NVP)、卡普韦林(capravirine ；CPV)、calanolide A、dpivirine (TMC120)、 etravirine(TMC125)、rilpivirine (TMC278)、阿洛夫定(alovudine ；MIV-310)、UC-781 等等；或者核苷酸逆转录酶抑制剂(NtRTI)，例如替诺福韦(tenofovir)和替诺福韦 二索罗基富马酸盐(tenofovir disoproxil fumarate, TDF)等等；或转活化蛋白质的 抑制剂，例如TAT-抑制剂，如R0-5-3335、BI-201 ;REV抑制剂；或蛋白酶抑制剂，例如 利托那韦(RTV)、沙奎那韦(saquinavir ；SQV)、洛匹那韦(ABT-378或LPV)、茚地那韦 (IDV)、安泼那韦(amprenavir ；VX-478)、TMC-126、那非那韦(nelfinavir ；AG-1343)、 atazanavir (BMS-232632)、达鲁那韦(darunavir ；TMC-114 ；目前以 Prezista 上市)、 SPI-256、福沙那韦(fosamprenavir ；GW433908 或 VX-175)、P-1946、MK-8122 (PPL-100)、 替拉那韦(tipranavir ；PNU-140690、或是化学名称为(1_苄基_3-{[2-(1_环戊基-哌 啶-4-基氨基)~苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基} -2-羟基-丙基)_氨基甲酸六 氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的蛋白酶抑制剂，及类似物；或是病毒整合酶抑制剂，例如 raltegravir (MK-518), elvitegravir (GS-9137 ； JTK-303)、BMS-538, 158 等类似物；或进入 抑制剂，其包括融合抑制剂(如T_20或enfuvirtide，T-1249)，吸附抑制剂及共受体抑制剂；后者包括CCR5拮抗剂和CXR4拮抗剂(如AMD-3100)；进入抑制剂的例子为PR0-140、 PR0-542、TBR-220 (TAK-220)、TBR-652 (TAK-652)、vicriviroc (SCH-417, 690)、TNX-355、 maraviroc (UK-427, 857)、BMS-488, 043、BMS-806 ；成熟抑制剂例如是 bevirimat (PA-457)； 核醣核苷酸还原酶抑制剂(细胞抑制剂)，例如羟基脲及类似物；或以上任一项的组合。更优选的实施方案是一种包含下列物质的组合(a)选自CI、C6或C7的化合 物、其盐或立体异构体；以及(b)HIV抗病毒剂，其选自达鲁那韦(darimavir)或化学名称 为(1-苄基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨 基}-2_羟基-丙基)-氨基甲酸六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的化合物。最优选的组合为其中化合物为噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨 基)-N-异丁基苯并[d]噁唑-6-羧酰胺基)-3_羟基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸酯并且 HIV抑制剂为(1-苄基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异 丁基-氨基}_2_羟基-丙基)_氨基甲酸六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯。在本发明的一个实施方案中，提供了一种制备如本文所述的组合的方法，其包括 将式(I)化合物或其药学可接受的盐，与HIV抗病毒剂或其药学可接受的盐合并的步骤。本 发明的另选实施方案提供了其中该组合包含一种或多种如本文所述的其它药剂的方法。本发明组合以及本发明的化合物本身可被作为医药使用。作为药物或医药的应用 包括对HIV-感染的个体全身施用有效剂量以对抗与HIV相关的病症。本发明化合物，更特 别地，式(II)-(IV)的化合物，在作为增强其它化学实体的药剂(例如抗病毒化合物)用于 哺乳动物时是特别有用的。因此，本发明组合可用于制备可用于治疗、预防或对抗哺乳动物 与HIV感染有关的感染或疾病的医药。在本发明的一个实施方案中，提供一种药物组合物， 其包含根据本文所述的任一实施方案的组合以及药学可接受的赋形剂。特别地，本发明提 供一种药物组合物，其包含(a)治疗有效量的式(I)化合物或其药学可接受的盐；(b)治疗 有效量的HIV抗病毒剂或其药学可接受的盐；以及(c)药学可接受的赋形剂。任选地，该药 物组合物可进一步包含选自HIV抗病毒剂的其它药剂。如本文所使用的，术语“组合物”欲意包括一种包含特定成份的产品，以及任何由 特定成份的组合直接或间接产生的产品。如本文所使用的，术语“治疗有效量”意指在组织、系统、动物或人体中会引起生物 学或医学反应的活性化合物或组份或药剂的量，其是由研究员、兽医、医学医生或其它临床 医生参考本发明后所探寻的，其包括减轻待治疾病的症状。由于本发明涉及含有两种或多 种药剂的组合，“治疗有效量”为那些制剂一起的用量，以便合并的效应引起所需的生物学 或医学反应。例如含有(a)式(I)化合物和(b)HIV抗病毒剂的组合物，其治疗有效量是在 两者一起具有治疗有效的合并效应时，式(I)化合物的用量与HIV抗病毒剂的量。药物组合物可以本领域技术人员已知的方法制备。为达到此目的，至少一种式(I) 化合物或其任一亚组以及HIV抗病毒剂，与一种或多种固体或液体药用赋形剂一起，并且 如果需要，与其它药物活性化合物合并，调配成适合施用的形式或剂型，然后其即可作为人 类用药或兽用药的药物。在一个实施方案中，如果适当，本发明组合亦可调配成组合制剂以供同时、分开或 顺序使用于HIV治疗。在此种情况下，式(I)化合物或其任一亚组被调配在含有其它药学 可接受的赋形剂的药物组合物中，而适当的HIV抗病毒剂则分开调配于含有其它药学可接受的赋形剂的药物组合物中。方便地，这两种分开的药物组合物可为药盒的一部分，以供同 时、分开或顺序使用。因此，本发明组合的个别组份可在疗程的不同时间分开施用，或以分离或单一组 合形式同时施用。所以本发明应理解为含盖所有此类同时或交替治疗的治疗法，并且术语 “施用”据此解释。在优选的实施方案中，该分开的剂型是以大约同时的方式施用的。包含本发明组合的组合物或产品，不论是共同调配于单一制剂还是调配成同时、 分开或顺序使用的，均可以下列方式施用口服(包括混悬剂、胶囊剂、片剂、小袋剂、溶液 剂、乳剂)、舌下、肠胃外(包括皮下注射、静脉内、肌肉内、皮肤内注射或输注技术)、局部 地、经直肠(包括栓剂)、经阴道、经植入式储库，以含有常规的无毒性药学可接受的载剂、 佐剂及赋形剂的剂量单位剂型施用。优选的组合物或产品包含式(I)-(IV)中任一式的化合物以及HIV抑制剂，其中 该抑制剂为达鲁那韦或化学名称为(1-苄基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯 并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基}-2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢呋喃并[2，3-b]呋 喃-3-基酯的化合物。根据本发明优选的是一种包含噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨 基)-N-异丁基苯并[d]噁唑-6-羧酰胺基)-3_羟基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸酯的组 合物或产品，并且其中HIV抑制剂为(1-苄基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯 并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基} -2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢呋喃并[2，3-b]呋 喃-3-基酯。对口服施用剂型而言，本发明组合物可与适当添加物混合，例如赋形剂、稳定剂或 惰性稀释剂，并利用常规方法调配成适合的施用剂型，例如片剂、包衣片剂、硬胶囊剂、水 溶液剂、醇溶液剂或油溶液剂。适合的惰性载剂的实例为阿拉伯胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸 钾、乳糖、葡萄糖、或淀粉(特别是玉米淀粉)。在此情况下，可以干式或湿式颗粒实现该制 备。适合的油性赋形剂或溶剂为植物或动物油，例如向日葵油或鱼肝油。水或醇溶液的适 合溶剂为水、乙醇、糖溶液、或其混合物。聚乙二醇和聚丙二醇亦可作为其它施用剂型的进 一步的辅助剂。作为立即释放型片剂时，这些组合物可包含本领域已知的微晶纤维素、磷酸 二钙、淀粉、硬脂酸镁和乳糖和/或其它赋形剂、粘合剂、增量剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂。本发明组合的口服施用亦可适当地通过均勻并且充分混合适当量的各种粉末型 式的组份，任选还包括微细分离的固体载剂，再将混合物填充至例如硬明胶胶囊内而完成。 该固体载剂可包括一种或多种物质作为粘合剂、润滑剂、崩解剂、着色剂等。