专利名称：天然黄藤素结晶物及其大孔吸附树脂制备方法
天然黄藤素结晶物及其大孔吸附树脂制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药有效部位提取技术领域。更具体地，本发明涉及 一种黄藤素结晶物，还涉及釆用大孔吸附树脂法制备所述黄藤素结晶物的 方法。背景技术：
黄藤又名土黄连、大黄藤，为防己科植物黄藤的根和茎。性寒，味甘 苦。黄藤生物碱是从黄藤中提取的一种生物碱，黄藤的根和茎含掌叶防己 碱、药根碱、小檗碱，另含黄藤素甲、黄藤素乙、黄藤内酯及甾醇，具有 清热解毒、消炎抑菌等作用。其中黄藤素广泛用于妇科炎症、肠炎、呼吸 道及泌尿道感染、外科感染、眼结膜炎等医药领域。
大孔吸附树脂是一类不含离子交换基团的交联聚合物，理化性质稳定， 不溶于酸、碱及有机溶媒，对有机物有浓缩、分离作用且不受无机盐类、 强离子及低分子化合物的干扰。大孔吸附树脂通过物理吸附有选择地吸附 有机物质达到分离提纯的目的。根据树脂的表面性质，可分为非极性、中 极性和极性三类。
目前，中药提取物的分离纯化方法大体上可分为三类溶剂萃取法， 超临界流体萃取法，柱层析法。釆用的有机溶剂萃取法获得含黄藤生物碱 的提取物的较多，但都需要使用多种易燃易爆的有机溶剂，对工业设备要 求高，操作过程复杂，产品收率不高，废液废气污染环境严重等不足之处。 超临界流体萃取法的不足之处是仪器设备成本高，能源消耗严重。柱层析
法的主要缺点是硅胶不能再生，生产成本高。因此，依然还需要一种提取 安全、无污染、操作成本低廉、回收率高的中药提取物分离纯化方法，为 此本发明人经过大量试验研究，终于完成了本发明。
发明内容
[要解决的技术问题l本发明的目的是提供一种黄藤素结晶物。
本发明的另一个目的是提供一种釆用大孔吸附树脂法制备所述黄藤素 结晶物的方法。 [技术方案
本发明是通过下述技术方案实现的。
本发明涉及一种釆用大孔吸附树脂法制备天然黄藤素结晶的方法。该
方法的步骤如下
(1) 取干黄藤根或茎粉末，使用有机溶剂以所述有机溶剂与所述黄藤根 或茎粉末的重量比8-10在室温下提取1.5-2.5小时，重复提取2-3次，合并 提取液，然后进行减压浓缩，回收有机溶剂，得到浓缩物；
(2) 步骤(1)得到的浓缩物以所述浓缩物与所述乙醇水溶液的重量比1: 2-4使用10%-20%(V/V)乙醇水溶液进行溶解，然后与大孔吸附树脂进行 混合，所述吸附树脂的干重量是干黄藤根或茎重量的8-10倍，然后加入为 所述乙醇水溶液体积10倍的水，搅拌2-3h后装到所述的大孔吸附树脂柱上， 用水冲洗至洗出液无色后，再用有机溶剂洗脱，所述有机溶剂的体积为2-4 倍柱体积，其流速为0.5-1倍柱体积/h，得到的洗脱液进行减压浓缩，回收 有机溶剂，得到呈棕色油状的黄藤生物碱提取物；
(3) 将步骤(2)得到的黄藤生物碱提取物以所述提取物与所述乙醇水溶 液的重量比l: 2-4使用90%-98% ( V/V )乙醇水溶液溶解，然后与所述的 大孔吸附树脂混合，所述的吸附树脂的干重量是所述黄藤生物碱提取物重 量的8-10倍，然后加入为所述乙醇水溶液体积IO倍的水，搅拌2-3h后加 入到所述的大孔吸附树脂柱上，用水冲洗至洗出液为无色后，先用非极性 有机溶剂洗脱，再用极性有机溶剂洗脱，所述极性有机溶剂的体积为2-4 倍柱体积，其流速为0.5-1倍柱体积/h,收集极性有机溶剂洗脱液；
(4) 将步骤(3)得到的极性有机溶剂洗脱液进行减压浓缩，回收有机溶 剂，得到的浓缩物用重结晶有机溶剂溶解，在温度25-6(TC振荡15-25min， 然后静置结晶，得到的结晶在重结晶有机溶剂中进行重结晶，得到呈小叶 片状的黄藤素生物碱结晶产物。