适合的固体载 剂包括例如磷酸钙、硬脂酸镁、滑石、糖类、乳糖、糊精、淀粉、明胶、纤维素、聚乙烯吡咯烷、 低熔点蜡及离子交换树脂。本发明组合的口服施用还可通过制备仅含所需量的式(I)化合物(任选地与上述 固体载剂混合)的胶囊剂或片剂，以及仅含所需量的HIV抗病毒剂的胶囊的方式完成。含有 式(I)化合物的压制片剂可通过均勻并且充分混合活性成份与如前所述的固体载剂，以提 供具有必要的压缩性质的混合物，然后用适合的机器压实该混合物至所需形状与大小。模 制片剂可在适合的机器使用惰性液体稀释剂润湿的粉末化式(I)化合物混合物模塑而制 得。口服施用还可通过下述方式完成制备前述含有式(I)化合物的压制或模制片剂、供插 入标准胶囊(例如硬明胶胶囊)的适合大小的片剂，然后将该片剂插入含有适当量的HIV抗病毒剂粉末的胶囊内。供皮下或静脉施用时，组合物的活性成份，若需要可利用常规物质(例如助溶剂、 乳化剂或其它辅助剂)，调制成溶液剂、混悬剂或乳剂。组合物的组份还可经冻干，获得的冻 干物可用于例如生产注射用或输注用制剂。适合的溶剂例如水、生理盐水溶液或醇类，如乙 醇、丙醇、甘油，以及糖溶液例如葡萄糖或甘露醇溶液，或另选地各种所述溶剂的混合物。可 注射的溶液或混悬液可根据已知技术配制，利用适合的无毒性、肠胃外可接受的稀释剂或 溶剂，例如甘露醇、1，3_ 丁二醇、水、林格氏溶液或等渗压氯化钠溶液，或适合的分散或润 湿和悬浮剂，例如无菌、温和、不挥发性油类，包括合成的甘油单或二酸酯，以及脂肪酸，包 括油酸。本发明的药物组合物亦可局部施用，尤其当治疗靶标包括可容易地通过局部施用 达到的区域或器官时，包括眼部、皮肤、或较末端肠道的疾病。适合的局部用制剂可容易配 制以供这些区域或器官施用。供较末端肠道的局部施用可以直肠栓剂制剂(参见下文)或 适当的灌肠剂实现。还可以采用局部的经皮用贴片。供局部使用时，药物组合物可被配制成适当的软膏，其含有悬浮或溶解在一种或 多种载剂中的活性成份。本发明化合物的适合局部施用的载剂包括(但不受限于)矿物油、 液状石蜡、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。另选地，药物组合物 可配制成适当的洗剂或乳膏剂，其含有悬浮或溶解在一种或多种药学可接受的载剂中的活 性成份。适合的载剂包括但不限于矿物油、脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六烷 基酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。当以栓剂形式经直肠施用时，这些制剂可通过混合本发明组合物的个别组份与适 合的非刺激性赋形剂而制备，所述赋形剂例如可可豆脂、合成的甘油酯类或聚乙二醇类，其 在常温下为固态，但在直肠腔内则液化和/或溶解以释放药物。在本发明方法的另一实施方案中，施用方式可与食物(例如高脂餐)一起或不与 食物一起进行。术语“与食物一起”意指用餐是在施用本发明组合的一种或两种组份时或 不超过约一小时前或后。在一个实施方案中，本发明组合含有一定量的式(I)化合物或其药学可接受的 盐，该量在相对于单独施用HIV抑制剂或抗病毒剂时的生物利用度下，足以在临床上改善 该HIV抑制剂或抗病毒剂的生物利用度。在另一实施方案中，本发明组合含有一定量的式(I)化合物或其药学可接受的 盐，相对于HIV抑制剂单独施用时的至少一种药物动力学变量而言，该量足以例如增加HIV 抑制剂的至少一种选自下列的药物动力学变量在例如12小时时的t1/2、(；in、(；ax、(；S、AUC， 或者在例如24小时时的AUC。进一步的实施方案涉及用于改善HIV抑制剂生物利用度的方法，该包括对需要此 种改善的个体施用本文定义的组合，该组合包含治疗有效量的该组合的各种组份。在另一实施方案中，本发明涉及利用式(I)化合物或其药学可接受的盐，作为HIV 抑制剂的至少一种选自下列的药物动力学变量的改善剂在例如12小时时的t1/2、(；in、(；ax、 CSS、AUC，或者是在例如24小时时的AUC ；条件是该应用并不在人体或动物体内实施。此处使用的术语“个体”意指动物，优选哺乳动物，最适宜为人类，其为治疗、观察 或实验的对象。
生物利用度定义为施用剂量达到体循环的分数。t1/2代表半衰期或血浆浓度降至 其初始值的一半所需的时间。Css为稳态浓度，亦即当输入药物速率等于消除速率时的浓度。 Cmin定义为在用药间隔期间测到的最低(最小)浓度。C-代表在用药间隔期间测到的最 高(最大)浓度。AUG定义为血浆浓度-时间曲线下在一定期间(例如在12小时或24小 时)内的面积。本发明组合可依该组合内所含的各项组份所适合的特定剂量范围施用于人体。包 含在该组合内的组份可一起或分开施用。HIV抑制剂以及式(I)化合物或其药学可接受的 盐或酯类可能的标示剂量水平为每天0. 02至5. 0克。当HIV抑制剂或抗病毒剂与式⑴化合物合并施用时，HIV抑制剂对式⑴化合 物的重量比的适宜范围为，约40 1至约1 15，或约30 1至约1 15，或约15 1 至约1 15，典型地约10 1至约1 10，或更典型地约8 1至约1 8。还可使用的 HIV抑制剂对式(I)化合物的重量比的适宜范围为，约6 1至约1 6，或约4 1至约 1 4，或约3 1至约1 3，或由2 1至约1 2，或约1.5 1至约1 1.5。一方面， HIV抑制剂的重量等于或大于式(I)化合物的重量，其中HIV抑制剂对式(I)化合物的重量 比的适宜范围为，约1 1至约15 1，典型地约1 1至约10 1，更典型地由约1 1 至约8 1。还可使用的HIV抑制剂对式(I)化合物的重量比的适宜范围为，约1 1至约 6 1，或约1 1至约5 1，或约1 1至约4 1，或约3 2至约3 1，或约1 1 至约2 1，或约1 1至约1. 5 1。根据一个实施方案，HIV抑制剂与式(I)化合物可一起施用每天一或两次，每周 一、二、三、四、五或六次，优选经口施用，其中HIV抑制剂每剂的量为约10至约2500毫克， 式(I)化合物每剂的量为约10至约2500毫克。在另一实施方案中，每天一起施用一或两 次的每一剂量为约50至约1500毫克的HIV抑制剂，以及约50至约1500毫克的式(I)化 合物。在再另一实施方案中，每天或每周一起施用的每一剂量为约100至约1000毫克的 HIV抑制剂，以及约100至约800毫克的式(I)化合物。在再另一实施方案中，每天或每周 一起施用的每一剂量为约150至约800毫克的HIV抑制剂，以及约100至约600毫克的式 (I)化合物。在再另一实施方案中，每天或每周一起施用的每一剂量为约200至约600毫克 的HIV抑制剂，以及约100至约400毫克的式(I)化合物。在再另一实施方案中，每天或每 周一起施用的每一剂量为约200至约600毫克的HIV抑制剂，以及约20至约300毫克的式 (I)化合物。在再另一实施方案中，每天或每周一起施用的每一剂量为约100至约400毫克 的HIV抑制剂，以及约40至约100毫克的式(I)化合物。供每日施用两次的HIV抑制剂(毫克)/式(I)化合物(毫克)示例性组合剂量 包括 50/100、100/100、150/100、200/100、250/100、300/100、350/100、400/100、450/100、 50/133,100/133,150/133,200/133,250/133,300/133,50/150,100/150,150/150, 200/150、250/150、50/200、100/200、150/200、200/200、250/200、300/200、50/300、80/300、 150/300,200/300,250/300,300/300,200/600,400/600,600/600,800/600,1000/600, 200/666,400/666,600/666,800/666,1000/666,1200/666,200/800,400/800,600/800, 800/800、1000/800、1200/800、200/1200、400/1200、600/1200、800/1200、1000/1200 和 1200/1200。供每日施用两次的HIV抑制剂(毫克)/式(I)化合物(毫克)其它示例性 组合剂量包括 1200/400、800/400、600/400、400/200、600/200、600/100、500/100、400/50、300/50 和 200/50。然而，应当理解，供任何特定患者的特定剂量水平和服用频率可能改变并且将取 决于包括以下的多种因素所用特定化合物的活性、代谢稳定性以及该化合物的作用时间 长度；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；施用的方式和时间、排泄速率、药物 组合、特定病情的严重性、以及进行治疗的患者类型。在本发明的一个实施方案中，还提供了一种生产的物品，该物品包括可有效治疗 HIV感染的组合物；以及包装材料，其包括指示该组合物可用于治疗HIV感染的标签；其中 该组合物包含如本文所述的组合。
实施例表5提供一些在各种活体外试验中测试化合物C1-C55时所获得的结果的概要。有 关这些试验的更多详细内容列于表格下方。给出的结果与实施例是用来举例说明本发明， 而不应被解释为限制本发明的范围。
试验1和2 抗病毒活件/毒件以细胞试验测试本发明化合物抗病毒活性，其根据下列操作步骤进行。 使用绿色荧光蛋白质(GFP)和HIV-特异性启动子、HIV-1长末端重复序列(LTR) 设计人类T-细胞株MT4。此细胞株命名为MT4LTR-EGFP，并且可用于体外评估待测化合物 的抗HIV活性。在HIV-1感染的细胞中，会生产出Tat蛋白质，其会向上调节LTR启动子并 且最终导致刺激GFP报导基因生产，得以荧光分析进行中的HIV-感染情形。类似地，用GFP和构成性细胞巨化病毒(CMV)启动子设计MT4细胞。此细胞株命 名为MT4CMV-EGFP，并且可用于体外评估待测化合物的细胞毒性。在此细胞株中，使GFP 水平与感染的MT4 LTR-EGFP细胞相比较。细胞毒性检测的化合物会减低模拟感染的MT4 CMV-EGFP细胞的GFP水平。可以测定有效浓度值例如50%有效浓度(EC5Q)，并且通常以iiM表示。EC5Q值定 义为测试化合物减低HIV-感染细胞的荧光50%时的浓度。50%细胞毒性浓度(CC5(1，uM) 定义为测试化合物减低模拟感染的细胞的荧光50%时的浓度。CC5(I对EC5(i的比率定义为选 择性指数(SI)，并且是抑制剂抗-HIV活性的选择性的指标。HIV-1感染和细胞毒性的最终 监测是使用扫瞄显微镜完成。影像分析允许有极敏感的病毒感染检测。测定是在细胞坏死 前进行，其通常是在感染约五天后发生，特别地，测定是在感染三天后进行。表5列出对抗野生型HIV-1 IIIB株的pEC5Q值以及一些挑选的本发明化合物的 pcc50 值。pEC50 值对应于"log10 (EC50)，pCC50 值对应于"log10 (CC50)。列出的化合物具有pEC5(1值低于4.00至最高4.88 ￡(5(1。达鲁那韦是一种商业可 得的HIV蛋白酶抑制剂，具有8. 17的pEC5(1值。就抗病毒活性而言，当与8. 17相比较时， < 4至4. 88的pEC5Q范围明显较低，因此证明本发明化合物对HIV具有极低的抗性或无抗 性。同样地，本发明化合物所报道的毒性值范围低于4. 00至最高4. 86pCC5(l，证明这些化合 物的低或极低毒性。试验3 测试化合物(HLM15’ )的代谢稳定性亚细胞组织制剂是根据Gorrod 等人(Xenobiotica，5，pp. 453-462 (1975))通过 组织机械勻浆后离心分离而制得。使人类肝组织在冰-冷的0. 1M Tris-HCl(pH 7.4)缓冲 液中漂洗以洗除过量的血液。然后擦干组织，称重，再利用外科剪刀粗略地剪碎。使组织 碎片在3倍体积的冰-冷的0. 1M磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中勻浆，利用配备Teflon杵的 Potter-S(Braun，意大利)或者Sorvall 0mni_Mix均质机勻浆7x10秒。在两种情况下，勻 浆过程中，容器要保持在冰内/上。利用Sorvall离心机或Beckman超速离心机在4°C下以 9000xg离心处理该组织勻浆物20分钟。所得上清液可储存于-80°C并且命名为‘S9’。利 用Beckman超速离心机在4°C下以100，000xg离心处理该S9部分60分钟。将所得上清液 小心吸出，分份，命名为‘胞质溶胶’。使片状沉淀物再悬浮于0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.4) 中，以每0. 5克原始组织重量的终体积为1毫升的比例制备，并命名为‘微粒体’。所有的亚 细胞部分经分份后立即在液氮中冷冻并储存于-80°C直至使用。将测试化合物和NADPH-产生系统添加至悬浮于0. 1M磷酸盐缓冲液(pH 7. 4)中 的人类肝微粒体(‘微粒体’部分，蛋白质浓度1毫克/毫升)中，以获得下列的最终反应 混合物浓度5 y M测试化合物、0. 8mM D-葡萄糖-6-磷酸盐、0. 8mM MgCl2和0. 8U/毫升葡 萄糖-6-磷酸盐脱氢酶。热-灭活(95°C下10分钟)的‘S9’或微粒体用于空白实验。反 应混合物在37°C下孵育5分钟，然后通过加入0. 8mM ^ -NADP使反应开始。使反应孵育0 或15分钟。接着通过加入2倍体积的DMS0(或乙腈)终止反应。将样品离心(10分钟，900xg)，再通过LC-MS分析。
试验4 :CYP450抑制作用测试化合物的代谢被不同CYP P450同功酶抑制的作用是使用大肠杆菌表达的蛋 白质(3A4、2C9、2D6、1A2和2C19)测定的，其将它们的特异性底物转化为荧光分子(表6)。 此种荧光分子是使用荧光板读数器(Vict0r2(WallaC)或Fluoroskan (Labsystems))测量 的。抑制酶反应的化合物将导致荧光讯号减弱。CYP P450酶是自行制备的或市购的，并且 储存于-80°C。表6 由各个大肠杆菌表汰的CYP P450同功_介导的转仆,作用 此试验在黑色96孔Costar权中进行。将测试化合物加至存在NADPH产生系统的 CYP P450酶溶液中。在37°C下预孵育5分钟后，添加新配制的磷酸盐缓冲(pH 7. 4)的底物 溶液。采用已知的CYP P450抑制剂作为阳性对照组，阴性对照组在CYP P450酶不存在下进 行。最终反应混合物浓度参见表7。使反应混合物在37°C下分别培育30min(CYP3A4-BFC)、 30min (CYP3A4-BQ)、lOmin(CYP3A4-DBF)、15min(CYP1A2-CEC)、30min(CYP2C9-MFC, CYP2C19-CEC)或45min (CYP2D6-AMMC)。然后通过添加200 u 1乙腈终止该反应，并检测荧 光信号。表7 供CYP P450同功_抑制i式骀的j|终反应、混合物浓度 CYP P450同功酶抑制作用(％抑制)的计算%活性=(100/ (阳性对照组平均值-阴性对照组平均值))x (样品平均值_阴性 对照组平均值)% 抑制=100-% 活性试验5 %代谢阻断TMC114代谢的抑制作用将达鲁那韦(目前以Prezista 销售的TMC 114)和待测增强剂化合物添加到悬 浮于磷酸钾缓冲液(PH 7.4)中的人类肝微粒体(‘微粒体’部分，蛋白质浓度1毫克/毫 升)中，以最终反应混合物浓度为3yM达鲁那韦及3yM测试化合物。在非增强的平行反 应中，未添加测试化合物。煮沸的人类肝微粒体用于空白实验。在添加(以1 3(v/v)比率)由下列组成的 NADPH生成混合物到2% NaHC03中后0 _烟碱酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(0 "NADP, 0. 5毫 克/毫升，653. 2 u M)、D-葡萄糖-6-磷酸盐(2毫克/毫升，7. ImM)、葡萄糖_6_磷酸盐脱氢 酶(1. 5U/毫升)，使反应混合物在37°C下孵育30或120分钟，然后通过提高温度至95°C以 终止反应。利用HPLC-MS测定达鲁那韦的浓度。对照组值为12% (10个实验的中间值)， 其是在剩余的TMC 114百分比在非增强反应(=测试化合物不存在)中测定时获得的。为了测试体内的“增强容量”(=化合物提高达鲁那韦的药物动力学的能力)，代 表性实例CI、C6和C7是在施用5毫克/公斤体重的达鲁那韦15分钟前，以5毫克/公斤 体重的剂量经口(在适合的赋形剂中，例如PEG400-或PEG400/30%盐水或Hp0⑶)给予 一组(n = 3)喂食的雄性小猎犬。经口用药是利用灌食法完成。在所有时间，使犬自由且 可持续的用水。血液样品是在用药后0 (=用药前)、0. 5、1、2、4、7和24小时的时候从颈静 脉收集的。将样品在5°C下以1900xg离心10分钟使血浆分离。分离的血浆在血液取样后 两小时内储存于冰箱中。在所有的时间，血液和血浆样品均放置在熔冰上并避免光照。通 过LC-MS/MS方法针对达鲁那韦及增强化合物作分析各个血浆样品。达鲁那韦的药物动力 学参数是使用非隔室模型(noncompartmental)分析法、WinNonLin软件5. 0版，Pharsight 计算的，并且列于表8中。所列的数值系3只犬的平均值。交叉变化(fold change ；FC)值 意指与对照组实验(只给5毫克/毫升达鲁那韦)的差异。
表8寸汰■帏■騎綱裤 实验试剂均购自商业来源，并以收到的状态使用，薄层色谱分析法是在硅胶60F254板 (Merck)上进行，LC-MS分析是利用下列方法之一完成。化合物C1-C55的数据列于表1 (参 见前面)。LCMS-方法 1HPLC-系统Waters Alliance 2695 (泵 + 自动取样器)，Waters 996(光二极管阵 列_检测器)柱Waters XTerra MS C18 2. 5 μ m 50x4. 6mm温度55°C流动相A:10mM HC00NH4+0. 1% HCOOH 在水中B : CH3CN梯度0分钟15% B，3 分钟95% B, 4. 2 分钟95% B平衡时间1.2分钟流速2毫升/分钟注射体积0. 5毫克/毫升溶液，5微升MS-检测器Waters ZQ离子化以正和负模式的电喷射LCMS-方法 2HPLC-系统Waters Alliance 2790 (泵 + 自动取样器)，Waters 996(光二极管阵 列_检测器)柱Waters SunFire C18 3. 5 μ m 100x4. 6mm温度55°C流动相A IOmM NH400CH+0. 1 % HCOOH 在水中B:乙月青梯度0分钟5% B, 5. 4 分钟95% B, 7. 2 分钟95% B平衡时间1.8分钟流速1.5毫升/分钟注射体积0. 5毫克/毫升溶液，5微升MS-检测器Waters LCT离子化以正及负模式的电喷射
NMR光谱是在以400MHz操作的Bruker Avance 400光谱仪上记录的。化学位移 以ppm给出，J值以Hz为单位。多重峰性使用下列缩写标示d指双峰，t指三峰，m指多重 峰,等等。化合物名称利用ChemdrawUltra 9. 0. 7版(CambridgeSoft)生成。脸式(I)化合物是根据方案1、2和3所提供的概括性方法1、2和3制得的。更详细 的步骤描述于下文。 方案1 方法1 方案2 方法2 方案3 方法3方案4及5阐释某些中间体羧酸(在上面方案中是以Il标示的)在无法市购取 得的情况下的制法。这些方案旨在阐释而非限制。