根据本发明的一种优选实施方案，在步骤(1)与(2)中所述的有机溶剂是一种或多种选自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯的有机溶剂。
根据本发明的另一种优选实施方案，在步骤(2)中所述的大孔吸附树脂 是HPD系列大孔吸附树脂100或300型号或其极性相近的大孔吸附树脂。
根据本发明的另 一种优选实施方案，在步骤(3)中所述的非极性有机溶 剂是一种或多种选自石油醚、乙醚或正己烷的非极性有机溶剂。
根据本发明的另一种优选实施方案，在步骤(3)中所述的大孔吸附树脂 是HPD系列大孔吸附树脂500或600型号或其极性相近的大孔吸附树脂。
根据本发明的另一种优选实施方案，所述的减压浓缩是在温度30-5(TC 与真空度0.1-0.5MPa条件下进行的。
根据本发明的另一种优选实施方案，步骤(3)中作为洗脱液的所述极性 溶剂是浓度大于95% (V/V)的乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯。
根据本发明的另一种优选实施方案，所述的重结晶有机溶剂是一种或 多种选自石油醚、乙醚或正己烷的溶剂。
本发明涉及釆用上述制备方法得到的黄藤素结晶产物，其特征在于该 产物含有81%以上黄藤素甲和黄藤素乙。
下面将更详细地描述本发明。
本发明采用如下技术方案制备黄藤素结晶取干黄藤根或茎，粉碎， 用有机溶剂提取2-3次，合并提取液并减压浓缩，得到的浓缩物用乙醇溶解， 然后与吸附树脂混合，再加入水，在搅拌后加到大孔吸附树脂上，先用水 冲洗再用极性有机溶剂洗脱，洗脱液进行减压浓缩，得到黄藤生物碱提取 物。该提取物再用乙醇水溶液溶解，然后与吸附树脂混合，再加入水，在 搅拌后加到大孔吸附树脂上，再用大量水冲洗，然后先用非极性有机溶剂、 再用极性有机溶剂进行洗脱。洗脱液进行减压浓缩，得到的浓缩物用有机 溶剂溶解后结晶两次，得到期望产物黄藤素结晶。
具体地，本发明黄藤素结晶物的制备步骤如下
(l)取干黄藤根或茎粉末，使用有机溶剂以所述有机溶剂与所述黄藤根 或茎粉末的重量比8-10在室温下提取1.5-2.5小时，重复提取2-3次，合并 提取液，然后进行减压浓缩，回收有机溶剂，得到浓缩物。
黄藤根或茎在加工处理前需要进行干燥处理， 一般地在干燥箱中在温度5(TC-75"C下进行干燥2-3小时。所述的干燥箱是通常中药材加工使用的 干燥设备。黄藤根或茎在经过干燥处理后的含水量一般低于1.0重量％。
干燥后的黄藤根或茎再使用在中药材加工领域中通常使用的粉碎设备 进行粉碎，粉碎黄藤根或茎的粒度一般是20-200目。当然，黄藤根或茎的 粒度不是很关键的，超过这个粒度范围的黄藤根或茎也可以使用，因此， 这些粒度范围没有超出本发明的保护范围。
在本发明中，有机溶剂应该理解是一种能够将黄藤生物碱从其黄藤根 或茎中提取出来的有机溶剂，这些有机溶剂是一种易挥发的，其残留物还 不会对烟草制品产生不良后果的有机溶剂。
在本发明中，所述的有机溶剂是一种选自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙 酯的有机溶剂。在本发明中，所述的乙醇、甲醇一般是乙醇水溶液、甲醇 水溶液。
优选地，所述的有机溶剂是乙醇水溶液或丙酮。 更优选地，所述的有机溶剂是乙醇水溶液。
在本发明中，所述的有机溶剂浓度是50。/。(V/V)以上，它的加入量是 干黄藤根或茎粉末重量的8-10倍。
所述的有机溶剂在提取步骤完成后需要进行回收，通常釆用本技术领 域的技术人员熟知的蒸馏法进行回收。
(2)步骤(1)得到的浓缩物以所述浓缩物与所述乙醇水溶液的重量比1: 2-4使用10%-20%(V/V)乙醇水溶液进行溶解，然后与大孔吸附树脂进行 混合，所述吸附树脂的干重量是干黄藤根或茎重量的8-10，然后加入为所 述乙醇水溶液体积IO倍的水，搅拌2-3h后装到所述的大孔吸附树脂柱上， 用水冲洗至洗出液无色后，再用有机溶剂洗脱，所述有机溶剂的体积为2-4 倍柱体积，其流速为0.5-1倍柱体积/h，得到的洗脱液进行减压浓缩，回收 有机溶剂，得到呈棕色油状的黄藤生物碱提取物。釆用HPLC法测得在该 黄藤生物碱提取物中的黄藤素甲、黄藤素乙的总含量不低于33%。
在本发明中，大孔吸附树脂是一种新型非离子型有机高分子聚合物吸 附剂。已广泛用于中草药有效成分的分离和提纯过程。它是以苯乙烯和丙 烯酸酯为单体，以二乙烯苯为交联剂，甲苯、二甲苯为致孔剂，它们相互交联聚合形成了多孔骨架结构。这种树脂通过它本身与被吸附的分子之间 的范德华力和氢键作用而具有吸附性，因其网状结构和高比表面积而具有 选择地吸附有机物质的能力，因此使用这种树脂能够实现黄藤生物碱提取 物的分离与纯化的目的。
在本发明中，所述的大孔吸附树脂为HPD系列大孔吸附树脂100或300 型号或其它极性相近的大孔吸附树脂。该HPD系列大孔吸附树脂例如是由 沧州宝恩化工有限公司以商品名HPD系列大孔吸附树脂销售的产品。其它 极性相近大孔吸附树脂例如是由上海华震科技有限公司以商品名HZ系列 大孔吸附树脂销售的产品。
所述的大孔吸附树脂的粒度是60-16目，优选地50-30,更优选地40-30。 所述的大孔吸附树脂预处理是将树脂置于容器中用自来水洗2-3次，每 次水的用量为树脂体积的1-1.5倍；再将树脂转移至柱内，用乙醇洗至l份 乙醇于三份水中不产生白色浑浊后再用水洗净树脂中的乙醇即可。经反复 使用后，吸附树脂颜色变深，吸附效果下降时，可用1 mol/LNaOH(或HC1) 洗涤或浸泡适当时间，至树脂接近原颜色为宜，继用蒸馏水洗至中性即可 再用。
所述的大孔吸附树脂柱在吸附后先用大量水冲洗直至洗出液无色，这 样，可以更加充分、彻底地将大孔吸附树脂柱吸附的糖类、粘液汁等水溶 性大极性杂质洗脱掉，然后再用极性有机溶剂洗脱。
在本发明中，所述的极性有机溶剂是一种选自乙醇、甲醇、丙酮或乙 酸乙酯的溶剂。在本发明中，所述的乙醇、甲醇一般是乙醇水溶液、甲醇 水溶液。
优选地，所述的极性有机溶剂是乙醇或甲醇水溶液。 所述的极性有机溶剂的浓度是85。/。(V/V)以上，其体积是树脂柱体积
的2-4倍。进行洗脱的条件是将洗脱液缓慢加入吸附柱中，调节流速至0.5-1
倍柱体积/h。
(3)将步骤(2)得到的黄藤生物碱提取物以所述提取物与所述乙醇水溶 液的重量比l: 2-4使用90%-98% ( V/V )乙醇水溶液溶解，然后与所述的 大孔吸附树脂混合，所述的吸附树脂的千重量是所述黄藤生物碱提取物重量的8-10倍，然后加入为所述乙醇水溶液体积IO倍的水，搅拌2-3h后加 入到所述的大孔吸附树脂柱上，用水冲洗至洗出液为无色后，先用非极性 有机溶剂洗脱，再用极性有机溶剂洗脱，所述极性有机溶剂的体积为2-4 倍柱体积，其流速为0.5-1倍柱体积/h,收集极性有机溶剂洗脱液；
该步骤中所述的大孔吸附树脂是HPD系列的大孔吸附树脂500或600 型号或其它极性相当的大孔吸附树脂。该HPD系列大孔吸附树脂例如是由 由沧州宝恩化工有限公司以商品名HPD系列大孔吸附树脂销售的产品。其 它极性相近大孔吸附树脂例如是由上海华震科技有限公司以商品名HZ系 列大孔吸附树脂销售的产品。