方案4 2-甲基苯并M噁唑-6-甲酸(4. 2)的合成使化合物4. 1 (1. 10g)和1，1，1-三甲氧基乙烷(5mL)的溶液在微波中在100°C下 加热5分钟。使反应混合物在真空下浓缩，得到1. 26g的化合物4. 2(95%纯度)为棕色粉 末。NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 ppm2. 66(s,3H) ,7. 74 (d，J = 8. 4Hz，1H)，7. 96 (dd，J = 8. 3， 1. 4Hz, 1H)，8. 16 (d, J = 1. 4Hz, 1H)，13. 07 (s (br)，1H). 方案5 合成2_(乙基(甲基)氨基)苯并[d]噁唑-6-甲酸(5.6)在冰浴中向无水MeOH(4L)的搅拌的溶液中滴加CH3C0C1 (490mL)，低于10°C。然 后加入化合物4. 1 (486g，3. 17mol)。使该混合物在室温下搅拌2天。TLC (EtOAc/石油醚= 1 1)显示反应完全。在真空下除去MeOH。将水(4L)加至该混合物中。缓缓加入K2C03， 直到pH= 10。分离有机相，用妝2504干燥，浓缩，得到化合物5.2(46(^，80%)为棕色固 体。将化合物5. 2(393g，2. 35mol)和 o_ 乙基黄原酸钾(393g，2. 45mol)在吡啶(3L) 中的混悬液加热至回流达12小时。TLC (EtOAc/石油醚=1 2)显示反应完全。使该混 合物冷却至室温，再倾入到四个5L烧瓶中，其中含有1600mL浓HC1和10L冰水。使反应搅 拌5分钟，通过过滤回收固体产物。将该固体用1L水洗涤，再干燥30分钟。使该固体溶 解于10L乙酸乙酯中，用2L的IN HC1和1L的盐水洗涤，用Na2S04干燥，浓缩，得到化合物 5. 3(390g,79. 3% )为粉红色固体。在低于20°C下向化合物 5. 3(320g，1. 53mol)和 K2C03(276g，2mol)在Et0AC(3L)中 的混悬液中加入Mel (238. 9g，1. 68mol)。使该混合物在室温下搅拌12小时。TLC (EtOAc/ 石油醚=1 3)显示反应完全。将水(2L)加至该混合物中。分离有机相，用Na2S04干燥， 浓缩，得到5.4(320g，93.8% )为粉红色固体。使化合物5. 4 (5g)溶解于75mL THF中。加入N-甲基-N-乙基胺(13. 2g，10eq)，再将该混合物在70°C搅拌直到LC-MS显示反应完全。使该混合物蒸发至干燥，该化合物 5.5(5. 25g,99% )就这样用于下一反应。使化合物5. 5(5. 25g)溶解于 THF-水 1 1 (IOOmL)中。加入 LiOH (5. 36g，IOeq)。 将该混合物在70°C搅拌过夜。加入浓HCl直到见到沉淀。将该混合物用IOOmL 2-Me-THF 萃取3次。使合并的有机层用MgSO4干燥。过滤，蒸发溶剂，得到5. 6为淡黄色固体。使该 化合物在真空下干燥过夜。得到 4. 33g(88% )。1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 20 (t, J =7. 2Hz,3H)，3. 15 (s, 3H)，3. 58 (q, J = 7. 1Hz，2H)，7. 29 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 80 (dd, J = 8. 3，1. 5Hz, 1H)，7. 84 (d, J=L 5Hz, 1H)，12. 65 (s (br)，1H)最终化合物的代表性实例通过方法1制备 方案6 合成噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羟基-4-(^异丁基苯并[d]噻唑_6_甲 酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C7)使⑶-1-((S)_环氧乙烷-2-基)-2_苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(25. Og) (6. 1)和 异丁基胺(10. Oeq)在异丙醇(150mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。使反应混合物在真 空下浓缩，定量得到6. 2。使该粗产物在高真空下干燥，就这样用于下一步骤。使在二氯甲烷中的(2S，3R) -3-羟基_4_ (异丁基氨基)苯基丁烷_2_基氨基甲 酸叔丁酯(6. 2) (31. Og)加至苯并噻唑-6-甲酸(1. 05eq)、三乙胺(1. 5eq)和HATU(2-(7_氮 杂-IH-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3_四甲基脲鐺六氟磷酸盐，1.05eq)在二氯甲烷(500mL) 中的溶液中。反应混合物在室温下搅拌过夜。加入水，相分离。有机相用饱和Na2CO3水溶 液、盐水洗涤三次，用MgSO4干燥，在减压下浓缩。使残余物通过柱色谱法纯化(洗脱液二 氯甲烷一二氯甲烷/甲醇95 5)，定量得到化合物6. 3。将氯代三甲基甲硅烷(3eq)加至(2S，3R)_3_羟基_4_(N-异丁基苯并[d]噻 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(6. 3) (45g)和碘化钠(4eq)在乙 腈(300mL)中的溶液中。反应混合物在室温下搅拌2小时。加入2M NaOH水溶液，持续搅 拌另外30分钟。将盐水和二氯甲烷加至反应混合物中。分离有机相，用盐水洗涤，用MgSO4 干燥，在减压下浓缩。将该化合物通过柱色谱法纯化(洗脱液二氯甲烷一二氯甲烷/甲醇9 1)，获得26. 6g (74% )的6. 4为白色固体。使N-((2R，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁基)-N-异丁基苯并[d]噻唑-6-甲 酰胺(6.4) (20. 9g)、2，5-二氧代吡咯烷-1-基噻唑-5-基甲基碳酸酯(1. Oeq)和三乙胺 (1. 2eq)在2-甲基-四氢呋喃(300mL)中的溶液在室温下搅拌3小时。将反应混合物用饱 和Na2C0yK溶液洗涤，用1%304干燥，在减压下浓缩。使该粗产物通过柱色谱法纯化(洗脱 液二氯甲烷一二氯甲烷/甲醇95 5)，得到24.0g(85% )的纯化合物C7。NMR (400MHz,氯仿-d_ ) S ppm 0. 63—0. 80 (m，6H)，1. 71 — 1. 86 (m，1H)， 2. 90-3. 02 (m, 1H)，3. 02-3. 23 (m, 3H)，3. 41-3. 53 (m, 1H)，3. 82-4. 06 (m, 3H)，4. 86 (s (br)， 1H)，4. 99-5. 08 (m, 1H)，5. 16-5. 33 (m, 2H)，7. 17-7. 33 (m, 5H)，7. 53 (d, J = 8. 2Hz, 1H)， 7. 82 (s, 1H) ,8. 02 (s, 1H) ,8. 17 (d, J = 8. 3Hz, 1H) ,8. 78 (s, 1H) ,9. 09 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_异丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)_3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C1) NMR(400MHz,氯仿-d ) S ppm 0. 58-0. 84 (s (br), 6H)，1. 28 (t，J = 7. 1Hz， 3H)，1. 77 (s (br)，1H)，2. 90-2. 99 (m, 1H)，3. 00-3. 41 (m, 3H)，3. 17 (s, 3H)，3. 42 (d (br)，J = 13. 9Hz, 1H), 3. 62 (q, J = 7. 2Hz，2H)，3. 71-4. 05 (m，3H)，5. 05-5. 34(m，4H)，7. 14-7. 37 (m, 8H), 7. 79 (s, 1H) ,8. 76 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羟基-4-(^异丁基-2-(哌啶-1-基)-苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C3) NMR (400MHz,氯仿-d. ) S ppm 0. 71 (s (br)，6H)，1. 64-1. 80 (m，6H)， 2. 82-3. 27 (m, 4H)，3. 4 (d，J = 12. 9Hz, 1H)，3. 69 (s,4H)，3. 75-4. 07 (m 3H)，4. 92-5. 3 (m, 4H)，7. 14-7. 32 (m, 8H)，7. 78 (s, 1H)，8. 75 (s, 1H)吡啶-4-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_异丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)_3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C10) 1H NMR (400MHz,氯仿-d. ) δ ppm 0· 75 (s (br)，6H)，1· 25 (t，J = 7·2Ηζ，3Η)， 1. 