所述的大孔吸附树脂的粒度是60-16目，优选地50-30,更优选地40-30。 所述的大孔吸附树脂预处理是将树脂置于容器中用自来水洗2-3次，每 次水的用量为树脂体积的1-1.5倍；再将树脂转移至柱内，用乙醇洗至l份 乙醇于三份水中不产生白色浑浊后再用水洗净树脂中的乙醇即可。经反复 使用后，吸附树脂颜色变深，吸附效果下降时，可用1 mol/LNaOH(或HC1) 洗涤或浸泡适当时间，至树脂接近原颜色为宜，继用蒸僧水洗至中性即可 再用。
在该步骤中，所述的非极性有机溶剂是一种或多种选自石油醚、正己
烷、环己烷的溶剂。
优选地，所述的非极性有机溶剂是石油醚。 所述的极性有机溶剂是一种选自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯的溶剂。
在本发明中，所述的乙醇、甲醇一般是乙醇水溶液、甲醇水溶液。 优选地，所述的极性有机溶剂是乙醇或甲醇水溶液。 该乙醇水溶液、甲醇水溶液的浓度是95% (V/V)以上。 在本发明中，所述的洗脱液体积是柱体积的2-4倍，进行洗脱的条件
是将洗脱液缓慢加入吸附柱中，调节流速至0.5-1倍柱体积/h。
(4)将上述步骤(3)得到的极性有机溶剂洗脱液进行减压浓缩，回收有机
溶剂，得到的浓缩物用重结晶有机溶剂溶解，在温度25-6(TC振荡15-25min,
然后静置结晶，得到的结晶在重结晶有机溶剂中进行重结晶，得到呈小叶
片状的黄藤素生物碱结晶产物。在本发明中，所述的重结晶有机溶剂是一种或多种选自石油醚、乙醚 或正己烷的溶剂，优选地石油醚或乙醚，更优选地石油醚。
在本发明中，所述的减压浓缩是在温度30-5(TC与真空度0.1-0.5MPa
的条件下进行的。
所述减压浓缩使用的设备是由上海鲁伊工贸有限公司以商品名ZX98-1 旋转蒸发仪销售的产品。
得到的呈小叶片状的黄藤素生物碱结晶产物釆用HPLC法(高效液相色 谱法)进行了分析，其结果表明该结晶产物含有总计81%以上黄藤素甲和黄 藤素乙。
在本发明中，所述的HPLC测定法是在该分析技术通常实施步骤与条 件经过适当调整，完全符合本发明测定要求的测定方法。 [有益效果
本发明制备的含黄藤生物碱提取物中有效成分含量较高，黄藤素甲、 黄藤素乙的含量可达33%以上。生产出的黄藤素结晶色雪白、纯度高，其 中黄藤素甲、黄藤素乙总含量为81%以上。
由于选用大孔吸附树脂，其对黄藤生物碱的吸附选择性良好，吸附快， 解吸也快，吸附容量较大；物理化学稳定性高，机械强度好，再生容易； 操作十分简便，步骤少，成本低廉，提取率达95%以上，溶剂皆可回收利 用，对环境无污染，特别适用于大规模工业生产。具体实施方式
下面通过实施例将更详细地说明本发明，而不是对本发明保护范围的 实施例1
称取广东黄藤根干燥粉末200g,在温度3(TC并不断搅拌下用丙酮提取 3次，每次800ml，每次lh。然后进行过滤，合并滤液，浓缩回收丙酮。得 到的浓缩物用30ml 10Q/。乙醇(V/V)溶解后，与干燥重量1600g的HPD100 树脂混合，再加入400ml水，恒速(30rpm)搅拌2h。然后用1000ml水冲 洗，流速为400ml/h,然后用300ml 85%(V/V)乙醇冲洗,流速75ml/h。得 到的乙醇洗脱液进行浓缩，得到含黄藤生物碱提取物1.86g,收率0.93%,HPLC法测得提取物中黄藤素甲、黄藤素乙总含量为38.25%。
称取上述含黄藤生物碱提取物3.00g,用6ml 95。/。(V/V)乙醇水溶液溶解 后，与干燥重量为30g的HPD600树脂混合，再加入100ml水，搅拌2h后 上柱。用500ml水冲洗直到洗出液为无色后，再用300ml石油醚洗脱，流 速为75ml/h。然后用300ml95。/。(V/V)乙醇继续洗脱，流速为75ml/h。减压 浓缩乙醇洗脱液回收溶剂，得到的浓缩物用石油醚溶解，在5(TC下振荡 25min,然后静置结晶，得到的结晶再次重结晶，得到雪白色小叶片状黄藤 素结晶0.91g。黄藤生物碱回收率82.5%。 HPLC法测得结晶中含黄藤素甲 69.21%,黄藤素乙28.45%, 二者总含量为81.66%。 实施例2
称取黄藤根或茎干燥粉末200g,在6(TC并不断搅拌下用50。/。(V/V)乙 醇提取2次，每次1200ml,每次lh。然后进行过滤，合并滤液，浓缩回收 乙醇。得到的浓缩物用40ml 15。/o乙醇(V/V)溶解后，与干燥重量2000 g的 HPD300树脂混合，再加入400ml水，恒速(30rpm )撹拌2h,然后用1000ml 水冲洗，流速为楊ml/h，再用270ml95。/o(V/V)乙醇冲洗,流速为120ml/h。 得到的乙醇洗脱液进行浓缩，得到含黄藤生物碱提取物L78g,收率0.89%, HPLC法测得提取物中黄藤素甲、黄藤素乙总含量为38.64%。
称取上述含黄藤生物碱提取物3.00g,用6ml 95%(V/V)乙醇水溶液溶 解后，与干燥重量为25g的HPD500树脂混合，再加入200ml水，搅拌3h 后上柱。用500ml水冲洗直到洗出液为无色后，再用环己烷250ml洗脱， 流速为60ml/h。然后用300ml甲醇继续洗脱，流速为100ml/h。减压浓缩甲 醇洗脱液回收溶剂，得到的浓缩物用正己烷溶解，在4(TC下振荡25min, 然后静置结晶，得到的结晶再次重结晶，得到雪白色小叶片状黄藤素结晶 0.90g。黄藤生物碱回收率81.3%。 HPLC法测得结晶中含黄藤素甲69.19%， 黄藤素乙28.45%, 二者总含量为83.64%。
实施例3
称取黄藤根或茎干燥粉末200g，在6(TC并不断搅拌下，用80%乙醇提
取3次，每次乙醇的量是5倍重量，每次lh。然后进行过滤，合并滤液，
浓缩回收乙醇。得到浓缩物用40ml20。/。乙醇(V/V)溶解后，与干燥重量1800g的HPD300树脂混合。然后加入400ml水，恒速(30rpm )搅拌3h，再用 1000ml水冲洗，流速为400ml/h。然后用120ml甲醇冲洗，流速为50ml/h。 得到的甲醇洗脱液进行浓缩，得到含黄藤生物碱提取物1.88g,收率0.94%。 HPLC法测得提取物中黄藤素甲、黄藤素乙总含量为37.35%。
称取上述含黄藤生物碱提取物3.00g,用6ml95。/。(V/V)乙醇水溶液溶 解后，与千燥重量25g的HPD600树脂混合，再加入200ml水，搅拌2h后 上柱。用500ml水冲洗直到洗出液为无色后，再用石油醚环己烷=1: 1(V/V) 的300ml混合溶剂洗脱，流速为75ml/h。然后用300ml丙酮继续洗脱，流 速为75ml/h。减压浓缩丙酮洗脱液回收溶剂，得到的浓缩物用石油醚乙 醚=1: 1(V/V)混合溶剂溶解，在30。C下振荡25min,然后静置结晶，得到 的结晶再次重结晶，得到雪白色小叶片状黄藤素结晶0.92g。黄藤生物碱回 收率82.0%。 HPLC法测得结晶中含黄藤素甲69.21%,黄藤素乙28.52%, 二者总含量为85.73%。
权利要求