75(s，1Η)，2· 90-2. 99(m，1Η)，3· 0-3. 40(m，3H)，3· 20(s，3H)，3· 42(d，J = 12. 6Ηζ，1Η)， 3. 62 (q, J = 7. 2，2H)，3. 71-4. 05 (m, 3H), 4. 94 (d, J = 14. 3Hz, 1H)，5. 07 (d, J = 14. 8Hz, 1H)，5. 07 (s (br)，1H)，5. 23 (s (br)，1H)，7. 09 (d，J = 4. 6，2H)，7. 1-7. 3 (m, 8H)，8. 53 (d, J = 5. 9，2H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)-N-甲基苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-3-羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C19) 1H NMR(400MHz,氯仿 _d) δ ppm 1. 27 (t，J = 7. 1Hz，3H)，2. 85-3. 96 (m，1H)， 2· 98-3. 09(m，4H)，3· 18 (s，3Η)，3· 37-3. 48 (m，1Η)，3· 61 (q，J = 7. 1Hz，2Η)，3· 77-4. 01 (m， 3Η)，5. 03 (s (br)，1H)，5. 12-5. 25 (m, 2H)，5. 37 (s (br)，1H)，7. 10-7. 32 (m, 7H)，7. 10 (s, 1H)， 7. 78 (s，1H) ,8. 75 (s，1H)噻唑-5-基甲基(25，35)-3-羟基-4-(^异丁基-2-(吡咯烷-1_基)苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C51)1H NMR (400MHz,氯仿-d) δ ppm 0. 50-0. 70 (m, 6H) , 1. 48-1. 62 (m, 1H), 1. 98-2. 09 (m, 4Η)，2. 83-2. 95 (m, 2Η)，3. 03-3. 20 (m, 3H)，3. 64 (t, J = 6. 6Hz,4H)， 3. 79-4. 07 (m, 3H)，5. 18-5. 30 (m, 2H)，5. 42 (s (br)，1H)，5. 66 (s (br)，1H)，7. 05-7. 34 (m, 8H), 7. 83 (s，1H) ,8. 74 (s，1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-4-(^乙基-2-(乙基(甲基)氨基)苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C29) 1H NMR(400ΜΗζ，氯仿 _d) δ ppm 1. 10 (t, J = 6. 7Ηζ，3Η)，1. 28 (t, J = 7. 1Ηζ，3Η)，
2.84-2. 96 (m, 1Η)，2. 98-3. 10 (m, 1Η)，3. 21 (s，3Η)，3. 28-3. 43 (m, 3H)，3. 64 (q, J = 7. 2Hz, 2H)，3. 72-4. 03 (m, 3H)，5. 14-5. 33 (m, 3H)，7. 14-7. 29 (m, 6H)，7. 30-7. 39 (m, 2H)，7. 79 (s, 1H) ,8. 76 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4_(N-乙基-2_(吡咯烷-1-基)苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C30) 1H NMR (400MHz,氯仿 _ d ) δ ppm 1. 02-1. 17 (s，3H)，2. 03 (t，J = 6. 6Hz, 4H)，2. 82-3. 07 (m, 1H)，3. 07-3. 13 (m, 1H)，3. 28-3. 44 (m, 3H)，3. 65 (t，J = 6. 5Hz,4H)，
3.70-4. 03 (m, 3H)，5. 10-5. 30 (m, 3H)，5. 41-5. 55 (m, 1H)，7. 08-7. 42 (m, 8H)，7. 77 (s, 1H)， 8. 75 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3S)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_异丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C52) 1H NMR (400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 52—0. 71 (m，6H)，1. 27 (t，J = 7. 1Hz)， 1. 47-1. 61 (m, 1H) ,2. 86-2. 97(m,2H) ,3. 02-3. 22 (m，6H) ,3. 61 (q, J = 7. 2Hz，2H)， 3. 78-4. 06 (m, 3H)，5. 09-5. 30 (s,2H)，5. 42 (s (br)，1H)，5. 56 (s (br)，1H)，7. 06-7. 33 (m, 8H), 7. 84 (s，1H) ,8. 79 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-4-(^(环己基甲基)-2-(吡咯烷-1-基)苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C31) 1H NMR (400MHz,氯仿-d. ) δ ppm 0· 44-0. 65 (m，2H)，0· 90-1. 20 (m，3H)，
1.36-1. 50 (m，2H)，1. 50-1. 70(m,4H) ,2. 04(t, J = 6. 6Hz，4H)，2· 81-2. 96 (m, 1H)，
2.96-3. 10 (m, 1H)，3. 10-3. 21 (m, 1H)，3. 21-3. 34 (m, 1H)，3. 45-3. 56 (m, 1H)，3. 58-4. 04 (m, 7H)，5. 08-5. 28 (m, 3H)，5. 38-5. 51 (m, 1H)，7. 09-7. 36 (m, 8H)，7. 77 (s, 1H)，8. 75 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-4-(^(环己基甲基)-2-(乙基(甲基)氨基)苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C32) 1H NMR(400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 46-0. 68(m，2H)，0· 92-1. 18(m，3H)，1. 27 (t, J = 7. 1Ηζ，3Η)，1. 36-1. 50 (m, 2H)，1. 50-1. 76(m，4H)，2. 83-2. 97 (m, 1H)，2. 97-3. 10 (m, 1H)，3. 10-3. 23 (m, 4H)，3. 23-3. 33 (m, 1H)，3. 40-3. 52 (m, 1H)，3. 61 (q，J = 7. 1Hz，2H)，
3.69-4. 03 (m, 3H)，5. 07-5. 25 (m, 3H)，5. 25-5. 39 (m, 1H)，7. 08-7. 35 (m, 8H)，7. 78 (s, 1H)， 8. 76 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羟基-1-苯基-4- (N-(丙_2_炔基)_2_ (吡咯 烷-1-基)苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)丁-2-基氨基甲酸酯(C33) 1H NMR (400MHz，氯仿-d. ) δ ppm 2· 06 (t，J = 7. OHz，4H)，2· 37 (t，J = 2. 2Hz， 1H)，3. 0 (s (br)，2H)，3. 58 (d, J = 13. 3Hz, 1H)，3. 68 (t, J = 6. 7Hz，4H)，3. 8-4. 15(m，3H)，
4.18-4. 22 (m, 1H)，5. 05 (s, 1H)，5. 15-5. 26 (m, 2H)，7. 19-7. 30 (m, 6H)，7. 34 (d, J = 8. IHz, 1H), 7. 43 (d, J = 8. 0Hz, 1H)，7. 52 (s, 1H) ,8. 77 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_ (2_羟基_2_甲基丙基) 苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C34) 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ ppm 1. 27 (t, J = 7. 1，3H)，1. 71 (s，6H)，2. 6-3. 15 (m, 3H)，3. 19 (s，3H)，3. 62 (q, J = 7. 1Hz，2H)，3. 4-4. 3 (m, 5H)，5. 19 (s (br)，3H)，7. 14-7. 25 (m, 7H), 7. 29 (d, J = 7. 8Ηζ，1Η)，7· 79(s，lH)，8. 77(s，lH) (2 个质子未观察到)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_ (丙_2_炔基)苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C35) 1H NMR(400MHz,氯仿 _ d ) δ ppm 2. 37 (t, J = 2. 26Hz, 1H)，3. 00 (s (br)，2H)，
3.23(s，3H)，3· 56 (d，J = 13. 2Hz，1H)，3· 63 (q, J = 7. 1Ηζ，4Η)，3· 85-4. 15(m，4H)，
4.18-4. 25 (m, 1H)，5. 04 (s (br)，1H)，5. 05-5. 4 (m, 2H)，7. 15-7. 30 (m, 5H)，7. 33 (d, J = 8. 1Hz, 1H)，7. 44 (s, 1H)，7. 51 (s，1H)，7. 81 (s，1H)，8. 77 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_异丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-1-(4_氟苯基)-3_羟基丁-2-基氨基甲酸酯(C53)
1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 0. 58-0. 84 (s (br)，6H)，1. 28 (t，J = 7. 0Hz，3H)， 1. 77 (s (br)，1H)，2. 90-3. 28 (m, 4H)，3. 20 (s, 3H)，3. 36-3. 88 (m, 1H)，3. 63 (q, J = 7. 2Hz, 2H)，3· 85-3. 94(m，3H)，4· 95(s(br)，1H)，5· 18-5. 25 (m，3Η)，6. 94 (t，J = 8. 6Hz，2H)， 7. 15-7. 20 (m, 3H)，7. 31 (s，1H)，7. 32 (d, J = 8. OHz, 1Η)，7. 82 (s, 1H)，8. 78 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙炔基氨基)-N_(丙-2-炔基)苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C42) 1H NMR(400MHz,氯仿-d ) δ ppm 2. 34 (t, J = 2· 4Hz，1Η)，2· 37 (s (br)，1Η)， 2. 84-3. 15(m，2H)，3. 6(d，J = 13. 4Hz，1Η)，3. 8—4. 2 (m，6Η)，4. 24 (d，J = 2. 4Hz，2H)， 5. 16-5. 23 (m, 3H)，7. 1-7. 3 (m, 5H)，7. 39 (d, J = 8. OHz, 1Η)，7. 4-7. 5 (m, 1Η)，7. 52 (s, 1H)， 7. 8 (s，1H)，8. 79 (s，1H) (1 个质子未观察到)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羟基_4_ (N-异丁基苯并[d]噻唑_6_甲酰氨 基)-1_(吡啶-3-基)丁-2-基氨基甲酸酯(C55) 1H NMR (400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 0—0· 74 (m，6H)，1. 71 — 1. 86 (m，1H)， 2. 92-2. 98 (m, 1H)，3. 08-3. 22 (m, 3H)，3. 45-3. 49 (m, 1H)，3. 89-3. 98 (m, 3H)，4. 86 (s (br)， 1H), 5. 04(s(br)，1H)，5. 10(d(br)，J = 9. 2Hz, 1H)，4· 99-5. 08 (m, 1H)，5· 17-5. 28 (m, 2H)，
7.18-7. 20 (m, 1H)，7· 53 (d, J = 7. 6Hz, 1H)，7· 60(d(br)，1H)，7· 82 (s，1H)，8· 03 (s，1Η)，
8.17 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，8. 47 (s (br)，2H)，8. 78 (s, 1H)，9. 10 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_异丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-(吡啶-3-基)丁 -2-基氨基甲酸酯(C54) 1H NMR(400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 73 (s (br)，6H)，1. 28 (t，J = 7. 2Hz,3H)， 1. 78(s(br)，1H) , 2. 92-2. 94 (m, 1H) , 3. 04-3. 15(m，2H) ,3. 20 (s, 3H) , 3. 26 (dd, J = 14. 0,8. 4Hz, 1H) ,3. 39 (d, J = 12. 4Hz, 1H) ,3. 63 (q, J = 7. 1Hz，2H)，3. 87-3. 94 (m，3H)， 5. 00 (s (br)，1H)，5. 16-5. 30 (m, 3H)，7. 18-7. 21 (m, 2H)，7· 31 (s，1H)，7. 32 (d, J = 8. OHz, 1Η)，7. 58-7. 60 (s, 1Η)，7. 82 (s, 1H)，8. 47 (s (br)，2H)，8. 78 (s, 1H)化合物的代表性实例通过方法2制备 方案7:合成苯并[d][l，3] 二氧杂环戊烯-5-基甲基(2S，3R) _4_ (2_ (乙基(甲 基)氨基)-N_异丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸 酯(C36)将(2R，3S) -3- ( 二苄基氨基)-1-(异丁基氨基)-4-苯基丁烷-2-醇(7. 1) (29. 5g)在二氯甲烷(200mL)中的溶液加至2-(乙基(甲基)氨基)苯并[d]噁唑-6-甲 酸(1.05eq)、三乙胺(2. Oeq)和BOP(苯并三唑基N-氧基三二甲基氨基鳞六氟磷酸盐， 1. 05eq)在二氯甲烷(500mL)中的溶液中。反应混合物在室温下搅拌4小时。加入水，相 分离。有机相用饱和Na2CO3水溶液洗涤三次，用MgSO4干燥，在减压下浓缩。使残余物通过 柱色谱法纯化(洗脱液庚烷/乙酸乙酯6 4—乙酸乙酯)，得到38g(87%)的化合物 7. 2.将钯/ 碳(5g，10 % w/w Pd/C)加至 N- ((2R，3S) _3_ ( 二苄基氨基)_2_ 羟基 _4_ 苯 基丁基)-2_(乙基(甲基)氨基)-N-异丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰胺(7. 2) (18g)在甲醇 (400mL)中的溶液中。使反应混合物在室温和H2气氛下搅拌，直到LCMS显示完全转化。将 该混合物用硅藻土过滤。滤液蒸发后，得到10.6g(83%)的化合物7. 3。使N- ((2R，3S) _3_氨基_2_羟基_4_苯基丁基)_2_ (乙基(甲基)氨基)-N-异丁 基苯并[d]噁唑-6-甲酰胺(7. 3) (416mg)、苯并[d] [1,3] 二氧杂环戊烯_5_基甲基4-硝基 苯基碳酸酯(1.05eq)、DMAP(0. 2eq)和三乙胺(l.Oeq)在DMF(IOmL)中的溶液在室温下搅 拌过夜。加入水，相分离。有机相用饱和Na2CO3水溶液洗涤三次，用MgSO4干燥，在减压下浓 缩。使反应混合物用饱和Na2CO3水溶液洗涤，用MgSO4干燥，在减压下浓缩。该粗产物通过柱 色谱法纯化(洗脱液二氯甲烷/甲醇99 1 — 97 3)，得到263!1^(45%)的纯化合物 (C36)。1H NMR(400MHz，氯仿 _d) δ ppm 0. 72 (s，6H)，1· 28 (t，J = 7. 2Hz，3H)，1. 77 (s (br)， 1H)，2. 94-3. 26 (s+m, 3H+4H)，3. 40-3. 43 (m, 1H)，3. 63 (q, J = 7. IHz，2H)，3. 84-3. 97 (m, 3H)，4. 88-3. 93 (m, 3H)，5. 15 (s (br)，1H)，5. 95 (s, 2H)，6. 75-6. 77 (m, 3H)，7. 18-7. 32 (m, 8H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羟基_4_ (N-异丁基甲基-IH-苯并[d]咪 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C8) 1H NMR (400MHz,氯仿-d· ) δ ppm 0. 61-0. 78 (m，6H)，1. 70-1. 85 (m，1H)， 2. 90-3. 02 (m, 1H)，3. 02-3. 