1、一种采用大孔吸附树脂法制备天然黄藤素结晶物的方法，其特征在于该方法步骤如下(1)取干黄藤根或茎粉末，使用有机溶剂以所述有机溶剂与所述黄藤根或茎粉末的重量比8-10在室温下提取1.5-2.5小时，重复提取2-3次，合并提取液，然后进行减压浓缩，回收有机溶剂，得到浓缩物；(2)步骤(1)得到的浓缩物以所述浓缩物与所述乙醇水溶液的重量比1∶2-4使用10％-20％(V/V)乙醇水溶液进行溶解，然后与大孔吸附树脂进行混合，所述吸附树脂的干重量是干黄藤根或茎重量的8-10倍，然后加入为所述乙醇水溶液体积10倍的水，搅拌2-3h后装到所述的大孔吸附树脂柱上，用水冲洗至洗出液无色后，再用有机溶剂洗脱，所述有机溶剂的体积为2-4倍柱体积，其流速为0.5-1倍柱体积/h，得到的洗脱液进行减压浓缩，回收有机溶剂，得到呈棕色油状的黄藤生物碱提取物；(3)将步骤(2)得到的黄藤生物碱提取物以所述提取物与所述乙醇水溶液的重量比1∶2-4使用90-98％(V/V)乙醇水溶液溶解，然后与所述的大孔吸附树脂混合，所述的吸附树脂的干重量是所述黄藤生物碱提取物重量的8-10倍，然后加入为所述乙醇水溶液体积10倍的水，搅拌2-3h后加入到所述的大孔吸附树脂柱上，用水冲洗至洗出液为无色后，先用非极性有机溶剂洗脱，再用极性有机溶剂洗脱，所述极性有机溶剂的体积为2-4倍柱体积，其流速为0.5-1倍柱体积/h，收集极性有机溶剂洗脱液；(4)将步骤(3)得到的极性有机溶剂洗脱液进行减压浓缩，回收有机溶剂，得到的浓缩物用重结晶有机溶剂溶解，在温度25-60℃振荡15-25min，然后静置结晶，得到的结晶在重结晶有机溶剂中进行重结晶，得到呈小叶片状的黄藤素生物碱结晶产物。
2、 根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤(1)与(2)中所述的有 机溶剂是一种或多种选自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯的有机溶剂。
3、 根据权利要求l所述的方法，其特征在于在步骤(2)中所述的大孔吸附树脂是HPD系列大孔吸附树脂100或300型号或其极性相近的大孔吸附树脂。
4、 根据权利要求l所述的方法，其特征在于在步骤(3)中所述的非极性 有机溶剂是一种或多种选自石油醚、乙醚或正己烷的非极性有机溶剂。
5、 根据权利要求l所述的方法，其特征在于在步骤(3)中所述的大孔吸 附树脂是HPD系列大孔吸附树脂500或600型号或其极性相近的大孔吸附
6、 根据权利要求l所述的方法，其特征在于所述的减压浓縮是在温度 30-50°C与真空度0.1-0.5MPa条件下进行的。
7、 根据权利要求l所述的方法，其特征在于步骤(3)中作为洗脱液的所 述极性溶剂是浓度大于95% (V/V)的乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯。
8、 根据权利要求l所述的方法，其特征在于所述的重结晶有机溶剂是 一种或多种选自石油醚、乙醚或正己烷的溶剂。
9、 根据权利要求1-8中任一项权利要求所述的制备方法得到的黄藤素 结晶物，其特征在于该产物含有81%以上黄藤素甲和黄藤素乙。
全文摘要
本发明涉及从黄藤根或茎中提取的黄藤素结晶及其制备方法。本发明方法在于用有机溶剂提取出黄藤根或茎中的生物碱成分，提取液进行减压浓缩，浓缩物经大孔吸附树脂分离纯化得到含黄藤素的生物碱提取物，提取物继续经大孔吸附树脂纯化后重结晶，得到所述的黄藤素结晶。所述的黄藤素结晶中的黄藤素甲、黄藤素乙的总含量可达81％以上。本发明提供了高效、简便的制备方法，并适用于大规模工业生产。
文档编号C07D455/03GK101619062SQ20091005428
公开日2010年1月6日 申请日期2009年7月2日 优先权日2009年7月2日
发明者举 任, 桦 白, 辅伟强 申请人:华宝食用香精香料(上海)有限公司;无锡华馨香精香料有限公司