28 (m, 3H)，3. 39-3. 53 (m, 1H)，3. 86 (s,3H)，3. 76-4. 07 (m, 3H)， 5. 00-5. 30 (m, 4H)，7. 17-7. 32 (m, 6H)，7. 51 (s，1H)，7. 76-7. 84 (m, 2H)，7. 94 (s, 1H)，8. 78 (s, 1H)化合物的代表性实例通过方法3制备 方案8 合成噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基氨基)-N-异丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C27)将(2R，3S) _3_ (二苄基氨基)(异丁基氨基)~4~苯基丁烷_2_醇(8. 1)的草酸 盐(60. Og)、二碳酸二叔丁酯(0. 99eq)和三乙胺(3. 3eq)在二氯甲烷(IOOOmL)中的溶液在 室温下搅拌过夜。使反应混合物用饱和NaHCO3水溶液洗涤，用MgSO4干燥，在减压下浓缩。 该粗产物通过柱色谱法纯化(洗脱液二氯甲烷)，得到60. 3g(99% )的纯化合物8. 2。将钯/ 碳(12.4g，10 % w/w Pd/C)加至 was added to a solution of (2R, 3S)-3-( 二苄基氨基)-2-羟基-4-苯基丁基(异丁基)氨基甲酸叔丁酯(8. 2) (60. 3g)在 甲醇(400mL)中的溶液中。使反应混合物在室温和H2气氛下搅拌直到LCMS显示完全转化。 将该混合物用硅藻土过滤，在减压下浓缩。该粗产物通过柱色谱法纯化(洗脱液二氯甲烷 —二氯甲烷/甲醇(NH3)93 7)，得到32.6g(83%)的纯化合物8. 3。使(2R，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁基(异丁基)氨基甲酸叔丁酯(8.3)、2，5-二氧代吡咯烷-1-基噻唑-5-基甲基碳酸酯(l.Oeq)和三乙胺(1. Oleq)在2_甲基-四 氢呋喃(600mL)中的溶液在室温下搅拌3小时。使反应混合物用饱和NaHC03水溶液洗涤， 用皿8504干燥，在减压下浓缩。该粗产物(8.4)就这样用于下一步骤。向噻唑-5-基甲基(2R，3S)-2_羟基-4-苯基丁烷-1，3_ 二基二氨基甲酸叔丁酯 (8. 4) (46. 3g)在二氯甲烷(400mL)中的溶液中加入在异丙醇中的HC1 (5-6N) (100mL)。使 反应混合物在室温下剧烈搅拌，直到显示完全转化。使反应混合物在真空下浓缩。将该残 余物用饱和NaHC03水溶液洗涤，用MgS04干燥，在减压下浓缩，得到33. 9g (92% )的纯化合 物 8. 5。将噻唑-5-基甲基(2S，3R)-3_羟基_4-(异丁基氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲 酸酯(8. 5) (1125mg)加至2_(乙基氨基)苯并[d]噁唑-6-甲酸(1. Oeq)、三乙胺(3. Oeq) 和B0P (苯并三唑基N-氧基三二甲基氨基鳞六氟磷酸盐，l.Oeq)在二氯甲烷(10mL)中的混 合物中。反应混合物在室温下搅拌过夜。加入水，相分离。使有机相用饱和NaHCOyK溶液洗 涤3次，用1%504干燥，在减压下浓缩。使残余物通过柱色谱法纯化(洗脱液二氯甲烷一二 氯甲烷 / 甲醇(NH3) 98 2)，得到116511^(66%)的纯化合物 C27。NMR(400MHz，氯仿 _d) 8 ppm 0. 56-0. 81 (m,6H), 1.31 (t, J = 7. 1Hz，3H)，1. 65-1. 85 (m，1H)，2. 80-3. 30 (m，4H)， 3. 31-3. 58 (m, 3H)，3. 70-4. 04 (m, 3H)，5. 04-5. 35 (m, 4H)，5. 61 (s (br)，1H)，7. 04-7. 42 (m, 8H), 7. 79 (s, 1H) ,8. 76 (s, 1H) 噻唑-5-基甲基(2S，3R) ~4~ (2_氨基_N_异丁基苯并[d]噻唑_6_甲酰氨 基)-3-羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C6)NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 58-0. 84 (m，6H)，1. 70 (s (br)，1H)， 2. 80-2. 95 (m, 1H)，2. 97-3. 17 (m, 3H)，3. 33 (d, J = 13. 6Hz, 1H)，3. 8-4. 0 (m, 3H)， 4. 9-5. 1 (m，2H)，5. 11-5. 23 (m，2H)，5. 41 (s (br) , 2H), 7. 14-7. 37(m，6H)，7. 44 (d，J = 8. 2Hz, 1H)，7. 57 (s, 1H)，7. 74 (s，1H)，8. 70 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羟基-4-(^异丁基-2-(4_甲基哌嗪基)苯并 [d]噁唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C15) NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 63-0. 78 (m, 6H) , 1. 68-1. 85 (m, 1H), 2. 36 (s,3H)，2. 45-2. 60 (m, 4H) 2. 83-2. 98 (m, 1H)，2. 98-3. 29 (m, 3H)，3. 35-3. 48 (m, 1H)， 噻唑-5-基甲基(2S，3R) ~4~ (2~ (2~ ( 二甲基氨基)乙基氨基)_N_异丁基苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)_3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C16) NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 62-0. 80 (m，6H)，1. 65-1. 85 (m，1H)，2. 29 (s， 6H)，2. 55-2. 62 (m, 2H) 2. 85-3. 27 (m, 4H)，3. 35-3. 43 (m, 1H)，3. 54 (s,2H)，3. 75-4. 04 (m, 3H)，4. 93-5. 30 (m, 4H)，5. 86 (s (br)，1H)，7. 11-7. 38 (m, 8H)，7. 81 (s，1H)，8. 78 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羟基-4-(^异丁基-2-(甲基氨基)苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C26)NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 58-0. 80 (m, 6H) , 1. 65-1. 85 (m, 1H), 2. 79-3. 31 (m, 7H)，3. 36-3. 52 (m, 1H)，3. 71-4. 07 (m, 3H)，5. 05-5. 38 (m, 4H)，5. 76 (s (br)， 1H)，7. 06-7. 42 (m, 8H)，7. 79 (s, 1H)，8. 76 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羟基_4_ (N_异丁基苯并[d]噁唑_6_甲酰氨 基)-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C38)NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 62-0. 80 (m, 6H) , 1. 65-1. 86 (m, 1H), 2. 82-2. 98 (m, 1H)，2. 99-3. 22 (m, 3H)，3. 38-3. 58 (m, 1H)，3. 62-4. 10 (m, 3H)，4. 70-5. 35 (m, 4H)，7. 05-7. 33 (m, 5H)，7. 34-7. 43 (m, 1H)，7. 65 (s, 1H)，7. 72-7. 87 (m, 2H)，8. 17 (s, 1H)， 8. 76(s,1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _4_ (2-乙基_N_异丁基苯并[d]噁唑_6_甲酰氨 基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C39) NMR (400MHz,氯仿 _ d ) S ppm 0. 61-0. 80 (m, 6H)，1. 46 (t, J = 7. 5Hz，3H)， 1. 64-1. 85 (m, 1H)，2. 83-3. 23 (m, 6H)，3. 38-3. 57 (m, 1H)，3. 72-4. 05 (m, 3H)，4. 82-5. 04 (m, 1H)，5. 07-5. 37 (m, 3H)，7. 03-7. 36 (m, 6H)，7. 54 (s, 1H)，7. 59-7. 72 (m, 1H)，7. 79 (s, 1H)， 8. 76(s,1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羟基-4-(^异丁基-2-甲基苯并[d]噁唑_6_甲酰 氨基)-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C40)
NMR (400MHz,氯仿-d. ) S ppm 0. 62-0. 79 (m，6H)，1. 66-1. 86 (m，1H)， 2. 66 (s, 3H)，2. 83-2. 98 (m, 1H)，2. 99-3. 23 (m, 3H)，3. 37-3. 53 (m, 1H)，3. 76-4. 06 (m, 3H)， 4. 85-4. 96 (m, 1H)，5. 05-5. 33 (m, 3H)，7. 10-7. 36 (m, 6H)，7. 54 (s, 1H)，7. 60-7. 70 (m, 1H)， 7. 80 (s, 1H) ,8. 76 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-3_羟基-4_(N-异丁基-2-苯基苯并[d]噁唑_6_甲酰 氨基)-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C41)
NMR (400MHz,氯仿-d. ) S ppm 0. 58-0. 80 (m，6H)，1. 69-1. 86 (m，1H)， 2. 88-3. 00 (m, 1H)，3. 00-3. 26 (m, 3H)，3. 39-3. 55 (m, 1H)，3. 77-4. 07 (m, 3H)，4. 78-5. 32 (m, 4H)，7. 10-7. 33 (m, 5H)，7. 38 (d, J = 8. 3Hz, 1H)，7. 50-7. 60 (m, 3H)，7. 65 (s, 1H)， 7. 70-7. 84 (m, 2H)，8. 21-8. 34 (m, 2H)，8. 77 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-3_羟基-4_(N-异丁基-2-iso丙基苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-l_苯基丁烷-2_基氨基甲酸酯(C45) 1H NMR(400ΜΗζ,氯仿 _ d. ) δ ppm 0. 62-0. 80 (m, 6Η)，1. 48 (d, J = 6. 9Ηζ,6Η)， 1. 68-1. 86 (m, 1Η)，2. 89-3. 01 (m, 1H)，3. 01-3. 22 (m, 3H)，3. 27 (hept, J = 7. OHz, 1H)， 3. 34-3. 49 (m, 1H)，3. 79-4. 05 (m, 3H)，4. 85-5. 02 (m, 2H)，5. 13-5. 32 (m, 2H)，7. 15-7. 36 (m, 6H), 7. 53 (s，1H), 7. 70 (d, J = 8. 2Hz, 1H)，7. 82 (s, 1H) ,8. 78 (s, 1H)
权利要求
下式的化合物或其盐和立体异构体其中R是H、苯基、吡啶基、C1-6烷基或其中A和B相互独立地是H；C1-6烷基，其任选被炔基、杂芳基或选自氮、氧或硫的杂原子取代，该杂原子任选被C1-6烷基取代；或者A和B与它们所连接的氮一起形成5或6元的饱和、部分或完全不饱和的含有1至4个各自独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环所述杂原子任选被C1-6烷基取代；R1选自R2为C1-6烷基，其任选被OH、氨基烷基、吡咯烷基、吗啉基、炔基或任选被卤素取代的C3-7环烷基取代；R3是OH；R4是H或烷基；R5是吡啶基或苯基，其任选被卤素取代；X是O、S或N，其任选被C1-6烷基取代。FPA00001142576100011.tif,FPA00001142576100012.tif,FPA00001142576100013.tif
2.ISCh烷基，其任选被OH、氨基烷基、吡咯烷基、吗啉基、炔基或任选被卤素取代的C 环烷基取代； R3 是 0H ； R4是H或烷基；R5是吡啶基或苯基，其任选被卤素取代； X是0、S或N，其任选被Cm烷基取代。 2.权利要求1的化合物，其具有下式结构
3.权利要求1的化合物，其具有下式结构
4.权利要求1的化合物，其具有下式结构
5.用作药物的权利要求1-4任一项的化合物。
6.权利要求1-4任一项的化合物在制备用于增强抗HIV过滤性病原体作用的药物中的 用途。
7.一种组合，其包含a)权利要求1-4任一项的化合物和b)HIV抑制剂，或其药学可接受的盐。
8.权利要求7的组合，其中所述HIV抑制剂是达鲁那韦或化学名称为(1-苄 基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基} -2-羟 基-丙基)_氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的化合物。
9.权利要求8的组合，其中所述化合物是噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2-(乙基(甲 基)氨基)_N-异丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸 酯，并且该HIV抑制剂是达鲁那韦或化学名称为(1-苄基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基 氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基} -2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢_呋喃并 [2,3-b]呋喃-3-基酯的化合物。
10.权利要求9的组合，其中所述化合物是噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2-(乙基(甲 基)氨基)_N-异丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸 酯，并且该HIV抑制剂是化学名称为(1-苄基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯 并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基} -2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b] 呋喃-3-基酯的化合物。
11.用作药物的权利要求7-10任一项的组合。
12.权利要求7-10任一项的组合在制备用于治疗或预防HIV感染的药物中的用途。
13.权利要求7-10任一项的组合，其中式(I)-(IV)化合物中任一种或其药学可接受盐 的用量，在相对于单独施用所述HIV抑制剂时的生物利用度下，该量足以在临床上改善所 述HIV抑制剂的生物利用度。
14.权利要求7-10任一项的组合，其中式(I)-(IV)化合物中任一种或其药学可接受的 盐的用量，相对于HIV抑制剂单独施用时的所述至少一种药物动力学变量而言，该量足以 增加HIV抑制剂的至少一种选自下列的药物动力学变量在12小时时的t1/2、(；in、(；ax、Css、 AUC，或者在24小时时的AUC。
15.一种药物组合物，其包含权利要求7-10任一项的组合，以及药学可接受的赋形剂。
16.一种产品，其包含权利要求1-4任一项的式(I)-(IV)的任一化合物，以及HIV抑制 剂或其药学可接受的盐；并作为组合制剂在HIV治疗中同时、分开或顺序使用。
17.权利要求16的产品，其中所述HIV抑制剂是达鲁那韦或化学名称为(1-苄 基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基} -2-羟基-丙基)_氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的化合物。
18.权利要求17的产品，其中所述化合物是噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2-(乙基 (甲基)氨基)-N_异丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羟基-1-苯基丁烷-2-基氨 基甲酸酯，并且所述HIV抑制剂是(1-苄基-3- {[2- (1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并 噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基}-2_羟基-丙基)_氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯。
全文摘要
本发明涉及具有CYP450抑制性质且因而可作为某些药物的增强剂的化合物，即，它们在共同施用时可增加某些药物为至少一种药物动力学变量。本发明进一步提供利用所述化合物作为某些药物的生物利用度改善剂的用途。还提供了本发明化合物的制备方法和药物组合物。
文档编号C07D417/14GK101878210SQ200880118280
公开日2010年11月3日 申请日期2008年12月5日 优先权日2007年12月6日
发明者B·S·哈伦伯格, G·A·E·范特克卢斯特, G·Y·P·哈彻, J·C·萨萨基, J·E·鲍梅斯特, T·H·M·琼克斯, W·B·G·谢彭斯 申请人:泰博特克药品公司